生物活性植物組合物及其用圖
【專利說明】生物活性植物組合物及其用途 【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及用于減輕表面活性化合物誘導(dǎo)的發(fā)炎及刺激的組合物及方法。 【【背景技術(shù)】】
[0002] 表面活性化合物是在溶于液體中時(shí)可降低該液體的表面張力或界面張力的物質(zhì)。 此最常用是指水及其與空氣、固體表面及其他物質(zhì)的界面。盡管任何溶質(zhì)皆可改變?nèi)芤旱?性質(zhì)，但將某些尤其有效于此的化合物稱為表面活性劑。此有效性是兩親性結(jié)構(gòu)的結(jié)果，該 結(jié)構(gòu)包括疏水部分，該部分一般包括一或兩個(gè)烴"尾";及親水"頭"部分，該部分可在頭結(jié)構(gòu) 內(nèi)帶負(fù)電荷（陰離子型表面活性劑）、帶正電荷（陽離子型表面活性劑）、不帶電荷（非離 子型表面活性劑），或同時(shí)具有正電荷及負(fù)電荷基團(tuán)（酸堿兼性型或兩性離子型表面活性 劑）。
[0003] 屬該群的表面活性劑的一些實(shí)例可為：
[0004] ?陰離子型
[0005] 〇十二烷基硫酸鈉（SDS)
[0006]。烯烴磺酸鈉
[0007] ?陽離子型
[0008] 。西曲溴銨（或溴化十六烷基三甲銨）
[0009] 〇單烷基四級(jí)銨化合物
[0010] 〇 C12-C18乙氧基化胺
[0011] ?非離子型
[0012] 〇 辛基酸聚氧乙稀釀（Octyl Phenol Ethoxylate)
[0013] 。乙氧基化醇
[0014] ?兩性離子型/酸堿兼性型
[0015] 〇椰油酰胺丙基甜菜堿
[0016] 。可可兩性聚羧基甘胺酸鹽
[0017] 兩親性結(jié)構(gòu)容許表面活性劑分子在界面邊界處自身聚集且定向，形成復(fù)雜排列， 提高溶液的潤(rùn)濕能力，容許疏水物質(zhì)懸浮，且與其他兩親性物質(zhì)形成的排列相互作用。
[0018] 此一排列的生物學(xué)上重要的實(shí)例是活細(xì)胞及細(xì)胞器的質(zhì)膜，其是兩層經(jīng)定向磷脂 形成的雙層結(jié)構(gòu)，且該膜的內(nèi)側(cè)是面向彼此的疏水"尾"，且面向細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞外介質(zhì)的外 側(cè)是親水"頭"。對(duì)于細(xì)胞功能而言重要的其他組份包埋于原生質(zhì)膜中或附著至質(zhì)膜上。
[0019] 活組織的健康及活力主要取決于周圍介質(zhì)的性質(zhì)及該組織中細(xì)胞的原生質(zhì)膜的 完整性。引入表面活性劑可改變介質(zhì)的性質(zhì)（例如表面張力）并通過提高原生質(zhì)膜的滲透 性來影響其穩(wěn)定性，或以其他方式損傷原生質(zhì)膜。所引入表面活性劑亦可與其他原生質(zhì)膜 組份相互作用。表面活性劑對(duì)活組織的不期望效應(yīng)可引起復(fù)雜生物反應(yīng)，例如發(fā)炎及刺激。
[0020] 過去，已多次嘗試通過以下方式來減少表面活性劑誘導(dǎo)的皮膚刺激及發(fā)炎：選擇 刺激性較低的表面活性劑，通過封閉薄膜阻斷皮膚接觸，降低清潔劑的臨界微胞濃度以限 制皮膚于游離表面活性劑單體中的暴露，或添加酶及常用植物提取物以促進(jìn)皮膚剝落及皮 膚細(xì)胞再生。然而，表面活性劑誘導(dǎo)的皮膚刺激及發(fā)炎仍是消費(fèi)者的主要問題的一。此乃因 表面活性劑具有眾多種工業(yè)、科學(xué)及家庭用途，其用于容許或改良潤(rùn)濕、乳化及增溶、清潔、 發(fā)泡及分散制程。
[0021] 因此，人類與表面活性劑的接觸頻繁發(fā)生，且期望減輕該接觸的有害效應(yīng)。
[0022] 發(fā)炎是由信號(hào)傳導(dǎo)物質(zhì)介導(dǎo)的生物反應(yīng)的復(fù)雜級(jí)聯(lián)，該信號(hào)傳導(dǎo)物質(zhì)尤其包括 (但不限于）諸如組胺等血管活性胺、諸如前列腺素等花生油酸代謝產(chǎn)物以及諸如趨化因 子及白介素等信號(hào)傳導(dǎo)蛋白質(zhì)。某些信號(hào)傳導(dǎo)分子由于包括（但不限于）以下的因素在調(diào) 節(jié)發(fā)炎及發(fā)炎活性的定量中尤其重要：其在發(fā)炎信號(hào)傳導(dǎo)級(jí)聯(lián)中的位置，其促炎效應(yīng)的范 圍的寬度以及在觸發(fā)發(fā)炎反應(yīng)方面的相當(dāng)效能。此級(jí)聯(lián)的實(shí)例提供于圖1中。
[0023] 對(duì)該發(fā)炎進(jìn)行研究及定量的一種方法是培養(yǎng)最有可能與表面活性劑接觸的組織 的細(xì)胞，例如來自表皮的活角質(zhì)細(xì)胞。該培養(yǎng)細(xì)胞可經(jīng)受壓力及處理，且與發(fā)炎信號(hào)傳導(dǎo) 或細(xì)胞損傷相關(guān)的釋放物質(zhì)的量可通過多種生物分析來測(cè)定。由于皮膚角質(zhì)細(xì)胞的表皮 位置、其在維持角質(zhì)層（stratum corneum)屏障完整性中的重要性及其產(chǎn)生多種發(fā)炎介質(zhì) 的能力，皮膚角質(zhì)細(xì)胞已成為刺激物誘導(dǎo)的皮膚發(fā)炎中的關(guān)注焦點(diǎn)。角質(zhì)細(xì)胞含有大量生 物活性白介素（IL)-Ia，其可因應(yīng)多種刺激物（例如表面活性劑）而釋放。IL-Ια是一 種一級(jí)細(xì)胞因子，其可通過刺激物來誘導(dǎo)，且通常在發(fā)炎級(jí)聯(lián)早期自角質(zhì)細(xì)胞釋放。隨后， IL-I α導(dǎo)致誘導(dǎo)多種下游發(fā)炎介質(zhì)，例如信號(hào)傳導(dǎo)分子、細(xì)胞因子及稱為嗜中性球趨化因 子的趨化因子IL-8。IL-8對(duì)于將白血球召集至受損皮膚及對(duì)于皮膚發(fā)炎的體征的發(fā)展是 重要的。因此，通過減少角質(zhì)細(xì)胞的IL-Ια及IL_8(初始發(fā)炎反應(yīng)介質(zhì)及關(guān)鍵趨化因子） 的分泌，可減少、預(yù)防和/或消除皮膚發(fā)炎的體征。
[0024] 通過（例如）美國(guó)專利第7, 442, 391號(hào)、第7, 473, 435號(hào)、第7, 537, 791號(hào)、第 8, 043, 635號(hào)、第8, 101，212號(hào)、第8, 277, 852號(hào)及第8, 318, 220號(hào)中闡述的方法產(chǎn)生的某 些生物活性組合物（即部分）具有與常用溶劑萃取的植物提取物顯著不同的組成。某些部 分具有有效的抗炎、抗氧化劑及光穩(wěn)定活性，其可影響多個(gè)負(fù)責(zé)皮膚老化的生物路徑，同時(shí) 亦使制劑的穩(wěn)定性、色彩及氣味的劣化降至最低，此可使其尤其適合于局部施加。適宜生物 活性部分可包括（但不限于）細(xì)胞壁部分、細(xì)胞壁部分提取物、膜部分、膜部分提取物、細(xì)胞 質(zhì)部分、細(xì)胞質(zhì)部分提取物、細(xì)胞漿液和/或組合。 【
【發(fā)明內(nèi)容】
】
[0025] 本發(fā)明是關(guān)于抑制生物組織（包括但不限于皮膚）發(fā)炎的方法。皮膚發(fā)炎包括在 皮膚中或在皮膚表面上產(chǎn)生的任何不期望效應(yīng)，包括（但不限于）刺激、發(fā)紅、腫脹、局部 溫度升高、龜裂、脫肩、搔癢、疼痛、敏感、擦傷、變色及出血或諸如此類及其組合。本發(fā)明已 顯示，某些植物部分的抗炎活性可有效用于各種抑制生物組織（包括但不限于皮膚）發(fā)炎 的產(chǎn)物中，所述植物部例如是茶樹（Camellia sinensis) ( Recentia? CS)、梓檬（Citrus limon) (Recentia? CL)及紅菽草（Trifolium pratense) (Recentia? TP)的衆(zhòng)液部分。
[0026] 【發(fā)明詳述】
[0027] 本發(fā)明是關(guān)于通過使生物組織（包括但不限于皮膚）與有效量的某些植物部 分接觸來抑制該組織發(fā)炎的方法，所述植物部分例如是茶樹（Receiitia? cs)、檸檬 (Recentia? cl)及紅菽草（Recentia? TP)的漿液部分。
[0028] 本發(fā)明還涉及發(fā)炎的生物標(biāo)記。在一個(gè)實(shí)施方案中，哺乳動(dòng)物發(fā)炎的生物標(biāo)記包 括（但不限于）與白介素 -I Ct (IL-l α )發(fā)炎級(jí)聯(lián)相關(guān)的生物標(biāo)記。IL-I α是發(fā)炎細(xì)胞因 子，其是由刺激物誘導(dǎo)，且通常在發(fā)炎級(jí)聯(lián)早期自表皮皮膚細(xì)胞釋放。隨后，其引起包括趨 化因子IL-8在內(nèi)的下游二級(jí)發(fā)炎介質(zhì)的誘導(dǎo)，之后引起形態(tài)改變且最終引起出現(xiàn)皮膚發(fā) 炎的體征。因此，通過減少IL-Ια及IL_8(初始發(fā)炎反應(yīng)介質(zhì)及關(guān)鍵趨化因子）的分泌， 可減少、預(yù)防和/或消除皮膚發(fā)炎及刺激。
[0029] 已發(fā)現(xiàn)某些表面活性化合物可誘導(dǎo)皮膚發(fā)炎及刺激。表面活性化合物（有時(shí)稱作 表面活性劑）在產(chǎn)品中通常用于降低液體的表面張力、兩種液體之間的界面張力或液體與 固體之間的界面張力。表面活性劑亦可用作清潔劑、潤(rùn)濕劑、乳化劑、發(fā)泡劑和/或分散劑。 表面活性劑可為陰離子型、陽離子型、非離子型及兩性離子型表面活性劑和/或其組合。
[0030] 本發(fā)明亦是關(guān)于生物活性組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，生物活性組合物包括通 過闡述于（例如）以下文獻(xiàn)中的方法產(chǎn)生的植物衍生的分離生物活性復(fù)合物：美國(guó)專利 第 7, 442, 391 號(hào)、第 7, 473, 435 號(hào)、第 7, 537, 791 號(hào)、第 8, 043, 635 號(hào)、第 8, 101，212 號(hào)、第 8, 277, 852號(hào)及第8, 318, 220號(hào)。該組合物（即部分）并非通過常用溶劑萃取來產(chǎn)生且其 組成與常用植物提取物顯著不同。適宜生物活性部分可包括（但不限于）細(xì)胞壁部分、細(xì) 胞壁部分提取物、膜部分、膜部分提取物、細(xì)胞質(zhì)部分、細(xì)胞質(zhì)部分提取物、細(xì)胞漿液部分和 /或其組合。
[0031] 本發(fā)明亦是關(guān)于適于局部施加至哺乳動(dòng)物的生物活性局部制劑。在一個(gè)實(shí)施方案 中，生物活性局部制劑包括局部有效量的本發(fā)明生物活性組合物。生物活性局部制劑可進(jìn) 一步包括局部可接受的載劑。
[0032] 本發(fā)明亦是關(guān)于抑制哺乳動(dòng)物皮膚組織中的發(fā)炎活性（包括皮膚組織中因使皮 膚接觸一或多種表面活性劑引起的發(fā)炎活性）的方法。該方法涉及提供本發(fā)明生物活性組 合物。該方法進(jìn)一步涉及將生物活性組合物以有效抑制皮膚組織的發(fā)炎活性的量施加至皮 膚組織。
[0033] 本發(fā)明亦是關(guān)于保護(hù)哺乳動(dòng)物皮膚組織免受表面活性化合物誘導(dǎo)的損傷的方法。 該方法涉及提供本發(fā)明生物活性組合物。該方法進(jìn)一步涉及將生物活性組合物以有效減少 皮膚組織的表面活性化合物誘導(dǎo)的損傷及預(yù)防皮膚組織的發(fā)炎損傷的量施加至皮膚組織。 [0034] 本發(fā)明亦解決常用植物提取物（即通過常用方法產(chǎn)生的植物提取物）的缺陷。常 用植物處理的缺陷在于，其無法完全保存眾多種有效生物活性組合物。不進(jìn)行發(fā)酵及過度 熱處理，通過闡述于（例如）美國(guó)專利第7, 442, 391號(hào)、第7, 473, 435號(hào)、第7, 537, 791號(hào)、 第8, 043, 635號(hào)、第8, 101，212號(hào)、第8, 277, 852號(hào)及第8318220號(hào)（均以引用方式并入本 文中）中的方法處理新鮮茶樹、檸檬及紅菽草等意外地顯示比常用植物處理產(chǎn)品更有效地 減輕表皮皮膚細(xì)胞中表面活性化合物誘導(dǎo)的發(fā)炎細(xì)胞因子及趨化因子分泌。
[0035] 闡述于（例如）美國(guó)專利第7, 442, 391號(hào)、第7, 473, 435號(hào)、第7, 537, 791號(hào)、第 8043635,8, 101,212號(hào)、第8, 277,852號(hào)及第8,318, 220號(hào)（均以引用方式并入本文中）中 的方法獨(dú)特地保存天然成份中的生物活性。衍生自該方法的植物部分亦極有效地減輕表皮 皮膚細(xì)胞中表面活性劑誘導(dǎo)的IL-Ια和/或IL-8的分泌。此是通過首先在培養(yǎng)的人類表 皮角質(zhì)細(xì)胞中用不同種類的表面活性劑（例如陰離子型、非離子型、陽離子型及兩性離子 型）誘導(dǎo)發(fā)炎細(xì)胞因子IL-Ια和/或IL-8來證明的。然后，基于6種不同種類的代表性表 面活性劑誘導(dǎo)IL-Ια及細(xì)胞毒性的能力，對(duì)其溫和性進(jìn)行評(píng)級(jí)。在所測(cè)試表面活性劑中最 溫和的非離子型乙氧基化醇能誘導(dǎo)IL-I α但不誘導(dǎo)IL-8。接下來，評(píng)估茶樹（Recentia? CS)、檸檬（Recentia? CL)及紅菽草（Rec