專利名稱：一種中藥組合物在制備降低水通道蛋白-4表達(dá)的藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種已知的中藥組合物在制備降低水通道蛋白-4 表達(dá)的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
水通道蛋白-4 (AQP4)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最為豐富的水通道蛋白，覆蓋超過(guò)95% 的腦毛細(xì)血管表面，在血腦屏障和腦-腦脊液屏障的星形神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞高度表達(dá)，經(jīng) 由該通道的水雙向轉(zhuǎn)運(yùn)，對(duì)維持腦內(nèi)水平衡至關(guān)重要。Venero等Venero JL,Vizuete M L， Machado A, et al Aquaporins in the central nervous system [J]. Prog Neurobiol, 2001,63(3):121-130.報(bào)道AQP-4mRNA在側(cè)腦室及中腦導(dǎo)水管的室管膜細(xì)胞、脈絡(luò) 從上皮、軟腦膜、下腦、室上核、海馬、齒狀回和小腦浦肯野細(xì)胞均有顯著表達(dá)。 石向群等石向群，楊金開，等.大鼠腦缺血在灌注損傷過(guò)程中水通道蛋白-4表達(dá)水 平的變化[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)腦血管疾病分冊(cè)，2004， 12 (2): 122-125.發(fā)現(xiàn)，AQP4主要 分布于面向毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、軟腦膜和腦室室管膜側(cè)膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞膜或足突上， 呈明顯的極性現(xiàn)象，提示AQP4分布與腦內(nèi)水分轉(zhuǎn)運(yùn)具有同向性。而分布于脈絡(luò)叢上 皮細(xì)胞和腦室管膜上皮細(xì)胞的AQP4則參與腦脊液的形成和重吸收。AQP4在腦內(nèi)分 布的多區(qū)域以及它的主要功能是參與了腦內(nèi)水的代謝。目前認(rèn)為AQP4的調(diào)節(jié)方式
有第一，AQP4的短時(shí)程調(diào)節(jié)通過(guò)蛋白質(zhì)磷酸化；第二，水通道蛋白與其膜描定
蛋白a-syntrophin的關(guān)系A(chǔ)QP4在膠質(zhì)細(xì)胞上的極性表達(dá)主要依賴于AQP4與 a-syntrophin之間的相互作用，將a-syntrophin基因敲除的大鼠進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色 發(fā)現(xiàn)，血管周圍的星形膠質(zhì)細(xì)胞AQP4表達(dá)明顯減少；第三，低氧對(duì)AQP4的調(diào)節(jié) 星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，低氧會(huì)下調(diào)AQP4mRNA蛋白質(zhì)表達(dá)，再給氧后，水通道蛋
白水平迅速恢復(fù)；第四，滲透壓對(duì)AQP4的調(diào)節(jié)；顱內(nèi)注入甘露醇可以增加大鼠皮質(zhì)
AQP4的表達(dá)。可見，AQP4在腦內(nèi)分布，廣泛參與腦內(nèi)水代謝、腦脊液的生成和重 吸收、調(diào)節(jié)滲透壓、維持和調(diào)節(jié)細(xì)胞K代謝，發(fā)揮著極其重要的功能。
腦水腫是多種腦部疾病發(fā)展到一定階段所共同經(jīng)歷的一個(gè)病理過(guò)程，往往伴隨 著腦腫瘤、腦缺血、腦出血和顱腦損傷等疾病發(fā)生。根據(jù)發(fā)生機(jī)制不同，腦水腫可 分為細(xì)胞毒性腦水腫、血管性腦水腫、間質(zhì)性腦水腫和缺血性腦水腫，其中主要的 為細(xì)胞毒性和血管源性腦水腫。多種腦部病變、如腦外傷、腦出血、腦腫瘤、腦缺血等，都可引起腦水腫。而不同的腦部病變，其引發(fā)腦水腫的機(jī)制也各不相同；相 同的是，AQP4在這些病理過(guò)程中都起著重要作用。
本申請(qǐng)人已經(jīng)申請(qǐng)了專利號(hào)為00131558.7名稱為"一種治療中風(fēng)的藥物及其生 產(chǎn)方法"、授權(quán)公告日為2003年6月11日、公開號(hào)為CN1111054C。該發(fā)明公開了 一種治療中風(fēng)的中藥制劑，其主要活性原料的組份和重量百分含量為紅參 6.05-15,8、三七8.95-10.08、當(dāng)歸5.12-8.34;雞血藤7.76-8.97、丹參8.01-11.13、紅 花5.18-8.84;銀杏葉8.87-10.11、山楂7.76-8.55、菊花5.78-6.89、石決明5.80-6,53、 何首烏7.77-8.84、石菖蒲5.03-5.74、葛根7.56-8.65。該藥物是將上述中藥原料利用 醇提、水提等現(xiàn)代制藥生產(chǎn)工藝制成膠囊劑或顆粒劑、口服液、片劑。該藥物具有 益氣活血、化瘀通絡(luò)、熄風(fēng)豁痰之功效，能抑制、消除動(dòng)脈粥樣硬化，抑制高膽固 醇與高血脂、通血脈溶血栓、抗腦血管老化等功效，主治缺血性中風(fēng)(腦梗塞)、恢 復(fù)期中經(jīng)絡(luò)之氣虛血瘀證、風(fēng)痰瘀血閉阻脈絡(luò)證，也可用于缺血性中風(fēng)急性期之早 期，.療效顯著，治療病譜寬，且標(biāo)本兼治。其藥品名稱為"腦脈泰"，由于其療效確 切，至上市以來(lái)，贏得了廣大患者的信賴。
近年來(lái)，本申請(qǐng)人繼續(xù)挖掘上述組合物的其他功效，功夫不負(fù)有心人，經(jīng)過(guò)近 年的臨床與試驗(yàn)研究，本申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)上述中藥組合物還有降低水通道蛋白-4表達(dá)的 作用，而且到目前為止，還未發(fā)現(xiàn)上述組合物降低水通道蛋白表達(dá)的報(bào)道。雖然有 上述組合物治療腦水腫的報(bào)道，但腦水腫的治療是結(jié)果，并未詳細(xì)說(shuō)明是通過(guò)哪一 個(gè)或幾個(gè)環(huán)節(jié)或靶點(diǎn)的作用而使腦水腫得到治療，亦未見上述組合物降低水通道蛋 白-4的表達(dá)而治療腦水腫的報(bào)道。
此外，水通道蛋白-4還在消化道正常胃黏膜組織中表達(dá)。"水通道蛋白-4在大腸 癌組織中的表達(dá)"(參見唐會(huì)峰等的"水通道蛋白-4在大腸癌組織中的表達(dá)"，南京 醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)，2007年ii月第27巻第11期)表明正常組織中水通
道蛋白4低表達(dá)或不表達(dá)，而腫瘤組織較癌旁表達(dá)明顯增加。"水通道蛋白與耳鼻咽 喉科疾病"(參見高曉葳等的"水通道蛋白與耳鼻咽喉科疾病"，醫(yī)學(xué)綜述2007年11 月第13巻第22期)表明水通道蛋白-4與耳鼻咽喉科疾病也有關(guān)系。本申請(qǐng)人通過(guò) 潛心研究，發(fā)現(xiàn)所述組合物還有降低水通道蛋白-4表達(dá)的作用，從而可用于治療一 些由水通道蛋白-4表達(dá)增加所引起的疾病，成為一種新的治療水通道蛋白-4表達(dá)增 加所致疾病的靶向藥物。
有鑒于此，特提出本發(fā)明
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種中藥組合物在制備降低水通道蛋白-4表達(dá)藥物中的應(yīng)用。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案
一種中藥組合物在制備降低水通道蛋白-4表達(dá)的藥物中的應(yīng)用，該藥物的主要
活性原料的組份和重量百分含量如下紅參6.05 15.8、三七8.95 10.08、當(dāng)歸 5. 12 8. 34;雞血藤7. 76 8. 97、丹參8. 01 11. 13、紅花5. 18 8. 84;銀杏葉8. 87 10. 11、山楂7. 76 8. 55、菊花5. 78 6. 89、石決明5. 80 6. 53、何首烏7. 77 8. 84、 石菖蒲5. 03 5. 74、葛根7. 56 8. 65。
本發(fā)明所述的中藥組合物在制備水通道蛋白-4表達(dá)增加所致疾病的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明所述的中藥組合物在制備治療水通道蛋白-4表達(dá)增加所致腦部病變疾病 的藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明所述的中藥組合物在制備制備治療水通道蛋白-4表達(dá)增加所致腦外傷、 腦出血、腦腫瘤或腦缺血藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明所述的中藥組合物在制備治療水通道蛋白-4表達(dá)增加所致耳鼻咽喉科疾 病藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明所述的中藥組合物在制備治療水通道蛋白-4表達(dá)增加所致大腸癌疾病藥 物中的應(yīng)用。
本發(fā)明中，所述藥物的劑型為任何一種藥劑學(xué)上所說(shuō)的劑型，優(yōu)選膠囊劑、顆 粒劑、口服液或片劑。所述藥物的制備方法可參見本申請(qǐng)人已經(jīng)申請(qǐng)了專利號(hào)為 00131558.7、名稱為"一種治療中風(fēng)的藥物及其生產(chǎn)方法"、授權(quán)公告日為2003年 6月11日、公開號(hào)為CN1111054C的發(fā)明專利。
存在于細(xì)胞膜上的AQP4，是對(duì)水有高度選擇性的細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，主要分布在 中樞神經(jīng)系統(tǒng),中腦導(dǎo)水管的室管膜細(xì)胞、大腦皮質(zhì)和腦干周圍的膠質(zhì)細(xì)胞和上皮細(xì) 胞上，是膠質(zhì)細(xì)胞與腦脊液以及血管間的水調(diào)節(jié)和轉(zhuǎn)運(yùn)的重要成分，與血腦屏障的 開放存在明顯的相關(guān)性，在腦水腫的形成過(guò)程中發(fā)揮著極為重要的作用。實(shí)驗(yàn)表明， 在正常大鼠腦內(nèi)僅有低水平AQP4蛋白表達(dá)，但在創(chuàng)傷、腦缺血缺氧時(shí)AQP4開放， 致使大量水分進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，腦水腫加重。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明所述藥物組合物可 降低AQP4的表達(dá)，從而可用于治療一些由水通道蛋白-4表達(dá)增加所引起的疾病，成 為一種新的治療水通道蛋白-4表達(dá)增加所致疾病的靶向藥物。


5圖l-A為Sham組對(duì)MCAO模型大鼠AQP4蛋白表達(dá)的影響； 圖1-B為腦脈泰大劑量組對(duì)MCAO模型大鼠AQP4蛋白表達(dá)的影響； 圖1-C為腦脈泰中劑量組對(duì)MCAO模型大鼠AQP4蛋白表達(dá)的影響； 圖1-D為腦脈泰小劑量組對(duì)MCAO模型大鼠AQP4蛋白表達(dá)的影響； 圖1-E為MCAO組對(duì)MCAO模型大鼠AQP4蛋白表達(dá)的影響； 圖2為Sham組對(duì)腦缺血再灌注大鼠超微結(jié)構(gòu)的影響； 圖3為MCAO組對(duì)腦缺血再灌注大鼠超微結(jié)構(gòu)的影響； 圖4為腦脈泰大劑量對(duì)腦缺血再灌注大鼠超微結(jié)構(gòu)的影響。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明，下述各實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而 并非對(duì)本發(fā)明的限制。
實(shí)施例1
稱取以下中藥成分(單位g):
紅參6 三七9.0 當(dāng)歸5.5 雞血藤7.8 丹參8.5
紅花5.5 銀杏葉9.0山楂7.8 菊花6.0 石決明5.9
何首烏7.5 石菖蒲5.1 葛根7.6
其生產(chǎn)步驟為
1、 取紅參4g，三七6g，粉碎，過(guò)80目篩，滅菌得中間產(chǎn)品A;
2、 剩余的紅參2g，三七3g與銀杏葉9.0g，丹參8.5g用4倍量70。/。的乙醇回流 提取2小時(shí)，醇提液回收乙醇得中間產(chǎn)品B;
3、 醇提部分的藥渣與當(dāng)歸5.5g、雞血藤7.8g、紅花5.5g、山楂7.8g、菊花6.0g、 石決明5.9g、何首烏7.5g、石菖蒲5.1g、葛根7.6g等九味藥材一起加5倍量 水提取兩次，每次2小時(shí)，得提取液，與B部分混合，濃縮，得流浸膏，噴 霧干燥，得中間產(chǎn)品干膏C;
4、 取中間產(chǎn)品A、 C，混合制粒，用膠囊分裝，再用鋁箔包裝得成品，產(chǎn)品名 稱為"三金腦脈泰膠囊"。
實(shí)施例2
稱取以下中藥成分(單位g):
紅參8 三七IO 當(dāng)歸6 雞血藤8.2 丹參9.2
紅花5.8 銀杏葉9.5山楂8.1 菊花6.6 石決明6.6
何首烏8.0 石菖蒲5.5 葛根7.9其生產(chǎn)步驟為
1、 取全部紅參8g，三七10g與銀杏葉9.5g，丹參9.2g用4.5倍量60%的乙醇回
流提取2小時(shí)，醇提液回收乙醇得中間產(chǎn)品B,;
2、 醇提部分的藥渣與當(dāng)歸6g、雞血藤8.2g、紅花5.8s、山楂8.1g、菊花6.6g、 石決明6.6g、何首烏8.0g、石菖蒲5.5g、葛根7.9g等九味藥材一起加8倍量 水提取兩次，每次2小時(shí)，得提取液，與Bi部分混合，濃縮，得相對(duì)密度 為1.05 1. 20/55-60。C的流浸膏C1;
3、 取中間產(chǎn)品流浸膏d，與適量輔料混合制粒，分裝，包裝得成品，產(chǎn)品名稱 為"三金腦脈泰顆粒"。
實(shí)施例3
稱取以下中藥成分(單位g)-
紅參IO 三七8 當(dāng)歸7 雞血藤8.5 丹參10.2
紅花6.5 銀杏葉IO山楂8.2 菊花6.5 石決明6.2
何首烏8.5 石菖蒲5.3 葛根8.3
其生產(chǎn)步驟為
1、 取全部紅參10g，三七8g與銀杏葉10g，丹參10.2g用7倍量50%的乙醇回 流提取2 3小時(shí)，醇提液回收乙醇得中間產(chǎn)品B2;
2、 醇提部分的藥渣與當(dāng)歸7g、雞血藤8.5g、紅花6.5g、山楂8.2g、菊花6.5g、 石決明6.2g、何首烏8.5g、石菖蒲5.3g、葛根8.3g等九味藥材一起加8倍量 水提取兩次，每次2小時(shí)，得提取液，與B2部分混合，濃縮，得相對(duì)密度 為1.05 1. 20/55-60。C的流浸膏C2;
3、 取中間產(chǎn)品流浸膏C2，與適量糖槳或蜂蜜混勻，滅菌，分裝，再滅菌，包裝 得成品，產(chǎn)品名稱為"三金腦脈泰口服液"。
實(shí)施例4
稱取以下中藥成分(單位g):
紅參8.0 三七9.0 當(dāng)歸5.8 雞血藤8.0 丹參8.8
紅花5.6 銀杏葉9.2山楂8.1 菊花6.2 石決明6.3
何首烏7.8 石菖蒲5.5 葛根7.8
其生產(chǎn)步驟為
1、 取紅參5g，三七5g，粉碎，過(guò)80目篩，滅菌得中間產(chǎn)品A3;
2、 剩余的紅參3g，三七4g與銀杏葉9.2g，丹參8.8g用5倍量70%的乙醇回流 提取2-3小時(shí)，醇提液回收乙醇得中間產(chǎn)品B3;3、 醇提部分的藥渣與當(dāng)歸5.8g、雞血藤8.0g、紅花5.6g、山楂8.1g、菊花6.2g、 石決明6.3g、何首烏7.8g、石菖蒲5.5g、葛根7.8g等九味藥材一起加5倍量 水提取兩次，每次2小時(shí)，得提取液，與B3部分混合，濃縮，得流浸膏， 噴霧干燥，得中間產(chǎn)品干膏C3; —
4、 取中間產(chǎn)品A3、 C3，混合制粒，壓片，包裝，得成品，產(chǎn)品名稱為"三金腦 脈泰片"。
下面本申請(qǐng)人將通過(guò)具體的藥效學(xué)試驗(yàn)對(duì)該中藥組合物具有降低水通道蛋白-4 表達(dá)的用途進(jìn)行說(shuō)明。腦脈泰對(duì)局灶性腦缺血大鼠腦含水量、EB含量和AQP-4陽(yáng)性細(xì)胞率的影 響
(一)試驗(yàn)材料和方法
1、 材料
(1) 藥品與試劑
腦脈泰膠囊 桂林三金藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)060801，規(guī)格0.5g/粒， 含生藥材1.865g。
尼莫地平 山西亞寶藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，批號(hào)國(guó)藥準(zhǔn)字H14022821
號(hào)，規(guī)格20mg/片。
AQP4免疫組化染色兔抗AQP4多克隆抗體及免疫組化二抗染色試劑盒(正常山 羊血清，SABC，生物素化山羊抗兔IgG，抗原修復(fù)液)及DAB顯色試劑盒均購(gòu)于 武漢博士德公司。
(2) 動(dòng)物
Sprague Dawley大鼠，體重(280±20) g，清潔級(jí)，購(gòu)自中南大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部。
(3) 主要儀器設(shè)備
電子天平(型號(hào)JY3002型)，高速低溫離心機(jī)(日本生產(chǎn)，型號(hào)SCR20BC)， LKB公司8800型超薄切片機(jī)，日立H-600透射電鏡。Nikon ECLIPSE E600全自動(dòng)
圖像分析系統(tǒng)。
2、 方法 (1)分組
60只SD大鼠，隨機(jī)分成6組(n-10):假手術(shù)組(sham-operation)、腦缺血再 灌注模型組(middle cerebral artery occlusion, MCAO)、腦脈泰(2.24、 1.12、 0.56g 'kg")
8組((MCAO+NaoMaiTai)和尼莫地平組(MCAO+nimodipine 10mg kg")。腦缺血 再灌注模型腦脈泰組和尼莫地平組大鼠MCAO前五天，每天兩次灌胃給于腦脈泰 2.24、 1.12、 0.56g kg—1體重；尼莫地平組每天兩次灌胃給于尼莫地平lOmg'kg" 體重。大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO) 90分鐘，再灌注24小時(shí)。
(2) 局灶性腦缺血再灌注模型制作 按Longa法制作大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型大鼠稱重，腹腔注射體積
分?jǐn)?shù)10%水合氯醛3 ml kg"麻醉，做頸部正中切口，暴露右頸總動(dòng)脈、頸外動(dòng)脈 和頸內(nèi)動(dòng)脈，在頸外動(dòng)脈距其始端約2mm處做一小切口，用一端烤成小球形的3-0尼 龍線小球端經(jīng)切口處插入頸外動(dòng)脈，再經(jīng)頸內(nèi)動(dòng)脈至大腦中動(dòng)脈始端，栓塞大腦中 動(dòng)脈，造成局灶性腦缺血大鼠腦缺血90分鐘后，拔出尼龍線，恢復(fù)腦組織供血。 假手術(shù)組大鼠在尼龍線小球端插入至大腦中動(dòng)脈始端后，立即拔出實(shí)驗(yàn)過(guò)程中維 持直腸溫度在37'C。
(3) 組織處理
于腦缺血再灌注24h后，用10%水合氯醛麻醉大鼠，打開胸腔，于右心耳部剪 一小口，從左心室插入導(dǎo)管至主動(dòng)脈，向主動(dòng)脈內(nèi)緩慢注入37'C肝素化的生理鹽水 200ml，至右心房流出液變清亮，然后注入4%的多聚甲醛磷酸鹽緩沖液350ml,灌流 固定30min后，斷頭取腦，放入相同固定液中固定72h。經(jīng)梯度酒精脫水、二甲苯透 明、浸蠟、包埋，以視交叉和其后4mm處冠狀切片，片厚4iam。載玻片經(jīng)DEPC處 理。AQP4免疫組化染色兔抗AQP4多克隆抗體及生物素化羊抗兔IgG及DAB顯色 劑均購(gòu)于武漢博士德公司。采用SABC法染色，嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。根 據(jù)大鼠腦缺血半暗帶的定位方法，將大腦中動(dòng)脈阻塞的同側(cè)額頂葉皮質(zhì)上部界定為 半暗帶的等值區(qū)。陽(yáng)性為棕黃色或棕褐色，呈顆粒狀，背景呈紫藍(lán)色。AQP4陽(yáng)性物 質(zhì)位于胞質(zhì)，采用Nikon ECLIPSE E600全自動(dòng)圖像分析系統(tǒng)，在400倍的視野下， 隨機(jī)選取5個(gè)視野，計(jì)數(shù)AQP4免疫反應(yīng)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。
(4) 腦組織EB含量測(cè)定
各組動(dòng)物均于處死前15min經(jīng)舌下靜脈注射2XEvance藍(lán)染料2ml/kg。在深麻 下開胸，由左心室插管至主動(dòng)脈，剪開右心房，10min內(nèi)經(jīng)插管灌注生理鹽水150ml。 斷頭后取部分腦組織，精確稱濕重，投入中號(hào)試管，加3ml甲酰胺，加蓋于37'C水 浴箱孵育48h后搖勻，3000r/min離心15min，取上清液在721紫外分光光度計(jì)上測(cè) 光密度(A: 632 nm)。按公式計(jì)算腦組織EB含量腦組織EB含量(pg/g腦組織)=A x甲酰胺量(ml) +腦濕重^)。式中A為根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程求得的樣品EB含量。
(5) 腦組織含水量的測(cè)定腦組織取材同上。取材完畢，將腦組織放在烘烤過(guò)的玻片上，精確稱濕重，放 入烤箱中烘干(IIO'C， 24 h)，取出并稱干重。
腦組織含水量(％) = (1—腦組織干重/腦組織濕重)xioo% (6)電鏡標(biāo)本制作及觀察
樣品經(jīng)2%多聚甲醛+2.5%戊二醛前固定，1%鋨酸后固定，O.IMPBS漂洗，丙 酮各級(jí)脫水(50， 70, 90， 100%)， Epon812環(huán)氧樹脂包埋劑包埋與100%丙酮1: 1 比例浸泡，包埋劑浸泡包埋，LKB公司11800型修塊機(jī)修塊定位，LKB公司8800 型超薄切片機(jī)切片，醋酸鈾、硝酸鉛雙重染色，日立H-600透射電鏡觀察。 3、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
所有資料用X±S表示，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS11.0軟件。多組間均數(shù)比較用F 檢驗(yàn)，均數(shù)間兩兩比較用q檢驗(yàn)。 (二)結(jié)果
結(jié)果見表1所示。從表1可見，腦脈泰大劑量組、中劑量組和尼莫地平均可使 局灶性腦缺血大鼠的腦含水量、EB含量明顯減少，并與水通道蛋白表達(dá)成正相關(guān)， 與缺血模型組比較，有顯著性差異(P<0.05)。 AQP4陽(yáng)性染色主要位于星形膠質(zhì)細(xì)胞、 室管膜細(xì)胞和血管間隙。缺血組和給藥組表達(dá)強(qiáng)度明顯高于Sham組(見圖1-A—E)。 表1.腦脈泰對(duì)局灶性腦缺血大鼠腦含水量、EB含量和AQP-4陽(yáng)性細(xì)胞率的影響.
_(x±s, n=10)_
Group(g . kg-') 腦含水量(％) EBOg/g) AQP-4陽(yáng)性細(xì)胞率
Sham74 .82±0. 2110. 41±2. 302. 09±0. 81
MCAO83. 16±0. 18。。16. 63±1.96^14. 22±2. 06。。
MCAO+腦脈泰2.2476. 23±0. 25**12. 22±1. 73**5. 27±1. 21**
MCAO+腦脈泰1.1277. 19±0, 28*13. 06±2. 18*6. 79±1. 18**
MCAO+腦脈泰0.5679. 25±1. 2414. 49 ±2. 489. 25±2. 26
MCAO+nimo 10mg76 . 20±0. 22**12. 09±1. 87**5. 04±1. 33**
MCAO VS Sham: 。。P〈0. 01，MCA0+腦脈泰/尼莫地平vs MCAO: *P<0. 05**P<0.01腦脈泰對(duì)腦缺血再灌注大鼠超微結(jié)構(gòu)的影響
(一) 試驗(yàn)材料和方法 同實(shí)施例1。
(二) 結(jié)果
圖2顯示Sham組大鼠神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞核大而圓，核膜清晰，核仁明顯，線粒體 結(jié)構(gòu)完好，未見水腫。
10圖3顯示MCAO組大鼠神經(jīng)細(xì)胞變性壞死，固縮，崩解，胞質(zhì)內(nèi)多數(shù)線粒體呈 空泡樣變，水腫明顯。
圖4顯示腦脈泰大劑量組大鼠神經(jīng)細(xì)胞少數(shù)線粒體有空泡，核膜較清晰，膠質(zhì) 細(xì)胞核仁明顯，核膜有輕度凹陷，有局灶性水腫，與MCAO組比較，有明顯改善。
此外，臨床資料顯示，本發(fā)明所述的中藥組合物可用于治療水通道蛋白-4表達(dá) 增加所致腦部病變疾病，包括水通道蛋白-4表達(dá)增加所致腦外傷、腦出血、腦腫瘤 或腦缺血；本發(fā)明所述的中藥組合物還可用于水通道蛋白-4表達(dá)增加所致耳鼻咽喉 科疾病或大腸癌疾病，治療上述疾病的總有效率達(dá)到89%，療效明顯高于其他藥物， 且無(wú)明顯不良反應(yīng)和毒副作用。
權(quán)利要求
1、一種中藥組合物在制備降低水通道蛋白-4表達(dá)的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物的主要活性原料的組份和重量百分含量如下紅參6.05～15.8、三七8.95～10.08、當(dāng)歸5.12～8.34；雞血藤7.76～8.97、丹參8.01～11.13、紅花5.18～8.84；銀杏葉8.87～10.11、山楂7.76～8.55、菊花5.78～6.89、石決明5.80～6.53、何首烏7.77～8.84、石菖蒲5.03～5.74、葛根7.56～8.65。
2、 權(quán)利要求1所述的中藥組合物在制備水通道蛋白-4表達(dá)增加所致疾病的藥物中的 應(yīng)用。
3、 權(quán)利要求2所述的中藥組合物在制備治療水通道蛋白-4表達(dá)增加所致腦部病變疾 病的藥物中的應(yīng)用。
4、 權(quán)利要求3所述的中藥組合物在制備治療水通道蛋白-4表達(dá)增加所致腦外傷、腦 出血、腦腫瘤或腦缺血藥物中的應(yīng)用。
5、 權(quán)利要求2所述的中藥組合物在制備治療水通道蛋白-4表達(dá)增加所致耳鼻咽喉科 疾病藥物中的應(yīng)用。
6、 權(quán)利要求2所述的中藥組合物在制備治療水通道蛋白-4表達(dá)增加所致大腸癌疾病 藥物中的應(yīng)用。
7、 根據(jù)權(quán)利要求1-6任意一項(xiàng)所述的中藥組合物在制備降低水通道蛋白-4表達(dá)藥物 中的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物的劑型為任何一種藥劑學(xué)上所說(shuō)的劑型。
8、 根據(jù)權(quán)利要求7所述的中藥組合物在制備降低水通道蛋白-4表達(dá)藥物中的應(yīng)用， 其特征在于，所述藥物的劑型為膠囊劑、顆粒劑、口服液或片劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種中藥組合物在制備降低水通道蛋白-4表達(dá)的藥物中的應(yīng)用，所述藥物的主要活性原料的組份和重量百分含量如下紅參6.05～15.8、三七8.95～10.08、當(dāng)歸5.12～8.34；雞血藤7.76～8.97、丹參8.01～11.13、紅花5.18～8.84；銀杏葉8.87～10.11、山楂7.76～8.55、菊花5.78～6.89、石決明5.80～6.53、何首烏7.77～8.84、石菖蒲5.03～5.74、葛根7.56～8.65。所述中藥組合物對(duì)水通道蛋白-4表達(dá)增加所引起的腦部病變，如腦外傷、腦出血、腦腫瘤或腦缺血、耳鼻咽喉科疾病以及大腸癌疾病均有一定的療效。
文檔編號(hào)A61K36/88GK101653527SQ20081014751
公開日2010年2月24日 申請(qǐng)日期2008年8月20日 優(yōu)先權(quán)日2008年8月20日
發(fā)明者征 王, 鄒節(jié)明 申請(qǐng)人:桂林三金藥業(yè)股份有限公司