專利名稱：藥用化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及全身和非全身使用的新甾族化合物，并涉及其組合物，該組合物用于氧化應(yīng)激反應(yīng)(oxidative stress)和內(nèi)皮機(jī)能障礙的疾病。具體地說(shuō)本發(fā)明涉及具有抗炎性、免疫抑制和angiostatic活性(所謂的抗炎甾族化合物)，或胃腸道活性的甾族化合物結(jié)構(gòu)的化合物。
按照本發(fā)明的化合物在治療其中通常用所述甾族化合物產(chǎn)品治療具有較大益處的疾病中在治療學(xué)是有用的，即具有更好的耐受性和/或更好的療效。
氧化應(yīng)激反應(yīng)意味著自由基或殘基(radicalic)化合物的產(chǎn)生，自由基或殘基化合物造成細(xì)胞和周圍組織的傷害(病理生理學(xué)成人和兒童疾病的生物學(xué)基礎(chǔ)(Pathophysiologythe biological basis for diseasein adults and children)，McCance & Huether 1998 48-54頁(yè))。
內(nèi)皮機(jī)能障礙意味著與血管內(nèi)皮有關(guān)的那些機(jī)能障礙。按照下文描述(病理生理學(xué)成人和兒童疾病的生物學(xué)基礎(chǔ)，McCance &Huether 1998 1025頁(yè))，已知血管內(nèi)皮的損傷是可以引起一系列影響各種器官和身體器官的病理過(guò)程的那些重要事件之一。
正如已知的那樣，氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙與各種此后報(bào)道的病理學(xué)有關(guān)。許多藥物的毒性也可以引起氧化應(yīng)激反應(yīng)，這極大地影響了它們的性能。
所述病理事件具有慢性的、虛弱的特征并且往往是十分典型的老年特征。正如已經(jīng)描述的，在所述的病理性疾病中使用的藥物顯示出一種顯著的惡化特性。
由氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙引起的病理學(xué)狀態(tài)(存在于老年人中)的實(shí)例如下-對(duì)于心血管系統(tǒng)在一般情況下的心肌和血管局部缺血、高血壓、中風(fēng)、動(dòng)脈粥樣硬化等。
-對(duì)于結(jié)締組織類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和結(jié)締組織的炎性疾病等。
-對(duì)于肺部系統(tǒng)哮喘和結(jié)締組織的炎性疾病等。
-對(duì)于胃腸系統(tǒng)潰瘍和非潰瘍消化不良，腸道炎性疾病等。
-對(duì)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)阿爾滋海默氏病等。
-對(duì)于泌尿生殖系統(tǒng)陽(yáng)痿、失禁。
-對(duì)于皮膚系統(tǒng)濕疹、神經(jīng)性皮膚炎、唑瘡。
-一般性的感染性疾病(參閱Schwarz-KB，Brady“在病毒感染期間的氧化應(yīng)激反應(yīng)評(píng)論(Oxidative stress during viral infectionAreview)”Free radical Biol.Med.21/5，641-649 1996)。
另外，可認(rèn)為衰老的過(guò)程是一種真正的病理性疾病(參閱病理生理學(xué)成人和孩子疾病的生物學(xué)基礎(chǔ)，71-77頁(yè))。
當(dāng)給予患有與氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙有關(guān)的病變的患者已知藥物時(shí)，顯示出較低的活性和/或較高的毒性。
例如這種情況在甾族藥物中發(fā)生。
藥物研究涉及尋找對(duì)上述那些病理性疾病具有改善的治療指數(shù)(功效/毒性比)或較低的風(fēng)險(xiǎn)/利益比的新分子，其中很多藥物的治療指數(shù)降低了。實(shí)際上，在上述氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙的疾病中許多藥物顯示較低的活性和/或較高的毒性。
眾所周知，在治療炎性疾病中甾族藥物為首選藥理學(xué)防治藥物。這類藥物，例如可以提及的有氫化可的松、可的松、潑尼松、潑尼松龍、氟氫可的松、去氧皮質(zhì)酮、甲潑尼松龍(metilprednisolone)、曲安西龍、帕拉米松、倍他米松、地塞米松、曲安奈德、acetonide氟輕松、acetonide倍氯米松、乙酰氧基孕烯諾龍等對(duì)不同的器官引起顯著的藥物-毒理學(xué)作用，并且因?yàn)檫@個(gè)原因，它們的臨床應(yīng)用和中斷停藥使用引起一系列的副作用，其中一些副作用是十分嚴(yán)重的。例如見(jiàn)Goodman & Gilman，“治療的藥學(xué)基礎(chǔ)(The pharmaceutical Basisof Therapeutics)”第九板，1459-1465頁(yè)，1996。
在所述的毒性作用中，可以提及的有影響骨組織導(dǎo)致改變細(xì)胞的新陳代謝的毒性作用和骨質(zhì)疏松高發(fā)生率；影響心血管系統(tǒng)的毒性作用，發(fā)生高血壓的反應(yīng)；影響胃腸道器官產(chǎn)生胃損害的毒性作用。
例如見(jiàn)Martindale“The extrapharmacopoeia”第30版，712-723頁(yè)，1993。
該類甾族藥物也屬于膽酸類(biliary acid)，膽酸類一直用于治療肝病和膽絞痛。熊去氧膽酸也用于某些肝機(jī)能障礙(源于膽的肝硬化等)。在存在胃腸道并發(fā)癥(慢性肝損害、消化器官潰瘍、腸道炎癥等)時(shí)，它們的耐受性強(qiáng)烈地變壞。在膽酸類藥的情況下，氧化應(yīng)激反應(yīng)顯著影響藥物的性能鵝去氧膽酸和熊去氧膽酸的功效和耐受性顯著地降低。特別是發(fā)現(xiàn)對(duì)肝臟的有害作用提高了。在甾族化合物中也可能涉及到治療低脂血癥(dislipidaemias)、激素紊亂、女性器官腫瘤的雌激素。所述甾族化合物類藥物也顯示如上所述的副作用，特別在肝的濃度高時(shí)。
按照上述先有技術(shù)，將治療活性與副作用分開(kāi)幾乎是不可能的，見(jiàn)Goodman等，如上所述，在1474頁(yè)。
從化學(xué)、藥理學(xué)和生物化學(xué)的觀點(diǎn)來(lái)看，甾族化合物是完全不同于抗炎的非甾族化合物的，因?yàn)榉晴拮寤衔锟寡桩a(chǎn)物的藥物-毒理學(xué)作用機(jī)制是基于抑制一種或多種環(huán)加氧酶(COX)，而甾族藥物不影響COX并具有更復(fù)雜的、仍未完全清楚的藥物-毒理學(xué)作用機(jī)制。
當(dāng)然，眾所周知，在藥典中將這兩組藥物分類為不同的類別。
意識(shí)到需要獲得顯示改善的治療性能的藥物，即具有較低的毒性和/或較高的功效的藥物，以便可以將它們給予在氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能障礙的病態(tài)中的患者而不顯示先有技術(shù)藥物的缺點(diǎn)。
令人驚訝地和意外地發(fā)現(xiàn)，在給予受氧化應(yīng)激反應(yīng)和/或內(nèi)皮機(jī)能影響的患者或一般的老人甾族藥物時(shí)所顯示的前述技術(shù)上的問(wèn)題可通過(guò)下文所述的一類新藥而得以解決。
本發(fā)明的一個(gè)目的就是具有以下通式(I)和(II)的甾族化合物或它們的鹽A-(B)bo-C-N(O)s(I)其中s為等于1或2的整數(shù)，優(yōu)選s＝2；bo＝0或1；A＝R-T1-，其中R為如下定義的甾族藥物殘基，B＝-TB-X2-TBI-其中TB和TBI相同或不同；當(dāng)在前體甾族化合物中的反應(yīng)官能團(tuán)為-OH時(shí)，TB＝(CO)；當(dāng)在前體甾族化合物中的反應(yīng)官能團(tuán)為-COOH時(shí)TB＝X；X＝O、S、NR1C，R1C為H或具有1到5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或自由價(jià)；TBI＝(CO)tx或(X)txx，其中tx和txx具有0或1的值；前提是當(dāng)txx＝0時(shí)tx＝1，而當(dāng)txx＝1時(shí)tx＝0；X如上定義；X2為如下定義的二價(jià)橋鍵基團(tuán)；C為二價(jià)-TC-Y-基團(tuán)，其中當(dāng)tx＝0時(shí)TC＝(CO)，當(dāng)txx＝0時(shí)TC＝X，X如上定義；Y為 其中nIX為一個(gè)在0和3之間的整數(shù)，優(yōu)選1；nIIX為一個(gè)在1和3之間的整數(shù)，優(yōu)選1；
RTIX、RTIX′、RTIIX、RTIIX′彼此相同或不同，為H或直鏈的或支鏈的C1-C4烷基；RTIX、RTIX′、RTIIX、RTIIX′優(yōu)選為H。
Y3為含有至少一個(gè)氮原子，優(yōu)選含有一個(gè)或兩個(gè)氮原子的飽和的、不飽和的或芳族雜環(huán)，所述環(huán)有5或6個(gè)原子?；験為Y0，選自以下基團(tuán)鏈烯氧基基團(tuán)R′O，其中R′為直鏈或支鏈(可能時(shí))C1-C20，優(yōu)選含有1到6個(gè)碳原子，最優(yōu)選2-4個(gè)碳原子，或?yàn)榫哂?到7個(gè)碳原子的亞環(huán)烷基，在該亞環(huán)烷基環(huán)上的一個(gè)或多個(gè)碳原子可以被雜原子取代，所述環(huán)可具有R′型側(cè)鏈，R′如上定義；或?yàn)?其中n3為0到3的整數(shù)和n3′為1到3的整數(shù)； 其中n3和n3′具有上述的含義；
其中nf′為1到6的整數(shù)，優(yōu)選為1到4的整數(shù)； 其中R1f＝H、CH3和nf為1到6的整數(shù)，優(yōu)選1到4；優(yōu)選Y＝-Y0＝R′O-，其中R′如上定義；優(yōu)選R′為C1-C6亞烷基； 其中 其中TCI和TCII相同或不同，當(dāng)在前體甾族化合物中的反應(yīng)官能團(tuán)為-OH時(shí)TCI＝(CO)；當(dāng)在前體甾族化合物中的反應(yīng)官能團(tuán)為-COOH時(shí)TCI＝X；X如上定義；TCII＝(CO)tI或(X)tII，其中tI和tII具有0或1的值；前提是當(dāng)tII＝0時(shí)tI＝1，而當(dāng)tII＝1時(shí)tI＝0；X如上定義；Y′如上述Y的定義，但是具有三個(gè)自由價(jià)而不是兩個(gè)，優(yōu)選它選自 基團(tuán)，其中R′為直鏈或支鏈C1-C20，優(yōu)選含有1到6個(gè)碳原子，最優(yōu)選2-4個(gè)碳原子；或一個(gè)飽和的，任選取代、具有5到7個(gè)碳原子的環(huán)或 其中n3為0到3的整數(shù)而n3′為1到3的整數(shù)； 其中n3和n3′具有上述的含義； 其中在一個(gè)碳原子上的一個(gè)氫原子被自由價(jià)取代； 其中nf′為1到6的整數(shù)，優(yōu)選1到4；其中在一個(gè)碳原子上的一個(gè)氫原子被自由價(jià)所取代； 其中在一個(gè)碳原子上的一個(gè)氫原子被自由價(jià)所取代； 其中R1f＝H、CH3和nf為1到6的整數(shù)，優(yōu)選1到4；其中在一個(gè)碳原子上的一個(gè)氫原子被自由價(jià)所取代；優(yōu)選 其中R′為直鏈或支鏈C2-C4，在Y′中與-N(O)S基團(tuán)共價(jià)連接的氧原子在C1式指出的自由鍵的末端；或Y′＝Y(jié)0如(I)定義，但是具有三個(gè)自由價(jià)而不是兩個(gè)，B1＝-TBII-X2a其中X2a為一價(jià)基團(tuán)，當(dāng)tI＝0時(shí)TBII＝(CO)，當(dāng)tII＝0時(shí)TBII＝X，X如上定義；X2為這樣的二價(jià)基團(tuán)，它使B-TB-X2-TBI的對(duì)應(yīng)前體符合試驗(yàn)4或試驗(yàn)5，在前體中的TB和TBI自由價(jià)各為-OZ、-Z或 所飽和，ZI和ZII相同或不相同并且具有如上定義的Z值，這取決于是否TB和/或TBI＝CO或X，與t、t′、tx和txx的值有關(guān)；當(dāng)b0＝0時(shí)C前體為-TC-Y-H類型，其中TC自由價(jià)為OZ、Z或 所飽和，ZI和ZII如上定義，并符合試驗(yàn)5；-X2a單價(jià)基團(tuán)，以使BI-TBII-X2a的對(duì)應(yīng)前體符合試驗(yàn)4或試驗(yàn)5，前體中的TBII自由價(jià)為OZ、Z或 所飽和，ZI和ZII相同或不相同并且具有如上定義的Z值，這取決于是否TBII＝CO或X，與tI和tII的值有關(guān)；A＝R-，具有下面的結(jié)構(gòu)
其中在通式中提及的CH基團(tuán)的氫或CH2基團(tuán)的兩個(gè)氫的取代中，可能存在以下取代基在1-2位可以有一個(gè)雙鍵；在2-3位可以有以下取代基 在2位可以有Cl、Br；在3位可以有CO、-O-CH2-CH2-Cl、OH；在3-4位可以有一個(gè)雙鍵；在4-5位可以有一個(gè)雙鍵；在5-6位可以有一個(gè)雙鍵；在5-10位可以有一個(gè)雙鍵；在6位可以有Cl、F、CH3、-CHO；在7位可以有Cl、OH；在9位可以有Cl、F；在11位可以有OH、CO、Cl、CH3；在16位可以有CH3、OH、＝CH2；在17位可以有OH、CH3、OCO(O)ua(CH2)vaCH3、C≡CH或 其中ua為一個(gè)等于0或1的整數(shù)，va為一個(gè)0到4的整數(shù)；在16-17位可以有以下基團(tuán) R和R′，彼此相同或不同，可以為氫或1到4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，優(yōu)選R＝R′＝CH3；R″為-(CO-L)t-(L)t2-(XI0)t1-其中t、t1和t2為彼此相同或不同的整數(shù)，等于0或1，前提是當(dāng)t＝0時(shí)，t2＝1和當(dāng)t＝1時(shí)，t2＝0，并且當(dāng)A不含有-OH基團(tuán)時(shí)，t和t1，或t2和t1不能同時(shí)等于0；所述二價(jià)橋鍵基團(tuán)L選自(CR4R5)na(O)nb(CR4R5)n′a(CO)n′b(O)n″b(CO)n_b(CR4R5)n″a其中na、n′a和n″a彼此相等或不等，為0到6的整數(shù)，優(yōu)選1-3；nb、n′b、n″b和n_b彼此相等或不等，為0或1的整數(shù)；R4和R5彼此相等或不等，選自H、1到5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，優(yōu)選1到3個(gè)；X0I為如上定義的X；而R1C為一個(gè)1到10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或等于X2I，其中X2I等于-OH、CH3、Cl、N(-CH2-CH3)2、SCH2F、SH或 其中試驗(yàn)4如下它是一個(gè)分析測(cè)定，以10-4M濃度將B或B1的前體的甲醇溶液分批加入到DPPH(2，2-二苯基-1-苦基偕腙肼-自由基)的甲醇溶液中進(jìn)行所述測(cè)定；避光、在室溫下保存該溶液30分鐘后，在517nm波長(zhǎng)讀出試驗(yàn)溶液和僅含有與試驗(yàn)溶液相同量的DPPH的溶液的吸收度；然后通過(guò)下式的方法計(jì)算由所述前體引起的對(duì)DPPH產(chǎn)生殘基的抑制百分率(1-AS/AC)×100其中AS和AC分別為含有試驗(yàn)化合物+DPPH的溶液和僅含有DPPH的溶液的吸收度值。按照本試驗(yàn)的化合物的可接受的標(biāo)準(zhǔn)如下如果如上定義的抑制百分率高于或等于50％，B或B1前體化合物滿足試驗(yàn)4；其中試驗(yàn)5如下這是一個(gè)分析測(cè)定，該測(cè)定如下進(jìn)行將10-4M濃度的具有如上定義的飽和自由價(jià)的B或B1的前體的甲醇溶液或C＝-TC-Y-H的甲醇溶液分批加入到由2mM脫氧核糖水溶液(含有100mM磷酸鹽緩沖液)與1mM FeII(NH4)2(SO4)2的混合物形成的溶液中；將該溶液在37℃恒溫保存一小時(shí)后，按照順序加入2.8％三氯乙酸水溶液和0.5M硫代巴比土酸等份液，在100℃加熱15分鐘，然后在532nm處讀出該試驗(yàn)溶液的吸收度；通過(guò)下式的方法計(jì)算B或B1的前體或C＝-TC-Y-H引起的對(duì)由FeII產(chǎn)生的殘基抑制的百分率(1-AS/AC)×100其中AS和AC分別為含有試驗(yàn)化合物和鐵鹽的溶液和僅含有鐵鹽的溶液的吸收度值，當(dāng)B或B1或C＝-TC-Y-H的前體(具有如上定義的飽和的自由價(jià))的如上定義的抑制百分率高于或等于50％時(shí)，所述化合物符合試驗(yàn)5；前提是當(dāng)bo＝0和C＝-TC-Y0-(其中Y0的自由價(jià)如上指出為飽和的)，s＝1或2時(shí)，在式(I)化合物中排除A＝R-的藥物，其中R如上定義。
滿足試驗(yàn)4的B或B1的前體化合物(分別為式(I)和(II)中X2或X2a殘基的前體)優(yōu)先選自以下類型的化合物選自以下的氨基酸L-肌肽(式CI)、鵝肌肽(CII)、硒代半胱氨酸(CIII)、硒代蛋氨酸(CIV)、青霉胺(CV)、N-乙?；嗝拱?CVI)、半胱氨酸(CVII)、N-乙酰基半胱氨酸(CVIII)、谷胱甘肽(CIX)或其酯，優(yōu)選乙基酯或異丙基酯 選自以下的羥基酸沒(méi)食子酸(式DI)、阿魏酸(DII)、2，5-二羥基苯甲酸(DIII)、檸檬酸(DIV)、咖啡酸(DV)、氫化咖啡酸(DVI)、對(duì)-香豆酸(DVII)、香草酸(DVIII)、綠原酸(DIX)、犬尿喹啉酸(DX)、丁香酸(DXI) 芳香的和雜環(huán)的一或多元醇，選自以下去甲二氫愈創(chuàng)木酸(EI)、 皮黃酮(EII)、兒茶素(EIII)、山茶酚(EIV)、sulphurethyne(EV)、抗壞血酸(EVI)、異抗壞血酸(EVII)、氫醌(EVIII)、綿子酚(EIX)、還原酸(Ex)、甲氧基氫醌(EXI)、羥基氫醌(EXII)、沒(méi)食子酸丙酯(EXIII)、蔗糖(EXIV)、維生素E(EXV)、維生素A(ExvI)、8-羥基喹啉(quinolol)(EXVII)、3-叔丁基-4-羥基苯甲醚(EXVIII)、3-羥基黃酮(EXIX)、3，5-叔丁基-對(duì)羥基甲苯(EXX)、對(duì)-叔丁基苯酚(EXXI)、噻嗎洛爾(EXXII)、希波酚(EXXIII)、巰基乙酸3，5-二叔丁基-4-羥基芐酯(EXXIV)、4′-羥基丁酰苯胺(EXXV)、愈創(chuàng)木酚(EXXVI)、母育酚(EXXVII)、異丁子香酚(EXXVIII)、丁子香酚(EXXIX)、3，4-亞甲二氧基苯甲醇(EXXX)、別嘌呤醇(EXXXI)、conyferyl醇(EXXXII)、4-羥基乙氧苯基醇(EXXXIII)、香豆醇(EXXXIV)、姜黃素(EXXXV) 芳香胺或雜環(huán)胺，選自以下N，N′-二苯基-對(duì)苯二胺(MI)、乙氧基喹(MII)、硫堇(MIII)、羥基脲(MIV) 至少含有一個(gè)游離酸官能團(tuán)的化合物，選自以下3，3′-硫代二丙酸(NI)、反丁烯二酸(NII)、二羥基順式丁烯二酸(NIII)、硫辛酸(NIV)、乙二胺四乙酸(NV)、膽紅素(NVI)、3，4-亞甲基二氧基苯乙烯酸(NVII)、3，4-亞甲二氧基苯甲酸(NVIII) 按照本領(lǐng)域已知的方法制備上述B或B1的前體物質(zhì)，例如“TheMerck Index，12版(1996)”中所述的方法，該文獻(xiàn)通過(guò)引用結(jié)合到本文中。當(dāng)可以獲得時(shí)，可以使用對(duì)應(yīng)的異構(gòu)體或光學(xué)異構(gòu)體。
符合試驗(yàn)5的B或B1的前體化合物(分別為式(I)和(II)中X2和X2a殘基的前體)優(yōu)先選自以下類型的化合物氨基酸天冬氨酸(PI)、組氨酸(PII)、5-羥基色氨酸(PIII)、4-噻唑烷甲酸(PIV)、2-氧代-4-噻唑烷甲酸(PV) 一或多元醇或硫醇2-硫代尿嘧啶(QI)、2-巰基乙醇(QII)、esperidine(QIII)、司骨化醇(QIV)、1-α-OH維生素D2(QV)、flocalcitriol(QVI)、22-氧雜骨化三醇(QVII)、用維生素A殘基酯化的維生素D3衍生物(QVIII)、式(QIX)的化合物、24，28-亞甲基-1α-羥基維生素D2(QX)、由1α，25-二羥基維生素D2衍生的化合物(QXI)、2-巰基咪唑(QXII) 琥珀酸(RI) 按照先有技術(shù)已知的方法和描述于“The Merck Index，12a Ed.(1996)”(通過(guò)引用結(jié)合到本文中)中的方法制備上述P、Q和R的組B或B1的前體化合物。
按照J(rèn)P 93039261(見(jiàn)C.A.119 117617)所述制備具有視黃酸(QVIII)的維生素D3衍生物；按照EP 562,497制備式(QIX)化合物；按照EP 578,494制備24，28-亞甲基-1α-羥基維生素D2(QX)；按照EP549,318制備二羥基維生素D2的衍生化合物(QXI)。
優(yōu)選滿足試驗(yàn)4的B或B1的前體化合物。
進(jìn)行鑒別B或B1的前體的試驗(yàn)詳述如下試驗(yàn)4是一個(gè)比色分析試驗(yàn)，該試驗(yàn)旨在確定B或B1的前體是否抑制由DPPH(2，2-二苯基-1-苦基偕腙肼)產(chǎn)生殘基(M.S.Nenseter etAl.，Atheroscler.Thromb.15，1338-1344，1995)。制備100uM實(shí)驗(yàn)物質(zhì)的甲醇溶液，并且將所述溶液每種等份液加入到0.1M DPPH的甲醇溶液中。在室溫下、避光貯存該溶液30分鐘后，在517nm波長(zhǎng)讀取它們的吸收度，以及在同樣濃度的相應(yīng)DPPH溶液的吸收度。測(cè)定相對(duì)于與試驗(yàn)溶液濃度相同的DPPH溶液的吸收度的降低。試驗(yàn)化合物在抑制DPPH殘基的形成中的效力用下式表示(1-AS/AC)×100其中AS和AC分別為含有試驗(yàn)化合物和DPPH的溶液與僅含有DPPH的溶液的吸收度值。在所指定的濃度(10-4M)下，當(dāng)抑制由DPPH產(chǎn)生的殘基的百分率(按照上述等式表示的百分率)等于或大于50％時(shí)，B或B1的化合物前體滿足試驗(yàn)4。
如果B或B1的前體不滿足試驗(yàn)4，則進(jìn)行試驗(yàn)5。
試驗(yàn)5為一個(gè)比色分析試驗(yàn)，其中將0.1ml等份的10-4M的試驗(yàn)產(chǎn)物的甲醇溶液加入到含有一種溶液的試管中，所述溶液由0.2ml2mM脫氧核糖、0.4ml(pH7.4)的100mM磷酸鹽緩沖液和0.1ml 1mMFeII(NH4)2(SO4)2在2mM HCl中形成。然后在37℃保存該試管1小時(shí)。然后，在每支試管中順序加入0.5ml 2.8％三氯乙酸水溶液和0.5ml0.1M的硫代巴比土酸水溶液。向一支僅含有上述反應(yīng)物水溶液的試管中加入0.1ml甲醇形成參比空白。封閉所述試管并在100℃的油浴中加熱15分鐘。出現(xiàn)粉紅色，粉紅色的強(qiáng)度與脫氧核糖經(jīng)歷基團(tuán)氧化降解的量是成比例的。在室溫下冷卻該溶液并且相對(duì)于空白在532nm讀取它們的吸收度。通過(guò)下式的方法測(cè)定由B或B1的前體或C＝-TC-Y-H引起的對(duì)由FeII產(chǎn)生殘基的抑制(1-AS/AC)×100其中AS和AC分別為含有試驗(yàn)化合物+鐵鹽的溶液與僅含有鐵鹽的溶液的吸收度值，當(dāng)由B或B1的前體或C＝-TC-Y-H引起的如上定義的殘基產(chǎn)生的抑制百分率等于或大于50％時(shí)，所述化合物滿足試驗(yàn)5。
在式(III)中Y3優(yōu)先選自以下 最優(yōu)選Y3為在2和6位被取代的Y12(吡啶基)。所述鍵合也可以在不對(duì)稱位，如Y12(吡啶基)也可以在2和3位發(fā)生取代；Y1(吡唑)可以被3，5-二取代。
按照式(I)和(II)的本發(fā)明化合物可以轉(zhuǎn)化成為相應(yīng)的鹽。例如形成鹽的一個(gè)方法如下當(dāng)在分子中存在一個(gè)具有足以成鹽的堿性的氮原子時(shí)，它可以在如乙腈、四氫呋喃的有機(jī)溶劑中與等分子量的對(duì)應(yīng)有機(jī)或無(wú)機(jī)酸反應(yīng)。
在本發(fā)明化合物的通式中優(yōu)選存在式(III)的Y或Y′。
有機(jī)酸的實(shí)例有草酸、酒石酸、馬來(lái)酸、琥珀酸、檸檬酸。
無(wú)機(jī)酸的實(shí)例為硝酸、鹽酸、硫酸、磷酸。
在所述甾族化合物前體中優(yōu)選R″＝-CO-CH2OH、-CH(CH3)-CH2-CH2-COOH。
在所述甾族化合物前體中，優(yōu)選那些在3位或在11位具有羥基功能基或在R″中在終端位具有一個(gè)羥基或羧基功能基的甾族化合物前體。
能夠涉及到并且優(yōu)選的A的甾族化合物前體列在下面，按照本領(lǐng)域已知的方法可以獲得。
例如，作為前體和各自的方法，可以涉及到那些描述于1996年第12版The Merck Index中的前體和方法，1996年第12版The MerckIndex，通過(guò)引用結(jié)合到本文中。所述前體(按照Merck命名法)如下，其中H2、H、R、R′、R″具有在本文列出的化合物中所述的含義布地奈德、氫化可的松、阿氯米松、阿爾孕酮、倍氯米松、倍他米松、氯潑尼松、氯倍他索、氯倍他松、氯可托龍、氯潑尼醇、可的松、皮質(zhì)酮、醋噁唑龍、地奈德、去羥米松、地塞米松、二氟拉松、二氟可龍、二氟潑尼酯、氟扎可特、氟氯奈德、氟米松、氟尼縮松、氟輕松、醋酸氟輕松、氟考丁酯、氟可龍、氟米龍、醋酸氟培龍、醋酸氟潑尼定、氟潑尼龍、氟氫縮松、福莫可他、哈西奈德、丙酸鹵倍他索、鹵米松、醋酸鹵潑尼松、氫可他酯、氯替潑諾Etabonate、甲羥松、甲潑尼松、甲潑尼龍、莫米松糠酸酯、帕拉米松、潑尼卡酯、潑尼松龍、25-二乙基氨基乙酸潑尼松龍、潑尼松龍磷酸鈉、潑尼松、強(qiáng)的松龍戊酸酯、潑尼立定、利美索龍、曲安西龍、曲安奈德、21-乙酰氧基孕烯醇酮、可的伐唑、安西奈德、丙酸氟替卡松、馬潑尼酮、替可的松、己曲安奈德、熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸、mitatrienediol、莫克雌醇、炔雌醇、雌二醇、美雌醇。
意外地，在氧化應(yīng)激疾病中，與所述前體甾族化合物相比，式(I)和(II)的本發(fā)明產(chǎn)物具有改良的治療指數(shù)。
為了闡述的目的，上述試驗(yàn)涉及到以下化合物(見(jiàn)該說(shuō)明書附表)試驗(yàn)4(B或B1的前體試驗(yàn)，參閱表III)N-乙酰基半胱氨酸100％抑制由DPPH引起的殘基的產(chǎn)生。因此，它滿足試驗(yàn)4并且可以用作B或B1的前體。
4-噻唑烷甲酸不能抑制由DPPH引起的殘基的產(chǎn)生。因此，它不能滿足試驗(yàn)4，而如果它滿足試驗(yàn)5則它可以用作B或B1的前體。試驗(yàn)5(B和B1的前體或C＝-TC-Y-H前體的試驗(yàn)，參閱表IV)4-噻唑烷甲酸滿足試驗(yàn)5，因?yàn)槠湟种瓢俜致蕿?00％。因此該化合物可以用作式(I)中B或B1的前體。
在所述前體藥物的相同的治療適應(yīng)癥中可以使用本發(fā)明化合物而具有上述優(yōu)點(diǎn)。
按照此后所述的合成方法制備所述的式(I)和(II)化合物。
每種方法的反應(yīng)選擇取決存在于該甾族化合物分子中、在B或B1的前體化合物中(如上所述B或B1可以是二價(jià)的或一價(jià)的)和在C的前體化合物中的反應(yīng)基團(tuán)。
用先有技術(shù)所熟知的方法進(jìn)行所述反應(yīng)，該反應(yīng)可在如前定義的甾族化合物、B或B1的前體化合物和C的前體化合物中獲得鍵合。
當(dāng)該甾族化合物的反應(yīng)官能團(tuán)(如-COOH，-OH)參與共價(jià)鍵(如酯、酰胺、醚型)時(shí)，所述官能團(tuán)可以用先有技術(shù)所熟知的方法恢復(fù)。
以下報(bào)道獲得本發(fā)明化合物的一些合成方案A)式(I)化合物的合成1.通過(guò)所述甾族化合物與B的化合物前體之間的反應(yīng)獲得的化合物的合成1a.當(dāng)所述甾族化合物含有一個(gè)羧基功能基(通式R-COOH)并且使自己連接到該藥物羧基官能團(tuán)上的B的前體化合物的官能團(tuán)具有式XZ時(shí)，X如前定義而Z＝H，進(jìn)行的反應(yīng)取決存在于B的前體化合物中的第二反應(yīng)基團(tuán)(second reactive group)的性質(zhì)。
1a.1當(dāng)存在于B的前體化合物中的第二反應(yīng)基團(tuán)為羧基基團(tuán)時(shí)，合成的常規(guī)方案預(yù)期首先形成R-COHal甾族化合物(Hal＝Cl，Br)的酰基鹵化物，接著與B的前體化合物的HX基團(tuán)反應(yīng)(IA.1)X2、TB如前定義。
當(dāng)在所述的兩個(gè)反應(yīng)化合物中存在其它官能團(tuán)COOH和/或HX時(shí)，必須在反應(yīng)前按照本領(lǐng)域已知的方法將它們保護(hù)起來(lái)；例如按照由Th.W.Greene編輯的出版物“有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán)”HarwardUniversity Press，1980中所述。
按照先有技術(shù)已知的方法制備RCOHal?；u，例如由亞硫酰氯或草酰氯、PIII或PV的鹵化物在惰性溶劑如甲苯、氯仿、DMF等中、在所述反應(yīng)條件下制備。
準(zhǔn)確地說(shuō)，如果B的前體化合物中的HX基團(tuán)為NH2、OH或SH，按照以上所述，首先將式R-COOH的甾族化合物轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的酰基鹵化物RCOHal，然后在有機(jī)堿如三乙胺、吡啶等的存在下、在0-25℃的溫度范圍內(nèi)、在所述反應(yīng)條件下、在惰性溶劑如甲苯、四氫呋喃等中與B的前體化合物的HX基團(tuán)反應(yīng)。
作為前述合成的一種選擇，在如DMF、THF、氯仿等的溶劑中、在-5℃-50℃的溫度范圍內(nèi)、可以用一種激活羧基基團(tuán)的物質(zhì)處理式R-COOH的甾族化合物，所述試劑選自N，N′-羰基二咪唑(CDI)、N-羥基苯并三唑和二環(huán)己基碳化二亞胺，并且使獲得的化合物與B的前體化合物中的反應(yīng)官能團(tuán)原位反應(yīng)獲得式(IA.1)化合物。
1a.2當(dāng)B的前體化合物含有兩個(gè)官能團(tuán)XZ時(shí)，這兩個(gè)官能團(tuán)彼此相同或不同，X如前定義和Z＝H時(shí)，首先用一種如上在1a.1中所述的激活羧基基團(tuán)的物質(zhì)處理具有式R-COOH的甾族化合物，然后在對(duì)兩個(gè)反應(yīng)基團(tuán)HX中的一個(gè)進(jìn)行保護(hù)后，例如通過(guò)與乙?；蚴宥⊙趸驶磻?yīng)進(jìn)行保護(hù)后，與B的前體化合物反應(yīng)，在合成結(jié)束時(shí)恢復(fù)最初的官能團(tuán)。該方案如下其中X、TB、X2如前定義而G為HX官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)。2.硝?；苌锏暮铣?。2a.1當(dāng)在前面1a步驟結(jié)束獲得的化合物具有通式(IA.1)時(shí)，可以將該酸轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的鈉鹽，然后按照已知的先有技術(shù)的方法，例如按照以下合成方案之一制備最終的化合物其中TB、X2、TBI、TC如前定義，R4選自Cl、Br，Y如前定義，X1為沒(méi)有氧原子的Y殘基，R3為Cl、Br、碘、OH。當(dāng)R3＝OH時(shí)，使所述式(1A.1b)化合物鹵化，例如用PBr3、PCl5、SOCl2、PPh3+I2鹵化，然后在如乙腈、四氫呋喃的有機(jī)溶劑中與AgNO3反應(yīng)。如果R3為Cl、Br、碘，所述式(1A.1b)化合物如上所述直接與AgNO3反應(yīng)。其中R5＝OH或NHR1C、R1C、R3而其它符號(hào)如前定義。
當(dāng)X1為直鏈C4烷基時(shí)，使相應(yīng)的酸R-T1-TB-X2-COOH在鹵化試劑如CBr4或N-溴琥珀酰亞胺的存在下、在四氫呋喃中與三苯基膦反應(yīng)，得到其中R3＝Br的化合物(1A.1c)。
2a.2當(dāng)在前面1a步驟結(jié)束獲得的化合物具有通式(IA.2)時(shí)，通過(guò)處理式Hal-X1-COOH的鹵基-羧酸獲得對(duì)應(yīng)的硝?；苌?，其中X1如前定義，如1A.1所述首先用一種活化羧基基團(tuán)的試劑，然后用式(IA.2)化合物處理所述鹵基-羧酸，獲得一種鹵素衍生物，分離該衍生物，然后將其溶解在有機(jī)溶劑中，(參閱段落2a.1)，并且用硝酸銀處理。整個(gè)反應(yīng)方案如下其中TB、X2、TBI、TC、Y如前定義。
或者，可以使用鹵化物Hal-X1-COCl，其中Hal優(yōu)選為溴，使該鹵化物與式(IA.2)化合物反應(yīng)。
1b.當(dāng)該甾族化合物的反應(yīng)官能團(tuán)為-OH(通式R-OH)時(shí)，在B的前體化合物中存在的兩個(gè)官能團(tuán)可以為如下的官能團(tuán)1b.1一個(gè)與甾族化合物中的OH官能團(tuán)反應(yīng)的羧基基團(tuán)，和一個(gè)HX基團(tuán)，B的前體化合物中的后一反應(yīng)基團(tuán)，與所述甾族化合物官能團(tuán)相同或不同。B的前體化合物的結(jié)構(gòu)式為H-X-X2-COOH型，其中X和X2如前定義。按照先有技術(shù)已知的方法保護(hù)B的前體化合物的H-X-官能團(tuán)并如上所述按照以下方案使羧基基團(tuán)發(fā)生反應(yīng)(1B.1)在反應(yīng)結(jié)束時(shí)恢復(fù)B的前體化合物的HX官能團(tuán)。
1b.2當(dāng)B的前體化合物含有兩個(gè)羧基基團(tuán)時(shí)，在前面1a.1所述的條件下，它與等摩爾量的活化羧基基團(tuán)的物質(zhì)反應(yīng)，然后與所述甾族化合物分子的反應(yīng)官能團(tuán)OH反應(yīng)。存在于所述兩種化合物中的HX型的可能的其它反應(yīng)官能團(tuán)必須按照前述方法仔細(xì)地保護(hù)。最后獲得式R-TB-X2-COOH(1B.2)的化合物。
2b.硝?；苌锏暮铣?。
2b.1為了由在1b.1中所述的合成結(jié)束時(shí)獲得的式R-TB-X2-X-H(1B.1)化合物作為起始原料獲得最終的硝?；苌?，使該(1B.1)化合物與式Hal-X1-COOH的鹵代酸反應(yīng)，該鹵代酸已經(jīng)按照上文段落1a.1中所述處理，或與該對(duì)應(yīng)的鹵代酸氯化物反應(yīng)。將產(chǎn)生的化合物溶解在一種如乙腈或四氫呋喃的有機(jī)溶劑中，并與硝酸銀反應(yīng)。
2b.2為了由在1b.2中所述的合成結(jié)束時(shí)獲得的式R-TB-X2-COOH(1B.2)化合物作為起始原料獲得最終的硝?；苌?，將所述酸轉(zhuǎn)變?yōu)閷?duì)應(yīng)的鈉鹽，該鈉鹽與R4-X1-R3化合物反應(yīng)，該化合物已在前面段落2a.1的反應(yīng)A.方案中定義，按照相同的方法獲得其中所述的最終硝?；苌?。作為選擇，當(dāng)X1為直鏈C4烷基時(shí)，在鹵化試劑如CBr4或N-溴琥珀酰亞胺的存在下、在四氫呋喃中，所述酸(1B.2)與三苯基膦反應(yīng)并將產(chǎn)生的化合物溶解在如乙腈、四氫呋喃的有機(jī)溶劑中與硝酸銀反應(yīng)。
2b.3作為按照1b.1和2b.1的合成方法的一種替代方法，這也是可能的，即在第一步B HX-X2-COOH的前體化合物的HX-官能團(tuán)與式Hal-X1-CO-Cl的氫鹵酸的?；确磻?yīng)，其中Hal優(yōu)選為Br，然后使如此獲得的化合物的羧基官能團(tuán)與式R-OH的甾族化合物反應(yīng)。在第三步和最后一步，按照描述于2b.1中的方法用-ONO2取代-Hal基團(tuán)。該反應(yīng)方案如下其中TC、TBI、TB、X2、X1、Y如前定義。
在前面的方案中，作為一種選擇所述硝化可以地在式(2B.3)的酸化合物上進(jìn)行。
在上述方法中，當(dāng)b0＝0所述甾族化合物與式(I)化合物的B前體反應(yīng)不能進(jìn)行，并且在與C的前體化合物反應(yīng)時(shí)，不能直接使用具有其反應(yīng)官能團(tuán)的甾族化合物。B)式(II)化合物的合成1a.當(dāng)所述甾族化合物反應(yīng)官能團(tuán)為羧基基團(tuán)并且B1的前體化合物僅含有一個(gè)X如前定義的式XH的功能性反應(yīng)基團(tuán)時(shí)，首先將所述甾族化合物轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的?；u化物(RCOCl)，或按照1a.1所述用活化羧基基團(tuán)的物質(zhì)處理，然后與氫鹵酸化合物的HX官能團(tuán)反應(yīng)，所述官能團(tuán)與存在于B1的前體化合物中的官能團(tuán)相同或不同，所述鹵代酸具有下式 其中X1′為如上定義的沒(méi)有氧原子的Y′，通過(guò)它連接-NO2基團(tuán)，X和Hal如前定義。
化合物(IIA.1)可以用先有技術(shù)的已知方法獲得。
例如當(dāng)X＝NH時(shí)，可以由相應(yīng)的羥基-氨基酸獲得，通過(guò)相應(yīng)的叔丁氧基羰基衍生物保護(hù)(amini)基團(tuán)并按照在2a.1中鹵化化合物(1A.1b)所述將羥基官能團(tuán)轉(zhuǎn)化為鹵素基團(tuán)。
該化合物中游離的羧基官能團(tuán)產(chǎn)生于與該甾族化合物分子的反應(yīng)，按照前面在1a.1中對(duì)式R-COOH甾族化合物與B的前體化合物之間的反應(yīng)闡述，所述游離羧基官能團(tuán)與存在于B1的前體化合物分子中的官能團(tuán)反應(yīng)。在最后一步，通過(guò)將AgNO3加入到該化合物的有機(jī)溶劑中，用ONO2基團(tuán)取代存在于基團(tuán)X1中的鹵原子(Hal)。該反應(yīng)方案如下，由RCOCl酰鹵示例性原料 當(dāng)所述甾族化合物反應(yīng)官能團(tuán)為一個(gè)OH基團(tuán)并且B1的前體化合物僅含有一個(gè)式XH的功能性反應(yīng)基團(tuán)時(shí)，其中X如前定義，等于或不等于OH，由一種下式的鹵代二酸化合物開(kāi)始進(jìn)行所述合成 其中X1′如上定義，按照在2a.1中鹵化化合物(1A.1b)所述，由對(duì)應(yīng)的羥基二酸制備所述化合物。在前面描述于1a.1的條件下，用等摩爾量的活化羧基基團(tuán)的物質(zhì)處理該鹵代二酸化合物，然后使其與甾族化合物分子中的反應(yīng)官能團(tuán)反應(yīng)。在隨后的步驟中，按照前面第一步所進(jìn)行的，用活化劑處理第二個(gè)羧基官能團(tuán)，并且按照以下方案與B1的前體化合物反應(yīng) 然后按照以上所述用ONO2基團(tuán)取代鹵原子。3.式(I)的亞硝基(s＝1)衍生物的合成。3a.1在一種由水與四氫呋喃的混合物形成的溶劑中、在鹽酸的存在下，使其中R3＝OH的式(1A.1b)化合物與亞硝酸鈉反應(yīng)。在先有技術(shù)中廣泛地闡述了該反應(yīng)。該通用方案如下3a.2如果在A步驟結(jié)束末獲得的化合物具有式(IA.2)，通過(guò)處理X1如前定義的式HO-X1-COOH的羥基酸獲得對(duì)應(yīng)的亞硝基衍生物，按照1a.1所述首先用一種活化羧基基團(tuán)的物質(zhì)處理，然后與1A.2反應(yīng)并且按照3a.1所述用亞硝酸鈉處理獲得的產(chǎn)物。3b.1為了由在1b.1所述的合成結(jié)束時(shí)獲得的式R-TB-X2-XH(1B.1)化合物開(kāi)始獲得亞硝基衍生物，按照3a.2所述使該化合物(1B.1)與羥基酸反應(yīng)。3b.2為了由在1b.2所述的合成結(jié)束時(shí)獲得的式R-TB-X2-COOH(1B.2)化合物獲得亞硝基衍生物，將所述酸轉(zhuǎn)化為鈉鹽并按照前面所述與化合物Hal-X1-OH反應(yīng)，并按照3a.1所述處理獲得的醇4)式(II)亞硝基衍生物的合成4a.1當(dāng)所述甾族化合物含有一個(gè)羧基功能基(通式R-COOH)并且B1的前體化合物僅含有一個(gè)X如前定義的式XH的功能性反應(yīng)基團(tuán)時(shí)，首先將R-COOH轉(zhuǎn)化為對(duì)應(yīng)的酰基鹵化物或按照1a.1所述用一種活化羧基基團(tuán)的物質(zhì)處理，然后與羥基酸化合物的HX官能團(tuán)反應(yīng)，所述官能團(tuán)與存在于B1的前體化合物中的官能團(tuán)相同或不同，所述羥基酸有下式 其中X1′為如上定義的沒(méi)有氧原子的Y′，通過(guò)它連接-NO基團(tuán)，X如前定義。該化合物中游離的羧基官能團(tuán)產(chǎn)生于與所述甾族化合物分子的反應(yīng)，按照前面在1a.1中對(duì)R-COOH酸與B的前體化合物之間反應(yīng)的闡述，所述游離羧基官能團(tuán)與存在于B1的前體化合物分子中的官能團(tuán)反應(yīng)。在最后一步，按照3a.1所述將所述醇轉(zhuǎn)化為亞硝基衍生物。該反應(yīng)方案如下，由RCOCl酰鹵作為示例開(kāi)始合成 4b.當(dāng)所述甾族化合物的反應(yīng)官能團(tuán)為一個(gè)OH基團(tuán)并且B1的前體化合物僅含有通式XH的功能性反應(yīng)基團(tuán)(在HX中，X如前定義，等于或不等于OH)時(shí)，由一種下式的鹵代二酸化合物作為原料開(kāi)始進(jìn)行所述合成 X′1如上定義，在前面描述于1a.1的條件下，用等摩爾量的活化羧基基團(tuán)的物質(zhì)處理所述羥基二酸化合物，然后與所述甾族化合物反應(yīng)官能團(tuán)反應(yīng)。在隨后的步驟中，按照前面第一步所進(jìn)行的，用一種活化試劑處理第二個(gè)羧基官能團(tuán)，并且按照以下方案與B1的前體化合物反應(yīng) 按照3a.1所述使獲得的化合物反應(yīng)。
按照本領(lǐng)域眾所周知的方法將本發(fā)明的目標(biāo)化合物和常規(guī)的賦形劑配制成用于胃腸外、口服使用和局部使用的相應(yīng)的藥用組合物；例如見(jiàn)書籍“Remington’s Pharmaceutical Sciences 15a Ed”。
在這些制劑中，與使用的對(duì)應(yīng)的前體藥物相比，以摩爾計(jì)的所述活性成分的量是相同的，或更低。
每日可以給予的劑量為所述前體藥物的劑量，或任選較低的劑量?？梢栽诒绢I(lǐng)域的出版物中發(fā)現(xiàn)所述日劑量，例如在“Physician’sDesk reference”中。
下列實(shí)施例的目的是闡述本發(fā)明，而不應(yīng)認(rèn)為是限制本發(fā)明。實(shí)施例1制備3-[4-[(3 α，5β，7β)-3，7-二羥基colan-24-oiloxy]-3-甲氧基苯基]-2-丙烯酸4-硝酰氧基(nitroxy)丁酯 其中所述甾族化合物前體為式(XL)的熊去氧膽酸而B的前體為式(DII)的阿魏酸 a)3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸4-溴丁酯的合成向3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-丙酸(10g，51.5mmoles)的THF(400ml)溶液中加入三苯膦(2.7g，10.3mmoles)和四溴化碳(34.16g，10.3mmoles)并且在磁力攪拌下使該溶液在室溫保持48小時(shí)。過(guò)濾該固體，然后在減壓下蒸發(fā)。通過(guò)硅膠層析，用正己烷/乙酸乙酯7/3洗脫，純化獲得的粗產(chǎn)物。獲得9g 3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-丙酸4-溴丁酯。M.p.＝86℃-89℃。b)3-[4-[(3α，5β，7β)-3，7-二羥基colan-24-oiloxy]-3-甲氧基苯基]-2-丙烯酸4-溴丁酯的合成在攪拌下，向溶解于氯仿(25ml)和二甲基乙酰胺(25ml)的(3α，5β，7β)-3，7-二羥基colan-24-oic酸(2.9g，7.38mmoles)溶液中加入3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸4-溴丁酯(2.73g，8.28mmoles)。使該溶液在0℃冷卻，保持?jǐn)嚢?，加入N，N′-二環(huán)己基碳化二亞胺(2g，9.7mmoles)和4-二甲基氨基吡啶(100mg，0.8mmoles)。1小時(shí)后，加熱該混合物至室溫，在24小時(shí)后過(guò)濾沉淀，在減壓下蒸發(fā)溶劑。用乙酸乙酯(150ml)處理該殘余物并用水(3×100ml)洗滌。在用硫酸鈉有機(jī)相脫水(anhydrified)后，蒸發(fā)溶劑。通過(guò)硅膠柱層析，用正己烷/乙酸乙酯1/9洗脫，純化獲得的粗產(chǎn)物。獲得2.5g 3-[4-[(3α，5β，7β)-3，7-二羥基colan-24-oiloxy]-3-甲氧基苯基-2-丙烯酸4-溴丁酯。c)3-[4-[(3α，5β，7β)-3，7-二羥基colan-24-oiloxy]-3-甲氧基苯基]-2-丙烯酸4-硝基丁酯的合成在攪拌下，向3-[4-[(3α，5β，7β)-3，7-二羥基colan-24-oiloxy]-3-甲氧基苯基]-2-丙烯酸4-溴丁酯(2.3g，3.27mmoles)的乙腈(20ml)和四氫呋喃(5ml)溶液中加入硝酸銀(0.84g，4.94mmoles)并在磁力攪拌下加熱該混合物至80℃6小時(shí)。當(dāng)反應(yīng)完成時(shí)過(guò)濾沉淀并蒸發(fā)溶劑。通過(guò)硅膠柱層析，用二氯甲烷/乙酸乙酯3/7洗脫，純化獲得的殘余物。獲得1.5g 3-[4-[(3α，5β，7β)-3，7-二羥基colan-24-oiloxy]-3-甲氧基苯基]-2-丙酸4-硝基丁酯?？偸章蕿?2％。元素分析計(jì)算值％C 66.55％H 8.08％N 2.04％實(shí)測(cè)值％C 66.59％H 8.14％N 1.99％實(shí)施例2制備3-[4-[(3α，5β，7α)-3，7-二羥基colan-24-oiloxy]-3-甲氧基苯基]-2-丙烯酸4-硝基丁酯 其中所述甾族化合物前體為式(XLI)的鵝去氧膽酸而B的前體為式(DII)的阿魏酸 按照實(shí)施例1報(bào)道的方法制備該化合物?？偸章蕿?8％。元素分析計(jì)算值％C 66.55％H 8.08％N 2.04％實(shí)測(cè)值％C 66.64％H 8.13％N 1.94％實(shí)施例3制備(11β)-11，17-二羥基-21[N-乙?；?S-(4-硝酰氧基丁?；?半胱氨酰氧基]-孕甾-1，4-二烯-3，20二酮 其中前體甾族化合物為式(XLII)的潑尼松龍而B的前體為式(CVIII)的N-乙?；腚装彼?a)N-乙?；?S-(4-溴丁酰基)半胱氨酸的合成在室溫下、攪拌4-溴丁酸(5.1g，30.6mmoles)和1，1′-羰基二咪唑(5.61g，34.6mmoles)的氯仿(50ml)溶液1小時(shí)。在攪拌下，向該反應(yīng)混合物中加入溶解于N，N-二甲基甲酰胺(5ml)中的N-乙?；腚装彼?5g，30.6mmoles)和乙醇鈉(50mg)。24小時(shí)后，用1％HCl和鹽水洗滌該溶液，用硫酸鈉使有機(jī)相脫水并在減壓下蒸發(fā)。通過(guò)硅膠柱層析，用乙酸乙酯/氯仿7/3洗脫，純化獲得的粗產(chǎn)物。得到N-乙酰基-S-(4-溴丁?；?半胱氨酸。b)(11β)-11，17-二羥基-21[N-乙?；?S-(4-溴丁?；?半胱氨酰氧基]-孕甾-1，4-二烯-3，20二酮的合成向冷卻至0℃并持續(xù)攪拌的N-乙?；?S-(4-溴丁?；?半胱氨酸(2.7g，8.64mmoles)和(11β)-11，17，21-三羥基孕甾-1，4-二烯-3，20二酮(3.2g，8.86mmoles)的四氫呋喃(100ml)溶液中加入N，N′-二環(huán)己基碳化二亞胺(1.9g，9.2mmoles)和4-二甲基氨基吡啶(100mg，0.8mmoles)。在1小時(shí)后加熱該混合物至室溫，24小時(shí)后過(guò)濾沉淀，減壓下蒸發(fā)溶劑。用乙酸乙酯(150ml)處理該殘余物并用水(3×100ml)洗滌。在用硫酸鈉使有機(jī)相脫水后，蒸發(fā)溶劑。通過(guò)硅膠柱層析，用氯仿/乙酸乙酯3/7洗脫，純化獲得的粗產(chǎn)物。得到0.94g(11β)-11，17-二羥基-21[N-乙酰基-S-(4-溴丁?；?半胱氨酰氧基]-孕甾-1，4-二烯-3，20二酮。c)(11β)-11，17-二羥基-21[N-乙?；?S-(4-硝酰氧基丁酰基)半胱氨酰氧基]-孕甾-1，4-二烯-3，20二酮的合成在攪拌下向(11β)-11，17-二羥基-21[N-乙?；?S-(4-溴丁酰基)半胱氨酰氧基]-孕甾-1，4-二烯-3，20二酮(0.8g，1.28mmoles)的乙腈(10ml)和四氫呋喃(5ml)溶液中加入硝酸銀(0.4g，2.35mmoles)并且在磁力攪拌下加熱該混合物至80℃20小時(shí)。在該反應(yīng)結(jié)束時(shí)過(guò)濾沉淀并蒸發(fā)該溶劑。通過(guò)硅膠柱層析，用二氯甲烷/乙酸乙酯3/7洗脫，純化獲得的粗產(chǎn)物。得到(11β)-11，17-二羥基-21[N-乙?；?S-(4-硝酰氧基丁酰基)半胱氨酰氧基]-孕甾-1，4-二烯-3，20二酮。總產(chǎn)率為12％元素分析計(jì)算值％C 56.59％H 6.33％N 4.40％S 5.04％實(shí)測(cè)值％C 56.63％H 6.38％N 4.36％S 5.01％實(shí)施例4制備(11β)-11，17-二羥基-21[N-乙?；?S-(4-硝酰氧基丁酰基)半胱氨酰氧基]-孕甾-4-烯-3，20二酮 其中前體甾族化合物為式(XLIII)的氫化可的松而B的前體為式(CVIII)的N-乙?；腚装彼?按照實(shí)施例3報(bào)道的方法制備該化合物?？偸章蕿?5％。元素分析計(jì)算值％C 56.37％H 6.78％N 4.39％S 5.02％實(shí)測(cè)值％C 56.39％H 6.81％N 4.31％S 4.93％實(shí)施例5制備(11β，16α)-9-氟-11，17-二羥基-21[N-乙酰基-S-(4-硝酰氧基丁?；?半胱氨酰氧基]-16-甲基孕甾-1，4-烯-3，20二酮 其中前體甾族化合物為式(X-LIV)的地塞米松而B的前體為式(CVIII)的N-乙?；腚装彼?按照實(shí)施例3報(bào)道的方法制備該化合物?？偸章蕿?7％。元素分析計(jì)算值％C 55.68％H 6.18％N 4.19％S 4.79％實(shí)測(cè)值％C 55.72％H 6.22％N 4.15％S 4.75％藥理學(xué)試驗(yàn)實(shí)施例急性毒性通過(guò)給予一組10只體重20g的大鼠單劑量的每種試驗(yàn)化合物評(píng)估急性毒性，以羧甲基纖維素2％w/v的水懸浮液通過(guò)套管口服給藥。
保持觀察所述動(dòng)物14天。即使在給予100mg/kg的劑量之后，該組動(dòng)物沒(méi)有一只出現(xiàn)毒性癥狀。實(shí)施例F1在體內(nèi)模型中用Nw-硝基-L-精氨酸-甲酯(L-NAME)的實(shí)驗(yàn)前體甾族化合物和按照本發(fā)明的對(duì)應(yīng)化合物對(duì)由L-NAME引起的內(nèi)皮機(jī)能障礙的作用。
該試驗(yàn)采用的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ褪歉鶕?jù)J.Clin.Investigation 90，278-281，1992中所述的模型。
通過(guò)測(cè)定由于給予L-NAME引起的肝損害(GPT增加)和血管內(nèi)皮或心血管損害(高血壓)評(píng)估內(nèi)皮機(jī)能障礙。
按照以下所述將動(dòng)物(Long Evans大鼠，平均重量350-450g)分組。接受L-NAME的動(dòng)物組用以400mg/升的濃度溶解于飲用水的所述化合物處理4周。建立以下各組(每組10只動(dòng)物)A)對(duì)照組10組處理只用載體(生理溶液)，20組處理載體+L-NAME，B)藥物處理組30組處理載體+藥物；40組處理載體+藥物+L-NAME。
在本試驗(yàn)中篩選的藥物為氫化可的松、地塞米松、潑尼松龍、鵝去氧膽酸、熊去氧膽酸和按照本發(fā)明的對(duì)應(yīng)衍生物。
在分別用氫化可的松、地塞米松、潑尼松龍及其按照本發(fā)明的對(duì)應(yīng)化合物處理的那些大鼠組中，測(cè)量血壓。
在分別用熊去氧膽酸和鵝去氧膽酸及其按照本發(fā)明的對(duì)應(yīng)化合物處理的那些大鼠組中，測(cè)量GPT。
每天一次通過(guò)腹膜內(nèi)途徑給予每種藥物，持續(xù)4周。
在4周末禁止接近水并在24小時(shí)后處死動(dòng)物。
在最后一次給藥后四小時(shí)測(cè)量血壓。
按照所述通過(guò)L-NAME引起的心血管作用(增加血壓)測(cè)定血管內(nèi)皮的損害。在處死后通過(guò)評(píng)估谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT增加)測(cè)定肝損害。
在表I和II中報(bào)告結(jié)果。％血壓和GPT值與在第1個(gè)對(duì)照組所測(cè)得的對(duì)應(yīng)值有關(guān)。在該組中血壓的平均值為105mmHg。
獲得的結(jié)果顯示所述甾族化合物前體引起肝損害(熊去氧膽酸和鵝去氧膽酸)和動(dòng)脈高血壓(氫化可的松、地塞米松、潑尼松龍)。處理的大鼠的GPT值和血壓值與在缺少L-NAME下用藥物處理的對(duì)應(yīng)組和用L-NAME處理的對(duì)照組相比較高。本發(fā)明的產(chǎn)物與對(duì)應(yīng)的前體相比具有更好的耐受性，甚至在未用L-NAME預(yù)處理的動(dòng)物中也是如此。實(shí)施例F2試驗(yàn)4某些用于制備B或B1的前體的物質(zhì)抑制DPPH產(chǎn)生殘基該方法是以比色分析試驗(yàn)為基礎(chǔ)的，在該試驗(yàn)中使用DPPH(2，2-二苯基-1-苦基偕腙肼)作為形成殘基的化合物(M.S.Nenseter等，Atheroscler.Thromb.15，1338-1344，1995)。
首先制備終濃度為100uM的試驗(yàn)物質(zhì)的甲醇溶液。將這些溶液的每一種的0.1ml加入到等份的1ml 0.1M DPPH的甲醇溶液中并使終體積為1.5ml。避光、在室溫下貯存該溶液30分鐘后，在517nm波長(zhǎng)讀出吸收度。測(cè)定該吸收度相對(duì)于含有同樣濃度DPPH的溶液的吸收度的降低。試驗(yàn)化合物抑制殘基產(chǎn)生的效力，或者說(shuō)抗殘基活性用下式表示(1-AS/AC)×100其中AS和AC分別為含有試驗(yàn)化合物加DPPH的溶液與僅含有DPPH的溶液的吸收度值。
如果化合物抑制DPPH產(chǎn)生殘基的百分率等于或大于50％時(shí)，按照本發(fā)明使用作為B或B1的前體的化合物滿足試驗(yàn)4。
在所述試驗(yàn)中，在表III中報(bào)告以下化合物所獲得的結(jié)果N-乙酰基半胱氨酸、半胱氨酸、阿魏酸、(L)-肌肽、龍膽酸、4-噻唑烷甲酸和2-氧代-4-噻唑烷甲酸。
表III顯示如下N-乙?；腚装彼?、半胱氨酸、阿魏酸、(L)-肌肽、龍膽酸滿足試驗(yàn)4，因?yàn)樗鼈円种朴蒁PPH引起的殘基的產(chǎn)生高于50％，因此在合成按照本發(fā)明的化合物中它們可以用作B化合物的前體。
4-噻唑烷甲酸和2-氧代-4-噻唑烷甲酸不滿足試驗(yàn)4，因?yàn)樗鼈儾荒芤种朴蒁PPH引起的殘基的產(chǎn)生，因此，如果它們滿足試驗(yàn)5，它們可以作為B或B1的前體使用。實(shí)施例F3試驗(yàn)5由用作B、B1或C＝-TC-Y-H前體的化合物引起的對(duì)由FeII產(chǎn)生的殘基的抑制將0.1ml等份的10-4M濃度的4-噻唑烷甲酸和2-氧代-4-噻唑烷甲酸的甲醇溶液加入到含有一種水溶液的試管中，所述水溶液由0.2ml 2mM脫氧核糖、0.4ml pH7.4的磷酸鹽緩沖液100mM和0.1ml1mM FeII(NH4)2(SO4)2在2mM HCl中混合形成。然后在37℃保存該試管1小時(shí)。然后，在每支試管中順序加入0.5ml 2.8％三氯乙酸水溶液和0.5ml 0.1M的硫代巴比土酸水溶液。用0.1ml甲醇代替0.1ml等份上述試驗(yàn)化合物的甲醇溶液形成參比空白。封閉所述試管并在100℃的油浴中加熱15分鐘。出現(xiàn)粉紅色，粉紅色的強(qiáng)度與脫氧核糖經(jīng)歷基團(tuán)氧化降解的量是成比例的。在室溫下冷卻該溶液并且在532nm讀取它們的相對(duì)于空白吸收度。
通過(guò)下式的方法測(cè)定由B或B1或C＝-TC-Y-H的前體(其中游離價(jià)如上定義為飽和的)對(duì)抗由FeII產(chǎn)生的殘基所引起的抑制(1-AS/AC)×100其中AS和AC分別為含有試驗(yàn)化合物+鐵鹽的溶液與僅含有鐵鹽的溶液的吸收度值。
在表IV中報(bào)告該結(jié)果，從結(jié)果顯示兩種酸皆滿足試驗(yàn)5，因?yàn)樗鼈円种朴蒄eII引起的殘基產(chǎn)生的百分率大于50％。因此為了獲得本發(fā)明的化合物，4-噻唑烷甲酸和2-氧代-4-噻唑烷甲酸均可以作為B、B1或C＝-TC-Y-H的前體使用。實(shí)施例F4用3組大鼠(每組10只動(dòng)物)重復(fù)實(shí)施例F1，一個(gè)不接受L-NAME的對(duì)照組和兩個(gè)接受L-NAME的組，并且按照以下通過(guò)腹膜給藥a.對(duì)照組(不接受L-NAME)載體(生理溶液)，b.接受L-NAME的第1組(b組-比較組)同時(shí)在與上面相同的載體中給予25mg/kg(0.064mmoles/kg)的地塞米松+10.4mg/kg(0.064mmoles/kg)的N-乙酰基半胱氨酸，c.接受L-NAME的第2組(c組)在與上面相同的載體中給予42.5mg/kg(0.064mmoles/kg)按照本發(fā)明的地塞米松衍生物(參閱實(shí)施例5)。
在該實(shí)驗(yàn)中，在b組和c組動(dòng)物中測(cè)定血管耐受性即升高血壓(血管損害)并用相對(duì)于對(duì)照組a(假定為100％)的百分率表示。
該結(jié)果在表V中報(bào)告并且該結(jié)果顯示，與本發(fā)明的化合物(c組)相比，給予b組(比較組)的混合物在動(dòng)物中引起更高的血壓增加。實(shí)施例F5用3組大鼠(每組10只動(dòng)物)重復(fù)實(shí)施例F1，一個(gè)不接受L-NAME的對(duì)照組和兩個(gè)接受L-NAME的組，并且按照以下通過(guò)腹膜給藥a.對(duì)照組(不接受L-NAME)載體(生理溶液)，b.接受L-NAME的第1組(d組-比較組)同時(shí)在與上面相同的載體中給予100mg/kg(0.25mmoles/kg)的熊去氧膽酸+49.5mg/kg(0.25mmoles/kg)的阿魏酸，c.接受L-NAME的第2組(e組)在與上面相同的載體中給予175mg/kg(0.25mmoles/kg)按照本發(fā)明的熊去氧膽酸衍生物(參閱實(shí)施例1)。
在該實(shí)驗(yàn)中在d組和e組動(dòng)物中測(cè)定肝的耐受性即GTP升高(肝損害)并用相對(duì)于對(duì)照組a(假定為100％)的百分率表示。
該結(jié)果在表VI中報(bào)告并且該結(jié)果顯示，與本發(fā)明的化合物(e組)相比，給予d組(比較組)的混合物在動(dòng)物中引起更高的GPT增加。
表I
表II
表III
表IV
表V
表VI
權(quán)利要求
1.具有以下通式(I)和(II)的甾族化合物或它們的鹽A-(B)b0-C-N(O)s(I)其中s為一個(gè)等于1或2的整數(shù)，優(yōu)選s＝2；bo＝0或1；A＝R-，其中R為如下定義的甾族藥物殘基，B＝-TB-X2-TBI-其中TB和TBI相同或不同；當(dāng)在前體甾族化合物中的反應(yīng)官能團(tuán)為-OH時(shí)TB＝(CO)；當(dāng)在前體甾族化合物中的反應(yīng)官能團(tuán)為-COOH時(shí)TB＝X；X＝O、S、NR1C，R1C為H或具有1到5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或自由價(jià)；TBI＝(CO)tx或(X)txx，其中tx和txx具有0或1的值；前提是當(dāng)txx＝0時(shí)tx＝1，而當(dāng)txx＝1時(shí)tx＝0；X如上定義；X2為如下定義的二價(jià)橋鍵基團(tuán)；C為二價(jià)-TC-Y-殘基，其中當(dāng)tx＝0時(shí)TC＝(CO)，當(dāng)txx＝0時(shí)TC＝X，X如上定義；Y為 其中nIX為一個(gè)在0和3之間的整數(shù)，優(yōu)選1；nIIX為一個(gè)在1和3之間的整數(shù)，優(yōu)選1；RTIX、RTIX′、RTIIX、RTIIX′，彼此相同或不同，為H或直鏈的或支鏈的C1-C4烷基；RTIX、RTIX′、RTIIX、RTIIX′優(yōu)選為H；Y3為至少含有一個(gè)氮原子的飽和的、不飽和的或芳香的雜環(huán)，所述環(huán)有5或6個(gè)原子；或Y為Y0，選自以下基團(tuán)亞烷氧基基團(tuán)R′O，其中R′為直鏈或可能的支鏈C1-C20，優(yōu)選含有1到6個(gè)碳原子；或?yàn)榫哂?到7個(gè)碳原子的亞環(huán)烷基，在該亞環(huán)烷基環(huán)上的一個(gè)或多個(gè)碳原子可以被雜原子所取代，所述環(huán)可具有R′型側(cè)鏈，R′如上定義；或?yàn)?其中n3為一個(gè)0到3的整數(shù)和n3′為一個(gè)1到3的整數(shù)； 其中n3和n3′具有以上所述的含義； 其中nf′為一個(gè)1到6的整數(shù)，優(yōu)選1到4； 其中R1f＝H、CH3和nf為一個(gè)1到6的整數(shù)，優(yōu)選1到4；優(yōu)選Y＝-Y0＝R′O-，其中R′如上定義；優(yōu)選R′為C1-C6烷基； 其中 其中TCI和TCII相同或不同，當(dāng)在前體甾族化合物中的反應(yīng)官能團(tuán)為-OH時(shí)TCI＝(CO)；當(dāng)在前體甾族化合物中的反應(yīng)官能團(tuán)為-COOH時(shí)TCI＝X；X如上定義；TCII＝(CO)tI或(X)tII，其中tI和tII具有0或1的值；前提是當(dāng)tII＝0時(shí)tI＝1，而當(dāng)tII＝1時(shí)tI＝0；X如上定義；Y′如上述Y的定義，但是具有三個(gè)自由價(jià)而不是兩個(gè)，優(yōu)選選自以下 基團(tuán)，其中R′為C1-C20直鏈或支鏈，優(yōu)選含有1到6個(gè)碳原子，或?yàn)榫哂?到7個(gè)碳原子、任選取代的飽和環(huán)；或?yàn)?其中n3為一個(gè)0到3的整數(shù)和n3′為一個(gè)1到3的整數(shù)； 其中n3和n3′具有以上所述的含義； 其中所述碳原子之一的一個(gè)氫原子被自由價(jià)所取代； 其中nf′為一個(gè)1到6的整數(shù)，優(yōu)選1到4；其中所述碳原子之一的一個(gè)氫原子被自由價(jià)所取代； 其中所述碳原子之一的一個(gè)氫原子被自由價(jià)所取代； 其中R1f＝H、CH3而nf為一個(gè)1到6的整數(shù)，優(yōu)選1到4；其中所述碳原子之一的一個(gè)氫原子被自由價(jià)所取代；優(yōu)選 其中R′為直鏈或支鏈C2-C4，在Y′中與-N(O)S基團(tuán)共價(jià)連接的氧原子位于C1式指出的自由鍵的末端上；或如在式(I)中定義Y′＝Y(jié)0，而且具有三個(gè)自由價(jià)而不是2個(gè)；B1＝-TBII-X2a其中X2a為一個(gè)單價(jià)基團(tuán)，當(dāng)tI＝0時(shí)TBII＝(CO)，當(dāng)tII＝0時(shí)TBII＝X，X如上定義；X2，二價(jià)基團(tuán)，為滿足試驗(yàn)4或試驗(yàn)5的對(duì)應(yīng)的B前體-TB-X2-TBI，在前體中TB和TBI自由價(jià)各為OZ、Z或 所飽和，ZI和ZII相同或不相同并且具有如上定義的Z值，這取決于是否TB和/或TBI＝CO或X，與t、t′、tx和txx的值有關(guān)；當(dāng)b0＝0時(shí)C的前體為-TC-Y-H類型，其中TC自由價(jià)為OZ、Z或 所飽和，ZI和ZII如上定義，滿足試驗(yàn)5；X2a單價(jià)基團(tuán)為這樣的基團(tuán)，以使B1-TBII-X2a的對(duì)應(yīng)前體滿足試驗(yàn)4或試驗(yàn)5，前體中TBII自由價(jià)為OZ、Z或 所飽和，ZI和ZII相同或不相同并且具有如上定義的Z值，這取決于是否TBII＝CO或X，與tI和tII的值有關(guān)；A＝R-具有以下結(jié)構(gòu) 其中在通式中提及的CH基團(tuán)的氫或CH2基團(tuán)的兩個(gè)氫的取代中，可能存在以下取代基在1-2位可以有一個(gè)雙鍵；在2-3位可以有以下取代基 在2位可以有Cl、Br；在3位可以有CO、-O-CH2-CH2-Cl、OH；在3-4位可以有一個(gè)雙鍵；在4-5位可以有一個(gè)雙鍵；在5-6位可以有一個(gè)雙鍵；在5-10位可以有一個(gè)雙鍵；在6位可以有Cl、F、CH3、-CHO；在7位可以有Cl、OH；在9位可以有Cl、F；在11位可以有OH、CO、Cl、CH3；在16位可以有CH3、OH、＝CH2；在17位可以有OH、CH3、OCO(O)ua(CH2)vaCH3、C≡CH或 其中ua為一個(gè)等于0或1的整數(shù)，va為一個(gè)0到4的整數(shù)；在16-17位可以有以下基團(tuán) R和R′，彼此相同或不同，可以為氫或1到4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈的烷基，優(yōu)選R＝R′＝CH3；R″為-(CO-L)t-(L)t2-(X0I)t1-其中t、t1和t2為彼此相同或不同的整數(shù)，等于0或1，前提是當(dāng)t＝0，時(shí)t2＝1和當(dāng)t＝1時(shí)t2＝0，并且當(dāng)A不含有-OH基團(tuán)時(shí)，t和t1，或t2和t1不能同時(shí)等于0；所述二價(jià)橋鍵基團(tuán)L選自(CR4R5)na(O)nb(CR4R5)n′a(CO)n′b(O)n″b(CO)n_b(CR4R5)n″a其中na、n′a和n″a彼此相等或不等，為等于0到6的整數(shù)，優(yōu)選1-3；nb、n′b、n″b和n_b彼此相等或不等，為等于0或1的整數(shù)；R4和R5彼此相等或不等，選自H、1到5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，優(yōu)選1到3個(gè)；X0I為如上定義的X；而R1C為1到10個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，或等于X2I其中X2I等于OH、CH3、Cl、N(-CH2-CH3)2、SCH2F、SH或 在試驗(yàn)4中，具有如上定義的飽和自由價(jià)的B或B1前體必須滿足該試驗(yàn)，所述試驗(yàn)如下這是一個(gè)分析測(cè)定，將10-4M濃度的B或B1的前體的甲醇溶液分批加入到DPPH(2，2-二苯基-1-苦基偕腙肼-自由基)的甲醇溶液中進(jìn)行所述測(cè)定；避光、在室溫下保存該溶液30分鐘后，在517nm波長(zhǎng)讀出試驗(yàn)溶液和僅含有與試驗(yàn)溶液相同量的DPPH的溶液的吸收度；然后通過(guò)下式的方法計(jì)算由所述前體引起的對(duì)DPPH產(chǎn)生殘基的抑制百分率(1-AS/AC)×100其中AS和AC分別為含有試驗(yàn)化合物+DPPH的溶液和僅含有DPPH的溶液的吸收度的值；如果如上定義的抑制百分率高于或等于50％，B或B1前體化合物滿足試驗(yàn)4；其中試驗(yàn)5為一個(gè)分析測(cè)定，通過(guò)以下步驟進(jìn)行將10-4M濃度的具有如上定義的飽和自由價(jià)的B或B1的前體的甲醇溶液或C＝-TC-Y-H的甲醇溶液等份加入到由2mM脫氧核糖水溶液與1mMFeII(NH4)2(SO4)2鹽混合形成的溶液中，所述水為含有100mM磷酸鹽緩沖液的水；在37℃將該溶液恒溫保持一小時(shí)后，按照順序加入等份的2.8％三氯乙酸水溶液和0.5M硫代巴比土酸，在100加熱15分鐘，然后在532nm讀出該試驗(yàn)溶液的吸收度；通過(guò)下式的方法計(jì)算B或B1的前體或C＝-TC-Y-H引起的對(duì)由FeII產(chǎn)生殘基的抑制百分率(1-AS/AC)×100其中AS和AC分別為含有試驗(yàn)化合物和鐵鹽的溶液和僅含有鐵鹽的溶液的吸收度的值，當(dāng)B或B1的前體或C＝-TC-Y-H的如上定義的抑制百分率高于或等于50％時(shí)，所述化合物滿足試驗(yàn)5；前提是在式(I)化合物中，當(dāng)bo＝0和C＝-TC-Y0-，其中Y0的自由價(jià)如上指出是飽和的，s＝1或2時(shí)，排除具有A＝R-的藥物。
2.按照權(quán)利要求1的化合物，其中滿足試驗(yàn)4的B或B1的前體化合物選自以下類型選自以下的氨基酸L-肌肽(式CI)、鵝肌肽(CII)、硒代半胱氨酸(CIII)、硒代蛋氨酸(CIV)、青霉胺(CV)、N-乙?；嗝拱?CVI)、半胱氨酸(CVII)、N-乙?；腚装彼?CVIII)、谷胱甘肽(CIX)或其酯，優(yōu)選乙基酯或異丙基酯 選自以下的羥基酸沒(méi)食子酸(式DI)、阿魏酸(DII)、2，5-二羥基苯甲酸(DIII)、檸檬酸(DIV)、咖啡酸(DV)、氫化咖啡酸(DVI)、對(duì)-香豆酸(DVII)、香草酸(DVIII)、綠原酸(DIX)、犬尿喹啉酸(DX)、丁香酸(DXI) 選自以下的芳香的和雜環(huán)的一或多元醇去甲二氫愈創(chuàng)木酸(EI)、 皮黃酮(EII)、兒茶素(EIII)、山茶酚(EIV)、sulphurethyne(EV)、抗壞血酸(EVI)、異抗壞血酸(EVII)、氫醌(EVIII)、綿子酚(EIX)、還原酸(EX)、甲氧基氫醌(EXI)、羥基氫醌(EXII)、沒(méi)食子酸丙酯(EXIII)、蔗糖(EXIV)、維生素E(EXV)、維生素A(EXVI)、8-羥基喹啉醇(EXVII)、3-叔丁基-4-羥基苯甲醚(EXVIII)、3-羥基黃酮(EXIX)、3，5-叔丁基-對(duì)羥基甲苯(EXX)、對(duì)-叔丁基苯酚(EXXI)、噻嗎洛爾(EXXII)、希波酚(EXXIII)、巰基乙酸3，5-二叔丁基-4-羥基芐酯(EXXIV)、4′-羥基丁酰苯胺(EXXV)、愈創(chuàng)木酚(EXXVI)、母育酚(EXXVII)、異丁子香酚(EXXVIII)、丁子香酚(EXXIX)、3，4-亞甲二氧基苯甲醇(EXXX)、別嘌呤醇(EXXXI)、conyferyl醇(EXXXII)、4-羥基乙氧苯基醇(EXXXIII)、對(duì)-香豆醇(EXXXIV)、姜黃素(EXXXV) 選自以下的芳香胺或雜環(huán)胺N，N′-二苯基-對(duì)苯二胺(MI)、乙氧基喹(MII)、硫堇(MIII)、羥基脲(MIV) 至少含有一個(gè)游離酸官能團(tuán)的化合物，選自以下3，3′-硫代二丙酸(NI)、反丁烯二酸(NII)、二羥基順式丁烯二酸(NIII)、硫辛酸(NIV)、乙二胺四乙酸(NV)、膽紅素(NVI)、3，4-亞甲基二氧基苯乙烯酸(NVII)、3，4-亞甲二氧基苯甲酸(NVIII)
3.按照權(quán)利要求1的化合物，其中滿足試驗(yàn)5的B或B1前體化合物選自以下氨基酸天冬氨酸(PI)、組氨酸(PII)、5-羥基色氨酸(PIII)、4-噻唑烷甲酸(PIV)、2-氧代-4-噻唑烷甲酸(PV) 一或多元醇或硫醇2-硫代尿嘧啶(QI)、2-巰基乙醇(QII)、esperidine(QIII)、司骨化醇(QIV)、1-α-OH維生素D2(QV)、flocalcitriol(QVI)、22-氧雜骨化三醇(QVII)、用維生素A殘基酯化的維生素D3衍生物(QVIII)、式(QIX)的化合物、24，28-亞甲基-1α-羥基維生素D2(QX)、由1α，25-二羥基維生素D2衍生的化合物(QXI)、2-巰基咪唑(QXII) 琥珀酸(RI)
4.按照權(quán)利要求1-2的化合物，其中B或B1的前體為那些滿足試驗(yàn)4的化合物。
5.按照權(quán)利要求1-4的化合物，其中在式(III)中的Y3選自以下
6.按照權(quán)利要求5的化合物，其中Y3為在2位或6位被取代的Y12(吡啶基)。
7.按照權(quán)利要求1-6的化合物，其中在前體甾族化合物中R″＝-CO-CH2OH，-CH(CH3)-CH2-CH2-COOH。
8.按照權(quán)利要求1-7的化合物，其中在前體甾族化合物中所述羥基官能團(tuán)在3位和/或在11位，和/或在R″中在末位有一個(gè)羥基或羧基官能團(tuán)。
9.按照權(quán)利要求1-8的化合物，其中所述前體甾族化合物選自以下布地奈德、氫化可的松、阿氯米松、阿爾孕酮、倍氯米松、倍他米松、氯潑尼松、氯倍他索、氯倍他松、氯可托龍、氯潑尼醇、可的松、皮質(zhì)酮、醋噁唑龍、地奈德、去羥米松、地塞米松、二氟拉松、二氟可龍、二氟潑尼酯、氟扎可特、氟氯奈德、氟米松、氟尼縮松、氟輕松、醋酸氟輕松、氟考丁酯、氟可龍、氟米龍、醋酸氟培龍、醋酸氟潑尼定、氟潑尼龍、氟氫縮松、福莫可他、哈西奈德、丙酸鹵倍他索、鹵米松、醋酸鹵潑尼松、氫可他酯、氯替潑諾Etabonate、甲羥松、甲潑尼松、甲潑尼龍、糠酸莫米松、帕拉米松、潑尼卡酯、潑尼松龍、25-二乙基氨基乙酸潑尼松龍、潑尼松龍磷酸鈉、潑尼松、強(qiáng)的松龍戊酸酯、潑尼立定、利美索龍、曲安西龍、曲安奈德、21-乙酰氧基孕烯醇酮、可的伐唑、安西奈德、丙酸氟替卡松、馬潑尼酮、替可的松、己曲安奈德、熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸、mitatrienediol、莫克雌醇、炔雌醇、雌二醇、美雌醇。
10.用作藥物的按照權(quán)利要求1-9的化合物或鹽，或它們的組合物；前提是在式(I)化合物中，當(dāng)bo＝0和C＝-TC-Y0-，其中Y0的自由價(jià)如上指出是飽和的，s＝1或2時(shí)，排除A＝R-的藥物。
11.按照權(quán)利要求1-9的化合物或鹽，或它們的組合物在制備用于治療氧化應(yīng)急激狀態(tài)的藥物中的用途；在式(I)化合物中，當(dāng)bo＝0而C＝-TC-Y0，其中Y0的自由價(jià)如上指出是飽和的，s＝1或2時(shí)，所述藥物可以為A＝R-。
12.含有作為活性成分的權(quán)利要求1-9的化合物或其鹽的藥物制劑。
全文摘要
具有通式(I)和(II)的甾族化合物及其鹽，其中s為一個(gè)等于1或2的整數(shù)，優(yōu)選s＝2；b0＝0或1；A＝R－，其中R為一種甾族藥物的殘基，C和C
文檔編號(hào)C07J41/00GK1420891SQ00808774
公開(kāi)日2003年5月28日 申請(qǐng)日期2000年4月11日 優(yōu)先權(quán)日1999年4月13日
發(fā)明者P·德索爾達(dá)托 申請(qǐng)人:尼科克斯公司