專利名稱：一種水稻鋅指蛋白基因及其編碼的蛋白質(zhì)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明一種水稻鋅指蛋白基因及其編碼的蛋白質(zhì)，屬于基因工程領(lǐng)域，具體地講涉及植物穗發(fā)育以及逆境脅迫應(yīng)答的鋅指轉(zhuǎn)錄因子。
背景技術(shù)：
C2H2型鋅指蛋白廣泛地存在于各種植物中，參與植物的生長發(fā)育與環(huán)境脅迫應(yīng)答(黃驥等，2004)。在矮牽牛和擬南芥中已經(jīng)先后克隆了近30個(gè)C2H2型鋅指蛋白基因，研究結(jié)果表明其主要參與了植物在生殖生長階段的發(fā)育過程，或參與高鹽、低溫、干旱等非生物脅迫反應(yīng)。大豆此類鋅指蛋白SCOF-1的研究表明，在擬南芥和煙草中過量表達(dá)SCOF-1顯著增強(qiáng)了冷誘導(dǎo)蛋白基因的表達(dá)，從而提高了植物的耐冷性(Kim et al，2001)。最近的研究表明擬南芥C2H2型鋅指蛋白可能通過抑制植物的生長和光合作用而節(jié)約能量用于抵御各類脅迫。因此植物C2H2型鋅指蛋白對于改良植物對非生物脅迫的抗性具有重要的應(yīng)用價(jià)值。
雖然小麥中首先報(bào)道了單子葉植物C2H2型鋅指蛋白WZF1，但是尚未發(fā)現(xiàn)WZF1與脅迫應(yīng)答的關(guān)系。水稻是重要的糧食作物以及單子葉植物的模式植物，迄今為止尚無關(guān)于水稻C2H2型鋅指蛋白基因的功能描述。本發(fā)明從水稻中鑒定了單子葉植物第1個(gè)與非生物脅迫有關(guān)的C2H2型鋅指蛋白OsZFP18，并研究了其與鹽脅迫的關(guān)系，提出了利用OsZFP18基因進(jìn)行水稻耐鹽性遺傳改良的方法。

發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問題本發(fā)明的目的在于公開一種單子葉植物C2H2型鋅指蛋白基因及其編碼的蛋白質(zhì)，該基因可作為目的基因?qū)胫参?，提高植物耐鹽性，以進(jìn)行植物品種改良。所編碼的蛋白質(zhì)具有耐鹽功能。
技術(shù)方案本發(fā)明一種水稻鋅指蛋白基因，它來自水稻(Oryza sativa)，命名為OsZFP18基因，核苷酸序列SEQ IDNO.11 gctcgtcatt aagagcgaaa gaaagttact tggaattctt tggtttgttg taatgacaat61 cacgagagaa gaagcggaga gcaaggagat ggagagccta cgggtgcacg ccagcgcgct121 gctctcgctg tcgtcgcctg cagcgtcggc gtcgcagccg acgtcgtcgt cgtcgacgac
181 ggagggggtg ttcgagtgca agacgtgcag caagcggttc ccgtcgttcc aggcgctggg241 cgggcaccgg acgagccaca cgcggctgca ggcgaagctg ctgagcgacc ccgccgcggc301 ggcggcggcg gcggccgaga gggacagggc acgcgtccac gagtgcgccg tgtgcggggt361 cgagttctcc atggggcagg cgctcggcgg ccacatgcgc cggcacaggg gcgagacggg421 cacgacgacc gtcgtgctcg cggacgccga cgactcgggc ggcgccaccg tgccgcagcc481 gccggagccc atgccggacc tgaactaccc gccgctggag gacgccggcg acggctcgga541 gcctgagtta cttaaccttc ttgtataagt tgcatcgata gatatacatg tgaattgaat601 tggcgtctgt acatagatat ggtggatgga ttctttacca aatttgatcg aaaaaaagaa661 ctaaattttg gagcgtgatg atcatagcat gtaagttgta acaaatgatt gttaactgta721 agataggaat tctattcatt tgttctcttc tgtacaaaat tacaaatagg ttgattaatt781 agttggtcgg ttgtggttga ttctttgtaa aataccaatt tactagtata aatatactga841 cagcttattg tttcaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaa。
上述一種水稻鋅指蛋白基因編碼含蛋白質(zhì)，它來自水稻(Oryza sativa)，命名為OsZFP18蛋白質(zhì)，它具有如下所示的氨基酸序列SEQ ID NO.2MTITREEAESKEMESLRVHASALLSLSSPAASASQPTSSSSTTEGVFECKTCSKRFPSFQALGGHRTSHTRLQAKLLSDPAAAAAAAAERDRARVHECAVCGVEFSMGQALGGHMRRHRGETGTTTVVLADADDSGGATVPQPPEPMPDLNYPPLEDAGDGSEPELLNLLV。
有益效果1、本發(fā)明公開了一種水稻C2H2型鋅指蛋白基因(OsZFP18基因)及其所編碼的蛋白質(zhì)。該基因來自水稻(Oryza sativa L.)，可作為目的基因?qū)胫参?，提高植物耐鹽性，以進(jìn)行植物品種改良，所編碼的蛋白質(zhì)具有耐鹽功能。
2、本發(fā)明人提供的OsZFP18基因功能是參予植物的鹽脅迫應(yīng)答反應(yīng)，mRNA表達(dá)分析表明OsZFP18基因在高鹽(140mM NaCl)誘導(dǎo)條件下表達(dá)增強(qiáng)。
3、本發(fā)明的OsZFP18基因來自水稻，具有適合于水稻等單子葉植物表達(dá)的優(yōu)化密碼子，其基因工程受體植物除了雙子葉植物，如大豆、棉花、煙草等之外更加適合于水稻、玉米、小麥等單子葉植物。
4、利用本發(fā)明OsZFP18基因作為目的基因構(gòu)建植物表達(dá)載體，其中可用任何一種啟動(dòng)子例如花椰菜花葉病毒(CAMV)35S啟動(dòng)子、Ubiquitin啟動(dòng)子或其它啟動(dòng)子，該表達(dá)載體中必要時(shí)可包括增強(qiáng)子，不論是轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子或翻譯增強(qiáng)子。為了簡化轉(zhuǎn)化細(xì)胞的鑒定可使用選擇性標(biāo)記包括對抗生素抗性的酶，也可利用顏色變化(例如B-葡糖醛酸糖苷酶GUS)或發(fā)光(例如熒光素酶)來識別的化合物的酶類，也可用無標(biāo)記選擇。所用的表達(dá)載體可使用Ti質(zhì)粒，Ri質(zhì)粒，植物病毒載體等。轉(zhuǎn)化方法可用經(jīng)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法、基因槍法、花粉管通道法或其它方法轉(zhuǎn)化植物。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1水稻鋅指蛋白基因OsZFP18的分子克隆選用水稻品種“韭菜青”(太湖流域粳稻地方品種，為強(qiáng)耐鹽品種)，待水稻幼苗長至3葉期后，用140mM NaCl進(jìn)行處理，12小時(shí)后立即取葉片置于液氮中冷凍保存。取部分葉片，用研缽研碎，加入盛有裂解液的1.5mLEP管，充分振蕩后，再移入玻璃勻漿器內(nèi)。勻漿后移至1.5mL EP管中，抽提總RNA(TRIzolReagents，Invitrogen，USA)。用甲醛變性膠電泳鑒定總RNA質(zhì)量，然后在分光光度計(jì)上測定RNA含量。以來自于水稻鹽誘導(dǎo)cDNA文庫的EST序列S121搜索GenBank的水稻基因組數(shù)據(jù)庫，經(jīng)過EST比較和序列拼接得到全長883bp的水稻C2H2型鋅指蛋白基因的序列，根據(jù)此序列分別設(shè)計(jì)兩端引物ZF1GCTCGTCATTAAGAGCGAAAG，ZF2GAATCAACCACAACCGAC CA，采用RT-PCR方法進(jìn)行cDNA克隆，PCR反應(yīng)程序?yàn)?4℃預(yù)變性4分鐘，94℃變性30s，56℃復(fù)性1min，72℃延伸2min，33個(gè)循環(huán)后，72℃10min。最終將PCR產(chǎn)物進(jìn)行克隆、測序獲得了水稻C2H2型鋅指蛋白基因OsZFP18的cDNA序列。
BLAST的結(jié)果及3D-PSSM數(shù)據(jù)庫分析結(jié)果證明從水稻中新得到的基因確為一個(gè)編碼C2H2型鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子基因。本發(fā)明的水稻鋅指蛋白基因OsZFP18為水稻中的首次報(bào)道，同時(shí)也是單子葉植物中首次發(fā)現(xiàn)的與植物非生物脅迫有關(guān)的C2H2型鋅指蛋白基因，有望應(yīng)用于植物尤其是單子葉植物的抗逆遺傳改良。
實(shí)施例2OsZFP18的序列信息與特性分析本發(fā)明的OsZFP18全長883bp，其開放閱讀框位于53-568處。DNAssist軟件分析表明OsZFP18共編碼171個(gè)氨基酸，其中含有2個(gè)典型的Cys2/His2型鋅指結(jié)構(gòu)，Cys-Xaa-Cys和His-Xaaa-His區(qū)之間由12個(gè)主要為酸性或疏水性氨基酸組成的區(qū)段隔開，配位結(jié)構(gòu)加上Phe和Leu所形成的疏水核心，確定了鋅指的基本機(jī)構(gòu)和形狀。2個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)都包含QALGGH的保守結(jié)構(gòu)。經(jīng)Blast程序比較發(fā)現(xiàn)，OsZFP18的編碼蛋白與大豆鋅指蛋白SCOF-1、小麥WZF1、擬南芥STZ的氨基酸相似性分別為33％、36％、30％。使用Compute pI/MW軟件估算其pI＝5.19，MW＝17.9KDa。以O(shè)sZFP18搜索GenBank中現(xiàn)有水稻基因組(包括粳稻和秈稻)數(shù)據(jù)庫，發(fā)現(xiàn)OsZFP18為單拷貝基因。
實(shí)施例3
OsZFP18的表達(dá)研究用實(shí)例1中設(shè)計(jì)的OsZFP18兩端引物進(jìn)行半定量RT-PCR分析水稻幼苗地上部與地下部的表達(dá)，以水稻actin基因Rac1(McElroy et al，1990)的表達(dá)為內(nèi)參，結(jié)果表明，水稻幼苗OsZFP18的表達(dá)在140mM NaCl處理下6h顯著增強(qiáng)，24h時(shí)表達(dá)達(dá)最高，灰度掃描分析表明其表達(dá)量約為對照的10倍。
實(shí)驗(yàn)例4正反義OsZFP18轉(zhuǎn)基因水稻植株的獲得根據(jù)實(shí)施例1得到的OsZFP18的全長序列，設(shè)計(jì)擴(kuò)增出完整編碼閱讀框的引物，并在上游和下游引物上分別引入限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)(這可視選用的載體而定)，以便構(gòu)建表達(dá)載體。以實(shí)施例1中獲得的擴(kuò)增產(chǎn)物為模板，經(jīng)PCR擴(kuò)增后，將OsZFP18的cDNA克隆至中間載體(如pGEM-T，Promega)，進(jìn)一步克隆到雙元表達(dá)載體(如改進(jìn)的pCAMBIA1301)，在保證閱讀框架正確的前提下鑒定好的表達(dá)載體，再將其轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌中，轉(zhuǎn)入水稻品種中花11號。待獲得的轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行PCR，Southern雜交以及RT-PCR驗(yàn)證后進(jìn)行植物的耐鹽性評價(jià)。即將轉(zhuǎn)基因植株的T2代和對照植株進(jìn)行180mM NaCl的持續(xù)處理，觀察他們的生長表現(xiàn)，結(jié)果表明轉(zhuǎn)基因水稻在1.2％NaCl處理3天后的表現(xiàn)明顯優(yōu)于對照組。同時(shí)轉(zhuǎn)基因植株在表型上也與野生型有所不同，正義轉(zhuǎn)基因植株的穗明顯不同于野生型，穗形變大，但實(shí)粒數(shù)基本不變，收獲的稻粒較野生型明顯更寬更短；而反義OsZFP18的轉(zhuǎn)基因植株則明顯更矮。
上述實(shí)施例表明本發(fā)明中克隆的水稻鋅指蛋白基因OsZFP18，為水稻中首次克隆的水稻C2H2型鋅指蛋白基因，此類基因在單子葉植物的功能迄今未經(jīng)描述。實(shí)驗(yàn)例3、4表明該基因與植物的鹽脅迫密切相關(guān)。此類基因由于來源于單子葉植物，具有單子葉植物優(yōu)化的密碼子，與雙子葉植物來源的鋅指蛋白基因相比，更加適合于水稻、玉米、小麥等單子葉作物的抗逆性遺傳改良。
本發(fā)明人從單子葉植物水稻(Oryza sativa L.)中克隆了一個(gè)cDNA，它編碼C2H2型鋅指蛋白，命名為OsZFP18。mRNA表達(dá)分析表明OsZFP18在檢測的水稻根、葉片、莖以及幼穗中表達(dá)，而且140mMNaCl的處理增強(qiáng)了OsZFP18的表達(dá)。轉(zhuǎn)基因研究表明，將OsZFP18基因轉(zhuǎn)入水稻，轉(zhuǎn)基因植株在正常條件下的長勢類似對照，但其穗形發(fā)生了改變，而且基因過量表達(dá)的轉(zhuǎn)基因植株比對照有明顯高的耐鹽性。同時(shí)OsZFP18的反義轉(zhuǎn)基因則較野生型明顯變矮。該基因可作為目的基因?qū)胫参铮岣咧参锬望}性，以進(jìn)行植物品種改良。在本發(fā)明的方法中，可利用OsZFP18基因作為目的基因構(gòu)建植物表達(dá)載體，其中可用任何一種啟動(dòng)子例如花椰菜花葉病毒(CAMV)35S啟動(dòng)子、Ubiquitin啟動(dòng)子或其它啟動(dòng)子，該表達(dá)載體中必要時(shí)可包括增強(qiáng)子，不論是轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)子或翻譯增強(qiáng)子。為了簡化轉(zhuǎn)化細(xì)胞的鑒定可使用選擇性標(biāo)記包括對抗生素抗性的酶，也可利用顏色變化(例如B-葡糖醛酸糖苷酶GUS)或發(fā)光(例如熒光素酶)來識別的化合物的酶類，也可用無標(biāo)記選擇。所用的表達(dá)載體可使用Ti質(zhì)粒，Ri質(zhì)粒，植物病毒載體等。轉(zhuǎn)化方法可用經(jīng)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法、基因槍法、花粉管通道法或其它方法轉(zhuǎn)化植物。
本發(fā)明涉及的序列及記號分列如下(1)SEQ ID NO.1的信息(i)序列特征(A)長度883bp(B)類型核苷酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型核苷酸(iii)序列描述SEQ ID NO.1(2)SEQ ID NO.2的信息(i)序列特征(A)長度171 a.a(B)類型氨基酸(C)鏈性單鏈(D)拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)線性(ii)分子類型蛋白質(zhì)(iii)序列描述SEQ ID NO.2序列表<110>南京農(nóng)業(yè)大學(xué)<120>一種水稻鋅指蛋白基因及其編碼的蛋白質(zhì)<141>2004-12-30<160>3<170>PatentIn version 3.1<210>SEQ ID NO.1
<211>883<212>DNA<213>水稻[Oryza sativa]<221>CDS<222>(53)..(568)<221>3’UTR<222>(569)..(883)<221>mRNA<222>(1)..(883)<221>polyA_site<222>(855)..(883)<221>5’UTR<222>(1)..(52)<400>1gctcgtcatt aagagcgaaa gaaagttact tggaattctt tggtttgttg ta atg aca 58Met Thr1atc acg aga gaa gaa gcg gag agc aag gag atg gag agc cta cgg gtg 106Ile Thr Arg Glu Glu Ala Glu Ser Lys Glu Met Glu Ser Leu Arg Val5 10 15cac gcc agc gcg ctg ctc tcg ctg tcg tcg cct gca gcg tcg gcg tcg 154His Ala Ser Ala Leu Leu Ser Leu Ser Ser Pro Ala Ala Ser Ala Ser20 25 30cag ccg acg tcg tcg tcg tcg acg acg gag ggg gtg ttc gag tgc aag 202Gln Pro Thr Ser Ser Ser Ser Thr Thr Glu Gly Val Phe Glu Cys Lys35 40 45 50acg tgc agc aag cgg ttc ccg tcg ttc cag gcg ctg ggc ggg cac cgg 250Thr Cys Ser Lys Arg Phe Pro Ser Phe Gln Ala Leu Gly Gly His Arg55 60 65acg agc cac acg cgg ctg cag gcg aag ctg ctg agc gac ccc gcc gcg 298
Thr Ser His Thr Arg Leu Gln Ala Lys Leu Leu Ser Asp Pro Ala Ala70 75 80gcg gcg gcg gcg gcg gcc gag agg gac agg gca cgc gtc cac gag tgc 346Ala Ala Ala Ala Ala Ala Glu Arg Asp Arg Ala Arg Val His Glu Cys85 90 95gcc gtg tgc ggg gtc gag ttc tcc atg ggg cag gcg ctc ggc ggc cac 394Ala Val Cys Gly Val Glu Phe Ser Met Gly Gln Ala Leu Gly Gly His100 105 110atg cgc cgg cac agg ggc gag acg ggc acg acg acc gtc gtg ctc gcg 442Met Arg Arg His Arg Gly Glu Thr Gly Thr Thr Thr Val Val Leu Ala115 120 125 130gac gcc gac gac tcg ggc ggc gcc acc gtg ccg cag ccg ccg gag ccc 490Asp Ala Asp Asp Ser Gly Gly Ala Thr Val Pro Gln Pro Pro Glu Pro135 140 145atg ccg gac ctg aac tac ccg ccg ctg gag gac gcc ggc gac ggc tcg 538Met Pro Asp Leu Asn Tyr Pro Pro Leu Glu Asp Ala Gly Asp Gly Ser150 155 160gag cct gag tta ctt aac ctt ctt gta taa gttgcatcga tagatataca588Glu Pro Glu Leu Leu Asn Leu Leu Val165 170tgtgaattga attggcgtct gtacatagat atggtggatg gattctttac caaatttgat648cgaaaaaaag aactaaattt tggagcgtga tgatcatagc atgtaagttg taacaaatga708ttgttaactg taagatagga attctattca tttgttctct tctgtacaaa attacaaata768ggttgattaa ttagttggtc ggttgtggtt gattctttgt aaaataccaa tttactagta828taaatatact gacagcttat tgtttcaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaa 883<210>SEQ ID NO.2<211>171<212>PRT<213>水稻[Oryza sativa]<400>2
Met Thr Ile Thr Arg Glu Glu Ala Glu Ser Lys Glu Met Glu Ser Leu1 5 10 15Arg Val His Ala Ser Ala Leu Leu Ser Leu Ser Ser Pro Ala Ala Ser20 25 30Ala Ser Gln Pro Thr Ser Ser Ser Ser Thr Thr Glu Gly Val Phe Glu35 40 45Cys Lys Thr Cys Ser Lys Arg Phe Pro Ser Phe Gln Ala Leu Gly Gly50 55 60His Arg Thr Ser His Thr Arg Leu Gln Ala Lys Leu Leu Ser Asp Pro65 70 75 80Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Glu Arg Asp Arg Ala Arg Val His85 90 95Glu Cys Ala Val Cys Gly Val Glu Phe Ser Met Gly Gln Ala Leu Gly100 105 110Gly His Met Arg Arg His Arg Gly Glu Thr Gly Thr Thr Thr Val Val115 120 125Leu Ala Asp Ala Asp Asp Ser Gly Gly Ala Thr Val Pro Gln Pro Pro130 135 140Glu Pro Met Pro Asp Leu Asn Tyr Pro Pro Leu Glu Asp Ala Gly Asp145 150 155 160Gly Ser Glu Pro Glu Leu Leu Asn Leu Leu Val165 170<210>3<211>171<212>PRT<213>水稻[Oryza sativa]<221>ZN_FING<222>(49)..(69)<221>ZN_FING<222>(98)..(118)
<400>3Met Thr Ile Thr Arg Glu Glu Ala Glu Ser Lys Glu Met Glu Ser Leu1 5 10 15Arg Val His Ala Ser Ala Leu Leu Ser Leu Ser Ser Pro Ala Ala Ser20 25 30Ala Ser Gln Pro Thr Ser Ser Ser Ser Thr Thr Glu Gly Val Phe Glu35 40 45Cys Lys Thr Cys Ser Lys Arg Phe Pro Ser Phe Gln Ala Leu Gly Gly50 55 60His Arg Thr Ser His Thr Arg Leu Gln Ala Lys Leu Leu Ser Asp Pro65 70 75 80Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Glu Arg Asp Arg Ala Arg Val His85 90 95Glu Cys Ala Val Cys Gly Val Glu Phe Ser Met Gly Gln Ala Leu Gly100 105 110Gly His Met Arg Arg His Arg Gly Glu Thr Gly Thr Thr Thr Val Val115 120 125Leu Ala Asp Ala Asp Asp Ser Gly Gly Ala Thr Val Pro Gln Pro Pro130 135 140Glu Pro Met Pro Asp Leu Asn Tyr Pro Pro Leu Glu Asp Ala Gly Asp145 150 155 160Gly Ser Glu Pro Glu Leu Leu Asn Leu Leu Val165 170
權(quán)利要求
1.一種水稻鋅指蛋白基因，它來自水稻(Oryza sativa)，命名為OsZFP18基因，核苷酸序列SEQ ID NO.11 gctcgtcatt aagagcgaaa gaaagttact tggaattctt tggtttgttg taatgacaat61 cacgagagaa gaagcggaga gcaaggagat ggagagccta cgggtgcacg ccagcgcgct121 gctctcgctg tcgtcgcctg cagcgtcggc gtcgcagccg acgtcgtcgt cgtcgacgac181 ggagggggtg ttcgagtgca agacgtgcag caagcggttc ccgtcgttcc aggcgctggg241 cgggcaccgg acgagccaca cgcggctgca ggcgaagctg ctgagcgacc ccgccgcggc301 ggcggcggcg gcggccgaga gggacagggc acgcgtccac gagtgcgccg tgtgcggggt361 cgagttctcc atggggcagg cgctcggcgg ccacatgcgc cggcacaggg gcgagacggg421 cacgacgacc gtcgtgctcg cggacgccga cgactcgggc ggcgccaccg tgccgcagcc481 gccggagccc atgccggacc tgaactaccc gccgctggag gacgccggcg acggctcgga541 gcctgagtta cttaaccttc ttgtataagt tgcatcgata gatatacatg tgaattgaat601 tggcgtctgt acatagatat ggtggatgga ttctttacca aatttgatcg aaaaaaagaa661 ctaaattttg gagcgtgatg atcatagcat gtaagttgta acaaatgatt gttaactgta721 agataggaat tctattcatt tgttctcttc tgtacaaaat tacaaatagg ttgattaatt781 agttggtcgg ttgtggttga ttctttgtaa aataccaatt tactagtata aatatactga841 cagcttattg tttcaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaa。
2.權(quán)利要求1所述一種水稻鋅指蛋白基因編碼含蛋白質(zhì)，它來自水稻(Oryzasativa)，命名為OsZFP18蛋白質(zhì)，它具有如下所示的氨基酸序列SEQ IDNO.2MTITREEAESKEMESLRVHASALLSLSSPAASASQPTSSSSTTEGVFECKTCSKRFPSFQALGGHRTSHTRLQAKLLSDPAAAAAAAAERDRARVHECAVCGVEFSMGQALGGHMRRHRGETGTTTVVLADADDSGGATVPQPPEPMPDLNYPPLEDAGDGSEPELLNLLV。
全文摘要
本發(fā)明公開了首個(gè)水稻C2H2型鋅指蛋白基因OsZFP18的核苷酸序列及所編碼的蛋白質(zhì)序列，屬于基因工程領(lǐng)域。OsZFP18的cDNA序列SEQ ID NO.1及編碼的氨基酸序列SEQ ID NO.2。本發(fā)明基因?yàn)樗局惺状螆?bào)道的C2H2型鋅指蛋白基因。OsZFP18參與水稻的穗發(fā)育以及鹽脅迫應(yīng)答，mRNA表達(dá)分析表明該基因受高鹽的誘導(dǎo)。轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)證明該基因的超量表達(dá)改變了穗形并且提高了水稻的耐鹽性，公開了利用OsZFP18基因進(jìn)行植物耐鹽性遺傳改良的方法。
文檔編號C07K14/415GK1724667SQ200410103080
公開日2006年1月25日 申請日期2004年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月31日
發(fā)明者王建飛, 黃驥, 張紅生, 王州飛, 郭書巧 申請人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué)