專利名稱：一種靈芝多糖及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及食用真菌領(lǐng)域，具體的說涉及一種靈芝多糖及其制備方法。
背景技術(shù)：
靈芝又名仙草、神草，是一種扶正固本、滋補(bǔ)強(qiáng)壯的珍貴藥用菌，靈芝多糖是靈芝 最主要的活性成分之一?，F(xiàn)代研究表明，靈芝多糖具有抗血栓、抗腫瘤、抗輻射、抗氧化、免 疫調(diào)節(jié)、保肝、降壓等作用。隨著近年發(fā)現(xiàn)靈芝多糖有越來越多的生物活性，各種靈芝多糖 產(chǎn)品開始也越來越多，但傳統(tǒng)水提法工藝提取的靈芝多糖產(chǎn)品顏色深，雜質(zhì)多，不利于作為 功能性食品或藥品進(jìn)行進(jìn)一步研究與開發(fā)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明首先提供了一種靈芝多糖，該靈芝多糖是用如下方法制備得到的
①水提將靈芝子實(shí)體粉碎、熱煮，得到靈芝粗多糖水提液；
②超濾靈芝粗多糖水提液通過超濾膜進(jìn)行超濾，冷凍干燥后得到分子量為1-50萬Da 的靈芝粗多糖干品；
③脫色分子量為1-50萬Da的靈芝粗多糖干品按照10-40%的重量比配制成水溶液， 離心除去沉淀部分；然后加入陰離子交換樹脂，進(jìn)行脫色；
④冷凍干燥脫色后的靈芝粗多糖水溶液，進(jìn)行冷凍干燥，即可。本發(fā)明使用的靈芝子實(shí)體由上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌所(保藏號食用菌所 2469)提供。本發(fā)明使用的超濾膜為高分子聚合卷式超濾膜，濾芯材質(zhì)為聚砜PS、聚醚砜PES、 聚偏氟乙烯PVDF，具體是購自上海弗立特實(shí)業(yè)有限公司的UF-3530超濾膜。本發(fā)明使用的陰離子交換樹脂為苯乙烯-二乙烯苯共聚體骨架，功能基團(tuán) 為-N(CH3)2，具體是購自滄州寶恩吸附材料科技有限公司的脫色1號樹脂。所述的陰離子交換樹脂在進(jìn)行脫色前，最好先進(jìn)行下述步驟的預(yù)處理將樹脂用 3-5%的HC1小流量淋洗至流出液呈酸性，浸泡2-4小時，然后放盡酸液，用去離子水漂洗至 中性；再用3-5%的NaOH小流量淋洗至流出液呈堿性，浸泡4_8小時，然后放盡堿液，用去離 子水漂洗至中性備用。所述的用陰離子交換樹脂進(jìn)行脫色，具體為1-50萬Da的靈芝粗多糖干品按 10-40%的重量比配制成水溶液后，加入已預(yù)處理好的陰離子交換樹脂，進(jìn)行脫色。所述的脫色可為靜態(tài)脫色或動態(tài)脫色；
其中靜態(tài)脫色的方法為靈芝粗多糖水溶液加入陰離子交換樹脂后(40mL靈芝粗多糖 水溶液加入5mL樹脂)，保持溫度為25-50°C，pH為5_7，攪拌2_4h，即可；
其中動態(tài)脫色的方法為靈芝粗多糖水溶液加入陰離子交換樹脂后(40mL靈芝粗多糖 水溶液加入10mL樹脂)，室溫下，流速l-4BV/h，上樣體積為6-10BV，(1BV :10mL),即可。脫色后的靈芝粗多糖水溶液，使用冷凍干燥機(jī)進(jìn)行冷凍干燥處理，最終得到顏色較淺的靈芝多糖產(chǎn)品。本發(fā)明還提供了制備上述靈芝多糖的方法，該方法包括如下步驟
①水提將靈芝子實(shí)體粉碎、熱煮，得到靈芝粗多糖水提液；
②超濾靈芝粗多糖水提液通過超濾膜進(jìn)行超濾，冷凍干燥后得到分子量為1-50萬Da 的靈芝粗多糖干品；
③脫色分子量為1-50萬Da的靈芝粗多糖干品按照10-40%的重量比配制成水溶液， 離心除去沉淀部分；然后加入陰離子交換樹脂，進(jìn)行脫色；
④冷凍干燥脫色后的靈芝粗多糖水溶液，進(jìn)行冷凍干燥，即可。本發(fā)明提供的經(jīng)過脫色的靈芝多糖，制備方法簡便、適用于大規(guī)模生產(chǎn)。脫色率可 達(dá)到80%以上，多糖保留率達(dá)到75%以上，并且該靈芝多糖的免疫活性顯著提高，可刺激巨 噬細(xì)胞生成一氧化氮(N0)，且可刺激淋巴細(xì)胞增殖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1水提法制備靈芝粗多糖并對其進(jìn)行超濾
將靈芝子實(shí)體用粉碎機(jī)粉碎成小塊，按照1kg子實(shí)體加入20L水的比例加水，加熱煮沸 持續(xù)2h，之后用濾布(100目)過濾，濾渣重復(fù)上述步驟再提取一次后過濾，合并兩次提取的 濾液。濾液濃縮至10L后，將濃縮液轉(zhuǎn)到UF-3530超濾膜上進(jìn)行超濾(選用截留分子量為1 萬和50萬Da的超濾膜)，冷凍干燥最終得到1-50萬Da的靈芝粗多糖干品。實(shí)施例2 1.原料制備
實(shí)施例1的1-50萬Da靈芝粗多糖干品按照15%質(zhì)量比配制成溶液，離心除去沉淀部分。2.陰離子交換樹脂預(yù)處理
用4%的HC1小流量淋洗至流出液呈酸性，浸泡3h，然后放盡酸液，用去離子水漂洗至中 性；用4%的NaOH小流量淋洗至流出液呈堿性，浸泡6h，然后放盡堿液，用去離子水漂洗至 中性。1-50萬Da靈芝粗多糖水溶液加入預(yù)處理后的陰離子交換樹脂(加入比例為40mL 靈芝粗多糖水溶液中加入5mL樹脂)，于250mL三角燒瓶中，置于搖床中震蕩，120rpm/min, 30°C、pH5. 0條件下脫色3h，然后用濾布(100目)過濾，收集脫色后的靈芝粗多糖水溶液，進(jìn) 行脫色的測定以及多糖保留率的測定。靈芝粗多糖水溶液，稀釋45倍后用苯酚硫酸法在490nm下測定脫色前后多糖含 量，在450nm下測定脫色前后色素含量。(其中測定的實(shí)施例1的多糖含量和色素為脫色前 的多糖含量和色素，實(shí)施例2的多糖含量和色素為脫色后的多糖含量和色素。)
計算公式
權(quán)利要求
一種靈芝多糖，其特征在于其是用如下方法制備得到的①水提將靈芝子實(shí)體粉碎、熱煮，得到靈芝粗多糖水提液；②超濾靈芝粗多糖水提液通過超濾膜進(jìn)行超濾，冷凍干燥后得到分子量為1 50萬Da的靈芝粗多糖干品；③脫色分子量為1 50萬 Da的靈芝粗多糖干品按照10 40%的重量比配制成水溶液，離心除去沉淀部分；然后加入陰離子交換樹脂，進(jìn)行脫色；④冷凍干燥脫色后的靈芝粗多糖水溶液，進(jìn)行冷凍干燥，即可。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靈芝多糖，其特征在于所述的脫色為靜態(tài)脫色或動態(tài)脫色。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的靈芝多糖，其特征在于所述的靜態(tài)脫色的方法為靈芝粗多糖水溶液加入陰離子交換樹脂，其中40mL靈芝粗多糖水溶液加入5mL樹 月旨，保持溫度為25-50°C，pH為5-7，攪拌2_4h，即可。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的靈芝多糖，其特征在于所述的動態(tài)脫色的方法為靈芝粗多糖水溶液加入陰離子交換樹脂，其中40mL靈芝粗多糖水溶液加入IOmL樹 月旨，室溫下，流速l_4BV/h，上樣體積為6-10BV，即可。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種靈芝多糖及其制備方法，該靈芝多糖是通過將靈芝子實(shí)體進(jìn)行水提、超濾、脫色然后冷凍干燥得到。脫色后的靈芝多糖免疫活性顯著提高，可刺激巨噬細(xì)胞生成一氧化氮，且可刺激淋巴細(xì)胞增殖。
文檔編號A61P37/02GK101935358SQ20101027740
公開日2011年1月5日 申請日期2010年9月10日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月10日
發(fā)明者馮娜, 劉艷芳, 吳迪, 周帥, 唐傳紅, 唐慶九, 張勁松, 楊焱, 羅璽, 賈薇 申請人:上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院