專利名稱：土鱉蟲分部位提取物及免加熱提取工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥制劑技術(shù)，特別是土鱉蟲分部位提取物免加熱提取工藝。
背景技術(shù)：
土鱉蟲[Eupalyhaga sinensis]始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，歷代本草均有記載，是一種傳統(tǒng)常用中藥，應(yīng)用歷史悠久，臨床療效可靠，廣泛用于各種淤血癥，具有活血化瘀、攻堅破積、通經(jīng)止痛等功效。
化學成分分析土鱉蟲含有氨基酸至少有17種，其總量約占土鱉蟲的40％，谷氨酸最高，其次為丙氨酸、酪氨酸等、土鱉蟲氨基酸在活血化瘀療效中起著一定的作用[盧穎，北京中醫(yī)學院學報，1992，15(3)]。
土鱉蟲測出28種微量元素，其中與抗癌、抑癌作用有關(guān)的Mn和Mg含量較高，有益元素Fe含量較為豐富，在活血化瘀功效起到中藥作用。土鱉蟲含有脂肪酸17.63％，土鱉蟲不飽和脂肪酸能增強肌體的組織的再生能力和抗病力，土鱉蟲具有抗癌作用與此類活性物質(zhì)有關(guān)，土鱉蟲脂溶性成分中分離出膽甾醇、棕櫚酸和5，4′-二羥基-7-甲氧基黃酮，二十八烷醇，β-谷甾醇，十八烷基甘油醚(沙肝醇)[金向群，中國中藥雜志，1993，18(6)]，土鱉蟲還含有一種能激活血纖維蛋白溶酶原的蛋白質(zhì)成分(絲氨酸蛋白酶類)[李衛(wèi)星，生物化學與生物物理學報，1989，21(4)]。
藥理學研究表明土鱉蟲具有降壓作用，同時還證明其降壓作用不受擬或抗腎上腺素藥物的影響，則其作用與α-β受體無關(guān)[龍子江，安徽中醫(yī)學院學報，1989，8(3)]。
土鱉蟲浸膏對白血病患者的白細胞增多有抑制作用[李軍德，中成藥，1992，14(2)]。
土鱉蟲水浸12小時，煮沸20分鐘過濾濃縮至含生藥2g/ml，能顯著減少內(nèi)皮素的釋放與合成起到保護血管作用[于燕，土鱉蟲水提物對實驗性高脂血癥大鼠血管內(nèi)皮和內(nèi)皮素的影響，中國生化藥物雜志，2003，24(1)]。
土鱉蟲水均漿法提取，均漿液纖溶活性遠優(yōu)于水煎煮、醇回流提取液[殷書梅，土鱉蟲水提部位及有效分子量確定，中藥材，2002，25(2)]。
土鱉蟲采用石油醚回流提取脂肪油得率在17.63％，研究發(fā)現(xiàn)土鱉蟲亞油酸具有合成前列腺素的必須前體物質(zhì)功能，可轉(zhuǎn)化為前列腺素是類激素的物質(zhì)[許景娥，土鱉蟲脂類成分的研究，吉林中醫(yī)藥，1994，6]。
臨床研究應(yīng)用治療冠心病72例，有效率高于丹參[何得倫，中國現(xiàn)代醫(yī)藥科技，2003，3(5-6)]。
治療高血脂68例，有效率高于92.8％[丁汀，天津藥學，2003，15(1)]。
治療糖尿病并發(fā)癥27例有效率高于82.5％[張宏亮，陜西中醫(yī)，2003，35(10)]。
治療乳腺增生癥20例有效率高于90％[黃梅，新中醫(yī)，2003，35(3)]。
治療腰椎間盤突出癥120例其療效高于麝香止痛膏[蔣松鶴，江蘇中醫(yī)藥，2002，23(3)]。
治療尋常型銀屑病80例，治愈率40％，有效率82％[王雅娟，陜西中醫(yī)，2002，23(9)]。
治療胸腰椎骨折拌截癱59例，有效率達82.5％[薛民權(quán)，陜西中醫(yī)，2001，22(9)]。
治療膝關(guān)節(jié)增生性關(guān)節(jié)炎66例顯效率82.9％[陳建宗，成都中醫(yī)藥大學學報，2001，24(1)]。
治療子宮肌瘤30例，有效率100％[朱士伏，甘肅中醫(yī)，1997，10(1)]。
上述研究提示了土鱉蟲活血化瘀作用功效部位主要是水溶性物質(zhì)，而免疫調(diào)節(jié)抗突變抗腫瘤主要是脂溶性部位。
現(xiàn)有研究資料表明土鱉蟲的臨床用藥主要以全蟲入藥，而全蟲入藥存在突出的問題，如由于現(xiàn)有藥材收購方式是從養(yǎng)殖戶手中收購，由養(yǎng)殖戶完成初處理，分散多戶收購的土鱉蟲質(zhì)量出現(xiàn)多種差異，研究表明；采集7個批樣的土鱉蟲清潔度(土鱉蟲腸胃內(nèi)容物)16.8％，腸胃內(nèi)容物清理出多達17％[王小仙，中國中藥雜志，2003，28(10)]，土鱉蟲質(zhì)量問題除了腹內(nèi)含泥沙雜質(zhì)過多外，還存在炮制品發(fā)生霉變(主要背面或腹面環(huán)節(jié)處)[揚金玲，傳統(tǒng)醫(yī)藥，2003，12(8)]?，F(xiàn)有土鱉蟲入藥常以全蟲磨粉入藥用于中成藥制劑，為經(jīng)提取直接磨粉的制備方法不僅劑型體積大，而且衛(wèi)生要求難于符合質(zhì)量要求，也有采用全蟲與配方藥味混合煎煮的方式，有實驗表明含有多肽類、蛋白質(zhì)類物質(zhì)藥效成分藥物在加熱煎煮過程中失去活性，如，有研究表明動物類藥材在受熱條件下易失去活性的特點，如全蝎直接粉碎的鎮(zhèn)痛作用最強，水煎劑鎮(zhèn)痛作用消失[儲益平，不同工藝全蝎提取物鎮(zhèn)痛作用比較，南京中醫(yī)藥大學學報(自然科學版)2002，18(3)]本發(fā)明是要提供一種能避免藥效成分受熱破壞將土鱉蟲的水溶性和脂溶性成分分部位的提取方法。

發(fā)明內(nèi)容
免加熱提取工藝提取土鱉蟲的特點免加熱提取工藝將土鱉蟲分部位提取，提取過程避免蛋白質(zhì)類小分子多肽類物質(zhì)因受熱發(fā)生變性，避免亞油酸、4′-二羥基-7-甲氧基黃酮類物質(zhì)氧化。采用土鱉蟲配方制劑可根據(jù)處方的功能主治分別選用土鱉蟲有效部位從而提高藥品的療效。
本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的將新鮮土鱉蟲切碎浸泡在乙醇中，然后采用高速剪切器剪切，土鱉蟲藥材在乙醇中被高速剪切器剪切的過程中被剪、拉、壓的機械效應(yīng)使土鱉蟲組織被剪碎、細胞被壓裂，細胞壁通透性改變，由于能溶解脂溶性水溶性物質(zhì)的溶媒乙醇與土鱉蟲組織混合高速剪切的機械作用傳質(zhì)過程使脂溶性和水溶性物質(zhì)從土鱉蟲組織置換出來，然后用離心機分離固性物收集離心液，將離心液減壓≤100Pa、控溫≤36℃蒸餾回收乙醇，蒸餾至固性狀態(tài)，然后將蒸餾至固性狀態(tài)的提取物溶解于乙酸乙酯中，溶解后至低溫室冷藏析出沉淀物，將沉淀部分和上清液部分分離，將上清液減壓控溫蒸餾回收乙酸乙酯，回收乙酸乙酯后加入乙醇洗脫殘留乙酸乙酯，再減壓控溫蒸餾至干燥即得鮮土鱉蟲脂溶性提取物。將低溫室冷藏析出沉淀物加入適量的乙醇洗脫殘留乙酸乙酯再減壓控溫蒸餾至干燥即鮮土鱉蟲水溶性提取物，采用鮮土鱉蟲原料減少了鮮土鱉蟲原料干燥過程造成的活性成分破壞，提取過程控溫≤36℃避免了提取工藝加熱引起生物活性破壞。
實施例1第一步取鮮土鱉蟲10公斤。
第二步絞切式切碎(切碎至小于5MM長度)。
第三步浸泡于100升含乙醇50～75％(最佳的比例為65％)混合溶液中。
第四步液態(tài)下剪切機剪切至固性物通過《藥典》規(guī)定的5號篩。
第五步離心機分離固性物、取離心液。
第六步將離心液減壓蒸餾(減壓至≤100Pa、控溫≤36℃)，回收乙醇；蒸除混合溶液中的部分水分，蒸餾至固體。
第七步將蒸餾至固體的提取物加入適量乙酸乙酯，混合后攪拌60分鐘。
第八步攪拌后的混合液將其置放在5℃環(huán)境冷沉(析出乙酸乙酯不溶物使之沉淀)24小時。
第九步將冷沉后的上清液和沉淀物分開。
第十步將上清液減壓蒸餾回收乙酸乙酯(減壓至100Pa、控溫≤36℃)，蒸餾至固體后加入2升95％乙醇洗脫殘留乙酸乙酯，再減壓蒸餾至干燥即得鮮土鱉蟲脂溶性提取物。
第十一步將將冷沉后分出的沉淀物加入2升95％乙醇洗脫殘留乙酸乙酯，再減壓蒸餾(減壓至≤100Pa、控溫≤46℃)蒸干乙醇和殘留水分即可收取鮮土鱉蟲水溶性提取物。
權(quán)利要求
1.土鱉蟲分部位提取物其特征在于水溶性部位、脂溶性部位。
2.按權(quán)利要求1所述土鱉蟲分部位提取物土鱉蟲分部位提取物及免加熱提取工藝，其特征在于原料為鮮土鱉蟲。
3.土鱉蟲分部位提取物及免加熱提取工藝，由剪切、乙醇混合溶液浸泡、液態(tài)粉碎、固液分離、減壓蒸餾至固體、乙酸乙酯溶解、冷沉析、分出沉淀物、減壓蒸餾回收乙酸乙酯、乙醇洗脫殘留乙酸乙酯、回收乙醇組成。
4.按權(quán)利要求3所述的土鱉蟲分部位提取物及免加熱提取工藝其特征在于鮮土鱉蟲置液態(tài)剪切。
5.按權(quán)利要求3所述的土鱉蟲分部位提取物及免加熱提取工藝，其特征在于混合溶液乙醇含量為65％。
6.按權(quán)利要求3所述的土鱉蟲分部位提取物及免加熱提取工藝，其特征在于減壓蒸餾減壓至≤100Pa、控溫≤36℃，回收乙醇。
7.按權(quán)利要求3所述的土鱉蟲分部位提取物及免加熱提取工藝，其特征在于濃縮固性物加入乙酸乙酯溶解、作冷沉析。
8.按權(quán)利要求7所述的土鱉蟲分部位提取物及免加熱提取工藝，冷沉環(huán)境控溫2～5℃。
9.按權(quán)利要求3所述的土鱉蟲分部位提取物及免加熱提取工藝，其特征在于將冷沉析出上清液減壓蒸餾回收乙酸乙酯，減壓100Pa、控溫≤40℃。
10.按權(quán)利要求3所述的土鱉蟲分部位提取物及免加熱提取工藝，其特征在于乙醇洗脫殘留乙酸乙酯。
全文摘要
本發(fā)明公開了土鱉蟲分部位提取物免加熱提取工藝提取鮮土鱉蟲的技術(shù)方案，以鮮品土鱉蟲為原料，乙醇浸泡、液態(tài)剪碎、固液分離、減壓蒸餾控溫濃縮至固體、乙酸乙酯溶解、冷沉析、分出沉淀物，減壓蒸餾控溫回收乙酸乙酯，洗脫乙酸乙酯，減壓蒸餾控溫蒸干洗脫劑至干燥全過程避免加熱影響。
文檔編號A61P29/00GK1754544SQ200410079090
公開日2006年4月5日 申請日期2004年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月30日
發(fā)明者鄧昌滬 申請人:廈門今潤醫(yī)藥科學開發(fā)有限公司