專利名稱：一種奧沙利鉑脂質(zhì)體及其制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物脂質(zhì)體領(lǐng)域，尤其涉及一種奧沙利鉬脂質(zhì)體及其制備方法和用 途。
背景技術(shù)：
奧沙利鉬是第三代鉬類抗癌藥，由瑞士Debi opharm公司研究開發(fā)，法國賽諾菲公 司生產(chǎn)銷售，1996年10月在法國率先上市。2004年FDA批準注射用奧沙利鉬與5-氟脲 嘧啶和亞葉酸聯(lián)合用于進展期結(jié)腸直腸癌的一線治療。現(xiàn)已上市的奧沙利鉬制劑有水針 和凍干粉針。奧沙利鉬對中晚期結(jié)腸直腸癌療效顯著，但隨著奧沙利鉬在臨床上的大量應(yīng) 用，其不良反應(yīng)也被不斷發(fā)現(xiàn)和報告。神經(jīng)毒性是奧沙利鉬最常見的劑量限制性毒性，約 85% -95%的患者在使用后發(fā)生急性短暫的神經(jīng)毒性，在劑量為130mg/m2時比85mg/m2更 常發(fā)生。使用奧沙利鉬的劑量累積到780-850mg/m2后，約10% -15%患者逐步發(fā)展為誘發(fā) 的累積性神經(jīng)毒性。此外，胃腸道反應(yīng)、骨髓抑制也是奧沙利鉬常見的不良反應(yīng)。脂質(zhì)體是一種生物相容性好的給藥系統(tǒng)，作為抗腫瘤藥物的輸送載體，可提高藥 物的腫瘤靶向性，降低藥物毒性，因此受到人們的關(guān)注。將奧沙利鉬制成脂質(zhì)體輸送至體 內(nèi)，可將藥物更好的靶向至腫瘤部位，提高藥物的抗腫瘤作用，降低其毒性反應(yīng)。奧沙利鉬為水溶性藥物，制備成脂質(zhì)體之后，包封率不高且容易發(fā)生滲漏。既要保 持脂質(zhì)體較高的包封率，又不能因此降低脂質(zhì)體中的藥物濃度，這是制備奧沙利鉬脂質(zhì)體 的一個難點。普通脂質(zhì)體進入體循環(huán)之后，會很快的被巨噬細胞識別并吞噬，以至于不能到達 腫瘤組織。制備成長循環(huán)脂質(zhì)體可避免這種吞噬，有助于實現(xiàn)藥物的腫瘤靶向。目前，制 備長循環(huán)脂質(zhì)體的一個常用技術(shù)，是在脂質(zhì)體的制備過程中加入PEG化磷脂(如聚乙二醇 2000- 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺，簡稱PEG2000-DSPE)，以使脂質(zhì)體具備長循環(huán)的功效。中國專利 200310124776. 6、200710025130. 0 和 W0/2007/099377 中公開了 奧沙利鉬長循環(huán)脂質(zhì)體，它們都采用PEG2000-DSPE使脂質(zhì)體具有長循環(huán)特性。其中 WCV2007/099377用反相膠束法提高奧沙利鉬脂質(zhì)體的包封率先將陽離子型藥物奧沙利 鉬與帶負電荷的酸性磷脂——二棕櫚酰磷脂酰甘油(DPPG)制成共軛物反相膠束，再與空白 脂質(zhì)體混合孵育，通過膜融合，將藥物_磷脂共軛物反相膠束包封于脂質(zhì)體內(nèi)，減少藥物向 外水相滲漏。該專利所采用的酸性磷脂為合成磷脂，價格昂貴；制得的藥物_磷脂共軛物反 相膠束在50°C以上才能保持穩(wěn)定，低于50°C會迅速產(chǎn)生大量沉淀；反相膠束與空白脂質(zhì)體 的膜融合過程條件苛刻，二者混合后極易產(chǎn)生沉淀。整個工藝流程的技術(shù)要求較高，普及性 不強。此外，楊美燕的博士論文《奧沙利鉬長循環(huán)熱敏脂質(zhì)體研究》采用凍融循環(huán)工藝試圖 提高脂質(zhì)體的包封率，但結(jié)果僅將包封率提高至30%，未能很好的解決包封率低的問題。因此，本領(lǐng)域迫切需要提供一種價廉、工藝簡單的制備奧沙利鉬脂質(zhì)體的方法，并 且要求所獲得的脂質(zhì)體包封率高、藥物濃度高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在提供一種奧沙利鉬脂質(zhì)體。本發(fā)明的另一個目的是提供所述奧沙利鉬脂質(zhì)體的制備方法。本發(fā)明的再一個目的是提供所述奧沙利鉬脂質(zhì)體的用途。本發(fā)明的第四個目的是提供一種含有所述奧沙利鉬脂質(zhì)體的藥物組合物。在本發(fā)明的第一方面，提供了一種奧沙利鉬脂質(zhì)體，所述奧沙利鉬脂質(zhì)體含有奧 沙利鉬，磷脂，和膽固醇；所述磷脂以其總重量計，其中磷脂酰膽堿(或稱卵磷脂，phosphatidylcholine, 簡稱PC)的重量百分含量為75-90%，磷脂酰甘油(phosphatidyl glycerols，簡稱PG)和 磷脂酸(phosphatidic acid，簡稱PA)的重量百分含量之和為10-25% ；奧沙利鉬和磷脂的重量比為1 3-20，膽固醇和磷脂的重量比為1 2-10。在另一優(yōu)選例中，以所述脂質(zhì)體的總體積計，奧沙利鉬的濃度為2_5mg/ml。在另一優(yōu)選例中，所述奧沙利鉬脂質(zhì)體的粒徑為120-140nm。在另一優(yōu)選例中，奧沙利鉬和磷脂的重量比為1 3-20。在另一優(yōu)選例中，所述奧沙利鉬脂質(zhì)體還含有聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂酰乙 醇胺(PEG2000-DSPE)；所述聚乙二醇2000-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺占總脂質(zhì)體的摩爾分數(shù) 為 5-9%。在另一優(yōu)選例中，所述奧沙利鉬脂質(zhì)體的粒徑為130-150nm。在另一優(yōu)選例中，所述的磷脂是天然蛋黃磷脂。在另一優(yōu)選例中，所述奧沙利鉬脂質(zhì)體的包封率為85-99% ；較佳地，包封率為 91-95%。本發(fā)明的第二方面，提供了一種如上所述的本發(fā)明提供的奧沙利鉬脂質(zhì)體的制備 方法，所述方法包括步驟(1)將膽固醇、磷脂和有機溶劑混合，得到有機相；(2)將奧沙利鉬和緩沖液混合，得到水相；(3)將步驟⑴和⑵得到的有機相和水相混合，得到反相膠束；和(4)除去有機溶劑得到如上所述的本發(fā)明提供的奧沙利鉬脂質(zhì)體；所述磷脂以其總重量計，其中磷脂酰膽堿(或稱卵磷脂，phosphatidylcholine, 簡稱PC)的重量百分含量為75-90%，磷脂酰甘油(phosphatidyl glycerols，簡稱PG)和 磷脂酸(phosphatidic acid，簡稱PA)的重量百分含量之和為10-25% ；奧沙利鉬和磷脂的重量比為1 3-20，膽固醇和磷脂的重量比為1 2-10 ；所述的有機溶劑選自氯仿、乙醚、或其混合。在另一優(yōu)選例中，所述緩沖液pH5. 0-7. 4。在另一優(yōu)選例中，所述緩沖液選自磷酸鹽緩沖液、檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液、或醋 酸_醋酸鈉緩沖液；酸根離子的總濃度為0. 05-1M。在另一優(yōu)選例中，所述有機溶劑是氯仿和乙醚的混合物，兩者的體積比為 1:4-4:1。在另一優(yōu)選例中，所述有機相和水相的體積比為3-10 1。在本發(fā)明的第三方面，提供了一種如上所述的本發(fā)明提供的奧沙利鉬脂質(zhì)體的用
5途，用于制備治療癌癥的藥物。在本發(fā)明的第四方面，提供了一種藥物組合物，所述的藥物組合物中含有如上所 述的本發(fā)明提供的奧沙利鉬脂質(zhì)體和藥學上可接受的載體。在另一優(yōu)選例中，所述的藥物組合物是注射制劑。據(jù)此，本發(fā)明提供了一種價廉、工藝簡單的制備奧沙利鉬脂質(zhì)體的方法，并且要求 所獲得的脂質(zhì)體包封率高、藥物濃度高。


圖1顯示了實施例11和實施例15得到的奧沙利鉬脂質(zhì)體III和長循環(huán)奧沙利鉬 脂質(zhì)體III的體外釋放情況。
具體實施例方式發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入的研究，意外地發(fā)現(xiàn)了一種與奧沙利鉬有高度親合力的、 價廉易得的磷脂，通過所述磷脂和奧沙利鉬之間的相互作用，可以得到穩(wěn)定的反相膠束組 合物，該組合物在0-40°C范圍內(nèi)可穩(wěn)定存在至少30min，便于進一步處理；同時，在制得的 反相膠束組合物的基礎(chǔ)上，采用簡單易控的工藝流程，反相膠束自發(fā)的轉(zhuǎn)變?yōu)橹|(zhì)體，避免 了條件苛刻的膜融合過程，制備得到穩(wěn)定的、具備較高濃度、高包封率的奧沙利鉬脂質(zhì)體。具體地，所述磷脂中，以該磷脂的總重量計，必需含有重量百分比為75-90% 的PC，同時，該磷脂中，以該磷脂的總重量計，其中的PG和PA的重量百分比之和必須在 10-25%。所述的磷脂優(yōu)選天然蛋黃磷脂。如本文所用，“奧沙利鉬”的結(jié)構(gòu)如式I所示 如本文所用，“天然蛋黃磷脂”是指一種從蛋黃中分離得到的混合物，其中含有磷 脂酰膽堿(或稱卵磷脂，PC)、磷脂酰甘油(PG)和磷脂酸(PA)，可以使用本領(lǐng)域常規(guī)的方法 制備得到，例如但不限于，超臨界二氧化碳從蛋黃中提取；也可以通過商業(yè)渠道獲得，例如 但不限于，Lipoid公司，Degussa公司等。優(yōu)選純度為75_90%的天然蛋黃磷脂，其中PG和 PA的重量百分含量之和為10% -25%。如本文所用，“天然蛋黃磷脂的純度”是指以其總重量計，其中PC的重量百分含量， 這也是本領(lǐng)域所常用的。在本領(lǐng)域中，如果不指明純度，一般表示天然蛋黃磷脂的純度是 99%或以上。如本文所用，磷脂酰膽堿(或稱卵磷脂，phosphatidylcholine,簡稱PC)的結(jié)構(gòu) 如式II磷脂酰甘油(phosphatidyl glycerols，簡稱PG)的結(jié)構(gòu)如式III所示，磷脂酸 (phosphatidic acid，簡稱PA)的結(jié)構(gòu)如式IV所示
如本文所用，“磷脂(phospholipid，PL)”是指具有由磷酸相連的取代基 團(含氨堿或醇類)構(gòu)成的親水頭(hydrophilic head)和由脂肪酸鏈構(gòu)成的疏水尾 (hydrophobic tail)的物質(zhì)?？梢院幸环N或一種以上所述結(jié)構(gòu)的物質(zhì)。優(yōu)選甘油磷脂 (phosphoglyceride)0奧沙利鉬脂質(zhì)體本發(fā)明提供的奧沙利鉬脂質(zhì)體含有奧沙利鉬，磷脂，和膽固醇；所述磷脂以其總重 量計，其中PC的重量百分含量為75-90%，PG和PA的重量百分含量之和為10-25% ；奧沙 利鉬和磷脂的重量比為1 3-20，膽固醇和磷脂的重量比為1 2-10。本發(fā)明提供的奧沙 利鉬脂質(zhì)體中奧沙利鉬的濃度為2-5mg/ml ；粒徑為120-140nm。本發(fā)明還提供一種可稱為長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體的奧沙利鉬脂質(zhì)體，所述脂質(zhì)體 中還含有PEG化磷脂，優(yōu)選PEG2000-DSPE ；所述PEG2000-DSPE占總脂質(zhì)體的摩爾分數(shù)為 5-9% ；所述長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體的粒徑為130-150nm。本發(fā)明提供的奧沙利鉬脂質(zhì)體或長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體的包封率為85-99% ；較 佳地，為91-95%。如本文所用，“包封率(encapsulation rate ；entrapment efficiency)，，是指月旨質(zhì) 體能包裹活性物質(zhì)(或稱藥物)的程度，脂質(zhì)體是藥物載體，包封于其中的藥量與脂質(zhì)體系 統(tǒng)(或稱系統(tǒng)，或稱脂質(zhì)體)中總藥量之百分比稱為包封率。可以通過本領(lǐng)域熟知的方法 進行測定，例如但不限于，凝膠柱層析、離心超濾法、和透析法等，通過分離和測定未包封藥 物的量，并測定脂質(zhì)體系統(tǒng)中總藥量，通過如下公式計算包封率。 0 ·，一系統(tǒng)中包封與未包封的總藥量一液體介質(zhì)中未包封的藥量100 /
系統(tǒng)中包封與未包封的總藥量Χ 0制備方法本發(fā)明提供奧沙利鉬脂質(zhì)體的制備方法，是在制備得到反相膠束組合物的基礎(chǔ) 上，通過去除其中的有機溶劑，使反相膠束自發(fā)轉(zhuǎn)變?yōu)橹|(zhì)體。反相膠束的制備方法包括以下步驟(1)將膽固醇、磷脂和有機溶劑混合，得到有機相；
(2)將奧沙利鉬和緩沖液混合，得到水相；和(3)將步驟⑴和⑵得到的有機相和水相混合，得到反相膠束。奧沙利鉬和磷脂的重量比為1 3-20 ；膽固醇和磷脂的重量比為1 2-10; 所述的有機溶劑選自氯仿、乙醚、或其混合；氯仿和乙醚的混合物中兩者的體積比為 1:4-4:1。所述緩沖液ρΗ5. 0-7. 4，濃度為0. 05-1Μ。所述緩沖液選自磷酸鹽緩沖液、檸檬 酸_檸檬酸鈉緩沖液、或醋酸_醋酸鈉緩沖液。所述有機相和水相的體積比為3-10 1。可以使用本領(lǐng)域常規(guī)的方法除去反相膠束中的有機溶劑，例如但不限于，減壓蒸 發(fā)、常壓蒸發(fā)；然后通過本領(lǐng)域熟知的方法擠出一定粒徑的脂質(zhì)體，并經(jīng)過常規(guī)手段(如透 析)去除游離藥物得到本發(fā)明提供的奧沙利鉬脂質(zhì)體。如果在轉(zhuǎn)變反相膠束的步驟(1)中 還加入PEG化磷脂，便能得到長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體。用途本發(fā)明提供的奧沙利鉬脂質(zhì)體可用于治療癌癥，可以將有效量的本發(fā)明提供的奧 沙利鉬脂質(zhì)體和藥學上可接受的載體混合得到藥物組合物。如本文所用，術(shù)語“含有”或“包括”包括了“包含”、“基本上由......構(gòu)成”、和
“由......構(gòu)成”。如本文所用，術(shù)語“基本上由......構(gòu)成”指在組合物中，除了含有必要成分或必
要組份之外，還可含有少量的且不影響有效成分的次要成分和/或雜質(zhì)。例如，可以含有甜 味劑以改善口味、抗氧化劑以防止氧化，以及其他本領(lǐng)域常用的添加劑。如本文所用，術(shù)語“有效量”是指可對人和/或動物產(chǎn)生功能或活性的且可被人和 /或動物所接受的量。如本文所用，術(shù)語“藥學上可接受的載體”指用于治療劑給藥的載體，包括各種 賦形劑和稀釋劑。該術(shù)語指這樣一些藥劑載體它們本身并不是必要的活性成分，且施 用后沒有過分的毒性。合適的載體是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的。在Remington’ s Pharmaceutical Sciences (Mack Pub. Co.，N. J. 1991)中可找到關(guān)于藥學上可接受的賦形 劑的充分討論。在組合物中藥學上可接受的載體可含有液體，如水、鹽水、甘油和乙醇。另 外，這些載體中還可能存在輔助性的物質(zhì)，如填充劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑、泡騰劑、潤濕 劑或乳化劑、矯味劑、PH緩沖物質(zhì)等。本發(fā)明優(yōu)選的藥物組合物是注射劑。使用藥物組合物時，是將安全有效量的奧 沙利鉬脂質(zhì)體或長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體施用于哺乳動物，其中該安全有效量通常至少約 100mg/m2,而且在大多數(shù)情況下不超過約400mg/m2，較佳地該劑量是約100mg/m2-350mg/m2。當然，具體劑量還應(yīng)考慮給藥途徑、病人健康狀況等因素，這些都是熟練醫(yī)師技能范圍之內(nèi) 的。本發(fā)明提到的上述特征，或?qū)嵤├岬降奶卣骺梢匀我饨M合。本案說明書所揭示 的所有特征可與任何組合物形式并用，說明書中所揭示的各個特征，可以任何可提供相同、 均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特別說明，所揭示的特征僅為均等或相似特 征的一般性例子。本發(fā)明的主要優(yōu)點在于1、本發(fā)明提供的奧沙利鉬脂質(zhì)體或長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體包封率高，載藥量高。2、本發(fā)明提供了一種簡便、價廉的奧沙利鉬脂質(zhì)體或長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體的制 備方法。下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條 件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則所有的百分數(shù)、比率、比例、或份數(shù)按
重量計。本發(fā)明中的重量體積百分比中的單位是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，例如是指在 100毫升的溶液中溶質(zhì)的重量。除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學用語與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意 義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文 中所述的較佳實施方法與材料僅作示范之用。下述實例中，奧沙利鉬購自Lipoid公司或Degussa公司，膽固醇購自國藥集團化 學試劑有限公司，PEG2000-DSPE購自Lipoid公司；下述實例中，天然蛋黃磷脂和天然大豆磷脂的純度都是以其總重量計，其中PC的
重量百分含量；下述實例中，反相膠束的穩(wěn)定性檢測方法為水相和有機相的混合物經(jīng)冰 浴超聲后，觀察是否形成澄清的單相分散體系或分散均勻的帶有乳光的分散體系 (Francis Szoka, JR. , Demetrios Papahadj opoulos, Procedure for preparation of liposomes with large internal aqueous space and high capture by reverse-phase evaporation, Proc. Natl. Acad. Sci. USA,75(1978)，4194-4198)；下述實例中，包封率的測定方法為透析法、離心超濾法下述實例中，室溫是25 °C實施例1制備穩(wěn)定的反相膠束I 制法按處方量稱取天然蛋黃磷脂(純度為90% )、膽固醇，置于茄型瓶中，加入 IOml氯仿/乙醚混合溶劑(4:1，ν/ν)使其溶解；稱取4. Omg奧沙利鉬，用醋酸-醋酸鈉 緩沖液(0.05M，pH5.0)lml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時冰浴超聲，形 成穩(wěn)定的反相膠束I，室溫下穩(wěn)定存在30min以上。實施例2制備穩(wěn)定的反相膠束II 制法按處方量稱取天然蛋黃磷脂(純度為75% )、膽固醇，置于茄型瓶中，加入 3ml氯仿/乙醚混合溶劑(1 4，ν/ν)使其溶解；稱取8. Omg奧沙利鉬，用檸檬酸-檸檬酸 鈉緩沖液(1Μ，ρΗ6. 2) Iml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時冰浴超聲，形 成穩(wěn)定的反相膠束II，室溫下穩(wěn)定存在30min以上。實施例3制備穩(wěn)定的反相膠束III 制法按處方量稱取天然蛋黃磷脂(純度為80% )、膽固醇，置于茄型瓶中，加入5ml氯仿/乙醚混合溶劑(1 4，ν/ν)使其溶解；稱取6. Omg奧沙利鉬，用磷酸鹽緩沖液 (0. 05Μ，ρΗ6. 5) Iml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時冰浴超聲，形成穩(wěn)定 的反相膠束III，室溫下穩(wěn)定存在30min以上。實施例4制備穩(wěn)定的反相膠束IV 制法按處方量稱取天然蛋黃磷脂(純度為80%)、膽固醇、PEG2000-DSPE，置于茄 型瓶中，加入5ml氯仿/乙醚混合溶劑(1 4，ν/ν)使其溶解；稱取6. Omg奧沙利鉬，用磷 酸鹽緩沖液(0. 05Μ, ρΗ6. 5) Iml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時冰浴超 聲，形成穩(wěn)定的反相膠束IV，室溫下穩(wěn)定存在30min以上。對比例1不穩(wěn)定的反相膠束1 制法按處方量稱取天然大豆磷脂(純度>99% )、膽固醇，置于茄型瓶中，加入 5ml氯仿/乙醚混合溶劑(1 4，ν/ν)使其溶解；稱取6. Omg奧沙利鉬，用磷酸鹽緩沖液 (0. 05Μ，ρΗ6. 5) Iml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時冰浴超聲，得到的反 相膠束1在室溫下迅速分層、產(chǎn)生沉淀。對比例2不穩(wěn)定的反相膠束2
制法按處方量稱取天然大豆磷脂(純度80% )、膽固醇，置于茄型瓶中，加入 5ml氯仿/乙醚混合溶劑(1 4，ν/ν)使其溶解；稱取6. Omg奧沙利鉬，用磷酸鹽緩沖液 (0. 05Μ，ρΗ6. 5) Iml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時冰浴超聲，得到的反 相膠束2在室溫下迅速分層、產(chǎn)生沉淀。對比例3不穩(wěn)定的反相膠束3 制法按處方量稱取天然蛋黃磷脂(純度50% )、膽固醇，置于茄型瓶中，加入 5ml氯仿/乙醚混合溶劑(1 4，ν/ν)使其溶解；稱取6. Omg奧沙利鉬，用磷酸鹽緩沖液 (0. 05Μ，ρΗ6. 5) Iml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時冰浴超聲，得到的反 相膠束在室溫下迅速分層、產(chǎn)生沉淀。實施例5-8分別將實施例2-5中各種物質(zhì)的用量按比例調(diào)整增加1-9倍，同樣可得到穩(wěn)定的 反相膠束V-VIII。實施例9制備奧沙利鉬脂質(zhì)體I 制法按處方量稱取天然蛋黃磷脂(純度為90% )、膽固醇，置于茄型瓶中，加入 IOml氯仿/乙醚混合溶劑(4:1，ν/ν)使其溶解；稱取4. Omg奧沙利鉬，用醋酸-醋酸鈉 緩沖液(0.05M，pH5.0)lml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時冰浴超聲，形 成穩(wěn)定的反相膠束，室溫下穩(wěn)定存在30min以上。室溫減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(控制真空度為-0. 06-0. 065MPa)，緩慢去除有機溶劑，反相 膠束最終自發(fā)轉(zhuǎn)變?yōu)橹|(zhì)體。經(jīng)聚碳酸酯膜擠出(孔徑0.2um和0. Ium的聚碳酸酯膜各擠 出10次)，粒徑達120nm，經(jīng)透析去除游離藥物，得到奧沙利鉬脂質(zhì)體I。藥物濃度達2. Omg/ ml，包封率達93%。實施例10制備奧沙利鉬脂質(zhì)體II 制法按處方量稱取天然蛋黃磷脂(純度為75% )、膽固醇，置于茄型瓶中，加入 3ml氯仿/乙醚混合溶劑(1 4，ν/ν)使其溶解；稱取8. Omg奧沙利鉬，用檸檬酸-檸檬酸 鈉緩沖液(1Μ，ρΗ6. 2) Iml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時冰浴超聲，形 成穩(wěn)定的反相膠束，室溫下穩(wěn)定存在30min以上。室溫減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(控制真空度為-0. 06-0. 065MPa)，緩慢去除有機溶劑，反相 膠束最終自發(fā)轉(zhuǎn)變?yōu)橹|(zhì)體。經(jīng)聚碳酸酯膜擠出(孔徑0.2um和0. Ium的聚碳酸酯膜各 擠出10次)，粒徑達120nm，經(jīng)透析去除游離藥物，得到奧沙利鉬脂質(zhì)體II。藥物濃度達 3. Omg/ml，包封率達 95%。實施例11制備奧沙利鉬脂質(zhì)體III 制法按處方量稱取天然蛋黃磷脂(純度為80% )、膽固醇，置于茄型瓶中，加入 5ml氯仿/乙醚混合溶劑(1 4，ν/ν)使其溶解；稱取6. Omg奧沙利鉬，用磷酸鹽緩沖液(0. 05M，pH6. 5) Iml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時冰浴超聲，形成穩(wěn)定 的反相膠束，室溫下穩(wěn)定存在30min以上。室溫減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(控制真空度為-0. 06-0. 065MPa)，緩慢去除有機溶劑，反相 膠束最終自發(fā)轉(zhuǎn)變?yōu)橹|(zhì)體。經(jīng)聚碳酸酯膜擠出(孔徑0.2um和0. Ium的聚碳酸酯膜各 擠出10次)，粒徑達130nm，經(jīng)透析去除游離藥物，得到奧沙利鉬脂質(zhì)體III。藥物濃度達 4. Omg/ml，包封率達 91%。實施例12制備奧沙利鉬脂質(zhì)體IV 制法按處方量稱取天然蛋黃磷脂(純度為80% )、膽固醇，置于茄型瓶中，加入 5ml氯仿/乙醚混合溶劑(1 4，ν/ν)使其溶解；稱取8. Omg奧沙利鉬，用磷酸鹽緩沖液 (0. 05Μ，ρΗ6. 5) Iml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時冰浴超聲，形成穩(wěn)定 的反相膠束，室溫下穩(wěn)定存在30min以上。室溫減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(控制真空度為-0. 06-0. 065MPa)，緩慢去除有機溶劑，反相 膠束最終自發(fā)轉(zhuǎn)變?yōu)橹|(zhì)體。經(jīng)聚碳酸酯膜擠出(孔徑0.2um和0. Ium的聚碳酸酯膜各 擠出10次)，粒徑達140nm，經(jīng)透析去除游離藥物，得到奧沙利鉬脂質(zhì)體IV。藥物濃度達 5. Omg/ml，包封率達 91%。實施例13制備長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體I 制法按處方量稱取天然蛋黃磷脂(純度為90% )、膽固醇、PEG2000-DSPE，置于茄 型瓶中，加入IOml氯仿/乙醚混合溶劑(4 l，v/v)使其溶解；稱取4. Omg奧沙利鉬，用醋 酸-醋酸鈉緩沖液(0.05M，pH5.0) Iml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時 冰浴超聲，形成穩(wěn)定的反相膠束，室溫下穩(wěn)定存在30min以上。室溫減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(控制真空度為-0. 06-0. 065MPa)，緩慢去除有機溶劑，反相 膠束最終自發(fā)轉(zhuǎn)變?yōu)橹|(zhì)體。經(jīng)聚碳酸酯膜擠出(孔徑0.2um和0. Ium的聚碳酸酯膜各擠
14出10次)，粒徑達130nm，經(jīng)透析去除游離藥物，得到長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體I。藥物濃度達 2. Omg/ml，包封率達 93%。實施例14制備長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體II 制法按處方量稱取天然蛋黃磷脂(純度為75%)、膽固醇、PEG2000-DSPE，置于茄 型瓶中，加入3ml氯仿/乙醚混合溶劑(1 4，ν/ν)使其溶解；稱取8. Omg奧沙利鉬，用檸 檬酸-檸檬酸鈉緩沖液(1Μ，ρΗ6. 2) Iml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時 冰浴超聲，形成穩(wěn)定的反相膠束，室溫下穩(wěn)定存在30min以上。室溫減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(控制真空度為-0. 06-0. 065MPa)，緩慢去除有機溶劑，反相 膠束最終自發(fā)轉(zhuǎn)變?yōu)橹|(zhì)體。經(jīng)聚碳酸酯膜擠出(孔徑0.2um和0. Ium的聚碳酸酯膜各擠 出10次)，粒徑達130nm，經(jīng)透析去除游離藥物，得到長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體II。藥物濃度 達3. Omg/ml，包封率達95 %。實施例15制備長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體III 制法按處方量稱取天然蛋黃磷脂(純度為80% )、膽固醇、PEG2000-DSPE，置于茄 型瓶中，加入5ml氯仿/乙醚混合溶劑(1 4，ν/ν)使其溶解；稱取6. Omg奧沙利鉬，用磷 酸鹽緩沖液(0. 05Μ, ρΗ6. 5) Iml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時冰浴超 聲，形成穩(wěn)定的反相膠束，室溫下穩(wěn)定存在30min以上。室溫減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(控制真空度為-0. 06-0. 065MPa)，緩慢去除有機溶劑，反相 膠束最終自發(fā)轉(zhuǎn)變?yōu)橹|(zhì)體。經(jīng)聚碳酸酯膜擠出(孔徑0.2um和0. Ium的聚碳酸酯膜各擠 出10次)，粒徑達140nm，經(jīng)透析去除游離藥物，得到長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體III。藥物濃度 達4. Omg/ml，包封率達93 %。
15
實施例16制備長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體IV 制法按處方量稱取天然蛋黃磷脂(純度為80% )、膽固醇、PEG 2000-DSPE，置于 茄型瓶中，加入5ml氯仿/乙醚混合溶劑(1 4，ν/ν)使其溶解；稱取8. Omg奧沙利鉬，用 磷酸鹽緩沖液(0. 05Μ, ρΗ6. 5) Iml使其溶解，然后加至脂質(zhì)溶液中。渦旋混勻后，短時冰浴 超聲，形成穩(wěn)定的反相膠束，室溫下穩(wěn)定存在30min以上。室溫減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)(控制真空度為-0. 06-0. 065MPa)，緩慢去除有機溶劑，反相 膠束最終自發(fā)轉(zhuǎn)變?yōu)橹|(zhì)體。經(jīng)聚碳酸酯膜擠出(孔徑0.2um和0. Ium的聚碳酸酯膜各 擠出10次)，粒徑達150nm，經(jīng)透析去除游離藥物，得到奧沙利鉬脂質(zhì)體IV。藥物濃度達 5. Omg/ml，包封率達 91%。實施例17奧沙利鉬脂質(zhì)體的體外釋放特征實施例11和實施例15分別制得奧沙利鉬脂質(zhì)體III和長循環(huán)奧沙利鉬脂質(zhì)體 III，再另外配制相同濃度、相同溶劑的奧沙利鉬水溶液。以5%葡萄糖為釋放介質(zhì)，考察上 述三種制劑的體外釋放特征。結(jié)果如圖1所示。結(jié)果表明，兩種奧沙利鉬脂質(zhì)體均表現(xiàn)出緩慢釋放的特征，而長循環(huán)奧沙利鉬脂 質(zhì)體的藥物釋放更為緩慢。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并非用以限定本發(fā)明的實質(zhì)技術(shù)內(nèi)容范 圍，本發(fā)明的實質(zhì)技術(shù)內(nèi)容是廣義地定義于申請的權(quán)利要求范圍中，任何他人完成的技術(shù) 實體或方法，若是與申請的權(quán)利要求范圍所定義的完全相同，也或是一種等效的變更，均將 被視為涵蓋于該權(quán)利要求范圍之中。
1權(quán)利要求
一種奧沙利鉑脂質(zhì)體，其特征在于，所述奧沙利鉑脂質(zhì)體含有奧沙利鉑，磷脂，和膽固醇；所述磷脂以其總重量計，其中磷脂酰膽堿(或稱卵磷脂，phosphatidylcholine，簡稱PC)的重量百分含量為75 90％，磷脂酰甘油(phosphatidyl glycerols，簡稱PG)和磷脂酸(phosphatidic acid，簡稱PA)的重量百分含量之和為10 25％；奧沙利鉑和磷脂的重量比為1∶3 20，膽固醇和磷脂的重量比為1∶2 10。
2.如權(quán)利要求1所述的奧沙利鉬脂質(zhì)體，其特征在于，以所述脂質(zhì)體的總體積計，奧沙 利鉬的濃度為2-5mg/ml。
3.如權(quán)利要求1所述的奧沙利鉬脂質(zhì)體，其特征在于，所述奧沙利鉬脂質(zhì)體的粒徑為 120-140nm。
4.如權(quán)利要求1所述的奧沙利鉬脂質(zhì)體，其特征在于，奧沙利鉬和磷脂的重量比為 1 3-20。
5.如權(quán)利要求1所述的奧沙利鉬脂質(zhì)體，其特征在于，所述奧沙利鉬脂質(zhì)體還含有聚 乙二醇2000- 二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(PEG2000-DSPE)；所述聚乙二醇2000- 二硬脂酰磷脂 酰乙醇胺占總脂質(zhì)體的摩爾分數(shù)為5-9%。
6.如權(quán)利要求5所述的奧沙利鉬脂質(zhì)體，其特征在于，所述奧沙利鉬脂質(zhì)體的粒徑為 130-150nm。
7.如權(quán)利要求1-6任一所述的奧沙利鉬脂質(zhì)體，其特征在于，所述的磷脂是天然蛋黃磷脂。
8.如權(quán)利要求1所述的奧沙利鉬脂質(zhì)體，其特征在于，所述奧沙利鉬脂質(zhì)體的包封率 為 85-99% ο
9.如權(quán)利要求8所述的奧沙利鉬脂質(zhì)體，其特征在于，所述奧沙利鉬脂質(zhì)體的包封率 為 91-95%。
10.一種如權(quán)利要求1-9任一所述的奧沙利鉬脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，所述方 法包括步驟(1)將膽固醇、磷脂和有機溶劑混合，得到有機相；(2)將奧沙利鉬和緩沖液混合，得到水相；(3)將步驟(1)和(2)得到的有機相和水相混合，得到反相膠束；和(4)除去有機溶劑得到如權(quán)利要求1-9任一所述的奧沙利鉬脂質(zhì)體；所述磷脂以其總重量計，其中磷脂酰膽堿(或稱卵磷脂，phosphatidylcholine，簡稱 PC)的重量百分含量為75-90%，磷脂酰甘油(phosphatidyl glycerols，簡稱PG)和磷脂酸 (phosphatidic acid，簡稱PA)的重量百分含量之和為10-25% ；奧沙利鉬和磷脂的重量比為1 3-20，膽固醇和磷脂的重量比為1 2-10;所述的有機溶劑選自氯仿、乙醚、或其混合。
11.如權(quán)利要求10所述的制備方法，其特征在于，所述緩沖液pH5.0-7. 4。
12.如權(quán)利要求11所述的制備方法，其特征在于，所述緩沖液選自磷酸鹽緩沖液、檸檬 酸_檸檬酸鈉緩沖液、或醋酸_醋酸鈉緩沖液；酸根離子的總濃度為0. 05-1M。
13.如權(quán)利要求10所述的制備方法，其特征在于，所述有機溶劑是氯仿和乙醚的混合 物，兩者的體積比為1 4-4 1。
14.如權(quán)利要求10所述的制備方法，其特征在于，所述有機相和水相的體積比為 3-10 1。
15.一種如權(quán)利要求1-9任一所述的奧沙利鉬脂質(zhì)體的用途，其特征在于，用于制備治 療癌癥的藥物。
16.一種藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物中含有如權(quán)利要求1-9任一所述 的奧沙利鉬脂質(zhì)體和藥學上可接受的載體。
17.如權(quán)利要求16所述的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物是注射制劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種奧沙利鉑脂質(zhì)體及其制備方法和用途。所述奧沙利鉑脂質(zhì)體含有奧沙利鉑，磷脂，和膽固醇；所述磷脂以其總重量計，其中磷脂酰膽堿(PC)的重量百分含量為75-90％，磷脂酰甘油(PG)和磷脂酸(PA)的重量百分含量之和為10-25％；奧沙利鉑和磷脂的重量比為1∶3-20，膽固醇和磷脂的重量比為1∶2-10。
文檔編號A61K31/282GK101897668SQ20091005211
公開日2010年12月1日 申請日期2009年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年5月27日
發(fā)明者賀寧, 陶濤 申請人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院