用于治療認(rèn)知功能障礙的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了用于治療患者對象認(rèn)知受損或功能障礙的組合物和方法。特別地，本發(fā)明提供了使用包含血管緊張素?(1?7)受體激動(dòng)劑的組合物來治療由多種臨床病癥引起的認(rèn)知功能障礙或受損的方法，所述臨床病癥包括但不限于與以下相關(guān)的那些臨床病癥：患者對象的中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的炎癥增加、細(xì)胞因子產(chǎn)生、活性氧物質(zhì)增加、腦炎性相關(guān)基因的表達(dá)改變和/或與學(xué)習(xí)和記憶有關(guān)之基因的表達(dá)改變。
【專利說明】用于治療認(rèn)知功能障礙的方法
[0001]相關(guān)申請的交叉引用
[0002]本申請要求于2013年7月3日提交的美國臨時(shí)申請N0.61/842,897的優(yōu)先權(quán)權(quán)益，其通過引用整體并入本文。
技術(shù)領(lǐng)域
[0003]本發(fā)明涉及用于治療認(rèn)知受損或功能障礙的組合物和方法。特別地，本發(fā)明涉及血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑用于治療認(rèn)知功能障礙的用途。
【背景技術(shù)】
[0004]認(rèn)知功能障礙或受損是充血性心力衰竭(congestive heart failure，“CHF”)和心臟手術(shù)后的常見的神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥，其侵襲約50%至70%的出院患者和20%至40%的手術(shù)后6個(gè)月的患者。CHF和術(shù)后認(rèn)知功能障礙的發(fā)生與住院持續(xù)時(shí)間延長和生活質(zhì)量長期受損有關(guān)。不受任何理論的限制，認(rèn)為與中樞神經(jīng)系統(tǒng)中(特別是腦中)炎性細(xì)胞因子增加和/或活性氧物質(zhì)(reactive oxygen specie)增加相關(guān)的任何臨床病癥一般均可導(dǎo)致認(rèn)知功能障礙。
[0005]遺憾的是，仍沒有用于CHF和術(shù)后患者的認(rèn)知受損或功能障礙或者用于與腦中炎性細(xì)胞因子增加和/或活性氧物質(zhì)增加相關(guān)的任何其他臨床病癥的認(rèn)知受損或功能障礙的有效藥理學(xué)治療。
[0006]因此，需要用于與炎性細(xì)胞因子增加和/或活性氧物質(zhì)增加相關(guān)的臨床病癥中認(rèn)知功能障礙的治療。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的一個(gè)具體方面涉及用于通過施用血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑來治療認(rèn)知功能障礙的組合物和方法。本發(fā)明的組合物和方法可用于治療(I)與手術(shù)前和/或手術(shù)后癡呆相關(guān)的認(rèn)知受損或功能障礙，或者(2)在患有充血性心力衰竭(CHF)、心血管疾病或高血壓的患者中觀察到的認(rèn)知受損或功能障礙。本文中使用的術(shù)語“治療”認(rèn)知功能障礙或受損是指:(I)避免認(rèn)知功能障礙發(fā)生，即，使可能正發(fā)生或易發(fā)生認(rèn)知功能障礙或受損但尚未經(jīng)歷或表現(xiàn)出認(rèn)知功能障礙或受損之癥狀的患者對象不出現(xiàn)認(rèn)知功能障礙的臨床癥狀；(2)抑制認(rèn)知功能障礙或受損，S卩，抑制或降低認(rèn)知功能障礙或受損或者其臨床癥狀的發(fā)生;或者(3)緩解認(rèn)知功能障礙或受損，S卩，使認(rèn)知功能障礙或受損或者其臨床癥狀消退。
[0008]更一般地，本發(fā)明的組合物和方法可用于治療患者對象的認(rèn)知功能障礙或受損，所述患者對象的認(rèn)知功能障礙或受損與中樞神經(jīng)系統(tǒng)中(特別是腦中)的炎性細(xì)胞因子增加和/或活性氧物質(zhì)增加在臨床上相關(guān)。本文中使用的術(shù)語“在臨床上相關(guān)”指認(rèn)知功能障礙或者當(dāng)?shù)靡愿纳茣r(shí)導(dǎo)致減輕、預(yù)防、治療或逆轉(zhuǎn)認(rèn)知功能障礙的任何其他臨床病癥的根本原因或潛在原因?？梢鹫J(rèn)知功能障礙或受損的與炎性細(xì)胞因子增加和/或活性氧物質(zhì)增加相關(guān)的示例性臨床病癥包括但不限于:循環(huán)衰竭(circulatory compromise)、心血管疾病、高血壓、低血壓、充血性心力衰竭、腦卒中(stroke)、栓塞(embolism)、手術(shù)(例如，術(shù)后恢復(fù)性病癥)、癡呆、阿爾茨海默病、疾病相關(guān)性認(rèn)知受損、創(chuàng)傷相關(guān)性認(rèn)知受損、年齡相關(guān)性癡呆、術(shù)后相關(guān)性譫妄(postoperative related (^^^^皿丨和/或所述患者對象的中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的炎性細(xì)胞因子增加和/或活性氧物質(zhì)增加，或者其組合。
[0009]在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的組合物包含肽血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑、非肽血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑或其混合物。在一種特別的情況下，本發(fā)明的組合物包含血管緊張素-(1-7)(8卩，“Ang-(l-7)”)肽或其衍生物。Ang-(l-7)的“衍生物”指Ang-(l-7)的同源物或類似物。Ang-( 1-7)的示例性衍生物包括但不限于:
[0010]⑴由Ang-a-7)衍生的肽；
[0011](ii)其中天然Ang-(l-7)序列的一個(gè)或數(shù)個(gè)氨基酸已被其他氨基酸替換的肽；
[0012](iii)肽序列的N末端和/或C末端例如通過替換進(jìn)行了修飾的Ang_( 1_7);因此，可認(rèn)為酯類和酰胺類為C端衍生物；
[0013](i V)其修飾防止其被蛋白酶或肽酶破壞的Ang-( 1-7)肽，以及由Ang-( 1_7)的基礎(chǔ)序列衍生的肽-PEG-綴合物；
[0014](V)由Ang-(l-7)的鏈衍生的并且其中序列的一個(gè)或數(shù)個(gè)氨基酸已被遺傳編碼或非遺傳編碼氨基酸替換的經(jīng)修飾肽或肽模擬物。它們可作為游離肽或作為C端衍生物和/或與聚乙二醇(PEG)-聚合物連接存在，并且具有期望的Ang-(l-7)作用，S卩，為血管緊張素_(1-7)受體激動(dòng)劑;
[0015](vi)與Ang_( 1-7)的天然序列相比在一個(gè)或數(shù)個(gè)位置具有氨基酸保守性替換的肽。保守性替換定義為各氨基酸的側(cè)鏈被具有類似化學(xué)結(jié)構(gòu)和極性的側(cè)鏈替換，所述側(cè)鏈可由遺傳編碼或非遺傳編碼的氨基酸衍生。具有類似側(cè)鏈的這類氨基酸的家族在本領(lǐng)域中是已知的。它們包括例如:具有堿性側(cè)鏈的氨基酸(賴氨酸、精氨酸、組氨酸)、具有酸性側(cè)鏈的氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸)、具有不帶電的極性側(cè)鏈的氨基酸(甘氨酸、天冬酰胺(aspartamic acid)、谷氨酰胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)、具有非極性側(cè)鏈的氨基酸(丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸)、具有分支側(cè)鏈的氨基酸(蘇氨酸、纈氨酸、異亮氨酸)和具有芳族側(cè)鏈的氨基酸(酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、組氨酸)。對側(cè)鏈的此類保守性替換通常在非必要位置進(jìn)行。在上下文中，序列中的必要位置為其中相關(guān)氨基酸的側(cè)鏈對其生物學(xué)作用具有重要意義的位置。
[0016]非肽Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑以及其他肽血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，或者可使用已知的任一種測定方法容易地鑒定。參見，例如，美國專利N0.6，984，660和8，383，772;卩(:1'專利公開叱.冊2009100513、冊 2013010241、W0 2006128266、W02010009524和W002072569，其全部通過引用以其整體并入本文。
[0017]在本發(fā)明的一個(gè)具體方面，提供了用于治療由臨床病癥引起的認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失的方法，所述臨床病癥與以下相關(guān):患者對象的中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的炎癥增加、細(xì)胞因子產(chǎn)生、活性氧物質(zhì)增加、腦炎性相關(guān)基因的表達(dá)改變和/或與學(xué)習(xí)和記憶有關(guān)之基因的表達(dá)改變。所述方法包括向有此治療需要的所述患者對象施用治療有效量的血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑以治療認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失。本文中使用的術(shù)語“治療有效量”意指當(dāng)施用于患者對象以治療認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失時(shí)足以使對認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失的這種治療奏效的化合物或組合物之量?！爸委熡行Я俊睂⒏鶕?jù)所述化合物或組合物，以及認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失的嚴(yán)重程度和待治療患者對象的年齡、體重等而改變。
[0018]在一些實(shí)施方案中，所述血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑是血管緊張素-(l-7)Mas受體激動(dòng)劑。
[0019]在另一些實(shí)施方案中，所述臨床病癥包括循環(huán)衰竭、心血管疾病、高血壓、低血壓、充血性心力衰竭、腦卒中、栓塞、手術(shù)(例如，術(shù)后恢復(fù)性病癥)、癡呆、阿爾茨海默病、疾病相關(guān)性認(rèn)知受損、創(chuàng)傷相關(guān)性認(rèn)知受損、年齡相關(guān)性癡呆、術(shù)后相關(guān)性譫妄和/或所述患者對象的中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的炎性細(xì)胞因子增加和/或活性氧物質(zhì)增加或者其組合。
[0020]在另一些實(shí)施方案中，所述血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑包含肽血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑、非肽血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑或其組合。
[0021]在另一些實(shí)施方案中，所述血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑包含血管緊張素-(1-7)或其衍生物。
[0022]附圖簡述
[0023]圖1示出了在充血性心力衰竭8周后觀察到的Ang_(1-7)全身性施用對物體識別受損的作用。小鼠為MI或假手術(shù)(sham surgery)后12周。6只小鼠為MI+Ang( 1-7);3只小鼠為MI+鹽水;并且4只小鼠為假手術(shù)(Sham)+Ang(l-7)。在進(jìn)行NOR測試前3周皮下植入裝有Ang(1-7)或鹽水的Alzet栗。在栗植入后3周進(jìn)行新物體識別測試。所示數(shù)據(jù)為“測試階段”的第一個(gè)2分鐘的識別率(DRat1) = (t新-t熟悉)/(t新+t熟悉)。正得分表示對新物體花費(fèi)更多的時(shí)間，負(fù)得分表示對熟悉物體花費(fèi)更多的時(shí)間，而零得分表示無優(yōu)先者。*=P<0.05，#= p<0.05。ANOVA+事后Turkey 檢驗(yàn)。
[0024]圖2示出了如通過Morris水迷宮任務(wù)所測試的Ang-( 1-7)全身性施用對空間記憶的作用。
[0025]圖3示出了ΙμΜAng-(l-7)抑制對神經(jīng)元中活性氧之產(chǎn)生的總體作用。
[0026]發(fā)明詳述
[0027]本發(fā)明的一些方面基于本發(fā)明人的以下發(fā)現(xiàn):認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失可通過施用Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑進(jìn)行治療。具體地，本發(fā)明人已發(fā)現(xiàn):在CHF誘導(dǎo)的認(rèn)知衰退的小鼠模型中，在心肌梗死(myocardial infarct1n，MI)后12周后Ang-(1_7)的施用挽救了認(rèn)知受損。
[0028]血管緊張素-(1-7)是一種內(nèi)源性肽，其中一些由血管緊張素II經(jīng)血管緊張素轉(zhuǎn)化酶2(ang1tensin converting enzyme 2，ACE2)衍生而來，一些由血管緊張素I通過多種肽酶衍生而來。特別地，已知Ang-(l-7)活化Mas受體。據(jù)報(bào)道，在因血管緊張素I增加而施用ACE抑制劑后患者和動(dòng)物模型中循環(huán)Ang-(l-7)的增加提高，血管緊張素I增加導(dǎo)致血管緊張素I向Ang-(l-7)的轉(zhuǎn)化增加。在臨床前研究中已表明，Ang-a-7)降低心臟和腦兩者中的炎癥和氧化應(yīng)激。
[0029]認(rèn)知功能障礙是多種臨床病癥的常見神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥，所述臨床病癥包括但不限于，充血性心力衰竭和心臟手術(shù)后病癥。CHF和術(shù)后認(rèn)知功能障礙的發(fā)生與住院持續(xù)時(shí)間延長和生活質(zhì)量長期受損相關(guān)。
[0030]腎素血管緊張素系統(tǒng):衰老、心力衰竭和認(rèn)知功能:一些研究已表明，已知老年心力衰竭和高血壓患者的再入院率為6個(gè)月內(nèi)40%至50%。已表明，高再入院率至少部分地是因?yàn)橛捎谡J(rèn)知受損加重而導(dǎo)致患者對治療無順從性。在心血管疾病和充血性心力衰竭患者中認(rèn)知受損的發(fā)生率尤其高，經(jīng)診斷30%至80%的患者患有一定程度的認(rèn)知喪失。迄今，尚沒有用于預(yù)防或治療術(shù)后認(rèn)知功能障礙或受損或者由與心血管疾病和充血性心力衰竭相關(guān)的臨床病癥以及上述其他臨床病癥引起的認(rèn)知功能障礙或受損的已知治療。
[0031]最近，ACEl阻斷劑和Ang II在記憶、心血管疾病以及充血性心力衰竭、阿爾茲海默病和癡呆的年齡變化中的作用已引起了相當(dāng)大的關(guān)注。對心血管疾病和充血性心力衰竭以及原發(fā)性高血壓老年患者的研究發(fā)現(xiàn):用ACE抑制劑進(jìn)行治療改善認(rèn)知功能而與對血壓的影響無關(guān)。認(rèn)為這些作用的潛在機(jī)制包括腦Ang II的降低，其將降低Ang II對記憶和海馬功能的已知的有害炎性作用。另外，Ang II的降低將減弱對乙酰膽堿釋放的Ang II抑制。此夕卜，還有人認(rèn)為Ang II的降低還將增加Ang I向Ang(l_9)和Ang-(1_7)轉(zhuǎn)化最終形成Ang(2_7)和Ang(3-7)的利用率，由此增加AT4受體的活化，已知AT4受體有利于海馬LTP。
[0032]Ang-(l-7)和腦:最近，已經(jīng)認(rèn)識到RAS涉及兩條獨(dú)立的酶促途徑，其提供作用于不同受體的兩種相關(guān)肽的生理學(xué)平衡。認(rèn)為，詳細(xì)描述的ACE-AngI1-ATlR系統(tǒng)在生理學(xué)上與ACE2-Ang-(l-7)-Mas受體系統(tǒng)相反并且相互平衡。在腦和其他組織中，ATl受體的AngII活化增加活性氧物質(zhì)(reactive oxygen species，“ROS”)和炎癥，而Ang-( 1-7)和Mas受體活化降低ROS和炎癥。已表明，ACE2在調(diào)節(jié)中樞腦功能中的作用通過增加Mas受體的Ang-(l-7)活化來抑制中樞AngII誘導(dǎo)的高血壓、增加NO釋放并且在內(nèi)皮細(xì)胞中降低ROS形成。
[0033]如上文所討論的，一些Ang-(l-7)通過對AngII進(jìn)行ACE2切割而產(chǎn)生。已表明，Ang-(1-7)通過活化Mas受體和AT2R兩者來在腦中增加NO。另外，ACE2敲除小鼠的室旁核中ACE2的過表達(dá)降低Ang II介導(dǎo)的氧化應(yīng)激。在腎中，已表明Mas受體的Ang-(l-7)活化直接增加細(xì)胞內(nèi)NO并減弱ROS的Ang II活化。另外，已表明，與年輕動(dòng)物相比，在年老的動(dòng)物中腎ACE2功能顯著降低并且Ang-(l-7)有所損失?；钚匝跷镔|(zhì)在學(xué)習(xí)和記憶的年齡相關(guān)性變化中的作用已得到廣泛研究。在較年輕的健康動(dòng)物中，ROS和NADPH似乎是正常學(xué)習(xí)和海馬LTP所需要的;然而，在衰老動(dòng)物中，LTP和記憶受損表現(xiàn)出與ROS增加有關(guān)。
[0034]還已知海馬表達(dá)ACE 2和Ang-(l_7)Mas受體。在缺乏Mas受體之小鼠中的最近研究已表明，Ang-(l-7)和Mas受體對正常物體識別過程具有重要意義并且阻斷海馬中的Mas受體損害物體識別。較早期的研究已表明，Ang-(l-7)有利于CAl細(xì)胞中的LTP并且該作用可被Mas受體的拮抗阻斷。迄今，還未進(jìn)行研究來確定ACE2在識別中的作用及其在衰老期間的變化。此外，有關(guān)海馬ACE2/Ang-(l-7)/Mas受體軸的細(xì)胞機(jī)制目前仍是未知的。
[0035]在本發(fā)明的一個(gè)具體方面，提供了用于治療患者對象的認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失的方法。所述方法包括向有此治療需要的對象施用治療有效量的血管緊張素_(1-7)受體激動(dòng)劑。
[0036]在一些實(shí)施方案中，所述認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失與以下相關(guān):所述對象的中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的炎癥增加、細(xì)胞因子產(chǎn)生、活性氧物質(zhì)增加、腦炎性相關(guān)基因的表達(dá)改變和/或與學(xué)習(xí)和記憶有關(guān)之基因的表達(dá)改變。
[0037]在另一些實(shí)施方案中，所述認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失與發(fā)生在以下中的認(rèn)知受損相關(guān):循環(huán)衰竭、充血性心力衰竭、術(shù)后恢復(fù)、癡呆、阿爾茨海默病、疾病相關(guān)性認(rèn)知受損和/或創(chuàng)傷相關(guān)性認(rèn)知受損。
[0038]在另一些實(shí)施方案中，所述認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失與以下相關(guān):循環(huán)衰竭、心血管疾病、高血壓、低血壓、充血性心力衰竭、腦卒中、栓塞、手術(shù)、癡呆、阿爾茨海默病、疾病相關(guān)性認(rèn)知受損、創(chuàng)傷相關(guān)性認(rèn)知受損、年齡相關(guān)性癡呆、術(shù)后相關(guān)性譫妄和/或所述患者對象的中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的炎性細(xì)胞因子增加和/或活性氧物質(zhì)增加，或者其組合。
[0039]可用于本發(fā)明的示例性Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑包括但不限于，肽血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑、非肽血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑或其混合物。在一種特別的情況下，本發(fā)明的組合物包含血管緊張素-(1-7)肽或其衍生物。Ang-( 1-7)的“衍生物”是指Ang-( 1-7)的同源物或類似物。
[0040]本發(fā)明的一些方面提供了包含Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑的組合物，其可用于治療患者對象的認(rèn)知功能障礙或受損。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了用于抑制個(gè)人認(rèn)知功能和/或記憶衰退的組合物。本發(fā)明的組合物和方法可用于預(yù)防或者甚至逆轉(zhuǎn)認(rèn)知能力的衰退。
[0041]在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，提供了這樣的方法，其用于改善認(rèn)知功能、學(xué)習(xí)和記憶或者保護(hù)避免已知在循環(huán)功能衰竭(例如充血性心力衰竭)后的對象或患者或者在術(shù)后患者中發(fā)生的認(rèn)知功能喪失。如使用合適動(dòng)物模型的實(shí)施例部分中所示，本發(fā)明人已發(fā)現(xiàn)，施用治療有效量的血管緊張素-(1-7)或血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑改善認(rèn)知功能、學(xué)習(xí)和記憶或者保護(hù)避免已知在循環(huán)功能衰竭(例如充血性心力衰竭)后或者在術(shù)后患者中發(fā)生的認(rèn)知功能喪失。
[0042]治療有效量ang-(l-7)受體激動(dòng)劑的施用增加與學(xué)習(xí)和記憶有關(guān)之基因的表達(dá)、改善腦血管功能和/或降低腦炎性相關(guān)基因的表達(dá)。因此，本發(fā)明的一些實(shí)施方案提供了這樣的方法，其用于通過向患者對象施用治療有效量的Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑來增加與學(xué)習(xí)和記憶有關(guān)之基因的表達(dá)或者改善腦血管功能或者降低腦炎性相關(guān)基因的表達(dá)。
[0043]在一些方面，本發(fā)明提供了用于預(yù)防與本文中所述之臨床病癥相關(guān)的認(rèn)知功能障礙或受損和/或改善認(rèn)知功能的治療手段，所述臨床病癥包括但不限于，心血管疾病、充血性心力衰竭和認(rèn)知功能的術(shù)后相關(guān)性衰退。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了通過施用治療有效量的Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑來治療認(rèn)知功能障礙或受損的方法。在一些情況下，Ang-a-7) 受體激動(dòng)劑通常以高效力選擇性地靶向腦組織， 以降低促進(jìn)認(rèn)知受損的細(xì)胞信號或者增強(qiáng)促進(jìn)認(rèn)知功能的細(xì)胞信號。
[0044]在另一些實(shí)施方案中，Ang-(1-7)受體激動(dòng)劑是Ang-(l-7)肽或其衍生物。
[0045]在另一些實(shí)施方案中，所述組合物包含提高血漿、組織或細(xì)胞的Ang-(l-7)水平的化合物。
[0046]在另一些實(shí)施方案中，所述組合物包含抑制或降低神經(jīng)元活性氧物質(zhì)的產(chǎn)生和/或NAD (P) H相關(guān)酶的表達(dá)的化合物。
[0047]在一個(gè)具體的實(shí)施方案中，血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑包含血管緊張素-(1-7)肽。
[0048]施用和藥物組合物:本發(fā)明包括藥物組合物，其包含至少一種Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑或者其可藥用鹽或溶劑合物，以及至少一種可藥用載體并任選地包含其他治療性和/或預(yù)防性成分。
[0049]—般來說，本發(fā)明的組合物通過用于具有類似用途之藥劑的任何可接受施用模式以治療有效量施用。合適劑量的范圍通常為每日Img至500mg，通常為每日Img至10mg，并且通常為每日Img至30mg，這取決于多種因素，例如認(rèn)知受損的嚴(yán)重程度、患者對象的年齡和相對健康、所使用Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑的效力、施用途徑和形式、施用所針對的適應(yīng)癥以及有關(guān)醫(yī)務(wù)人員的偏好和經(jīng)驗(yàn)。治療此類疾病之領(lǐng)域中的普通技術(shù)人員通常能夠在無需過多實(shí)驗(yàn)的情況下根據(jù)個(gè)人知識和本申請的公開內(nèi)容就可確定本發(fā)明的化合物的治療有效量。
[0050]通常來說，本發(fā)明的組合物可作為藥物制劑，所述藥物制劑包括以適合經(jīng)口(包括口腔和舌下)、經(jīng)鼻、經(jīng)肺或腸胃外(包括肌內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、鞘內(nèi)、皮下和靜脈內(nèi))或者以適合通過吸入或吹入施用的形式施用。典型的施用方式一般為使用常規(guī)的劑量方案經(jīng)口或腸胃外施用，所述劑量方案可根據(jù)痛苦的程度進(jìn)行調(diào)整。
[0051]本發(fā)明的組合物可包含一種或更多種常規(guī)的佐劑、載體或稀釋劑，并且可置于藥物組合物和單位劑量的形式中。藥物組合物和單位劑量形式可包含常規(guī)比例的常規(guī)成分，具有或不具有另外的活性化合物或成分，單位劑量形式可包含任何合適的與所采用之預(yù)期日劑量范圍相當(dāng)?shù)挠行Я康幕钚猿煞帧Ｋ鏊幬锝M合物可作為用于經(jīng)口使用的固體(例如片劑或填充的膠囊劑)、半固體、粉末、持續(xù)釋放制劑或液體(例如溶液劑、混懸劑、乳劑、酏劑或填充的膠囊劑)使用；或者以用于腸胃外使用的無菌可注射溶液劑的形式使用。因此，每個(gè)片劑包含約100毫克活性成分或更廣泛地約I毫克至約I，000毫克活性成分的制劑是合適的代表性單位劑量形式。
[0052]本發(fā)明的組合物可以以多種經(jīng)口施用劑型配制。所述藥物組合物和劑型可包含Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑或其可藥用鹽作為活性組分。可藥用載體可以為固體或液體。固體形式制劑包括粉末劑、片劑、丸劑、膠囊劑、扁囊劑、栓劑和可分散的顆粒劑。固體載體可以是還可充當(dāng)稀釋劑、矯味劑、增溶劑、潤滑劑、助懸劑、粘合劑、防腐劑、片劑崩解劑或包封材料的一種或更多種物質(zhì)。在粉末劑中，載體一般為細(xì)顆粒固體，其為細(xì)顆?；钚猿煞值幕旌衔铩Ｔ谄瑒┲?，活性組分一般與具有必需結(jié)合能力的載體以合適比例混合，并且壓制成期望的形狀和尺寸。粉末劑和片劑優(yōu)選包含約1%至約70%的活性化合物。合適的載體包括但不限于:碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石、糖、乳糖、果膠、糊精、淀粉、明膠、西黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點(diǎn)蠟、可可豆脂等。術(shù)語“制劑”旨在包括具有包封材料作為載體的活性化合物的配制物，其提供其中活性組分(具有或不具有載體)被與其結(jié)合之載體包圍的膠囊劑。類似地，扁囊劑和錠劑(lozenge)也包括在內(nèi)。片劑、粉末劑、膠囊劑、丸劑、扁囊劑和錠劑可作為適合經(jīng)口施用的固體形式。
[0053]適合經(jīng)口施用的其他形式包括液體形式制劑(包括乳劑、糖漿劑、酏劑、水溶液劑、水性混懸劑)或意圖在臨用前不久轉(zhuǎn)化為液體形式制劑的固體形式制劑。乳劑可在溶液(例如在丙二醇水溶液)中制備，或者可包含乳化劑，例如，如卵磷脂、去水山梨醇單油酸酯或阿拉伯膠。水溶液劑可通過將活性組分溶解于水中并添加合適的著色劑、矯味劑、穩(wěn)定劑和增稠劑來制備。水性混懸劑可通過使用黏性材料(例如天然或合成的樹膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉以及其他公知的助懸劑)將細(xì)顆?；钚越M分分散于水中來制備。固體形式制劑包括溶液劑、混懸劑和乳劑，并且除活性組分之外還可包含著色劑、矯味劑、穩(wěn)定劑、緩沖劑、人工和天然的甜味劑、分散劑、增稠劑、增溶劑等。
[0054]Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑也可配制成用于腸胃外施用(例如，通過注射，例如推注或連續(xù)輸注)并且可以以單位劑量形式存在于安瓿、預(yù)填充式注射器、小體積輸注容器或已添加防腐劑的多劑量容器中。本發(fā)明的組合物可采用以下形式，例如在油性或水性載劑中的混懸劑、溶液劑或乳劑，例如在水性聚乙二醇中的溶液劑。油性或非水性載體、稀釋劑、溶劑或載劑的實(shí)例包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如，橄欖油)和可注射的有機(jī)酯(例如，油酸乙酯)，并且可包含配制劑，例如防腐劑、潤濕劑、乳化劑或助懸劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑?；蛘?，活性成分可以是通過對無菌固體進(jìn)行無菌分離或者通過對溶液劑進(jìn)行凍干獲得的粉末形式，其用于在使用前與合適的載體(例如，無菌的無熱原水)組合。
[0055]本發(fā)明的組合物還可配制成用于經(jīng)鼻施用。溶液劑或混懸劑可通過常規(guī)的工具(例如使用滴管、移液管或噴霧器)直接施用于鼻腔。制劑可以以單劑量形式或多劑量形式提供。在滴管或移液管的后一種情況下，這可通過向患者施用合適的預(yù)定體積的溶液劑或混懸劑來實(shí)現(xiàn)。在噴霧器的情況下，這可借助例如計(jì)量霧化噴霧栗來實(shí)現(xiàn)。
[0056]本發(fā)明的組合物可配制成用于氣霧劑施用，特別是針對呼吸道并且包括鼻內(nèi)施用。所述組合物一般具有小粒徑，例如約5微米或更小的粒徑。這樣的粒徑可通過本領(lǐng)域中已知的方式，例如通過微粉化獲得?；钚猿煞衷O(shè)置在具有合適拋射劑(例如氯氟化碳(CFC)，例如二氯氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷)或二氧化碳或其他合適氣體的增壓包裝中。氣霧劑還可適宜地包含表面活性劑，例如卵磷脂。Ang-(l-7)受體激動(dòng)劑的劑量可通過計(jì)量閥進(jìn)行控制?；蛘?，活性成分可以以干粉末劑的形式提供，例如所述組合物在合適粉末基質(zhì)(例如，乳糖、淀粉、淀粉衍生物如羥丙基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮(PVP))中的粉末混合物。粉末載體通常在鼻腔中形成凝膠。粉末組合物可以以單位劑量形式存在于例如從其可借助吸入器施用粉末劑的如明膠膠囊或明膠藥筒或者泡罩包裝中。
[0057]當(dāng)期望時(shí)，制劑可制備成具有適用于活性成分的持續(xù)釋放或控制釋放施用的腸溶包衣。例如，可將本發(fā)明的組合物配制在經(jīng)皮或皮下藥物遞送裝置中。當(dāng)需要或期望ang-a-7) 受體激動(dòng)劑的持續(xù)釋放時(shí)以及當(dāng)患者對治療方案的順從性至關(guān)重要時(shí) ，這些遞送系統(tǒng)是有利的。在經(jīng)皮遞送系統(tǒng)中的組合物經(jīng)常與皮膚粘附性固體支持物附著。還可將目的組合物與滲透增強(qiáng)劑(例如Azonea-十二烷基氮雜環(huán)庚烷-2-酮))組合。持續(xù)釋放遞送系統(tǒng)可通過手術(shù)或注射皮下插入到皮下層中。皮下植入物將化合物包封在脂溶性膜(例如，硅酮橡膠或生物可降解聚合物如聚乳酸)中。
[0058]藥物制劑通常為單位劑量形式。在這樣的形式中，通常將制劑細(xì)分為包含適當(dāng)量的ang-(1-7)受體激動(dòng)劑的單位劑量。單位劑量形式可以是經(jīng)包裝制劑，即含有分散量的制劑的包裝物，例如在小瓶或安瓿中的經(jīng)包裝片劑、膠囊劑和粉末劑。此外，單位劑量形式可以為膠囊劑、片劑、扁囊劑或錠劑本身，或者其可以是經(jīng)包裝形式的適當(dāng)數(shù)目的任意這些劑型。
[0059]其他合適的藥物載體及其制劑在Remington: The Science and Practice ofPharmacy 1995，由E.W.Martin編輯，Mack Publishing Company，第 19版，Easton，Pa中進(jìn)行了描述。
[0060]通過檢驗(yàn)本發(fā)明的以下實(shí)施例，本發(fā)明的另外目的、優(yōu)點(diǎn)和新特征對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言將變得明顯，以下實(shí)施例并非旨在限制。在實(shí)施例中，將建設(shè)性地付諸實(shí)踐的操作以現(xiàn)在時(shí)進(jìn)行描述，而將已在實(shí)驗(yàn)室中實(shí)施過的操作以過去時(shí)進(jìn)行闡述。
實(shí)施例[0061 ] Ang-(1-7)在物體識別記憶方面逆轉(zhuǎn)充血性心力衰竭衰退:圖1示出了在充血性心力衰竭8周后全身施用的Ang-(l-7)對物體識別受損的作用。通過對左冠狀動(dòng)脈進(jìn)行結(jié)扎來誘導(dǎo)心肌梗死和繼發(fā)性CHF。如通過超聲心動(dòng)描記術(shù)所測量的，截止MI后的第4周和第8周，CHF小鼠(η= 15)的射血分?jǐn)?shù)降低約50%和70%。對于MI后8周的物體識別SOR測試，由在測試階段期間相對于熟悉物體探索新物體所花費(fèi)的時(shí)間計(jì)算識別率(d i s c r i m i n a t i ο ηrat1)。與假手術(shù)相比，CHF小鼠(η = 5)具有顯著更低的識別率(-.43+.05與+0.16±.1，F(xiàn)(I，7) = 27.4，p =.001，ANOVA)。在MI后8周，皮下給予CHF小鼠(η = 6)和對照(η = 4)的亞組50mcg/kg/小時(shí)血管緊張素(1-7)或鹽水，持續(xù)4周，然后重新測試認(rèn)知功能。在3周的全身性Ang-(l-7)處理后，CHF小鼠(n = 6)的SOR識別率與對照(n = 3)類似(+0.43±0.1與+0.25土
0.2)但顯著不同于經(jīng)鹽水處理的CHF小鼠(n = 4，_.21 ±0.1，F(xiàn)( 2，10) =6.0，p = 0.01，ANOVA)ο
[0062]Ang-(l-7)在空間記憶方面逆轉(zhuǎn)充血性心力衰竭衰退:圖2示出了如通過Morris/K迷宮任務(wù)所測試的Ang-( 1-7)的全身性施用對空間記憶的作用。在MI之前，對照和CHF小鼠組對Morris水迷宮任務(wù)具有類似的表現(xiàn)。通過對左冠狀動(dòng)脈進(jìn)行結(jié)扎來誘導(dǎo)心肌梗死和繼發(fā)性CHF。如通過超聲心動(dòng)描記術(shù)所測量的，截止MI后的第4周和第8周，CHF小鼠的射血分?jǐn)?shù)降低約50%和70%。在MI后4周(η= 10)和8周(n = 9)，CHF小鼠在Morris水迷宮任務(wù)中的平均表現(xiàn)均顯著差于對照(n = 4)的表現(xiàn)。在4天中對動(dòng)物進(jìn)行測試，其中每天進(jìn)行6個(gè)空間試驗(yàn)。在第4天，MI后4周和8周的校正綜合路徑長度(corrected integrated path length，CIPL)均顯著降低(分別為-66.9+1.6%，-65.3+1.1%，相比較于對照，$(1，75) = 9.11，？=.003，AN0VA，MI后4周))。在MI后8周，皮下給予CHF小鼠(n = 6)和對照(n = 4)的亞組50mcg/kg/小時(shí)血管緊張素(1-7)或鹽水，持續(xù)4周，然后重新測試認(rèn)知功能。接受Ang-(l-7)的小鼠在測試的第一天在物體識別記憶方面表現(xiàn)出顯著改善。
[0063]Ang-(l-7)抑制神經(jīng)元中活性氧的產(chǎn)生:圖3示出了ΙμΜ Ang-( 1-7)抑制對神經(jīng)元中活性氧物質(zhì)產(chǎn)生的總體作用。從22日齡的雌性SD大鼠分離室旁神經(jīng)元，將其解離，在圓形蓋玻片上培養(yǎng)并在HBSS培養(yǎng)基中維持至少48小時(shí)，之后通過共聚焦顯微鏡可視化。將所有的細(xì)胞在 1nM ALDO 中預(yù)孵育 48 小時(shí)，然后在 1.ΟμΜ Ang-( 1-7)或1.ΟμΜ Ang-(l-7)+10.0yMA779中預(yù)孵育2小時(shí)，之后用1.ΟμΜ急性Aldo進(jìn)行測試。為了測量ROS，測量乙錠熒光的變化，其與二氫乙錠(DHE)通過ROS的氧化成正比。將細(xì)胞用添加至細(xì)胞培養(yǎng)基的Ε)ΗΕ(20μΜ)負(fù)載I小時(shí)，然后置于用于對熒光進(jìn)行顯微可視化的室中。確定實(shí)驗(yàn)組對急性Aldo響應(yīng)的單因素AN0VA。在建立顯著性ANOVA后，用Tukey多重比較檢驗(yàn)在平均變化得分對之間進(jìn)行事后分析。將所有的數(shù)據(jù)均表示為平均值±SE。將統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性設(shè)定為Ρ<0.05。
[0064]1.ΟμΜ ALDO的灌注增加PVN神經(jīng)元中的R0S(D = 113.4+28% )。在經(jīng)在Ang-(1-7)中預(yù)孵育的細(xì)胞中，ROS的ALDO增加受到顯著抑制(D = 6.4+27%)。在Ang-(l-7)+A779中的預(yù)孵育恢復(fù)ROS的ALDO增加(Delta= 105.9+9% )。相對于在ACSF孵育期間在ALDO處理之前的對照狀態(tài)對ROS產(chǎn)生的變化進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。使用ANOVA并隨后使用Tukey事后檢驗(yàn)在對照和ALDO處理之間進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)比較。當(dāng)P < 0.05時(shí)，認(rèn)為差異是統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的?？ū硎綪 <0.05ο
[0065]如果患有充血性心力衰竭或心血管疾病的患者伴隨地被診斷患有認(rèn)知衰退和記憶喪失，則其具有遠(yuǎn)遠(yuǎn)更高的死亡可能性。此外，這些患者的再入院率為6個(gè)月內(nèi)40%至50%，這部分地是因?yàn)橛捎谡J(rèn)知受損而導(dǎo)致患者對治療無順從性。如本文中所討論的，本發(fā)明的組合物和方法可用于治療與本文中所討論的多種臨床病癥相關(guān)的認(rèn)知功能障礙或受損。
[0066]另外，本發(fā)明提供了心血管疾病和充血性心力衰竭誘導(dǎo)的認(rèn)知功能障礙的臨床前動(dòng)物模型。將總共26只雄性C57B1/6J小鼠隨機(jī)分成對照組或心血管疾病和充血性心力衰竭組。通過對左冠狀動(dòng)脈進(jìn)行結(jié)扎誘導(dǎo)心肌梗死。如通過超聲心動(dòng)描記術(shù)所測量的，截止MI后的第4周和第8周，心血管疾病和充血性心力衰竭小鼠(η= 15)的射血分?jǐn)?shù)降低約50%和70 % ο在MI后4周和8周，通過Morri s水迷宮任務(wù)測試小鼠的空間學(xué)習(xí)記憶變化并通過標(biāo)準(zhǔn)的自發(fā)物體識別(spontaneous object recognit1n，S0R)任務(wù)測試小鼠的物體識別變化。在MI后8周，皮下給予心血管疾病和充血性心力衰竭小鼠(η = 6)以及對照小鼠(η = 4)的亞組50mcg/kg/小時(shí)血管緊張素(1-7)或鹽水，持續(xù)4周，然后重新測試認(rèn)知功能。
[0067]在MI之前，對照小鼠以及心血管疾病和充血性心力衰竭小鼠組對Morris水迷宮任務(wù)具有類似的表現(xiàn)。在MI后4周(η= 10)和8周(n = 9)，心血管疾病和充血性心力衰竭小鼠在Morris水迷宮任務(wù)中的平均表現(xiàn)均顯著差于對照小鼠(n = 4)的表現(xiàn)。在4天中對動(dòng)物進(jìn)行測試，其中每天進(jìn)行6個(gè)空間試驗(yàn)。在第4天，MI后4周和8周的校正綜合路徑長度(correctedintegrated path length，CIPL)均顯著降低(分別為-66.9+1.6%，-65.3+1.1 %，相比較于對照，(F(l，75) =9.11，p=.003，ANOVA，MI后4周))。對于MI后8周的物體識別SOR測試，當(dāng)根據(jù)在測試階段期間相對于熟悉物體探索新物體所花費(fèi)的時(shí)間計(jì)算識別率時(shí)，與對照小鼠相比心血管疾病和充血性心力衰竭小鼠(n = 5)具有顯著更低的識別率(-.43+.05與+0.16土? I，F(xiàn)(1，7) = 27.4，p=.001, ANOVA)。在全身Ang-( 1-7)的3周處理后，心血管疾病和充血性心力衰竭小鼠(η = 6)的SOR識別率與對照小鼠(η = 3)類似(+0.43 ± 0.1與+0.25 ± 0.2)，但顯著不同于經(jīng)鹽水處理的心血管疾病和充血性心力衰竭小鼠(η = 4，_.21 ±0.1，F(xiàn)(2，10) =6.0，？ = 0.014^^)。令人感興趣的是，射血分?jǐn)?shù)并未受到4即-(1-7)處理的顯著影響。這些結(jié)果表明，心血管疾病和充血性心力衰竭的臨床前小鼠模型表現(xiàn)出空間記憶和物體識別功能障礙兩者，并且表明這種認(rèn)知功能障礙通過全身Ang-( 1-7)的處理而減輕。(JKR01HL098256、K02HL105799、CBMcKnight Brain Research Foundat1n)。血管緊張素(1-7)和]\^8受體活化抑制室旁核(口&作￥6111:1'；[(3111&1 nucleus，PVN)神經(jīng)元中酸固酮誘導(dǎo)的ROS炎性應(yīng)答。
[0068]出于舉例說明和描述的目的已提供了本發(fā)明的前述討論。前述討論并非旨在使本發(fā)明局限于本文中所討論的形式。盡管本發(fā)明的說明書包括對一個(gè)或更多個(gè)實(shí)施方案以及某些變化和改變的描述，但是在理解本公開內(nèi)容之后，其他變化和改變也在本發(fā)明的范圍內(nèi)，例如落在本領(lǐng)域技術(shù)人員的技術(shù)和知識范圍內(nèi)。意圖獲得在允許程度上包括替代實(shí)施方案的權(quán)利，其包括所要求保護(hù)的那些的替代、可互換和/或等同的結(jié)構(gòu)、功能、范圍或步驟，不管這些替代、可互換和/或等同的結(jié)構(gòu)、功能、范圍或步驟在本文中是否公開，而并非意圖公開地展示任何可取得專利的主題。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.用于治療患者對象的認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失的方法，其包括向有此治療需要的患者對象施用治療有效量的血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失與以下相關(guān):所述患者對象的中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的炎癥增加、細(xì)胞因子產(chǎn)生、活性氧物質(zhì)增加、腦炎性相關(guān)基因的表達(dá)改變和/或與學(xué)習(xí)和記憶有關(guān)之基因的表達(dá)改變。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失與以下相關(guān):循環(huán)衰竭、充血性心力衰竭、術(shù)后恢復(fù)、癡呆、阿爾茨海默病、疾病相關(guān)性認(rèn)知受損和/或創(chuàng)傷相關(guān)性認(rèn)知受損中發(fā)生的認(rèn)知受損。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失與以下相關(guān):循環(huán)衰竭、心血管疾病、高血壓、低血壓、充血性心力衰竭、腦卒中、栓塞、手術(shù)、癡呆、阿爾茨海默病、疾病相關(guān)性認(rèn)知受損、創(chuàng)傷相關(guān)性認(rèn)知受損、年齡相關(guān)性癡呆、術(shù)后相關(guān)性譫妄和/或所述患者對象的中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的炎性細(xì)胞因子增加和/或活性氧物質(zhì)增加，或者其組合。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑是血管緊張素-(l-7)Mas受體激動(dòng)劑。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑包含血管緊張素_(1_7)ο7.用于治療由臨床病癥引起的認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失的方法，所述臨床病癥與以下相關(guān):患者對象的中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的炎癥增加、細(xì)胞因子產(chǎn)生、活性氧物質(zhì)增加、腦炎性相關(guān)基因的表達(dá)改變和/或與學(xué)習(xí)和記憶有關(guān)之基因的表達(dá)改變，所述方法包括向有此治療需要的所述患者對象施用治療有效量的血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑以治療認(rèn)知功能障礙和/或記憶喪失。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑是血管緊張素-(l-7)Mas受體激動(dòng)劑。9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑包含血管緊張素_(1_7)ο10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述臨床病癥包括循環(huán)衰竭、心血管疾病、高血壓、低血壓、充血性心力衰竭、腦卒中、栓塞、手術(shù)、癡呆、阿爾茨海默病、疾病相關(guān)性認(rèn)知受損、創(chuàng)傷相關(guān)性認(rèn)知受損、年齡相關(guān)性癡呆、術(shù)后相關(guān)性譫妄和/或所述患者對象的中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的炎性細(xì)胞因子增加和/或活性氧物質(zhì)增加或者其組合。11.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑包含肽血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑、非肽血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑或其組合。12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述血管緊張素-(1-7)受體激動(dòng)劑包含血管緊張素-(1-7)或其衍生物。
【文檔編號】A61K38/08GK105873598SQ201480038443
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2014年6月30日
【發(fā)明人】梅雷迪思·海, 卡羅爾·巴爾內(nèi)斯, 約翰·科希拉斯
【申請人】代表亞利桑那大學(xué)的亞利桑那校董會(huì)