專利名稱：透明質酸或其鹽之一、多元醇和利多卡因的熱滅菌的注射型組合物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及基于透明質酸或其鹽之一、一種或多種多元醇和利多卡因的凝膠形式的注射型水性組合物，所述熱滅菌的組合物具有改善的粘彈性流變學性質和長期體內持久性，適用于美容用途或治療用途。
背景技術：
多年來，基于透明質酸的注射型凝膠已經(jīng)用于美容用途、用于填充或替代生物組織(填充皺紋、重塑面部、增加唇體積等)，并還用于通過中胚層療法治療來使皮膚再水合?；谕该髻|酸的注射型凝膠也用于許多治療應用中。例如，-在風濕病學中，用作替代或暫時補充滑液的試劑；-在泌尿學/婦科學中，用作增加括約肌體積或尿道體積的試劑；-在眼科學中，用作白內障手術或治療青光眼的輔助劑；-在制藥學中，用作釋放活性物質的試劑；-在外科手術中，用于骨重建、增加聲帶體積或生成外科組織。已經(jīng)進行了大量努力來改善基于透明質酸的凝膠的物理化學穩(wěn)定性，以增加其體內持久性(即，凝膠在注射部位的停留時間)，并因此增加治療效力的持續(xù)時間。根據(jù)現(xiàn)有技術，增加基于透明質酸的凝膠的持久性且因此增加其對于各種活體內降解因素的抵抗性基本上是通過透明質酸交聯(lián)和/或接枝技術進行的。例如，-WO 2005/012364描述了基于交聯(lián)和接枝的多糖、包括透明質酸的凝膠，其具有比未交聯(lián)和/或未接枝的產物好的持久性。-WO 2004/092222描述了基于多糖、包括透明質酸的凝膠，其含有至少一種低分子量多糖和至少一種高分子量多糖，所述凝膠具有比沒有分子量混合物的產物高的持久性。-WO 2005/085329描述了獲得基于稠密交聯(lián)透明質酸的凝膠的生產方法，所述凝膠具有長期體內持久性。-WO 2000/0046252描述了借助于使透明質酸雙交聯(lián)的方法得到具有高交聯(lián)度的 “生物穩(wěn)定性”強的基于透明質酸的凝膠。多元醇屬于化學式CxHyOz的分子家族，其具有至少兩個醇基。借助于所述多元醇調整摩爾滲透壓濃度的高度能力，本領域技術人員已知可將多元醇引入注射型水性制劑中以獲得等滲組合物。利多卡因(或鹽酸利多卡因)是美容和醫(yī)學領域中常用的局部麻醉劑。多年來， 該分子尤其用于美容用途的產品、諸如填充皺紋的產品中，以限制注射期間和注射后的疼痛(在產品Zyderm 含有膠原和0. 3%利多卡因的情況下)?，F(xiàn)有技術描述了基于透明質酸的凝膠，其可以含有多元醇和/或利多卡因。例如，-WO 2007/077399描述了基于透明質酸和粘性生物相容性醇的凝膠，將其滅菌增加了粘度。
-WO 2004/032943描述了基于透明質酸的凝膠，其含有局部麻醉劑、包括利多卡因。-WO 98/41171描述了基于透明質酸、甘露醇和利多卡因的凝膠形式的注射型組合物。-WO 2008/068297描述了透明質酸水凝膠形式的皮下或皮內注射型植入物的用途。還公開了甘露醇作為抗氧化劑的用途。-摻有利多卡因的新透明質酸填充劑的歐洲評估(Europeanevaluation of a new hyaluronic acid filler incorporating lidocaine), G. WAHL,美容皮膚學雜志 (Journal of Cosmetic Dermatology)，第 7 卷，2008 年 11 月 6 日，298-303 頁，描述了用于皮膚學用途的包含透明質酸和利多卡因的制劑。

發(fā)明內容
現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，向基于透明質酸——不管是未交聯(lián)的還是交聯(lián)的、接枝的還是未接枝的、還是交聯(lián)并接枝的——的凝膠中加入多元醇和利多卡因，接著將該制劑熱滅菌，可以獲得以下效果(與不含多元醇且不含利多卡因的凝膠相比較)-大大改善凝膠的流變學性質，-通過對抗基于透明質酸凝膠的三種主要類型的體內降解(透明質酸酶的酶促降解、自由基降解、在37°C下的熱降解)而改善凝膠的持久性，-改善凝膠隨時間過去的流變學穩(wěn)定性，因此可延長產品儲存期限。事實上已經(jīng)表明，完全出人意料的是，向基于透明質酸的凝膠中加入一種或多種多元醇和利多卡因-在熱滅菌前沒有改變凝膠的流變學性質，-在熱滅菌后顯著改變了凝膠的流變學性質(與不含多元醇且不含利多卡因的凝膠相比較)。換句話說，在熱滅菌前，具有多元醇和利多卡因的基于透明質酸的凝膠的粘彈性質與不含多元醇且不含利多卡因的基于透明質酸的凝膠的粘彈性質相同。在熱滅菌后，具有多元醇和利多卡因的基于透明質酸的凝膠的粘彈性質與不含多元醇且不含利多卡因的基于透明質酸的凝膠的粘彈性質不同。與不含多元醇且不含利多卡因的凝膠相比較，具有多元醇和利多卡因的凝膠具有非常強的彈性(G’較高)和更有彈性的粘彈性質(Tan δ較低)。熱滅菌深刻改變了凝膠的結構，因此改變了其粘彈性質(流變學參數(shù)G’和G”減小/參數(shù)TanS增加)。應注意到，在基于透明質酸的凝膠中，多元醇和利多卡因的存在顯著改變了熱滅菌期間流變學參數(shù)的變化(限制流變學參數(shù)的變化G’和G”的減小明顯不那么強烈/Tan δ的增加明顯不那么強烈)。通過限制基于透明質酸的凝膠在熱滅菌期間的降解，具有多元醇和利多卡因的基于透明質酸的凝膠的結構與用不含多元醇且不含利多卡因的基于透明質酸的凝膠獲得的結構不同。該結構尤其具有加強的彈性性質(凝膠產生體積的能力更好)。這種較好的抗熱降解性尤其賦予凝膠在周圍環(huán)境溫度下隨時間過去的較好產品穩(wěn)定性。因此，根據(jù)本發(fā)明生成的產品將具有的儲存期限可能比不含多元醇和利多卡因的產品延長。還已經(jīng)表明與不含多元醇且不含利多卡因的凝膠相比較，具有多元醇和利多卡因的基于透明質酸的凝膠在體內對基于透明質酸的凝膠的三種降解因素具有更好的抗性-對酶促降解的更好抗性，-對自由基降解的更好抗性，-對熱降解的更好抗性。特別是，非常值得注意的是對熱降解和自由基降解的抗性的改善。在不希望受到多元醇和利多卡因對于基于透明質酸的凝膠降解的作用的理論解釋約束下，假設利多卡因顯著增加多元醇保護基于透明質酸的凝膠的能力。此外，摻入基于透明質酸的凝膠中的多元醇可以從凝膠中遷移出。在凝膠的外面，多元醇將能夠擴散到組織中并例如在組織水合或者通過干預細胞或生物化學機制而起重要作用。最后，凝膠中利多卡因的存在具有改善患者在注射期間和注射之后的舒適度的重要利益。因此，根據(jù)本發(fā)明的基于透明質酸或其鹽之一、一種或多種多元醇、和利多卡因的注射型水性組合物對于美容目的或治療目的具有如下優(yōu)勢-因為在滅菌作用下的降解顯著變小，凝膠的粘彈流變學性質更好(尤其產生體積的能力更好)，-借助于多元醇和利多卡因對抗凝膠在體內的三種主要類型的降解而實現(xiàn)的凝膠更長的體內持久性，和因此更長期的治療效果，-在其儲存期限期間凝膠的流變學穩(wěn)定性更好，-多元醇對生物體的積極作用(例如組織水合)，-由于在注射期間和注射之后利多卡因的麻醉效果而對患者舒適度的改善。因此，本發(fā)明提供了熱滅菌的注射型組合物，其包含基于透明質酸或其鹽之一、一種或多種多元醇、和利多卡因的凝膠。該組合物用于-美容用途以填充生物組織或通過中胚層療法使皮膚再水合；-治療用途，諸如a)在風濕病學中，作為用于替代或暫時補充滑液的試劑；b)在泌尿學/婦科學中，作為用于增加括約肌體積或尿道體積的試劑；c)在眼科學中，作為白內障手術或治療青光眼的輔助劑；d)在制藥學中，作為用于釋放活性物質的試劑；e)在外科手術中，用于骨重建、增加聲帶體積或生成外科組織。根據(jù)本發(fā)明的實施方案，基于透明質酸或其鹽之一的凝膠是未交聯(lián)或交聯(lián)的。根據(jù)本發(fā)明的實施方案，透明質酸或其鹽之一的濃度在0. 01mg/ml至100mg/ml之間且所述透明質酸或其鹽之一的分子量在IOOODa至IOX IO6Da之間。根據(jù)本發(fā)明的一個具體實施方案，交聯(lián)是在未與或已與天然來源的一種或多種其它多糖交聯(lián)的透明質酸上用選自環(huán)氧化物、表鹵代醇和二乙烯基砜的雙官能或多官能分子進行的。本領域中已知各種類型的基于透明質酸的凝膠，且交聯(lián)并接枝的凝膠例如描述在 WO 2005/012364 中。根據(jù)本發(fā)明的一個具體實施方案，所述凝膠還可以含有其它生物相容性聚合物 (諸如天然來源的多糖)和/或對生物體或凝膠具有積極效果的其它活性或非活性物質。根據(jù)本發(fā)明的特征，這些凝膠含有選自例如甘油、山梨醇、丙二醇、木糖醇、甘露醇、赤蘚醇、麥芽糖醇或乳糖醇的一種或多種多元醇。根據(jù)本發(fā)明的實施方案，所述凝膠中多元醇的濃度在0. 0001至500mg/ml之間且更具體地在0. 0001mg/ml至100mg/ml之間。根據(jù)本發(fā)明的實施方案，所述凝膠中利多卡因的濃度在0. 0001至500mg/ml之間且更具體地在0. 001mg/ml至50mg/ml之間。根據(jù)本發(fā)明的實施方案，滅菌采用干熱或濕熱、優(yōu)選采用濕熱進行。本領域技術人員將能夠選擇適合使其產物滅菌的熱滅菌循環(huán)(滅菌循環(huán)的溫度和持續(xù)時間)。例如， 可使用如下濕式熱滅菌循環(huán):131°C，1分鐘；130°C，3分鐘；125°C，7分鐘；121°C，20分鐘； 121°C，10 分鐘；100°C，2 小時。
實施例提出實施例以說明本發(fā)明，但它們決不限制本發(fā)明。下面的實施例中制備的制劑是在PH =7的緩沖水溶液中有或沒有多元醇和利多卡因的基于交聯(lián)透明質酸鈉(NaHA)的凝膠。交聯(lián)的凝膠根據(jù)本領域技術人員熟知的技術制備。用于生產這些凝膠的透明質酸鈉具有等于2. SXlOf5Da的分子量。所使用的交聯(lián)劑為丁二醇二縮水甘油基醚(BDDE)且所使用的交聯(lián)度的定義是重量(BDDE)/重量(干燥NaHA)。向凝膠中摻入多元醇是通過向凝膠中加入必要量的多元醇(表示為重量％ )且用藥勺混合10分鐘(對于50g最終凝膠而言)進行的。向凝膠中摻入利多卡因是通過向凝膠中加入必要量的利多卡因(表示為重量％ ) 且用藥勺混合10分鐘(對于50g最終凝膠而言)進行的。為了使有和沒有多元醇和利多卡因的凝膠具有嚴格相同的生產條件，還將不含多元醇且不含利多卡因的交聯(lián)凝膠用藥勺混合10分鐘(對于50g最終凝膠而言)。將所制備的凝膠充入玻璃注射器中，且隨后熱滅菌(121°C，10分鐘)。用于進行流變學表征的流變儀為AR2000 (TA儀器(TA instruments))，采用40mm 的平板幾何、1000 μ m的間隙和37°C的分析溫度。實施例1 通過流變學證明在有和沒有多元醇/利多卡因的基于透明質酸的凝膠之間熱滅菌后的結構差異取得A，基于交聯(lián)NaHA的凝膠(NaHA摩爾質量=2. 5 X IO6Da, NaHA濃度=22. 5mg/ ml，交聯(lián)度=9% )。隨后通過滲析將凝膠純化M小時(再生的纖維素，分離限摩爾量= 60kDa)。將150g純化的凝膠用藥勺混合10分鐘。將所得凝膠分成等重量的三部分(50g)。取得B，部分1.將甘油、1.5%山梨醇和0.3%利多卡因加到該部分中。將凝膠用藥勺混合10分鐘。取得C，部分2.將甘油和1. 5%山梨醇加到該部分中。將凝膠用藥勺混合10 分鐘。取得D，部分3.加入適當濃度的NaCl溶液以具有等于凝膠B和C的透明質酸濃度和摩爾滲透壓濃度。將凝膠用藥勺混合10分鐘。 取得B、C和D，分別由部分B、C和D產生的凝膠。所得凝膠具有接近7. 00的pH、接近300m0sm/kg的摩爾滲透壓濃度和相等的透明
質酸濃度。在滅菌前對凝膠B、C和D中的每一種進行流變學測量(掃頻0. 01 100Hz)在IHz下進行G’(=彈性模量)、G”(=粘性模量)和Tan δ =G”/G’的值的比較。
權利要求
1.用于美容目的或治療目的的凝膠形式的注射型水性組合物，其基于透明質酸或其鹽之一、一種或多種多元醇和利多卡因，該組合物已經(jīng)歷熱滅菌，該組合物的作用是改善的粘彈流變學性質和改善的體內持久性。
2.如權利要求1所述的注射型水性組合物，特征在于所述熱滅菌用濕熱進行。
3.如權利要求1所述的注射型水性組合物，特征在于透明質酸或其鹽之一的濃度在 0. 01mg/ml至100mg/ml之間，且所述透明質酸或其鹽之一的分子量在IOOODa至IOX IO6Da 之間。
4.如權利要求1 3中任一項所述的注射型水性組合物，特征在于所述多元醇的濃度在 0. 0001mg/ml 至 100mg/ml 之間。
5.如權利要求1 4中任一項所述的注射型水性組合物，特征在于所述利多卡因的濃度在 0. 0001mg/ml 至 50mg/ml 之間。
6.如權利要求1 5中任一項所述的注射型水性組合物，特征在于所述基于透明質酸或其鹽之一的凝膠是未交聯(lián)的。
7.如權利要求1 5中任一項所述的注射型水性組合物，特征在于所述基于透明質酸或其鹽之一的凝膠是交聯(lián)的。
8.如權利要求1 5中任一項所述的注射型水性組合物，特征在于所述基于透明質酸或其鹽之一的凝膠與或未與天然來源的一種或多種其它多糖交聯(lián)。
9.如權利要求7或8所述的注射型水性組合物，特征在于所述基于透明質酸或其鹽之一的凝膠與選自環(huán)氧化物、表鹵代醇和二乙烯基砜的雙官能或多官能分子交聯(lián)。
10.如權利要求1 9中任一項所述的注射型水性組合物，特征在于所述多元醇選自例如甘油、山梨醇、甘露醇、丙二醇、赤蘚醇、木糖醇、麥芽糖醇和乳糖醇。
11.如權利要求1 10中任一項所述的注射型水性組合物，其用于填充或替代生物組織。
12.如權利要求1 10中任一項所述的注射型水性組合物，其用于填充皺紋、重塑面部或增加唇體積。
13.如權利要求1 10中任一項所述的注射型水性組合物，其用于通過中胚層療法使皮膚再水合的治療。
14.如權利要求1 10中任一項所述的注射型水性組合物，其用于分離、替代或填充生物組織或增加所述組織的體積。
15.如權利要求1 10中任一項所述的注射型水性組合物，其用于 -風濕病學中，作為用于替代或暫時補充滑液的試劑；-泌尿學/婦科學中，作為用于增加括約肌體積或尿道體積的試劑； -眼科學中，作為白內障手術或治療青光眼的輔助劑； -制藥學中，作為用于釋放活性物質的試劑； -外科手術中，用于骨重建、增加聲帶體積或生成外科組織。
全文摘要
本發(fā)明涉及透明質酸或其鹽之一、一種或多種多元醇和利多卡因的注射型水性組合物。所述組合物用于美容目的或治療目的，其具有改善的粘彈流變學性質和長期體內持久性。所述多元醇選自例如甘油、山梨醇、丙二醇、甘露醇、赤蘚醇、木糖醇、麥芽糖醇和乳糖醇。所述特定性質通過熱滅菌所述混合物而獲得。
文檔編號A61K31/00GK102196805SQ200980142308
公開日2011年9月21日 申請日期2009年11月4日 優(yōu)先權日2008年11月7日
發(fā)明者莫里阿爾德 塞繆爾·賈瓦德 申請人:安特易斯有限公司