專利名稱：伊文氏藍配合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類放射性配合物，其制備方法以及所述配合物作為血池顯像劑的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
血管系統(tǒng)疾病嚴重影響著人類健康，采用顯像手段有效顯示血管并結(jié)合免疫組織化學研究探索疾病發(fā)病機制是十分必要的。目前常用的血管顯影方法有墨汁灌注法，免疫組織化學方法，單寧酸媒染法，酶組織化學法等等。但這些方法各有弊端，如不能與免疫組織化學研究相結(jié)合 ，過程繁瑣或熒光易淬滅等。利用放射性核素標記的顯像劑對血管系統(tǒng)顯像是當今放射性藥物研究的熱點之一。放射性核素血池顯像能無創(chuàng)傷地活體測定局部或整體的心臟功能，提供某些心臟功能參數(shù)。對冠心病、心肌病和瓣膜病等心肌疾病的早期診斷、愈后及療效觀察都有一定的價值。目前臨床上使用最多的血池顯像劑為99mTc-RBC (血紅細胞)(王學斌，馬小煜，唐志剛，等.紅細胞99mTc體外標記法的研究.同位素，1996，9 (4): 193-199)。標記方法可分為體外、體內(nèi)和半體外標記法。體外標記法標記率高，但操作繁瑣，時間長，很難保證無菌，因此不能被廣泛使用。體內(nèi)標記法操作相對簡單，其缺點是需要對病人進行兩次注射，而且影響標記率的因素較多，標記率波動較大，使其在臨床上的應(yīng)用受到了一定限制。半體外標記法雖然在一定程度上簡化了體外標記法的操作，但仍需采集病人血樣，因此容易引起交叉感染或病毒感染，而且標記率也要低于體外標記法。人血清白蛋白(HSA)是人體血液中的天然組份，由576個氨基酸組成的單肽鏈大分子蛋白質(zhì)，其中包括56個賴氨酸殘基、17個酪氨酸酚羥基和一個自由巰基，分子量為68400，有很長的生物半衰期。99mTc-HSA可用作血池顯像劑，一般直接標記法的標記率不高，標記物穩(wěn)定性差，使其在血液中的清除快，顯像效果差。近年來使用雙功能聯(lián)接劑偶聯(lián)人血清白蛋白進行99mTc標記的報道較多，包括:DTPA (二乙三胺五醋酸)、DMP (2，3- 二巰基丙酸)等雙功能聯(lián)接劑。但99mTc-DTPA-HSA從血液中清除較快，需在注射后5 IOmin顯像，且肝內(nèi)有一定濃集，不利于一些疾病的診斷。較為成功的有99mTc-DMP-HSA (CambierJ-P, Verbeke KA, Vanbilloen HP et al.99mTc-dimercaptopropiony1-HSA prepared froma labelling kit!Preliminary investigations as a blood pool agent.Nucl MedCommun, 1997, 18:31-37),該配合物的制備方法已經(jīng)藥盒化。通過對HSA進行一些結(jié)構(gòu)修飾，有望獲得性能優(yōu)良的血池顯像劑，但是其為人體提取物，價格昂貴且也可能攜帶一些病毒，這些都在一定程度上限制了其應(yīng)用。其它用于血池顯像的99mTc放射性藥物還有=99mTc-DX (葡聚糖)和99mTc標記脂質(zhì)體等，但在臨床上都未取得實質(zhì)性進展。除了上述99mTc標記顯像劑外，還有62Ciu67Cu和68Ga等放射性核素標記的HSA及其衍生物用于血池顯像。由此可以看出，現(xiàn)有較為成功的血池顯像劑局限于锝_99m標記的血紅細胞或放射性標記的生物提取物HSA，尚存在制備方法復雜、價格昂貴、容易感染病毒以及顯像效果易受其它因素影響等缺點，若能提供一種具有制法簡單、成本低以及顯像效果良好等特點的新型的放射性標記的血池顯像劑，將具有廣闊的應(yīng)用前景。伊文氏藍是一種熒光染料，在白光下呈藍色，在熒光顯微鏡綠色激發(fā)光下呈鮮紅色，采用伊文氏藍進行血管顯影可用于研究血管通透性等特性。它可與血漿白蛋白結(jié)合形成伊文氏藍-白蛋白復合體，再與血管內(nèi)皮細胞膜上的血漿白蛋白受體結(jié)合，因此理論上應(yīng)該可以通過灌注方法顯示血管形態(tài)。伊文氏藍的示意結(jié)構(gòu)式:
權(quán)利要求
1.一種伊文氏藍衍生物，結(jié)構(gòu)式為:
2.如權(quán)利要求1所述的一種伊文氏藍衍生物的合成方法，包括如下步驟: 1)將化合物I和化合物2以摩爾比1-10:1-10的比例混合，在氰基磷酸二乙酯作用下，利用氨基縮合反應(yīng)得到化合物3 ； 2)化合物3在鹽酸條件下以NaNO2還原氨基，得到偶氮化合物4； 3)將化合物4與化合物5(1-氨基-8-萘酚-2，4- 二磺酸)反應(yīng)，得到目標化合物； 其合成路線為:
3.一種放射性標記配合物，其特征在于，該放射性標記配合物為權(quán)利要求1所述的伊文氏藍衍生物經(jīng)過放射性核素標記后得到。
4.如權(quán)利要求3所述的一種放射性標記配合物，其特征在于:所述的放射性核素包括18F、64Cu、68Ga、62Cu、67Cu、86Y 或 89Zr。
5.一種放射性標記配合物，其特征在于:其具有如下結(jié)構(gòu)之一:
6.如權(quán)利要求3至5任一項所述的放射性標記配合物的用途，其用于人或動物的器官或組織中作為顯像劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求3至5任一項所述的放射性標記配合物的制備方法，其特征在于，所述的配合物以濕法或凍干法制備所得。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的放射性標記配合物的制備方法，其特征在于，所述的放射性標記配合物的濕法制備包括如下步驟: 1)將權(quán)利要求1所述的伊文氏藍衍生物溶于緩沖溶液或去離子水中； 2)在上述溶液中加入相應(yīng)的放射性核素溶液，密閉反應(yīng)5 40min，冷卻； 3)經(jīng)高效液相色譜分離純化，旋蒸除去溶劑，以磷酸鹽緩沖液或水或生理鹽水溶解剩余物，經(jīng)無菌過濾即得相應(yīng)的放射性標記配合物注射液。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的放射性標記配合物的制備方法，其特征在于，所述的放射性標記配合物的凍干法包括如下步驟: 1)將權(quán)利要求1所述的伊文氏藍衍生物溶于緩沖溶液或去離子水中； 2)將第I)步溶液經(jīng)無菌過濾后，分裝于容器中，經(jīng)冷凍干燥后加塞密封，等到凍干藥盒; 3)向上述藥盒中加入適量乙酸溶液或緩沖液溶解，再加入相應(yīng)的放射性核素溶液，密閉反應(yīng)5 40min,冷卻； 4)經(jīng)高效液相色譜分離純化，旋蒸除去溶劑，以磷酸鹽緩沖液或水溶解剩余物，經(jīng)無菌過濾即得相應(yīng)的放射性注射液。
10.一種18F標記的配合物，其濕法制備方法為: 1)將權(quán)利要求1所述的伊文氏藍衍生物溶于緩沖溶液或去離子水中； 2)將氯化鋁溶于緩沖溶液或去離子水中； 3)將上述I)和2)的兩種溶液混合均勻； 4)加入乙腈或乙醇和新鮮制得的18F離子水溶液，密閉70 120°C反應(yīng)5 30min，冷卻； 5)加水稀釋反應(yīng)液后經(jīng)Sep-PakC18色譜柱分離純化，以緩沖液或水沖洗色譜柱除去未反應(yīng)的18F離子，以鹽酸乙醇溶液或乙醇溶液淋洗，再經(jīng)生理鹽水稀釋后無菌過濾即得18F標記的伊 文氏藍衍生物注射液。
全文摘要
本發(fā)明公開了伊文氏藍配合物及其制備方法和應(yīng)用，其結(jié)構(gòu)含有大環(huán)多胺類螯合基團NOTA。經(jīng)放射性核素(氟-18、銅-64和鎵-68等)標記后得到標記配合物。所述的配合物按濕法或凍干法制備。本發(fā)明還涉及所述配合物在人或動物的器官或組織中作為顯像劑的用途，特別是用作血池顯像劑，其具有制備簡單、價格便宜以及較高靶/非靶比值的優(yōu)點。
文檔編號A61K51/04GK103242255SQ201310157168
公開日2013年8月14日 申請日期2013年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月28日
發(fā)明者張現(xiàn)忠, 陳小元, 郎立新, 牛剛, 李方, 朱朝暉 申請人:廈門大學