專利名稱：用于治療急、慢性肝病的恩替卡韋鉀及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及恩替卡韋的鉀鹽化合物以及其制備方法和其在醫(yī)藥上的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
恩替卡韋(Entecavir)是一種2′-戊環(huán)脫氧鳥嘌呤核苷類似物，恩替卡韋是一種手性化合物，其中[1s-(1α，3α，4β)]構(gòu)象體具有極強(qiáng)的抗乙型肝炎病毒能力，目前國外已有其原料藥及其制劑上市。恩替卡韋的分子結(jié)構(gòu)式如下 分子式C12H15N5O3。由于恩替卡韋的水溶解度很小，不利于口服制劑的制備和藥品生物利用度的提高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種具有良好水溶解性的恩替卡韋的衍生物，具體來說是恩替卡韋的鉀鹽化合物，這種恩替卡韋鉀相比恩替卡韋而言，應(yīng)具有更好的水溶性和藥學(xué)上的生物利用度。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種制備恩替卡韋鉀的方法，該方法具有簡(jiǎn)便，成本低廉，質(zhì)量穩(wěn)定等特點(diǎn)。
本發(fā)明還有一個(gè)目的是將本發(fā)明的恩替卡韋鉀作為原料藥，用于制備藥學(xué)上使用的注射劑如無菌粉針劑、凍干粉針劑、水針劑、大輸液；口服制劑如片劑、膠囊劑、口服液、緩控釋制劑、顆粒劑等。
本發(fā)明提供的恩替卡韋的鉀鹽化合物，具有以下分子結(jié)構(gòu)式
，分子式C12H14N5O3K·nH2O，n的取值范圍為0～6。
本發(fā)明的恩替卡韋鉀的制備方法包括下列步驟取一定量的恩替卡韋置于反應(yīng)瓶中，向其中加入5～20倍去離子水，再向其中滴加氫氧化鉀水溶液，使溶解并呈堿性，于攪拌下，向其中加入沉淀劑丙酮，便得恩替卡韋鉀沉淀物。抽濾，用丙酮洗滌，減壓干燥至恒重，即得恩替卡韋鉀。
本發(fā)明所提供的恩替卡韋鉀相比恩替卡韋而言，具有更好的水溶解性能，是一種理想的原料藥，以本發(fā)明恩替卡韋鉀為活性成分，以及含有一種或多種藥學(xué)上可接受的載體，按本領(lǐng)域已知方法制備，可用于制備藥劑學(xué)上使用的注射劑如無菌粉針劑、凍干粉針劑、水針劑、大輸液，口服制劑如片劑、膠囊劑、口服液、緩控釋制劑、顆粒劑等。片劑，膠囊劑，溶液劑，注射劑等，以滿足臨床使用上的各種需要?？捎糜诳挂倚透窝撞《?HBV-DNA)的治療。
本發(fā)明恩替卡韋鉀的水溶解性能試驗(yàn)如下稱取恩替卡韋鉀1g，加入去離子水10ml，在25℃下振搖，即得無色澄明的溶液，說明所得化合物易溶于水；同樣取恩替卡韋1g，置于容量瓶中加去離子水30ml，在25℃下振搖30min，仍有部分未溶解，由此可見，恩替卡韋鉀在水中的溶解度遠(yuǎn)大于恩替卡韋。
本發(fā)明恩替卡韋鉀的體外抗乙型乙肝病毒HBV-DNA的性能如下應(yīng)用能夠體外復(fù)制表達(dá)HBV轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株，從體外角度，對(duì)恩替卡韋鉀的抗HBV活性進(jìn)行試驗(yàn)。細(xì)胞株為轉(zhuǎn)染了HBV全基因組，能分泌HBV-DNA顆粒的人肝母瘤細(xì)胞系，采用檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液上清液中分泌型HBV-DNA滴度的改變是反映HBV-DNA復(fù)制的重要指標(biāo)。
1.細(xì)胞培養(yǎng)每組細(xì)胞用DMEM培養(yǎng)液培養(yǎng)，培養(yǎng)液加10％胎牛血清，0.03％谷氨酰氨，100U/ml青霉素，100u/ml鏈霉素，200μg/ml G418，置37℃，5.00％CO2孵箱中傳代培養(yǎng)，每4天傳代一次，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。
2.檢測(cè)原理及方法采用檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)液上清液中分泌型HBV-DNA滴度的改變是反映HBV-DNA復(fù)制的重要指標(biāo)；采用熒光定量PCR法測(cè)定。
3.實(shí)驗(yàn)分組及測(cè)定實(shí)驗(yàn)分三組，分別為恩替卡韋鉀組、恩替卡韋組、空白對(duì)照組，其中恩替卡韋鉀組采用含恩替卡韋鉀濃度為4.0nmol/L培養(yǎng)液培養(yǎng)；恩替卡韋組采用含恩替卡韋濃度為4.0nmol/L培養(yǎng)液培養(yǎng)；空白組采用常規(guī)培養(yǎng)液培養(yǎng)。
取各組同一時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)上清液，測(cè)定其HBV-DNA滴度含量數(shù)(拷貝/ml)，測(cè)定數(shù)值如下表 由上表數(shù)據(jù)可看出，恩替卡韋鉀組和恩替卡韋組相對(duì)于空白組，其對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的HBV-DNA病毒有極好的抑制作用，恩替卡韋鉀和恩替卡韋兩者抗HBV-DNA的活性相近，其中恩替卡韋鉀略優(yōu)于恩替卡韋。
下面通過實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明。應(yīng)該理解的是，本發(fā)明的實(shí)施例是用于說明本發(fā)明而不是對(duì)本發(fā)明的限制。根據(jù)本發(fā)明的實(shí)質(zhì)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的簡(jiǎn)單改進(jìn)都屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。除非另有說明，本發(fā)明中的百分?jǐn)?shù)是重量百分?jǐn)?shù)。
實(shí)施例一.恩替卡韋鉀及其制備方法取恩替卡韋5g，加去離子水30ml，加氫氧化鉀水溶液溶解，調(diào)節(jié)溶液的pH為12，在攪拌下加入丙酮約50ml，繼續(xù)攪拌30min后，靜置2小時(shí)，抽濾，將過濾沉淀物用丙酮洗滌2～3次后，在60℃下，真空干燥得到類白色固體粉末，即為恩替卡韋鉀。
實(shí)施例二.恩替卡韋鉀片劑的制備取實(shí)施例一中制備的恩替卡韋鉀0.5g，加入適量載體輔料(如淀粉，乳糖，聚乙烯吡咯烷酮，硬酯酸鎂等)，濕法制粒，烘干整粒后用壓片機(jī)制成1000片，每片含活性成分恩替卡韋鉀為0.5mg/粒，供口服使用。
實(shí)施例三.恩替卡韋鉀膠囊的制備取實(shí)施例一中制備的恩替卡韋鉀1g，加入適量載體輔料(如淀粉，乳糖，聚乙烯吡咯烷酮，硬酯酸鎂等)，濕法制粒，烘干后裝入1000?？招哪z囊中，使每粒含活性成份恩替卡韋鉀為1mg/粒，供口服使用。
實(shí)施例四.恩替卡韋鉀腸溶片劑的制備取實(shí)施例一中制備的恩替卡韋鉀0.5g，加入適量載體輔料(如淀粉，乳糖，聚乙烯吡咯烷酮，硬酯酸鎂等)，濕法制粒，整粒后用壓片機(jī)制成1000片，每片含活性成分恩替卡韋鉀為0.5mg/片，將該片用腸溶衣溶液包裹，即得規(guī)格為0.5mg/片恩替卡韋鉀腸溶片，供口服使用。(其中，包腸溶衣溶液可選用如下處方得包衣溶液鄰苯二甲醋酸纖維素10g，十八醇4.0g苯二甲酸二乙酯1.0ml，異丙醇40ml，丙酮45ml。)實(shí)施例五.恩替卡韋鉀注射用粉針劑的制備取恩替卡韋鉀水合物1g，甘露醇200g，加注射用水溶解并稀釋至2500ml，除菌過濾，無菌濾液灌裝至1000支7ml西林瓶中，按凍干粉針劑制備工藝進(jìn)行冷凍干燥，即可制成1000支注射用恩替卡韋鉀凍干粉針劑，每支含恩替卡韋鉀lmg。
權(quán)利要求
1.一種用于治療肝病的藥物恩替卡韋鉀，其具有以下分子結(jié)構(gòu)式 其中n為每分子恩替卡韋鉀所含結(jié)晶水的個(gè)數(shù)，n的取值范圍為0～6。
2.根據(jù)權(quán)力要求1所述的恩替卡韋鉀的制備方法，其特征是將恩替卡韋與含鉀的堿性化合物在水中進(jìn)行酸堿成鹽反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束再向體系中加入沉淀劑進(jìn)行沉淀析出，過濾、干燥，便可制得恩替卡韋鉀。
3.根據(jù)權(quán)力要求2的方法，其中所用的含鉀無機(jī)堿選自氫氧化鉀，碳酸鉀，醋酸鉀等中的一種或多種。
4.根據(jù)權(quán)力要求3的方法，其中所用的含鉀無機(jī)堿選自氫氧化鉀。
5.根據(jù)權(quán)力要求2的方法，其中所用的沉淀劑選用不溶解或微溶解恩替卡韋鉀的有機(jī)溶劑。
6.根據(jù)權(quán)力要求5的方法，其中所用的沉淀劑選自丙酮、乙酸乙酯，二氯甲烷等中的一種或多種。
7.根據(jù)權(quán)力要求2的方法，其中所用的沉淀劑選自丙酮。
8.根據(jù)權(quán)力要求1的恩替卡韋鉀用于制備預(yù)防和或治療急、慢性肝病的藥物用途。
9.一種用于預(yù)防和或治療急、慢性肝病的藥物組合物，其含有治療有效量的權(quán)利要求1的恩替卡韋鉀和可藥用輔料或者賦型劑，用于制備藥學(xué)上使用的注射劑如無菌粉針劑、凍干粉針劑、水針劑、大輸液，口服制劑如片劑、膠囊劑、口服液、緩控釋制劑、顆粒劑等。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于治療肝病的藥物恩替卡韋鉀，其具有以下分子結(jié)構(gòu)式，其中n為每分子恩替卡韋鉀所含結(jié)晶水的個(gè)數(shù)，n的取值范圍為0～6。本發(fā)明還提供了上述恩替卡韋鉀的制備方法其特征是將恩替卡韋與含鉀的堿性化合物在水中進(jìn)行酸堿成鹽反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束再向體系中加入沉淀劑進(jìn)行沉淀析出，過濾、干燥，便可制得恩替卡韋鉀。本發(fā)明方法制備的恩替卡韋鉀具有穩(wěn)定性高、溶解性好、療效確切、臨床使用方便等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)A61K31/519GK101054378SQ20061007308
公開日2007年10月17日 申請(qǐng)日期2006年4月13日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月13日
發(fā)明者邵長(zhǎng)青 申請(qǐng)人:邵長(zhǎng)青