專利名稱：：Vla-4拮抗劑的制作方法VLA-4拮抗劑
背景技術(shù)：
：VLA-4("極遲抗原-4";CD49d/CD29;或oc4卩l(xiāng))是在所有白細(xì)胞上表達(dá)的整聯(lián)蛋白，但除血小板和成熟嗜中性白細(xì)胞之外，包括樹狀細(xì)胞和巨p藍(lán)細(xì)胞樣細(xì)胞并且是這些細(xì)胞類型的細(xì)胞-細(xì)胞和細(xì)胞-基質(zhì)之間相互作用的關(guān)4建介質(zhì)。針對VLA-4的配體包括血管細(xì)胞粘著分子-l(VCAM-I),纖連細(xì)胞(FN)的CS-I結(jié)構(gòu)域，和基質(zhì)蛋白，骨橋蛋白。中性化抗-a4抗體或抑制VLA-4與其配體之間相互反應(yīng)的阻滯肽已經(jīng)被證實(shí)在預(yù)防和治療疾病的若干動脈才莫型中有效，所述疾病包括;肖除、多發(fā)性硬化癥，炎性腸病、多發(fā)性骨髓瘤和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。人源4匕單克隆^t體4元a4，natalizumab(Tysabn⑧，Elan/Biogen),已被證實(shí)在多發(fā)性硬化癥(D.H.Miller等，Mwo/MeJ/c,"e，348，15(2003))和克羅恩氏病(S.Ghosh等￡>g/"^/,A",ma/o/A^^,c,"e,348,23(2003))的治療中有效。還有數(shù)種VLA-4拮抗劑在早期臨床試驗中用于治療哞喘、關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化癥和克羅恩氏病。在使用natalizumab的早期臨床試驗中，觀察到淋巴細(xì)胞增多癥(阻滯VLA-4功能的一種替代性標(biāo)志)和>80%受體的占據(jù)。據(jù)報道證實(shí)小分子VLA-4拮抗劑在大鼠實(shí)驗室自身免疫性腦脊髓炎(EAE)試驗的功能活性，該試驗是皮下給藥后多發(fā)性硬化癥的一種動物模型(D.R.Leone等，丄P/mrm"co/.Ex/^T7^ra;.,305，1150(2003)。此4匕合物被證實(shí)誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞增多癥，并且具有緩慢的離解率(閉合-率)，導(dǎo)致攜帶VLA-4細(xì)胞上受體的占據(jù)明顯且持續(xù)。在此草案中描述了EAE才莫型中受體占據(jù)、淋巴細(xì)胞增多癥和功效之間呈正相關(guān)。G.Doherty等在歷oorga/7/cA/eiizcz皿/C72e脂:y/yy丄e"eM,13，1891(2003)中報到，一系列的異煙酰胺基-L-氨基苯基丙氨酸衍生物被證實(shí)與Jurkat細(xì)胞上的VLA-4之間具有緩慢的離解作用(off-rate)。然而，進(jìn)一步描述特征證明此化合物藥代動力學(xué)性質(zhì)非常差，例如低口服生物利用度，中等至高水平的血漿清除率并且短半衰期，使它不適合口服給藥。本發(fā)明的化合物是能夠獲得和維持受體占據(jù)足夠長的時間從而允許口服給藥的VLA-4的有效拮抗劑。發(fā)明概述本發(fā)明的取代的N-[N-(磺?；交?磺酰基-脯氨?；鵠-苯基丙氨酸衍生物是VLA-4整聯(lián)蛋白的拮抗劑并且有效治療、預(yù)防和抑制通過VLA-4-結(jié)合和細(xì)胞粘著和活化介導(dǎo)的疾病。此外，本發(fā)明的化合物證實(shí)VLA-4攜帶細(xì)胞的受體占據(jù)在口服給藥后顯著并且適合口服給藥和適合每天口服給藥1、2或3次。本發(fā)明還涉及含有此類化合物的組合物和使用此類化合物的治療方法。發(fā)明詳述本發(fā)明提供式I的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage8</formula>I或其藥學(xué)可接受鹽，其中X和Y獨(dú)立地選自(1)CV3烷基，(2)面素，和(3)Cw烷氧基；Z是N或N+0—;R'選自(l)氫，(2)C卜,。烷基，(3)-(Cw。烷基)-芳基，(4)-(Cw。烷基)-0-CV10烷基，(5)-(CVo烷基)-OC(0)-CV,。烷基，(6)-(Cw。烷基)-OC(0)-芳基，和(7)-(CV1Q烷基)-OC(O)O-Cw。烷基；其中烷基任選地被1-3個獨(dú)立選自Ra的取代基取代并且芳基任選地被1-3個獨(dú)立選自Rb的取代基取代；R"是氫或甲基；R3和R4獨(dú)立地選自(l)氫,(2)Cw。烷基，(3)-ORd，(4)-NRdRe,(5)-NRdS(〇)mRe,(6)-NRdC(0)Re，(7)-NRdC(0)ORe和(8)隱NRdC(0)NRdRe,其中烷基任選地被1-4個獨(dú)立選自Ra的取代基取代；或rs和W與它們所連的碳原子一起構(gòu)成含有0-2個附加雜原子的5-7員單環(huán)，所述附件雜原子選自O(shè)、S和N-Rh,該環(huán)任選地被1-4個獨(dú)立選自IT的取代基取代；r5選自(1)C^。烷基，和(2)芳基；R6選自(l)氫，(2)鹵素，和(3)-ORd;Ra選自(l)-ORd,(2)-NRdS(〇)mRe,(3)-N02,(4)卣素，(5)-S(0)mRd，(6)-SRd,(7)-S(0)2ORd,(8)-S(0)mNRdRe，(9)-NRdR￡，(10)-0(CRfRg)nNRdRe，(ll)-C(0)Rd，(12)-C〇2Rd，(13)-C〇2(CRfRg)nCONRdRe,(14)-OC(0)Rd，(15)-CN,(16)-C(0)NRdRe,(17)-NRdC(0)Re,(18)-OC(0)NRdR。，(19)-NRdC(0)ORe,(20)-NRdC(O)NRdRe，(21)-CRd(N-ORe)，(22)CF3，(23)-OCF3，(24)C^環(huán)烷基，和(25)雜環(huán)基；其中環(huán)烷基和雜環(huán)基任選地被1-3個獨(dú)立選自『的基團(tuán)取代；Rb選自(l)選自Ra的基團(tuán)，(2)Cw。烷基，(3)Cw。鏈烯基，(4)Cwo鏈炔基，("芳基，和(6)-(C^Q烷基)-芳基，其中烷基、鏈烯基、鏈炔基和芳基任選地被1-3個獨(dú)立選自ir的基團(tuán)取代；Re是(l)鹵素，(2)氨基，(3)羧基,(4)(:,_4烷基，(5)Ci-4烷氧基，(6)芳基，(7)-(C!-4烷基)-芳基，(8)羥基，(9)CF3,(10)OC(0)C,—4烷基，(ll)陽CN，和(12)-S02CV1()烷基；Rd和Re獨(dú)立選自氫、Cw。烷基、C^。鏈烯基，C^。鏈炔基，Cy和Cy畫C^。烷基，其中烷基、鏈烯基、鏈炔基和Cy任選地被1-4個獨(dú)立選自『的取代基取代；或Rd和Re與其所連的原子一起構(gòu)成含有0-2個附加雜原子的4-7員雜環(huán)，所述附加雜原子獨(dú)立地選自O(shè)、S和N-Rh;其中該環(huán)任選地被l-4個獨(dú)立選自IT的取代基取代；Rf和Rg獨(dú)立選自氫，Cw。烷基，Cy和Cy-Cw。烷基；或Rf和Rg與其所連的碳一起構(gòu)成含有0-2個雜原子的5-7員環(huán)，所述作用下獨(dú)立地選自氧、為乾和氮；Rh選自Rf和-C(O)Rf;Cy選自環(huán)烷基，雜環(huán)基，芳基和雜芳基；各個m獨(dú)立地是0、1或2;和各個n獨(dú)立地是l、2、3或4。在式I的一個實(shí)施方式中，X和Y之一是卣素并且另一選自鹵素，Cw烷基和Cw烷氧基。在此實(shí)施方式的一個子集中，X和Y之一是氯且另一是氯或曱氧基。在另一子集中X和Y分別是氯。在式I的另一實(shí)施方式中，R/是氫，Cw烷基，-(&-4烷基)0。(0)-&-4烷基，或-(Cm烷基)OC(O)-CM烷基。在一子集中W是氫，和在另一子集中W是CM烷基。在式I的另一實(shí)施方式中，W是氫，和R"是NRdRe。在式I的另一實(shí)施方式中，R^是NRdRe和R"是氫。式I的一個實(shí)施方式提供式Ia的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>或其藥學(xué)可接受鹽，其中Z是N或N'O一；R'選自氫，Cw。烷基，-(CV4烷基)-芳基，-(Cw烷基)-O-Cw烷基，和-(C烷基)-0(:(0)-&_4烷基；Rs選自C,—4烷基和苯基。式I的代表性化合物如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>其中Ri是H或乙基，和其藥學(xué)可接受鹽。式I的另一實(shí)施方式提供式Ib的化合物:Ib或其藥學(xué)可接受鹽，其中Z是N或N+〇—，R'是選擇的氫和C"烷基；Rs選自C^烷基和苯基；和W是氫和R"是NRdRe或R"是NRdRe和W是氫。在此實(shí)施方式的一個子集中，W或R"之一是氫并且RS或R"的另一者選自&-6烷基氨基,(33_6環(huán)烷基氨基和其中k是0-3。在此子集中，W或V之一是氫并且R或W的另一者選自環(huán)丁基氨基，叔丁基氨基和哌啶子基。另一方面，本發(fā)明提供一種預(yù)防或治療哺乳動物中通過細(xì)胞粘著介導(dǎo)的疾病、障礙、病癥或癥狀的預(yù)防或治療，該方法包括纟合該哺乳動物施用有效量的式I的化合物。此發(fā)明包括式I的化合物在制備用于治療哺乳動物中細(xì)胞粘著介導(dǎo)的疾病、障礙、病癥或癥狀的藥物中的應(yīng)用。在一實(shí)施方式中該疾病或病癥選自P孝喘，變應(yīng)性鼻炎，'艮性阻塞性肺病(COPD),多發(fā)性硬化癥，動脈粥樣硬化，炎性腸病，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，器官移植，急性白血病，和鐮狀細(xì)胞性貧血。另一方面本發(fā)明提供一種防止VLA-4在哺乳動物中作用的方法，該方法包括給該哺乳動物施用治療有效量的式I的化合物。本發(fā)明的另一方面提供一種藥物組合物，其中含有式I的化合物和藥學(xué)可4妄受載體。"烷基"，以及具有前綴"烷"的其他基團(tuán)，例如烷氧基、烷酰基，是指可以是直鏈或支鏈或其組合形式的碳鏈。烷基的實(shí)例包括甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，仲和叔丁基，戊基，己基，庚基，辛基，壬基等。"鏈烯基"是指含有至少一個碳-碳雙鍵的碳鏈，并且它可以是直鏈或支鏈或其組合形式。鏈烯基的實(shí)例包括乙烯基，烯丙基，異丙烯基，戊烯基，己烯基，庚烯基，l-丙烯基，2-丁烯基，2-甲基-2-丁烯基等。"鏈炔基"是指含有至少一個碳-碳叁鍵的碳鏈，并且它可以是直鏈或支鏈或其組合形式。鏈炔基的實(shí)例包括乙炔基，丙炔基，3-曱基-l-戊炔基，2-庚炔基等。"環(huán)烷基"是指單-或二環(huán)飽和碳環(huán)，其分別具有3-10個碳原子。該術(shù)語還包括與芳基稠合的連接點(diǎn)位于非芳香部分的單環(huán)。環(huán)烷基的實(shí)例包括環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，四氫萘基，十氫萘基，二氫茚基等。"芳基"是指只含有碳原子的單-或雙環(huán)芳香環(huán)。該術(shù)語還包括與單環(huán)環(huán)戊基或單環(huán)雜環(huán)基稠合且連接點(diǎn)位于芳族部分的芳基。芳基的實(shí)例包括苯基，萘基，二氫茚基，茚基，四氫萘基，2,3-二氫苯并呋喃基，二氫苯并吡喃基，1,4-苯并二U惡烷基等。"雜芳基"是指含有至少一個選自N、O和S的雜原子并且各個環(huán)含有5-6個原子的單-或雙環(huán)芳環(huán)。雜芳基的實(shí)例包括吡咯基，異鵬唑基，異p塞唑基，吡唑基，吡。定基，嚼、唑基，卩惡二唑基，p塞二唑基，p塞唑基，咪唑基，三唑基，四唑基，呋喃基，p塞p秦基，p塞p分基，嘧口定基，噠嗪基，吡漆基，苯并嚼、唑基，苯并噻唑基，苯并咪唑基，苯并呋喃基，苯并苯硫基，呋喃并(2,3-b)吡啶基，喹啉基，吲哚基，異喹啉基等。"雜環(huán)基"是指含有至少一個選自N、O和S的雜原子并且各個環(huán)具有3-10個原子且其中連接點(diǎn)位于非芳族部分上的單-或雙環(huán)飽和環(huán)。"雜環(huán)基"的實(shí)例包括吡咯烷基，哌啶基，哌。秦基，咪唑啉基，2,3-二氫呋喃并(2,3-b)吡啶基，苯并鵬。秦基，四氫喹啉基，四氫異喹啉基，二氫吲哚基等。該術(shù)語還包括非芳族的部分飽和的單環(huán)環(huán)，例如2-或4-吡啶酮經(jīng)氮連接或N-強(qiáng)度的-(1H,3H)-嘧啶-2,4-二酮(N-強(qiáng)度尿嘧啶)。"卣素"包括氟、氯、溴和碘。光學(xué)異構(gòu)體-非對映異構(gòu)體-幾何異構(gòu)體-互變異構(gòu)體式I的化合物含有一個或多個不對稱中心并且由此可能存在外消旋體和外消旋混合物，單一對映異構(gòu)體，非對映異構(gòu)體混合物和各個非對映異構(gòu)體。本發(fā)明包括式I化合物的所有異構(gòu)形式。本發(fā)明所述的一些化合物含有烯屬雙鍵，并且除非另外說明，包括E和Z兩種幾何異構(gòu)體。本文所述的一些化合物可能以不同的氫連接點(diǎn)存在，稱作互變異構(gòu)體。這樣的實(shí)例可以是酮及其烯醇形式，稱作酮基-烯醇互變異構(gòu)體。各個互變異構(gòu)體及其混合物屬于式I的化合物。式I的化合物可以分離成對映異構(gòu)體的非對映異構(gòu)體對，通過例如從適當(dāng)溶劑分級結(jié)晶的方法，所述溶劑例如MeOH或EtOAc或其混合物。由此得到的對映異構(gòu)體的對可以通過常規(guī)方法分離為單個立體異構(gòu)體，例如通過使用光學(xué)活性的胺作為拆分溶劑或在手性HPLC柱上?；蛘?，通式I或Ia的混合物的任何對映異構(gòu)體可以通過立體有擇合成利用光學(xué)純已知構(gòu)型的起始原料或試劑得到。術(shù)語"藥學(xué)可接受鹽"是指由藥學(xué)可接受無毒堿或酸制備的鹽，包括無機(jī)或有機(jī)堿和無機(jī)或有機(jī)酸。由無機(jī)堿衍生的鹽包括鋁、銨、鉤、銅、鐵、亞鐵、鋰、鎂、錳鹽、亞錳、鉀、鈉、鋅等。特別優(yōu)選銨、鉤、鎂、鉀和鈉鹽。由藥學(xué)可接受有機(jī)無毒堿衍生的鹽包括伯、仲和叔胺的鹽，取代的胺類包括天然取代胺類、環(huán)狀胺和堿性離子交換樹脂，例如精氨酸，甜菜堿，咖啡因，膽堿，N,N'-二千基亞乙基二胺，二乙胺，2-二乙基氨基乙醇，2-二甲基氨基乙醇，乙醇胺，乙二胺，N-乙基-嗎啉，N-乙基哌啶，葡糖胺，殼糖胺，組氨酸，hydrab胺，異丙基胺，賴氨酸，曱基葡糖胺，嗎啉，哌。秦，哌啶，聚胺樹脂，普魯卡因，。票呤，可可堿，三乙胺，三曱胺，三丙胺，當(dāng)本發(fā)明的化合物是堿性時，鹽可以由藥學(xué)可接受無毒酸制成，包括無機(jī)和有機(jī)酸。此類酸包括乙酸、笨石黃酸、苯甲酸、樟腦石黃酸、檸檬酸、乙磺酸、富馬酸、葡糖酸、谷氨酸、氫溴酸、鹽酸、羥乙基磺酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、甲磺酸、粘酸、檸檬酸、樸酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、對甲苯磺酸等。特別優(yōu)選4寧4蒙酸、氫溴酸、鹽酸、馬來酸、4|酸、碌u酸和酒石酸。應(yīng)理解，在此使用時，涉及式I的化合物還包括藥學(xué)可接受鹽。實(shí)用性式I的化合物拮抗VLA-4整聯(lián)蛋白作用的性能使它們能有效預(yù)防或逆轉(zhuǎn)通過VLA-4與其多種配體結(jié)合引起的癥狀、障礙或疾病。所以，這些桔抗劑應(yīng)抑制細(xì)胞粘著過程，包括細(xì)胞活化、遷移、增殖和分化。所以，本發(fā)明的另一方面提供一種治療(包括預(yù)防、減輕、改善或抑制)通過VLA-4結(jié)合和細(xì)胞粘著和活化介導(dǎo)的疾病或障礙或癥狀的方法，該方法包括纟合哺乳動物施用有效量的式I的化合物。此類疾病、障礙、病癥或癥狀是，例如(l)多發(fā)性硬化癥，(2)哮喘，(3)變應(yīng)性鼻炎，(4)變應(yīng)性結(jié)膜炎，("炎性肺病，(6)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，(7)膿毒性關(guān)節(jié)炎，(8)I型糖尿病，(9)器官移植排斥，(IO)再狹窄，(11)自體骨髓移植，(12)病毒感染的炎性后遺癥，(13)心肌炎，(14)炎性腸病，包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩氏病，(15)某些類型的毒性和免疫基礎(chǔ)的腎炎，(16)接觸性皮膚過敏癥，(17)牛皮癬，(18)腫瘤移植，(19)動脈粥樣硬化，(20)鐮狀細(xì)胞性貧血，(21)某些急性白血病，(22)多種黑素瘤，癌和肉瘤(包括多發(fā)性骨髓瘤)；(23)急性呼吸窘迫綜合征；(24)葡萄膜炎；(25)循環(huán)性休克；(26)肝炎，和(27)慢性阻塞性肺病。本發(fā)明的化合物可以有效治療除人以外的哺乳動物中的上述疾病、障礙、病癥或癥狀，包括，例如，馬、貓、狗、牛和豬。本發(fā)明化合物還可以包括治療馬的復(fù)發(fā)性呼吸阻塞，一般稱作馬喘。本發(fā)明化合物在這些疾病或障礙中的可利用性可以在文獻(xiàn)報導(dǎo)的動物模型中證實(shí)。下面是此類動物疾病模型的實(shí)例i)實(shí)驗性變應(yīng)性腦脊髓炎，一種神經(jīng)元脫髓鞘類多發(fā)性硬化癥的模型(例如，參見T.Yednock等，Nature，356，63(1993)和E.Keszthelyi等，Neurology.47，1053(1996));11)綿羊和豚鼠中的支氣管高反應(yīng)性作為不同階段的譯喘的模型(例如，參見W.M.Abraham等，J.Clm.Invest.93,776(1993)和A.A.YMilne和P.P.Piper，Eur.J.Pharmacol..282.243H995)):iii)大鼠中佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎作為一種炎性關(guān)節(jié)炎的模型(參見C.Barbadillo等，Arthr.Rlieuma.fSuppU,3695(1993)和D.Seiffge,JLRheumatol..23,12(1996));iv)NOD小鼠中適應(yīng)性自身免疫糖尿病(參見J.L.Baron等，J.Clin.Invest..93,1700(1994)，A.Jakubowski等，J.Immunol..155.938(1995)，和X.D.Yang等，Diabetes.46,1542(1997));v)小鼠的心臟同種移植物存活作為一種器官移植的模型(參見M.Isobe等，Tranplant.Proc.26,867H994、和S.Molossi等，L_ClmInvest..95.2601(1995));vi)棉頂tamanns的自發(fā)性慢性結(jié)腸炎，它類似于人潰瘍性結(jié)腸炎，炎性腸病的一種形式(參見D.K.Podolsky等，.TClin.Invest..372(1993));vii)接觸性高過敏性模型作為皮膚變應(yīng)性反應(yīng)的模型(參見T.A.Ferguson和T.S.Kupper,J.Immunol..150，U72(1993)和P.L.Chisholm等，Eur.J.Immunol..23，682(1993));viii)急性腎毒性腎炎(參見M.S.Mulligan等，J.Clm.Invest..91,577(1993));ix)肺瘤轉(zhuǎn)移(例如，參見M.Edward，Curr.Opin.Oncol.,7，185(1995));x)實(shí)驗性自身免疫性曱狀腺炎(參見R.W.McMurray等，Autoimmunity,23，9(1996);xi)大鼠中動脈閉合后的局部缺血性組織損傷(參見F.Squadrito等，Eur.丄Pharmacol..318.153門996》:xii)VLA-4抗體對TH2T-細(xì)胞細(xì)胞因子包括DL-4和DL-5的生成的抑制，其減弱變應(yīng)性反應(yīng)(LOmimlInvestigation100.3083(1"7);xiii)在靈長動物和小鼠中VLA-4整聯(lián)蛋白的抗體調(diào)動長效種群恢復(fù)細(xì)胞并增加細(xì)胞因子誘導(dǎo)的流動(Elimd904779-4788(1997);xiv)鐮狀sickle網(wǎng)狀細(xì)胞粘著于VCAM-I(Ekoi85268-274(1995)和Blood884348-4358(1996);xv)趨化因子基質(zhì)細(xì)胞衍化因子1調(diào)節(jié)VLA-4整聯(lián)蛋白介導(dǎo)的多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞粘著粘著于CS-1/纖連細(xì)胞和VCAM-I(mnfld.97，346-3512001);xvi)抗-a4整聯(lián)蛋白抗體抑制多發(fā)性骨髓瘤的發(fā)展并且有關(guān)的破骨骨質(zhì)溶解(參見YMori等.Blood.1042149-2154)。劑量范圍顯然，式I的化合物的預(yù)防或治療劑量的H量應(yīng)隨著一皮治療病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重性，所用的具體式I化合物及其給藥途徑而變化。劑量還應(yīng)根據(jù)各個患者的年齡、體重和反應(yīng)而變化。通常，日劑量范圍在約0.001mg-約100mg/kg哺乳動物體重的范圍內(nèi)，優(yōu)選0.01mg-約50mg/kg，和最優(yōu)選0.1-10mg/kg，分一次或多次給藥。另一方面，在某些情況下可能必須使用超出這些范圍的劑量。對于靜脈內(nèi)給藥使用的組合物來說，適當(dāng)?shù)膭┝糠秶羌sO.Olmg-約25mg(優(yōu)選O.lmg-約10mg)的式I的化合物/kg體重/天。在使用口服組合物的情況中，適當(dāng)?shù)膭┝糠秶?，例如約O.Olmg-約lOOmg的式I化合物/kg體重/天，優(yōu)選約0.1mg-約10mg/kg。對于舌下給藥使用的組合物來說，適當(dāng)?shù)膭┝糠秶?.01mg-約25mg(優(yōu)選0.1mg-約5mg)的式I化合物/kg體重/天。為了治療哮喘，式I的化合物可以以約0.1mg/kg-約100mg/kg的劑量應(yīng)用，優(yōu)選約lmg/kg-10mg/kg，通過口J良/吸入/舌下/等等每天給藥1、2、3次。所述的劑量可以作為單一日劑量給藥或者每天分為2或3次給藥。為了治療多發(fā)性硬化癥，式I的化合物可以在約0.1mg/kg-約100mg/kg下使用，優(yōu)選約1mg/kg-10mg/kg,通過口服/吸入/舌下/等等每天給藥1、2、3次。所述的劑量可以作為單一日劑量給藥或者每天分為2或3次給藥。為了治療炎性腸病，式I的化合物可以以約0.1mg/kg-約100mg/kg的劑量使用，優(yōu)選約1mg/kg-10mg/kg，通過口服/吸入/舌下/等等每天給藥1、2、3次。所述的劑量可以作為單一日劑量給藥或者每天分為2或3次給藥。為了治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，式I的化合物可以以約0.1mg/kg-約100mg/kg的劑量使用，優(yōu)選約1mg/kg-10mg/kg，通過口服/吸入/舌下/等等每天給藥1、2、3次。所述的劑量可以作為單一日劑量給藥或者每天分為2或3次給藥。藥物-且合物本發(fā)明的另一方面提供藥物組合物，其中含有式I的化合物和藥學(xué)可接受載體。術(shù)語"組合物"，如藥物組合物中的，是指包括含有活性成分和構(gòu)成載體的惰性組分(藥學(xué)可接受賦形劑)的產(chǎn)品，以及任何直接或間接由兩種或多種組分混合、復(fù)合或附聚得到的產(chǎn)品，或由一種或多種組分的離解得到的產(chǎn)品，或由一種或多種組分的其他類型的反應(yīng)或相互作用得到的產(chǎn)品。所以，本發(fā)明的藥物組合物涉及任何通過式I的化合物、附加活性成分和藥學(xué)可接受賦形劑混合制成的組合物。任何適當(dāng)?shù)慕o藥途徑可以提供給哺乳動物，尤其是人有效劑量的本發(fā)明化合物。例如，可以采用口服、直腸、局部、非腸道、眼睛、鼻等。劑型包括片劑、錠劑、分散體、混懸劑、膠嚢、霜劑、軟膏、氣霧劑等。本發(fā)明的藥物組合物含有式I的化合物作為活性成分或其藥學(xué)可接受鹽，和還可以含有藥學(xué)可接受載體和任選地其他治療組分。術(shù)語"藥學(xué)可接受鹽"是指由藥學(xué)可接受無毒堿或酸制成的鹽，包括無機(jī)堿或酸和有機(jī)-威或酸。所述的組合物包括適合口服、舌下、直腸、疾病、非腸道(包括皮下、肌肉內(nèi)和靜脈內(nèi))、眼(眼睛)、肺(氣霧劑吸入)或鼻給藥的組合物，盡管最適當(dāng)?shù)耐緩皆谌魏沃付ㄇ闆r下應(yīng)取決于被治療病癥的性質(zhì)和嚴(yán)重性和活性成分的性質(zhì)。它們通?？梢砸詥挝粍┬痛嬖诓⑶姨峁┧帉W(xué)領(lǐng)域的已知方法來制備。為了通過吸入給藥，本發(fā)明的化合物一般以加壓包裝或霧化器提優(yōu)選給藥體系是計量劑量的吸入(MDI)氣霧劑，它可以將式I的化合物在適當(dāng)拋射劑例如氟烴或烴類中配制為混懸劑或溶液和千粉吸入(DPI)氣霧劑，它可以使用或者不用附加賦形劑配制為式I的化合物的干粉。式I的化合物的適當(dāng)局部配制包括透皮裝置、氣霧劑、霜劑、軟膏、洗劑、粉塵劑等。在實(shí)際應(yīng)用中，式I的化合物作為活性成分可以按照常規(guī)藥學(xué)化合技術(shù)與藥學(xué)載體結(jié)合成致密混合物。所述的載體釆用寬范圍的形式，這取決于所需給藥的制劑的形式，例如口服或非腸道(包括靜脈內(nèi))。在口服劑型的組合物制備中，可以采用任何有用的藥學(xué)介質(zhì)，例如，在口服液體制劑的情況中水、二醇類、油、醇、矯味劑、防腐劑、著色劑等，例如，混懸劑、酏劑和溶液；或在口服固體制劑的情況中載體例如淀粉、糖、微晶纖維素、稀釋劑、制粒劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等，例如，粉末、膠嚢和片劑，并且固體口服制劑比液體制劑更優(yōu)選。因為容易給藥，片劑和膠嚢代表最優(yōu)選的口服劑量單位，其中顯然使用固體藥學(xué)載體。如果需要，片劑可以通過標(biāo)準(zhǔn)水或非水技術(shù)進(jìn)行包衣。除了上述常規(guī)劑型，式I的化合物還可以通過控釋方式和/或給藥裝置給藥，例如美國專利3,845,770;3,916,899;3,536,809;3,598,123;3,630,200和4，008，719中描述的。本發(fā)明的適合口服給藥的藥物組合物可以作為離散單位提供，例如其中各自含有預(yù)定量的活性成分的膠嚢、嚢形片或片劑，作為散劑或顆粒劑或作為在含水液體中的溶液或混懸劑，非水液體，水包油乳液或油包水液體乳液。鈣組合物可以提供藥學(xué)的方法制備氮所有方法包括使活性成分與構(gòu)成一種或多種必要組分的載體結(jié)合的步驟。通常，所述的組合物通過將活性成分與液體載體和細(xì)分的固體載體或兩者均勻和緊密混合來制成，并且如果需要，隨后將產(chǎn)品成形為所需形式。例如，通過壓縮或模制制備片劑，任選地與一種或多種附加組分。壓縮片劑可以通過在適當(dāng)機(jī)器中壓縮自由流動形式的活性成分例如粉末或顆粒來制成，所述活性成分任選地與粘合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、表面活性劑或分散劑混合。模制的片劑可以通過在適當(dāng)機(jī)器中模制用惰性液體稀釋劑濕潤的粉狀化合物來制備。理想地，各個片劑含有約lmg-約500mg的活性成分并且各個嚢形片或片劑含有約]-約500mg的活性成分。下面是式I的化合物的代表性藥學(xué)劑型的實(shí)例:<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>氣霧劑每個載體式I的化合物24mg卯磷脂，NF液體濃度1.2mg三氟甲烷，NF4.025g二氯二氟曱烷，NF12.15g聯(lián)合療法式I的化合物可以與用于治療/預(yù)防/抑制或改善對于式I化合物有效的疾病或病癥的其他藥物聯(lián)合。其他藥物可以通過一定途徑和常用量與式I化合物同時或順序給藥。當(dāng)式I的化合物與一種或多種其他藥物同時給藥時，優(yōu)選除式I化合物以外含有其他藥物的藥物組合物。所以，本發(fā)明的藥物組合物包括那些除式I化合物以外還含有一種或多種其他活性成分的。分開或在同一藥物組合物中給藥，可以與式I的化合物聯(lián)合的其他活性成分的實(shí)例，包括，但不限于(a)其他VLA-4拮抗劑，例如US5,510,332，WO97/03094,WO97/02289,WO96/40781,W096/22966,WO96/20216,WO96/01644,WO96/06108,W095/15973和WO96/31206所述的，以及natahzumab;(b)甾族化合物例如倍氯米松，強(qiáng)的松龍，倍他米松，強(qiáng)的松，地塞米松，和氳化可的松；(c)免疫抑制劑例如環(huán)sporm，他克莫司，雷帕霉素和其他FK-506型免疫抑制劑；(d)抗組胺藥物(Hl-組胺拮抗劑)例如bromophenir胺，氯笨那每丈，右氯苯那敏，曲普利咬，氯馬斯汀，苯海拉明，雙苯拉林，曲吡那敏，肼，甲地。秦，異丙溱，異丁溱，阿扎他定，賽庚啶，安它唑啉，非尼拉敏，新安替根，阿司咪唑，特非那定，氯雷他定，西替利溱，曱美芳銨，脫碳乙氧氯雷他定(descarboethoxyloratadine)等；(e)非甾族抗哞喘藥物例如p2-激動劑(特布他林，異丙喘寧，非諾特羅，異他林，沙丁胺醇，比托特羅，沙美特羅和吡布特羅)，茶石咸，色甘酸鈉，阿托品，異丙托溴銨，白三烯拮抗劑(扎魯司特，芒特司特(montelukast)，普侖司特，伊拉司特(iralukast)，泊吡司特，SKB-106,203),白三烯生物合成抑制劑(棄白通，BAY-1005);(f)非甾族抗炎劑(NSAIDs)例如丙酸衍生物(阿明洛芬，苯卓洛芬，布氯酸，caiprofen,芬布芬，非諾洛芬，氟洛芬，氟比洛芬，布洛芬，吲哚洛芬，酮洛芬，咪羅普洛芬，萘普生，奧哌那嗪，吡洛芬，普拉洛芬，舒洛芬，噻洛芬酸，和硫惡洛芬)，乙酸衍生物(消炎痛，阿西美辛，阿氯芬酸，環(huán)氯茚酸，雙氯芬酸，芬氯酸，芬克洛酸，芬替酸，呋羅芬酸，異丁芬酸，伊索克酸，oxpinac,^tj^木酉艾，^"匹來克，4乇美丁，豐氣口引酉艾,和^(i美fe)，芬那酸衍生物(氟芬那酸，曱氯芬酸鈉，甲芬那酸，尼氯滅酸和托芬那酸)，聯(lián)苯羧酸衍生物(二氟尼柳和氟苯沙酸)，昔康類(伊索昔康，吡羅昔康，噻氧噻嗪和替諾昔康)，水楊酸類(乙酰水楊酸，柳氮^t吡啶)和吡唑酮(阿扎丙宗，bezpiperylon,非普拉宗，莫非布宗，羥布宗，苯丁氮酮)；(g)環(huán)加氧酶-2(COX-2)抑制劑例如塞來昔布，羅非克西，和parecoxib;(h)IV型磷酸二酯酶抑制劑(PDE-IV);(i)趨化因子受體的拮抗劑，尤其是CCR-I,CCR-2,和CCR-3;(j)降膽固醇藥例如HMG-CoA還原酶抑制劑(洛伐他汀，辛伐他汀，普伐他汀，氟伐他汀，托伐他汀，和其他他汀類)，螯合劑(考來烯胺和降膽寧)，煙酸，非諾貝酸衍生物(吉非貝齊，氯貝特，非諾貝特和苯扎貝特)，和丙丁酚；(k)抗糖尿病藥物例如胰島素，磺酰脲，雙胍類(二曱雙胍)，a-糖苷酶抑制劑(阿卡波糖)和格列酮類(曲格列酮，吡格列酮，恩格列酮，MCC-555,BRL49653等)；(1)(3干擾素的制劑(干擾素P-la,千擾素P-lb);(m)抗膽堿能藥例如毒蕈石咸拮抗劑(異丙托品和tiatropmm);(n)多發(fā)性硬化癥的現(xiàn)有療法，包括強(qiáng)的松龍，格拉太咪爾，脫氧腺苦，米托蒽醌，甲氨喋呤，和環(huán)磷酰胺；(0)p38激酶抑制劑；(p)其他化合物例如5-氨基水楊酸及其前藥，抗代i射藥物例如石克唑。票呤和6-巰基噤呤，和細(xì)月包毒性癌化療劑。式I的化合物與第二活性成分的重量比可以改變并且應(yīng)取決于各個組分的有效劑量。通常，應(yīng)使用各自的有效劑量。所以，例如，當(dāng)式I的化合物與NSAID混合時式I的化合物與NSAID的重量比一般在約1000:1-約1:1000的范圍內(nèi)，優(yōu)選約200:1-約1:200。式I的化合物和其他活性成分的組合一般也在上述范圍內(nèi)，但在各個情況中，應(yīng)采用各個活性成分的有效劑量。前藥一些本發(fā)明的化合物在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為活性部分。例如，當(dāng)Rl是乙基時，本發(fā)明的化合物在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的酸。本領(lǐng)域技術(shù)人員很容易辨^人此類前藥。合成的方法下列路線和實(shí)施例可能使用的縮寫包括4-DMAP:4-二甲基氨基吡啶；AcCN:乙腈；BOC:叔丁氧基羰基；BOC-ON:2-(叔丁氧基羰氧基亞氨基)-2-苯基乙腈；BOP:苯并三唑-1-基氧基-三(二曱基氨基)-六氟磷酸鹽；鹽水飽和NaCl溶液；DDPEA:N,N-二異丙基乙基胺；DMF:二曱基甲酰胺；DMSO:二甲基砜；Et:乙基；EtOAc:乙酸乙酯；EtOH:乙醇；g或gm:克；h或hr:小時；HATU:0-(7-氮雜苯并三唑-l-基)-l，l,3,3-四曱基銨六氟磷酸鹽；HBTU:O-(苯并三唑陽1-基)-1，1,3,3—四曱基銨六氟磷酸鹽；HOAc:乙酸；HOAt:l-羥基-7-氮雜苯并三唑；HOBt:l-羥基苯并三唑；HPLC:高壓液體色譜；真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)；Me:曱基；MeOH:甲醇；mg:毫克；MHz:兆赫茲；分鐘分鐘；mL:毫升；mmol:毫摩爾；MS或ms:質(zhì)譜；MsCl:甲磺酰氯；Ph:苯基；Ph3P:三苯基膦；PyBOP:(苯并三唑-l-基氧基)-三吡咯烷丙六氟磷酸鹽；rt:室溫；TEA:三乙胺；TFA:三氟乙酸；THF:四氳呋喃。生的化合物可以通過實(shí)施例7和8所示的方法制備。在if各線方案1中，取代的吡。定基-4-羧酸衍生物A用亞石克酰氯處理制備羧酰氯書f生物，其隨后與4-氨基-(L)-苯基丙氨酸衍生物反應(yīng)生成酰胺B。B中的N-BOC-保護(hù)基用強(qiáng)減(TFA或HC1)儲氫得到游離的胺C。適當(dāng)取代的(L)-脯氨酸酯D用3-曱基磺?；交酋Ｂ仍趬A(DIPEA或Na2C03)的存在下磺?；苫酋０稥,如果含有酯保護(hù)基，它用氫氧化物處理生成游離酸。胺C和酸E在適當(dāng)歐會見(例如，PyBOP,HBTU/HOAt,預(yù)制為E的酰氯等)的存在下反應(yīng)得到酰胺F。F中的酯可以用氫氧化物(如果R'是正-或異-烷基)或TFA或HC1(如圖W是叔丁基)水解得到酸G。路線方案1H2N^X02R1BOC一1.S0C12，2',.[J丫C02R1C02R1R4.R3R21.IjJ'，C02R匿A或Na2C03Me02S、2H-^2.KOH,MeOH生物學(xué)評估式I的化合物是VLA-4的有效拮抗劑并且在VLA-4攜帶細(xì)胞上具有顯著和持續(xù)的受體占據(jù)。試驗化合物從Jurkat細(xì)胞上的VLA-4的離解率可以通過G.Doherty等，Aoorgamc&13，1891(2003)所述的方法測定。本發(fā)明的化合物在此試—驗中具有超過3小時的解離半衰期(11/2〉3hr),證明它們是VLA-4的緊密結(jié)合抑制劑。在大鼠和狗中口服給藥后VLA-4受體占據(jù)可以通過D.R.Leone等，J.PharmacolExper.Therap.,305，1150(2003)所述的方法測定。在口服給藥后證明本發(fā)明的化合物具有持續(xù)和顯著受體占據(jù)作用。本發(fā)明的化合物可以通過下列詳細(xì)描述的實(shí)施例制備。提供的實(shí)參考實(shí)施例14-((3',S'-二氯異煙酰基)氨基)-(L)-笨基丙氨酸，乙酯，鹽酸鹽步驟A:4-硝基-L-苯基丙氨酸，乙酯，鹽酸鹽H2N^X02HHCIHsNvCC^EtiEtOH/HCI￡C9H10N2O4ChH^CIN^Mol.Wt.:210.19Mol.Wt.:274.70在氮?dú)夂?。C下向500mL的絕對乙醇中5分鐘內(nèi)加入亞石克酰氯(21mL，0.29mol)，和將澄清溶液在O'C攪拌10分鐘并隨后在室溫攪拌30分鐘。一次加入4-硝基-L-苯基丙氨酸(S0.2g,0.24mol)，和回流該混合物過夜。將所得化合物真空濃縮得到標(biāo)題化合物(60g,92%),其為白色固體。'HNMR(400MHz，CD3OD)58.21(d，2H)，7.54(d,2H)，4.39(dd，1H),4.22(q,2H),3.24-3.40(m,2H),1.22(t,3H)。步驟B:N-BOC-4-；肖基-L-苯丙氨酸，乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>向4-硝基-L-苯基丙氨酸乙酯鹽酸鹽(60g,0.22mol)在二氯甲烷(1.5L)中的混懸液內(nèi)在氮?dú)庀录尤肴野?31mL)。在室溫下攪拌10分鐘，加入二碳酸二叔丁酯(49g,0.22mol)和4-二曱基胺吡啶(0.1g)，和該反應(yīng)在室溫下攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用1NHCl(2x200mL)、E2〇(2x200mL)和鹽水(1X250mL)洗滌，用無水Na2S04干燥，過濾和濃縮得到該標(biāo)題化合物(78g,100%)。'HNMR(400MHz,CDC13)58.14(d，2H)，7.28(d,2H),4.30-4.65(m,1H),4.15(q，2H)，3.00隱3.30(m，2H),1.35(s,9H).1.20(t，3H)。步驟C:N-BOC-4-氨基-L-苯基丙氨酸，乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>向N-BOC-4-硝基-L-苯基丙氨酸乙酯(78.3g，0.22mol)在絕對乙醇(300mL)中的溶液中吹入氮?dú)?，并且加?0%碳載鈀(1.0g)。40刁0psi下氫化1小時后，該反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土過濾，和濾々并用EtOH洗滌，隨后用EtOAc洗滌。濃縮濾液，殘余物通過快速柱色譜純化在硅膠上用4:1-1:1EtOAc/己烷細(xì)的同得到該標(biāo)題化合物(60g89%收率)。LHNMR(400MHz，CDC13)56.卯(d，2H)，6.63(d，2H)，4.20-4.50(m,1H)，4.14(q,2H),3.76-3.00(m,2H)，1.36(s,9H).1.20(t，3H)。步驟D:N-B0C-4-』煙酰基)氨基)-L-苯基丙氨酸，乙酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>向吹氮500mL圓底燒瓶內(nèi)加入3,5-二氯-異煙酸(46.5g，0.24mol)、CH2Cl2(150mL)、DMF(0.5mL)和亞硫酰氯(20mL,33.9g0.28mol)。將漿液回流5h后，力口入附力。的亞硫酰氯(5mL,0.70mol)和CH2Cl2(100mL)，并且將該反應(yīng)回流附加的45分鐘。濃縮該反應(yīng)混合物，殘余物預(yù)曱苯共沸得到粗酰氯，立刻使用。由此，將粗酰氯溶解在CH2Cl2(150mL)中并在(TC下5分鐘內(nèi)加入到N-B0C-4-氨基-L-苯基丙氨酸乙酯(60g,0.20mol)和4-甲基嗎啉(44mL,0.40mol)在CH2Cl2(400mL)。(TC下攪拌1小時后，該反應(yīng)用稀NaHC03中止。分離有機(jī)層且水層用CH2Cl2(500mL)萃取。合并有機(jī)層，用無水MgS〇4干燥并真空濃縮，殘余物通過快速柱色譜純化在硅膠上用4:1to3:2EtOAc/己烷洗脫得到該標(biāo)題化合物(95g，100%收率)。；HNMR(400MHz,CD3OD)58.60(s,2H)，7.54(d，2H)，7.20(d，2H)，4.20-4.36(m,]H)，4.10(q，2H)，3.02-3.12(m,1H)5)，2.82-2.92(m,1H),1.34/1.30(s,9H)，L20(t,3H)。步驟E:4-((3',5'-二氯煙酰基)氨基)-(L)-苯基丙氨酸，乙酯，鹽酸鹽BocHNvc02EtHCIH2N^/C02EtHCl/EtOAcC22H25CI2N3O5MoLWL482.36NHCIcl7Hi8CI3N303/VN函.Wt.:418.70CI將N-BOC-4-((3',5'-二氯煙?；?氨基)-L-苯基丙氨酸乙酯(95g,0.197mol)在EtOAc(1.2L)中的溶液用氯化氬氣流室溫下處理2h。所得黃色混懸液用己烷(250mL)稀釋，冷卻至0。C和過濾。濾餅用己烷洗滌和真空濃縮得到該標(biāo)題化合物，其為黃色固體(80g，98%)。^NMR(400MHz，CD3OD)58.64(s，2H),7.66(d，2H)，7.30(d，2H),4.28(dd，1H),4.25(q，2H)，3.20(q,2H),1.26(t，3H)。參考實(shí)施例2cis-八氫異吲哚-l-羧酸室溫下cis-N-BOC-八氳異口引咮-l-羧酸(18.6mmol)溶解在4MHC1的二嗯烷(46.5mL)中。攪拌l小時后，通過TLC測定該反應(yīng)達(dá)到完全。該反應(yīng)混合物，用Et20(2x70mL)研制且隨后真空濃縮得到cis-八氫異吲哚-l-羧酸(4.13g)，其為白色固體。500MHz1HNMR(CD30D)54.40(d，J=5.5Hz，1H);3.39(m,1H);3.31(m，1H);2.70(m,1H);2.58;(m,1H);1.78-1.14(m,8H)。實(shí)施例1(R,S,S)-N-(N-「(3-曱基磺?；?磺?；?(R)-環(huán)丁基氨基-(L)-脯氨?；鶀-4-「(3'，5'-二氯-異煙酰基)氨基1-(L)-苯丙氨酸乙酯步驟A:N-BOC-4(R)-環(huán)丁基氨基-L-脯氨酸，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>CnH化N05Mol.Wt,:245.27Tf20，iPrNEt2,CH2CI2-20C,1h,then氨基環(huán)丁坑-20tort,16h<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>C15H26N2O4Mol.Wt.:298.38向N-BOC-cis-羥基-L-脯氨酸甲酯(60g，0.25mol)和N,N-二異丙基乙基胺(100mL，0.57mol)在二氯曱烷(800mL)中的溶液內(nèi)于-20。C下45分鐘內(nèi)加入三氟甲磺酸酐。在-20。C下繼續(xù)攪拌45分鐘后，一次性加入環(huán)丁胺(55g,0.78mol)，八使該反應(yīng)升至室溫過夜。該反應(yīng)用INNaOH(250mL)和飽和NaHC03水溶液(250mL)中止。分離有機(jī)層，用鹽水干燥，用硫酸鎂干燥，過濾和濃縮，殘余物通過快速柱色譜純化在硅膠上用<^1202至EtOAc至5%MeOH/EtOAc洗脫)得到該標(biāo)題化合物(77g，100%)。！HNMR(400MHz,CD3OD)54.8(brs,1H),4.24-4.32(m，1H),3.67/3.68(s，3H)，3.56-3.64(m，1H)，3.1-3.38(m,3H),2.12-2.21(m,2H)52.00-2.12(m，2H)，1.54-1.82(m，4H),1.36/1.43(s,9H)。步驟B:N-「N-BOC-4(R)環(huán)丁基氨基-(L)-脯氨?；?-4-「(3',5'-二氯-異煙?；鵯氨基)-(L)-苯基丙氨酸，乙酯向N-BOC-4(R)-環(huán)丁基氨基-(L)-脯氨酸甲酯(77g,0.25mol)在CH3CN(350mL)和水(150niL)中的溶液內(nèi)加入氫氧化鋰一水合物(21g,0.50mol)，和該混懸液在室溫攪拌過夜。該反應(yīng)混合物用CH3CN稀釋到總體積為1L，冷卻至0。C和過濾，濾液得到N-BOC-4(R)-環(huán)丁基氨基-(L)-脯氨酸的鋰鹽的溶液。將一部分的上述濾液(484mL，0.22M,O.llmol)濃縮，向殘余物加入水(lL)、CH2C12(1L)、EDC(20.8g,O.llmol)、l-羥基苯并三唑(14.6g，O.llmol)和4-((3',5'-二氯-異煙?；?氨基)-(L)-苯基丙氨酸乙酯鹽酸鹽(39g，0.090mol)在水(lL)中的溶液。所得兩相混合物在室溫下劇烈攪拌4小時。分離有機(jī)層并且水層用CH2C12(0.5L)萃取。合并的有機(jī)層用Na2S04千燥，過濾和濃縮，殘余物通過快速柱色譜純化在硅膠上用EtOAc至EtOAc/MeOH/NH40H(98:l:l)洗脫得到該標(biāo)題化合物(48g78%)。！H畫R(400MHz,CD3OD)58.64(s，2H)，7.57(d，2H)，7.20-7.30(m,2H),4.80(brs，1H)，4.58-4.70(m,1H)，4.08-4.30(m,3H),3.56-3.64(m,1H),2.90-3.30(m,5H),3.00-3.08(m,1H),1.5-2.2(m，8H)，1.22(brs,9H),1.2(t，3H)。步驟C:N-「4(R)-環(huán)丁基氨基-(L)-脯氨?；鵯-4-『3',5'-二氯-異煙?；鵯氨基l-(L)-笨基丙氨酸，乙酯，鹽酸鹽向N-[N-BOC-4(R)-環(huán)丁基氨基-(L)-脯氨?；鵠-4-[(3',5'-二氯-異煙酰基)氨基]-(L)-苯基丙氨酸乙酯在乙醇(300mL)中的溶液內(nèi)加入4MHC1的二P惡烷(250mL)溶液。室溫下攪拌過夜后，將澄清黃色溶液濃縮，殘余物用醚(1L)研制。所得混懸液在室溫下攪拌2小時，通過過濾收集沉淀。濾餅用醚洗滌丙千燥得到該標(biāo)題化合物(45.6g，100%收率)。NMR(400MHz，CD3OD)58.86(d，1H)，8.62(s，2H)，7.58(d，2H)，7.26(d，2H)54.80(brs,1H),4.70(m，1H)，4.64(dd，1H)，4.15(q，2H),3.80-3.95(m，3H),3.5(dd，1H)，3.24(dd，1H)，3.00(dd,1H),2.50-2.70(m,2H)，2.20陽2.40(m,4H)，1.8-2.0(m,2H),1.22(t，3H)。步驟D:N-(N-「(3-曱基磺酰基笨)磺?；鵯-4(R)-環(huán)丁基氨基-(L)-脯氨?；鶀-4-「(3',5'-二氯-異煙?；?氨基l-(L)-苯基丙氨酸，乙酯向N-[4(R)-環(huán)丁基氨基-(L)-脯氨酰基]-4-[(3',5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸乙酯鹽酸鹽(18g，30mmol)、3-曱基磺?；交酋Ｂ?7.64g，30mmol)、4-二甲基氨基吡啶(50mg)在四氫呋喃(80mL)和二氯甲烷(80mL)中的混懸液內(nèi)于0。C下加入二異丙基乙基胺(21mL,0.12mol)。將該反應(yīng)在3小時內(nèi)升至室溫，并且將所得化合物濃縮。把殘余物溶解在乙酸乙酯(400mL)中，用1N氫氧化鈉和鹽水洗滌丙濃縮至干。將殘余物通過快速柱色譜純化在硅膠上用2N氨在甲醇/EtOAc(0-3%)中洗脫得到標(biāo)題化合物(21.4g,93%)。！H函R(500MHz，CD3OD):58.63(s，2H),8.31(s,1H),8.23(m，2H)，7.95(d，1H)，7.80(t,1H)，7.62(d，2H)，7.32(d,2H)，4.61(dd，1H),4.47(dd,1H)，4.14(m，2H),3.68(dd,1H)，3.57(m，1H),3.42(dd,1H)，3.20(s,3H)，3.21(m,1H)，3.05(dd,1H),2.19(m,2H),1.94(m,1H),1.87(m，2H)，1.73(m，2H)，1.22(t,3H)。LC-MS:C33H37C12N508S2計算值765,實(shí)測值m/e766(M+H)+(2.85分鐘)。(R,S，S)-N-(N-「3-曱基磺?；?磺?；鵯-4(R)環(huán)丁基氨基-(L)-脯胺酰基V4-「(3',5'-二氯-異煙?；?氨基l-(L)-苯基丙氨酸向N-{N-[(3-甲基磺?；交酋；?-環(huán)丁基氨基-(L)-脯氨酰基}-4-[(3',5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸乙酯(實(shí)施例1的化合物，4.794g，6.378mmol)在40mL乙腈中的溶液內(nèi)加入15.93mL的1NNaOH。室溫攪拌2h后，該反應(yīng)用8mL的2NHC1中止使該反應(yīng)溶液呈輕微酸性。該反應(yīng)用450mL的THF/EtOAc(1:3v/v)稀釋丙用水(100mLx2)洗滌。蒸發(fā)溶劑后，將殘余物溶解在100mL的乙腈中丙冷凍干燥得到4.6g(99。/o)的標(biāo)題產(chǎn)物。iHNMR(500MHz，CD3OD):58.62(s，2H),8.33(s，1H)，8.20(d,1H),7.卯(d,1H)，7.76(t，1H)，7.60(d,2H),7.34(d,2H)，4.49(dd,1H),4.44(dd,1H)，3.70(dd，1H)，3.63(m，1H),3.52(m，1H),3.22(m,2H)，3.20(s，3H),3.01(dd，1H)，2.27(m,2H)，1.97(m，2H),1.80(m，1H)。LC-MS:C31H33C12N508S2計算值737,實(shí)測值m/e738(M+Hy(2.54分鐘)。實(shí)施例2實(shí)施例3<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>步驟A:N-r(3-曱基磺?；?磺酰基l-3(S)-羥基-(L)-脯氨酸，曱酯向(3S)-羥基-(L)-脯氨酸(Acros，1.223g,9.324mmol)和碳酸鈉(2.08g，19.63mmol)在30mL水中的溶液內(nèi)于0。C下加入粉狀3-甲基磺?；绞S酰氯(2.5g，9.815mmol)。室溫下攪拌過夜后，該反應(yīng)混合物用濃鹽酸酸化(p1^3)，產(chǎn)物用乙酸乙酯(3x30mL)萃取。干燥有機(jī)萃取物(MgSCg，過濾和濃縮至干。殘余物隨后溶于二氯甲烷(10mL)和曱醇(10mL)中，并且在0。C下加入三曱基甲硅烷基重氮甲烷(2M在醚中)直至顏色持續(xù)為黃色。室溫下攪拌15分鐘后，將該混合物濃縮至干得到標(biāo)題化合物(2.6g，77%)。LC-MS:C13H17N07S2計算值363,實(shí)測值m/e364(M+H)+(2.1分鐘)。步驟B:N-「(3-曱基磺?；?磺酰基卜3(S)-曱磺酰氧基-(L)-脯氨酸，曱酯向N-[(3-曱基磺酰基苯)磺?；鵠-3(S)-羥基-(L)-脯氨酸，曱酯(2.6g,7.16inmol)在24mL二氯曱烷中的溶液內(nèi)于(TC下加入三乙胺(1.2mL,8.59mmol)和甲磺酰氯(0.61mL，7.87mmol)。0。C下攪拌20分鐘后，該反應(yīng)用30mL的碳酸氫鈉水溶液中止。攪拌15分鐘后，該反應(yīng)混合物在乙酸乙酯(1OOmL)和碳酸氫鈉水溶液(50mL)之間分配。分離有機(jī)層，用鹽水干燥和濃縮至干得到該產(chǎn)物(3.156g，99%)。LC-MS:C14H19N09S3計算值441，觀測值m/e442(M+H)+(2.5分鐘)。步驟C:N-『(3-曱基磺?；?磺酰基l-2,3-脫氫脯氨酸，曱酯向N-[(3-曱基磺?；?磺酰基]-3(5)-甲磺酰氧基-(L)-脯氨酸，甲酯(3.156g，7.15mmol)在24mL乙腈中的溶液內(nèi)加入三乙胺(3.985mL,28.6mmol)。在75。C下加熱4小時后，將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫并濃縮。將殘余物溶解在乙酸乙酯(100mL)并用1N氫氧化鈉水溶液和鹽水洗滌，濃縮至干得到標(biāo)題化合物(2.4g,97%)。LC-MS:計算值C13H15N06S2345,觀測值m/e346(M+H)+(2.53分鐘)。步驟D:N-「(3-曱基磺?；?磺?；鵯-3-叔丁基氨基脯氨酸，甲酯向N-[(3-曱基磺?；?磺?；鵠-2,3-脫氫脯氨酸(甲酯(2.4g，6.95mmol)在18mL的環(huán)己烷和6mL的灃又丁醇中的混懸液內(nèi)加入4又丁胺(7.3mL,69.5mmol)。5CTC下加熱48小時后，j吏該反應(yīng)混合物冷卻至室溫和濃縮。該固體殘余物用己烷研制并通過過濾收集得到標(biāo)題化合物(1.63g，56%)。iHNMR(400MHz，CD3OD):58.38(s，1H)，8.22(d，1H),8.20(d，1H),7.87(dd，1H),3.99(d,1H)，3.75(s，3H)，3.50(m,3H)，3.20(s，3H)，2.17(m,1H)，1.62(m，1H),0.97(s，9H)。LC陽MS:C17H26N206S2計算值418，觀測值mZe419(M+H)+(2.0分鐘)。步驟E:N-fN-「(3-甲基磺?；?磺酰基l-3-叔-丁基氨基脯氨?；?「3',5'-二氯-異煙?；?氨基l-(L)-苯基丙氨酸，乙酯向N-[(3-曱基磺?；?磧?；鵠-3-叔丁基氨基脯氨酸甲酯(步驟D,1.63g,3.883mmol)在10mL乙腈/水(2.5:l)中的溶液內(nèi)加入氳氧化鋰一水合物(407mg,9.71mmol)。室溫下攪拌2.5小時后，該反應(yīng)通過加入2N鹽酸水溶液(5mL,10mmol)中止，將該反應(yīng)混合物冷凍干燥得到粗鋰鹽，其無線進(jìn)一步純化就可使用。所以，向該粗鋰鹽在13mL干燥二甲基曱酰胺中的混懸液內(nèi)加入4-[(3',5'-二氯煙?；?氨基]-(L)-笨基丙氨酸乙酯鹽酸鹽鹽(1.79g,4.27mmol)、(苯并三唑-l-基氧基)三吡咯烷基六氟磷酸(3.03g，5.83mmol)和N-甲基嗎啉(1.7mL，15.5mmol)。室溫下攪拌2.5小時后，該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯。0mL)稀釋，用水(30mLx2)和鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾和濃縮至干。殘余物通過快速色譜純化在硅膠上得到標(biāo)題化合物。LC-MS:C33H39C12N508S2計算值767,觀測值m/e768(M+H)+(2.8分鐘)。實(shí)施例4N-m-f(3-甲基磺?；?磺酰基l-3-叔丁基氨基脯氨?；?-4-「(3',5'-二氯-異煙酰基)氨基"KL)-苯基丙氨酸向N-{N-[(3-曱基磺?；?磺酰基]-3-叔丁基氨基脯氨?；鶀-4-[(3',5'-二氯-異煙酰基)氨基]-(L)-苯基丙氨酸乙酯(實(shí)施例3的標(biāo)題化合物，50mg,0.065mmol)在lmL乙腈中的溶液內(nèi)加入氫氧化鈉(1N，0.164mL,0.164mmol),該反應(yīng)在室溫下攪拌60分鐘。該反應(yīng)用0.2ml曱酸中止并用0.5mLDMSO和0.3mL水稀釋。此反應(yīng)混合物進(jìn)行反向HPLC并收集含有產(chǎn)物的餾分和冷凍干燥得到標(biāo)題化合物。LC-MS:C31H35C12N508S2計算值739，觀測值m/e740(M十H)+(2.5分鐘)。實(shí)施例5(5,11,5,5)->^^-「(3-甲基磺?；?磺酰基1八氫異口引哚-1-羧基}-4-「(3',5'-二氯-異煙?；鵯氨基)-(L)-苯基丙氨酸，乙酯步驟A:(S，R,S，S)-N-(N-Boc-八氫異吲哚-l-羧基)-4-「(3',5'-二氯-異煙?；鵯-(L)-苯基丙氨酸乙酯HC1鹽基)氨基l-苯基丙氨酸，乙酯HCIH2N、/C02Et、2N、/C02Et0。C下向外消旋N-Boc-八氫異吲哚-l-羧酸(得自Neosystem,6g，22.28mmol，1當(dāng)量)、參考實(shí)施例1的步驟E中的胺HC1鹽(9.3g,22.28mmol，1當(dāng)量)和PYBOP(17.4g，33.42mmol,1.5當(dāng)量)在100mLCH2C12中的漿液內(nèi)加入N-曱基嗎啉(8.52mL,78mmol，3.5當(dāng)量)。撤去冷卻浴，該反應(yīng)溶液現(xiàn)在變澄清，室溫下攪拌過夜。LCMS表明該反應(yīng)達(dá)到完全。隨后反應(yīng)溶液加載在65M硅膠柱上并用含2-10。/。THF的二氯曱烷洗脫。收集較高Rf異構(gòu)體(所需的非對映異構(gòu)體)并且棄去較低Rf異構(gòu)體。分開收集中間的非對映異構(gòu)體混合物餾分并利用上述條件再次走柱。合并兩批頂部Rf異構(gòu)體得到5.64g(收率80%)的化合物3。兩種非對映異構(gòu)體?？梢酝ㄟ^ChiralPakAD4.6x250mm10u很好地分離(40%異丙醇/60%庚烷，等度。保留時間不需要的異構(gòu)體8.1分鐘，需要的異構(gòu)體10.5分鐘)。NMR(500MHz，CD3OD):58.65(s,2H);7.60(d，J=8.5Hz，2H);7.31(d，J=8.5Hz，2H);4.70(寬s,1H);4.21(d，J=6HzIH);4.15(m,2H);3.50(m,1H);3.15(m,1H);2.96(m，1H);2.37(m,1H);2.27(m,1H);1.71-1.08(m,13H);1.27(s，9H)。LCMSm/e632(M+)/532(M+-Boc),3.49分鐘。步驟B:(S，R,S,S)-N-(八氫異吲哚-l-羧基)-4-「(3'.5'-二氯-異煙?；?氨向步驟A的產(chǎn)物(5.64g，8.9mmol)在50mLEtOAc/CH2Cl2(l:1v/v)中的混懸液內(nèi)加入20mL4NHC1的1,4-二鵬烷溶液。將該反應(yīng)混合物攪拌過夜和真空濃縮得到該標(biāo)題化合物(5.02g,收率99%)。NMR(500MHz,CD3OD):58.65(s,2H);7.59(d，J=8.5Hz，2H);7.27(d,J=8.5Hz,2H);4.80(m,1H);4.18(q，J=7Hz，2H);3.28(m，2H);2.98(m,1H);2.60(m，2H);].78-1.55(m，5H);1.28(m,2H);1.25(t,J=7Hz，3H);1.03(m，1H)。LCMSm/e532(M+)，2.63分鐘。步驟C:(S,R,S,S)-N-fN-「(3-曱基磺?；?磺?；鵯八氫異p引哚-l-羧基L4-「(3',5'-二氯-異煙?；?氨基1-(LV苯基丙氨酸，乙酯向(8凡8,8)^-(八氫異。引咮-1-羧基)-4-[(3',5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸乙酯HC1鹽(步驟B的產(chǎn)物，1.522g，2.853mmol)和3-曱基石黃?；炕酋Ｂ?0.8g，3.138mmol)在四氫呋喃(5mL)和二氯甲烷(5mL)中的混懸液內(nèi)于0。C下加入三乙胺(1.19mL,8.56mmol)。使該反應(yīng)在2小時內(nèi)升至室溫，將所得混合物濃縮。殘余物溶解在乙酸乙酯(50mL)，用1N氫氧化鈉和鹽水洗滌并濃縮至干。殘余物通過快速柱色譜純化在硅膠上用EtOAc/己烷(50-100%)洗脫得到標(biāo)題化合物(1.687g,79%)。^NMR(500MHz，CD3OD):58.62(s,2H)，8.38(s，1H)，8.24(d,1H)，8.14(d，1H),7.87(dd，1H)，7.63(d，2H),7.32(d,2H)，4.80(dd，1H),4.18(q,2H)，3.51(dd,1H),3.40(m,1H),3.25(dd,1H)，3.20(s，3H)，3.05(dd，2H),2.25(m,1H),1.73(m，1H),1.58-1.35(m,5H)，1.28(t,3H),1.06-0.97(m,4H)。LC-MS:計算值C33H36C12N408S2750，觀測值m/e751(M+H)+(3.4分鐘)。實(shí)施例6(S，R，S,S)-N-m-「(3-甲基磺酰基苯)磺?；鵯八氫異吲哚-l-羧基卜4-「(3',5'-二氯-異煙酰基l氨基ML)-苯基丙氨酸該標(biāo)題化合物按照實(shí)施例2所述方法但起始原料用實(shí)施例5的化合物代替來制備。NMR(500MHz,CD3OD):S8.62(s，2H)58.39(s，1H)，8.23(d，1H)，8.14(d,2H),7.83(dd，1H)，7.62(d，2H)，734(d，2H)，4.78(dd,1H)，4.18(d，1H)，3.49(dd,1H)，3.39(m，1H)，3.20(s,3H),3.06(m,1H)，2.28(m，1H)，1.76(m，1H)，1.60-135(m,4H)，1.26-1.00(m，4H)。LC-MS:C31H32C12N408S2計算值722，觀測值m/e723(M+H)+(3.0分鐘)。(S,R,S,S)-N-(N-「(3-苯基磺?；?磺?；鵯八氫異。引咮-l-羧基V4-「(3'二氯-異煙酰基l氨基)-(L)-苯丙氨酸，乙酯實(shí)施例7歩驟八(5,11乂8)-:^-^-舊^1哚苯)磺?；?八氫異吲哚-1-羧基}-4-「3',5'-二氯-異煙?；?氨基l-(L)-苯基丙氨酸，乙酯該標(biāo)題化合物按照實(shí)施例步驟C所述方法但3-曱基磺?；交酋Ｂ扔?-硤代苯石黃酰氯代替來制備。NMR(500MHz,CD3OD):58.62(s，2H)，8.18(s，1H)，8.02(d,1H),7.85(d，1H)，7.62(d,2H),7.38(dd，1H)，7.28(d,2H),4.80(m,1H)，4.20(q，2H)，3.40(m，2H)，3.25(m，2H)，3.05(dd,1H)，2.21(m，1H)，1.63(m，1H)，1.50(m,2H)，1.33(m，2H)，1.25(t，3H)，1.18(m,1H),0.94(m，2H)。LC陽MS:計算值C32H33C12IN406S798，觀測值m/e799(M+H)'(3.8分鐘)。步驟B:(S,R,S,S)-NJN-「(3-苯基磺?；?磺酰基l八氫異口引哚-l-羧基l-4-(3'，5'-二氯-異煙?；?氨基l-(L)-笨基丙氨酸，乙酯該標(biāo)題化合物4安照Org.Lett.2002,4,第4423-4425頁所述方法制備。所以，將(S,R,S,S)-N-(N-[(3-碘代苯)磺酰基]八氫異吲哚-l-羧基}-4-[(3'，5'-二氯煙酰基)氨基]-(10-苯基丙氨酸，乙酯(得自步驟A,53mg,0.066mmol)、苯磺酸鈉鹽(32.7mg,0.199mmol)、(CuOTf)2苯復(fù)合物(10mg,0.0199mmol)和N，N-二曱基乙二胺(0.005mL，0.04mmol)溶解在0.5mL的DMSO(用4AMS干燥)。該反應(yīng)混合物在ll(TC下干燥過夜。隨后該反應(yīng)混合物用EtOAc(10mL)稀釋，和用水(10mLx2)和鹽水洗滌。用MgS04干燥，蒸發(fā)溶劑，殘余物在Si02上用EtOAc/己烷(60y。-10()Q/o)洗脫得到標(biāo)題化合物(18mg,34%)。'HNMR(500MHz，CD3OD):58.61(s，2H)，8.38(s，1H),8.24(d，1H),8.01(d，2H),7.81(dd,1H)，7.67(d,1H),7.61(m,4H)，7.31(d,2H)，4.80(m,1H),4.18(q，2H)，3.36(m,2H)，3.24(dd，2H)，3.06(dd,1H),2.16(m,1H)，1.47(m,3H)，1.33(m,2H)，1.27(t,3H)，1.19(m,2H)，1.02-0.91(m，3H)。二氯-異煙?；鵯氨基)-(L)-苯丙氨酸該標(biāo)題化合物按照實(shí)施例2所述方法但起始原料用實(shí)施例7的化合物代替制備。NMR(500MHz,CD3OD):58.62(s，2H),8.38(s，1H)，8.23(d，1H)'8.03(d,2H),7.80(dd，1H)，7.68(m，1H)，7.60(m，4H)，7.34(d,2H)，4.78(dd，1H)，4.08(d，]H),3.37(m，1H)，3.05(m，2H)，2.18(m，1H),1.52(dm,3H)51.38-0.95(m,6H)。LC-MS:C36H34C12N408S2計算值784，觀測值m/e785(M+H)4(3.5分鐘)。實(shí)施例9,^-「(3-甲基磺?；?磺酰基1-4(!1)-哌咬子基-仏)-脯氨?；鶀-4-r(3',5'-二氯-異煙?；?氨基l-(L)-苯基丙氨酸，乙酯LC-MS:C38H38C12N408S2計算值812,觀測值m/e813(M+H)+(3.7分鐘)。實(shí)施例8步驟A:N-(叔-丁氣基羰基)-4(R)-哌啶子基-L-脯氨酸，曱酯向N-(叔丁氧基羰基)-cis-羥基-L-脯氨酸曱酯(1.5g,6.1mmol)在CH2Cl2(50mL)中的溶液內(nèi)加入N，N-二異丙基乙胺(2.7mL,15.25mol)。將該反應(yīng)混合物冷卻至^8。C并滴加三氟曱磺酸酐(1.4mL，8.5mmol)至該溶液。攪拌1小時后，該混合物升至-2(TC并滴加哌啶(1.8mL，18.3mmol)。該溶液升至室溫并攪拌過夜。向該溶液加入水且水層用CH2C12萃取。合并的有機(jī)層用MgS04千燥和濃縮。殘余物通過快速色譜純化得到N-(叔丁氧基羰基)-4(R)-哌啶子基-L-脯氨酸曱酯，其為油。NMR(CDC13，500MHz)54.44-4.31(m，1H)，3.87-3.75(m，1H),3.72(s,3H),3.45-2.90(m,3H),2.51-2.15(m，5H)，1.71-1.55(m,4H)，1.48-1.39(m，HH)。MS(ESI)313.3(MH》。步驟B:N-((3-曱基磺?；?磺?；?-4(R)-哌啶子基-L-脯氨酸，甲酯N-(叔丁氧基羰基)-4(R)-哌啶子基-L-脯氨酸甲酯(388mg,1.24mmol)溶解在CH2Cl2(7.5mL)中并加入三氟乙酸(2.5mL)。室溫下攪拌3小時后，將該溶液濃縮并進(jìn)一步在高真空下千燥。將粗原料溶解在CH2Cl2(10mL)和三乙胺(0.5mL，3.6mmol)中，隨后加入3-曱基石黃?；绞S酰氯(500mg，1.96mmol)。室溫下攪拌2小時后，將該反應(yīng)濃縮并通過硅膠色譜純化得到N-((3-甲基磺?；?磺?；?-4(R)-哌啶子基-L-脯氨酸曱酯,其直接用于下面步驟。MS(ESI)431.0(MH+)。步驟C:N-(N-「(3-甲基磺?；?磺?；鵯-4(R)-哌啶子基-(L)-脯氨酰基V4-「(3',5'-二氯-異煙?；?氨基l-(L)苯基丙氨酸乙酯向N-((3-曱基磺酰基苯)磺?；?-4(R)-哌啶子基-L-脯氨酸甲酯(320mg,0.74mmol)在乙腈/7JC(6mL，2/1)中的溶液內(nèi)加入氫氧化鋰一水合物(100mg，2.4mmol)。室溫下攪拌30分鐘后，該反應(yīng)用1NHCl(2.4mL，2.4mmol)中和，濃縮至干并直接用于下步。MS(ESI)417.1(MH+)。向上述酸在DMF(5mL)中的混懸液內(nèi)加入N-甲基嗎啉(0.25mL,2.3mmol)、HATU(310mg，0.82mmol)和4-[(3',5'-二氯煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸乙酯鹽酸鹽(310mg，0.74mmol)。室溫下攪拌2小時后，將該反應(yīng)緩慢加入到水(50mL)中且將所得沉淀過濾和干燥。將半數(shù)的此原料直接用于下步，而其余的通過制備反相HPLC純化。將產(chǎn)物餾分冷凍干燥得到標(biāo)題化合物，其為白色粉末。iH-NMR(DMSO-d6,500MHz)510.84(s，1H)38.78(s，2H)，8.41(d，1H)，8.26-8.25(m,1H)，8.24(s，1H)，8.13隱8.11(m，1H)，7.91-7.88(m，1H)，7.58(d,2H)，7.27(d，2H)，4.51-4.49(m,1H)，4.36-4.34(m,1H)，4.11-4.07(m，2H)，3.60-3.57(m,1H)，3.34(s，3H)，3.05-3.03—，2H)，2.92-2.89(m，1H)，2.78-2.81(m,1H)，2.21-2.11(m，4H)，1.82-1.79(m，1H),1.63-1.60(m，1H)，1.35-1.27(m,6H)，1.17(t，3H)。MS(ESI)780.2(M+)。實(shí)施例10r(3',5'-二氯-異煙?；?氨基l-(L)-苯基丙氨酸向N-{N-[(3-甲基磺酰基苯)磺?；鵠-4(R)-哌啶子基-(L)-脯氨?；鶀-4-[(3',5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸乙酯(實(shí)施例9的化合物，133mg，0.17mmol)在乙腈/7K(3mL,2/1)中的溶液內(nèi)加入氬氧化鋰一水合物(15mg，0.35mmol)。室溫下攪拌30分鐘，該反應(yīng)用5滴曱酸中止。該反應(yīng)直接通過制備反相HPLC純化并且產(chǎn)物餾分冷凍干燥得到標(biāo)題化合物，其為白色粉末、'H-NMR(DMSO-d6,500MHz)512.86(brs,1H)，10.84(s,]H),8.78(s,2H)，8.27(s，1H)，8.26-8.22(m，2H)，8.14-8.12(m，1H)，7.90-7.87(m，1H)，7.58(d，2H)，7.27(d，2H)，4.47-4.45(m，1H),4.38-4.36(m，1H)，3.59-3.56(m,1H)，3.34(s，3H)，3.08-3.05(m,1H)，3.02-2.99(m,1H),2.92隱2.89(m,1H)，2.81-2.76(m，1H),2.21-2.12(m,4H)，1.86-1.83(m,1H)，1.59-1.55(m,1H)，1.35-1.29(m，6H)。MS(ESI)752.2(M+)。實(shí)施例11N-fN-「(3-曱基磺酰基苯)磺?；鵯-4(R)-3,3-二曱基哌啶子基-(L)-脯氨?；?-4-f(3',5'-二氯-異煙酰基)氨基l-(L)-苯基丙氨酸，乙酯步驟A:N-(叔-丁氣基羰基)-4RR)-3,3-二曱基哌啶子基-L-脯氨酸，甲酯向N-(叔-丁氧基羰基)-cis-羥基-L-脯氨酸甲酯(1.5g，6.1mmol)在CH2C12中的溶液內(nèi)加入二異丙基乙基胺(2.7mL,16.1mmol)。使該溶液冷卻至-78。C后，在10分鐘內(nèi)滴加三氟甲磺酸酐(1.4mL，8.3mmol)。攪拌lh后，該溶液升至-20。C并在5分鐘內(nèi)滴加3,3-二曱基哌啶(1.4g，12.4mmol)。該反應(yīng)升至室溫并攪拌過^f復(fù)。加入水且該反應(yīng)用CH2C12萃取。合并的有機(jī)層用MgSC^干燥，過濾，濃縮，通過硅膠色譜純化得到油狀的產(chǎn)物。'H-NMR(DMSO-d6，500MHz)54.39-4.29(m，1H),3.80-3.76(m，1H),3.74(s,3H)，3.22-3.15(m，1H)，2.88-2.84(m,1H),2.37-2.22(m，2H)32.17-1.96(m，4H),1.65-1.55(m,2H),1.48-1.43(2s,9H)，1.21-1.18(m，2H)，0.92(s,3H)，0.90(s，3H)。MS(ESI)341.3(MH+)。步驟B:N-「N-(叔-丁氣基羰基)-4(R)-3,3-二曱基哌啶子基-(L)-脯氨?；?-「(3',5'-二氯-異煙?；?氨基l-(L)-苯基丙氨酸，乙酯向N-(叔丁氧基羰基)-4(R)-3，3-二曱基哌啶子基-L-脯氨酸甲酯(1.22g，3.6mmol)在乙腈/水(6mL，2/1)中的溶液內(nèi)加入氬氧化鋰一水合物(376mg,9.0mmo1)。室溫下攪拌lh后，該反應(yīng)通過加入1NHCl(9mL,9mmol)中和并冷凍干燥得到所述羧酸，其直接用于下步。MS(ESI)327.3(MH+)。向上述酸在DMF(20mL)中的溶液內(nèi)加入N-甲基嗎啉(1.0mL,9.1mmol)、HATU(1.5g,3.9mmol)和4-[(3',5'-二氯煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸乙酯鹽酸鹽(1.5mg,3.6mmol)。室溫下攪拌2小時，將該反應(yīng)緩慢加入到水(200mL)且將所得沉淀過濾和干燥。粗產(chǎn)物直接用于下步。MS(ESI)6卯.3(M+)。步驟C:1^-「(3-甲基磺酰基苯)磺?；?-4(11)-3,3-二曱基旅口定子基-仏)-脯氨酰基}-4-「(3',5'-二氯-異煙?；?氨基1-(L)-苯基丙氨酸，乙酯向仏^-(叔丁氧基羰基)-4(11)-3，3-二曱基哌啶子基-(10-脯氨酰基〗-4-[(3',5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸，乙酯(1.5g，2.2匪ol)在CH2Cl2(20mL)中的溶液內(nèi)加入三氟乙酸(5mL)。室溫下攪拌2小時后，濃縮該溶液并進(jìn)一步在高真空下干燥。粗產(chǎn)物溶解在CH2Cl2(10mL)和三乙胺(0.65mL,4.7mmol)中，隨后加入3-曱基磺酰基苯磺酰氯(650mg,2.55mmol)。室溫下攪拌1小時后，將該反應(yīng)濃縮并在真空下干燥。將粗原料溶解在DMF(10mL)中并緩慢加入到水(100mL)中。過濾沉淀，溶于CH2C12,用MgS04千燥，過濾和濃縮。將一部分的產(chǎn)物用于下步且無效進(jìn)一步純化，而其余通過制備反相HPLC純化。將產(chǎn)物鎦分冷凍干燥得到標(biāo)題化合物，其為白色粉末。'H-NMR(DMSO-d6，500MHz)510.77(s,1H)，8.71(s,2H)，8.37(d，1H),8.19-8.17(m，2H)，8.06隱8.04(m,1H)，7.83-7.80(m,1H),7.51(d，2H)，7.20(d,2H),4.41-4.39(m，1H)，4.32-4.30(m,1H)，4.04隱3.99(m，2H)，3.52-3.49(m,1H),3.26(s，3H),2.98-2.95(m，2H)，2.87隱2.84(m,1H),2.76-2.73(m,1H),2.11-2.02(m，2H)，1.78陽1.74(m,3H),1.56-1.52(m，1H),1.34-1.30(m，2H)，1.10(t,3H),1.05-1.03(m,2H)，0.74(s，3H)，0.72(s，3H)。MS(ESI)808.2(M4)。實(shí)施例12N-fN-「(3-曱基磺?；?磺?；鵯-4(R)-3,3-二曱基哌啶子基-(L)-脯氨?；鵙4-「(3'，5'-二氯-異煙?；?氨基l-(L)-苯基丙氨酸向^{>^-[(3-甲基磺?；?磺酰基]-4(11)-3,3-二甲基哌啶子基-(10-脯氨?；?-4-[(3',5'-二氯-異煙酰基)氨基]-(L)-苯基丙氨酸乙酯(實(shí)施例11的化合物，160mg，0.20mmol)在乙腈/水(4.5mL,2/1)中的溶液內(nèi)加入氫氧化鋰一水合物(20mg,0.48mmol)。室溫下攪拌l小時后，該反應(yīng)用5滴甲酸中止。該反應(yīng)直接通過制備反相HPLC純化且將產(chǎn)物餾分冷凍干燥得到標(biāo)題化合物，其為白色粉末。iH-NMR(DMSO-d6,500MHz)512.83(s,1H)，10.83(s，1H),8.78(s，2H)，8.26-8.23(m，3H),8.13-8.11(m，1H)，7.89-7.86(m,1H),7.59-7.57(d，2H)，7.28-7.26(d,2H),4.46-4.43(m,1H),4.41-4.38(m,1H)，3.58-3.55(m，1H),3.33(s,3H),3.08-3.05(m，1H),3.02-2.99(m,1H),2.93-2.89(m,1H),2.81-2.79(m,1H)，2.15-2.09(m，2H)，1.87-1.84(m,3H)，1.58-1.55(m，1H),1.39陽1.36(m,2H)，1.11-1.09(m,2H)，0.80(s，3H)，0.78(s，3H)。MS(ESI)780.2(M+)。權(quán)利要求1.式I的化合物或其藥學(xué)可接受鹽，其中X和Y獨(dú)立地選自(1)C1-3烷基，(2)鹵素，和(3)C1-3烷氧基；Z是N或N+O-；R1選自(1)氫，(2)C1-10烷基，(3)-(C1-10烷基)-芳基，(4)-(C1-10烷基)-O-C1-10烷基，(5)-(C1-10烷基)-OC(O)-C1-10烷基(6)-(C1-10烷基)-OC(O)-芳基，和(7)-(C1-10烷基)-OC(O)O-C1-10烷基；其中烷基任選地被1-3個獨(dú)立選自Ra的取代基取代并且芳基任選地被1-3個獨(dú)立選自Rb的取代基取代；R2是氫或甲基；R3和R4獨(dú)立地選自(1)氫，(2)C1-10烷基，(3)-ORd，(4)-NRdRe，(5)-NRdS(O)mRe，(6)-NRdC(O)Re，(7)-NRdC(O)ORe和(8)-NRdC(O)NRdRe，其中烷基任選地被1-4個獨(dú)立選自Ra的取代基取代；或R3和R4與它們所連的碳原子一起構(gòu)成含有0-2個附加雜原子的5-7員單環(huán)，所述附件雜原子選自O(shè)、S和N-Rh，該環(huán)任選地被1-4個獨(dú)立選自Rc的取代基取代；R5選自(1)C1-10烷基，和(2)芳基；R6選自(1)氫，(2)鹵素，和(3)-ORd；Ra選自(1)-ORd，(2)-NRdS(O)mRe，(3)-NO2，(4)鹵素，(5)-S(O)mRd，(6)-SRd，(7)-S(O)2ORd，(8)-S(O)mNRdRe，(9)-NRdRe，(10)-O(CRfRg)nNRdRe，(11)-C(O)Rd，(12)-CO2Rd，(13)-CO2(CRfRg)nCONRdRe，(14)-OC(O)Rd，(15)-CN，(16)-C(O)NRdRe，(17)-NRdC(O)Re，(18)-OC(O)NRdRe(19)-NRdC(O)ORe，(20)-NRdC(O)NRdRe，(21)-CRd(N-ORe)，(22)CF3，(23)-OCF3，(24)C3-8環(huán)烷基，和(25)雜環(huán)基；其中環(huán)烷基和雜環(huán)基任選地被1-3個獨(dú)立選自Rc的基團(tuán)取代；Rb選自(1)選自Ra的基團(tuán)，(2)C1-10烷基，(3)C2-10鏈烯基，(4)C2-10鏈炔基，(5)芳基，和(6)-(C1-10烷基)-芳基，其中烷基、鏈烯基、鏈炔基和芳基任選地被1-3個獨(dú)立選自Rc的基團(tuán)取代；Rc是(1)鹵素，(2)氨基，(3)羧基，(4)C1-4烷基，(5)C1-4烷氧基，(6)芳基，(7)-(C1-4烷基)-芳基，(8)羥基，(9)CF3，(10)OC(O)C1-4烷基，(11)-CN，和(12)-SO2C1-10烷基；Rd和Re獨(dú)立選自氫、C1-10烷基、C2-10鏈烯基，C2-10鏈炔基，Cy和Cy-C1-10烷基，其中烷基、鏈烯基、鏈炔基和Cy任選地被1-4個獨(dú)立選自Rc的取代基取代；或Rd和Re與其所連的原子一起構(gòu)成含有0-2個附加雜原子的4-7員雜環(huán)，所述附加雜原子獨(dú)立地選自O(shè)、S和N-Rz；其中該環(huán)任選地被1-4個獨(dú)立選自Rc的取代基取代；Rf和Rg獨(dú)立選自氫，C1-10烷基，Cy和Cy-C1-10烷基；或Rf和Rg與其所連的碳一起構(gòu)成含有0-2個雜原子的5-7員環(huán)，所述作用下獨(dú)立地選自氧、硫和氮；Rh選自Rf和-C(O)Rf；Cy選自環(huán)烷基，雜環(huán)基，芳基和雜芳基；各個m獨(dú)立地是0、1或2；和各個n獨(dú)立地是1、2、3或4。2.權(quán)利要求l所述的化合物，其中X和Y之一是卣素且另一選自鹵素、Cl-3烷基和C1-3烷氧基。3.權(quán)利要求2所述的化合物，其中X和Y之一是氯且另一者是氯或曱氧基。4.權(quán)利要求3所述的化合物，其中X和Y分別是氯。5.權(quán)利要求l所述的化合物，其中R'選自氫，Cw烷基，-(Cw烷基)OC(O)-C"4烷基，和-(C"4烷基)OC(0)-CV4烷基。6.權(quán)利要求l所述的化合物，其中R'是氫。7.權(quán)利要求l所述的化合物，其中W是CM烷基。8.權(quán)利要求1所述的化合物，其中113是氳和！^是NRdRe。9.權(quán)利要求1所述的化合物，其中R是NRdRe和W是氫。10.權(quán)利要求1所述的式Ia的化合物或其藥學(xué)可接受鹽，其中Z是N或N+0-;R'選自氫，Cw。烷基，-(Cy烷基)-芳基，-(CV4烷基)-0-C,-4烷基,和-(CV4烷基)-OC(0)-Cw烷基；和Rs選自C^烷基和笨基。11.權(quán)利要求l所述的化合物，選自下列其中Rt是H或乙基，和其藥學(xué)可接受鹽。12.權(quán)利要求1所述的式Ib的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>或其藥學(xué)可接受鹽，其中Z是N或N+0—;R'是選擇的氫和&_4烷基；R"選自C^烷基和苯基；和R3是氫和R4是NRdRe或R3是NRd『和R4是氫。13.權(quán)利要求12的化合物，其中W或R"之一是氫并且R"或R'的另一者選自C^烷基氨基，C3—6環(huán)烷基氨基和其中k是0-3。14.權(quán)利要求13的化合物，其中R或R"之一是氫且R或R4的另一者選自環(huán)丁基氨基，叔丁基氨基和哌啶子基。15.權(quán)利要求1所述的化合物選擇(R,S,S)-N-(N-[(3-甲基磺酰基苯)磺?；鵠-4(R)-環(huán)丁基氨基-(L)-脯氨酰基)-4-[(3',5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸，乙酯；(R,S,S)-N-(N-[(3-甲基磺?；?磺?；鵠-4(R)-環(huán)丁基氨基-(L)-脯氨酰基)-4-[(3',5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸；>^{^[(3-曱基磺?；?磺酰基]-3(8)-叔-丁基氨基-(10-脯氨?；鶀-4-[(3',5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸，乙酯；>4-{^[(3-曱基磺酰基苯)磺?；鵠-3-叔丁基氨基脯氨?；鶀-4-[(3',5'-二氯-異煙酰基)氨基]-(L)-苯基丙氨酸；(8凡3,8)-:^-{^[(3-甲基磺酰基苯)磺?；鵠八氫異吲哚-1-羧基}-4-[(3',5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸，乙酯；(S,R,S,S)-N-(N-[(3-甲基磺酰基苯)磺?；鵠八氫異吲哚-l-羧基卜4-[(3',5'-二氯-異煙酰基)氨基]-(L)-苯基丙氨酸；(S,R,S,S)-N-(N-[(3-苯基磺酰基苯)磺?；鵠八氫異吲哚-l-羧基)-4-[(3',5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸，乙酯；(S,R,S,S)-N-{N-[(3-苯基磺?；?磺酰基]八氫異吲哚-l-羧基}-4-[(3'，5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸；N-(N-[(3-曱基磺?；?磺?；鵠-4(R)-哌啶子基-(L)-脯氨酰基)-4-[(3',5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸，乙酯；N-{N-[(3-曱基磺?；?磺?；鵠-4(R)-哌啶子基-(L)-脯氨?；鶀-4-[(3',5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸；N-(N-[(3-曱基磺?；?磺酰基]-4(R)-3,3-二曱基哌啶子基-(L)-脯氨?；鶀-4-[(3',5'-二氯-異煙酰基)氨基]-(L)-笨基丙氨酸，乙酯；和N-(N-[(3-甲基磺?；?磺?；鵠-4(R)-3,3-二甲基哌啶子基-(L)-脯氨?；鶀-4-[(3',5'-二氯-異煙?；?氨基]-(L)-苯基丙氨酸，或上述的藥學(xué)可接受鹽。16.—種藥學(xué)組合物，其中含有治療有效量的權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)可接受鹽和藥學(xué)可接受載體。17.權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)可接受鹽在制備用于治療或預(yù)防通過細(xì)^>粘著介導(dǎo)的疾病的藥物中的應(yīng)用。18.權(quán)利要求17的應(yīng)用，其中該疾病選自哮喘，多發(fā)性硬化癥，炎性腸病，慢性阻塞性肺病，鐮狀細(xì)胞性貧血，白細(xì)胞，多發(fā)性骨髓瘤和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。19.一種預(yù)防哺乳動物中VLA-4的作用的方法，該方法包括給該哺乳動物施用治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。全文摘要本發(fā)明的取代的N-[N-(磺?；交?磺?；?脯氨?；鵠-苯基丙氨酸衍生物是VLA-4的拮抗劑并有效治療、預(yù)防和抑制由VLA-4結(jié)合和細(xì)胞粘著和活化介導(dǎo)的疾病。此外，本發(fā)明的化合物被證實(shí)在口服給藥后具有明顯的VLA-4攜帶細(xì)胞的受體占據(jù)作用并適合每天口服給藥1-、2-或3次。本發(fā)明還涉及含有此類化合物的組合物和使用這些化合物的治療方法。文檔編號A61K31/40GK101163472SQ200680013080公開日2008年4月16日申請日期2006年4月17日優(yōu)先權(quán)日2005年4月21日發(fā)明者C·瓊斯,T·S·雷格爾,平劉申請人:默克公司