專利名稱：有抗炎和肌肉松弛活性的秋水仙堿和硫代秋水仙堿衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通式(Ⅰ)的3-去甲基-硫代秋水仙堿衍生物
式中R可以是
HOCH2-CHOH-CH2-、H2NCH2CHOHCH2-、HOOCCH2-、OH-CH2-CHCl-CH2-(下文中它們分別被稱為化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ)，涉及制備它們的方法，涉及含有它們的藥物組合物并涉及它們在風(fēng)濕病學(xué)-矯形外科領(lǐng)域中的應(yīng)用，用于制備具有肌肉松馳和抗炎活性的藥物。
肌肉松馳藥物具有減輕肌肉緊張，例如肌肉攣縮的共同的特性。
肌肉攣縮是運(yùn)動(dòng)器官若干病理學(xué)的一個(gè)特征，并且它是導(dǎo)致相關(guān)的疼痛狀況持續(xù)的主要作用因素之一。肌肉攣縮也發(fā)生于炎性-風(fēng)濕和變質(zhì)性矯形外科病理學(xué)方面；當(dāng)受到感染時(shí)，除了疼痛之外，它還引起僵硬，后者限制關(guān)節(jié)端的相互移動(dòng)性，從而限制相關(guān)部位的功能性。由于這些原因，非常關(guān)注具有顯著的肌肉松馳和鎮(zhèn)痙性質(zhì)特征的藥物分子。
已知秋水仙堿是一種似生物堿，廣泛地和相當(dāng)長期地用于治療痛風(fēng)。在治療中同樣廣泛使用的是3-去甲基-硫代秋水仙堿葡糖苷，又稱硫代秋水仙苷，在針對骨胳肌炎癥的治療中作為鎮(zhèn)痙藥(Ortopedia eTraumatologia Oggi Xll,n 4,1992)。最近已經(jīng)證實(shí)硫代秋水仙苷的活性與它和對馬錢子堿敏感的甘氨酸受體之間的相互作用有關(guān)系，因此，具有擬甘氨酸活性的化合物由于其肌肉松馳特性能夠用于風(fēng)濕病學(xué)-矯形外科領(lǐng)域。
現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，用不論在體內(nèi)還是在體外的研究來評價(jià)，通式(Ⅰ)的硫代秋水仙堿衍生物都能夠比那些貫用的類似已知物質(zhì)以更為有利的劑量發(fā)揮有效的肌肉松馳作用。
在結(jié)合試驗(yàn)中，本發(fā)明的化合物顯示出比結(jié)構(gòu)類似的化合物，即硫代秋水仙苷更高的對甘氨酸受體的親和力(表Ⅰ)。
表Ⅰ化合物 濃度(μM)置換％硫代秋水仙苷0.1 200.5 451 70化合物Ⅰ0.1 401 85化合物Ⅱ0.1 351 65化合物Ⅲ0.1 501 75與受體的相互作用按照A.B.Young和S.H.Snyder在Proc.Natl.Acad.Sci U.S.A.71,4002,1974報(bào)告的方法作了評價(jià)。
在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)研究了兔子由馬錢子引起的多突觸反射的抑制作用。
使用這種方式，本發(fā)明的化合物以1mg/kg的劑量肌肉注射，能夠減少多突觸反射的50％(化合物Ⅰ)、60％(化合物Ⅱ)和65％(化合物Ⅲ)，并且能夠完全除去相同劑量的馬錢子-引發(fā)反射的效力；已使用5mg/kg的最小劑量的對照分子硫代秋水仙苷用于獲得可比較的效果。
此外，分子式(Ⅰ)的化合物具有比硫代秋水仙苷小得多的急性毒性。實(shí)際上，在小鼠的靜脈內(nèi)，化合物Ⅰ-Ⅲ的DL50大于30mg/kg，硫代秋水仙苷的DL50是7.5mg/kg。
在乳腺癌細(xì)胞上和其它腫瘤細(xì)胞上的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的化合物在濃度高達(dá)5000nM以上仍無細(xì)胞毒性，而母體硫代秋水仙苷甚至在0.6nM濃度時(shí)就有細(xì)胞毒性了。
結(jié)論是，本發(fā)明的化合物是安全的，在治療上是有優(yōu)勢的。
化合物Ⅰ-Ⅴ可以從3-去甲基硫代秋水仙堿素出發(fā)，按照下面的總反應(yīng)流程，使用傳統(tǒng)的反應(yīng)劑和合成工藝來制備。
流程

圖1
為了治療使用，化合物Ⅰ-Ⅴ可以適當(dāng)?shù)厥褂盟幬飳W(xué)可接受的賦形劑和載體配制成例如膠囊、片劑、顆粒、栓劑、乳膏、注射液、油膏、凝膠和其它的形式，更為一般化的按照傳統(tǒng)技術(shù)，例如在“Remington’sPharmaceutical Sciences Handbook”(Mack PublishingCompany,New York,U.S.A,17thEd.1985)中所述的那些形式。
因此本發(fā)明還涉及含有通式Ⅰ化合物的藥物組合物，用于作為肌肉松馳劑，鎮(zhèn)痙劑、消炎藥、抗痛風(fēng)藥、更為一般地用于風(fēng)濕病學(xué)-矯形外科領(lǐng)域中。
以下的實(shí)施例具體說明本發(fā)明。
實(shí)施例Ⅰ合成3-去甲基-3-縮水甘油基硫代秋水仙堿將3-去甲基硫代秋水仙堿(200mg,0.5mmol)懸浮于CH3CN(10ml)中?；亓髟摶旌衔铮缓蠹尤?,8-二氮雜二環(huán)[5,4,0]十一碳-7-烯(DBU153μl,1mmol)。產(chǎn)物馬上溶解，溶液顏色變暗。此后，再加入(±)-表氯醇(3mmol,190μl)。通過TLC(CCH2Cl2-MeOH 9-1)監(jiān)測反應(yīng)。7小時(shí)后，原料全部反應(yīng)完畢。將溶劑蒸發(fā)掉，反應(yīng)粗產(chǎn)物采用重量分析色譜法在硅膠上，用CH2Cl2-MeOH 100-2混合物洗脫純化。生成的油狀產(chǎn)物(160mg,0.35mmol，產(chǎn)率70％)從丙酮中結(jié)晶，并根據(jù)1H-13C-NMR,COSY和NOESY色譜進(jìn)行鑒別。
形成的產(chǎn)物是兩種非對映體(2’R,7S,aS)和(2’S,7S,aS)的混合物。
m.p.:241-241.5℃.
1H-NMR:(CDCl3)7.84-7.79(m,1H),7.42(s,1H),7.31(d,1H,J10.3),7.08(d,1H,J10.3),6.57,6.56(2s,1H),4.66-4.61(m,1H),4.37-4.28(m,1H),4.10-3.98(m,1H),3.94(s,3H),3.65(s,3H),3.44-3.37(m,1H),2.96-2.91(m,1H),2.82-2.76(m,1H),2.43(s,3H),2.48-1.85(m,4H),1.97(s,3H).
13C-NMR:(CDCl3)162.5,170.2,158.4,152.7,152.0,151.4,142.3,138.6,135.0,134.5,128.4,126.8,126.7,109.6,109.5,70.4,70.1,61.7,61.5,52.4,50.3,44.7,36.4,29.9,22.9,15.2.
實(shí)施例Ⅱ合成3-去甲基-3-(2,3-二羥丙基)硫代秋水仙堿將3-去甲基-3-縮水甘油基硫代秋水仙堿(300mg,0.67mmol)溶于二噁烷-H2O(1-1.5ml)混合物中并用催化劑量的0.2N的H2SO4處理，然后加熱回流。這個(gè)反應(yīng)用TLC(CH2Cl2-MeOH 9-1)監(jiān)測。5小時(shí)后將溶劑蒸發(fā)掉，并將反應(yīng)粗產(chǎn)物采用重量分析色譜法，在硅膠上用CH2Cl2-MeOH 100-3混合物洗脫純化。獲得所希望的產(chǎn)物(根據(jù)其光譜特征鑒別1H-13C-NMR和COSY)的產(chǎn)率為73％(228mg,0.48mmol)，是兩各種非對映體(2’R,7S,aS)和(2’S,7S,aS)的混合物。m.p.:149-150℃，分解1H-NMR:(CDCl3)7.28(d,1H,J9.8),7.26(s,1H),7.06(d,1H,J9.8),6.58(s,1H),6.48(d,1H,J8.5),4.71-4.60(m,1H),4.20-4.11(m,4H),3.94(s,3H),3.85-3.82(m,1H),3.65(s,3H),2.60-1.92(m,4H),2.44(s,3H),1.99(s,3H).13C-NMR:(CDCl3)182.5,170.0,158.5,152.6,151.5,142.2,138.2,134.8,134.7,128.4,126.8,126.7,109.6,92.5,71.7,70.2,63.8,61.7,52.3,36.6,29.9,23.0,15.3.
實(shí)施例Ⅲ合成3-去甲基-3-(3-氨基-2-羥丙基)硫代秋水仙堿將3-去甲基-3-縮水甘油基秋水仙堿(300mg,0.67mmol)溶于氨飽和的EtOH中并加熱至60℃。1小時(shí)后反應(yīng)完成，將溶劑蒸發(fā)掉，得到純態(tài)的目的產(chǎn)物，產(chǎn)率為83％(261mg,0.55mmol)，為兩種非對映體(2’R,7S,aS)和(2’s,7S,aS)的混合物。產(chǎn)物根據(jù)其光譜特性鑒別1H-NMR。m.p.:144.8-145.5℃，分解1H-NMR:(CDCl3)7.28(d,1H,J10.6),7.26(s,1H),7.06(d,1H,J10.6),4.72-4.58(m,1H),4.12-3.90(m,4H),3.94(s,3H),3.65(s,3H),3.05-1.5(m,5H),2.44(s,3H),1.99(s,3H).
實(shí)施例Ⅳ合成2-(3-去甲基硫代秋水仙堿)乙酸將3-去甲基硫代秋水仙堿(401mg,1mmol)在室溫下懸浮于無水CH3CN(10ml)中。滴加1,8-二氮雜二環(huán)[5,4,0]十一碳-7-烯(DBU)(192ml,1.3mmol)混合物呈溶狀并顏色變暗。在這次加入之后，再加入溴乙酸乙酯(161ml,1.3mmol)，由此溶液顏色緩慢變淺。大約2小時(shí)后，再加入60ml的DBU和70ml的這種酯。反應(yīng)混合物在室溫放置10小時(shí)。TLC:CH2ClZ-MeOH=9/1。
在減壓下將溶劑蒸發(fā)掉，得到的粗產(chǎn)物采用極性梯度的(polaritygradient)重量分析色譜法用CH2ClZ-MeOH混合物洗脫純化。以84％的產(chǎn)率得到所需要的酯(410mg)。產(chǎn)物根據(jù)其光譜特性鑒別。m.p.:115℃1H NMR(CDCl3):1.31(t,J7.1,3H,Me),1.97(s,3H,MeCO),1.8-2.5(m,4H,H-5,H-6),2.43(s,3H,SMe),3.66,3.98(two s,6H,OMe),4.25(q,J7.1,2H,OCH2Me),4.58-4.70(m,1H,H-7),4.72(s,2H,OCH2),6.46(s,1H,H-4),7.08(d,J10.6,1H,H-11),7.29(d,J10.6,1H,H-12),7.27(s,1H,H-8),7.85(d,J6.9,1H,NH).
將NaOH顆粒(32mg,0.8mmol)溶于5％的EtOH(10ml)水溶液中。加入2-(3-去甲基硫代秋水仙堿)乙酸乙酯(300mg,0.62mmol)，反應(yīng)在室溫。在磁力攪拌下進(jìn)行。1小時(shí)后(TLC:CH2Cl2-MeOH=9/1)，將溶劑蒸發(fā)，將剩余物溶于HCl稀水溶液中。沉淀出一種黃色產(chǎn)物，該產(chǎn)物再在硅膠上采用色譜法，用CH2ClZ-MeOH 9-1混合物洗脫純化。得到2-(3-去甲基硫代秋水仙堿)乙酸(260mg)，產(chǎn)率是92％。
m.p.:189-190℃分解(丙酮)1H NMR(CDCl3):1.95(s,3H,MeCO),1.75-2.58(m,4H,H-5,H-6),2.44(s,3H,SMe),3.03(s,1H,COOH)3.64,3.97(two s,6H,OMe),4.51-4.70(m,1H,H-7),4.73(s,2H,OCH2),6.61(s,1H,H-4),7.12(d,J10.7,1H,H-11),7.31(d,J10.7,1H,H-12 and NH),7.50(s,1H,H-8).
按照與上述實(shí)施例相同的工藝已得到了3-去甲基-3-(2-氯-3-羥丙基)硫代秋水仙堿。
m.p.:118-119分解(丙酮，i-Pr2O)1H NMR(CDCl3):1.99(s,3H,MeCO),1.75-2.58(m,4H,H-5,H-6),2.44(s,3H,SMe),3.07(t,1H,OH,deuterable),3.66,3.94(two s,6H,OMe),3.77-3.87,4.15-4.32(two m,2+3H,CH2CHCH2),4.57-4.70(m,1H,H-7), 6.58(s,1H,H-4),7.14(d,J10.6,1H,H-11),7.29(d,J10.6,H-12),7.35(m,1H,NH),7.37(s,1H,H-8).
實(shí)施例Ⅴ將式(Ⅰ)的化合物配制成小瓶裝形式的制劑實(shí)施例。
小瓶裝的化合物(Ⅱ) 5mg氯化鈉 15.8mg注射制劑用水適量加至2ml實(shí)施例Ⅵ將式(Ⅰ)的化合物配制成膠囊形式的制劑實(shí)施例。
硬明膠膠囊化合物(Ⅱ) 10mg乳糖 212.3mg
淀粉 1.3mg硬脂酸鎂 2.4mg實(shí)施例Ⅶ將式(Ⅰ)的化合物配制成乳膏形式的制劑實(shí)施例。
乳膏化合物(Ⅱ)0.5g對羥基苯甲酸甲酯 0.14g對羥基苯甲酸乙酯 0.035g多氧乙烯-20-脫水山梨醇單油酸酯5g月桂基硫酸鈉 2g鯨蠟 5g鯨蠟醇7g氫化羊毛脂 12.5g硬脂酸8g藻酸鈉 0.5g熏衣草油 1g純化水適量加至 100g
權(quán)利要求
1．通式(Ⅰ)的化合物
式中R可以是
HOCH2-CHOH-CH2,H2NCH2CHOHCH2-,HOOCCH2-、OH-CH2-CHCl-CH2-。
2．按照下面的流程圖制備權(quán)利要求1的化合物的方法。
3．權(quán)利要求1的化合物用于制備作為肌肉松馳劑、抗炎劑、鎮(zhèn)痙劑、抗痛風(fēng)劑的藥物的用途。
4．含有與藥物學(xué)可接受的載體和賦形劑混合在一起的作為活性組分的權(quán)利要求1的化合物的藥物組合物。
5．根據(jù)權(quán)利要求4的藥物組合物，呈膠囊、片劑、顆粒、栓劑、乳膏、注射液、油膏和凝膠的形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式(Ⅰ)的3－去甲基—硫代秋水仙堿衍生物,式中R可以是
文檔編號A61K31/00GK1208033SQ9810969
公開日1999年2月17日 申請日期1998年4月9日 優(yōu)先權(quán)日1997年4月11日
發(fā)明者E·鮑姆巴德利 申請人:因迪納有限公司