Etonogestrel在制備抗前列腺癌產(chǎn)品中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種Etonogestrel在制備抗前列腺癌產(chǎn)品 中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 腫瘤是威脅人類(lèi)健康的最常見(jiàn)也是最嚴(yán)重的一種疾病，研發(fā)高效抗腫瘤藥物對(duì)延 長(zhǎng)患者的生存周期至關(guān)重要。近年來(lái)，隨著腫瘤基因組學(xué)學(xué)和分子藥理學(xué)的飛速發(fā)展，新型 抗腫瘤藥物的研發(fā)取得了不錯(cuò)的成果，但由于新藥研發(fā)投入大，周期長(zhǎng)等瓶頸無(wú)法克服，以 及腫瘤個(gè)體遺傳變異大等特征，導(dǎo)致許多傳統(tǒng)抗腫瘤藥物效果不加，新藥價(jià)格昂貴，副作用 未明。
[0003] Barabasi AL等研究者在2011年發(fā)表于《Nature Reviews Genetics》的論文中指 出，基于GWAS研究結(jié)果和互作組學(xué)（interactome)策略開(kāi)展的分子網(wǎng)絡(luò)分析有望揭示復(fù)雜 疾病新的藥物靶點(diǎn)和分子標(biāo)志物，并最終形成對(duì)疾病發(fā)病機(jī)制和治療方案全新的認(rèn)識(shí)。更 值得注意的是，藥物重定位（drug repositioning)研究發(fā)現(xiàn)，GWAS研究鎖定的易感基因及 與其有蛋白-蛋白相互作用（protein-protein interaction, PPI)的基因更容易成為藥物 間接的靶點(diǎn)，這一發(fā)現(xiàn)有助于解釋現(xiàn)有藥物的作用機(jī)制并指導(dǎo)新藥的研發(fā)。2014年，Okada Y等研究者在《Nature》上發(fā)表的論文中顯示GWAS研究結(jié)果整合分析得到的類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié) 炎的101個(gè)易感基因中有98個(gè)目前正用于治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎藥物的直接或間接靶標(biāo)，而 且還通過(guò)藥物重定位研究，他們還發(fā)現(xiàn)了數(shù)十個(gè)已獲批準(zhǔn)用于其他適應(yīng)癥的藥物也可用于 治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本研究正是通過(guò)整合癌癥組學(xué)Cosmic version72數(shù)據(jù)庫(kù)的癌癥基因譜Cancer Gene Census 以及蛋白質(zhì)相互作用 STRING version 10 數(shù)據(jù)庫(kù)和 DrugBankversion4. 2 中 FDA批準(zhǔn)的藥物數(shù)據(jù)庫(kù)，獲得的候選重定位藥物，對(duì)腫瘤細(xì)胞系進(jìn)行篩查實(shí)驗(yàn)，篩選出新的 抗腫瘤藥物。做腫瘤細(xì)胞系篩選的候選腫瘤抑制藥物見(jiàn)如下：
[0005] Nicardipine, Promethazine, Estrone, Etonogestrel, Sunlidac, Etonogestrel, Et onogestrel, Levonorgestrel, Mesalazine, Indomethacin, Sulfasalazine, Balsalazid e, Irbesartan, Ibuprofen, IsoprenalinejPentosan Polysulfate〇
[0006] 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供Etonogestrel的新用途。
[0007] 本發(fā)明提供的Etonogestrel在制備治療前列腺癌產(chǎn)品中的應(yīng)用。
[0008] 本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供Etonogestrel的新用途。
[0009] 本發(fā)明提供了 Etonogestrel在制備抑制前列腺癌細(xì)胞增殖產(chǎn)品中的應(yīng)用。
[0010] 本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供Etonogestrel的新用途。
[0011] 本發(fā)明提供了 Etonogestrel在制備降低前列腺癌細(xì)胞IC50值產(chǎn)品中的應(yīng)用。
[0012] 上述應(yīng)用中，所述前列腺癌細(xì)胞為DU-145。
[0013] 上述應(yīng)用中，所述產(chǎn)品為藥物或試劑盒。
[0014] 本發(fā)明的第四個(gè)目的是提供一種產(chǎn)品。
[0015] 本發(fā)明提供的產(chǎn)品，其活性成分為Etonogestrel ;所述產(chǎn)品具有如下至少一種功 能：
[0016] 1)治療前列腺癌；
[0017] 2)抑制前列腺癌細(xì)胞增殖；
[0018] 3)降低前列腺癌細(xì)胞IC50值。
[0019] 上述產(chǎn)品中，所述前列腺癌細(xì)胞為DU-145。
[0020] 上述產(chǎn)品中，所述產(chǎn)品為藥物或試劑盒。
[0021] 本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明對(duì)FDA, CFDA已獲批準(zhǔn)的藥物Etonogestrel進(jìn)行腫瘤 藥物重定位，根據(jù)腫瘤不同的細(xì)胞系（組織類(lèi)型）以及突變位點(diǎn)對(duì)適應(yīng)癥不是抗腫瘤的藥 物進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)Etonogestrel抗前列腺癌這種新用途，實(shí)現(xiàn)舊藥新用。
【附圖說(shuō)明】
[0022] 圖1為96孔培養(yǎng)板藥篩藥物板型分布。
[0023] 圖 2 為 Etonogestrel 對(duì)前列腺癌敏感；EC50 = 11. 6796 ;IC50 = 16. 0136 ;R2 = 0.9788〇
【具體實(shí)施方式】
[0024] 下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。
[0025] 下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0026] 下述實(shí)施例中待測(cè)藥物為Etonogestrel，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：
[0027] 其為drug bank產(chǎn)品，產(chǎn)品目錄號(hào)為 ?： DB00294。
[0028] 下面實(shí)施例中的前列腺癌細(xì)胞DU-145、人肺鱗癌細(xì)胞NCI-H1703和人肺癌細(xì)胞 NCI-H2122的出處如下：
[0029] DU-145 ATCC HTB-81
[0030] NCI-H1703 ATCC CRL-5889
[0031] NCI-H2122 ATCC CRL-5985
[0032] 下面實(shí)施例中的主要的儀器及耗材
[0033] DMSO (from Sigma, Cat. No. D4540)
[0034] 96-well 白色底透細(xì)胞培養(yǎng)板（from Corning, Cat. No. 3610)
[0035] CellTiter Glo 試劑盒（from Promega，Cat. No. G7573)
[0036] Doxorubicin 陽(yáng)性藥（from MCE, Cat. No. HY-15142)
[0037] Fetal Bovine Serum(from Gibco,Cat#10099141)
[0038] 100mm 培養(yǎng)皿（from Corning, Cat#430167)
[0039] RPMI-1640medium(from Gibco, Cat#A1049101)
[0040] DMEM medium(from Gibco, Cat#l1995081)
[0041] DMEM/F12medium(from Gibco, Cat#l1330057)
[0042] EMEM medium(from Gibco, Cat#10370021)
[0043] Mutidrop 384 細(xì)胞分液器（Thermo, Cat#5840150)
[0044] EnSpire 多功能讀板機(jī)（Perkin Elmer, Cat#23〇0_001M)
[0045] 實(shí)施例 1、CELLTITER-GL0 檢測(cè) Etonogestrel 抗前列腺癌
[0046] 一、待測(cè)孔板的制備
[0047] 1、細(xì)胞鋪板
[0048] a)配制各個(gè)細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基。
[0049] b)實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，確認(rèn)標(biāo)記在IOOmrn培養(yǎng)皿上的藥篩細(xì)胞名字，培養(yǎng)基以及傳代時(shí) 間，代次等信息，確保實(shí)驗(yàn)無(wú)誤。
[0050] C)貼壁細(xì)胞操作參考步驟d)到i)，懸浮細(xì)胞操作參考步驟j)到1)。
[0051] d)無(wú)菌操作時(shí)利用真空栗吸取細(xì)胞培養(yǎng)基。
[0052] e)用2ml的無(wú)菌PBS溶液潤(rùn)洗細(xì)胞表層，再用真空栗吸出PBS廢液。
[0053] f)向培養(yǎng)皿輕輕加入 Iml 0.25% (w/v) Trypsin-0. 038% (w/v) EDTA 溶液消化細(xì) 胞，輕輕混勻幾下，溶液覆蓋住細(xì)胞表層，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，在細(xì)胞將要 脫落時(shí)終止胰酶消化作用。
[0054] g)向培養(yǎng)皿中加入5ml 37°C預(yù)熱好的完全培