專利名稱：在視網(wǎng)膜疾病中用二核苷酸多磷酸促進(jìn)液體的去除的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療眼病的方法。特別地，本發(fā)明涉及排除視網(wǎng)膜下和視網(wǎng)膜內(nèi)空間中病態(tài)液體累積的方法。
背景技術(shù)：
視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(RPE)存在于脊椎動(dòng)物眼睛后面并形成將視網(wǎng)膜和脈絡(luò)膜血液供應(yīng)分開的屏障。RPE的一個(gè)重要功能是保持并調(diào)節(jié)視網(wǎng)膜下空間的水合作用，視網(wǎng)膜下空間是視網(wǎng)膜和RPE之間的胞外體積。(Marmor，M.F.Marmor和T.J.Wolfensberger所編The Retinal，Pigment Epithelium一書第3-12頁(yè)，牛津大學(xué)出版社，紐約，(1998))。這一功能是通過調(diào)節(jié)視網(wǎng)膜下空間和脈絡(luò)膜血液供應(yīng)之間液體、離子和代謝物的轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)現(xiàn)的。(Marmor，M.F.Marmor和T.J.Wolfensberger所編The Retinal，Pigment Epithelium一書第420-438頁(yè)，牛津大學(xué)出版社，紐約，(1998)；Pederson，S.J.Ryan所編Retina一書第1955-1968頁(yè)，Mosby，圣路易斯，(1994))。像所有的上皮細(xì)胞一樣，RPE含有兩層在功能和解剖學(xué)上都不同的膜朝向視網(wǎng)膜的頂膜和朝向脈絡(luò)膜血液供給的基底外側(cè)膜。在正常是視網(wǎng)膜中，液體在從視網(wǎng)膜下空間向脈絡(luò)膜穿過RPE時(shí)被吸收。這種通常被稱為“RPE泵”的RPE對(duì)液體的主動(dòng)吸收通過將液體泵出視網(wǎng)膜空間從而對(duì)維持光感受器正確附著于RPE頂膜起到了重要的作用。(Marmor，S.J.Ryan，Mosby所編Retina一書第1931-1954頁(yè)，圣路易斯，(1994)；Hughes等，M.F.Marmor和T.J.Wolfensberger所編The Retinal，Pigment Epithelium一書第xvii，745頁(yè)，牛津大學(xué)出版社，紐約，(1998))。
視網(wǎng)膜剝離以視網(wǎng)膜下空間中液體的異常累積為特征，這將導(dǎo)致視網(wǎng)膜從底部的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞脫落。視網(wǎng)膜水腫是指液體異常累積于視網(wǎng)膜自身。視網(wǎng)膜在視網(wǎng)膜中心部分(黃斑)脫落或水腫會(huì)造成嚴(yán)重的視力喪失，且最終可導(dǎo)致無法治愈的失明。(Yanoff和Duker，Ophthalmology，Mosby，費(fèi)城，(1999)；Wilkinson等，Michels’Retinal Detachment，第二版，Mosby，圣路易斯(1997))。許多研究病狀可導(dǎo)致視網(wǎng)膜剝離或視網(wǎng)膜水腫。視網(wǎng)膜剝離最常見的類型是孔源性視網(wǎng)膜剝離，其原因是視網(wǎng)膜中產(chǎn)生了一個(gè)或多個(gè)允許液化的玻璃質(zhì)進(jìn)入視網(wǎng)膜下空間的裂紋(tear)或小洞，因此產(chǎn)生了視網(wǎng)膜剝離。
在治療孔源性視網(wǎng)膜剝離(RRD)上還沒有取得藥理學(xué)進(jìn)展。目前對(duì)RRD的治療僅有外科手術(shù)(鞏膜扣帶術(shù)、充氣性視網(wǎng)膜固定術(shù)或玻璃體切割術(shù))(Wilkinson，Michels’Retinal Detachment，第二版，Mosby，圣路易斯(1997)。成功的RRD手術(shù)包括兩個(gè)主要部分視網(wǎng)膜的再附著和視網(wǎng)膜破損修復(fù)。這三種治療RRD的手術(shù)技術(shù)的主要差別在于所用使視網(wǎng)膜再附著的方法。
鞏膜扣帶術(shù)使用了眼外扣帶(通常是硅酮海綿或固體硅酮)，它被縫在對(duì)著剝離的視網(wǎng)膜的鞏膜上(Wilkinson，Michels’Retinal Detachment，第二版，Mosby，圣路易斯(1997)。視網(wǎng)膜通常在幾天后再附著，但也可能需要數(shù)周。在手術(shù)時(shí)，外科醫(yī)師可通過鞏膜、脈絡(luò)膜和RPE插入一個(gè)針頭以排出視網(wǎng)膜下的液體。通常，扣帶將一直縫合在鞏膜上。在充氣性視網(wǎng)膜固定術(shù)中，氣泡被直接注入玻璃體，且頭被定位，因此氣泡可填塞并覆蓋視網(wǎng)膜的破損。(Tornambe和Hilton，Ophthalmology 96(6)772-83(1989))。視網(wǎng)膜下的液體通常會(huì)在1-2天內(nèi)排除，但它需要精確的頭部定位以確保氣泡可覆蓋所述視網(wǎng)膜破損。(Tomambe等10人，Am.J.Ophthalmol.127(6)741-3(1999))。玻璃體切割術(shù)通常用于與玻璃體牽引或出血有關(guān)的復(fù)雜RRD，但有時(shí)也可用于單純性RRD(Chang，M.Yanoff和J.S.Duker所編Ophthalmology一書中8.34.1-8.34.6，Mosby，費(fèi)城，(1999))。其過程包括貫穿鞏膜切三個(gè)小切口以將器械放進(jìn)玻璃體房。取出玻璃體并用特殊的鹽溶液代替。根據(jù)剝離的類型和起因，然后可以使用各種器械和技術(shù)以使視網(wǎng)膜再附著。就單純性剝離而言，可穿過視網(wǎng)膜上的裂紋插入針頭并通過視網(wǎng)膜下空間的前引流術(shù)使視網(wǎng)膜變平。
鞏膜扣帶術(shù)和玻璃體切割通常需要全身麻醉，并且需要住院。充氣性視網(wǎng)膜固定術(shù)通?？稍陂T診完成，但需要病人配合以確保成功(Hilton和Tornambe，Retina11(3)285-94(1991)；Hilton和Brinton，Stephen J.Ryan所編Retina一書第2093-2112頁(yè)，Mosby，費(fèi)城，(1999)；Han等，Am.J.Ophthalmol.126(5)658-68(1998))。根據(jù)外科手術(shù)的技術(shù)和外科醫(yī)師，每種實(shí)驗(yàn)的成功率是不同的，充氣性視網(wǎng)膜固定術(shù)的成功率最低，鞏膜扣帶術(shù)的成功率最高。(Tornambe等，Am.J.Ophthalmol.127(6)741-3(1999)；Han等，Am.J.Ophthalmol.126(5)658-68(1998))。視網(wǎng)膜剝離手術(shù)成功與否是根據(jù)手術(shù)后任何時(shí)候(從幾小時(shí)至數(shù)周)視網(wǎng)膜的再附著判定的。視覺后果和患者的生活質(zhì)量等參數(shù)不能用來判斷視網(wǎng)膜剝離手術(shù)成功與否。
通常與更嚴(yán)重的視網(wǎng)膜內(nèi)水腫有關(guān)的病癥是糖尿病黃斑水腫、滲出性年齡相關(guān)的黃斑變性(AMD)和臨床上有意義的囊樣黃斑水腫。(Jampol和Po，S.J.Ryan所編Retina一書第999-1008頁(yè)，Mosby，圣路易斯，(1994))。其它與視網(wǎng)膜內(nèi)或視網(wǎng)膜下空間液體累積異常有關(guān)的病理癥狀包括葡萄膜炎、中央和分支靜脈阻塞、視網(wǎng)膜色素變性、中心性漿液性視網(wǎng)膜病、CMV視網(wǎng)膜炎和脈絡(luò)膜黑色素瘤。與某些外科手術(shù)(如白內(nèi)障手術(shù))后的眼損傷有關(guān)的物理創(chuàng)傷也可導(dǎo)致視網(wǎng)膜剝離或水腫。(Ahmed和Ai，M.Yanoff和J.Duker所編Ophthalmology一書中8.34.1-8.34.6，Mosby，費(fèi)城，(1999))。
黃斑中液體在視網(wǎng)膜內(nèi)的累積會(huì)導(dǎo)致視敏度降低，且通常會(huì)對(duì)患有糖尿病型視網(wǎng)膜病變、AMD和其它局部缺血性視網(wǎng)膜病變(如分支和中央視網(wǎng)膜靜脈阻塞)的患者造成視力喪失。(Jampol和Po，S.J.Ryan所編Retina一書第999-1008頁(yè)，Mosby，圣路易斯，(1994)；Kent等，Br.J Ophthalmol.84(5)542-5(2000))。黃斑水腫通常與葡糖膜炎并發(fā)且通?？稍谝暰W(wǎng)膜色素變性患者中觀察到。(Rothova等，Br.JOphthalmol.80(4)332-6(1996)；Fetkenhour等，Trans.Am.Acad.Ophthalmol.Otolaryngol.83(3)Pt 1OP515-21(1977))。黃斑水腫也是眼內(nèi)手術(shù)后造成視力下降的主要原因(稱為囊樣黃斑水腫)。(Miyake，Surv，Ophthalmol.28增補(bǔ)本554-68(1984))。視網(wǎng)膜內(nèi)液體的累積被認(rèn)為是內(nèi)部和/或外部血液-視網(wǎng)膜屏障崩潰的結(jié)果。(Kent等，Br.J Ophthalmol.84(5)542-5(2000))。內(nèi)部視網(wǎng)膜屏障由視網(wǎng)膜脈管系統(tǒng)的內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成，外部視網(wǎng)膜屏障包括視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞。血液-視網(wǎng)膜屏障的崩潰會(huì)導(dǎo)致脈管系統(tǒng)的液體和累積在視網(wǎng)膜層或視網(wǎng)膜下空間中的液體病灶泄漏。目前對(duì)視網(wǎng)膜水腫的治療包括全身和局部施用皮質(zhì)類固醇、乙酰唑胺和非類固醇類的消炎藥，還可以有手術(shù)方法，如玻璃體切割術(shù)、格柵(grid)激光光凝術(shù)和病灶激光光凝術(shù)。這些治療方法對(duì)患者的效用有限。
盡管現(xiàn)今的RRD手術(shù)已經(jīng)有相對(duì)較高的成功率(60-90％)，但是一旦手術(shù)失敗，可再附著視網(wǎng)膜的藥物組合物將對(duì)患者非常有利。此外，在無法進(jìn)行手術(shù)治療時(shí)，可再附著視網(wǎng)膜的藥物組合物對(duì)于治療是非常有效的，尤其是在孔源性視網(wǎng)膜剝離的治療中。
已經(jīng)進(jìn)行了大量藥理學(xué)和手術(shù)研究以治療囊樣黃斑水腫和糖尿病型黃斑水腫，但它們通常需借助于經(jīng)驗(yàn)且經(jīng)常是無效的。非特異性消炎治療被用于所有類型的黃斑水腫，除了與局部缺血型視網(wǎng)膜炎有關(guān)的水腫，對(duì)它可采用激光治療。(Kent等，Br.J Ophthalmol.84(5)542-5(2000)。皮質(zhì)類固醇通常被用于治療黃斑水腫，但它在隨機(jī)的、安慰劑控制的研究中無效(Flach等，Am.J Ophthalmol.103(4)479-86(1987)；Flach等，Ophthalmology 97(10)1253-8(1990))。乙酰唑胺也可減輕某些類型的黃斑水腫，且它被認(rèn)為是通過RPE泵的作用起作用的，但對(duì)乙酰唑胺的全身性耐受較弱。(Cox等，Arch.OphthazmoZ.106(g)1190-5(1988))。格柵(grid)或病灶激光光凝術(shù)通常被用來減少與糖尿病型視網(wǎng)膜炎有關(guān)的視網(wǎng)膜脈管系統(tǒng)滲漏，且它在有限的情況下是有效的。(Ip等，Ophthalmology，倫敦；PhiladelphiaMosby.8.4.1-8.4.2(1999)；The Diabetic Retinopathy Study Research Group，Ophthalmology 88(7)583-600(1981)；Early Treatment Diabetic RetinopathyStudy Research Group，Arch.Ophthalmol.103(12)1796-806(1985)；The BranchVein Occlusion Study Group，Am.J Ophthalmol.98(3)271-82(1984))。此外，玻璃體切割術(shù)被用于治療糖尿病型視網(wǎng)膜炎以及玻璃體出血和/或玻璃體視網(wǎng)膜牽引術(shù)。(Wilkinson等，Michels’Retinal Detachment，第二版，Mosby，圣路易斯(1997))。對(duì)黃斑水腫安全有效的治療還無法滿足醫(yī)療需求。(Kent等，Br.JOphthalmol.84(5)542-5(2000))。
以前的工作顯示，RPE的頂膜(朝向視網(wǎng)膜的膜)含有P2Y受體，該受體可被激活以促進(jìn)液體沿視網(wǎng)膜下空間到脈絡(luò)膜血液供給的方向穿過RPE，且這種作用機(jī)制被認(rèn)為在視網(wǎng)膜剝離時(shí)有助于除去視網(wǎng)膜下的液體。(Peterson等，J.Neurosci.17(7)2324-37(1997))。然而，P2Y2受體的天然配體是ATP和UTP，這兩者都會(huì)被普遍存在的胞外核苷酸酶迅速降解。因此，為使ATP和UTP在視網(wǎng)膜剝離的治療中有效，這些化合物需要被直接輸遞到視網(wǎng)膜下空間。然而，普遍認(rèn)為向視網(wǎng)膜下空間輸遞藥物對(duì)患者有著不可接受的風(fēng)險(xiǎn)，因?yàn)檫@要將針頭插在視網(wǎng)膜和RPE之間，而這可能導(dǎo)致并發(fā)癥和失明。因此，為使ATP或UTP可用于治療用途，必須將它們輸遞進(jìn)玻璃體內(nèi)腔，而這是侵入性小得多的過程。然而，為使ATP或UTP達(dá)到RPE頂膜，它必須擴(kuò)散通過視網(wǎng)膜。還不知道在ATP或UTP到達(dá)RPE頂膜之前是否會(huì)被降解，因此不知道它們?cè)诖龠M(jìn)視網(wǎng)膜再附著中是否有效?，F(xiàn)有的例子顯示，玻璃體內(nèi)的UTP對(duì)于促進(jìn)視網(wǎng)膜再附著是無效的，因此新型抗水解激動(dòng)藥對(duì)于促進(jìn)視網(wǎng)膜再附著是有效的。
發(fā)明概述揭示了用于在需要此類治療的患者中促進(jìn)將視網(wǎng)膜或視網(wǎng)膜下空間內(nèi)的外來液體的除去的藥物組合物和使用它的方法。本發(fā)明所揭示的方法和組合物被用于促進(jìn)將因任何原因產(chǎn)生的視網(wǎng)膜內(nèi)或視網(wǎng)膜下的外來液體除去，這些原因包括但不限于對(duì)孔源性視網(wǎng)膜剝離的初步處理和附屬處理、漿液性視網(wǎng)膜剝離、所有形式的囊樣黃斑水腫(葡糖膜炎、手術(shù)后造成的、中央和分支靜脈阻塞以及遺傳性視網(wǎng)膜疾病，如視網(wǎng)膜色素變性)以及所有形式的視網(wǎng)膜和黃斑水腫(增生性和非增生性的、滲出性年齡相關(guān)的黃斑變性以及早熟性視網(wǎng)膜病)。
本發(fā)明揭示了通過施用結(jié)構(gòu)式I的藥物組合物以治療視網(wǎng)膜疾病(如視網(wǎng)膜剝離或視網(wǎng)膜水腫)患者的方法，所述施用是通過玻璃體內(nèi)注射、玻璃體內(nèi)持續(xù)釋放或輸遞、眼表面滴注、跨鞏膜注射或灌輸、或是全身注射或灌輸進(jìn)行的。
對(duì)本發(fā)明有用的藥物組合物包含P2Y受體促效藥，其中包括某些含有腺嘌呤、尿嘧啶和胞嘧啶的二核苷酸多磷酸，在視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的上皮細(xì)胞中它們是P2Y受體的選擇性促效藥。這些促效藥對(duì)P2Y受體的激活與升高的胞內(nèi)鈣水平和液體通過RPE運(yùn)輸?shù)奶岣哂嘘P(guān)。
本發(fā)明還提供了含有結(jié)構(gòu)式I的化合物的新型組合物，其中結(jié)構(gòu)式I的呋喃型糖部分選自3’-脫氧呋喃核糖基、2’，3’-雙脫氧呋喃核糖基、呋喃阿拉伯糖基、3’-脫氧呋喃阿拉伯糖基、呋喃木糖基、2’-多于呋喃木糖基和呋喃來蘇糖基。
附圖簡(jiǎn)述

圖1代表用非同位素原位雜交技術(shù)得到的白化兔視網(wǎng)膜/RPE/脈絡(luò)膜組織的新鮮冷凍橫截面中P2Y2受體mRNA的細(xì)胞定位。特別顯示了在P2Y2受體mRNA序列上進(jìn)行的反義和正義洋地黃毒苷(DIG)標(biāo)記的核糖探針(riboprobe)的原位雜交結(jié)果。GCL神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層。IPL內(nèi)分子層。INL內(nèi)核層。ONL外核層。IS內(nèi)段。OS外段。
圖2比較了INS37217(UP4dC)和UTP在過表達(dá)P2Y2受體的1321NI細(xì)胞中對(duì)胞質(zhì)溶膠鈣轉(zhuǎn)移的作用。
圖3比較了INS37217(UP4dC)和UTP在過表達(dá)P2Y2受體的1321NI細(xì)胞中對(duì)肌醇磷酸產(chǎn)生的作用。
圖4表示INS37217(UP4dC)在人類胎兒RPE中對(duì)液體吸收的作用。
圖5表示INS37217(UP4dC)在牛RPE中對(duì)液體轉(zhuǎn)運(yùn)的數(shù)量和方向的作用。
圖6表示來自新鮮分離的豬視網(wǎng)膜組織的INS37217(UP4dC)和UTP的代謝速度。
圖7顯示了在許多視網(wǎng)膜剝離的幼豬中，玻璃體內(nèi)INS37217(UP4dC)對(duì)視網(wǎng)膜下氣泡大小的作用，這是用間接檢眼鏡檢查法評(píng)價(jià)的。
圖8顯示了玻璃體內(nèi)INS37217(UP4dC)對(duì)視網(wǎng)膜下氣泡再吸收的作用。視網(wǎng)膜下的氣泡是通過在視網(wǎng)膜下空間注射含或不含INS37217(1mM)的MPBS溶液產(chǎn)生的?？偨Y(jié)的結(jié)果(平均值±SEM)顯示，與賦形劑對(duì)照相對(duì)，INS37217增加了視網(wǎng)膜下氣泡的清除速度。
圖9(A-C)顯示了玻璃體內(nèi)INS37217對(duì)視網(wǎng)膜下氣泡再吸收的作用。將MPBS溶液注射進(jìn)視網(wǎng)膜下以產(chǎn)生視網(wǎng)膜下的氣泡，然后立即在玻璃體內(nèi)注射含或不含INS37217(12mM，1.4mm和0.15mM)的MPBS溶液?？偨Y(jié)的結(jié)果顯示，與賦形劑對(duì)照相對(duì)，以12和1.4mM施用的INS37217增加了視網(wǎng)膜下氣泡的清除速度，但0.15mM則沒有這種效果。
圖10顯示INS37217(空心柱)和賦形劑對(duì)照(安慰劑，實(shí)心柱)對(duì)視網(wǎng)膜下氣泡的記分有顯著差異(p＜0.05)。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了一種方法，此方法可增加液體通過視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(RPE)的吸收以便于將外來視網(wǎng)膜內(nèi)或視網(wǎng)膜下的液體從眼睛后面的部分除去，從而治療可導(dǎo)致視網(wǎng)膜剝離和視網(wǎng)膜水腫的疾病。本發(fā)明包括對(duì)受試者施用有效量的P2Y受體促效藥以促進(jìn)將與水腫性視網(wǎng)膜疾病有關(guān)的視網(wǎng)膜內(nèi)和視網(wǎng)膜下空間內(nèi)的病態(tài)液體累積除去。
所述P2Y受體促效藥和或不和通常用于治療或控制視網(wǎng)膜剝離和視網(wǎng)膜水腫的其它治療劑和佐劑一起施用。有效劑量是激活位于視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞朝向視網(wǎng)膜的膜(頂膜)上的P2Y受體并增強(qiáng)液體通過RPE吸收(從視網(wǎng)膜到脈絡(luò)膜的方向)所必須的此類促效藥的量。本發(fā)明提供了促進(jìn)將外來液體從視網(wǎng)膜和視網(wǎng)膜下空間除去的方法，由此可有效預(yù)防、控制和治療水腫性視網(wǎng)膜疾病，如視網(wǎng)膜剝離和視網(wǎng)膜水腫。
本發(fā)明的方法可有效控制和/或治療所有與視網(wǎng)膜剝離和視網(wǎng)膜水腫有關(guān)的疾病，包括但不限于孔源性視網(wǎng)膜剝離、漿液性視網(wǎng)膜剝離、所有形式的囊樣黃斑水腫(葡糖膜炎、手術(shù)后造成的、中央和分支靜脈阻塞以及遺傳性視網(wǎng)膜疾病，如視網(wǎng)膜色素變性)以及所有形式的視網(wǎng)膜和黃斑水腫(增生性和非增生性的、滲出性年齡相關(guān)的黃斑變性以及早熟性視網(wǎng)膜病)。
本發(fā)明提供了向受試者施用含有P2Y受體促效藥的藥物組合物以除去視網(wǎng)膜下和視網(wǎng)膜內(nèi)空間內(nèi)的病態(tài)液體累積的方法。所述P2Y受體促效藥包括二核苷酸多磷酸和它們的類似物，它們可激活P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6和P2Y11，優(yōu)選P2Y2受體。
化合物的描述對(duì)本發(fā)明有效的二核苷酸多磷酸是具有通式I的化合物活期藥學(xué)上可接受的無毒鹽結(jié)構(gòu)式I
其中X是氧、亞甲基、二鹵亞甲基(二氟亞甲基和二氯亞甲基是優(yōu)選的)或亞氨；n＝0，1或2；m＝0，1或2；n+m＝0，1，2，3或4；Z＝OH或H；Z’＝OH或H；Y＝OH或H；Y’＝OH或H；和B和B’各自獨(dú)立為如結(jié)構(gòu)式Ia或Ib所定義的嘌呤殘基或嘧啶殘基，分別通過9-或1-位連接；結(jié)構(gòu)式Ia 其中R1是氫、氯、氨基、單取代的氨基、二取代的氨基、烷基硫代、芳基硫代或烷芳基硫代，其中硫上的取代基含有最多20個(gè)不飽和或飽和的碳原子；R2是羥基、鏈烯基、氧代、氨基、巰基、硫酮、烷基硫代、芳基硫代、烷芳基硫代、?；虼⑼檠趸?、芳氧基、芳烷氧基、酰氧基、單取代的烷基氨基、雜環(huán)基、單取代的環(huán)烷基氨基、單取代的芳烷基氨基、單取代的芳基氨基、二芳烷基氨基、二芳基氨基、二烷基氨基、?；被蚨；被?，Rx是O、H或缺少；R2和Rx可任選地一起形成1，N6-乙烯腺嘌呤衍生物的五元稠合咪唑環(huán)，乙烯部分的4-或5-位被如下定義的烷基、芳基或芳烷基部分任意取代；
R3是如下定義的氫、疊氮、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、烷基硫代、芳基硫代或烷芳基硫代；或是T(C1-6烷基)OCONH(C1-6烷基)W，其中T和W獨(dú)立為氨基、巰基、羥基或羧基；或是它們藥學(xué)上可接受的酯、酰胺或鹽；或者缺少；因此，腺嘌呤的取代衍生物包括1-氧化物、1，N6-(4-或5-取代的乙烯)腺嘌呤；N6-取代的腺嘌呤；或N-取代的8-氨基腺嘌呤，其中6-或8-HNR’基的R’選自芳基烷基(C1-6)基，其芳基部分任選地如以下描述功能化；烷基；以及其中帶有以下官能團(tuán)的烷基；如([6-氨基己基]氨基甲?；谆?-，和ω-?；陌被?羥基、硫醇和羧基)烷基(C2-10)-，以及它們?chǔ)??；陌被?羥基、硫醇和羧基)衍生物，這里的?；x自(但不限于)乙酰基、三氟乙?；?、苯甲?；⑷〈谋郊柞；?，或者羧基部分以其酯或酰胺衍生物的形式出現(xiàn)，例如，乙基或甲基酯或其甲基、乙基或芐胺衍生物。ω-氨基(羥基、硫醇)部分可被C1-4烷基烷基化。
J是碳或氮，條件是當(dāng)J是氮時(shí)，R3不出現(xiàn)；其中，所述烷基是直鏈、支鏈或環(huán)狀的；其中，所述芳基可任選地被低級(jí)烷基、芳基、氨基、單取代或二取代的氨基、NO2、N3、氰基、羧基、酰胺基、亞磺酰氨基、磺酸、磷酸鹽或鹵素基團(tuán)取代；結(jié)構(gòu)式Ib 其中R4是羥基、氧代、巰基、硫酮、氨基、氰基、C7-12芳基烷氧基、C1-6烷基硫代、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基或二C1-4烷基氨基，其中所述烷基可任選地連接形成雜環(huán)；R5是氫、酰基、苯甲?；?、C1-6烷基、C1-5烷?；⒎减；蛉鄙?；R6是羥基、氧代、巰基、硫酮、C1-4烷氧基、C7-12芳基烷氧基、C1-6烷基硫代、S-苯基、芳基硫代、芳基烷基硫代、三唑基、氨基、C1-6烷基氨基、C1-5雙取代的氨基、或二-C1-4烷基氨基，其中所述二烷基可任選地連接形成雜環(huán)或連接形成取代的環(huán)，如嗎啉環(huán)、吡咯環(huán)等；或者R5和R6一起在嘧啶環(huán)的3和4位之間形成五元稠合的咪唑環(huán)，并形成3，N4-乙烯胞嘧啶衍生物，其中所述乙烯部分在4-或5-位被C1-4烷基、苯基或苯氧基任意取代；其中所述C1-4烷基、苯基或苯氧基至少一個(gè)氫被選自以下基團(tuán)的部分任意取代，這些基團(tuán)是鹵素、羥基、C1-4烷氧基、C1-4烷基、C6-10芳基、C7-12芳基烷基、羧基、氰基、硝基、亞磺酰氨基、磺酸鹽、磷酸鹽、磺酸、氨基、C1-4烷基氨基和二-C1-4烷基氨基，其中所述二烷基可任選地連接形成雜環(huán)；R7選自氫、羥基、氰基、硝基、C1-6烷基或苯基；取代的C2-8炔基、鹵素、取代的C1-4烷基、CF3、C2-3鏈烯基、C2-3炔基、丙烯氨基、溴乙烯、乙基丙烯酸鹽或丙烯酸和C2-8鏈烯基；或者R6和R7一起形成5或6元通過R6的N或O或S連接的飽和或不飽和的環(huán)，該環(huán)任意含有本身具有官能度的取代基；以及R8選自氫、氨基、二-C1-4烷基氨基、C1-4烷氧基、C7-12芳基烷氧基、C1-4烷基硫代、C7-12芳基烷基硫代、羧酰胺甲基、羧甲基、甲氧基、硫代甲基、苯氧基和硫代苯基；條件是當(dāng)R8是氨基或取代的氨基時(shí)，R7是氫。
如上所述，所述核糖基部分是D-構(gòu)型的，但也可以是L-構(gòu)型，或者是D-和L-構(gòu)型。D-構(gòu)型是優(yōu)選的。所述核苷殘基包括糖的部分，呋喃核糖基、呋喃阿拉伯糖基、2’-脫氧呋喃核糖基、3’-脫氧呋喃核糖基、2’，3’-雙脫氧呋喃核糖基、呋喃木糖基、2’-脫氧呋喃木糖基和呋喃來蘇糖基；并且可以是α-或β-和D-或L-構(gòu)型，但最好是β-D-構(gòu)型。
在結(jié)構(gòu)式I的一般結(jié)構(gòu)(上述Ia和Ib)中，2至6位的虛線表示在這些位置上存在單鍵或雙鍵；雙鍵或單鍵的相對(duì)位置由R4、R5和R6的取代基是否能夠酮-烯醇互變異構(gòu)來確定。
在上述結(jié)構(gòu)式I的一般結(jié)構(gòu)中，酰基包括烷?；头减；?。所述烷基含有1-8個(gè)碳原子，優(yōu)選含有1-4個(gè)被如下所述的一個(gè)或多個(gè)合適的取代基任意取代的碳原子。芳基包括芳氧基基團(tuán)的芳基部分，優(yōu)選的是被如下所述的一個(gè)或多個(gè)合適的取代基任意取代的苯基。上面提到的鏈烯基或炔基含有2-8個(gè)碳原子，優(yōu)選有2-6個(gè)碳原子，如乙烯基或乙炔基，可被如下所述的一個(gè)或多個(gè)合適的取代基任意取代。
上面提到的烷基、鏈烯基、炔基和芳基的合適取代基選自鹵素、羥基、C1-4烷氧基、C1-4烷基、C6-12芳基、C6-12芳基烷氧基、羧基、氰基、硝基、亞磺酰氨基、磺酸鹽、磷酸鹽、磺酸基、氨基和取代的氨基，其中，所述氨基被C1-4烷基單取代或雙取代，當(dāng)雙取代時(shí)，所述烷基可任意連接形成雜環(huán)。
通式I的二核苷酸多磷酸包括選自以下基團(tuán)的二核苷酸四磷酸P1，P4-二(尿苷5’-)四磷酸(UP4U)；P1-(胞苷5’)-P4-(尿苷5’)四磷酸；P1，P4-二(腺苷5’-)四磷酸；P1-(腺苷5’)-P4-(尿苷5’)四磷酸；P1-(腺苷5’)-P4-(胞苷5’)四磷酸；P1，P4-二(乙烯腺苷)四磷酸；P1-(尿苷5’)-P4-(胸苷5’)四磷酸；P1-(腺苷5’)-P4-(肌苷5’)四磷酸；P1，P4-二(尿苷5’-)P2，P3-亞甲基四磷酸；P1，P4-二(尿苷5’-P2，P3-二氟亞甲基四磷酸)；P1，P4-二(尿苷5’-P2，P3-亞氨四磷酸)；P1，P4-二(4-硫代尿苷5’-四磷酸)；P1，P4-二(3，N4-乙烯胞苷5’-)四磷酸；P1，P4-二(咪唑[1，2-c]嘧啶-5(6H)-酮-2-(3-硝基)-苯基-6-β-D-呋喃核糖5’-)四磷酸，四銨鹽；P1-(肌苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(胞苷β-D-呋喃阿拉伯糖5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(尿苷5’-)P4-(黃苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧尿苷5’-)-P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(3’-疊氮-3’-脫氧胸苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1，P4-二(3’-疊氮-3’-脫氧胸苷5’-)四磷酸2P4；P1，P4-二(3’-疊氮-3’-脫氧胸苷5’-)四磷酸；2’(3’)-苯甲酰-P1，P4-二(尿苷5’-)四磷酸；P1，P4-二(2’，3’)-苯甲酰尿苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧鳥苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧腺苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧肌苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧胞苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸(dCP4U)；P1-(8-氮雜腺苷-5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(6-巰基嘌呤核苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(6-巰基嘌呤核苷5’-)P4-(2’-脫氧尿苷5’-)四磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P4-(阿拉伯糖胞苷5’-)四磷酸；P1-(腺苷5’-)P4-(4-硫代甲基尿苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧腺苷5’-)P4-(6-硫代己基嘌呤核苷5’-)四磷酸以及P1-(6-二十烷氧基嘌呤核苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸。UP4U和dCP4U是優(yōu)選的化合物。
通式I的二核苷酸多磷酸包括選自以下基團(tuán)的二核苷酸三磷酸P3-二(尿苷5’-)三磷酸；P1-(胞苷5’)-P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1，P3-二(腺苷5’-)三磷酸；P1-(腺苷5’)-P3-(尿苷5’)三磷酸；P1-(腺苷5’)-P3-(胞苷5’)三磷酸；P1，P3-二(乙烯腺苷)三磷酸；P1-(尿苷5’)-P3-(胸苷5’)三磷酸；P1-(腺苷5’)-P3-(肌苷5’)三磷酸；P1，P3-二(尿苷5’-)P2，P3-亞甲基三磷酸；P1，P3-二(尿苷5’-P2，P3-二氟亞甲基三磷酸)；P1，P3-二(尿苷5’-P2，P3-亞氨三磷酸)；P1，P3-二(4-硫代尿苷5’-三磷酸)；P1，P3-二(3，N4-乙烯胞苷5’-)三磷酸；P1，P3-二(咪唑[1，2-c]嘧啶-5(6H)-酮-2-(3-硝基)-苯基-6-β-D-呋喃核糖5’-)三磷酸，四銨鹽；P1-(肌苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(胞苷β-D-呋喃阿拉伯糖5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(尿苷5’-)P3-(黃苷5’-)三磷酸；P1-(2’-脫氧尿苷5’-)-P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(3’-疊氮-3’-脫氧胸苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1，P3-二(3’-疊氮-3’-脫氧胸苷5’-)三磷酸；P1，P3-二(3’-疊氮-3’-脫氧胸苷5’-)三磷酸；2’(3’)-苯甲酰-P1，P3-二(尿苷5’-)三磷酸；P1，P3-二(2’，3’)-苯甲酰尿苷5’-)三磷酸；P1-(2’-脫氧鳥苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(2’-脫氧腺苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(2’-脫氧肌苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(2’-脫氧胞苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(8-氮雜腺苷-5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(6-巰基嘌呤核苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(6-巰基嘌呤核苷5’-)P3-(2’-脫氧尿苷5’-)三磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P3-(阿拉伯糖胞苷5’-)三磷酸；P1-(腺苷5’-)P3-(4-硫代甲基尿苷5’-)三磷酸；P1-(2’-脫氧腺苷5’-)P3-(6-硫代己基嘌呤核苷5’-)三磷酸以及P1-(6-二十烷氧基嘌呤核苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸。
此外，通式III的二核苷酸多磷酸包括選自P1-(尿苷5’-)P2-(4-硫代尿苷5’-)二磷酸；P1，P5-二(尿苷5)-五磷酸和P1，P6-二(尿苷5)-六磷酸的化合物。
優(yōu)選的核苷促效藥是抗水解的促效藥。抗水解的促效藥是帶有經(jīng)過修飾的磷酸酯主鏈的核苷，如亞甲基、亞氨基或其它可保護(hù)磷酸酯鍵被輕易水解的基團(tuán)。二核苷酸也可因缺少末端磷酸基團(tuán)而抵抗水解。某些二核苷酸特別抗水解。例如，與P1，P4-二(尿苷5’-)四磷酸相比，P1-(胞苷5’)-P4-(尿苷5’)四磷酸更加抗水解。此外，置于單核苷酸磷酸鏈末端的基團(tuán)可賦予一定的抗水解穩(wěn)定性，如簡(jiǎn)單的烷基磷酸酯(甲基、乙基、芐基等)或硫代基團(tuán)(如UTPγS)。
本發(fā)明還提供了結(jié)構(gòu)式I的化合物的新型組合物，其中結(jié)構(gòu)式I的呋喃基糖部分選自3’-脫氧呋喃核糖基、2’，3’-雙脫氧呋喃核糖基、呋喃阿拉伯糖基、3’-脫氧呋喃阿拉伯糖基、呋喃木糖基、2’-多于呋喃木糖基和呋喃來蘇糖基。
以下特殊的化合物也是新的P1-(6-巰基嘌呤核苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(6-巰基嘌呤核苷5’-)P4-(2’-脫氧尿苷5’-)四磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P4-(阿拉伯糖胞苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧腺苷5’-)P4-(6-硫代己基嘌呤核苷5’-)四磷酸；P1-(6-二十烷氧基嘌呤核苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(阿拉伯糖腺苷5’)P4-(尿苷-5’-)四磷酸；P1-(呋喃來蘇糖基胸苷5’)P4-(尿苷-5’-)四磷酸和P1-(呋喃來蘇糖基尿嘧啶-5’-)P4-(尿苷-5’-)四磷酸。
可以將一種被縮合劑活化的核苷酸的單-、二-或三磷酸與第二種相同或不同的單-、二-或三磷酸分子縮合，以形成所需的二核苷酸多磷酸，這樣便可制得本發(fā)明的化合物，上述縮合劑包括但不限于羰基二咪唑或二環(huán)己基碳二亞胺。另一種制備方法是，將按上述方法活化的一種核苷酸磷酸依次和無核苷酸的單-、二-或三磷酸部分縮合以產(chǎn)生所需的二核苷酸多磷酸，其中所述無核苷酸的單-、二-或三磷酸部分有(但不限于)單磷酸或焦磷酸陰離子，這時(shí)，沒有分離的中間產(chǎn)物是單核苷酸多磷酸。再一種制備方法是將按上述方法活化的單-、二-或三磷酸部分，或是酸性鹵化物形式或其它朝著親核置換的衍生反應(yīng)物形式的單-、二-或三磷酸部分與核苷酸磷酸或核苷酸多磷酸依次縮合，以產(chǎn)生所需的二核苷酸多磷酸?？赏ㄟ^在嘌呤、嘧啶或碳水化合物環(huán)上進(jìn)行取代或衍生修飾預(yù)先形成的二核苷酸多磷酸，這樣也可形成所需的二核苷酸多磷酸。用作原料是核苷酸磷酸是商業(yè)上可獲得的，或者可用精通此領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的方法由相應(yīng)的核苷酸制得。同樣，當(dāng)核苷酸是商業(yè)上無法獲得時(shí)，它們可通過修飾其它容易獲得的核苷酸而制得，或者用精通此領(lǐng)域的技術(shù)人員熟知的方法由雜環(huán)和碳水化合物前體合成，這些方法有WO 96/40059，WO96/02443A1，WO-A-9815563和WO 98/55494；Theoclitou等，J.Chem.Sot.Perkin.Trans.I，2009-2019(1996)；Guranowski等，Nucleosides and Nucleotides 14，731-734(1995)；Visscher等，Nucleic Acids Research 20，5749-5752(1992)；Holler等，Biochemistry 22，4924-10 4933(1983)；Orr等，Biochem.Pharmacol.673-677(1988)；Plateau等，Biochemistry 24，914-922(1985)；Hagmeier等，J.Chromatography 237，174-177(1982)；Scheffzek等，Biochemistry 35，9716-9727(1996)；Stridh等，Antiviral Res.，97-105(1981)；Tarasova等，Chem.Abs.110，154770(1988)；Hata等，Chem.Lett.987-990(1976)；Huhn等，28，1959-1970(1993)；Tumanov等，Chem.Abs.109-6867d(1987)；Pintor等，MolecularPharmacology 51，277-284(1997)；以及美國(guó)專利第4,855,304；5,635,160；5,495,550和5,681,823號(hào)。
那些精通此領(lǐng)域的技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到，所述原料是可以變化的，并且可以使用額外的步驟以制造本發(fā)明的化合物，這正如以下實(shí)施例所證明。某些情況下，對(duì)某些反應(yīng)官能度的保護(hù)對(duì)于實(shí)現(xiàn)上述一些轉(zhuǎn)化是有用的。通常，對(duì)這些保護(hù)基團(tuán)的需求以及加上和除去這些基團(tuán)所需的條件對(duì)于精通有機(jī)合成領(lǐng)域的技術(shù)人員而言是顯而易見的。
本發(fā)明的化合物還包括它們無毒的藥學(xué)上可接受的鹽，比如但不限于堿金屬鹽，如鋰、鈉或鉀；堿土金屬鹽，如錳、鎂或鈣；或是銨鹽或四烷基季銨鹽，即NX4+(其中X是C1-4)。藥學(xué)上可接受的鹽是保留了本化合物所需的生物學(xué)活性且沒有不需要的毒理學(xué)效應(yīng)的鹽。本發(fā)明還包括這里所描述的化合物?；那绑w藥物。那些精通此領(lǐng)域的技術(shù)人員將了解各種可用于制備所述化合物無毒的藥學(xué)上可接受的鹽和?；那绑w藥物的合成方法。
盡管本發(fā)明的化合物只要用于治療人類受試者，但它們也可被獸醫(yī)用于治療其它哺乳動(dòng)物受試者，如狗和貓。
本發(fā)明化合物的藥效可通過對(duì)P2Y2和其它P2Y受體活性進(jìn)行肌醇磷酸測(cè)定來說明。如Lazarowski等(1995)(Brit.J.Pharm.116，1619-27)描述的這種被廣泛使用的測(cè)定方法依賴于對(duì)肌醇磷酸形成的測(cè)量，它被作為化合物活化通過G-蛋白與磷酸酶C連接的受體的活性的度量。
這些化合物的功效反映在它們促進(jìn)除去視網(wǎng)膜下和視網(wǎng)膜內(nèi)空間中的病態(tài)液體累積的能力上，這種累積與包括視網(wǎng)膜剝離和視網(wǎng)膜水腫在內(nèi)的水腫性視網(wǎng)膜疾病有關(guān)。有效劑量取決于各個(gè)患者的特征、所用特定化合物的活性、用藥模式和疾病或病癥的特征，并且可有精通此領(lǐng)域的技術(shù)人員決定。
可除去視網(wǎng)膜內(nèi)或視網(wǎng)膜下空間中外來液體的劑量水平在眼睛每眼10μg-10mg之間，優(yōu)選每眼50μg-6mg，最優(yōu)選為每眼0.1mg-4mg。
化合物的施用可用各種合適的方法對(duì)患者的眼睛施用這里所揭示的活性化合物，但優(yōu)選的施用方法是以液滴、噴霧或凝膠的形式施用所述活性化合物的液體或凝膠懸液。或者，可通過脂質(zhì)體對(duì)眼睛施用活性化合物。此外，可通過泵-導(dǎo)管系統(tǒng)將所述活性化合物灌輸進(jìn)淚液膜。本發(fā)明的另一實(shí)施方案涉及含在連續(xù)或選擇性釋放裝置中的活性化合物，所述裝置如用于(但不限于)OcusertTM系統(tǒng)(Alza公司，Palo Alto，加利福尼亞州)的膜。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述活性化合物被含在、攜帶在或附在放在眼睛上的隱性眼鏡上。本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括含在可用于眼表面的藥簽或海綿上的活性化合物。本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括含在可用于眼表面的液體噴霧器內(nèi)的活性化合物。本發(fā)明的另一實(shí)施方案包括將活性化合物直接注射到淚腺組織或眼表面。
優(yōu)選以含水懸液的形式將這里所揭示的活性化合物使用到玻璃體內(nèi)。玻璃體內(nèi)用藥包括；一次或多次玻璃體內(nèi)注射；在手術(shù)時(shí)直接對(duì)玻璃體室單獨(dú)施用或與眼內(nèi)沖洗液或其它類似溶液或裝置一起施用，這些裝置通常是在玻璃體視網(wǎng)膜手術(shù)時(shí)使用的；通過脂質(zhì)體或其它合適的藥物載體施用；通過連續(xù)或選擇性釋放的植入玻璃體內(nèi)的裝置施用，這些裝置包括但不限于OcusertTM(Alza公司，Palo Alto，加利福尼亞州)和Vitrasert(Bausch和Lomb公司，羅徹斯特，紐約州)。所述玻璃體內(nèi)溶液含有活性化合物，并可任意含有生理上可接受的賦形劑，如精通眼科的技術(shù)人員按常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)可選用的那些。所述賦形劑可選自已知的眼賦形劑，如(但不限于)鹽溶液、含水的聚醚類(如聚乙二醇)、聚乙烯類(如聚乙烯醇和聚吡咯烷酮)、纖維素衍生物類(如甲基纖維素和羥丙基甲基纖維素)、石油衍生物類(如礦物油和白凡士林)、動(dòng)物脂肪(如羊毛脂)、丙烯酸的聚合物(如羧基聚亞甲基凝膠)、植物脂肪(如花生油)和多糖類(如葡聚糖)和糖胺聚糖類(如透明質(zhì)酸鈉鹽)和鹽類(如氯化鈉和氯化鉀)。優(yōu)選的實(shí)施方案是含有活性化合物和pH中性且生理等滲的鹽水的玻璃體內(nèi)溶液。
含有活性化合物的局部溶液還可以含有生理上相容的賦形劑，精通眼科技術(shù)的人員可用常規(guī)的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行選擇。賦形劑可選自已知的眼科賦形劑，包括(但不限于)鹽水和含水的電解質(zhì)溶液、含水的聚醚類(如聚乙二醇)、聚乙烯類(如聚乙烯醇和聚吡咯烷酮)、纖維素衍生物類(如甲基纖維素和羥丙基甲基纖維素)、石油衍生物類(如礦物油和白凡士林)、動(dòng)物脂肪(如羊毛脂)、丙烯酸的聚合物(如羧基聚亞甲基凝膠)、植物脂肪(如花生油)和多糖類(如葡聚糖)和糖胺聚糖類(如透明質(zhì)酸鈉鹽)和鹽類(如氯化鈉和氯化鉀)。
除了上述局部用藥的方法，還有許多全身性施用本發(fā)明的活性化合物的方法，這樣，化合物就可以通過全身吸收和循環(huán)到達(dá)眼部。這類方法之一涉及一種被受試者吸入的含有活性化合物的可吸入顆粒的氣溶膠懸浮液?；钚曰衔飳⑼ㄟ^肺被吸收進(jìn)血液，或經(jīng)過鼻淚管與眼組織接觸，隨后再以藥物有效量與眼內(nèi)細(xì)胞接觸?？晌氲念w?？梢允且后w或固體，粒徑應(yīng)該足夠小以被吸入時(shí)通過口腔和喉；通常，粒徑在約1-10微米，但最好在1-5微米，這一范圍內(nèi)的顆粒被認(rèn)為是可吸入的。
另一種向受試者的眼全身性施用活性化合物的方法包括以液態(tài)制劑的眼藥水或洗眼液或滴鼻藥水形式，或以受試者吸入的可吸入顆粒的鼻噴霧劑的形式施用液/液懸浮液?？梢杂镁ù祟I(lǐng)域的技術(shù)人員已知的方法，將活性化合物與合適的賦形劑，如無菌無熱原的水或無菌鹽水混合，以制備用來制造鼻噴霧劑或滴鼻或滴眼液的活性化合物的液態(tài)藥物組合物。
其它全身性施用活性化合物的方法包括口服施用，其中含有結(jié)構(gòu)I的化合物的藥物組合物是片劑、錠劑、水性或油性懸浮液、可分散的粉劑或顆粒劑、乳劑、硬或軟膠囊、或糖漿劑或酏劑的形式。可以根據(jù)此領(lǐng)域中已知的用來制造藥物組合物的任何方法來制造供口服的組合物，且這種組合物可以含有一種或多種選自甜味劑、調(diào)味劑、著色劑和防腐劑的物質(zhì)以提供好看且美味的藥物制劑。與無毒的藥學(xué)上可接受的賦形劑混合的含有活性成分的片劑是適宜于制造片劑的。這些賦形劑可以是，例如，惰性稀釋劑，如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；成粒劑和崩解劑，如玉米淀粉或海藻酸；粘合劑，例如淀粉、明膠或阿拉伯膠；和潤(rùn)滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。片劑可以不包衣或可用已知的技術(shù)進(jìn)行包衣以延遲它們?cè)谀c胃道中的崩解和吸收，從而在較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)提供持續(xù)的活性。例如，可以使用單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯之類的緩釋材料。供口服的制劑可以硬明膠膠囊的形式提供，其中活性成分與惰性固體稀釋劑(如，碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土)混合，或作為軟明膠膠囊的形式，其中活性成分與水或油性介質(zhì)(如，花生油、液態(tài)石蠟或橄欖油)混合。
其它向受試者的眼全身性使用活性成分的方法包括活性成分的栓劑形式，以通過全身性吸收和循環(huán)使治療有效量的化合物到達(dá)眼部。
進(jìn)一步的全身性施用活性化合物的方法包括直接內(nèi)操作(intra-operative)滴注凝膠、乳膏或液體懸液形式的治療有效量的活性化合物。
本發(fā)明的方法可有效提高用于治療和控制與視網(wǎng)膜剝離和視網(wǎng)膜水腫有關(guān)的疾病的手術(shù)、藥物療法和佐劑的功效。手術(shù)方法包括鞏膜扣帶術(shù)、充氣性視網(wǎng)膜固定術(shù)、黃斑易位(macular translocation)和玻璃體切割術(shù)。皮質(zhì)類固醇和乙酰唑胺等藥物治療劑已被用于治療黃斑水腫。
為達(dá)到實(shí)現(xiàn)目標(biāo)響應(yīng)的水平，一些治療劑的用量可能較大，但這通常會(huì)帶來較高頻率的藥物相關(guān)不良作用。因此，在使用本發(fā)明的化合物時(shí)，通常用于治療視網(wǎng)膜剝離和視網(wǎng)膜水腫的藥劑的用量應(yīng)相對(duì)較小，這樣，因長(zhǎng)期使用此類治療劑而導(dǎo)致的不良副作用的頻率就較低。因此，本發(fā)明化合物的另一適應(yīng)癥是降低用于治療視網(wǎng)膜剝離和視網(wǎng)膜水腫的藥物的不良副作用，比如提高乙酰唑胺的總體效果。
通過以下實(shí)施例進(jìn)一步闡述了本發(fā)明，這些實(shí)施例不能理解為將本發(fā)明限制在它們所描述的特定步驟的范圍內(nèi)。
實(shí)施例實(shí)施例1.P2Y2-受體mRNA在視網(wǎng)膜和RPE中的定位用非同位素原位雜交技術(shù)研究了白化兔視網(wǎng)膜/RPE/脈絡(luò)膜組織的新鮮冷凍橫截面中P2Y2受體mRNA的細(xì)胞定位。圖1代表在P2Y2受體mRNA序列上進(jìn)行的反義和正義洋地黃毒苷(DIG)標(biāo)記的核糖探針(riboprobe)的原位雜交結(jié)果。用堿性磷酸酶共軛的抗DIG抗體通過免疫組織化學(xué)顯示反義和正義核糖探針的雜交，并對(duì)堿性磷酸酶進(jìn)行生色團(tuán)反應(yīng)以檢測(cè)DIG特異信號(hào)，產(chǎn)生了紫色/黑色的染色。還用核堅(jiān)牢紅對(duì)該組織進(jìn)行復(fù)染。作為對(duì)照的正義探針(右)沒有顯示特異的標(biāo)記。反義探針標(biāo)記顯示P2Y2受體mRNA序列定位在神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分散的核和內(nèi)核層中，并穿過光感受器的內(nèi)段層。在脈絡(luò)膜血管的上皮細(xì)胞中還檢測(cè)到了貫穿RPE的強(qiáng)標(biāo)記。
實(shí)施例2.合成的P2Y2促效藥UP4dC(INS37217)對(duì)克隆的人P2Y2受體的作用二核苷酸[P1-(尿苷5’-)-P4-(2’-脫氧胞苷5’-)四磷酸四鈉鹽](UP4dC)，也稱為INS37217，被測(cè)試了其在克隆的人P2Y受體亞型上的活性(潛能、效力和選擇性)，這種亞型在1321N1星形細(xì)胞瘤細(xì)胞中被穩(wěn)定表達(dá)。用兩種體外細(xì)胞活性指標(biāo)評(píng)定活性，這兩種指標(biāo)是1)胞內(nèi)鈣儲(chǔ)備的活化，以及2)[3H]-肌醇磷酸([3H]-IP)的累積。UP4dC在兩種反對(duì)細(xì)胞表達(dá)P2Y1、P2Y2、P2Y4或P2Y6受體的測(cè)定中都具有活性。
UTP和UP4dC在表達(dá)人P2Y2(圖2)受體的1321N1星形細(xì)胞瘤細(xì)胞中誘導(dǎo)了胞質(zhì)溶膠鈣的活化，其EC50值分別為0.22μM和0.8μM。在P2Y2受體上，鈣對(duì)100PM UP4dC的響應(yīng)與對(duì)UTP的最大響應(yīng)相等?？傊?，與UTP相比，UP4dC在P2Y2受體上是鈣活化的全效促效藥。
UTP和UP4dC促進(jìn)表達(dá)人10 P2Y(圖3)受體的1321N1細(xì)胞中[3H]-IP的累積，其EC50值分別為1.1和2.2μM。肌醇磷酸對(duì)100PM UP4dC的響應(yīng)大致等于UTP的最大響應(yīng)。總之，在實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)中與UTP相比，UP4dC在P2Y2受體上是肌醇磷酸釋放的全效促效藥。
實(shí)施例3.在新鮮分離的RPE單層中UP4dC(INS37217)促進(jìn)液體的吸收用經(jīng)過改進(jìn)的電容探針技術(shù)研究了液體通過新鮮分離的、完整的牛和人RPE單層的轉(zhuǎn)移(Frambach等，Biophys.J.47(4)547-52(1985)；J Gen.Physiol.83(6)875-99(1984))。
RPE被垂直安置在改進(jìn)的Ussing室中，這樣頂膜和基底外側(cè)膜就各自暴露于儲(chǔ)存在浴池(bathing reservoirs)中的林格溶液。不銹鋼電容探針被緩慢放進(jìn)頂部和基底外側(cè)的浴池中以感知探針和液體半月板之間空隙的電容。液體轉(zhuǎn)移速度Jv(μL cm-2hr-1)是通過監(jiān)測(cè)因液體移動(dòng)而導(dǎo)致的頂部和基底外側(cè)浴液處空隙電容的變化而測(cè)定的。
圖4顯示了人胚胎RPE中促效藥對(duì)J的代表性作用。正的Jv值表示液體被吸收(頂部向基底外側(cè))而負(fù)的Jv值表示液體分泌(基底外側(cè)向頂部)。在圖4顯示的實(shí)驗(yàn)中，對(duì)照液體通過新鮮分離的人胚胎RPE單層的移動(dòng)以約5μL cm-2hr-1的速度被吸收。在沐浴頂膜的林格溶液中加入50μM促效藥使液體吸收在回到刺激前水平前暫時(shí)升高到約40μL cm-2hr-1。在1小時(shí)的處理階段中，UP4dC(INS37217)增加的總液體吸收大約有三倍。
盡管RPE通常是液體吸收上皮，但在新鮮分離的RPE標(biāo)本中也觀察到了液體分泌。假設(shè)體內(nèi)液體分泌在某些情況(如在黑暗和明亮之間轉(zhuǎn)換時(shí))或在病態(tài)狀況(如漿液性視網(wǎng)膜剝離)下是RPE生理機(jī)能的正常組成部分。圖5顯示了在新鮮分離的牛RPE單層中，其中Jv分泌是在對(duì)照條件下觀察的，所述促效藥可逆轉(zhuǎn)液體轉(zhuǎn)運(yùn)被吸收的方向。在返回對(duì)照林格溶液后促效劑的作用是可逆的。促效藥在體內(nèi)的這種作用將為漿液性視網(wǎng)膜剝離的治療提供治療的可能，所述漿液性視網(wǎng)膜剝離如中心性漿液性視網(wǎng)膜病，其中，假設(shè)異常的RPE介導(dǎo)的液體分泌可引起脈絡(luò)膜的液體轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入視網(wǎng)膜下空間。
實(shí)施例4.新鮮分離的視網(wǎng)膜組織中UP4dC(INS37217)和UTP代謝穩(wěn)定性的比較UP4dC(INS37217)和UTP在新鮮分離的豬視網(wǎng)膜組織中的代謝速度是用連接有UV檢測(cè)器的高效液相色譜(HPLC)法檢測(cè)的。大小相同的新鮮分離的視網(wǎng)膜組織是從安樂死的幼豬(2-3個(gè)月)中分離的，并將視網(wǎng)膜組織分別放在37℃的培養(yǎng)室中。平衡30分鐘后，將各個(gè)組織和100μM UP4dC或UTP一起摻到生理緩沖液中，并溫育0.5、1、2和4小時(shí)。然后對(duì)來自各個(gè)室的等量的緩沖液進(jìn)行W-偶聯(lián)的HPLC檢測(cè)，以得到各個(gè)時(shí)間點(diǎn)上母體UP4dC和UTP化合物的色譜圖，從而可記錄各個(gè)母體化合物的代謝速度。圖6顯示，在這些實(shí)驗(yàn)條件下UP4dC的代謝半衰期是UTP的四倍。
實(shí)施例5.在大氣泡型視網(wǎng)膜剝離(large bullous retinal detachment)的豬模型中UP4dC增加了視網(wǎng)膜下液體的再吸收目的設(shè)計(jì)該研究的目的是評(píng)價(jià)在正常手術(shù)條件下UP4dC對(duì)視網(wǎng)膜下液體再吸收的臨床作用，所述手術(shù)是在大氣泡型視網(wǎng)膜剝離的豬中進(jìn)行的。
方法將300μl平衡鹽鹽水加(BBS+)注射進(jìn)12只豬一只眼睛的視網(wǎng)膜下空間，這樣可產(chǎn)生中心性玻璃體切割術(shù)和延伸1-2個(gè)象限的大視網(wǎng)膜剝離。將含或不含UP4dC(5.6mM)的BBS+注射進(jìn)玻中璃體腔，并通過間接檢眼鏡檢查、超聲和OCT-成像觀察3-7天。
結(jié)果在用UP4dC處理的所有眼睛中，在36小時(shí)內(nèi)觀察到了大視網(wǎng)膜剝離中視網(wǎng)膜下液體的完全再吸收，并在所有的對(duì)照研究中在5-7天后觀察到了這一結(jié)果。這些結(jié)果顯示在圖7中。
結(jié)論在小和大視網(wǎng)膜剝離的試驗(yàn)動(dòng)物模型中，在玻璃體內(nèi)使用UP4dC增加了視網(wǎng)膜下液體的再吸收。因此將UP4dC作為外科輔助物以促進(jìn)人類視網(wǎng)膜剝離或限制性黃斑易位中視網(wǎng)膜下液體的再吸收是有效的。
實(shí)施例6.兔模型中視網(wǎng)膜下和玻璃體內(nèi)UP4dC的作用方法誘導(dǎo)視網(wǎng)膜下氣泡的外科手術(shù)過程通過肌肉內(nèi)注射每千克體重0.3ml鹽酸氯胺酮(100mg/ml)和0.5ml鹽酸甲苯噻嗪(100mg/ml)將重約1.5kg(2-3個(gè)月大)的新西蘭白兔麻醉。按需要加入鹽酸氯胺酮。對(duì)于需要觀察眼底的實(shí)驗(yàn)，用氫溴酸東莨菪堿0.25％、cyclogy 1％和鹽酸苯腎上腺素2.5％滴眼液擴(kuò)張瞳孔。
在每只眼睛中產(chǎn)生局部視網(wǎng)膜剝離。放進(jìn)金屬絲的眼瞼窺鏡并在時(shí)鐘3和9的位置上進(jìn)行節(jié)段性角膜緣球結(jié)膜環(huán)狀切開術(shù)(segmental conjunctivalperitomy)(大約需要2小時(shí))。用19號(hào)MVR刀片在邊緣后0.5mm貫穿玻璃體將鞏膜切出兩條切口。將自留平凹隱性眼鏡放在角膜表面。將用來照明的枝形吊燈光源(Grieshaber & Co.，AG Schaffhausen，Switzerland)小心通過一個(gè)鞏膜切開位置放進(jìn)玻璃體腔以避免接觸隱性眼鏡。
用有斜面的36號(hào)視網(wǎng)膜針頭(Grieshaber & Co.，AG Schaffhausen，Switzerland)造成視網(wǎng)膜剝離，所述針頭通過一伸縮管連接到1ml的注射器，該注射器由經(jīng)過校準(zhǔn)的機(jī)械注射泵(351型，Sage Instruments，Cambridge，Mass)驅(qū)動(dòng)。用手術(shù)顯微鏡直接觀察，所述視網(wǎng)膜針頭被插進(jìn)通過第二鞏膜切口并緩慢前進(jìn)至鼻或太陽(yáng)穴的髓磷脂翼瓣(myelin wing)。這些位置是選出來供注射用的，這時(shí)因?yàn)榕c附近薄且無血管的視網(wǎng)膜相比，髓磷脂翼瓣可提供額外的結(jié)構(gòu)支持。將眼內(nèi)壓保持在較低水平以使易碎的視網(wǎng)膜從RPE上緩慢地水分離。將36號(hào)針的尖端小心插到髓磷脂翼瓣下。用機(jī)械注射泵在視網(wǎng)膜下空間注射進(jìn)約50μl磷酸緩沖鹽水，這樣可產(chǎn)生局部的圓形視網(wǎng)膜剝離。從眼睛中除去這些裝置，鞏膜切割位置將維持打開狀態(tài)以保持眼內(nèi)壓恒定。盡管這些試驗(yàn)性的視網(wǎng)膜剝離只有非常小的視網(wǎng)膜穿孔，但它們?cè)诠δ苌吓c非視網(wǎng)膜剝離類似并可被用來研究視網(wǎng)膜下液體的再吸收機(jī)制。
注射溶液用于所有視網(wǎng)膜下和視網(wǎng)膜內(nèi)注射的經(jīng)過改進(jìn)的磷酸緩沖鹽水(MPBS)含有13.6mM Na2HPO4、6.2mM NaH2PO4、130.5mM NaCl和5mM KCl，其同滲容摩約為300mOsm，pH為7.2。在MPBS溶液中加入U(xiǎn)P4dC(MW 862)以使靶藥物的濃度為12mM、1.4mM、1.0mM或0.15mM。使實(shí)驗(yàn)溶液和對(duì)照溶液保持相等的同滲容摩。對(duì)于濃度為1mMUP4dC或更低的溶液，需在MPBS溶液中加入適量NaCl以補(bǔ)償U(kuò)P4dC對(duì)同滲容摩的貢獻(xiàn)(1mM UP4dC的貢獻(xiàn)約為4-5mOsm)。對(duì)于濃度大于1mM UP4dC的溶液，可通過減少M(fèi)PBS溶液中相等的NaCl的同滲容摩以代替加入的UP4dC，這樣可維持溶液的等滲性。每種劑量的所有實(shí)驗(yàn)溶液和對(duì)照溶液都照此配制，最終的同滲容摩分別為±2mOsm。提供了無菌溶液并讓不知情的觀察者來評(píng)價(jià)。
研究設(shè)計(jì)將每個(gè)動(dòng)物的一只眼睛作為實(shí)驗(yàn)眼，而另一只眼睛作為對(duì)照。UP4dC是通過視網(wǎng)膜下或玻璃體內(nèi)輸遞的，以評(píng)價(jià)其在試驗(yàn)性視網(wǎng)膜剝離中對(duì)視網(wǎng)膜下液體再吸收的作用。在第一系列的實(shí)驗(yàn)中，含或不含UP4dC(1mM)的MPBS被注射到視網(wǎng)膜下空間中。在第二系列的實(shí)驗(yàn)中，產(chǎn)生了含有MPBS溶液的視網(wǎng)膜下氣泡，然后用100μl的Hamilton注射器在靠近所述視網(wǎng)膜下氣泡的地方將50μl含或不含UP4dC(12mM、1.4mM和0.15mM)的MPBS溶液施用到玻璃體腔。外科醫(yī)師是不知道所施用溶液的具體濃度的。
實(shí)驗(yàn)前的觀察用甲基纖維素層保護(hù)角膜上皮以保持角膜透明。在選定的情況下用眼底照相機(jī)(TRC-W，TOPCON，日本)得到眼底的照片。觀察者通過間接檢眼鏡檢查確定氣泡最初的大小，并且每30分鐘測(cè)定一次氣泡大小，這樣進(jìn)行3小時(shí)。以鄰近的視神經(jīng)盤為參考標(biāo)記，將每個(gè)視網(wǎng)膜下氣泡的垂直和水平直徑記錄為盤直徑(discdiameter)。(視神經(jīng)盤的評(píng)價(jià)參考直徑約為1mm，如先前在顯微鏡下在10只來自白化兔的摘除細(xì)胞核的眼睛中測(cè)定的結(jié)果類似)。每個(gè)評(píng)定時(shí)間點(diǎn)的氣泡的大小的計(jì)算方法是，首先將垂直和水平尺寸相乘，然后將結(jié)果除以各個(gè)氣泡最初的大小以得到無量綱的數(shù)值。然后將各個(gè)評(píng)定時(shí)間點(diǎn)上無量綱(歸一化)的氣泡尺寸作為時(shí)間的函數(shù)繪圖并分析。
結(jié)果視網(wǎng)膜下和玻璃體內(nèi)UP4dC的作用在第一組實(shí)驗(yàn)中，將含有1mM UP4dC的等滲的MPBS溶液直接注射進(jìn)視網(wǎng)膜下空間。對(duì)面的眼睛僅接受了視網(wǎng)膜下注射的等滲的MPBS溶液。圖8顯示，含有UP4dC的視網(wǎng)膜下氣泡的消散明顯快于僅含MPBS溶液的氣泡。在用UP4dC處理的氣泡中，在120-150分鐘觀察到了視網(wǎng)膜的再附著，而對(duì)照的視網(wǎng)膜下氣泡在3小時(shí)的觀察期內(nèi)都沒有消散。通過重復(fù)使用ANOVA測(cè)量方法，30、60和90分鐘的視網(wǎng)膜下再吸收有顯著差異(p＜0.05)。
在第二組實(shí)驗(yàn)中，首先用MPBS溶液誘導(dǎo)視網(wǎng)膜下氣泡，然后立即在非常接近所述氣泡的地方在玻璃體內(nèi)注射50μl含或不含UP4dC(12、1.4和0.15mM)的MPBS溶液。圖9A和B顯示，與賦形劑相比，兩個(gè)較高劑量的UP4dC明顯增強(qiáng)了視網(wǎng)膜下氣泡的再吸收和視網(wǎng)膜再附著的速度。在用UP4dC處理和單獨(dú)用賦形劑處理30、60和90分鐘的眼睛的再吸收速度之間存在著統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的差異(p＜0.05)。用UP4dC處理的眼睛在約90分鐘即顯示了接近完全的視網(wǎng)膜再附著，而對(duì)照氣泡在180分鐘時(shí)還沒有完全再附著。
圖9C顯示了用0.15mM玻璃體內(nèi)UP4dC處理或單獨(dú)用賦形劑處理的眼睛中視網(wǎng)膜下氣泡的再吸收。與單獨(dú)用賦形劑處理相比，在用0.15mM UP4dC處理的眼睛中，任何時(shí)間點(diǎn)上視網(wǎng)膜下液體的再吸收之間都沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的差異。
實(shí)施例7.大鼠模型中UP4dC對(duì)視網(wǎng)膜再附著的作用方法體內(nèi)準(zhǔn)備大鼠研究設(shè)計(jì)在Long-Evans雌性大鼠中通過將2-3μl經(jīng)過改進(jìn)的磷酸緩沖鹽水(MPBS)的林格溶液注射進(jìn)視網(wǎng)膜下空間以造成視網(wǎng)膜剝離；對(duì)每只大鼠只使用一只眼睛。使用CCD照相機(jī)以1分鐘為間隔獲得視網(wǎng)膜下氣泡的圖象，這樣持續(xù)數(shù)小時(shí)。下面將更詳細(xì)地描述圖象的獲得。在各個(gè)實(shí)驗(yàn)的對(duì)照部分(視網(wǎng)膜剝離產(chǎn)生后0-30分鐘)，表觀氣泡大小達(dá)到穩(wěn)定，其大小在麻醉階段(數(shù)小時(shí))保持不變。配制含或不含UP4dC(5mM)的MPBS溶液并在隱蔽和隨機(jī)的條件下將其注射進(jìn)大鼠眼睛的玻璃體內(nèi)(3μl)。針劑藥水瓶和它們的成分是無法區(qū)別的。玻璃體注射后，如實(shí)驗(yàn)者用圖10所示的7級(jí)范圍(0±3)做出的判斷，表觀氣泡大小在以后的60分鐘內(nèi)既不增加也不減小，或者說是恒定的。該等級(jí)是通過觀察在玻璃體內(nèi)注射藥物或安慰劑后30-90分鐘內(nèi)表觀氣泡大小的變化制定的。等級(jí)為-3說明視網(wǎng)膜氣泡明顯被展平。等級(jí)為+3說明氣泡的尺寸幾乎增大了兩倍。0等級(jí)說明表觀氣泡大小未隨時(shí)間變化。所有實(shí)驗(yàn)完成后，告知各個(gè)針劑藥水瓶的成分并與試驗(yàn)者的結(jié)論進(jìn)行比較，試驗(yàn)者的結(jié)論是根據(jù)對(duì)圖象的觀察得出的，所示圖象是在施用藥物或安慰劑后30-90分鐘內(nèi)和以后一天內(nèi)獲得的。
結(jié)論圖10顯示了玻璃體內(nèi)UP4dC對(duì)12只大鼠(每只動(dòng)物用1只眼睛)視網(wǎng)膜再附著的作用。實(shí)驗(yàn)是以不知情的方式進(jìn)行的，以精密并客觀地評(píng)價(jià)UP4dC對(duì)液體再吸收(來自實(shí)驗(yàn)制造的視網(wǎng)膜下的氣泡)的作用。在這些實(shí)驗(yàn)中，氣泡產(chǎn)生后，以不知情的方式(針劑藥水瓶和它們的成分是無法區(qū)別的)將藥物或安慰劑溶液注射進(jìn)大鼠眼睛的玻璃體內(nèi)。對(duì)所有12只眼睛都記分后，告知關(guān)鍵因素并與基于1和24小時(shí)觀察的總結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果總結(jié)在圖10中，它顯示UP4dC(空心柱)和賦形劑對(duì)照(安慰劑，實(shí)心柱)對(duì)視網(wǎng)膜下氣泡的記分存在顯著差異(p＜0.05)。處理1小時(shí)后，用UP4dC處理的眼睛都顯示了氣泡大小的減小，而對(duì)照眼睛卻都顯示出氣泡大小的增加。第二條，來自用UP4dC處理的眼睛的視網(wǎng)膜下氣泡幾乎完全消失，而來自賦形劑處理的研究的視網(wǎng)膜下氣泡則基本上沒有改變。6只用UP4dC處理的眼睛中有4只，其視網(wǎng)膜在24小時(shí)的時(shí)間點(diǎn)上似乎完全展平。
實(shí)施例8.初步處理患有黃斑病變性視網(wǎng)膜剝離(macula-off rhegmatogenousretinal detachment)的受試者中心視力突然喪失的患者被診斷為黃斑病變性視網(wǎng)膜剝離，它在上視網(wǎng)膜(superior retina)中只有一個(gè)尺寸小于1時(shí)鐘小時(shí)的缺口。用典型的Betadine消毒患者的結(jié)膜(盲管)，并洗滌并遮蓋臉、睫毛和眼瞼。通過結(jié)膜下注射利多卡因進(jìn)行局部麻醉。
然后將來自0.25cc或0.50cc結(jié)核菌素注射器的29或30號(hào)針通過鞏膜插入眼睛的睫狀環(huán)區(qū)域，以便僅對(duì)患者緩慢施用50μL玻璃體內(nèi)注射的無菌藥物組合物。所示藥物組合物含有阻止代謝的P2Y2受體促效藥，所述促效藥在鹽水中被制備成等滲(280-300mOsm)，并具有生理pH(7.0-7.5)。
從兩側(cè)修復(fù)患者的眼睛，并使患者在水平的位置上休息4小時(shí)，就是在這一位置上對(duì)眼睛進(jìn)行視網(wǎng)膜再附著實(shí)驗(yàn)的。如果視網(wǎng)膜在4小時(shí)的時(shí)間點(diǎn)沒有完全再附著，則再?gòu)膬蓚?cè)修復(fù)患者的眼睛直至第二條(給藥20-24小時(shí)后)，此時(shí)在檢查視網(wǎng)膜的再附著情況。在視網(wǎng)膜再附著后，用常規(guī)的方法適當(dāng)處理視網(wǎng)膜裂孔，比如冷凍療法或激光凝固。
現(xiàn)在已經(jīng)用完整、清楚、簡(jiǎn)潔且準(zhǔn)確的術(shù)語(yǔ)描述了本發(fā)明以及制造和使用它的方式和方法，這就使得精通此領(lǐng)域的任何技術(shù)人員都可以制造和使用它。應(yīng)該理解的是，上面描述了本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案，并可以在不背離如權(quán)利要求所列出的本發(fā)明范圍的情況下對(duì)其作出改進(jìn)。為特別指出并明確要求本發(fā)明的主題，用以下的權(quán)利要求結(jié)束本說明書。
權(quán)利要求
1.一種在需要治療的受試者中治療水腫性視網(wǎng)膜疾病的方法，其特征在于，所述方法包括對(duì)所述受試者施用含有P2Y受體拮抗劑的藥物組合物，P2Y受體拮抗劑的量可有效促進(jìn)與水腫性視網(wǎng)膜疾病有關(guān)的視網(wǎng)膜內(nèi)和視網(wǎng)膜下空間中病態(tài)液體累積的去除。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述視網(wǎng)膜疾病是視網(wǎng)膜剝離或視網(wǎng)膜水腫。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述水腫性視網(wǎng)膜疾病選自糖尿病黃斑水腫、年齡相關(guān)的黃斑變性、中心性漿液性視網(wǎng)膜病和黃斑水腫。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其中，所述黃斑水腫起因于葡萄膜炎、中央和分支靜脈阻塞、視網(wǎng)膜色素變性、中心性漿液性視網(wǎng)膜病、CMV視網(wǎng)膜炎或脈絡(luò)膜黑色素瘤。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，施用了所述P2Y受體拮抗劑被以使玻璃體內(nèi)濃度范圍為1微摩爾至500微摩爾。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述P2Y受體拮抗劑是具有結(jié)構(gòu)式I的二核苷酸多磷酸化合物結(jié)構(gòu)式I 其中X是氧、亞甲基、二鹵亞甲基或亞氨；n＝0，1或2；m＝0，1或2；n+m＝0，1，2，3或4；Z＝OH或H；Z’＝OH或H；Y＝OH或H；Y’＝OH或H；和B和B’各自獨(dú)立為如結(jié)構(gòu)式Ia或Ib所定義的嘌呤殘基或嘧啶殘基，分別通過9-或1-位連接；結(jié)構(gòu)式Ia 其中R1是氫、氯、氨基、單取代的氨基、二取代的氨基、烷基硫代、芳基硫代或烷芳基硫代，其中硫上的取代基含有最多20個(gè)不飽和或飽和的碳原子；R2是羥基、鏈烯基、氧代、氨基、巰基、硫酮、烷基硫代、芳基硫代、烷芳基硫代、?；虼⑼檠趸?、芳氧基、芳烷氧基、酰氧基、單取代的烷基氨基、雜環(huán)基、單取代的環(huán)烷基氨基、單取代的芳烷基氨基、單取代的芳基氨基、二芳烷基氨基、二芳基氨基、二烷基氨基、?；被蚨；被?，Rx是O、H或缺少；R2和Rx可任選地一起形成1，N6-乙烯腺嘌呤衍生物的五元稠合咪唑環(huán)，乙烯部分的4-或5-位被如下定義的烷基、芳基或芳烷基部分任意取代；R3是如下定義的氫、疊氮、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、烷基硫代、芳基硫代或烷芳基硫代；或是T(C1-6烷基)OCONH(C1-6烷基)W，其中T和W獨(dú)立為氨基、巰基、羥基或羧基；或是它們藥學(xué)上可接受的酯、酰胺或鹽；或者缺少；J是碳或氮，條件是當(dāng)J是氮時(shí)，R3不出現(xiàn)；其中，所述烷基是直鏈、支鏈或環(huán)狀的；其中，所述芳基可任選地被低級(jí)烷基、芳基、氨基、單-或二烷基氨基、NO2、N3、氰基、羧基、酰胺基、亞磺酰氨基、磺酸、磷酸鹽或鹵素基團(tuán)取代；結(jié)構(gòu)式Ib 其中R4是羥基、氧代、巰基、硫酮、氨基、氰基、C7-12芳基烷氧基、C1-6烷基硫代、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基或二C1-4烷基氨基，其中所述烷基可任選地連接形成雜環(huán)；R5是氫、?；?、苯甲?；?、C1-6烷基、C1-5烷酰基、芳酰基或缺少；R6是羥基、氧代、巰基、硫酮、C1-4烷氧基、C7-12芳基烷氧基、C1-6烷基硫代、S-苯基、芳基硫代、芳基烷基硫代、三唑基氨基、C1-6烷基氨基、C1-5雙取代的氨基、或二-C1-4烷基氨基，其中所述二烷基可任選地連接形成雜環(huán)或連接形成取代的環(huán)，如嗎啉環(huán)、吡咯環(huán)等；或者R5和R6一起在嘧啶環(huán)的3和4位之間形成3，N4-乙烯胞嘧啶衍生物的五元稠合咪唑環(huán)，其中所述乙烯部分在4-或5-位被C1-4烷基、苯基或苯氧基任意取代；其中所述C1-4烷基、苯基或苯氧基至少一個(gè)氫被選自以下基團(tuán)的部分任意取代，這些基團(tuán)是鹵素、羥基、C1-4烷氧基、C1-4烷基、C6-10芳基、C7-12芳基烷基、羧基、氰基、硝基、亞磺酰氨基、磺酸鹽、磷酸鹽、磺酸、氨基、C1-4烷基氨基和二-C1-4烷基氨基，其中所述二烷基可任選地連接形成雜環(huán)；R7選自氫、羥基、氰基、硝基、C1-6烷基或苯基；取代的C2-8炔基、鹵素、取代的C1-4烷基、CF3、C2-3鏈烯基、C2-3炔基、丙烯氨基、溴乙烯、乙基丙烯酸鹽或丙烯酸和C2-8鏈烯基；或者R6和R7一起形成5或6元通過R6的N或O或S連接的飽和或不飽和的環(huán)，該環(huán)任意含有本身具有官能度的取代基；以及R8選自氫、氨基、二-C1-4烷基氨基、C1-4烷氧基、C7-12芳基烷氧基、C1-4烷基硫代、C7-12芳基烷基硫代、羧酰胺甲基、羧甲基、甲氧基、硫代甲基、苯氧基和硫代苯基。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中，所述通式I的二核苷酸多磷酸是選自P3-二(尿苷5’-)三磷酸；P1-(胞苷5’)-P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1，P3-二(腺苷5’-)三磷酸；P1-(腺苷5’)-P3-(尿苷5’)三磷酸；P1-(腺苷5’)-P3-(胞苷5’)三磷酸；P1，P3-二(乙烯腺苷)三磷酸；P1-(尿苷5’)-P3-(胸苷5’)三磷酸；P1-(腺苷5’)-P3-(肌苷5’)三磷酸；P1，P3-二(尿苷5’-)P2，P3-亞甲基三磷酸；P1，P3-二(尿苷5’-P2，P3-二氟亞甲基三磷酸)；P1，P3-二(尿苷5’-P2，P3-亞氨三磷酸)；P1，P3-二(4-硫代尿苷5’-三磷酸)；P1，P3-二(3，N4-乙烯胞苷5’-)三磷酸；P1，P3-二(咪唑[1，2-c]嘧啶-5(6H)-酮-2-(3-硝基)-苯基-6-β-D-呋喃核糖5’-)三磷酸，四銨鹽；P1-(肌苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(胞苷β-D-呋喃阿拉伯糖5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(尿苷5’-)P3-(黃苷5’-)三磷酸；P1-(2’-脫氧尿苷5’-)-P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(3’-疊氮-3’-脫氧胸苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1，P3-二(3’-疊氮-3’-脫氧胸苷5’-)三磷酸；P1，P3-二(3’-疊氮-3’-脫氧胸苷5’-)三磷酸；2’(3’)-苯甲酰-P1，P3-二(尿營(yíng)5’-)三磷酸；P1，P3-二(2’，3’)-苯甲酰尿苷5’-)三磷酸；P1-(2’-脫氧鳥苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(2’-脫氧腺苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(2’-脫氧肌苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(2’-脫氧胞苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(8-氮雜腺苷-5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(6-巰基嘌呤核苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸；P1-(6-巰基嘌呤核苷5’-)P3-(2’-脫氧尿苷5’-)三磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P3-(阿拉伯糖胞苷5’-)三磷酸；P1-(腺苷5’-)P3-(4-硫代甲基尿苷5’-)三磷酸；P1-(2’-脫氧腺苷5’-)P3-(6-硫代己基嘌呤核苷5’-)三磷酸和P1-(6-二十烷氧基嘌呤核苷5’-)P3-(尿苷5’-)三磷酸的二核苷酸三磷酸。
8.如權(quán)利要求6所述的方法，其中，所述通式I的二核苷酸多磷酸是選自P1-(尿苷5’-)P2-(4-硫代尿苷5’-)二磷酸；P1，P5-二(尿苷5)-五磷酸和P1，P6-二(尿苷5)-六磷酸的化合物。
9.如權(quán)利要求6所述的方法，其中，所述通式I的二核苷酸多磷酸是選自P1，P4-二(尿苷5’-)四磷酸；P1-(胞苷5’)-P4-(尿苷5’)四磷酸；P1，P4-二(腺苷5’-)四磷酸；P1-(腺苷5’)-P4-(尿苷5’)四磷酸；P1-(腺苷5’)-P4-(胞苷5’)四磷酸；P1，P4-二(乙烯腺苷)四磷酸；P1-(尿苷5’)-P4-(胸苷5’)四磷酸；P1-(腺苷5’)-P4-(肌苷5’)四磷酸；P1，P4-二(尿苷5’-)P2，P3-亞甲基四磷酸；P1，P4-二(尿苷5’-P2，P3-二氟亞甲基四磷酸)；P1，P4-二(尿苷5’-P2，P3-亞氨四磷酸)；P1，P4-二(4-硫代尿苷5’-四磷酸)；P1，P4-二(3，N4-乙烯胞苷5’-)四磷酸；P1，P4-二(咪唑[1，2-c]嘧啶-5(6H)-酮-2-(3-硝基)-苯基-6-β-D-呋喃核糖5’-)四磷酸，四銨鹽；P1-(肌苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(胞苷β-D-呋喃阿拉伯糖5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(尿苷5’-)P4-(黃苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧尿苷5’-)-P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(3’-疊氮-3’-脫氧胸苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1，P4-二(3’-疊氮-3’-脫氧胸苷5’-)四磷酸2P4；P1，P4-二(3’-疊氮-3’-脫氧胸苷5’-)四磷酸；2’(3’)-苯甲酰-P1，P4-二(尿苷5’-)四磷酸；P1，P4-二(2’，3’)-苯甲酰尿苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧鳥苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧腺苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧肌苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧胞苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(8-氮雜腺苷-5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(6-巰基嘌呤核苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(6-巰基嘌呤核苷5’-)P4-(2’-脫氧尿苷5’-)四磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P4-(阿拉伯糖胞苷5’-)四磷酸；P1-(腺苷5’-)P4-(4-硫代甲基尿苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧腺苷5’-)P4-(6-硫代己基嘌呤核苷5’-)四磷酸以及P1-(6-二十烷氧基嘌呤核苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸的二核苷酸四磷酸。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述P2Y受體拮抗劑和用于治療水腫性視網(wǎng)膜疾病的初步處理或佐劑一起施用。
11.如權(quán)利要求10所述的方法，其中，所述初步處理選自手術(shù)、格柵(grid)和病灶激光光凝術(shù)以及藥物療法。
12.如權(quán)利要求11所述的方法，其中，所述手術(shù)選自鞏膜扣帶術(shù)、充氣性視網(wǎng)膜固定術(shù)、玻璃體切割術(shù)和黃斑易位。
13.如權(quán)利要求11所述的方法，其中，所述藥物療法選自皮質(zhì)類固醇、碳酸酐酶抑制劑、消炎劑以及可促進(jìn)與玻璃體和視網(wǎng)膜連接的膠原組織和纖維組織消化的藥物。
14.如權(quán)利要求6所述的方法，其中，所述二核苷酸多磷酸化合物被制備在選自水性、凝膠、類凝膠和固體制劑的制劑中。
15.如權(quán)利要求14所述的方法，其中，所述凝膠或類凝膠制劑選自O(shè)E透明質(zhì)酸、和批準(zhǔn)可供眼內(nèi)手術(shù)應(yīng)用的含有透明質(zhì)酸的制劑。
16.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述施用是所述藥物組合物經(jīng)由攜帶賦形劑的局部施用，所述賦形劑選自液滴、洗液、凝膠、軟膏、噴霧和脂質(zhì)體。
17.如權(quán)利要求16所述的方法，其中，所述局部施用包括通過一種裝置將所述藥物組合物灌輸進(jìn)所述眼表面，所述裝置選自泵-導(dǎo)管系統(tǒng)、連續(xù)或選擇性釋放裝置和隱性眼鏡。
18.如權(quán)利要求1所述的方式，其中，所述施用是所述藥物組合物的全身施用。
19.如權(quán)利要求18所述的方法，其中，所述藥物組合物的全身施用是通過鼻滴、鼻噴霧或霧化的液體將液體或液體懸液施用到所述受試者的口或鼻咽通氣管，或者以口服形式、注射形式或栓劑形式給所述受試者用藥，或?qū)λ鍪茉囌呤┯媚z、乳膏、粉末、泡沫、晶體、脂質(zhì)體、噴霧或液體懸液形式的內(nèi)操作(intra-operative)滴注物，這樣治療有效量的所述化合物便通過全身吸收和循環(huán)與所述受試者的眼組織接觸。
20.如權(quán)利要求18所述的方法，其中，所述藥物組合物的全身施用是通過施用可注射形式的所述化合物實(shí)現(xiàn)的，這樣治療有效量的所述化合物便通過全身吸收和循環(huán)與所述受試者的眼組織接觸。
21.如權(quán)利要求20所述的方法，其中，所述藥物組合物是通過注射進(jìn)玻璃體或推注，通過在玻璃體內(nèi)持續(xù)灌輸，通過持續(xù)釋放進(jìn)玻璃體腔，通過眼球后結(jié)膜下注射、釋放或灌輸，通過穿過鞏膜(transcleral)注射，通過持續(xù)穿過鞏膜釋放或灌輸，通過眼表面滴注或通過急性或慢性注射或灌輸向所述受試者施用的。
22.如權(quán)利要求21所述的方法，其中，所述對(duì)玻璃體的注射是以50-100微升的注射體積進(jìn)行一次或多次玻璃體內(nèi)注射。
23.如權(quán)利要求21所述的方法，其中，所述P2Y受體拮抗劑以每只眼睛0.10-4.0毫克的量施用。
24.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述藥物組合物被含在眼制劑內(nèi)施用，所述眼制劑含有有效量的所述P2Y受體拮抗劑，或其藥學(xué)上可接受的鹽，以及生理上適用的賦形劑，所述賦形劑選自電介質(zhì)水溶液、聚醚、聚乙烯、丙烯酸的聚合物、羊毛脂和糖胺聚糖；其中所述制劑可促進(jìn)與水腫性視網(wǎng)膜疾病有關(guān)的視網(wǎng)膜下和視網(wǎng)膜空間中病態(tài)液體的去除。
25.具有結(jié)構(gòu)式I的化合物 其中X是氧、亞甲基、二鹵亞甲基或亞氨；n＝0，1或2；m＝0，1或2；n+m＝0，1，2，3或4；Z＝OH或H；Z’＝OH或H；Y＝OH或H；Y’＝OH或H；和B和B’各自獨(dú)立為如結(jié)構(gòu)式Ia或Ib所定義的嘌呤殘基或嘧啶殘基，分別通過9-或1-位連接；結(jié)構(gòu)式Ia 其中R1是氫、氯、氨基、單取代的氨基、二取代的氨基、烷基硫代、芳基硫代或烷芳基硫代，其中硫上的取代基含有最多20個(gè)不飽和或飽和的碳原子；R2是羥基、鏈烯基、氧代、氨基、巰基、硫酮、烷基硫代、芳基硫代、烷芳基硫代、?；虼?、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、酰氧基、單取代的烷基氨基、雜環(huán)基、單取代的環(huán)烷基氨基、單取代的芳烷基氨基、單取代的芳基氨基、二芳烷基氨基、二芳基氨基、二烷基氨基、?；被蚨；被琑x是O、H或缺少；R2和Rx可任選地一起形成1，N6-乙烯腺嘌呤衍生物的五元稠合咪唑環(huán)，乙烯部分的4-或5-位被如下定義的烷基、芳基或芳烷基部分任意取代；R3是如下定義的氫、疊氮、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、烷基硫代、芳基硫代或烷芳基硫代；或是T(C1-6烷基)OCONH(C1-6烷基)W，其中T和W獨(dú)立為氨基、巰基、羥基或羧基；或是它們藥學(xué)上可接受的酯、酰胺或鹽；或者缺少；J是碳或氮，條件是當(dāng)J是氮時(shí)，R3不出現(xiàn)；其中，所述烷基是直鏈、支鏈或環(huán)狀的；其中，所述芳基可任選地被低級(jí)烷基、芳基、氨基、單-或二烷基氨基、NO2、N3、氰基、羧基、酰胺基、亞磺酰氨基、磺酸、磷酸鹽或鹵素基團(tuán)取代；結(jié)構(gòu)式Ib 其中R4是羥基、氧代、巰基、硫酮、氨基、氰基、C7-12芳基烷氧基、C1-6烷基硫代、C1-6烷氧基、C1-6烷基氨基或二C1-4烷基氨基，其中所述烷基可任選地連接形成雜環(huán)；R5是氫、?；?、苯甲?；1-6烷基、C1-5烷?；⒎减；蛉鄙?；R6是羥基、氧代、巰基、硫酮、C1-4烷氧基、C7-12芳基烷氧基、C1-6烷基硫代、S-苯基、芳基硫代、芳基烷基硫代、三唑基氨基、C1-6烷基氨基、C1-5雙取代的氨基、或二-C1-4烷基氨基，其中所述二烷基可任選地連接形成雜環(huán)或連接形成取代的環(huán)，如嗎啉環(huán)、吡咯環(huán)等；或者R5和R6一起在嘧啶環(huán)的3和4位之間形成3，N4-乙烯胞嘧啶衍生物的五元稠合咪唑環(huán)，其中所述乙烯部分在4-或5-位被C1-4烷基、苯基或苯氧基任意取代；其中所述C1-4烷基、苯基或苯氧基至少一個(gè)氫被選自以下基團(tuán)的部分任意取代，這些基團(tuán)是鹵素、羥基、C1-4烷氧基、C1-4烷基、C6-10芳基、C7-12芳基烷基、羧基、氰基、硝基、亞磺酰氨基、磺酸鹽、磷酸鹽、磺酸、氨基、C1-4烷基氨基和二-C1-4烷基氨基，其中所述二烷基可任選地連接形成雜環(huán)；R7選自氫、羥基、氰基、硝基、C1-6烷基或苯基；取代的C2-8炔基、鹵素、取代的C1-4烷基、CF3、C2-3鏈烯基、C2-3炔基、丙烯氨基、溴乙烯、乙基丙烯酸鹽或丙烯酸和C2-8鏈烯基；或者R6和R7一起形成5或6元通過R6的N或O或S連接的飽和或不飽和的環(huán)，該環(huán)任意含有本身具有官能度的取代基；以及R8選自氫、氨基、二-C1-4烷基氨基、C1-4烷氧基、C7-12芳基烷氧基、C1-4烷基硫代、C7-12芳基烷基硫代、羧酰胺甲基、羧甲基、甲氧基、硫代甲基、苯氧基和硫代苯基；條件是當(dāng)R8是氨基或取代的氨基時(shí)，R7是氫；以及結(jié)構(gòu)式I的呋喃糖部分選自3’-脫氧呋喃核糖基、2’，3’-雙脫氧呋喃核糖基、呋喃阿拉伯糖基、3’-脫氧呋喃阿拉伯糖基、呋喃木糖基、2’-多于呋喃木糖基和呋喃來蘇糖基。
26.選自P1-(6-巰基嘌呤核苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(6-巰基嘌呤核苷5’-)P4-(2’-脫氧尿苷5’-)四磷酸；P1-(4-硫代尿苷5’-)P4-(阿拉伯糖胞苷5’-)四磷酸；P1-(2’-脫氧腺苷5’-)P4-(6-硫代己基嘌呤核苷5’-)四磷酸；P1-(6-二十烷氧基嘌呤核苷5’-)P4-(尿苷5’-)四磷酸；P1-(阿拉伯糖腺苷5’)P4-(尿苷-5’-)四磷酸；P1-(呋喃來蘇糖基胸苷5’)P4-(尿苷-5’-)四磷酸和P1-(呋喃來蘇糖基尿嘧啶-5’-)P4-(尿苷-5’-)四磷酸的化合物。
全文摘要
本發(fā)明提供了治療水腫性視網(wǎng)膜疾病的方法。所述方法包括施用含有P2Y受體拮抗劑的藥物組合物以促進(jìn)將視網(wǎng)膜下和視網(wǎng)膜空間中病態(tài)的外來液體除去，從而減少與視網(wǎng)膜剝離和視網(wǎng)膜疾病有關(guān)的所述液體的累積。上述P2Y受體拮抗劑可以和通常用于治療水腫性視網(wǎng)膜疾病的治療劑和佐劑一起施用。所述對(duì)本發(fā)明有效的藥物組合物含有對(duì)胞外水解有增強(qiáng)抗性的P2Y受體激動(dòng)藥，如二核苷酸多磷酸化合物。
文檔編號(hào)A61P9/10GK1575181SQ02804303
公開日2005年2月2日 申請(qǐng)日期2002年1月29日 優(yōu)先權(quán)日2001年1月30日
發(fā)明者W·M·彼德森, B·R·葉爾克薩 申請(qǐng)人:印斯拜爾藥品股份有限公司