本發(fā)明涉及抑制CKAP5基因表達(dá)的組合物、包含該組合物的醫(yī)藥品等。
背景技術(shù)：
：細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白5(Cytoskeleton-associatedprotein5，CKAP5)是與微管相互作用的蛋白質(zhì)，在人類(lèi)中是由CKAP5基因編碼的(參見(jiàn)“脫氧核糖核酸研究(DNARes)”，第2卷，p.37-43；“歐洲生物化學(xué)雜志(EurJBiochem)”，第234卷，p.406-13；“EntrezGene(NCBI(美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心)基因數(shù)據(jù)庫(kù))：CKAP5細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白5”)。CKAP5還作為ch-TOG而為人所知，并且非洲爪蟾中的XMAP215為其同源物(參見(jiàn)“細(xì)胞分子生物學(xué)(MolecularBiologyoftheCell)”，第15卷，p.1580-1590)。CKAP5顯示在微管形成中具有至少2個(gè)作用，一個(gè)是抑制由MCAK(KIF2C)導(dǎo)致的動(dòng)粒微管的解聚，另一個(gè)是與中心體的形成也有關(guān)(參見(jiàn)“分子細(xì)胞生物學(xué)(MolecularandCellularBiology)”，第28卷，p.7199-7211)。已知CKAP5還與在乳腺癌中功能亢進(jìn)的TACC1相互作用(參見(jiàn)“致癌基因(Oncogene)”，第22卷，p.8102-16；“生物化學(xué)學(xué)報(bào)(BiochemJ)，第363卷，p.195-200”；“EntrezGene(NCBI(美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心)基因數(shù)據(jù)庫(kù))：TACC1轉(zhuǎn)化，酸性含卷曲螺旋蛋白質(zhì)1(acidiccoiled-coilcontainingprotein1)”)。CKAP5在人類(lèi)肝癌和大腸癌中高水平表達(dá)是已知的(參見(jiàn)“歐洲生物化學(xué)雜志(EurJBiochem)”，第234卷，p.406-13)，此外，近年來(lái)，其還與MCL1、RRM1、USP8等一同作為多發(fā)性骨髓瘤的備選靶標(biāo)而被報(bào)道(參見(jiàn)“癌癥研究(CancerRes)”，第72卷，p.757-68)。雖然基于這樣的背景而認(rèn)為CKAP5為抗癌劑的良好靶標(biāo)，但是目前尚無(wú)以CKAP5為靶標(biāo)的對(duì)癌等的有效治療方法。作為抑制靶基因的表達(dá)的方法，例如已知利用了RNA干擾(RNAinterference，以下稱(chēng)為RNAi)的方法等，具體而言，報(bào)道了通過(guò)將具有與作為靶標(biāo)的基因相同的序列的雙鏈RNA導(dǎo)入到線蟲(chóng)中，從而可特異性地抑制該靶基因表達(dá)的現(xiàn)象(參見(jiàn)“自然(Nature)”，1998年，第391卷，第6669號(hào)，p.806-811)。另外發(fā)現(xiàn)，在果蠅中，通過(guò)導(dǎo)入21～23個(gè)堿基的長(zhǎng)度的雙鏈RNA來(lái)代替長(zhǎng)的雙鏈RNA，也可抑制靶基因的表達(dá)，其被命名為短干擾RNA(shortinterferingRNA，siRNA)(參見(jiàn)國(guó)際公開(kāi)第01/75164號(hào))。關(guān)于RNAi，在體內(nèi)(invivo)試驗(yàn)中也得到了大量驗(yàn)證，報(bào)道了使用50個(gè)堿基對(duì)以下的siRNA在動(dòng)物胚胎中的效果(參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)第2002-132788號(hào)說(shuō)明書(shū))及在成年小鼠中的效果(參見(jiàn)國(guó)際公開(kāi)第03/10180號(hào))。另外，當(dāng)將siRNA靜脈內(nèi)施予至小鼠胚胎時(shí)，在腎臟、脾臟、肺、胰臟及肝臟各器官中確認(rèn)到了對(duì)特定的基因的表達(dá)抑制效果(參見(jiàn)“自然·遺傳學(xué)(NatureGenetics)”，2002年，第32卷，第1號(hào)，p.107-108)。此外，還報(bào)道了在腦細(xì)胞中直接施予siRNA也可抑制特定的基因的表達(dá)(參見(jiàn)“自然·生物技術(shù)(NatureBiotechnology)”，2002年，第20卷，第10號(hào)，p.1006-1010)。CKAP5siRNA例如被記載于專(zhuān)利文獻(xiàn)1等中。含有siRNA類(lèi)的醫(yī)藥品例如被記載于專(zhuān)利文獻(xiàn)2、專(zhuān)利文獻(xiàn)3、專(zhuān)利文獻(xiàn)4等中。專(zhuān)利文獻(xiàn)2中公開(kāi)了含有siRNA類(lèi)、和例如1,2-二亞油基氧基-N,N-二甲基氨基丙烷(DLinDMA)等的醫(yī)藥品。出于開(kāi)發(fā)更柔軟的陽(yáng)離子性脂質(zhì)、由此提高脂質(zhì)體等的膜流動(dòng)性的目的而使用了DLinDMA等，其特征在于，使作為結(jié)構(gòu)上類(lèi)似的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的N-(2,3-二-(9-(Z)-十八碳烯?；趸?)-丙烷-1-基-N,N,N-三甲基氯化銨(DOTAP)及N-[1-(2,3-二油烯基氧基)丙基]-N,N,N-三甲基氯化銨(DOTMA)的高級(jí)烷基成為至少包含2處不飽和位點(diǎn)的高級(jí)烷基。另外，專(zhuān)利文獻(xiàn)3中公開(kāi)了含有siRNA類(lèi)、和例如2,2-二亞油基-4-二甲基氨基甲基-[1,3]-二氧戊環(huán)(DLin-K-DMA)等的醫(yī)藥品。另外，專(zhuān)利文獻(xiàn)4中公開(kāi)了例如反式-3,4-雙(((Z)-十八碳-9-烯?；趸?甲基)吡咯烷(化合物I-3)等?，F(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)1：國(guó)際公開(kāi)第2004/045543號(hào)專(zhuān)利文獻(xiàn)2：國(guó)際公開(kāi)第2005/121348號(hào)專(zhuān)利文獻(xiàn)3：國(guó)際公開(kāi)第2009/086558號(hào)專(zhuān)利文獻(xiàn)4：國(guó)際公開(kāi)第2011/136368號(hào)技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：發(fā)明所要解決的課題本發(fā)明的目的在于提供一種抑制CKAP5基因表達(dá)的組合物、包含該組合物的醫(yī)藥品等。用于解決課題的手段本發(fā)明涉及以下的(1)～(23)。(1)一種組合物，其含有下述脂質(zhì)粒子，所述脂質(zhì)粒子含有：作為藥物的雙鏈核酸，其具有有義鏈及反義鏈，該有義鏈和該反義鏈具有至少25個(gè)堿基對(duì)，該反義鏈具有與序列號(hào)1～6中任一的CKAP5基因的mRNA的連續(xù)至少19個(gè)堿基的序列互補(bǔ)的堿基序列，具有最長(zhǎng)為35個(gè)核苷酸的長(zhǎng)度；和式(I)表示的陽(yáng)離子性脂質(zhì)。(式(I)中，R1及R2相同或不同，為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或炔基，L1及L2相同或不同，為-CO-O-或-O-CO-，a及b相同或不同，為1～3，R3為氫原子、碳原子數(shù)為1～6的烷基或碳原子數(shù)為3～6的鏈烯基。)(2)如上述(1)所述的組合物，其中，脂質(zhì)粒子是進(jìn)一步含有式(II)表示的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的脂質(zhì)粒子。(式(II)中，R4及R5相同或不同，為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或炔基，R6為氫原子、碳原子數(shù)為1～6的烷基、碳原子數(shù)為3～6的鏈烯基、吡咯烷-3-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基或者被相同或不同的1～3個(gè)的氨基、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基、烷氧基、氨基甲?；瓮榛被柞；?、二烷基氨基甲?；?、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的碳原子數(shù)為1～6的烷基或碳原子數(shù)為3～6的鏈烯基。)(3)如上述(2)所述的組合物，其中，R4及R5相同，為為十二烷基、十三烷基、十四烷基、2,6,10-三甲基十一烷基、十五烷基、3,7,11-三甲基十二烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基、6,10,14-三甲基十五烷-2-基、十九烷基、2,6,10,14-四甲基十五烷基、二十烷基、3,7,11,15-四甲基十六烷基、二十一烷基、二十二烷基、二十三烷基、二十四烷基、(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基、3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基或3,7,11,15-四甲基十六碳-2-烯基。(4)如上述(2)所述的組合物，其中，R4及R5相同，為為十四烷基、十六烷基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(Z)-二十碳-11-烯基或(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基。(5)如上述(3)或(4)所述的組合物，其中，R6為氫原子、甲基、吡咯烷-3-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基或者被相同或不同的1～3個(gè)的氨基、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基、烷氧基、氨基甲?；?、單烷基氨基甲?；⒍榛被柞；?、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的碳原子數(shù)為1～6的烷基或碳原子數(shù)為3～6的鏈烯基。(6)如上述(1)～(5)中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，R3為氫原子或甲基。(7)如上述(1)～(6)中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，L1及L2為-O-CO-，R1及R2相同，為十二烷基、十四烷基、十六烷基、十八烷基、二十烷基、二十二烷基、二十四烷基、(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基、3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基或3,7,11,15-四甲基十六碳-2-烯基。(8)如上述(1)～(6)中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，L1及L2為-CO-O-，R1及R2相同，為十三烷基、十五烷基、十七烷基、十九烷基、二十一烷基、二十三烷基、(Z)-十三碳-8-烯基、(Z)-十五碳-8-烯基、(Z)-十七碳-5-烯基、(Z)-十七碳-8-烯基、(E)-十七碳-8-烯基、(Z)-十七碳-10-烯基、(8Z,11Z)-十七碳-8,11-二烯基、(8Z,11Z,14Z)-十七碳-8,11,14-三烯基、(Z)-十九碳-10-烯基、(10Z,13Z)-十九碳-10,13-二烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基、2,6,10-三甲基十一碳-1,5,9-三烯基或2,6,10,14-四甲基十五碳-1-烯基。(9)如上述(1)～(8)中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，作為藥物含有下述雙鏈核酸，所述雙鏈核酸具有分別為序列號(hào)7及8、序列號(hào)9及10、序列號(hào)11及12、序列號(hào)13及14、序列號(hào)15及16、序列號(hào)17及18、或序列號(hào)19及20的有義鏈及反義鏈。(10)如上述(1)～(9)中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，陽(yáng)離子性脂質(zhì)與該雙鏈核酸形成復(fù)合體，或者，形成陽(yáng)離子性脂質(zhì)組合中性脂質(zhì)及/或高分子而成的物質(zhì)與該雙鏈核酸的復(fù)合體。(11)如上述(1)～(9)中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，陽(yáng)離子性脂質(zhì)與該雙鏈核酸形成復(fù)合體，或者，形成陽(yáng)離子性脂質(zhì)與中性脂質(zhì)及/或高分子組合而成的物質(zhì)與該雙鏈核酸的復(fù)合體，脂質(zhì)粒子是由該復(fù)合體和將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成的脂質(zhì)粒子。(12)一種抑制CKAP5基因的表達(dá)的方法，所述方法包括下述步驟：使用上述(1)～(11)中任一項(xiàng)所述的組合物，向細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入該雙鏈核酸。(13)如上述(12)所述的方法，其中，細(xì)胞是位于哺乳類(lèi)的腫瘤中的細(xì)胞。(14)如上述(12)所述的方法，其中，細(xì)胞是位于哺乳類(lèi)的大腸、胰臟、胃、小腸、肝臟或食道中的細(xì)胞。(15)如上述(12)～(14)中任一項(xiàng)所述的方法，其中，向細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入的方法是通過(guò)靜脈內(nèi)施予而向細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入的方法。(16)CKAP5相關(guān)疾病的治療方法，所述治療方法包括向哺乳動(dòng)物施予上述(1)～(11)中任一項(xiàng)所述的組合物的步驟。(17)如上述(16)所述的方法，其中，施予的方法是靜脈內(nèi)施予。(18)癌的治療方法，所述治療方法包括向哺乳動(dòng)物施予上述(1)～(11)中任一項(xiàng)所述的組合物的步驟。(19)如上述(18)所述的方法，其中，施予的方法是靜脈內(nèi)施予。(20)用于治療CKAP5相關(guān)疾病的醫(yī)藥品，其包含上述(1)～(11)中任一項(xiàng)所述的組合物。(21)如上述(20)所述的醫(yī)藥品，其用于靜脈內(nèi)施予。(22)癌的治療劑，其包含上述(1)～(11)中任一項(xiàng)所述的組合物。(23)如上述(22)所述的癌的治療劑，其用于靜脈內(nèi)施予。發(fā)明的效果例如，將本發(fā)明的組合物施予至哺乳動(dòng)物后，能在生物體內(nèi)抑制CKAP5基因表達(dá)，治療CKAP5相關(guān)疾病。附圖說(shuō)明[圖1]表示以相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量向MIAPaCa-2異種移植小鼠(xenograftmice)分別施予實(shí)施例1中得到的制劑1-A～1-B后48小時(shí)后的腫瘤中CKAP5mRNA量?？v軸表示CKAP5mRNA量的相對(duì)值。需要說(shuō)明的是，相對(duì)值是以在對(duì)CKAP5的mRNA進(jìn)行半定量時(shí)普遍表達(dá)的mRNA計(jì)，將各樣品的HPRT1(次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶1，hypoxanthinephosphoribosyltransferase1)的mRNA量作為內(nèi)部對(duì)照，以與生理鹽水(saline)的相對(duì)值的形式算出的。[圖2]表示以相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量向MIAPaCa-2異種移植小鼠分別施予實(shí)施例2中得到的制劑1-C～1-F后48小時(shí)后的腫瘤中CKAP5mRNA量?？v軸表示CKAP5mRNA量的相對(duì)值。需要說(shuō)明的是，相對(duì)值是以在對(duì)CKAP5的mRNA進(jìn)行半定量時(shí)普遍表達(dá)的mRNA計(jì)，將各樣品的HPRT1(次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶1)的mRNA量作為內(nèi)部對(duì)照，以與生理鹽水的相對(duì)值的形式算出的。[圖3]表示以相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量向MIAPaCa-2異種移植小鼠分別施予實(shí)施例2中得到的制劑1-D～1-E后48小時(shí)后的腫瘤中人CKAP5mRNA量?？v軸表示CKAP5mRNA量的相對(duì)值。需要說(shuō)明的是，相對(duì)值是以在對(duì)CKAP5的mRNA進(jìn)行半定量時(shí)普遍表達(dá)的mRNA計(jì)，將各樣品的HPRT1(次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶1)的mRNA量作為內(nèi)部對(duì)照，以與生理鹽水的相對(duì)值的形式算出的。[圖4]表示以相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量向MIAPaCa-2異種移植小鼠分別施予實(shí)施例2中得到的制劑1-D～1-E后48小時(shí)后的骨髓細(xì)胞中小鼠CKAP5mRNA量。縱軸表示CKAP5mRNA量的相對(duì)值。需要說(shuō)明的是，相對(duì)值是以在對(duì)CKAP5的mRNA進(jìn)行半定量時(shí)普遍表達(dá)的mRNA計(jì)，將各樣品的HPRT1(次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶1)的mRNA量作為內(nèi)部對(duì)照，以與生理鹽水的相對(duì)值的形式算出的。[圖5]表示在第0天及第7天以相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量向MIAPaCa-2異種移植小鼠施予實(shí)施例3中得到的制劑1-B時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值的推移。縱軸表示以第0天為1時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值。橫軸表示實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后的經(jīng)過(guò)天數(shù)。白圓圈表示生理鹽水施予組，黑圓圈表示制劑施予組。[圖6]表示在第0天及第7天以相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量向MIAPaCa-2異種移植小鼠施予實(shí)施例3中得到的制劑1-D時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值的推移。縱軸表示以第0天為1時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值。橫軸表示實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后的經(jīng)過(guò)天數(shù)。白圓圈表示生理鹽水施予組，黑圓圈表示制劑施予組。[圖7]表示在第0天及第7天以相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量向MIAPaCa-2異種移植小鼠施予實(shí)施例3中得到的制劑1-E時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值的推移?？v軸表示以第0天為1時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值。橫軸表示實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后的經(jīng)過(guò)天數(shù)。白圓圈表示生理鹽水施予組，黑圓圈表示制劑施予組。[圖8]表示在第0天及第7天以相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量向MIAPaCa-2異種移植小鼠施予實(shí)施例3中得到的制劑1-G時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值的推移?？v軸表示以第0天為1時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值。橫軸表示實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后的經(jīng)過(guò)天數(shù)。白圓圈表示生理鹽水施予組，黑圓圈表示制劑施予組。[圖9]表示在第0天及第7天以相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量向MIAPaCa-2異種移植小鼠施予實(shí)施例4中得到的制劑1-A’及1-B”時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值的推移?？v軸表示以第0天為1時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值。橫軸表示實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后的經(jīng)過(guò)天數(shù)。白圓圈表示生理鹽水施予組，黑圓圈表示制劑1-A’施予組，黑三角表示制劑1-B”施予組。[圖10]表示在第0天及第7天以相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量向MIAPaCa-2異種移植小鼠施予實(shí)施例5中得到的制劑1-B”’、1-C”及1-E”時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值的推移。縱軸表示以第0天為1時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值。橫軸表示實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后的經(jīng)過(guò)天數(shù)。白圓圈表示生理鹽水施予組，黑圓圈表示制劑1-E”施予組，黑三角表示制劑1-B”’施予組，黑方塊表示制劑1-C”施予組。[圖11]表示在第0天及第7天以相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量向MIAPaCa-2異種移植小鼠施予實(shí)施例5中得到的制劑1-B”’、1-D”及1-F”時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值的推移。縱軸表示以第0天為1時(shí)的腫瘤體積的相對(duì)值。橫軸表示實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后的經(jīng)過(guò)天數(shù)。白圓圈表示生理鹽水施予組，黑圓圈表示制劑1-D”施予組，黑三角表示制劑1-B”’施予組，黑方塊表示制劑1-F”施予組。具體實(shí)施方式本發(fā)明提供含有下述脂質(zhì)粒子的組合物，所述脂質(zhì)粒子含有：作為藥物的具有使得CKAP5基因的表達(dá)降低或終止的能力的雙鏈核酸、和陽(yáng)離子性脂質(zhì)。另外，還提供將該組合物施予至哺乳動(dòng)物、以抑制生物體內(nèi)CKAP5基因表達(dá)、治療CKAP5相關(guān)疾病的方法。本發(fā)明還提供用于預(yù)防或治療過(guò)度增殖性病癥或疾病(例如白血病、黑色素瘤、細(xì)胞瘤、癌、腫瘤、腺瘤)或與不恰當(dāng)?shù)腃KAP5基因的表達(dá)相關(guān)的1種以上的血管新生性疾病的方法。本發(fā)明的組合物中的脂質(zhì)粒子含有式(I)表示的陽(yáng)離子性脂質(zhì)。(式(I)中，R1及R2相同或不同，為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或炔基，L1及L2相同或不同，為-CO-O-或-O-CO-，a及b相同或不同，為1～3，R3為氫原子、碳原子數(shù)為1～6的烷基或碳原子數(shù)為3～6的鏈烯基。)以下，有時(shí)也將式(I)表示的化合物稱(chēng)為化合物(I)。其他化學(xué)式編號(hào)的化合物也同樣。另外，本發(fā)明的組合物中的脂質(zhì)粒子是含有化合物(I)及式(II)表示的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的脂質(zhì)粒子。(式(II)中，R4及R5相同或不同，為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或炔基，R6為氫原子、碳原子數(shù)為1～6的烷基、碳原子數(shù)為3～6的鏈烯基、吡咯烷-3-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基或者被相同或不同的1～3個(gè)的氨基、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基、烷氧基、氨基甲酰基、單烷基氨基甲?；?、二烷基氨基甲酰基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的碳原子數(shù)為1～6的烷基或碳原子數(shù)為3～6的鏈烯基。)式(I)的各基團(tuán)的定義中，作為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基，可舉出例如十二烷基、十三烷基、十四烷基、2,6,10-三甲基十一烷基、十五烷基、3,7,11-三甲基十二烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基、6,10,14-三甲基十五烷-2-基、十九烷基、2,6,10,14-四甲基十五烷基、二十烷基、3,7,11,15-四甲基十六烷基、二十一烷基、二十二烷基、二十三烷基、二十四烷基等。式(I)的各基團(tuán)的定義中，作為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的鏈烯基，只要是包含1～3個(gè)雙鍵的碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的鏈烯基即可，可舉出例如(Z)-十三碳-8-烯基、(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十五碳-8-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十七碳-5-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十七碳-8-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十七碳-8-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十七碳-10-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(8Z,11Z)-十七碳-8,11-二烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(8Z,11Z,14Z)-十七碳-8,11,14-三烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-十九碳-10-烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(10Z,13Z)-十九碳-10,13-二烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基、2,6,10-三甲基十一碳-1,5,9-三烯基、3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基、2,6,10,14-四甲基十五碳-1-烯基、3,7,11,15-四甲基十六碳-2-烯基等，可優(yōu)選舉出(Z)-十五碳-8-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十七碳-5-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十七碳-8-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(8Z,11Z)-十七碳-8,11-二烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基等。式(I)的各基團(tuán)的定義中，作為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的炔基，只要是包含1～3個(gè)三鍵的碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的炔基即可，可舉出例如十二碳-11-炔基、十三碳-12-炔基、十五碳-6-炔基、十六碳-7-炔基、十五碳-4,6-二炔基、十六碳-5,7-二炔基、十七碳-8-炔基、十八碳-9-炔基等。需要說(shuō)明的是，化合物(I)中，R1及R2優(yōu)選為相同的碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或炔基。另外，R1及R2更優(yōu)選為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基或鏈烯基，進(jìn)一步優(yōu)選為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀的鏈烯基。式(II)的各基團(tuán)的定義中，作為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基，可舉出例如十二烷基、十三烷基、十四烷基、2,6,10-三甲基十一烷基、十五烷基、3,7,11-三甲基十二烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基、6,10,14-三甲基十五烷-2-基、十九烷基、2,6,10,14-四甲基十五烷基、二十烷基、3,7,11,15-四甲基十六烷基、二十一烷基、二十二烷基、二十三烷基、二十四烷基等。式(II)的各基團(tuán)的定義中，作為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的鏈烯基，只要是包含1～3個(gè)雙鍵的碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的鏈烯基即可，可舉出例如(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基、3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基、3,7,11,15-四甲基十六碳-2-烯基等，可優(yōu)選舉出(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基等。式(II)的各基團(tuán)的定義中，作為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的炔基，只要是包含1～3個(gè)三鍵的碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的炔基即可，可舉出例如十二碳-11-炔基、十四碳-6-炔基、十六碳-7-炔基、十六碳-5,7-二炔基、十八碳-9-炔基等。需要說(shuō)明的是，化合物(II)中，R4及R5優(yōu)選為相同的碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或炔基。另外，R4及R5更優(yōu)選為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基或鏈烯基，進(jìn)一步優(yōu)選為碳原子數(shù)為12～24的直鏈狀的鏈烯基。式(I)及式(II)的各基團(tuán)的定義中，作為碳原子數(shù)為1～6的烷基，可舉出例如甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、環(huán)丁基、環(huán)丙基甲基、戊基、異戊基、仲戊基、新戊基、叔戊基、環(huán)戊基、己基、環(huán)己基等，可優(yōu)選舉出甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、仲戊基、叔戊基、新戊基、己基等，可進(jìn)一步優(yōu)選舉出甲基、乙基、丙基等。作為碳原子數(shù)為3～6的鏈烯基，可舉出例如烯丙基、1-丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基等，可優(yōu)選舉出烯丙基等。被取代的碳原子數(shù)為1～6的烷基中的烷基部分及被取代的碳原子數(shù)為3～6的鏈烯基中的鏈烯基部分分別與上述碳原子數(shù)為1～6的烷基及碳原子數(shù)為3～6的鏈烯基含義相同?；衔?I)及化合物(II)中，結(jié)構(gòu)中的氮原子的孤對(duì)電子上可以配位氫離子，該配位了氫離子的氮原子可以與制藥上可接受的陰離子形成鹽，化合物(I)及化合物(II)也包括氫離子配位于該氮原子的孤對(duì)電子而得到的化合物。作為制藥上可接受的陰離子，可舉出例如氯化物離子、溴化物離子、硝酸根離子、硫酸根離子、磷酸根離子等無(wú)機(jī)離子，乙酸根離子、草酸根離子、馬來(lái)酸根離子、富馬酸根離子、檸檬酸根離子、苯甲酸根離子、甲磺酸根離子等有機(jī)酸離子等。式(II)的定義中，吡咯烷-3-基、哌啶-3-基及哌啶-4-基分別包含鍵合于各自環(huán)中氮原子上的氫原子被改變?yōu)榧谆蛞一玫降幕鶊F(tuán)。作為單烷基氨基及二烷基氨基，分別可以為被1個(gè)、及相同或不同的2個(gè)下述基團(tuán)取代的氨基，所述基團(tuán)為碳原子數(shù)為1～6的烷基(與上文所述的含義相同)或者被氨基、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的碳原子數(shù)為1～6的烷基(與上文所述的含義相同)，可舉出例如甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、丁基氨基、戊基氨基、己基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、乙基甲基氨基、甲基丙基氨基、丁基甲基氨基、甲基戊基氨基、己基甲基氨基、氨基乙基氨基、氨基丙基氨基、(氨基乙基)甲基氨基、雙(氨基乙基)氨基等，可優(yōu)選舉出甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、氨基丙基氨基、雙(氨基乙基)氨基等?；衔?II)中，氨基、單烷基氨基及二烷基氨基分別可以在氮原子的孤對(duì)電子上配位氫離子而形成銨基(ammonio)、單烷基銨基及二烷基銨基，氨基、單烷基氨基及二烷基氨基分別包括銨基、單烷基銨基及二烷基銨基。此時(shí)，在氨基、單烷基氨基及二烷基氨基的氮原子的孤對(duì)電子上配位了氫離子而成的銨基、單烷基銨基及二烷基銨基可以與制藥上可接受的陰離子(與上文所述的含義相同)形成鹽。作為烷氧基，可以是被下述基團(tuán)取代的羥基，所述基團(tuán)為碳原子數(shù)為1～6的烷基(與上文所述的含義相同)或者被氨基、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的碳原子數(shù)為1～6的烷基(與上文所述的含義相同)，可舉出例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基、氨基乙氧基、甲基氨基乙氧基等，可優(yōu)選舉出甲氧基、乙氧基、氨基乙氧基、甲基氨基乙氧基等。作為單烷基氨基甲?；岸榛被柞；?，分別可以為被1個(gè)、及相同或不同的2個(gè)下述基團(tuán)取代的氨基甲酰基，所述基團(tuán)為碳原子數(shù)為1～6的烷基(與上文所述的含義相同)或者被氨基、甲基氨基、乙基氨基、二甲基氨基、二乙基氨基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的碳原子數(shù)為1～6的烷基(與上文所述的含義相同)，可舉出例如甲基氨基甲酰基、乙基氨基甲酰基、丙基氨基甲酰基、丁基氨基甲酰基、戊基氨基甲酰基、己基氨基甲?；?、二甲基氨基甲酰基、二乙基氨基甲?；⒁一谆被柞；?、甲基丙基氨基甲酰基、丁基甲基氨基甲?；?、甲基戊基氨基甲?；?、己基甲基氨基甲酰基、氨基乙基氨基甲?；?、氨基丙基氨基甲?；?、(氨基乙基)甲基氨基甲?；?、雙(氨基乙基)氨基甲?；?，可優(yōu)選舉出甲基氨基甲?；?、乙基氨基甲?；?、二甲基氨基甲?；?。化合物(I)中，當(dāng)L1及L2為-O-CO-時(shí)，更優(yōu)選地，R1及R2相同或不同，為十二烷基、十四烷基、十六烷基、十八烷基、二十烷基、二十二烷基、二十四烷基、(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基、3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基或3,7,11,15-四甲基十六碳-2-烯基，進(jìn)一步優(yōu)選為相同或不同的十四烷基、十六烷基、十八烷基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(Z)-二十碳-11-烯基或(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基。需要說(shuō)明的是，在任一情況下，R1與R2相同均是進(jìn)一步優(yōu)選的。另外，當(dāng)L1及L2為-CO-O-時(shí)，更優(yōu)選地，R1及R2相同或不同，為十三烷基、十五烷基、十七烷基、十九烷基、二十一烷基、二十三烷基、(Z)-十三碳-8-烯基、(Z)-十五碳-8-烯基、(Z)-十七碳-5-烯基、(Z)-十七碳-8-烯基、(E)-十七碳-8-烯基、(Z)-十七碳-10-烯基、(8Z,11Z)-十七碳-8,11-二烯基、(8Z,11Z,14Z)-十七碳-8,11,14-三烯基、(Z)-十九碳-10-烯基、(10Z,13Z)-十九碳-10,13-二烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基、2,6,10-三甲基十一碳-1,5,9-三烯基或2,6,10,14-四甲基十五碳-1-烯基，進(jìn)一步優(yōu)選為相同或不同的十三烷基、十五烷基、十七烷基、(Z)-十五碳-8-烯基、(Z)-十七碳-5-烯基、(Z)-十七碳-8-烯基、(8Z,11Z)-十七碳-8,11-二烯基或(Z)-十九碳-10-烯基、(10Z,13Z)-十九碳-10,13-二烯基。需要說(shuō)明的是，在任一情況下，R1與R2相同均是優(yōu)選的。另外，更優(yōu)選地，a及b同時(shí)為1。另外，a及b同時(shí)為1、L1及L2為-CO-O-也是本發(fā)明的更優(yōu)選的實(shí)施方式之一。此時(shí)，R1及R2更優(yōu)選為相同或不同的(Z)-十七碳-8-烯基或(8Z,11Z)-十七碳-8,11-二烯基，最優(yōu)選相同且為(Z)-十七碳-8-烯基或(8Z,11Z)-十七碳-8,11-二烯基。另外，R3更優(yōu)選為氫原子或甲基。另外，a及b為1、L1及L2相同且為-CO-O-或-O-CO-(優(yōu)選-CO-O-)、R3為甲基的實(shí)施方式也是本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方式之一。R1及R2更優(yōu)選為相同或不同的(Z)-十七碳-8-烯基或(8Z,11Z)-十七碳-8,11-二烯基，最優(yōu)選相同且為(Z)-十七碳-8-烯基或(8Z,11Z)-十七碳-8,11-二烯基。需要說(shuō)明的是，當(dāng)R3為氫原子時(shí)，L1及L2相同且為-CO-O-或-O-CO-(優(yōu)選-CO-O-)的實(shí)施方式也是本發(fā)明的更優(yōu)選實(shí)施方式之一。R1及R2更優(yōu)選為相同或不同的(Z)-十七碳-5-烯基或(Z)-十七碳-8-烯基，最優(yōu)選相同且為(Z)-十七碳-5-烯基或(Z)-十七碳-8-烯基?；衔?II)中，R4及R5優(yōu)選為相同或不同的十四烷基、十六烷基、(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基或(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基，更優(yōu)選為相同或不同的(Z)-十八碳-9-烯基或(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基，最優(yōu)選相同且為(Z)-十八碳-9-烯基或(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基。另外，R6優(yōu)選為氫原子、甲基、吡咯烷-3-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基或者被相同或不同的1～3個(gè)的氨基、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基、烷氧基、氨基甲?；?、單烷基氨基甲?；?、二烷基氨基甲?；⑦量┩榛?、哌啶基或嗎啉基取代的碳原子數(shù)為1～6的烷基或碳原子數(shù)為3～6的鏈烯基，更優(yōu)選為氫原子、甲基或者被1個(gè)氨基、羥基或氨基甲?；〈奶荚訑?shù)為1～6的烷基或碳原子數(shù)為3～6的鏈烯基，最優(yōu)選為氫原子、甲基等。另外，R6為氫原子的實(shí)施方式也是本發(fā)明的更優(yōu)選實(shí)施方式之一。此時(shí)，R4及R5更優(yōu)選為相同或不同的十四烷基、十六烷基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(Z)-二十碳-11-烯基或(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基，最優(yōu)選相同且為(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基或(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基。另外，R6為甲基的實(shí)施方式也是本發(fā)明的更優(yōu)選實(shí)施方式之一。此時(shí)，R4及R5更優(yōu)選為相同或不同的十四烷基、十六烷基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(Z)-二十碳-11-烯基或(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基，最優(yōu)選相同且為(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基?；衔?I)可利用與國(guó)際公開(kāi)第2011/136368號(hào)中記載的制造方法同樣的方法得到。需要說(shuō)明的是，當(dāng)上文定義的基團(tuán)在該制造方法的條件下發(fā)生變化或不適于實(shí)施該制造方法時(shí)，可通過(guò)使用在有機(jī)合成化學(xué)中常用的保護(hù)基的導(dǎo)入及除去方法[例如，有機(jī)合成中的保護(hù)基(ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis)，第三版、T.W.Greene著，JohnWiley&SonsInc.(1999年)等所記載的方法]等，來(lái)制造目標(biāo)化合物。另外，根據(jù)需要，也可改變?nèi)〈鶎?dǎo)入等的反應(yīng)工序的順序。接下來(lái)，說(shuō)明化合物(II)的制造方法。需要說(shuō)明的是，在以下所示的制造方法中，當(dāng)上文定義的基團(tuán)在該制造方法的條件下發(fā)生變化或不適于實(shí)施該制造方法時(shí)，可通過(guò)使用在有機(jī)合成化學(xué)中常用的保護(hù)基的導(dǎo)入及除去方法[例如，有機(jī)合成中的保護(hù)基，第三版、T.W.Greene著，JohnWiley&SonsInc.(1999年)等所記載的方法]等，來(lái)制造目標(biāo)化合物。另外，根據(jù)需要，也可改變?nèi)〈鶎?dǎo)入等的反應(yīng)工序的順序。制造方法1化合物(II)可通過(guò)以下的方法來(lái)制造。(式中，R4、R5及R6分別與上文所述的含義相同，Z表示氯原子、溴原子、碘原子、三氟甲磺?；趸?、甲磺?；趸⒈交酋；趸?、對(duì)甲苯磺?；趸入x去基團(tuán))工序1及2化合物(IIIb)可通過(guò)以下方法來(lái)制造：在無(wú)溶劑下或在溶劑中，根據(jù)需要優(yōu)選在1～10當(dāng)量的堿的存在下，在室溫與200℃之間的溫度下，使化合物(IIIa)與化合物(IVa)反應(yīng)5分鐘～100小時(shí)。進(jìn)而，化合物(II)可通過(guò)以下方法來(lái)制造：在無(wú)溶劑下或在溶劑中，根據(jù)需要優(yōu)選在1～10當(dāng)量的堿的存在下，在室溫與200℃之間的溫度下，使化合物(IIIb)與化合物(IVb)反應(yīng)5分鐘～100小時(shí)。作為溶劑，可舉出例如甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、甲苯、乙酸乙酯、乙腈、乙醚、四氫呋喃、1,2-二甲氧基乙烷、二氧雜環(huán)己烷、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、吡啶、水等，它們可以單獨(dú)使用或混合使用。作為堿，可舉出例如碳酸鉀、氫氧化鉀、氫氧化鈉、甲醇鈉、叔丁醇鉀、三乙基胺、二異丙基乙基胺、N-甲基嗎啉、吡啶、1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-7-十一碳烯(DBU)等?；衔?IIIa)可作為市售品或利用已知的方法(例如，第5版實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座14“有機(jī)化合物的合成II”，第5版，p.351，丸善(2005年))或以此為基準(zhǔn)的方法得到?；衔?IVa)及化合物(IVb)可作為市售品或利用已知的方法(例如，第5版實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座13“有機(jī)化合物的合成I”，第5版，p.374，丸善(2005年))或以此為基準(zhǔn)的方法得到。R4與R5相同時(shí)的化合物(IIa)可通過(guò)在工序1中使用2當(dāng)量以上的化合物(IVa)而得到。制造方法2化合物(II)中的R6為-CHRARB的化合物(IIb)也可通過(guò)以下的方法制造(式-CHRARB中，RA及RB相同或不同，為氫原子、碳原子數(shù)為1～5的烷基、碳原子數(shù)為2～5的鏈烯基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、嗎啉-2-基、嗎啉-3-基或者被相同或不同的1～3個(gè)的氨基、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基、烷氧基、氨基甲?；瓮榛被柞；?、二烷基氨基甲酰基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的碳原子數(shù)為1～5的烷基或碳原子數(shù)為2～5的鏈烯基，或者與鄰接的碳原子一起形成吡咯烷-3-基、哌啶-3-基或哌啶-4-基，除了RA及RB相同且為氫原子的情況之外，RA及RB的烷基、被取代的烷基的烷基部分、鏈烯基及被取代的鏈烯基的鏈烯基部分的碳原子數(shù)的總和為1～5，當(dāng)RA及RB中的任一方是吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、嗎啉-2-基或嗎啉-3-基時(shí)，該RA及RB中的另一方是氫原子、碳原子數(shù)為1～5的烷基、碳原子數(shù)為2～5的鏈烯基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、嗎啉-2-基、嗎啉-3-基或者被相同或不同的1個(gè)或2個(gè)氨基、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基、烷氧基、氨基甲酰基、單烷基氨基甲?；⒍榛被柞；?、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的碳原子數(shù)為1～5的烷基或碳原子數(shù)為2～5的鏈烯基，當(dāng)RA及RB為被取代的烷基或鏈烯基時(shí)，該取代基的總數(shù)為2或3)。(式中，R4、R5、RA及RB分別與上文所述的含義相同)工序3化合物(IIb)可通過(guò)以下方式來(lái)制造：在溶劑中，在優(yōu)選1～大量過(guò)量的還原劑及根據(jù)需要在優(yōu)選1～10當(dāng)量的酸的存在下，在-20℃與150℃之間的溫度下，使化合物(II)中R6為氫原子的化合物(IIc)與優(yōu)選1～10當(dāng)量的化合物(V)反應(yīng)5分鐘～72小時(shí)。作為溶劑，可舉出例如甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、甲苯、乙酸乙酯、乙腈、乙醚、四氫呋喃、1,2-二甲氧基乙烷、二氧雜環(huán)己烷、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、水等，它們可以單獨(dú)使用或混合使用。作為還原劑，可舉出例如三乙酰氧基硼氫化鈉、氰化硼氫化鈉等。作為酸，可舉出例如鹽酸、乙酸等?；衔?V)可作為市售品或利用已知的方法(例如，第5版實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座15“有機(jī)化合物的合成III”，第5版，p.1，丸善(2005年)；第5版實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座15“有機(jī)化合物的合成III”，第5版，p.153，丸善(2005年))或以此為基準(zhǔn)而得到。制造方法3化合物(II)中的R6為-CH2-C(OH)RCRD的化合物(IId)也可利用以下的方法來(lái)制造(式-CH2-C(OH)RCRD中，RC及RD相同或不同，為氫原子、碳原子數(shù)為1～4的烷基、碳原子數(shù)為2～4的鏈烯基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、嗎啉-2-基、嗎啉-3-基或者被相同或不同的1個(gè)或2個(gè)氨基、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基、烷氧基、氨基甲酰基、單烷基氨基甲?；?、二烷基氨基甲酰基、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的碳原子數(shù)為1～4的烷基或碳原子數(shù)為2～4的鏈烯基，除了RC及RD相同且為氫原子的情況之外，RC及RD的烷基、被取代的烷基的烷基部分、鏈烯基及被取代的鏈烯基的鏈烯基部分的碳原子數(shù)的總和為1～4，RC及RD中的任一方是吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、嗎啉-2-基或嗎啉-3-基時(shí)，該RC及RD中的另一方是氫原子、碳原子數(shù)為1～4的烷基、碳原子數(shù)為2～4的鏈烯基、吡咯烷-2-基、吡咯烷-3-基、哌啶-2-基、哌啶-3-基、哌啶-4-基、嗎啉-2-基、嗎啉-3-基或者被1個(gè)氨基、單烷基氨基、二烷基氨基、羥基、烷氧基、氨基甲酰基、單烷基氨基甲酰基、二烷基氨基甲?；?、吡咯烷基、哌啶基或嗎啉基取代的碳原子數(shù)為1～4的烷基或碳原子數(shù)為2～4的鏈烯基，RC及RD為被取代的烷基或鏈烯基時(shí)，該取代基的總數(shù)為2)。(式中，R4、R5、RC及RD分別與上文所述的含義相同)工序4化合物(IId)可通過(guò)以下方式來(lái)制造：在溶劑中或在無(wú)溶劑下，在0℃與230℃之間的溫度下，使化合物(IIc)與化合物(VI)反應(yīng)5分鐘至100小時(shí)。作為溶劑，可舉出例如甲醇、乙醇、1-丙醇、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、甲苯、乙酸乙酯、乙腈、乙醚、四氫呋喃、1,2-二甲氧基乙烷、二氧雜環(huán)己烷、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亞砜等，它們可以單獨(dú)使用或混合使用。化合物(VI)可作為市售品或利用已知的方法(例如，第5版實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座17“有機(jī)化合物的合成V”，第5版，p.186，丸善(2005年))或以此為基準(zhǔn)而得到?；衔?II)中的R4、R5或R6中包含的官能團(tuán)的轉(zhuǎn)化可利用已知的方法[例如，有機(jī)官能團(tuán)轉(zhuǎn)換(ComprehensiveOrganicTransformations)，第二版，R.C.Larock著，VchVerlagsgesellschaftMbh(1999年)等所記載的方法]進(jìn)行或以這些方法為基準(zhǔn)進(jìn)行。上述各制造方法中的中間體及目標(biāo)化合物可通過(guò)實(shí)施在有機(jī)合成化學(xué)中常用的分離純化法例如過(guò)濾、萃取、洗滌、干燥、濃縮、重結(jié)晶、各種色譜法等而進(jìn)行分離純化。另外，也可不特別地對(duì)中間體進(jìn)行純化地供于下一反應(yīng)。化合物(I)及化合物(II)中，也可存在幾何異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體等立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體等，化合物(I)及化合物(II)包含所有可能的異構(gòu)體(包括上述這些在內(nèi))及它們的混合物?；衔?I)及化合物(II)中的各原子的一部分或全部，也可各自用對(duì)應(yīng)的同位素原子取代，化合物(I)及化合物(II)也包含這些用同位素原子取代而得到的化合物。例如，化合物(I)及化合物(II)中的氫原子的一部分或全部可以是原子量為2的氫原子(氘原子)?；衔?I)及化合物(II)中的各原子的一部分或全部各自用對(duì)應(yīng)的同位素原子取代而得到的化合物可使用市售的結(jié)構(gòu)單元(buildingblock)、利用與上述各制造方法同樣的方法來(lái)制造。另外，化合物(I)及化合物(II)中的氫原子的一部分或全部經(jīng)氘原子取代而得到的化合物例如也可使用以下方法合成：使用銥絡(luò)合物作為催化劑，使用重水作為氘源，對(duì)醇、羧酸等進(jìn)行氘代的方法[參見(jiàn)美國(guó)化學(xué)會(huì)志(JournaloftheAmericanChemicalSociety，J.Am.Chem.Soc.)，Vol.124，No.10，2092(2002)]等。將化合物(I)的具體例示于表1，將化合物(II)的具體例示于表2。但本發(fā)明中的化合物(I)及化合物(II)不限于這些。[表1][表2]另外，本發(fā)明中使用的作為藥物的雙鏈核酸是以下雙鏈核酸：當(dāng)被導(dǎo)入至哺乳類(lèi)細(xì)胞中時(shí)、具有使CKAP5基因的表達(dá)降低或終止的能力，其具有有義鏈及反義鏈，該有義鏈和該反義鏈具有至少25個(gè)堿基對(duì)，該反義鏈具有與序列號(hào)1～6中任一的CKAP5基因的mRNA(CKAP5mRNA)的靶標(biāo)序列的連續(xù)至少19個(gè)堿基的序列互補(bǔ)的堿基序列，具有最長(zhǎng)為35個(gè)核苷酸的長(zhǎng)度。作為雙鏈核酸，只要是核苷酸及/或具有與該核苷酸同等的功能的分子聚合而成的雙鏈的分子，就可以是任何分子，可舉出例如作為核糖核苷酸的聚合物的RNA、作為脫氧核糖核苷酸的聚合物的DNA、包含RNA和DNA的嵌合核酸、及這些核酸中至少一個(gè)核苷酸被具有與該核苷酸同等功能的分子取代而得到的核苷酸聚合物。另外，包含至少一個(gè)核苷酸及/或具有與該核苷酸同等的功能的分子聚合而成的分子作為結(jié)構(gòu)單元的衍生物也包括在本發(fā)明的雙鏈核酸之內(nèi)。進(jìn)而，還可舉出肽核酸(PNA)[化學(xué)研究述評(píng)(Acc.Chem.Res.),32,624(1999)]、氧肽核酸(OPNA)[美國(guó)化學(xué)會(huì)志(J.Am.Chem.Soc.),123,4653(2001)]、肽核糖核酸(PRNA)[美國(guó)化學(xué)會(huì)志(J.Am.Chem.Soc.),122,6900(2000)]等。需要說(shuō)明的是，本發(fā)明中，RNA中的尿嘧啶核苷U和DNA中的胸腺嘧啶核苷T可以互換讀出。作為與核苷酸具有同等功能的分子，可以舉出例如核苷酸衍生物等。作為核苷酸衍生物，只要是對(duì)核苷酸進(jìn)行修飾而得的分子則可以為任何分子，例如與天然來(lái)源的RNA或者DNA相比為了提高核酸酶耐性或使其免受其他分解因子的影響而穩(wěn)定化、為了提高與互補(bǔ)鏈核酸的親和性、為了提高細(xì)胞透過(guò)性、或者為了使其可被觀察到，適合使用對(duì)核糖核苷酸或者脫氧核糖核苷酸進(jìn)行修飾而得的分子等。作為核苷酸衍生物，可以舉出例如糖部修飾核苷酸、磷酸二酯鍵修飾核苷酸、堿基修飾核苷酸等。作為糖部修飾核苷酸，只要為對(duì)核苷酸的糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)的一部分或者全部用任意的取代基進(jìn)行了修飾或取代的產(chǎn)物、或者用任意的原子進(jìn)行了取代的產(chǎn)物，則可以為任何物質(zhì)，優(yōu)選可以使用2’-修飾核苷酸。作為糖部修飾核苷酸中的修飾基團(tuán)，可舉出例如2’-氰基、2’-烷基、2’-取代烷基、2’-鏈烯基、2’-取代鏈烯基、2’-鹵素、2’-O-氰基、2’-O-烷基、2’-O-取代烷基、2’-O-鏈烯基、2’-O-取代鏈烯基、2’-S-烷基、2’-S-取代烷基、2’-S-鏈烯基、2’-S-取代鏈烯基、2’-氨基、2’-NH-烷基、2’-NH-取代烷基、2’-NH-鏈烯基、2’-NH-取代鏈烯基、2’-SO-烷基、2’-SO-取代烷基、2’-羧基、2’-CO-烷基、2’-CO-取代烷基、2’-Se-烷基、2’-Se-取代烷基、2’-SiH2-烷基、2’-SiH2-取代烷基、2’-ONO2、2’-NO2、2’-N3、2’-氨基酸殘基(從氨基酸的羧酸中除去羥基而得到的基團(tuán))、2’-O-氨基酸殘基(與上述氨基酸殘基含義相同)等。另外，具有2’位的修飾基團(tuán)與4’位的碳原子橋聯(lián)而成的結(jié)構(gòu)的橋聯(lián)結(jié)構(gòu)型人工核酸(BridgedNucleicAcid)(BNA)，更具體而言，2’位的氧原子與4’位的碳原子經(jīng)亞甲基橋聯(lián)的鎖人工核酸(LockedNucleicAcid)(LNA)、及亞乙基橋聯(lián)結(jié)構(gòu)型人工核酸(Ethylenebridgednucleicacid)(ENA)[核酸研究(NucleicAcidResearch),32,e175(2004)]等也被包含在本發(fā)明中的在2’位被修飾基團(tuán)取代的核苷酸內(nèi)。作為糖部修飾核苷酸的修飾基團(tuán)，優(yōu)選2’-氰基、2’-鹵素、2’-O-氰基、2’-烷基、2’-取代烷基、2’-O-烷基、2’-O-取代烷基、2’-O-鏈烯基、2’-O-取代鏈烯基、2’-Se-烷基、2’-Se-取代烷基等，更優(yōu)選2’-氰基、2’-氟、2’-氯、2’-溴、2’-三氟甲基、2’-O-甲基、2’-O-乙基、2’-O-異丙基、2’-O-三氟甲基、2’-O-[2-(甲氧基)乙基]、2’-O-(3-氨基丙基)、2’-O-[2-(N,N-二甲基)氨基氧基]乙基、2’-O-[3-(N,N-二甲基氨基)丙基]、2’-O-{2-[2-(N,N-二甲基氨基)乙氧基]乙基}、2’-O-[2-(甲基氨基)-2-氧代乙基]、2’-Se-甲基等，進(jìn)一步優(yōu)選2’-O-甲基、2’-O-乙基、2’-氟等，最優(yōu)選2’-O-甲基、2’-O-乙基。另外，關(guān)于糖部修飾核苷酸的修飾基團(tuán)，還可以從其大小考慮來(lái)定義優(yōu)選范圍，從氟的大小考慮，優(yōu)選相當(dāng)于-O-丁基的大小的基團(tuán)，從-O-甲基的大小考慮，更優(yōu)選相當(dāng)于-O-乙基的大小的基團(tuán)。糖部修飾核苷酸的修飾基團(tuán)中的烷基與化合物(II)中的碳原子數(shù)為1～6的烷基含義相同。糖部修飾核苷酸的修飾基團(tuán)中的鏈烯基與化合物(II)中的碳原子數(shù)為3～6的鏈烯基含義相同。作為糖部修飾核苷酸的修飾基團(tuán)中的鹵素，可舉出氟原子、氯原子、溴原子、碘原子。作為氨基酸殘基中的氨基酸，可以舉出例如脂肪族氨基酸(具體為甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸等)、羥基氨基酸(具體為絲氨酸、蘇氨酸等)、酸性氨基酸(具體為天冬氨酸、谷氨酸等)、酸性氨基酸酰胺(具體為天冬酰胺、谷氨酰胺等)、堿性氨基酸(具體為賴(lài)氨酸、羥基賴(lài)氨酸、精氨酸、鳥(niǎo)氨酸等)、含硫氨基酸(具體為半胱氨酸、胱氨酸、甲硫氨酸等)、亞氨基酸(具體為脯氨酸、4-羥基脯氨酸等)等。作為糖部修飾核苷酸的修飾基團(tuán)中的取代烷基及取代鏈烯基中的取代基，可以舉出例如鹵素(與上文所述的含義相同)、羥基、巰基、氨基、氧代基(oxo)、-O-烷基(該-O-烷基的烷基部分與上文所述的烷基含義相同)、-S-烷基(該-S-烷基的烷基部分與上文所述的烷基含義相同)、-NH-烷基(該-NH-烷基的烷基部分與上文所述的烷基含義相同)、二烷基氨基氧基(該二烷基氨基氧基的2個(gè)烷基部分相同或不同，與上文所述的烷基含義相同)、二烷基氨基(該二烷基氨基的2個(gè)烷基部分相同或不同，與上文所述的烷基含義相同)、二烷基氨基亞烷基氧基(該二烷基氨基亞烷基氧基的2個(gè)烷基部分相同或不同，與上文所述的烷基含義相同，亞烷基部分表示從上文所述的烷基中除去1個(gè)氫原子而得到的基團(tuán))等，取代數(shù)優(yōu)選為1～3。作為磷酸二酯鍵修飾核苷酸，只要是對(duì)核苷酸的磷酸二酯鍵的化學(xué)結(jié)構(gòu)的一部分或者全部用任意的取代基修飾或取代而得的核苷酸，或者用任意的原子取代而得的核苷酸，則可以為任意的核苷酸，可以舉出例如磷酸二酯鍵被硫代磷酸酯鍵取代而得的核苷酸、磷酸二酯鍵被二硫代磷酸酯鍵取代而得的核苷酸、磷酸二酯鍵被膦酸烷基酯鍵取代而得的核苷酸、磷酸二酯鍵被氨基磷酸酯鍵取代而得的核苷酸等。作為堿基修飾核苷酸，只要是對(duì)核苷酸的堿基的化學(xué)結(jié)構(gòu)的一部分或者全部用任意的取代基修飾或取代而得的核苷酸，或者用任意的原子取代而得的核苷酸，則可以為任意的核苷酸，可以舉出例如堿基內(nèi)的氧原子被硫原子取代而得的核苷酸，氫原子被碳原子數(shù)為1～6的烷基取代而得的核苷酸，甲基被氫原子或碳原子數(shù)為2～6的烷基取代而得的核苷酸，氨基被碳原子數(shù)為1～6的烷基、碳原子數(shù)為1～6的烷酰基等保護(hù)基保護(hù)的核苷酸。進(jìn)而，作為核苷酸衍生物，還可以舉出在核苷酸或者糖部、磷酸二酯鍵或堿基的至少一方被修飾而得的核苷酸衍生物中加成脂質(zhì)、磷脂、吩嗪、葉酸(folate)、菲啶、蒽醌、吖啶、熒光素、羅丹明、香豆素、色素等、其他化學(xué)物質(zhì)而得到的產(chǎn)物，具體而言，可以舉出經(jīng)5’-多胺加成的核苷酸衍生物、經(jīng)膽固醇加成的核苷酸衍生物、經(jīng)甾體加成的核苷酸衍生物、經(jīng)膽汁酸加成的核苷酸衍生物、經(jīng)維生素加成的核苷酸衍生物、經(jīng)Cy5熒光色素加成的核苷酸衍生物、經(jīng)Cy3熒光色素加成的核苷酸衍生物、經(jīng)6-熒光素(FAM)加成的核苷酸衍生物、及經(jīng)生物素加成的核苷酸衍生物等。另外，核苷酸衍生物也可以與雙鏈核酸內(nèi)的其他核苷酸或者核苷酸衍生物形成橋聯(lián)結(jié)構(gòu)(亞烷基結(jié)構(gòu)、肽結(jié)構(gòu)、核苷酸結(jié)構(gòu)、醚結(jié)構(gòu)、酯結(jié)構(gòu)、及它們中的至少一者組合而成的結(jié)構(gòu)等)。雙鏈核酸具有對(duì)于通過(guò)Dicer加工以產(chǎn)生siRNA來(lái)說(shuō)足夠的長(zhǎng)度。根據(jù)本實(shí)施方式，雙鏈核酸包含長(zhǎng)度優(yōu)選在26至30個(gè)核苷酸之間的有義鏈、和在生物學(xué)條件(在細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中觀察到的條件等)下與有義鏈退火的反義鏈。另外，雙鏈核酸可以具有增強(qiáng)基于Dicer的該加工的某些特性。根據(jù)本實(shí)施方式，雙鏈核酸具有對(duì)于通過(guò)Dicer加工以產(chǎn)生siRNA來(lái)說(shuō)足夠的長(zhǎng)度、及以下特性中的至少1種(優(yōu)選全部特性)，所述特性為：(i)雙鏈核酸為非對(duì)稱(chēng)，例如，在反義鏈上具有3’突起。(ii)為了Dicer結(jié)合及加工，在有義鏈的3’末端含有核苷酸衍生物(與上文所述的含義相同)。作為適當(dāng)?shù)暮塑账嵫苌?，包括脫氧核糖核苷酸、無(wú)環(huán)核苷酸(acyclonucleotide)及其類(lèi)似物等核苷酸，以及以立體方式嵌纏了熒光分子及其類(lèi)似物等而成的分子，優(yōu)選包括脫氧核糖核苷酸。當(dāng)使用核苷酸衍生物時(shí)，以雙鏈核酸的長(zhǎng)度不發(fā)生變化的方式，使核苷酸衍生物與雙鏈核酸中的核糖核苷酸置換。(iii)有義鏈在5’末端包含磷酸。在5’末端包含磷酸是指，結(jié)合于5’末端的堿基的糖的5’位的羥基，被磷酸基或可被生物體內(nèi)的核酸分解酶等轉(zhuǎn)化為磷酸基的基團(tuán)修飾。另外，雙鏈核酸優(yōu)選在反義鏈、或有義鏈、或兩種鏈中，具有1個(gè)或更多的2’-O-甲基修飾核苷酸。最優(yōu)選有義鏈包含25～28個(gè)核苷酸，有義鏈的3’末端的2個(gè)核苷酸是脫氧核糖核苷酸。有義鏈在5’末端包含磷酸。反義鏈包含26～30個(gè)核苷酸，而且，包含1～4個(gè)核苷酸的3’突出部。反義鏈及有義鏈具有1個(gè)或更多的2’-O-甲基修飾核苷酸。例如，對(duì)于25個(gè)核苷酸有義鏈、及包含2個(gè)核苷酸的3’突出部的27個(gè)核苷酸反義鏈，當(dāng)以有義鏈及反義鏈的5’末端的第一堿基為位置編號(hào)1進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，作為2’-O-甲基修飾的位置，可舉出有義鏈的位置編號(hào)1、2、4、6、8、12、14、16、18及23以及反義鏈的位置編號(hào)1、2、3、4、11、13、25及27、有義鏈的位置編號(hào)1、2、4、6、8、12、14、16、18及23以及反義鏈的位置編號(hào)1、2、3、4、11、13、21、23、25、26及27、有義鏈的位置編號(hào)1、2、4、6、8、12、14、16、18及23以及反義鏈的位置編號(hào)1、2、3、4、11、13、15、17、19、21、23、25、26及27等，在任一情況下，均優(yōu)選有義鏈的3’末端的2個(gè)核苷酸是脫氧核糖核苷酸、反義鏈在5’末端包含磷酸。本發(fā)明中使用的雙鏈核酸包括核酸的結(jié)構(gòu)中的磷酸部、酯部等中包含的氧原子等被例如硫原子等其他原子取代而得到的衍生物。另外，結(jié)合于反義鏈及有義鏈的5’末端的堿基的糖的各自的5’位的羥基，可被磷酸基或上述的修飾基團(tuán)、或者可被生物體內(nèi)的核酸分解酶等轉(zhuǎn)化為磷酸基或上述的修飾基團(tuán)的基團(tuán)修飾。另外，結(jié)合于反義鏈及有義鏈的3’末端的堿基的糖的各自的3’位的羥基，可被磷酸基或上述的修飾基團(tuán)、或者可被生物體內(nèi)的核酸分解酶等轉(zhuǎn)化為磷酸基或上述的修飾基團(tuán)的基團(tuán)修飾。需要說(shuō)明的是，本發(fā)明中使用的雙鏈核酸可以使用已知的RNA或DNA合成法、及RNA或DNA修飾法來(lái)制造。雙鏈核酸可以以與CKAP5基因序列內(nèi)的靶標(biāo)序列相互作用的方式來(lái)設(shè)計(jì)。雙鏈核酸的1條鏈的序列與上文說(shuō)明的靶標(biāo)部位序列互補(bǔ)。雙鏈核酸可使用本說(shuō)明書(shū)中記載的方法化學(xué)合成。RNA可通過(guò)酶合成或部分有機(jī)合成/全有機(jī)合成產(chǎn)生，另外，經(jīng)修飾的核糖核苷酸可在體外(invitro)利用酶合成或有機(jī)合成而導(dǎo)入。在一個(gè)實(shí)施方式中，各鏈可化學(xué)制備。以化學(xué)方式合成RNA分子的方法在本領(lǐng)域中已知[參見(jiàn)核酸研究(NucleicAcidsResearch，Nucleic.Acids.Res.)，1998年，第32卷，p.936-948]。通常，雙鏈核酸可通過(guò)使用固相寡核苷酸合成法來(lái)合成(例如，參見(jiàn)Usman等，美國(guó)專(zhuān)利第5,804,683號(hào)說(shuō)明書(shū)；美國(guó)專(zhuān)利第5,831,071號(hào)說(shuō)明書(shū)；美國(guó)專(zhuān)利第5,998,203號(hào)說(shuō)明書(shū)；美國(guó)專(zhuān)利第6,117,657號(hào)說(shuō)明書(shū)；美國(guó)專(zhuān)利第6,353,098號(hào)說(shuō)明書(shū)；美國(guó)專(zhuān)利第6,362,323號(hào)說(shuō)明書(shū)；美國(guó)專(zhuān)利第6,437,117號(hào)說(shuō)明書(shū)；美國(guó)專(zhuān)利第6,469,158號(hào)說(shuō)明書(shū)；Scaringe等,美國(guó)專(zhuān)利第6,111,086號(hào)說(shuō)明書(shū)；美國(guó)專(zhuān)利第6,008,400號(hào)說(shuō)明書(shū)；美國(guó)專(zhuān)利第6,111,086號(hào)說(shuō)明書(shū))。單鏈核酸可使用固相亞磷酰胺法(參見(jiàn)核酸研究(Nucleic.Acids.Res.)，1993年，第30卷，p.2435-2443)來(lái)進(jìn)行合成、脫保護(hù)、及在NAP-5柱(AmershamPharmaciaBiotech，Piscataway，NJ)上脫鹽。寡聚物使用AmershamSource15Q柱(1.0cm，高25cm(AmershamPharmaciaBiotech，Piscataway，NJ))、以15分鐘工序的線性梯度通過(guò)離子交換高效液相色譜法(IE-HPLC)來(lái)純化。梯度從90:10的緩沖液A:B變化至52:48的緩沖液A:B，緩沖液A為100mMTrispH8.5，以及，緩沖液B為100mMTrispH8.5(1M的NaCl)。以260nm監(jiān)測(cè)試樣，收集并合并與全長(zhǎng)寡核苷酸種對(duì)應(yīng)的峰，用NAP-5柱脫鹽，并進(jìn)行冷凍干燥。各單鏈核酸的純度可通過(guò)利用BeckmanPACE5000(BeckmanCoulter，Inc.,Fullerton,Calif)的毛細(xì)管電泳(CE)來(lái)確定。CE毛細(xì)管具有100μm的內(nèi)徑，包含ssDNA100RGel(Beckman-Coulter)。典型地，將約0.6nmol的寡核苷酸注射到毛細(xì)管中，在444V/cm的電場(chǎng)中運(yùn)行，通過(guò)260nm下的UV吸光度來(lái)檢測(cè)。改性Tris-硼酸-7M-尿素電泳緩沖液從Beckman-Coulter購(gòu)入?？傻玫接糜谙挛挠涊d的實(shí)驗(yàn)中的、利用CE進(jìn)行評(píng)價(jià)的結(jié)果至少為90％純的單鏈核酸?；衔锿恍钥砂凑罩圃鞓I(yè)者的推薦規(guī)程，通過(guò)利用VoyagerDE.TM.Biospectometry工作站(AppliedBiosystems、FosterCity、Calif.)的基質(zhì)輔助激光解析電離-飛行時(shí)間型(MALDI-TOF)質(zhì)譜法來(lái)驗(yàn)證。單鏈核酸的相對(duì)分子質(zhì)量可在預(yù)想的分子質(zhì)量的0.2％以?xún)?nèi)得到。以100μM濃度將單鏈核酸再懸浮于100mM乙酸鉀、30mMHEPES、pH7.5的緩沖液中。以同等摩爾的量混合互補(bǔ)的有義鏈及反義鏈，得到50μM雙鏈核酸的最終溶液。經(jīng)5分鐘將試樣加熱至95℃，在使用前冷卻至室溫。在-20℃下保存雙鏈核酸。單鏈核酸被冷凍干燥，或在無(wú)核酸酶的水中在-80℃下貯存。將本發(fā)明中使用的雙鏈核酸的具體例示于表3。需要說(shuō)明的是，與表中附有r、m及d的堿基結(jié)合的糖分別為核糖、2’位的羥基被-O-甲基取代的核糖及脫氧核糖。[表3]本發(fā)明中的脂質(zhì)粒子是含有化合物(I)及雙鏈核酸的脂質(zhì)粒子、或含有化合物(I)及化合物(II)及雙鏈核酸的脂質(zhì)粒子，可舉出例如含有下述復(fù)合體的脂質(zhì)粒子、由該復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成的脂質(zhì)粒子等，所述復(fù)合體是：化合物(I)與雙鏈核酸的復(fù)合體、或化合物(I)及化合物(II)與雙鏈核酸的復(fù)合體；或者下述物質(zhì)與雙鏈核酸的復(fù)合體，所述物質(zhì)為化合物(I)和中性脂質(zhì)及/或高分子組合而成的物質(zhì)、或化合物(I)及化合物(II)和中性脂質(zhì)及/或高分子組合而成的物質(zhì)。脂質(zhì)膜可以是脂質(zhì)單層膜(脂質(zhì)單分子膜)，也可以是脂質(zhì)雙層膜(脂質(zhì)雙分子膜)。需要說(shuō)明的是，該脂質(zhì)膜中可以含有化合物(I)、化合物(II)、中性脂質(zhì)及/或高分子。另外，該復(fù)合體及/或該脂質(zhì)膜中也可以含有化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)。另外，作為本發(fā)明中的脂質(zhì)粒子，還可舉出例如由下述復(fù)合體以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成、在脂質(zhì)膜中含有化合物(I)的脂質(zhì)粒子等，所述復(fù)合體是：化合物(II)與雙鏈核酸的復(fù)合體，或?qū)⒒衔?II)和中性脂質(zhì)及/或高分子組合而成的物質(zhì)、與雙鏈核酸的復(fù)合體。此時(shí)的脂質(zhì)膜也同樣既可以是脂質(zhì)單層膜(脂質(zhì)單分子膜)，也可以是脂質(zhì)雙層膜(脂質(zhì)雙分子膜)。需要說(shuō)明的是，該脂質(zhì)膜中可以含有化合物(II)、中性脂質(zhì)及/或高分子。另外，該復(fù)合體及/或該脂質(zhì)膜中也可以含有化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)。作為該復(fù)合體的形態(tài)，在任一情況下，均可舉出雙鏈核酸與由脂質(zhì)單層形成的膜(反膠束)的復(fù)合體、雙鏈核酸與脂質(zhì)體的復(fù)合體、雙鏈核酸與膠束的復(fù)合體等，可優(yōu)選舉出雙鏈核酸與由脂質(zhì)單層形成的膜的復(fù)合體或雙鏈核酸與脂質(zhì)體的復(fù)合體。作為由該復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)雙層膜構(gòu)成的脂質(zhì)粒子，可舉出由該復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)雙層膜構(gòu)成的脂質(zhì)體等。需要說(shuō)明的是，本發(fā)明中的脂質(zhì)粒子中，可使用各為一種或多種的化合物(I)及化合物(II)，另外，化合物(I)及/或化合物(II)中，也可混合化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)。作為化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，可舉出例如日本特開(kāi)昭61-161246號(hào)公報(bào)(美國(guó)專(zhuān)利5049386號(hào)說(shuō)明書(shū))中公開(kāi)的DOTMA、DOTAP等，國(guó)際公開(kāi)第91/16024號(hào)及國(guó)際公開(kāi)第97/019675號(hào)中公開(kāi)的N-[1-(2,3-二油烯基氧基丙基)]-N,N-二甲基-N-羥基乙基溴化銨(DORIE)、2,3-二油烯基氧基-N-[2-(精胺羧基酰胺)乙基]-N,N-二甲基-1-丙銨三氟乙酸鹽(DOSPA)等，國(guó)際公開(kāi)第2005/121348號(hào)中公開(kāi)的DLinDMA等，國(guó)際公開(kāi)第2009/086558號(hào)中公開(kāi)的DLin-K-DMA等，優(yōu)選DOTMA、DOTAP、DORIE、DOSPA、DLinDMA、DLin-K-DMA等有著具有2個(gè)非取代烷基的叔胺部位或具有3個(gè)非取代烷基的季銨部位的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，可更優(yōu)選舉出該具有叔胺部位的陽(yáng)離子性脂質(zhì)。該叔胺部位及該季銨部位的非取代烷基更優(yōu)選為甲基。本發(fā)明中的脂質(zhì)粒子可利用已知的制造方法或以此為基準(zhǔn)來(lái)制造，可以是用任何制造方法制造出的脂質(zhì)粒子。例如，在作為脂質(zhì)粒子之一的脂質(zhì)體的制造中，可應(yīng)用已知的脂質(zhì)體的制備方法。作為已知的脂質(zhì)體的制備方法，可舉出例如Bangham等的脂質(zhì)體制備法(參見(jiàn)“分子生物學(xué)雜志(JournalofMolecularBiology)(J.Mol.Biol.)”，1965年，第13卷，第238-252頁(yè))、乙醇注入法(參見(jiàn)“細(xì)胞生物學(xué)雜志(JournalofCellBiology)(J.CellBiol.)”，1975年，第66卷，第621-634頁(yè))、法壓法(參見(jiàn)“歐洲生化學(xué)會(huì)聯(lián)合會(huì)快報(bào)(FEBSLetters)(FEBSLett.)”，1979年，第99卷，第210-214頁(yè))、冷凍熔化法(參見(jiàn)“生物化學(xué)與生物物理文獻(xiàn)(ArchivesofBiochemistryandBiophysics)(Arch.Biochem.Biophys.)”，1981年，第212卷，第186-194頁(yè))、反相蒸發(fā)法(參見(jiàn)“美國(guó)國(guó)家科學(xué)院院刊(ProceedingsoftheNationalAcademyofScienceUnitedStatesofAmerica)(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)”，1978年，第75卷，第4194-4198頁(yè))或pH梯度法(參見(jiàn)例如日本專(zhuān)利第2572554號(hào)公報(bào)、日本專(zhuān)利第2659136號(hào)公報(bào)等)等。作為制造脂質(zhì)體時(shí)將脂質(zhì)體分散的溶液，可以使用例如水、酸、堿、各種緩沖液、生理鹽水或者氨基酸輸注液等。另外，在制造脂質(zhì)體時(shí)，還可以添加例如檸檬酸、抗壞血酸、半胱氨酸或者乙二胺四乙酸(EDTA)等抗氧化劑、例如甘油、葡萄糖或者氯化鈉等等滲劑等。另外，也可以通過(guò)將脂質(zhì)等溶解在例如乙醇等有機(jī)溶劑中、蒸餾除去溶劑后、添加生理鹽水等、振蕩攪拌、形成脂質(zhì)體，由此來(lái)制造脂質(zhì)體。另外，本發(fā)明中的脂質(zhì)粒子例如可通過(guò)如下方法等方法制造：將化合物(I)，化合物(I)及化合物(II)，化合物(I)、和化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，或化合物(I)及化合物(II)、和化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)預(yù)先溶解在氯仿中，接著，加入雙鏈核酸的水溶液和甲醇并進(jìn)行混合，形成陽(yáng)離子性脂質(zhì)/雙鏈核酸的復(fù)合體，進(jìn)而提取出氯仿層，向其中加入聚乙二醇化磷脂、中性脂質(zhì)和水，形成油包水型(W/O)乳液，利用反相蒸發(fā)法進(jìn)行處理，由此制造(參見(jiàn)日本特表2002-508765號(hào)公報(bào))；將雙鏈核酸溶解在酸性的電解質(zhì)水溶液中，加入脂質(zhì)(乙醇中)，將乙醇濃度降低至20v/v％，制備內(nèi)含上述雙鏈核酸的脂質(zhì)體，進(jìn)行分選過(guò)濾(sizingfiltration)，通過(guò)透析除去過(guò)量的乙醇后，進(jìn)一步提高試樣的pH，透析除去附著在脂質(zhì)體表面的雙鏈核酸，由此制造(參見(jiàn)日本特表2002-501511號(hào)公報(bào)及參見(jiàn)“生物化學(xué)與生物物理學(xué)報(bào)(BiochimicaetBiophysicaActa)”，2001年，第1510卷，第152-166頁(yè))等。本發(fā)明中的脂質(zhì)粒子中，由復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)雙層膜構(gòu)成的脂質(zhì)體例如可按照國(guó)際公開(kāi)第02/28367號(hào)及國(guó)際公開(kāi)第2006/080118號(hào)等中記載的制造方法來(lái)制造。另外，本發(fā)明中的脂質(zhì)粒子中，例如下述脂質(zhì)粒子等可通過(guò)以下方法得到，所述脂質(zhì)粒子是：由下述復(fù)合體以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成，脂質(zhì)膜中含有化合物(I)、化合物(II)、及/或化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的脂質(zhì)粒子，所述復(fù)合體是化合物(I)與雙鏈核酸的復(fù)合體、或化合物(I)及化合物(II)與雙鏈核酸的復(fù)合體、或下述物質(zhì)與雙鏈核酸的復(fù)合體，所述物質(zhì)為化合物(I)和中性脂質(zhì)及/或高分子組合而成的物質(zhì)、或化合物(I)及化合物(II)和中性脂質(zhì)及/或高分子組合而成的物質(zhì)；由下述復(fù)合體以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成，脂質(zhì)膜中含有化合物(I)、或化合物(I)及化合物(II)的脂質(zhì)粒子，所述復(fù)合體是化合物(II)與雙鏈核酸的復(fù)合體，或?qū)⒒衔?II)和中性脂質(zhì)及/或高分子組合而成的物質(zhì)、與雙鏈核酸的復(fù)合體，所述方法是：按照國(guó)際公開(kāi)第02/28367號(hào)及國(guó)際公開(kāi)第2006/080118號(hào)等中記載的制造方法，制造各復(fù)合體，不使該復(fù)合體溶解地將該復(fù)合體分散到水或0～20％乙醇水溶液中(A液)，另外，將各脂質(zhì)膜成分溶解在乙醇水溶液中(B液)，混合A液和B液，進(jìn)而適當(dāng)?shù)丶尤胨?。另外，A液及B液中的化合物(I)、化合物(II)、以及化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)也可分別使用一種或多種。需要說(shuō)明的是，本發(fā)明中，由化合物(I)、或化合物(I)及化合物(II)與雙鏈核酸的復(fù)合體，或?qū)⒒衔?I)、或化合物(I)及化合物(II)、和中性脂質(zhì)及/或高分子組合而成的物質(zhì)與雙鏈核酸的復(fù)合體，以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成，在脂質(zhì)膜中含有化合物(I)、化合物(II)、及/或化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的脂質(zhì)粒子；由化合物(II)與核酸的復(fù)合體、或?qū)⒒衔?II)和中性脂質(zhì)及/或高分子組合而成的物質(zhì)與核酸的復(fù)合體以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成，在脂質(zhì)膜中含有化合物(I)、或化合物(I)及化合物(II)的脂質(zhì)粒子等在制造中及制造后，由于復(fù)合體中的雙鏈核酸與脂質(zhì)膜中的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的靜電相互作用、復(fù)合體中的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與脂質(zhì)膜中的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的融合，復(fù)合體及膜的結(jié)構(gòu)發(fā)生位移而得到的脂質(zhì)粒子，也分別包含在下述的各脂質(zhì)粒子中，所述脂質(zhì)粒子是：由化合物(I)、或化合物(I)及化合物(II)與雙鏈核酸的復(fù)合體，或?qū)⒒衔?I)、或化合物(I)及化合物(II)、和中性脂質(zhì)及/或高分子組合而成的物質(zhì)與雙鏈核酸的復(fù)合體以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成，在脂質(zhì)膜中含有化合物(I)、化合物(II)、及/或化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的脂質(zhì)粒子；由化合物(II)與核酸的復(fù)合體，或?qū)⒒衔?II)、和中性脂質(zhì)及/或高分子組合而成的物質(zhì)與核酸的復(fù)合體以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成，在脂質(zhì)膜中含有化合物(I)、或化合物(I)及化合物(II)的脂質(zhì)粒子等。作為本發(fā)明中的脂質(zhì)粒子，更優(yōu)選下述脂質(zhì)粒子，其由化合物(I)、或化合物(I)及化合物(II)與雙鏈核酸的復(fù)合體，或?qū)⒒衔?I)、或化合物(I)及化合物(II)、和中性脂質(zhì)及/或高分子組合而成的物質(zhì)與雙鏈核酸的復(fù)合體，以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成，在脂質(zhì)膜中含有化合物(I)、化合物(II)、或化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)；更優(yōu)選下述脂質(zhì)粒子，其由化合物(I)、或化合物(I)及化合物(II)與雙鏈核酸的復(fù)合體，或?qū)⒒衔?I)、或化合物(I)及化合物(II)、和中性脂質(zhì)及/或高分子組合而成的物質(zhì)與雙鏈核酸的復(fù)合體，以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成，在脂質(zhì)膜中含有化合物(I)、或化合物(I)及化合物(II)；進(jìn)一步優(yōu)選下述脂質(zhì)粒子，其由化合物(I)、或?qū)⒒衔?I)和中性脂質(zhì)組合而成的物質(zhì)與雙鏈核酸的復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成，在脂質(zhì)膜中含有化合物(I)；或者由化合物(II)、或?qū)⒒衔?II)和中性脂質(zhì)組合而成的物質(zhì)與雙鏈核酸的復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成，在脂質(zhì)膜中含有化合物(I)及化合物(II)。該復(fù)合體中的化合物(I)及化合物(II)的分子的總數(shù)相對(duì)于該雙鏈核酸的磷原子的數(shù)目?jī)?yōu)選為0.5～4倍，更優(yōu)選為1.5～3.5倍，進(jìn)一步優(yōu)選為2～3倍。另外，該復(fù)合體中的化合物(I)及化合物(II)、以及化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的分子的總數(shù)相對(duì)于該雙鏈核酸的磷原子的數(shù)目?jī)?yōu)選為0.5～4倍，更優(yōu)選為1.5～3.5倍，進(jìn)一步優(yōu)選為2～3倍。本發(fā)明的脂質(zhì)粒子中，當(dāng)由復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜構(gòu)成時(shí)，該脂質(zhì)粒子中的化合物(I)及化合物(II)的分子的總數(shù)相對(duì)于該雙鏈核酸的磷原子的數(shù)目?jī)?yōu)選為1～10倍，更優(yōu)選為2.5～9倍，進(jìn)一步優(yōu)選為3.5～8倍。另外，該脂質(zhì)粒子中的化合物(I)及化合物(II)、以及化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的分子的總數(shù)相對(duì)于該雙鏈核酸的磷原子的數(shù)目?jī)?yōu)選為1～10倍，更優(yōu)選為2.5～9倍，進(jìn)一步優(yōu)選為3.5～8倍。作為中性脂質(zhì)，可以為單純脂質(zhì)、復(fù)合脂質(zhì)或者衍生脂質(zhì)中的任一種，例如可以舉出磷脂(phospholipid)、甘油糖脂(glyceroglycolipid)、鞘糖脂(sphingoglycolipid)、鞘氨基醇(sphingoid)或者甾醇(sterol)等，但不限于此。本發(fā)明的脂質(zhì)納米粒子中含有中性脂質(zhì)時(shí)，相對(duì)于化合物(I)及化合物(II)、以及化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的分子的總數(shù)而言，中性脂質(zhì)的分子的總數(shù)優(yōu)選為0.1～1.8倍，更優(yōu)選為0.3～1.1倍，進(jìn)一步優(yōu)選為0.4～0.9倍。本發(fā)明中的脂質(zhì)粒子可以在復(fù)合體中含有中性脂質(zhì)，也可以在將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜中含有中性脂質(zhì)，更優(yōu)選至少在將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜中含有中性脂質(zhì)，進(jìn)一步優(yōu)選在該復(fù)合體及該將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜中均含有中性脂質(zhì)。作為中性脂質(zhì)中的磷脂，可以舉出例如磷脂酰膽堿(phosphatidylcholine)(具體而言，大豆磷脂酰膽堿(soybeanphosphatidylcholine)、蛋黃磷脂酰膽堿(eggyolkphosphatidylcholine)(EPC)、二硬脂酰磷脂酰膽堿(distearoylphosphatidylcholine)(DSPC)、二棕櫚酰磷脂酰膽堿(dipalmitoylphosphatidylcholine)(DPPC)、棕櫚酰油酰磷脂酰膽堿(palmitoyloleoylphosphatidylcholine)(POPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿(dimyristoylphosphatidylcholine)(DMPC)、二油酰磷脂酰膽堿(dioleoylphosphatidylcholine)(DOPC)等)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine)(具體而言，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(distearoylphosphatidylethanolamine)(DSPE)、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺(dipalmitoylphosphatidylethanolamine)(DPPE)、二油酰磷脂酰乙醇胺(dioleoylphosphatidylethanolamine)(DOPE)、二肉豆蔻酰磷酸乙醇胺(dimyristoylphosphoethanolamine)(DMPE)、16-0-單甲基PE(16-0-monomethylPE)、16-0-二甲基PE(16-0-dimethylPE)、18-1-反式PE(18-1-transPE)、棕櫚酰油酰-磷脂酰乙醇胺(palmitoyloleoyl-phosphatidylethanolamine)(POPE)、1-硬酯酰-2-油酰-磷脂酰乙醇胺(1-stearoyl-2-oleoyl-phosphatidylethanolamine)(SOPE)等)、甘油磷脂(glycerophospholipid)(具體而言，磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine)、磷脂酸(phosphatidicacid)、磷脂酰甘油(phosphatidylglycerol)、磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol)、棕櫚酰油酰磷脂酰甘油(palmitoyloleoylphosphatidylglycerol)(POPG)、溶血磷脂酰膽堿(lysophosphatidylcholine)等)、神經(jīng)鞘氨醇磷脂(sphingophospholipid)(具體而言，神經(jīng)鞘磷脂(sphingomyelin)、磷酸乙醇胺神經(jīng)酰胺(ceramidephosphoethanolamine)、神經(jīng)酰胺磷酸甘油(ceramidephosphoglycerol)、磷酸甘油磷酸神經(jīng)酰胺(ceramidephosphoglycerophosphate)等)、甘油磷酸脂(glycerophosphonolipid)、神經(jīng)鞘磷酸脂(sphingophosphonolipid)、天然卵磷脂(naturallecithin)(具體而言蛋黃卵磷脂(eggyolklecithin)、大豆卵磷脂(soybeanlecithin)等)或者氫化磷脂(hydrogenatedphospholipid)(具體而言氫化大豆磷脂酰膽堿(hydrogenatedsoybeanphosphatidylcholine)等)等天然或者合成的磷脂。作為中性脂質(zhì)中的甘油糖脂，可以舉出例如硫氧基核糖基甘油酯(sulfoxyribosylglyceride)、二糖基甘油二酯(diglycosyldiglyceride)、二半乳糖甘油二酯(digalactosyldiglyceride)、半乳糖甘油二酯(galactosyldiglyceride)或者糖基甘油二酯(glycosyldiglyceride)等。作為中性脂質(zhì)中的鞘糖脂，可以舉出例如半乳糖基腦苷脂(galactosylcerebroside)、乳糖腦苷脂(lactosylcerebroside)或者神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)等。作為中性脂質(zhì)中的鞘氨基醇，可以舉出例如鞘氨糖(sphingan)、二十鞘氨糖(icosasphingan)、鞘氨醇(sphingosine)或者它們的衍生物等。作為衍生物，可以舉出將例如鞘氨糖、二十鞘氨糖或者鞘氨醇等的-NH2轉(zhuǎn)化為-NHCO(CH2)xCH3(式中，x為0～18的整數(shù)，其中優(yōu)選6、12或者18)的產(chǎn)物等。作為中性脂質(zhì)中的甾醇，可以舉出例如膽固醇(cholesterol)、二氫膽甾醇(dihydrocholesterol)、羊毛甾醇(lanosterol)、β-谷甾醇(β-sitosterol)、菜油甾醇(campesterol)、豆甾醇(stigmasterol)、菜子甾醇(brassicasterol)、麥角鈣化甾醇(ergocasterol)、巖藻甾醇(fucosterol)或者3β-[N-(N’,N’-二甲基氨基乙基)氨基甲?；鵠膽固醇(3β-[N-(N’,N’-dimethylaminoethyl)carbamoyl]cholesterol)(DC-Chol)等。作為中性脂質(zhì)，可優(yōu)選舉出磷脂、甾醇等，可更優(yōu)選舉出磷脂酰膽堿、磷脂酰乙醇胺、膽固醇，可進(jìn)一步優(yōu)選舉出磷脂酰乙醇胺、膽固醇及它們的組合。作為高分子，可以舉出例如蛋白質(zhì)、白蛋白(albumin)、葡聚糖(dextran)、polyfect、脫乙酰殼多糖(chitosan)、硫酸葡聚糖(dextransulfate)、例如聚-L-賴(lài)氨酸、聚乙烯亞胺、聚天冬氨酸、苯乙烯馬來(lái)酸共聚物、異丙基丙烯酰胺(isopropylacrylamide)-丙烯基吡咯烷酮(acrylpyrrolidone)共聚物、聚乙二醇修飾樹(shù)狀聚體(dendrimer)、聚乳酸、聚乳酸聚乙醇酸或者聚乙二醇化聚乳酸等高分子或者它們的鹽中的1種以上。此處，高分子中的鹽，包括例如金屬鹽、銨鹽、酸加成鹽、有機(jī)胺加成鹽、氨基酸加成鹽等。作為金屬鹽，可以舉出例如鋰鹽、鈉鹽、鉀鹽等堿金屬鹽，鎂鹽、鈣鹽等堿土金屬鹽，鋁鹽或者鋅鹽等。作為銨鹽，可以舉出例如銨或者四甲基銨等鹽。作為酸加成鹽，可以舉出例如鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽或者磷酸鹽等無(wú)機(jī)酸鹽，及乙酸鹽、馬來(lái)酸鹽、富馬酸鹽或者檸檬酸鹽等有機(jī)酸鹽。作為有機(jī)胺加成鹽，可以舉出例如嗎啉或者哌啶等的加成鹽。作為氨基酸加成鹽，可以舉出例如甘氨酸、苯丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸或者賴(lài)氨酸等的加成鹽。另外，本發(fā)明中的脂質(zhì)粒子優(yōu)選還含有水溶性高分子的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物。該水溶性高分子的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物可以在復(fù)合體中含有，也可在將復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜中含有，更優(yōu)選在復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜中均含有。當(dāng)本發(fā)明的脂質(zhì)粒子中含有水溶性高分子的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物時(shí)，水溶性高分子的脂質(zhì)衍生物及脂肪酸衍生物的分子的總數(shù)相對(duì)于化合物(I)及化合物(II)、以及化合物(I)及化合物(II)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的分子的總數(shù)優(yōu)選為0.05～0.3倍，更優(yōu)選為0.07～0.25倍，進(jìn)一步優(yōu)選為0.1～0.2倍。水溶性高分子的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物優(yōu)選為具有兩面性的物質(zhì)：具有分子的一部分與脂質(zhì)粒子的其他構(gòu)成成分通過(guò)例如疏水性親和力、靜電相互作用等進(jìn)行結(jié)合的性質(zhì)，并且具有其他部分與制造脂質(zhì)粒子的時(shí)的溶劑通過(guò)例如親水性親和力、靜電相互作用等進(jìn)行結(jié)合的性質(zhì)。作為水溶性高分子的脂質(zhì)衍生物或者脂肪酸衍生物，可以舉出例如聚乙二醇、聚甘油、聚乙烯亞胺、聚乙烯醇、聚丙烯酸、聚丙烯酰胺、寡糖、糊精、水溶性纖維素、葡聚糖、硫酸軟骨素、脫乙酰殼多糖、聚乙烯吡咯烷酮、聚天冬酰胺、聚-L-賴(lài)氨酸、甘露聚糖、普魯蘭多糖(pullulan)、寡甘油(oligoglycerol)等或者它們的衍生物、與上述脂質(zhì)粒子的定義中舉出的中性脂質(zhì)、化合物(I)或化合物(II)、或者例如硬脂酸、棕櫚酸、肉豆蔻酸或月桂酸等脂肪酸結(jié)合而形成的產(chǎn)物、它們的鹽等，較優(yōu)選舉出聚乙二醇衍生物、聚甘油衍生物等的脂質(zhì)衍生物或者脂肪酸衍生物及它們的鹽，更優(yōu)選舉出聚乙二醇衍生物的脂質(zhì)衍生物或者脂肪酸衍生物及它們的鹽。作為聚乙二醇衍生物的脂質(zhì)衍生物或者脂肪酸衍生物，可以舉出例如聚乙二醇化脂質(zhì)(具體而言，聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺(更具體而言，1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](PEG-DSPE)、1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](PEG-DMPE)等)、聚氧乙烯氫化蓖麻油60、聚氧乙烯蓖麻油(CREMOPHOREL)等)、聚乙二醇山梨糖醇酐脂肪酸酯類(lèi)(具體而言，聚氧乙烯山梨醇酐單油酸酯等)或者聚乙二醇脂肪酸酯類(lèi)等，較優(yōu)選舉出聚乙二醇化脂質(zhì)，進(jìn)一步優(yōu)選舉出PEG-DSPE、PEG-DMPE。作為聚甘油衍生物的脂質(zhì)衍生物或者脂肪酸衍生物，可以舉出例如聚甘油化脂質(zhì)(具體而言，聚甘油-磷脂酰乙醇胺等)或者聚甘油脂肪酸酯類(lèi)等，較優(yōu)選舉出聚甘油化脂質(zhì)。另外，還可以任意地對(duì)本發(fā)明的脂質(zhì)粒子進(jìn)行基于例如水溶性高分子、聚氧乙烯衍生物等的表面改性(參見(jiàn)D.D.Lasic、F.Martin編，“StealthLiposomes”(美國(guó))，CRCPressInc，1995年，第93-102頁(yè))。作為可以用于表面改性的高分子，可以舉出例如葡聚糖、普魯蘭多糖、甘露聚糖、支鏈淀粉(Amylopectin)或者羥乙基淀粉等。作為聚氧乙烯衍生物，可以舉出例如聚山梨醇酯80、普朗尼克F68、聚氧乙烯氫化蓖麻油60、聚氧乙烯月桂醇或者PEG-DSPE等。通過(guò)該表面改性，可以使脂質(zhì)粒子中的復(fù)合體及脂質(zhì)膜中含有水溶性高分子的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物。本發(fā)明中的脂質(zhì)粒子的平均粒徑可以根據(jù)期望而自由選擇，優(yōu)選形成為下述平均粒徑。作為調(diào)節(jié)平均粒徑的方法，可以舉出例如擠出法(extrusionmethod)、將較大的多層脂質(zhì)體(MLV)等機(jī)械粉碎(具體而言，使用Manton-gaulin、高壓微射流均質(zhì)機(jī)(microfluidizer)等)的方法(參見(jiàn)R.H.Muller、S.Benita、B.Bohm編著，“難溶藥物的乳液和納米混懸劑的配方(EmulsionandNanosuspensionsfortheFormulationofPoorlySolubleDrugs)”，德國(guó)，ScientificPublishersStuttgart，1998年，第267-294頁(yè))等。對(duì)于本發(fā)明中的脂質(zhì)粒子的大小而言，平均粒徑優(yōu)選為約10nm～1000nm，更優(yōu)選為約30nm～300nm，進(jìn)一步優(yōu)選為約50nm～200nm。通過(guò)將本發(fā)明的組合物施予至哺乳類(lèi)的細(xì)胞，可將本發(fā)明的組合物中的雙鏈核酸導(dǎo)入到細(xì)胞內(nèi)。作為在體內(nèi)將本發(fā)明的組合物向哺乳類(lèi)的細(xì)胞導(dǎo)入的方法，按照能在體內(nèi)進(jìn)行的已知的轉(zhuǎn)染步驟進(jìn)行即可。例如，通過(guò)將本發(fā)明的組合物靜脈內(nèi)施予至包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物，可送達(dá)至例如產(chǎn)生了癌或炎癥的器官或部位，可向送達(dá)器官或部位的細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入本發(fā)明的組合物中的雙鏈核酸。作為產(chǎn)生了癌或炎癥的器官或部位，沒(méi)有特別限制，可舉出例如胃、大腸、胰臟、胃、小腸、肝臟、肺、脾臟、腎臟、膀胱、皮膚、血管、眼球、食道等，可優(yōu)選舉出大腸、胰臟、胃、小腸、肝臟或食道。另外，通過(guò)將本發(fā)明的組合物靜脈內(nèi)施予至包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物，可送達(dá)至例如血管、肝臟、肺、脾臟及/或腎臟，可向送達(dá)器官或部位的細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入本發(fā)明的組合物中的雙鏈核酸。血管、肝臟、肺、脾臟及/或腎臟的細(xì)胞可以是正常細(xì)胞。在送達(dá)器官或部位的細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入了本發(fā)明的組合物中的雙鏈核酸后，可降低該細(xì)胞內(nèi)的CKAP5基因的表達(dá)，治療CKAP5相關(guān)疾病，例如白血病、黑色素瘤、細(xì)胞瘤、癌、腫瘤、腺瘤等。即，通過(guò)將本發(fā)明的組合物施予至哺乳動(dòng)物，可降低CKAP5基因的表達(dá)，治療CKAP5相關(guān)疾病，例如白血病、黑色素瘤、細(xì)胞瘤、癌、腫瘤、腺瘤等。施予對(duì)象優(yōu)選是人。另外，本發(fā)明中的組合物還可作為在關(guān)于癌的治療劑或預(yù)防劑的體內(nèi)的藥效評(píng)價(jià)模型中用于驗(yàn)證抑制CKAP5基因的有效性的工具使用。當(dāng)將本發(fā)明的組合物作為癌的治療劑或預(yù)防劑使用時(shí)，作為施予途徑，優(yōu)選使用在治療時(shí)最有效的施予途徑，可優(yōu)選舉出靜脈內(nèi)施予或肌肉內(nèi)施予，可更優(yōu)選舉出靜脈內(nèi)施予。施予量根據(jù)施予對(duì)象的病狀、年齡、施予途徑等的不同而不同，例如以換算為雙鏈核酸的1天施予量為約0.1μg～1000mg的量施予即可。作為適合于靜脈內(nèi)施予或肌肉內(nèi)施予的制劑，可以舉出例如注射劑，通過(guò)上述方法制備的脂質(zhì)粒子的分散液可以直接以例如注射劑等的形態(tài)使用，還可以從該分散液中通過(guò)例如過(guò)濾、離心分離等除去溶劑而進(jìn)行使用，還可以將該分散液冷凍干燥而進(jìn)行使用、及/或?qū)⒓尤肓死绺事短谴肌⑷樘?、海藻糖、麥芽糖或甘氨酸等賦形劑的分散液冷凍干燥而進(jìn)行使用。在注射劑的情況下，優(yōu)選在上述的脂質(zhì)粒子的分散液、或?qū)⑸鲜鋈軇┏セ蜻M(jìn)行冷凍干燥而得到的組合物中，混合例如水、酸、堿、各種緩沖液、生理鹽水或氨基酸輸注液等，配制成注射劑。另外，還可以添加例如檸檬酸、抗壞血酸、半胱氨酸或EDTA等抗氧化劑，或甘油、葡萄糖或氯化鈉等等滲劑等，配制成注射劑。另外，還可以加入例如甘油等冷凍保存劑進(jìn)行冷凍保存。接下來(lái)，利用實(shí)施例、參考例及試驗(yàn)例具體地說(shuō)明本發(fā)明。但本發(fā)明不受這些實(shí)施例及試驗(yàn)例的限制。需要說(shuō)明的是，參考例中所示的質(zhì)子核磁共振譜(1HNMR)是在270MHz、300MHz或400MHz下測(cè)得的。根據(jù)化合物及測(cè)定條件不同，有時(shí)不能清楚地觀測(cè)到交換性質(zhì)子。需要說(shuō)明的是，作為信號(hào)的多重度的符號(hào)，使用通常使用的符號(hào)，br表示是表觀寬信號(hào)。參考例1甲基二((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基)胺(化合物II-1)向甲基胺(Aldrich公司制，約2mol/L的四氫呋喃溶液，10.5mL，21.0mmol)中加入甲磺酸(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基酯(Nu-ChekPrep,Inc公司制，1.03g，3.00mmol)，使用微波反應(yīng)裝置于150℃加熱攪拌90分鐘。用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)液，用2mol/L氫氧化鈉水溶液洗滌，接著用飽和食鹽水洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥后過(guò)濾，在減壓下進(jìn)行濃縮，由此得到甲基((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基)胺的粗產(chǎn)物。向得到的粗產(chǎn)物中加入甲磺酸(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基酯(Nu-ChekPrep,Inc公司制，0.93g，2.70mmol)及50％氫氧化鈉水溶液(0.960g，12.0mmol)，在油浴上于135℃加熱攪拌60分鐘。冷卻至室溫后，用乙酸乙酯稀釋反應(yīng)液，用水洗滌，接著用飽和食鹽水洗滌，用無(wú)水硫酸鎂干燥后過(guò)濾，在減壓下進(jìn)行濃縮。利用硅膠柱色譜法(氯仿/甲醇＝100/0～97/3)對(duì)得到的殘余物進(jìn)行純化，得到化合物II-1(1.07g，67.2％)。ESI-MSm/z:529(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(t,J＝6.7Hz,6H),1.29(brs,32H),1.40-1.51(m,4H),1.97-2.06(m,8H),2.20(s,3H),2.30(t,J＝7.6Hz,4H),2.77(t,J＝5.8Hz,4H),5.28-5.43(m,8H).參考例2甲基二((Z)-十六碳-9-烯基)胺(化合物II-2)利用與參考例1同樣的方法，使用甲基胺(Aldrich公司制，約2mol/L四氫呋喃溶液，10.0mL，20.0mmol)及甲磺酸(Z)-十六碳-9-烯基酯(Nu-ChekPrep,Inc公司制，1.21g，3.80mmol)，得到化合物II-2(0.491g，51.6％)。ESI-MSm/z:477(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.88(t,J＝6.7Hz,6H),1.29(brs,36H),1.46-1.57(m,4H),1.97-2.05(m,8H),2.33(s,3H),2.45(t,J＝7.9Hz,4H),5.29-5.41(m,4H).參考例3甲基二((11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基)胺(化合物II-3)利用與參考例1同樣的方法，使用甲基胺(Aldrich公司制，約2mol/L四氫呋喃溶液，16.0mL，32.0mmol)及甲磺酸(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基酯(Nu-ChekPrep,Inc公司制，2.98g，8.00mmol)，得到化合物II-3(1.27g，54.4％)。ESI-MSm/z:585(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(t,J＝6.7Hz,6H),1.27(brs,40H),1.39-1.51(m,4H),2.01-2.09(m,8H),2.20(s,3H),2.30(t,J＝7.6Hz,4H),2.79(d,J＝6.3Hz,4H),5.28-5.43(m,8H).參考例4二((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基)胺(化合物II-4)利用與參考例1同樣的方法，使用氨(東京化成工業(yè)公司制，約2mol/L甲醇溶液，18.0mL，36.0mmol)及甲磺酸(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基酯(Nu-ChekPrep,Inc公司制，2.79g，8.10mmol)，得到化合物II-4(0.838g，36.2％)。ESI-MSm/z:515(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(t,J＝6.9Hz,6H),1.30(brs,33H),1.41-1.54(m,4H),2.01-2.09(m,8H),2.59(t,J＝7.2Hz,4H),2.77(t,J＝5.6Hz,4H),5.28-5.43(m,8H).參考例5二((Z)-十八碳-9-烯基)胺(化合物II-5)利用與參考例1同樣的方法，使用氨(東京化成工業(yè)公司制，約2mol/L甲醇溶液，12.0mL，24.0mmol)及甲磺酸(Z)-十八碳-9-烯基酯(Nu-ChekPrep,Inc公司制，1.87g，5.40mmol)，得到化合物II-5(0.562g，36.2％)。ESI-MSm/z:519(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.88(t,J＝6.7Hz,6H),1.29(brs,45H),1.41-1.52(m,4H),1.97-2.05(m,8H),2.58(t,J＝7.2Hz,4H),5.28-5.40(m,4H).參考例6甲基二((Z)-十八碳-9-烯基)胺(化合物II-6)利用與參考例1同樣的方法，使用甲基胺(Aldrich公司制，約2mol/L四氫呋喃溶液，11.2mL，22.4mmol)及甲磺酸(Z)-十八碳-9-烯基酯(Nu-ChekPrep,Inc公司制，2.11g，6.09mmol)，得到化合物II-6(1.20g，70.2％)。ESI-MSm/z:533(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.88(t,J＝6.6Hz,6H),1.27(brs,44H),1.39-1.50(m,4H),1.97-2.06(m,8H),2.20(s,3H),2.30(t,J＝7.6Hz,4H),5.28-5.40(m,4H).參考例7反式-1-(叔丁氧基羰基)-3,4-雙(((Z)-十八碳-9-烯酰基氧基)甲基)吡咯烷(化合物VII-1)將參考國(guó)際公開(kāi)第2006/100036號(hào)合成出的反式-3,4-雙(羥基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(156mg，0.674mmol)溶解在二氯甲烷(6mL)中，加入油酸(東京化成工業(yè)公司制，419mg，1.48mmol)、水溶性碳化二亞胺(WSCD)(國(guó)產(chǎn)化學(xué)公司制，297mg，1.55mmol)及4-二甲基氨基吡啶(東京化成工業(yè)公司制，DMAP(20.6mg，0.169mmol))，在室溫下攪拌一夜。向反應(yīng)液中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯進(jìn)行萃取。用水及飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鎂干燥，然后在減壓下進(jìn)行濃縮。利用硅膠柱色譜法(己烷/氯仿＝50/50～0/100)對(duì)殘余物進(jìn)行純化，由此得到化合物VII-1(280mg，54.6％)。ESI-MSm/z:761(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.88(t,J＝6.6Hz,6H),1.25-1.46(m,36H),1.46(s,9H),1.46-1.66(m,8H),1.97-2.04(m,8H),2.27-2.38(m,6H),3.10-3.23(m,2H),3.53-3.66(m,2H),4.03(dd,J＝10.8,6.0Hz,2H),4.14(dd,J＝10.8,6.0Hz,2H),5.28-5.40(m,4H).參考例8反式-1-(叔丁氧基羰基)-3,4-雙(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯?；趸?甲基)吡咯烷(化合物VII-2)利用與參考例7同樣的方法，使用參考國(guó)際公開(kāi)第2006/100036號(hào)合成出的反式-3,4-雙(羥基甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.674mmol)及亞油酸(Aldrich公司制，400mg，1.48mmol)，得到化合物VII-2(351mg，71.7％)。ESI-MSm/z:757(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(t,J＝6.8Hz,6H),1.21-1.45(m,26H),1.46(s,9H),1.47-1.68(m,6H),2.05(q,J＝6.7Hz,8H),2.26-2.38(m,6H),2.77(t,J＝5.9Hz,4H),3.10-3.23(m,2H),3.53-3.66(m,2H),4.03(dd,J＝11.0,6.0Hz,2H),4.14(dd,J＝11.0,6.0Hz,2H),5.28-5.43(m,8H).參考例9反式-3,4-雙(((Z)-十八碳-9-烯?；趸?甲基)吡咯烷(化合物I-1)將參考例7中得到的化合物VII-1(278mg，0.366mmol)溶解在二氯甲烷(6mL)中，加入三氟乙酸(0.563mL，7.31mmol)，在室溫下進(jìn)行3小時(shí)攪拌。向反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用氯仿萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鎂干燥后過(guò)濾，在減壓下進(jìn)行濃縮。將得到的殘余物溶解在少量的甲醇中，使其吸附于填充在塑料柱中的BONDESIL-SCX(VARIAN公司制，6g)的上部，用甲醇洗滌，接著，用氨·甲醇溶液(東京化成工業(yè)公司制，2mol/L)洗脫目標(biāo)物。通過(guò)在減壓下濃縮包含目標(biāo)物的級(jí)分而得到化合物I-1(162mg，67.2％)。ESI-MSm/z:661(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.88(t,J＝6.6Hz,6H),1.27-1.35(m,40H),1.56-1.64(m,4H),2.01(q,J＝5.9Hz,8H),2.09-2.16(m,2H),2.30(t,J＝7.5Hz,4H),2.72(dd,J＝11.3,5.5Hz,2H),3.11(dd,J＝11.3,7.1Hz,2H),3.99-4.12(m,4H),5.29-5.40(m,4H).參考例10反式-3,4-雙(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯?；趸?甲基)吡咯烷(化合物I-2)利用與參考例9同樣的方法，使用參考例8中得到的化合物VII-2(350mg，0.463mmol)，得到化合物I-2(224mg，73.6％)。ESI-MSm/z:657(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(t,J＝6.8Hz,6H),1.26-1.40(m,28H),1.57-1.66(m,4H),2.05(q,J＝6.6Hz,8H),2.09-2.17(m,2H),2.31(t,J＝7.5Hz,4H),2.72(dd,J＝11.3,6.0Hz,2H),2.77(t,J＝6.2Hz,4H),3.11(dd,J＝11.3,7.3Hz,2H),3.99-4.13(m,4H),5.28-5.43(m,8H).參考例11反式-1-甲基-3,4-雙(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯?；趸?甲基)吡咯烷(化合物I-3)將參考例10中得到的化合物I-2(80mg，0.12mmol)溶解在1,2-二氯乙烷(1.5mL)、甲醇(1.5mL)中，經(jīng)過(guò)多次來(lái)添加甲醛(0.091mL，1.22mmol)、三乙酰氧基硼氫化鈉(AcrosOrganics公司制，129mg，0.610mmol)，在室溫下進(jìn)行1.5小時(shí)攪拌。向反應(yīng)溶液中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取水層。用飽和氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)層，用無(wú)水硫酸鎂干燥后過(guò)濾，在減壓下進(jìn)行濃縮。利用硅膠柱色譜法(氯仿/甲醇＝100/0～93/7)對(duì)得到的殘余物進(jìn)行純化，由此得到化合物I-3(66mg，81％)。ESI-MSm/z:671(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(t,J＝6.8Hz,6H),1.25-1.40(m,28H),1.57-1.66(m,4H),2.05(q,J＝6.7Hz,8H),2.13-2.24(m,2H),2.27-2.37(m,9H),2.66(dd,J＝9.2,7.3Hz,2H),2.77(t,J＝5.7Hz,4H),3.99-4.12(m,4H),5.28-5.43(m,8H).參考例12反式-1-甲基-3,4-雙(((Z)-十八碳-9-烯?；趸?甲基)吡咯烷(化合物I-4)利用與參考例11同樣的方法，使用參考例9中得到的化合物I-1(50mg，0.076mmol)，得到化合物I-4(47mg，92％)。ESI-MSm/z:675(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.88(t,J＝6.6Hz,6H),1.26-1.35(m,40H),1.56-1.65(m,4H),2.01(q,J＝5.5Hz,8H),2.15-2.24(m,2H),2.27-2.37(m,9H),2.67(dd,J＝9.3,7.1Hz,2H),3.99-4.12(m,4H),5.29-5.40(m,4H).實(shí)施例1使用參考例1中得到的化合物II-1及參考例11中得到的化合物I-3、及表3的siRNAA或B，按照以下方式制造制劑。將雙鏈核酸溶解到蒸餾水中，配制成24mg/mL來(lái)使用(以下稱(chēng)為siRNA溶液)。以化合物II-1/PEG-DSPENa＝57.3/5.52mmol/L的量將各脂質(zhì)懸浮于含有鹽酸及乙醇的水溶液中，利用渦旋(vortex)攪拌混合機(jī)進(jìn)行攪拌，以及反復(fù)進(jìn)行加熱，得到均勻的懸浮液。在室溫下使該懸浮液通過(guò)0.2μm的聚碳酸酯膜濾器及0.05μm的聚碳酸酯膜濾器，得到了前導(dǎo)(lead)粒子的分散液。利用粒徑測(cè)定裝置(ZetasizerNanoZS，MalvernInstruments公司制)測(cè)定得到的前導(dǎo)粒子的平均粒徑，確認(rèn)了在30nm～100nm的范圍內(nèi)。以3:1(＝前導(dǎo)粒子的分散液:siRNA溶液)的比例在得到的前導(dǎo)粒子的分散液中混合siRNA溶液，進(jìn)而加入3倍量的蒸餾水，進(jìn)行混合，從而制備了陽(yáng)離子性脂質(zhì)/雙鏈核酸復(fù)合體粒子的分散液。另一方面，以化合物II-1/化合物I-3/PEG-DSPENa/DSPC/膽固醇＝2.98/5.97/2.94/5.71/11.8mmol/L的量稱(chēng)量各脂質(zhì)，并將其溶解在90vol％乙醇中，制備脂質(zhì)膜構(gòu)成成分的溶液。將得到的脂質(zhì)膜構(gòu)成成分的溶液加熱，然后以1:1的比例混合得到的陽(yáng)離子性脂質(zhì)/雙鏈核酸復(fù)合體粒子的分散液，進(jìn)而混合數(shù)倍量的蒸餾水，得到了粗制劑。使用AmiconUltra(Millipore公司制)對(duì)得到的粗制劑進(jìn)行濃縮，進(jìn)而將溶劑置換成生理鹽水，使用0.2μm的濾器(東洋濾紙公司制)在潔凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行過(guò)濾。進(jìn)而測(cè)定得到的制劑的siRNA濃度，使用生理鹽水稀釋至以siRNA濃度計(jì)為1.0mg/mL，由此，得到了制劑1-A及1-B(含有化合物II-1及化合物I-3作為脂質(zhì)、含有siRNAA或B作為雙鏈核酸的組合物)。使用粒徑測(cè)定裝置，測(cè)定了制劑中的脂質(zhì)粒子的平均粒徑。將結(jié)果示于表4。[表4]制劑1-A1-BsiRNAAB得到的制劑的粒徑(nm)8686實(shí)施例2使用參考例1中得到的化合物II-1及參考例11中得到的化合物I-3、及表3的siRNAC～F，利用與實(shí)施例1同樣的方法得到制劑1-C～F(含有化合物II-1及化合物I-3作為脂質(zhì)、含有siRNAC～F作為雙鏈核酸的組合物)。用粒徑測(cè)定裝置進(jìn)行測(cè)定。將結(jié)果示于表5。[表5]制劑1-C1-D1-E1-FsiRNACDEF得到的制劑的粒徑(nm)81808383實(shí)施例3使用參考例1中得到的化合物II-1及參考例11中得到的化合物I-3、及表3的siRNAB、D、E及G，利用與實(shí)施例1同樣的方法得到制劑1-B’、1-D’、1-E’及1-G(含有化合物II-1及化合物I-3作為脂質(zhì)、含有siRNAB、D、E及G作為雙鏈核酸的組合物)。利用粒徑測(cè)定裝置進(jìn)行測(cè)定。將結(jié)果示于表6。[表6]制劑1-B’1-D’1-E’1-GsiRNABDEG得到的制劑的粒徑(nm)84848683實(shí)施例4使用參考例1中得到的化合物II-1及參考例11中得到的化合物I-3、及表3的siRNAA或B，利用與實(shí)施例1同樣的方法得到制劑1-A’及1-B”(含有化合物II-1及化合物I-3作為脂質(zhì)、含有siRNAA及B作為雙鏈核酸的組合物)。利用粒徑測(cè)定裝置進(jìn)行測(cè)定。將結(jié)果示于表7。[表7]制劑1-A’1-B”siRNAAB得到的制劑的粒徑(nm)8585實(shí)施例5使用參考例1中得到的化合物II-1及參考例11中得到的化合物I-3、及表3的siRNAB、C、D、E、及F，利用與實(shí)施例1同樣的方法得到制劑1-B”’、1-C”、1-D”、1-E”及1-F”(含有化合物II-1及化合物I-3作為脂質(zhì)、含有siRNAB、C、D、E及F作為雙鏈核酸的組合物)。利用粒徑測(cè)定裝置進(jìn)行測(cè)定。將結(jié)果示于表8。[表8]制劑1-B”’1-C”1-D”1-E”1-F”siRNABCDEF得到的制劑的粒徑(nm)7879798081試驗(yàn)例1使用實(shí)施例1中得到的制劑1-A～B，分別通過(guò)以下的方法實(shí)施了體內(nèi)mRNA敲低(knockdown)評(píng)價(jià)試驗(yàn)。作為來(lái)自人胰臟癌的細(xì)胞株的MIAPaCa-2由JCRB細(xì)胞庫(kù)(CellBank)獲得，使用包含10％滅活胎牛血清(GIBCO公司制)及1vol％青霉素-鏈霉素(GIBCO公司制，15140-122)的含高濃度葡萄糖的DMEM培養(yǎng)基(GIBCO公司制，11995-065)在37℃、5％CO2條件下進(jìn)行培養(yǎng)。以1.6×108個(gè)細(xì)胞/mL的濃度將MIAPaCa-2懸浮在磷酸緩沖生理鹽水(PBS)中，將50μL該細(xì)胞懸浮液移植到SCID小鼠(由CLEAJapan獲得)的背部皮下(8×106個(gè)細(xì)胞/0.05mL磷酸緩沖生理鹽水(PBS)/只)。以腫瘤體積為指標(biāo)進(jìn)行分組，每組5只，將相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量的實(shí)施例1中得到的各制劑靜脈內(nèi)施予至小鼠。對(duì)于生理鹽水施予組，施予生理鹽水10mL/kg。在施予前和施予48小時(shí)后測(cè)定小鼠的體重。測(cè)定體重后，對(duì)小鼠實(shí)施安樂(lè)死，摘出皮下腫瘤。立即用液氮將摘出的腫瘤冷凍，將其在-80℃保存直到使用。針對(duì)得到的腫瘤樣品，向放入了樣品的2mL圓底試管(tube)中添加0.5mL的Trizol試劑(Invitrogen制，10296-028)及5mm的氧化鋯球(Zirconiaball)(ASONE制，5-4060-13)，用TissuelyserII(QIAGEN制)在1/25freq、1.5分鐘、2次的條件下將其破碎。破碎后進(jìn)行離心(10000rpm，10分鐘)，回收上清液，添加200μL的氯仿，劇烈攪拌，然后再次進(jìn)行離心(15000rpm，15分鐘)。利用200μL得到的上清，使用高通量核酸提取儀MagNAPure96(Roche制，5195322)及CellularRNALargeVolumeKit(Roche制，5467535)遵循所附的使用說(shuō)明來(lái)提取RNA。使用吸光光度計(jì)DropSense96(Trinean制)測(cè)定提取的RNA的濃度，使用Transcriptor(Roche制，4897030)，對(duì)相當(dāng)于500-1000ng的RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄。反應(yīng)液、反應(yīng)條件遵循Transcriptor所附的使用說(shuō)明書(shū)。用dH2O將得到的cDNA樣品稀釋10倍，作為定量PCR(qPCR)的模板使用。qPCR反應(yīng)中使用了TaqManGeneExpressionMasterMix(AppliedBiosystems制，4369542)、TaqManGeneExpressionAssays(AppliedBiosystems制，4331182)。PCR反應(yīng)的條件遵循TaqManGeneExpression所附的使用說(shuō)明書(shū)。樣品的mRNA量以將生理鹽水施予組中的CKAP5的mRNA量作為1時(shí)的相對(duì)比例算出。圖1中示出腫瘤中CKAP5mRNA量。由圖1可知，實(shí)施例1中得到的各制劑與生理鹽水施予組相比，抑制了CKAP5基因的表達(dá)。試驗(yàn)例2使用實(shí)施例2中得到的制劑1-C～F，分別利用與試驗(yàn)例1同樣的方法實(shí)施了體內(nèi)mRNA敲低評(píng)價(jià)試驗(yàn)。圖2中示出腫瘤中CKAP5mRNA量。由圖2可知，實(shí)施例2中得到的各制劑與生理鹽水施予組相比，抑制了CKAP5基因的表達(dá)。試驗(yàn)例3使用實(shí)施例2中得到的制劑1-D～E，分別通過(guò)以下的方法實(shí)施了體內(nèi)mRNA敲低評(píng)價(jià)試驗(yàn)。作為來(lái)自人胰臟癌的細(xì)胞株的MIAPaCa-2由JCRB細(xì)胞庫(kù)(CellBank)獲得，使用包含10％滅活胎牛血清(GIBCO公司制)及1vol％青霉素-鏈霉素(GIBCO公司制，15140-122)的含高濃度葡萄糖的DMEM培養(yǎng)基(GIBCO公司制，11995-065)在37℃、5％CO2條件下進(jìn)行培養(yǎng)。以1.6×108個(gè)細(xì)胞/mL的濃度將MIAPaCa-2懸浮在磷酸緩沖生理鹽水(PBS)中，將50μL該細(xì)胞懸浮液移植到SCID小鼠(由CLEAJapan獲得)的背部皮下(8×106個(gè)細(xì)胞/0.05mLPBS/只)。以腫瘤體積為指標(biāo)進(jìn)行分組，每組5只，將相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量的實(shí)施例2中得到的各制劑靜脈內(nèi)施予至小鼠。對(duì)于生理鹽水施予組，施予生理鹽水10mL/kg。在施予前和施予48小時(shí)后測(cè)定小鼠的體重。測(cè)定體重后，對(duì)小鼠實(shí)施安樂(lè)死，摘出皮下腫瘤及股骨內(nèi)腔骨髓細(xì)胞。立即用液氮將摘出的腫瘤及骨髓細(xì)胞冷凍，將其在-80℃保存直到使用。針對(duì)得到的腫瘤樣品，利用與試驗(yàn)例1同樣的方法提取RNA，由提取出的RNA得到cDNA，與試驗(yàn)例1同樣地用作qPCR反應(yīng)的模板。qPCR反應(yīng)中使用了TaqManGeneExpressionMasterMix(AppliedBiosystems制，4369542)。此外，作為引物/探針，使用分別與人小鼠的各基因?qū)?yīng)的TaqManGeneExpressionAssays(AppliedBiosystems制，4331182)。PCR反應(yīng)的條件遵循TaqManGeneExpression所附的使用說(shuō)明書(shū)。樣品的mRNA量以將生理鹽水施予組中的人CKAP5及小鼠CKAP5的mRNA量作為1時(shí)的相對(duì)比例算出。圖3中示出腫瘤中人CKAP5mRNA量。圖4中示出骨髓細(xì)胞中小鼠CKAP5mRNA量。由圖3、4可知，實(shí)施例2中得到的各制劑與生理鹽水施予組相比，抑制了腫瘤中CKAP5基因的表達(dá)，另一方面，幾乎未抑制正常骨髓中CKAP5基因的表達(dá)。試驗(yàn)例4使用實(shí)施例3中得到的制劑1-B’、1-D’、1-E’及1-G，利用以下的方法實(shí)施了腫瘤增殖評(píng)價(jià)試驗(yàn)。與試驗(yàn)例1同樣地，使用將作為來(lái)自人胰臟癌的細(xì)胞株的MIAPaCa-2移植到SCID小鼠中而得到的異種移植模型來(lái)實(shí)施。以腫瘤體積為指標(biāo)以每組6只實(shí)施了分組(第0天)。在第0天及第7天靜脈內(nèi)施予相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量的實(shí)施例3中得到的各制劑。作為對(duì)照，施予了生理鹽水10mL/kg。從第0天至第21天測(cè)定了各個(gè)體的腫瘤直徑，使用下式算出了腫瘤體積、體積比。[數(shù)學(xué)式1]腫瘤體積(mm3)＝長(zhǎng)徑(mm)×短徑(mm)×短徑(mm)×0.5[數(shù)學(xué)式2]體積比(V/V0)＝各時(shí)間點(diǎn)的腫瘤體積(mm3)÷第0天的腫瘤體積(mm3)圖5～圖8中示出腫瘤體積的相對(duì)值的推移。由圖5～圖8可知，進(jìn)行體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)試驗(yàn)的結(jié)果是，實(shí)施例3中得到的各制劑與生理鹽水施予組相比，抗腫瘤作用強(qiáng)。由此可知，向哺乳動(dòng)物施予本發(fā)明的組合物后，在生物體內(nèi)能使CKAP5基因的表達(dá)降低，能治療CKAP5相關(guān)疾病。試驗(yàn)例5使用實(shí)施例4中得到的制劑1-A’及1-B”，利用以下的方法實(shí)施了腫瘤增殖評(píng)價(jià)試驗(yàn)。與試驗(yàn)例1同樣地，使用將作為來(lái)自人胰臟癌的細(xì)胞株的MIAPaCa-2移植到SCID小鼠中而得到的異種移植模型來(lái)實(shí)施。以腫瘤體積為指標(biāo)以每組6只實(shí)施了分組(第0天)。在第0天及第7天靜脈內(nèi)施予相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量的實(shí)施例4中得到的各制劑。作為對(duì)照，施予了生理鹽水10mL/kg。從第0天至第21天測(cè)定了各個(gè)體的腫瘤直徑，與試驗(yàn)例4同樣地算出了腫瘤體積、體積比。圖9中示出腫瘤體積的相對(duì)值的推移。由圖9可知，進(jìn)行體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)試驗(yàn)的結(jié)果是，實(shí)施例4中得到的各制劑與生理鹽水施予組相比，抗腫瘤作用強(qiáng)。由此可知，向哺乳動(dòng)物施予本發(fā)明的組合物后，在生物體內(nèi)能使CKAP5基因的表達(dá)降低，能治療CKAP5相關(guān)疾病。試驗(yàn)例6使用實(shí)施例5中得到的制劑1-B”’、1-C”、1-D”、1-E”及1-F”，利用以下的方法實(shí)施了腫瘤增殖評(píng)價(jià)試驗(yàn)。與試驗(yàn)例1同樣地，使用將作為來(lái)自人胰臟癌的細(xì)胞株的MIAPaCa-2移植到SCID小鼠中而得到的異種移植模型來(lái)實(shí)施。以腫瘤體積為指標(biāo)以每組6只實(shí)施了分組(第0天)。在第0天及第7天靜脈內(nèi)施予相當(dāng)于siRNA為10mg/kg的量的實(shí)施例5中得到的各制劑。作為對(duì)照，施予了生理鹽水10mL/kg。從第0天至第21天測(cè)定了各個(gè)體的腫瘤直徑，與試驗(yàn)例4同樣地算出了腫瘤體積、體積比。圖10、11中示出腫瘤體積的相對(duì)值的推移。由圖10、11可知，進(jìn)行體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)試驗(yàn)的結(jié)果是，實(shí)施例5中得到的各制劑與生理鹽水施予組相比，抗腫瘤作用強(qiáng)。由此可知，向哺乳動(dòng)物施予本發(fā)明的組合物后，在生物體內(nèi)能使CKAP5基因的表達(dá)降低，能治療CKAP5相關(guān)疾病。產(chǎn)業(yè)上的可利用性將本發(fā)明的組合物施予至哺乳動(dòng)物后，在生物體內(nèi)能抑制CKAP5基因表達(dá)，治療CKAP5相關(guān)疾病。序列表中文字序列號(hào)1-CKAP5mRNA中的靶標(biāo)序列號(hào)2-CKAP5mRNA中的靶標(biāo)序列號(hào)3-CKAP5mRNA中的靶標(biāo)序列號(hào)4-CKAP5mRNA中的靶標(biāo)序列號(hào)5-CKAP5mRNA中的靶標(biāo)序列號(hào)6-CKAP5mRNA中的靶標(biāo)序列號(hào)7-siRNA有義鏈序列號(hào)8-siRNA反義鏈序列號(hào)9-siRNA有義鏈序列號(hào)10-siRNA反義鏈序列號(hào)11-siRNA有義鏈序列號(hào)12-siRNA反義鏈序列號(hào)13-siRNA有義鏈序列號(hào)14-siRNA反義鏈序列號(hào)15-siRNA有義鏈序列號(hào)16-siRNA反義鏈序列號(hào)17-siRNA有義鏈序列號(hào)18-siRNA反義鏈序列號(hào)19-siRNA有義鏈序列號(hào)20-siRNA反義鏈序列表<110>協(xié)和發(fā)酵麒麟株式會(huì)社<110>戴瑟納制藥公司<120>抑制CKAP5基因表達(dá)的RNAi醫(yī)藥組合物<130>K04F5192<150>JP2014-115814<151>2014-06-04<160>20<170>PatentInversion3.5<210>1<211>21<212>RNA<213>智人<220><223>CKAP5mRNA中的靶標(biāo)<400>1uuaagugaauuugguuccaaa21<210>2<211>21<212>RNA<213>智人<220><223>CKAP5mRNA中的靶標(biāo)<400>2caacaagaacuagaagcuaaa21<210>3<211>21<212>RNA<213>智人<220><223>CKAP5mRNA中的靶標(biāo)<400>3caguaauggauaauaaaaauc21<210>4<211>21<212>RNA<213>智人<220><223>CKAP5mRNA中的靶標(biāo)<400>4gauggaaagaaacuaauuuuc21<210>5<211>21<212>RNA<213>智人<220><223>CKAP5mRNA中的靶標(biāo)<400>5ggaugucauucguaaagaugu21<210>6<211>21<212>RNA<213>智人<220><223>CKAP5mRNA中的靶標(biāo)<400>6acauugaaccauuucugaaaa21<210>7<211>25<212>DNA<213>人工序列<220><223>DNA/RNA雜合分子<220><223>siRNA有義<220><221>misc_feature<222>(1)..(23)<223>RNA<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(1)..(2)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(4)..(4)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(6)..(6)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(7)..(7)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(12)..(12)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(14)..(14)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(16)..(16)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(18)..(18)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(19)..(19)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(23)..(23)<223>um<400>7uuaagugaauuugguuccaaaauca25<210>8<211>27<212>RNA<213>人工序列<220><223>siRNA反義<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(1)..(1)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(2)..(2)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(3)..(3)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(4)..(4)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(11)..(11)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(13)..(13)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(21)..(21)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(23)..(23)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(25)..(25)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(26)..(27)<223>gm<400>8ugauuuuggaaccaaauucacuuaagg27<210>9<211>25<212>DNA<213>人工序列<220><223>DNA/RNA雜合分子<220><223>siRNA有義<220><221>misc_feature<222>(1)..(23)<223>RNA<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(2)..(2)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(4)..(4)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(6)..(6)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(8)..(8)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(12)..(12)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(14)..(14)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(16)..(16)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(18)..(18)<223>um<400>9caacaagaacuagaagcuaaauugg25<210>10<211>27<212>RNA<213>人工序列<220><223>siRNA反義<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(1)..(2)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(3)..(4)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(11)..(11)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(13)..(13)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(21)..(21)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(23)..(23)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(25)..(27)<223>gm<400>10ccaauuuagcuucuaguucuuguuggg27<210>11<211>25<212>DNA<213>人工序列<220><223>DNA/RNA雜合分子<220><223>siRNA有義<220><221>misc_feature<222>(1)..(23)<223>RNA<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(2)..(2)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(5)..(5)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(7)..(7)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(11)..(11)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(12)..(12)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(14)..(14)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(17)..(18)<223>am<400>11caguaauggauaauaaaaauccaac25<210>12<211>27<212>RNA<213>人工序列<220><223>siRNA反義<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(1)..(1)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(2)..(3)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(4)..(4)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(11)..(11)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(13)..(13)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(15)..(15)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(17)..(17)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(19)..(19)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(21)..(21)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(23)..(23)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(25)..(25)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(26)..(26)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(27)..(27)<223>um<400>12guuggauuuuuauuauccauuacugcu27<210>13<211>25<212>DNA<213>人工序列<220><223>DNA/RNA雜合分子<220><223>siRNA有義<220><221>misc_feature<222>(1)..(23)<223>RNA<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(1)..(1)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(2)..(2)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(4)..(4)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(6)..(7)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(12)..(12)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(14)..(14)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(16)..(16)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(18)..(19)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(23)..(23)<223>gm<400>13gauggaaagaaacuaauuuucaggt25<210>14<211>27<212>RNA<213>人工序列<220><223>siRNA反義<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(1)..(1)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(2)..(3)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(4)..(4)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(11)..(11)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(13)..(13)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(15)..(15)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(17)..(17)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(19)..(19)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(21)..(21)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(23)..(23)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(25)..(26)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(27)..(27)<223>am<400>14accugaaaauuaguuucuuuccaucca27<210>15<211>25<212>DNA<213>人工序列<220><223>DNA/RNA雜合分子<220><223>siRNA有義<220><221>misc_feature<222>(1)..(23)<223>RNA<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(1)..(1)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(4)..(4)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(6)..(6)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(12)..(12)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(15)..(15)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(18)..(18)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(23)..(23)<223>cm<400>15ggaugucauucguaaagauguucgt25<210>16<211>27<212>RNA<213>人工序列<220><223>siRNA反義<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(1)..(1)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(2)..(2)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(3)..(3)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(4)..(4)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(11)..(11)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(13)..(13)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(15)..(15)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(17)..(17)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(19)..(19)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(21)..(21)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(23)..(23)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(25)..(25)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(26)..(27)<223>um<400>16acgaacaucuuuacgaaugacauccuu27<210>17<211>25<212>DNA<213>人工序列<220><223>DNA/RNA雜合分子<220><223>siRNA有義<220><221>misc_feature<222>(1)..(23)<223>RNA<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(2)..(2)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(5)..(5)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(7)..(7)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(11)..(11)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(12)..(12)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(14)..(14)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(17)..(17)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(18)..(18)<223>am<400>17acauugaaccauuucugaaaaautc25<210>18<211>27<212>RNA<213>人工序列<220><223>siRNA反義<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(1)..(1)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(2)..(3)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(4)..(4)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(11)..(11)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(13)..(13)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(15)..(15)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(17)..(17)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(19)..(19)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(21)..(21)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(23)..(23)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(25)..(25)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(26)..(26)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(27)..(27)<223>am<400>18gaauuuuucagaaaugguucaauguca27<210>19<211>25<212>DNA<213>人工序列<220><223>DNA/RNA雜合分子<220><223>siRNA有義<220><221>misc_feature<222>(1)..(23)<223>RNA<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(2)..(2)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(4)..(4)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(5)..(6)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(8)..(8)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(12)..(12)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(14)..(14)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(16)..(16)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(18)..(18)<223>um<400>19caacaagaacuagaagcuaaauugg25<210>20<211>27<212>RNA<213>人工序列<220><223>siRNA反義<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(1)..(2)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(3)..(4)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(9)..(9)<223>gm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(11)..(11)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(13)..(13)<223>cm<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(15)..(15)<223>am<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(21)..(21)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(23)..(23)<223>um<220><221>經(jīng)修飾堿基<222>(25)..(27)<223>gm<400>20ccaauuuagcuucuaguucuuguuggg27當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3