專利名稱：湖北貝母總生物堿制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥有效成分的制備工藝，具體涉及湖北貝母總生物堿的制備工藝。
背景技術(shù)：
湖北貝母為百合科貝母屬植物湖北貝母(Fritillaria Hupehensis Hsiaoet K.C.Hsia)的干燥鱗莖，微苦、涼，入肺、心經(jīng)，具有清熱潤肺、化痰止咳及散結(jié)之功效。湖北貝母鱗莖含多種異甾體類生物堿，主要有湖貝甲素、湖貝甲素甙、浙貝乙素、浙貝甲素、湖貝乙素、湖貝嗪、湖貝辛及湖貝啶等。藥理學(xué)研究表明，湖北貝母總生物堿是其生物活性有效部位。目前，湖北貝母總生物堿的提取工藝主要是有機溶劑提取法，即采用甲醇或無水乙醇熱回流提取，所得粗浸膏用適量酸水溶解，然后堿化酸水液至一定pH值，再用氯仿、乙酸乙酯等有機溶劑萃取，制備湖北貝母總生物堿。這種方法由于采用了易燃、易爆和毒性較大的有機溶劑，不僅生產(chǎn)成本高、環(huán)境污染嚴(yán)重，而且由于萃取過程中存在嚴(yán)重乳化現(xiàn)象，生產(chǎn)周期長，不利于工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的任務(wù)是提供一種湖北貝母總生物堿制備工藝，使其具有簡易、高效、低成本，且適宜工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點，以克服傳統(tǒng)制備工藝的不足。
本發(fā)明的技術(shù)方案依次包括藥材前處理、乙醇回流提取、濃縮、除雜、上柱純化和真空干燥等步驟，具體方法如下a.藥材前處理將湖北貝母進行干燥和破碎過篩，藥材干燥溫度為40～60℃，篩網(wǎng)目數(shù)為10～20目，得湖北貝母藥材粉末；b.乙醇回流提取將所得湖北貝母藥材粉末與3～6倍生藥材重量的水體積的濃度為30～70％的乙醇混合，常壓下回流提取2～4次，每次乙醇回流提取時間為30～120分鐘，過濾后收集并合并濾液；c.濃縮將所得濾液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上，在70℃下減壓濃縮6～8小時，以除去乙醇并濃縮至1/4倍生藥材重量的水的體積，得濃縮液；d.除雜在所得濃縮液中加入1/4倍生藥材重量的濃度為2％的鹽酸和相當(dāng)于2.4～4.8％生藥材重量的硅藻土，充分?jǐn)嚢?5分鐘，過濾，收集濾液和殘渣，殘渣繼續(xù)用2％的鹽酸溶液洗滌兩次，每次酸水的用量為1/4倍生藥材重量的水體積，合并以上三次濾液；e.上柱純化采用5％氫氧化鈉堿化上一步驟所得濾液，即用5％氫氧化鈉將濾液的pH值調(diào)至7.0～9.0之間，然后以每小時1～4倍樹脂床體積的速度流過大孔吸附樹脂，所用樹脂的重量為生藥材重量的1/3～1/6，然后用6～10倍樹脂床體積的蒸餾水以相同速度流過樹脂，除去無機鹽和水溶性雜質(zhì)，再用3～5倍樹脂床體積的濃度為20％～50％的乙醇溶液以相同速度進行洗脫，除去部分極性大的雜質(zhì)，最后采用5～10倍樹脂床體積的濃度為80％～90％的乙醇溶液以相同速度流過大孔吸附樹脂，將樹脂上吸附的生物堿洗脫下來，收集該部分洗脫液并濃縮至流浸膏；f.真空干燥將所得流浸膏置于50℃～60℃真空干燥箱中干燥，干燥后的固體被粉碎后即得到湖北貝母總生物堿成品。
本發(fā)明的制備工藝適合湖北貝母總生物堿的制備。本發(fā)明的工藝在藥材提取流程中采用了30％～70％乙醇水溶液作為提取溶劑，一方面保證了湖北貝母總生物堿的完全提取，另一方面可避免貝母藥材中過多的脂溶性雜質(zhì)和淀粉被帶到提取液中，影響后續(xù)操作。對提取液適度濃縮再用2％鹽酸水溶液酸化處理，并加入硅藻土助濾，既縮短了生產(chǎn)周期，又減少了湖北貝母生物堿中某些成分因與強酸長時間接觸而分解的程度。酸水液堿化至適當(dāng)pH值后，用大孔吸附樹脂分離純化，避免了貝母生物堿提取工藝中氯仿、乙酸乙酯等有機溶劑的使用，同時又提高了成品中生物堿的含量，改善了成品性狀。
將本發(fā)明工藝提取的湖北貝母總生物堿與傳統(tǒng)有機溶劑萃取工藝所得總生物堿化學(xué)成分經(jīng)薄層色譜對照，顯示采用大孔吸附樹脂分離純化所得樣品與傳統(tǒng)有機溶劑萃取工藝所得總生物堿中各個化學(xué)成分Rf值相同，表明采用本發(fā)明方法制備的湖北貝母總生物堿與傳統(tǒng)有機溶劑萃取工藝方法所得總生物堿的化學(xué)成分一致(見圖2)。本發(fā)明方法生產(chǎn)的湖北貝母總生物堿可用于藥品生產(chǎn)。


圖1為本發(fā)明湖北貝母總生物堿制備工藝流程圖。
圖2為本發(fā)明工藝提取的湖北貝母總生物堿與傳統(tǒng)有機溶劑萃取工藝所得總生物堿化學(xué)成分的薄層色譜對照圖，其展開劑為環(huán)己烷∶乙酸乙酯∶甲醇∶二乙胺6∶4∶0.2∶0.9；展開條件為二次展開，第一次8cm，第二次16cm；顯色劑為稀碘化鉍鉀試液；圖中編號部位對應(yīng)的樣品是1為湖貝甲素對照品，由同濟醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院天然藥化教研室提供，經(jīng)紅外圖譜(IR)、紫外圖譜(UV)、質(zhì)譜(MS)和核磁共振譜(NMR)鑒定；
2、3為40％乙醇除雜后的總堿；4、6為傳統(tǒng)工藝處理的總堿；5為浙貝甲素對照品，由同濟醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院天然藥化教研室提供，經(jīng)紅外圖譜(IR)、紫外圖譜(UV)、質(zhì)譜(MS)和核磁共振譜(NMR)鑒定；7、8為50％乙醇除雜后的總堿；9為浙貝乙素對照品，由同濟醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院天然藥化教研室提供，經(jīng)紅外圖譜(IR)、紫外圖譜(UV)、質(zhì)譜(MS)和核磁共振譜(NMR)鑒定。
該圖譜顯示采用大孔吸附樹脂分離純化所得樣品與傳統(tǒng)工藝(有機溶劑萃取)所得總生物堿中各個化學(xué)成分Rf值相同。這表明采用本發(fā)明制備所得湖北貝母總生物堿與傳統(tǒng)工藝(有機溶劑萃取)所得總生物堿化學(xué)成分的一致。
具體實施例方式
實施例1以湖北貝母1kg為原料，在60℃烘烤12小時后，破碎過20目篩，然后與4倍生藥材重量的水的體積的50％乙醇溶液混合，于水浴鍋上熱回流提取3次，每次提取1小時，過濾后收集并合并三次濾液。將濾液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上，于70℃下減壓濃縮6小時，得到250毫升濃縮液。將濃縮液與250毫升的2％鹽酸溶液混合后，加入24g硅藻土，充分?jǐn)嚢?5分鐘，過濾，收集濾液和殘渣。殘渣再用2％鹽酸溶液重復(fù)洗滌2次，先將殘渣與2％鹽酸溶液混合，攪拌5分鐘后，過濾。合并以上三次濾液。濾液用5％Na0H溶液堿化調(diào)節(jié)pH至8后，以每小時2倍樹脂床體積的速度流過D101大孔吸附樹脂，所用樹脂的重量為生藥材重量的1/5，然后用10倍樹脂床體積的蒸餾水以相同速度流過樹脂，再用5倍樹脂床體積的40％的乙醇溶液以相同速度進行洗脫，最后采用8倍樹脂床體積的90％的乙醇溶液以相同速度流過大孔吸附樹脂，將樹脂上吸附的生物堿洗脫下來，收集該部分洗脫液并濃縮；于50℃真空干燥箱中，干燥恒重后，得4.7673g淡黃色固體。精密稱取上述黃棕色固體粉末10mg，用酸性染料比色法測定總生物堿含量即純度為59％。
實施例2以湖北貝母1kg為原料，在60℃烘烤12小時后，破碎過20目篩，然后與4倍生藥材重量的水的體積的50％乙醇溶液混合，于水浴鍋上熱回流提取3次，每次提取1小時，過濾后收集并合并三次濾液。將濾液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上，于70℃下減壓濃縮6小時，得到250毫升濃縮液。將濃縮液與250毫升的2％鹽酸溶液混合后，加入24g硅藻土，充分?jǐn)嚢?5分鐘，過濾，收集濾液和殘渣。殘渣再用2％鹽酸溶液重復(fù)洗滌2次，先將殘渣與2％鹽酸溶液混合，攪拌5分鐘后，過濾。合并以上三次濾液。濾液用5％NaOH溶液堿化調(diào)節(jié)pH至8后，以每小時2倍樹脂床體積的速度流過D101大孔吸附樹脂，所用樹脂的重量為生藥材重量的1/5，然后用10倍樹脂床體積的蒸餾水以相同速度流過樹脂，再用5倍樹脂床體積的50％的乙醇溶液以相同速度進行洗脫，最后采用8倍樹脂床體積的90％的乙醇溶液以相同速度流過大孔吸附樹脂，將樹脂上吸附的生物堿洗脫下來，收集該部分洗脫液并濃縮；于50℃真空干燥箱中，干燥恒重后，得4.0739g淡黃色固體。精密稱取上述黃棕色固體粉末10mg，用酸性染料比色法測定總生物堿含量即純度為73％。
權(quán)利要求
1.一種湖北貝母總生物堿制備工藝，包括以下步驟a.將湖北貝母進行干燥和破碎過篩，得湖北貝母藥材粉末；b.將所得湖北貝母藥材粉末與3～6倍生藥材重量的水體積的濃度為30～70％的乙醇混合，常壓下回流提取2～4次，每次乙醇回流提取時間為30～120分鐘，過濾后收集并合并濾液；c.將所得濾液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上，在70℃下減壓濃縮6～8小時，以除去乙醇并濃縮至1/4倍生藥材重量的水體積，得濃縮液；d.在所得濃縮液中加入1/4倍生藥材重量的濃度為2％的鹽酸和相當(dāng)于2.4～4.8％生藥材重量的硅藻土，充分?jǐn)嚢?5分鐘，過濾，收集濾液和殘渣，殘渣繼續(xù)用2％的鹽酸溶液洗滌兩次，每次酸水的用量為1/4倍生藥材重量的水體積，合并以上三次濾液；e.采用5％氫氧化鈉堿化上一步驟所得濾液，然后以每小時1～4倍樹脂床體積的速度流過大孔吸附樹脂，所用樹脂的重量為生藥材重量的1/3～1/6，然后用6～10倍樹脂床體積的蒸餾水以相同速度流過樹脂，除去無機鹽和水溶性雜質(zhì)，再用3～5倍樹脂床體積的濃度為20％～50％的乙醇溶液以相同速度進行洗脫，除去部分極性大的雜質(zhì)，最后采用5～10倍樹脂床體積的濃度為80％～90％的乙醇溶液以相同速度流過大孔吸附樹脂，將樹脂上吸附的生物堿洗脫下來，收集該部分洗脫液并濃縮至流浸膏；f.將所得流浸膏置于50℃～60℃真空干燥箱中干燥即得湖北貝母總生物堿。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的湖北貝母總生物堿制備工藝，其特征在于步驟a中的藥材干燥溫度為40～60℃，破碎過篩的篩網(wǎng)目數(shù)為10～20目。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的湖北貝母總生物堿制備工藝，其特征在于所述的采用5％氫氧化鈉堿化濾液是將濾液的pH值調(diào)至7.0～9.0之間。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的湖北貝母總生物堿制備工藝，其特征在于所述的采用5％氫氧化鈉堿化濾液是將濾液的pH值調(diào)為8。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的湖北貝母總生物堿制備工藝，其特征在于所述的經(jīng)5％氫氧化鈉堿化后的濾液流過大孔吸附樹脂的速度為每小時2倍樹脂床體積的速度；所用樹脂的重量為生藥材重量的1/5。
6.用權(quán)利要求1至5之任一項所述的湖北貝母總生物堿制備工藝所生產(chǎn)的湖北貝母總生物堿在制備藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種湖北貝母總生物堿制備工藝，該工藝包括藥材前處理、乙醇回流提取、濃縮、除雜、上柱純化和真空干燥等步驟。其中乙醇回流提取步驟中采用了適當(dāng)濃度的含水乙醇作為提取溶劑，上柱純化步驟中采用了大孔吸附樹脂純化技術(shù)。該工藝避免了貝母生物堿提取工藝中氯仿、乙酸乙酯等有機溶劑的使用，提高了產(chǎn)品質(zhì)量，縮短了生產(chǎn)周期，適合工業(yè)生產(chǎn)。
文檔編號A61P11/10GK1796402SQ20041006147
公開日2006年7月5日 申請日期2004年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月30日
發(fā)明者吳繼洲 申請人:華中科技大學(xué)