一種治療病毒性感冒的地衣提取物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥提取物領(lǐng)域，具體涉及一種地衣提取物及含有該提取物的藥物制 劑，該提取物可以應(yīng)用于治療病毒性感冒。
【背景技術(shù)】
[0002] 地衣是低等植物的重要類群，為菌藻共生體。其中的共生菌以子囊菌為主，少數(shù)為 擔(dān)子菌，共生藻為藍藻或綠藻。由于地衣的生物學(xué)特性主要是菌藻共生體中真菌的體現(xiàn)，故 又稱為地衣型真菌。地衣被認為是生物互惠共生現(xiàn)象中最完善的典型。全世界已知地衣500 多個屬，26000多個種，我國有232屬1766種。地衣入藥在我國具有悠久的歷史，《詩經(jīng)》中 就有關(guān)于松蘿藥用的記載。據(jù)各種本草及有關(guān)資料記載，約有200種地衣入藥。
[0003] 地衣是真菌和藻類高度結(jié)合的共生復(fù)合體，由于地衣共生的特殊性，其含有的初 生代謝產(chǎn)物（多糖類）和次生代謝產(chǎn)物（酚酸類）構(gòu)成了天然有機化合物獨特的類群。近 幾年從地衣植物中分離得到了許多具有活性的新化合物，包括：地衣多糖、地衣酸（縮酚酸 類、縮酚酸環(huán)醚類、縮酚酮類和二苯并呋喃類）和醌類等其他成分。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種地衣提取物，其制備方法和液相分析方法，含有該提 取物的藥物制劑及利用該提取物制備治療病毒性感冒的藥物的用途。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0006] -種地衣提取物，該提取物由以下方法制備：
[0007] (a)以重量計，每100份藥材包含干燥的地衣80~90份和干燥的車前草10~20 份，混合粉碎，用55 %乙醇溶液熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮 液；(b)將步驟（a)所得乙醇提取濃縮液用水稀釋，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正 丁醇萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（c)正丁 醇萃取物用水溶解，過濾，用大孔樹脂富集活性成分，先用10%乙醇沖洗8個柱體積除去大 極性成分，再用70%乙醇洗脫12個柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮即得。
[0008] 為了能夠通過建立HPLC指紋圖譜的方法控制不同批次制備的提取物的批間差 異，所述提取物的液相分析方法為：
[0009] 色譜柱：Agilent Zorbax Extent_C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 μ m);
[0010] 流動相：Α為乙腈，B為0. 5%磷酸溶液；
[0011] 梯度洗脫程序：0· 01 ~5min，A 10%- 15% ;5 ~lOmin，A 15%-48% ;10 ~ 25min，A48%- 78% ;25 ~30min，A 78%- 10% ;
[0012] 流動相流速：1. OmL · min S檢測波長：280nm ;柱溫：30°C ;進樣量：10 yL。
[0013] 藥物制劑，含有治療有效量的所述提取物和藥學(xué)上可接受的載體。
[0014] 所述的提取物在制備治療病毒性感冒的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 所述的藥物制劑在制備治療病毒性感冒的藥物中的應(yīng)用。
[0016] 本發(fā)明提取物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物制劑的形式使用。
[0017] 所述藥物制劑含有治療有效量的本發(fā)明地衣提取物，其余為藥物學(xué)上可接受的、 對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0018] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物制劑以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明提取物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0019] 本發(fā)明的優(yōu)點：本發(fā)明通過對干燥的地衣根莖進行提取、除雜、富集處理，能得到 具有治療病毒性感冒的提取物；本發(fā)明提供的液相分析方法可以用于建立該提取物的指紋 圖譜，用于控制不同批次制備的提取物的批間差異。
【附圖說明】
[0020] 圖1為地衣提取物HPLC液相圖譜。
【具體實施方式】
[0021] 下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0022] 實施例1 :地衣提取物①制備（85份地衣，15份車前草）
[0023] 藥材來源：地衣和車前草購自安徽亳州中藥材市場。
[0024] 主要試劑：食品級乙醇購自上海凌峰化學(xué)試劑有限公司；醫(yī)藥級AB-8大孔樹脂購 自天津波鴻樹脂有限公司；乙腈為HPLC級，購于TEDIA ;85 %磷酸為HPLC級，購于TEDIA ; 色譜用純凈水為哇哈哈純凈水。
[0025] 制備方法：將8. 5kg干燥地衣根莖和I. 5kg干燥車前草混合粉碎，用55 %乙醇溶 液熱回流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所得 乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽和 的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物232g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱體 積1.5L)富集活性成分，先用10%乙醇沖洗8個柱體積（12L)除去大極性成分，再用70% 乙醇洗脫12個柱體積（18L)，收集70 %洗脫液，減壓濃縮，即得地衣提取物約150g。
[0026] 實施例2 :地衣提取物②制備（80份地衣，20份車前草）
[0027] 制備方法：將8. Okg干燥地衣根莖和2. Okg干燥車前草混合粉碎，用55 %乙醇溶 液熱回流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所得 乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽和 的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物232g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱體 積1.5L)富集活性成分，先用10%乙醇沖洗8個柱體積（12L)除去大極性成分，再用70% 乙醇洗脫12個柱體積（18L)，收集70 %洗脫液，減壓濃縮，即得地衣提取物約150g。
[0028] 實施例3 :地衣提取物③制備（90份地衣，10份車前草）
[0029] 制備方法：將9. Okg干燥地衣根莖和1.0 kg干燥車前草混合粉碎，用55 %乙醇溶 液熱回流提取（25LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所得 乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽和 的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物232g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱體 積1.5L)富集活性成分，先用10%乙醇沖洗8個柱體積（12L)除去大極性成分，再用70% 乙醇洗脫12個柱體積（18L)，收集70 %洗脫液，減壓濃縮，即得地衣提取物約150g。
[0030] 實施例4 :地衣提取物④制備（75份地衣，25份車前草）
[0031] 制備方法：將7. 5kg干燥地衣根莖和2. 5kg干燥車前草混合粉碎，用55%乙醇溶 液熱回流提?。?5LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所得 乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽和 的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物232g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱體 積1.5L)富集活性成分，先用10%乙醇沖洗8個柱體積（12L)除去大極性成分，再用70% 乙醇洗脫12個柱體積（18L)，收集70 %洗脫液，減壓濃縮，即得地衣提取物約150g。
[0032] 實施例5 :地衣提取物⑤制備（95份地衣，5份車前草）
[0033] 制備方法：將9. 5kg干燥地衣根莖和0. 5kg干燥車前草混合粉碎，用55 %乙醇溶 液熱回流提取（25LX3次），合并提取液，濃縮至無醇味得到乙醇提取濃縮液（2L);將所得 乙醇提取濃縮液用水稀釋至3L，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和水飽和 的正丁醇（3LX3次）萃取，減壓濃縮，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物232g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解，醫(yī)用脫脂棉過濾，用AB-8大孔樹脂（2kg，柱體 積1.5L)富集活性成分，先用10%乙醇沖洗8個柱體積（12L)除去大極性成分，再用70% 乙醇洗脫12個柱體積（18L)，收集70 %洗脫液，減壓濃縮，即得地衣提取物約150g。
[0034] 實施例6 :液相色譜分析
[0035] 供試品溶液配制：取實施例1方法制得的提取物5mg至50mL棕色容量瓶中，加 30mL 10 %乙腈水溶液超聲溶解，冷卻至室溫后，繼續(xù)加10 %乙腈水溶液定容。分析方法如 下：
[0036] 高效液相色譜儀：Agilent 1260,二元栗；
[0037] 色譜柱：Agilent Zorbax Extent_C18 柱（4. 6mmX 250mm，5 μ m);