專利名稱：：替莫唑胺的單位劑型的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及替莫唑胺的單位劑型。這些單位齊趣尤其有禾盱降低藥片的含藥量并增強(qiáng)患者的順從性。本發(fā)明還涉及用這些單位劑型治療患者的增殖性病變的方法。本發(fā)明還涉及包含這些單位劑型的藥盒。
背景技術(shù)：
：腦瘤占所有惡性疾病的近2%。Stupp等，Clin.Onc.,20(5):1375-1382(2002)。在美國每年有至少17,000例被診斷出患有腦瘤，而近13,000例隨后死亡。治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤的標(biāo)準(zhǔn)療法包括在可行時，通過手術(shù)切除進(jìn)行的癌細(xì)胞減滅術(shù)，隨后進(jìn)行方媳治療(RT)并伴隨或不伴隨輔助的化學(xué)治療。Stupp等，同上。被準(zhǔn)許用于治療腦瘤的一種化學(xué)治療劑是替莫唑胺(ScheringCoip.在美國商品名為Temodar,在歐洲為Temodaf)。替莫唑胺的化學(xué)名為3,4-二氫-3-甲基-4-氧代咪唑并[5,l-d]-as-四舉8-甲醐安(參見U.S.專利No.5,260,291)。替莫嘲安或其代謝產(chǎn)物MTICO甲基-(三氮烯-l-蜀咪唑4-醐安的細(xì)胞毒性，被認(rèn)為主要由DNA的烷基化產(chǎn)生。烷基化(甲基化)主要發(fā)生于鳥嘌呤的06和1^7位上。目前Temoda^膠囊在美國用于治療新近被診斷患有多形性膠質(zhì)細(xì)胞瘤以及難以治愈的變性星形細(xì)胞瘤的患者，即，處于第一次復(fù)發(fā)并且^ffi包含亞硝脲和甲節(jié)肼的藥物療法時疾病仍難以控制的患者。目前Temodaf在歐洲被批準(zhǔn)用于治療患有惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤的患者，例如新近診斷出患有多型性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤或變性星型細(xì)胞瘤的患者以及標(biāo)準(zhǔn)療法后復(fù)發(fā)或惡化的患者。用替莫唑胺治療患裕中經(jīng)膠質(zhì)瘤患者的典型療&^含兩個階段，伴隨階段和其后的維持階段。在伴隨階段中，患者以75mg/m、體表面積(BSA)為1.8-1.9m2的患者為近140mg)的劑量口服替莫嘲安42天并伴隨RT。賺l。伴隨階段結(jié)束四周后，患者將進(jìn)行6周期的維持階段。在維持階段的第一期，以150mg/m2(BSA為1.8-1.9m2的患者為約280mg)的齊U魏天一次施用替莫鵬，共5天，之后的23天不進(jìn)行任何治療。在之后的每一期的頭5天，替莫嗍安的齊糧可提高至200mg/m2(BSA為1.8-1.9m2的患者為約360mg)。目前，替莫嗍安的膠囊制劑包含5、20、100或250mg的替莫唑胺。假設(shè)治療劑量為150mg/m2，BSA為1.8-1.9m2的患者每天需要施用4粒膠囊(l*250mg，P20mg和245mg)達(dá)到約280mg替莫f^l安劑量。見表2。如此高的給藥量導(dǎo)致患者在需要自己服藥替莫唑胺的治療中順從性很差，因此不能達(dá)到藥物最佳的治療效果。可影響患者自己施用適當(dāng)數(shù)量藥丸的順從性的其它因素有，治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤療法的強(qiáng)度，包括腦手^^RT。此外，患者為了織軍手術(shù)或RT的副作用，或治療7M^其它不相，癥所不得不施用的其它附加藥物的數(shù)量會進(jìn)一步增加本來就高的給藥量。此外，由于如此密集的治療，患者有認(rèn)知力減退和神經(jīng)狀態(tài)缺乏抵抗力的風(fēng)險(xiǎn)。因此，需要改進(jìn)替莫嘲安單位劑型。改進(jìn)了的齊糧形式a繊少給藥量并增加患者的順從性。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>*100mg/m2每日維持階段的患者的目前最小劑量。表2基于成人日劑量所建議目前可得到的膠囊組合以濃度計(jì)每日膠囊數(shù)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>水平或MGMT蛋白的酶活性來制定。在其它的實(shí)施方式中，給藥方案依據(jù)從患者獲取的樣本中MGMT的信使RNA的存在(或水平)來制定。本發(fā)明還提供包含這些單位劑型的藥盒。在一些實(shí)施方式中，藥盒包含兩種單位齊趣。在一些實(shí)歸式中，藥盒進(jìn)一步包含一種或多種包含約5、20或100mg替莫嗍安的單位劑型。在一些實(shí)敲式中，藥盒為泡罩包裝。發(fā)明詳述為了更好地理解本發(fā)明，下文進(jìn)行詳細(xì)描述。、除非另有說明，本文中所有專業(yè)和禾根術(shù)語所具有的含義與本發(fā)明所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員普遍理解的含義相同。盡管與本發(fā)明描述相似或等效的方法和材料可用于實(shí)現(xiàn)或測試本發(fā)明，但是將在下面描述合適的方法和材料。材料，方法和實(shí)施例僅為說明，而不作為對本發(fā)明的限制。本文提到的所有出版物、專利和其它文獻(xiàn)均全文弓l入作為參考。為了進(jìn)一步定義本發(fā)明，提供一下術(shù)語和定義。術(shù)語"藥學(xué)上可接受的載體或輔料"指沒有毒性、可與替莫嗍安一起施用于患者，且不會破壞其藥理活性的載體或輔料。術(shù)語"顏色標(biāo)記的膠囊"指膠囊的任意部分或齡膠囊是著色的，并M色4樣某M寺船義，例如，某個給定的膠囊顏色fW替莫唑胺的一個具體齊糧。術(shù)語"處理"或'治疔'指Mg或,哺孚L動物，例如人的細(xì)胞增殖性病癥癥狀，或改善細(xì)胞增殖性病癥的可確定手段。術(shù)語"患者"指動物，包括哺乳動物(例如人)。術(shù)語"增殖性病癥'可以是腫瘤。該腫瘤是良性的或者惡性的。術(shù)語"腫癥指細(xì)胞新近的不正常生長，或復(fù)制比普通細(xì)胞決的不正常細(xì)胞的生長。腫瘤形成無組織的腫塊(腫瘤)，為良性或惡性的。術(shù)語"良使'指月中瘤是非癌的，例如其細(xì)胞不會侵入周圍組織a移到遠(yuǎn)的部位。術(shù)語"惡性"指腫瘤是癌性的、轉(zhuǎn)移性的，侵入周圍組織或不再受正常細(xì)胞生長控制。術(shù)語"腦癤'包括神經(jīng)膠質(zhì)瘤(glioma)、多型性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、室管膜細(xì)胞瘤；星型細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤(neuroglioma)、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤和腦膜瘤。術(shù)語"樣本"指可以從正常或腫瘤組織、腦組織、腦脊液、血液、血漿、血清、尿、糞便、唾液淋巴、淋巴結(jié)、脾、肝臟、骨髓或任何其它生物標(biāo)本中獲得或分離出來的，含有MGMT蛋白或MGMT基因的核酸的樣品。術(shù)語'TV[GMT"指C)6-甲基鳥嘌呤-DNA甲,移酶。MGMT也稱為06-烷基鳥嘌呤-DNA烷S^專移酶(AGAT)。術(shù)語"GM-CSF"指這樣的蛋白，其(a)具有和Lee等，Proc.Natl.AcadSci.U.SA,82:4360(1985)中描述的成熟(即缺乏信號肽)人GM-CSF的序列基本上相同的氨基酸序列，(b)并且具有與天然GM-CSF相同的生物活性的蛋白。術(shù)語"基本上相同的氨基酸序歹U"指序列為相同的或區(qū)別為基本上不改變生物活性的一個或多個氨基酸變更(缺失、增加、取代)。術(shù)語"藥盒"指一個或多個容器裝有本發(fā)明的單位劑型。單位劑型本發(fā)明提供一種替莫唑胺的單位劑型，包含約140mg替莫唑胺和藥學(xué)上可接受的載體。本發(fā)明還提供一種替莫嘲安的單位劑型，包含約180mg替莫PM和藥學(xué)上可接受的載體。在一些實(shí)施方式中，該單位劑型適合口服。本發(fā)明劑量形式中可用的藥學(xué)上可接受載體包括本領(lǐng)域熟知的載體(見例如，Remington'sPharmaceuticalSciences,16Ed.,MacPublishingCompany(1980))。該藥學(xué)上可接受的載體可包括其它藥用試劑、載體、遺傳載體、輔抓賦形劑、惰性的稀釋劑、潤滑劑等等，例如人血清白蛋白或血漿制品。非水溶性載體例如確定的油類和油酸乙酯也可用于本發(fā)明。稀釋劑的例子包括碳酸藥、土豆淀粉、海藻酸和乳糖。惰性稀釋劑的例子包括潤滑劑，例如硬脂勝美。j雄地，藥學(xué)上可接受的載體為無水乳糖、膠狀二氧化硅、淀粉羥乙勝內(nèi)、酒石酸和硬脂酸。本發(fā)明的單位劑型可制備成片劑、藥丸、顆粒、可分散粉劑繊囊。tt^地，單位劑型為膠囊。在一些實(shí)施方式中，膠囊為了易于辨認(rèn)而用顏色標(biāo)記。在一些實(shí)施方式中，140mg替莫唑胺膠囊的顏色與180mg替莫膠囊不同。在一些實(shí)敲式中，每個膠囊濃頗應(yīng)一種顏色，來標(biāo)明替莫鵬的齊糧。提高患者順從性的方法。本發(fā)明的單位劑型ffl31斷氐給藥量來用于增強(qiáng)患者柳頃從性。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種ffl51給患者施用一個或多^a含約140mg或180mg替莫唑胺的單位劑型增強(qiáng)患者順從性的方法。在一些實(shí)施方式中，該方法進(jìn)一步包含給患者施用一個或多4^含約5mg、20mg或100mg替莫唑胺的單位劑型?？砂凑战o藥方案和/或給藥itfe據(jù)給患者施用單位劑型。給藥方案和i錢拔的非限制性例子見表3。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>*為三星期的周期內(nèi)接收的總劑量表3的給藥方案方案用本發(fā)明的單位齊鵬簡化。4頓本發(fā)明的單位劑M^建i^(^囊組合見表4。在表4列出的29個日劑量中，有18個本發(fā)明的建i，囊組合低于目前可得到的麟組合。見表5。尤其是，本發(fā)明的建ij^組合只在2個日劑量中有所增加(見，表2中的255mg和370mg并與表4相比)。通過簡化給藥方案法，患者的給藥量顯著斷氐。特別地，一個需要每天施用195mg替莫嘲安的患者需要施用8?，F(xiàn)有膠囊*&到治療劑量(例如，1X100mg，4X20mg和3X5mg)。見表2和5。然而，使用本發(fā)明的單位劑型，患者只需要施用4粒單位劑型(例如，lxl80mg和3x5mg)。JM4和5。另一個例子中，一個需要每天j^用280mg替莫嘲安的患者需要施用4?，F(xiàn)有膠囊制劑達(dá)到治療劑量(例如，lx250mg，lx20mg和2x5mg)。JW2和5。然而，4頓本發(fā)明的單位劑型，患者只需要施用2粒單位劑型(例如，2xl40mg)。見表4和5。在另一個例子中，一個每天需要施用380mg替莫唑胺的患者需要施用5?，F(xiàn)有膠囊制劑達(dá)到治療劑量(例如，lx250mg，lxlOOmg，lx20mg和2x5mg)。見表2禾B5。相反，該患者只需要施用3粒本發(fā)明的單位劑型(例如，2xl80mg和lx20mg)。見表4和5。表6進(jìn)一步描述了本發(fā)明的單位齊i邀是如何斷氐患者的給藥量的。如表6所示，當(dāng)患者施用本發(fā)明的單位劑型時，45個給藥方案中的有28個的膠囊數(shù)降低了。見表6。尤其是，在其余的17^合藥方案中，只有8個增加了膠囊數(shù)。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>*假設(shè)取整表5<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>但不限于，GM-CSF、G-CSF、11^1、IL-3、或紅細(xì)胞生成素。非限制性生長因子包括Epogen(紅細(xì)胞生成素alfa)、Procrit(紅細(xì)胞生成素alfe)、Neupogen(filgrastim,人G-CSF)、Aranesp(過糖基化重組darbepoetinalfa)、Neulasta(商品名也為Neupopeg，pegylated重組filgrastim,pegfilgrastim)、Albupoietin，(長效紅細(xì)胞生成素)和Albugraiiii^(白蛋白G-CSF，長效G-CSF)。在一些實(shí)施方式中，生長因子為G-CSF。在一些實(shí)施方式中，單位齊趣結(jié)合在治療中給藥。在一些實(shí)施方式中，單位劑型與聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)抑制齊i條^i合藥。PARP抑制劑的給藥可以在本發(fā)明所述單位劑型的給藥之前，同時或之后進(jìn)行。合適的PARP抑制劑包括但不限于CEP-6800(Cephalon;在Miknyoczki等，MolCancerTher,2(4):371-382(2003)中有描述);3-氨基苯翻安(也稱作3-AB;Inotek;在Liaudet等,BrJPharmacol,133(8):1424-1430(2001)中有描述)；PJ34(Inotek;在Abdelkarim等,InUMolMedJ(3):255-260(2001)中有描述)；5-石^-氨基-l,2-苯并呲喃,也稱作INH(2)BP;Inotek;在Mabley等,BrJPharmacol,133(6):909-919(2001)中有描述，GPI15427(在Tentori等,IntJOncol,26(2):415國422(2005)中有描述)；1,5誦二羥基異喹畔奴也稱作DIQ;在Walisser和Thies，E鄧CellRes,251(2):401413(1999)中有描述；5-氨基異喹啉(也稱作5-AIQ;在DiPaola等,EurJPharmacol,492(2-3):203-210(2004)中有描述；AG14361(在Bryant和Helleday，BiochemSocTrans,32(Pt6):959-961(2004);Veugaer等，CancerRes,63(18):6008-6015(2003);和Veuger等，Oncogene,23(44):7322國7329(2004)中有描述)；ABT472(Abbott);INO-匪(Inotek);AAI-028(Novarits);KU-59436(KuDOS;在Farmer等,'TargetingtheDNArepairdefectinBRCAmutantcellsasatherapeuticstrategy,，Wature,434(7035):917-921(2005)中有描述)；以及那些描述在Jagt鄰等，CritCareMed，30(5):1071-1082(2002);Loh等，BioorgMedChemLett,15(9):2235國2238(2005);Ferraris等,JMedChem,46(14):3138-3151(2003);Ferraris等,BioorgMedChemL魄13(15):2513-2518(2003);Ferraris等,BioorgMedChe叫11(17):3695-3707(2003);Li和ZhangIdrugs,4(7):804-812(2001);Steinhagen等，BioorgMedChemL魄12(21):3187-3190(2002》；WO02/06284(Novartis);WO02/06247(Bayer)的內(nèi)容；已經(jīng)由MGIPhamaInc.(原來的GuildfordPhannaceutical,Inc.)開發(fā)的PARP抑制劑包括在W099/11645(在此全文引入作為參考)中描述的PARP抑制劑，包括結(jié)構(gòu)為"l,llb"二氫(l)苯并呲喃辨4,32-de)異Ptflt木-3(2H)酮"的PARP抑制劑，例如結(jié)構(gòu)為"10-(4-甲基-哌嗪)-1-基甲基>2}1-7-氧雜-l,2-二氮雜苯辨de]蒽-3-酮"的GPI15427;結(jié)構(gòu)為"2-(4-甲基-哌漆l-基)-5H國苯并[c][l，5]二M^蔡6-酮"的GPI16539;GPI21016、GPI16346和GPI18180、GPI6150、GPI18078;GPI6000以及2-苯基苯并咪唑~4-甲翻安類化合物，包括那些在WO/09524379中由Agouron/Pfizer描述的化合物，包括例如在16CI畫EROTCSymposiumNewDrugsC獄rTherapy(Amsterdam)1998Abs116;Agouron9"AACR(SanFrancisco)2000,Abs.5164包括AG-014699、AG-14361、AG14073、以及Kudos，sKU59436、KU-0687等。在一些實(shí)施方式中，單位劑型與Oe-烷基鳥嘌呤-DNA-烷基轉(zhuǎn)移酶(Atase)抑制劑例如C^節(jié)基鳥嘌呤(O^G)或在美國專利號為6,043,228中描述的Lomeguatrib[6-(4-溴-2-噻吩基)甲氧基]嘌呤-2-I旬(a.k.a.Patrin，或Patrin-2)^^合藥，以增^tit毒性。Atase抑律躋,如0&G可以在本發(fā)明單位齊趣給藥的之前，同時或之后進(jìn)fi^合藥。在一些實(shí)施方式中，單位齊鵬與抗嘔吐齊[Ji^給藥。合適的抗嘔吐齊抱括，但不限于，帕洛諾司瓊(palonosetron)&烷司瓊(tropisetron)、昂丹司瓊、格拉司瓊、貝美司瓊或戰(zhàn)至少兩種的組合。在一些實(shí)施方式中，一個單位劑量中的活性抗嘔吐物質(zhì)的量為2至10mg，特別—個單位劑量中具有5至8mg的活性物質(zhì)。日劑量通常包括活性物質(zhì)的量為2至20mg，特別4腿活性物質(zhì)的量為5至16mg。在一些實(shí)施方式中，神經(jīng)mi太-l拮抗劑(NK-1拮抗劑)例如apreptant可以單獨(dú)給藥，或者與類固醇例如地塞米松和抗嘔吐劑一起給藥。在另一些實(shí)施方式中，單位劑型可以^^蟲與NK-1對抗劑或和類固醇一起進(jìn)行齢給藥。在一個實(shí)施方式中，美國專利號為7,049,320中描述了一種或更多種NK-1拮抗劑單獨(dú)給藥或與一種或更多種5HT3抑制劑和類固醇^^合藥。在一些實(shí)施方式中，單位齊趣與法呢基(famesyl)蛋白轉(zhuǎn)移,制劑齢給藥。在其他實(shí)式中，單位劑型與其它抗腫瘤劑齢給藥。誠的抗腫瘤劑包括，但不限于，尿嘧啶芥子(mustard)、氮芥、環(huán)磷醐安、異環(huán)磷酰胺、左旋溶肉瘤素、苯丁酸氮芥、溴丙哌嗪、曲他胺、三亞乙基硫代磷翻安、白消安、卡莫司汀、羅氮芥、韋娜霉素、達(dá)卡巴嗪、甲氨蝶呤，5-繊嘧啶、M^苷、阿28糖包苷、6-巰基嘌呤、6-巰鳥嘌呤，氟達(dá)拉濱磷酸鹽(fludarabinephosphate)、pentostatine、吉西他濱(gemcitabine)、長春花鹼、長春新堿、長春地辛、博萊霉素，更生霉素、柔紅霉素、阿霉素、表柔比星、伊達(dá)比星、紫杉醇、光祌霉素、噴司他丁(deoxycofomiycin)、絲裂霉素-C、匸天門冬翻安酶、干擾素、依托泊苷、替尼泊苷、17a-炔雌醇、已烯雌酚、睪酮、強(qiáng)的松、MI5強(qiáng)的松龍、三對甲氧苯基氯乙烯、孕酮、氨魯米特、雌莫司汀、甲羥孕酮乙酸酯、醋酸亮丙瑞林(leuprolide)、氟他月安、托瑞米芬(toremifene)、戈舍瑞林(goserelin)、順鈾、卡鉬、羥基脲、安丫啶、甲節(jié)肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑、長春瑞濱(navelbene)、阿那曲唑(anastrazole)、來曲唑(letrazole)、卡培他濱(capecitabine)、雷洛昔芬(reloxafine)、屈洛昔芬(droloxafine)、六甲三聚氰胺、奧沙利鈾(oxaliplatin)(Eloxatin⑧)、iressa(gefinitib，Zdl839)、XELODA⑧(卡培他鉤、Tarceva(erlotinib)、阿扎胞苷(5-氮胞苷；5-AzaC)，以及它們的混合物。在一些實(shí)施方式中，單位劑型可以與其它抗癌劑^給藥，這些抗癌劑例如是在美國專利5，824,346、5,939,098、5,924，247、6，096,757、6,251,886、6,316,462、6,333,333、6,346,524和6,703,400中任一所述的抗癌劑，在此整體弓l用做為參考。i刺介MGMT基因甲基化程度的方法做為一種烷化劑，替莫嘲安通過結(jié)合到DNA上，在結(jié)構(gòu)上扭曲DNA的螺旋狀結(jié)構(gòu)，阻止DNA復(fù)制和翻譯，從而導(dǎo)鄉(xiāng)胞死亡。在普翻胞中，烷化劑的損害作用可以通過細(xì)胞DNA修復(fù)酶，尤其是MGMT進(jìn)行修復(fù)。MGMT水平在腫瘤細(xì)胞中是不同的，甚至在相同類型的腫瘤細(xì)胞中也是不同的。通?；蚓幋aMGMT不會變異^fi滁。更確定的，腫瘤細(xì)胞中MGMT的低7K平是由于外遺傳的修飾所造成的；MGMT助催化劑的部位是甲基化，從而抑制MGMT基因的轉(zhuǎn)錄并阻止MGMT的泰逸。美國公布號20060100188，其全文在此弓間做作參考，公開了用于治療患者癌癥的方法，包括按照改進(jìn)的齊糧給藥方案和基于患者M(jìn)GMT水平^4行替莫嘲安的給藥。在一些實(shí)施方式中，劑量給藥方案基于患者樣本中的MGMT基因甲基化程度。在一些實(shí)歸式中，M31測定MGMT基因是否甲割七來評定甲謝七程度。在其它實(shí)施方式中，通過定量測定MGMT基因的甲基化水平來評定甲基化程度。在其他實(shí)施方式中，M觀啶MGMT蛋白是否毅來評定甲割^呈度。在另外的實(shí)式中，通過測定患者樣本中MGMT蛋白表ii7K平或測量MGMT的酶活性來評定甲^4kl呈度?？梢允褂帽绢I(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法評價MGMT是否甲基化。用于測定基因或核酸甲基化的方^括，但不限于，公開在Ahrendt等,J.Natl.CancerInst.,91:332-339(1999);Belsinky等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A,95:11891-11896(1998),Clark等,NucleicAcidsRes.,22:2990-2997(1994);Herman等,ProcNatlAcadSciU.S.A.,93:9821-9826(1996);Xiong禾HLarid,NucleicAcidsRes.,25:2532-2534(1997);Eads等,Nuc.Acids.Res.,28:e32(2002);Cottrell等,NucleicAcidsRes.,32:l-8(2004)中所描述的那些方法。甲^^七特異性PCR(MSP)育,ffl3I評定事實(shí)上任何定位在CpG內(nèi)的CpG的甲基化狀態(tài)，且不4頓感甲基化限制酶。見，MSP;Herman等,ProcNatl.AcadSci.USA^93(18):9821-9826(1996);Esteller等,CancerRes.,59:793-797(1999》，同樣見美國專利號5,786,146，公開于Jul，28,1998;美國專利號6,017,704，公開于Jan.25,2000;美國專利號6,200，756，公開于Mar.13,2001;以及美國專利號6,265，171，公開于M，24,2001;美國專利號6,773,897，公開于Aug.10,2004;每一篇的全文都在此弓間做為參考。MSP測定需要亞硫酸氫鈉中DNA的原始變體，轉(zhuǎn)化所有未甲基化，但是不甲基化的胞嘧啶為尿嘧啶，然后接著放大用于對未甲基化DNA進(jìn)行甲基化的特殊起動。MSP僅需要少量的DNA，可以精確到所給CpG島位的0.1%的甲基化等位基因，并可以在內(nèi)含石蠟的樣本得到的DNA提取液中進(jìn)行。MSP消除了之前PCR基方法固有的假陽性結(jié)果，之前的PCR基方法依賴于不同的限定,裂來區(qū)別未甲割七和甲基化的DNA。這種方法非常簡單并且能用于少量的組織或細(xì)胞。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的，如果基因編碼MGMT沒有甲基化，如下所述，貝脂g夠表達(dá)且測定MGMT蛋白(例如，31Western印跡、免疫組織化學(xué)技械酶觀驚MGMT活性，等)。用于本發(fā)明實(shí)施方式中以測定患者樣本中MGMT蛋白水平的Western印跡測定的一個實(shí)施例公開于美國專利號5,817,514，Li等，在此全文弓閱做為參考。U等描述了單克隆抗體肯,特定的結(jié)合在自然人體MGMT蛋白上或具有已經(jīng)烷化的活性部位的^v體MGMT蛋白。用于本發(fā)明實(shí)施方式中以觀啶患者樣本中MGMT蛋白水平的免疫組織化學(xué)技術(shù)的一個實(shí)施例公開于美國專利號5,407,804，tt全文弓間做為參考。單克隆抗體被公開能夠特定的結(jié)合在單細(xì)胞標(biāo)本(免疫組織化學(xué)染色測定)和細(xì)胞提取液(免疫觀啶)中的MGMT蛋白上。與細(xì)胞數(shù)字化成像所所結(jié)合的可讀螢光也被公開，并且允許定量測定患者和對照試樣，包括但不限于腫瘤活組織檢Si，中的MGMT水平。可以用于測定MGMT蛋白的酶活性的技術(shù)包括但不限于下述方法Myrnes等，Carcinogenesis,5:1061-1064(1984);Futscher等，CancerComm.,1:65-73(1989);Kreklaw等,J.Pharmacol.E鄧er.Tlier.,297(2):524國530(2001);以及Nagel等,Anal.Biochem.,321(1):3843(2003)，這些文獻(xiàn)在此全文弓間。患者樣本中的MGMT蛋白表ii7jC平可以通過測定MGMT蛋白進(jìn)行評定，例如ffi31使用了MGMT特定抗體的Western印跡，例如見，美國專利號5817514。樣本中MGMT表達(dá)水平也可以ffi31在定量的患者細(xì)胞上^ffl免疫組織化學(xué)技術(shù)測定MGMT蛋白進(jìn)行評定，例如4頓一種特用于牛斜己MGMT的抗體，并與ffl51已知的用于^iiMGMT的正常淋巴細(xì)胞的相同定量進(jìn)行表達(dá)的水平相比較(例如見，美國專利號5,407,804，Yarosh著，對于所用的定量免疫組織化學(xué)技術(shù)測定的描述)。可選地，MGMT的水平可ffiil酶測定確定，例如，對DNA鳥嘌呤位置的O6或N7甲基化的能力。在這些方法中，MGMT蛋白表達(dá)的測得7K平都將與已知表達(dá)MGMT的正常淋巴細(xì)胞相比?；颊叩腗GMT蛋白7K平分級如下低度二正常淋巴細(xì)胞表達(dá)的MGMT的0-30y。；中度=正常淋巴細(xì)|達(dá)的MGMT的31-70%;以及高度=正常淋巴細(xì)胞表達(dá)的MGMT才71-300%或更高。患者的MGMT7K平分級如下:低度=正常淋巴細(xì)胞MGMT酶活性的0-30%;中度二正常淋巴細(xì)胞MGMT酶活性的31-70%;以及高度-正常淋巴細(xì)胞MGMT酶活性的71-300%或更高。MGMT的特定活性可基于與已知表達(dá)MGMT的細(xì)胞系相對照進(jìn)行刑介，分級如下低度H、于20finol/mg;中度二20-60finol/mg;或高度=大于60finol/mg;其中MGMT在LOX細(xì)胞中的特定活性為6-9finol/mg，在DAOY細(xì)胞中60-100finol/mg，在A375細(xì)胞中為80-150fino]/mg。MGMT的甲基化程度可通M編碼MGMT的基因甲基化的定量測定進(jìn)行評價。稱為COBRA(Xiong等，Nuc.AddsRes.,25:2532-2534(1997))定量技術(shù)可用于該測定。也可使用Eads等，Nuc.AcidsRes.,28(8):e32(2000);U.S.Pat.No.6,331,393中記載的"methyllight"技術(shù)。將患者細(xì)胞中編碼MGMT的基因甲基化程度與已知表達(dá)MGMT的等量正常淋巴細(xì)M行比較。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，表達(dá)MGMT的正常淋巴細(xì)胞具剤氏度的MGMT基因的甲基化水平；相反，MGMT基因甲割tl呈度高的細(xì)胞表達(dá)MGMT蛋白的水刑氐(參見例如，Costello等，J.Biol.Chem.,269(25):17228-17237(1994);Qian等，Carcinogen,16(6):1385-1390(1995))。患者M(jìn)GMT基因甲基化的程度分級如下低度=0-20%的MGMT基因啟動子區(qū)中的CpGs被甲基化；中度=21-50%的MGMT基因啟動子區(qū)中的CpGs被甲基化；高度=51-100%的MGMT基因啟動子區(qū)中的CpGs被甲基化。COBRA可用于觀啶少量基因組的DNA中特定基因部位的DNA甲基化定量程度。限律勝酶的消化作用可用于顯示用重亞硫酸鈉處理的DNA中的PCR產(chǎn)品的依賴性甲基化序列差別。(Tano等，Proc.Natl.Acad.Sci.US入87:686-690(1990)描述了AMGMT基因的分離和序列)。原始DNA樣本中的甲基化程度可通過橫跨廣itDNA甲基化程度的，表現(xiàn)為線性定量形式的消化和未消^PCR產(chǎn)品的相對值進(jìn)行表達(dá)。該技術(shù)能可靠地運(yùn)用于從嵌入石蠟的顯微解剖的組織樣品中獲得的DNA。COBRA因此可以將強(qiáng)大的應(yīng)用特征，定量精確，以及兼容性與石臘切片結(jié)合起來。Watts等，Mol.Cell.Biol.,17(9):5612-5619(1997)描述了一個用于測定MGMTmRNA水平的RT-PCR測定方法的解釋性范例。簡單地說，使用guanidium異硫氰酸鹽細(xì)胞溶解作用分離總細(xì)胞RNA，之后在205,000Xg下用5.7MCsCl梯度離心2.5小時。RNA用BeckmanTL-100分光光度計(jì)在260nm吸收處定量。在42。C下培養(yǎng)40nl反應(yīng)混合物60min實(shí)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)錄總細(xì)胞RNA，該混合物由200ngRNA;1XPCR緩沖(10mMTris[pH8.3〗，50mMKCl，1.5mMMgCl2);dATP、dCTP、dGTP和dTTP各ImM;200pmol無規(guī)六聚物，40URnasin和24U鳥成髓細(xì)胞白血病病毒逆轉(zhuǎn)錄酶(BoehringerMaimheim^Indianapolis,Ind.)組成。然后該反應(yīng)在99。C下培養(yǎng)10min停止。向20pl逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)混合物中加入80^1擴(kuò)增反應(yīng)緩沖(lxPCR緩沖，25pmolMGMT特異性引物和/或控制序列，和2UTaqDNA聚合酶)，然后在94。C下培養(yǎng)5併中完成MGMT特異性PCR;94。C下lmin，6(TC下15s，72。C下lmin，循環(huán)30次；最后在72。C下反應(yīng)5min;快速7賴卩到4。C。例如，可使用MGMT基因的外顯子4(nt665至684)的逆流弓l物序列。核苷酸的位置可由cDNA序列衍生(Tano等，Proc.Natl.Acad.Sci.US入87:686-690(1990))。對照引物序列可用于相同的cDNA反應(yīng)(例如，組蛋白3.3基因的弓l物)。為了分析的目的，用3%瓊脂糖繊交分離10%各自的PCR產(chǎn)品，并用菲啶溴紅染色?；贛GMT基因甲基化狀態(tài)治療患有神經(jīng)膠質(zhì)瘤的患者的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明的單位齊U型用于治療患有神經(jīng)膠質(zhì)瘤的患者。在一些實(shí)施方式中，給藥方案根據(jù)樣品中MGMT基因甲基化的檢測狀況制定。當(dāng)從患有神經(jīng)膠質(zhì)瘤的患者取得的樣品中檢測到MGMT基因的甲基化時，給藥方案為在28天周期中，5天每天施用150-200mg/m2。當(dāng)沒有檢觀倒甲基化時，給藥方案為(i)在21天周期中，14天每天lOOmg/m2;(iO在14天周期中，7天每天150mg/m2;或(iii)在28天周期中，21天每天100mg/m2。在一些實(shí)施方式中，樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。在一些實(shí)施方式中，使用MSP檢測MGMT基因。在其它的實(shí)施方式中，給藥方案根據(jù)MGMT蛋白是否存在而制定。在那些基于MGMT蛋白是否存在的實(shí)施方式中，當(dāng)從患有神經(jīng)膠質(zhì)瘤的患者獲取的樣本中沒有檢測到MGMT蛋白時，給藥方案為在28天周期中，5天每天150—200mgW;當(dāng)檢測到MGMT蛋白時，給藥方案選自(i)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(ii)在14天周期中，7天每天150mg/m2;或(iii)在28天周期中，21天每天100mg/m2。在一些實(shí)施方式中，樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。在一些實(shí)施方式中，使用Western印跡免疫測定、免疫組織化學(xué)技術(shù)或MGMT蛋白的酶測定來檢測MGMT蛋白。在其它實(shí)施方式中，給藥方案根據(jù)樣本中檢測到的MGMT蛋白的水平或活性來制定。當(dāng)從患者獲取的樣本中檢觀倒的MGMT蛋白的水平或酶活性與正常淋巴細(xì)胞相比為低度時，給藥方案為(i)在28天周期中，5天每天150—200mg/m2;或(ii)在28天周期中，5天每天250mg/m2，并聯(lián)合施用生長因子。當(dāng)MGMT蛋白的水平或酶活性為中度時，給藥方案為(i)在28天周期中，14天每天100mg/m2;(ii)在28天周期中，5天每天300mg/m2，并f^施用生長因子；(iii)在28天周期中，21天每天75mg/m2;或(iv)在56天周期中，42天每天75mg/m2。當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到的MGMT蛋白的水平或酶活性與正常淋巴細(xì)胞相比為高度時，給藥方,自(0在21天周期中，14天每天100mg/m2;(ii)在14天周期中，7天每天150mg/m2;或(iii)在28天周期中，21天每天100mg/m2。在一些實(shí)施方式中，樣本為腫瘤的活組織檢查樣本?；贛GMT基因甲基化狀態(tài)治療患有某種增殖性病癥的患者的方法在一些實(shí)施方式中，單位齊鵬可用于治療選自黑素瘤、肺癌、淋巴瘤、頭部癌、頸部癌、卵巢癌、翻結(jié)腸癌、結(jié)腸癌和糊癌的增殖性病癥。在一些實(shí)施方式中，給藥方案根據(jù)樣本中MGMT基因甲基化的檢測狀況而制定。當(dāng)從患者獲取的樣本中沒有檢測到MGMT基因的甲基化時，給藥方案為(1)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(ii)在14天周期中，7天每天150m^m2;或(iii)在28天周期中，21天每天100mg/m2。在一些實(shí)施方式中，樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。在一些實(shí)施方式中，使用MSP檢測MGMT基因。在其他實(shí)施方式中，給藥方案根據(jù)樣本MGMT蛋白檢測狀況而制定。當(dāng)沒有檢測到MGMT蛋白時，給藥方案選自(i)在21天周期中，14天每天lOOmg/m2;(ii)在14天周期中，7天每天150mg/m2;或(iii)在28天周期中，21天每天100mg/m2。在一些實(shí)施方式中，樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。在一些實(shí)施方式中，使用Western印跡免疫測定、免疫組織化學(xué)技械MGMT蛋白的酶測定來檢測MGMT蛋白。在其它實(shí)船式中，給藥方案根據(jù)樣本中檢觀倒的MGMT蛋白的水平或活性而制定。當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT蛋白的水平或酶活性與正常淋巴細(xì)胞相比為低度或中度時，給藥方魏自(i)在21預(yù)期中，14天每天100mg/m2;(ii)在14天周期中，7天每天150mg/m2;或(iii)在28天周期中，21天每天100mg/m2。在一些實(shí)施方式中，樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。包含本發(fā)明單位劑型的藥盒本發(fā)明單位劑型可包含于藥盒中。藥盒可以是任何本領(lǐng)域已知的常規(guī)皿或形式，用藥學(xué)上可接受的材料制成，例如紙或紙板盒，玻璃或塑料的瓶子或罐子，可重復(fù)密封的袋子(例如，裝有"補(bǔ)充紫，藥片可方i(A其它容器)，^^屬或塑料薄片，例如可將單個劑量按壓出包裝或小囊的泡罩包裝，或像信封一樣的容器，可撕開按照治療計(jì)劃取出單位齊趣。在一些實(shí)施方式中，藥盒為泡罩包裝。在其他實(shí)歸式中，藥盒可包含不止一個容器以用于裝載單個劑量形式。例如，膠囊或片齊何裝在瓶子里，而瓶子是裝在盒子里的。在一些實(shí)臟式中，藥盒是密封的。在一些實(shí)施方式中，藥盒用不透光材料制成。在一些實(shí)施方式中，藥盒包含一種或多種包含約5、20、100、140或180mg替莫幽安的單位劑型。在一些實(shí)施方式中，藥盒為泡罩包裝?？蓪⒉煌膭┝啃问揭阅z囊、片劑或藥丸的順序依次排歹贓泡罩包裝里。當(dāng)醫(yī)師作出指示時，患者可成功地在短時間內(nèi)(尤其在5辦中內(nèi))從各列中取出膠囊、片劑或藥丸。在一些實(shí)施方式中，藥盒可為FDA批準(zhǔn)的藥盒。在一些實(shí)施方式中藥盒中帶有服藥說明。藥盒還可包含裝在容器中的須失口文書，該須知為機(jī)構(gòu)建議的對制造、使用和販賣藥品規(guī)定的形式，該須知由機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)組合物產(chǎn)生以及向人M在獸醫(yī)學(xué)上給藥。該須知，例如，可標(biāo)記被美國食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)為處方藥或批準(zhǔn)的產(chǎn)品說明書。單位劑型也可制備、放置飽的容器中，并標(biāo)記適應(yīng)癥。為了更好地理解本發(fā)明，下面記載實(shí)施例。該實(shí)施例僅為了說明，不能認(rèn)為，本發(fā)明的任何方式的限定。實(shí)施例患有神經(jīng)膠質(zhì)瘤的患者加入臨床沈驗(yàn)瓶受替莫嘲安治療。以75mg/m2，150mg/m2或200mg/m2的劑量給藥，只j頓表6中目前可得到的建ijd^組合，例如5、20禾ni00mg膠囊。日齊糧按照患者的BSA計(jì)算。加入試驗(yàn)的患者BSA大多在1.8至2.0(284中的149人)之間?？疾礻P(guān)于給藥量的數(shù)據(jù)時，本發(fā)明的發(fā)明人意夕撥現(xiàn)增加了約40禾口/或180mg替莫唑胺單位劑量將有助于降低患者給藥量。見表7。如表7所示，24個可能給藥方案中的16個中，施用本發(fā)明單位齊趣的患者的給藥量有所降低。在BSA為1.8-2.0的患者中，給藥量尤其顯著降低。對于這些患者，8個可能給藥方案中的6個可降低給藥量。表7<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>權(quán)利要求1.一種替莫唑胺的單位劑型，所述劑型包含約140mg替莫唑胺和藥學(xué)上可接受載體。2.—種替莫嘲安的單位劑型，所述劑型包含約180mg替莫唑胺和藥學(xué)上可接受載體。3.如權(quán)利要求1或2所述的單位齊趣，其中制劑為膠囊。4.如權(quán)利要求3所述的單位齊趣，其中膠囊是用顏色標(biāo)記的。5.如禾又利要求4所述的單位劑型，其中140mg替莫唑胺膠囊的顏色與180mg替莫幽安膠囊不同。6.應(yīng)用一種給藥方案增加患萄頓從性的方法，所述方纟跑括給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位齊趣或其組合的步驟。7.—種治療患裕申經(jīng)膠質(zhì)瘤的患者的方法，所述方法包括給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位劑型或其組合的步驟。8.—種治療患有增麼性病癥的患者的方法，其中所述增殖性病癥選自至少一種黑素瘤、肺癌、淋巴瘤、頭部癌、頸部癌、卵巢癌、鵬結(jié)腸癌、結(jié)腸癌和癌，所述方法包括給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位劑型或其組合的步驟。9.一種治療患裕申經(jīng)膠質(zhì)瘤的患者的方法，所述方法包括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位劑型或其組合的步驟，其中給藥方織自以下(a)在28天周期中，5天每天150—200mg/m2;(b)在28天周期中，5天每天250mg/m2，并齢施用生長因子；(c)在28天周期中，14天每天100mg/m2;(d)在28天周期中，5天每天300mg/m2，并1^施用生長因子；(e)在28天周期中，21天每天75mg/m2;(f)在56天周期中，42天每天75mg/m2;(g)在28天周期中，21天每天85mg/m2;(h)在28天周期中，5天每天350mg/m2，并g施用生長因子；(i)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(j)在28天周期中，5天每天400mg/m2，并齢施用生長因子；(k)在14天周期中，7天每天150mg/m2;(1)在28天周期中，21天每天100mg/m2;(m)在28天周期中，14天每天150mg/m2;(n)每天75mg/m2;(0)在28天周期中，5天每天450mg/m2，并^施用生長因子；(p)在21娟期中，14天每天150mg/m2;(q)每天濯mg/m2;(r)在14天周期中，7天每天250m^m2，并齡施用生長因子；以及(s)在14天周期中，7天每天300mg/m2，并g施用生長因子。10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中給藥方織自以下(a)在28天周期中，5天每天150—200mg/m2;(b)在21天周期中，14天每天100mg/m2;以及(c)在14天周期中，7天每天150mg/m2。11.一種治療患有神經(jīng)膠質(zhì)瘤的患者的方法，所述方法包括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位劑型或其組合的步驟，其中給藥方織自以下(a)當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT基因的甲割七時(1)在28天周期中，5天每天150—200mg/m2;以及(b)當(dāng)從患者獲取的樣本中沒有檢測到MGMT基因的甲基化時(i)在21^ji期中，14天每天100mg/m2;(ii)在14天周期中，7天每天150mg/m2;或(iii)在28天周期中，21天每天100mg/m2。12.如權(quán)禾腰求ll所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢査樣本。13.如權(quán)利要求11所述的方法，其中^頓甲基化特異性PCR檢測MGMT基因。14.一種治療患有神經(jīng)膠質(zhì)瘤的患者的方法，所述方&^括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位劑型或其組合的步驟，其中給藥方魏自以下(a)當(dāng)從患者獲取的樣本中沒有檢測到MGMT蛋白時(i)在28天周期中，5天每天150—200mg/m2;以及(b)當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT蛋白時(i)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(ii)在14天周期中，7天每天150mgW;或(iii)在28天周期中，21天每天100mg/m2。15.如權(quán)利要求14所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。16.如權(quán)利要求14所述的方法，其中4頓Western印跡免疫測定、免疫組織化學(xué)技MMGMT蛋白的酶測定來檢測MGMT蛋白。17.—種治療患裕申鄉(xiāng)艦質(zhì)瘤的患者的方法，所述方飽括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位齊趣或其組合的步驟，其中給藥方織自以下(a)當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT蛋白的水平或酶活性與正常淋巴細(xì)胞相比為低度時(0在28天周期中，5天每天150—200mg/m2;或(11)在28湖期中，5天每天250mg/m2，并齢施用生長因子；(b)當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT蛋白的7jC平或酶活性與正常淋巴細(xì)胞相比為中度時(0在28天周期中，14天每天100mg/m2;(ii)在28天周期中，5天每天300mg/m2，并g施用生長因子；(iii)在28天周期中，21天每天75mg/m2;或(iv)在56天周期中，42天每天75mg/m2;以及(c)當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT蛋白的水平或酶活性與正常淋巴細(xì)胞相比為高度時(0在21天周期中，14天每天100mg/m2;(ii)在14天周期中，7天每天150mg/m2;或(iii)在28天周期中，21天每天100mg/m2。18.如權(quán)利要求17所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。19.一種治療患有黑素瘤的患者的方法，所述方跑括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位齊趣或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下:(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28^l期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT基因的甲基化時。20.如權(quán)利要求19所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。21.如權(quán)利要求19所述的方法，其中^[頓甲基化特異性PCR檢測MGMT基因。22.—種治療患有黑素瘤的患者的方法，所述方&^括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位齊趣或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下:(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中沒有檢領(lǐng)倒MGMT蛋白時。23.如權(quán)利要求22所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。24.如權(quán)利要求22所述的方法，其中{柳Western印跡免疫測定、免疫組織化學(xué)技MMGMT蛋白的酶測定來檢測MGMT蛋白。25.—種治療患有黑素瘤的患者的方法，所述方fe^括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位齊趣或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下:(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT蛋白的水平或酶活性與正常淋巴細(xì)胞相比為低度或中度時。26.如權(quán)利要求25所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。27.—種治療患有肺癌的患者的方法，所述方^括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位齊鵬或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT基因的甲基化時。28.如權(quán)利要求27所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。29.如禾又利要求27所述的方法，其中使用甲基化特異性PCR檢測MGMT基因。30.—種治療患有肺癌的患者的方法，所述方&^括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位齊趣或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14，期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中沒有檢測到MGMT蛋白時。31.如權(quán)利要求30所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。32.如權(quán)利要求30所述的方法，其中使用Western印跡免疫測定、免疫組織化學(xué)技MMGMT蛋白的酶測定來檢測MGMT蛋白。33.—種治療患有肺癌的患者的方法，所述方^&括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位劑型或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14^l期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT蛋白的水平或酶活性與正常淋巴細(xì)胞相比為低度或中度時。34.如豐又利要求33所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。35.—種治療患有淋巴瘤的患者的方法，所述方^&括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求l或2的單位齊趣或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;和(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT基因的甲基化時。36.如權(quán)利要求35所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。37.如權(quán)利要求35所述的方法，其中4頓甲^f七特異性PCR檢測MGMT基因。38.—種治療患有淋巴瘤的患者的方法，所述方S^括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求l或2的單位齊趣或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下:(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中沒有檢觀倒MGMT蛋白時。39.如權(quán)利要求38所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。40.如權(quán)利要求38所述的方法，其中使用Western印跡免疫測定、免疫組織化學(xué)技MMGMT蛋白的酶測定來^t測MGMT蛋白。41.一種治療患有淋巴瘤的患者的方法，所述方^&括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位齊趣或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下:(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT蛋白的水平或酶活性與正常淋巴細(xì)胞相比為低度或中度時。42.如權(quán)利要求41所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。43.—種治療患有頭頸癌的患者的方法，所述方、^括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求l或2的單位齊趣或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT基因的甲基化時。44.如權(quán)利要求43所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。45.如權(quán)利要求43所述的方法，其中使用甲基化特異性PCR檢測MGMT基因。46.—種治療患有頭頸癌的患者的方法，所述方^^括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求l或2的單位劑型或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下(a)在21天周期中，14天每天lOOmg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中沒有檢測到MGMT蛋白時。47.如權(quán)利要求46所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。48.如權(quán)利要求46所述的方法，其中4頓Western印跡免疫測定、免疫組織化學(xué)技棘MGMT蛋白的酶測定來檢測MGMT蛋白。49.一種治療患有頭頸癌的患者的方法，所述方S^括在給藥方案中給患者施用根據(jù)禾又利要求l或2的單位劑型或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下:(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14湖期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT蛋白的水平或酶活性與正常淋巴細(xì)胞相比為低度或中度時。50.如權(quán)利要求49所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。51.—種治療患有卵巢癌的患者的方法，所述方^括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求l或2的單位劑型或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14湖期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT基因的甲基化時。52.如權(quán)利要求51所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。53.如權(quán)利要求51所述的方法，其中^f頓甲基化特異性PCR檢測MGMT基因。54.—種治療患有卵巢癌的患者的方法，所述方i4^括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求l或2的單位劑型或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下:(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中沒有檢測到MGMT蛋白時。55.如l^利要求54所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。56.如1X利要求54所述的方法，其中4OTWestern印跡免疫測定、免疫組織化學(xué)技MMGMT蛋白的酶測定來檢測MGMT蛋白。57.—種治療患有卵巢癌的患者的方法，所述方fe^括在給藥方案中給患者施用根據(jù)t又利要求1或2的單位劑型或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下:(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT蛋白的7K平或酶活性與正常淋巴細(xì)胞相比為低度或中度時。58.如權(quán)利要求57所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢査樣本。59.—種治療患有直腸結(jié)腸癌和/或結(jié)腸癌的患者的方法，所述方法包括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位劑型或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下..(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150m^m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT基因的甲基化時。60.如權(quán)利要求59所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。61.如權(quán)利要求59所述的方法，其中4頓甲基化特異性PCR檢測MGMT基因。62.—種治療患有直腸結(jié)腸癌和/或結(jié)腸癌的患者的方法，所述方法包括在給藥方案中給患者施用根據(jù)豐又利要求1或2的單位劑型或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14娟期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中沒有檢測到MGMT蛋白時。63.如權(quán)利要求62所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。64.如權(quán)利要求62所述的方法，其中使用Western印跡免疫測定、免]!^且織化學(xué)技^MGMT蛋白的酶測定來檢測MGMT蛋白。65.—種治療患有割湯結(jié)腸癌和/或結(jié)腸癌的患者的方法，所述方法包括在給藥方案中給患者施用根據(jù)禾又利要求1或2的單位劑型或其組合的步驟，其中給藥方,自以下(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT蛋白的7jC平或酶活性與正常淋巴細(xì)胞相比為低度或中度時。66.如權(quán)利要求65所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。67.—種治療患有，癌的患者的方法，所述方跑括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位劑型或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下:(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100m^m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT基因的甲基化時。68.如權(quán)利要求67所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。69.如豐又利要求67所述的方法，其中fOT甲基化特異性PCR檢測MGMT基因。70.—種治療患有，癌的患者的方法，所述方fe^括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求1或2的單位齊趣或其組合的步驟，其中給藥方魏自以下:(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中沒有檢觀倒MGMT蛋白時。71.如權(quán)利要求70所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。72.如豐又利要求70所述的方法，其中使用Western印跡免^^測定、免疫組織化學(xué)技MMGMT蛋白的酶測定來檢測MGMT蛋白。73.—種治療患有賴癌的患者的方法，所述方、跑括在給藥方案中給患者施用根據(jù)權(quán)利要求l或2的單位齊趣或其組合的步驟，其中給藥方案選自以下:(a)在21天周期中，14天每天100mg/m2;(b)在14天周期中，7天每天150mg/m2;禾口(c)在28天周期中，21天每天100mg/m2;當(dāng)從患者獲取的樣本中檢測到MGMT蛋白的7jC平或酶活性與正常淋巴細(xì)74.如權(quán)利要求73所述的方法，其中樣本為腫瘤的活組織檢查樣本。75.—種包含豐又利要求1所述的單位劑型的藥盒。76.如權(quán)利要求74所述的藥盒，其中所述藥盒還包括權(quán)利要求2的單位劑型。77.—種包含權(quán)利要求2所述的單位劑型的藥盒。78.如權(quán)利要求75—77任一項(xiàng)所述的藥盒，其中藥盒還包括一種或多種包含約5、20或100mg替莫嘲安的單位劑型。79.如權(quán)利要求75—77任一項(xiàng)所述的藥盒，其中藥盒為泡罩包裝。80.肌如權(quán)利要求78所述的藥盒，其中藥盒為泡罩包裝。81.如權(quán)利要求79所述的藥盒，其中單位劑型為膠囊。82.如權(quán)利要求80所述的藥盒，其中單位劑型為麟。全文摘要本發(fā)明涉及替莫唑胺的單位劑型。這些單位劑型尤其適合降低給藥量并提高患者順從性。本發(fā)明還涉及使用這些單位劑型治療患有增殖性病癥的患者的方法。本發(fā)明還涉及包含這些單位劑型的藥盒。文檔編號A61K31/4188GK101309686SQ200780000141公開日2008年11月19日申請日期2007年6月25日優(yōu)先權(quán)日2006年6月26日發(fā)明者J·R·貝爾施,M·曼佐,S·拉馬錢德拉申請人:先靈公司