專利名稱：作為抗癌化合物的蒽醌化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一系列帶有含氮雜環(huán)取代基的、取代的烷基氨基蒽醌，以及這些化合物的N-氧化物。所述化合物可以是具有拓撲異構(gòu)酶II抑制活性的烷基化劑。所述N-氧化物為前體藥物。
背景技術(shù)：
對抗腫瘤藥物的抗性是導(dǎo)致癌癥化學治療方法失敗的主要原因，許多抗性機理是已知的。例如，體外模型DNA錯配修復(fù)的缺失導(dǎo)致對許多臨床上重要的抗腫瘤藥物的抗性，包括對順鉑(cisplatin)和多柔比星(doxorubicin)，也已經(jīng)證實這種缺失與hMLH1基因啟動子區(qū)域的過甲基化(hypermethylation)有關(guān)。一種逆轉(zhuǎn)該藥物抗性機理的方法是采用去甲基化劑進行處理，從而恢復(fù)細胞系對常規(guī)抗腫瘤藥物的敏感性。用去甲基化劑2′-去氧-5-氮雜胞苷處理A2780卵巢腫瘤細胞系(A2780/cp70)的順鉑抗性變異株的人腫瘤異種移植，可導(dǎo)致對各種抗腫瘤藥物的敏感性增加。然而，探究抗藥細胞系和非抗藥細胞系的區(qū)別，使得抗腫瘤藥物對抗藥細胞系的治療更為有效。
在過去的25年里，已經(jīng)對非共價DNA結(jié)合1，4-二取代氨基蒽醌進行了廣泛的研究。其中大部分研究關(guān)注于對稱取代的試劑，例如米托蒽醌(mitoxantrone)和AQ4N，米托蒽醌是一種臨床應(yīng)用的蒽環(huán)類抗生素類似物，AQ4N是由Patterson L.H.在Drug Metabolism Reviews，2002，34，581-92及WO-A-9105824中所述的一種目前正在I期臨床試驗中的通過生物還原活化的試劑。
AQ6 R3＝H，Rb＝CH2CH2OHZP257 Ra＝CH3，Rb＝CH2CH2OHZP275 Ra＝RbCH2CH2OHAlchemix Ra＝Rb＝CH2CH2ClAQ6是一種由Patterson及其同事在WO-A-9105824中以及SmithP.J.，Blunt N.J.，Desnoyers R.，Giles Y.，Patterson LH.在CancerChemotherapy and Pharmacology，1997，39，455-461中研制的、并由Krapcho等人在Journal of Medicinal Chemistry，1991，34，2373-2380中報道的不對稱取代的氨基蒽醌。Patterson發(fā)現(xiàn)AQ6能夠通過提高的細胞毒性可能性在拓撲異構(gòu)酶II的過度表達下抑制動基體DNA解連環(huán)。此外，Krapcho等人還發(fā)現(xiàn)它在多柔比星抗性結(jié)腸癌細胞系中具有優(yōu)良的體外細胞毒性，并在L1210細胞中具有中度的體內(nèi)活性。
近來對于新的氨基蒽醌的研究中，我們發(fā)現(xiàn)兩種不對稱的氨基蒽醌ZP257和ZP275在一組卵巢癌細胞系中具有顯著的細胞毒性活性。PorsK，Paniwnyk Z，Teesdale-Spittle P，Plumb JA，Willmore E，AustinCA，Patterson LH.(2003)AlchemixA Novel AlkylatingAnthraquinone with Potent Activity against Anthracycline-andCisplatin-resistant Ovarian Cancer.Mol Cancer Ther.2(7)607-610。ZP257和ZP275在P-糖蛋白過度表達的細胞系(2780AD)中顯示出對多柔比星具有交叉抗性，然而，它們在順鉑抗性A2780/cp70細胞系中的活性卻明顯高于野生型。AQ6、ZP257和ZP275是這樣一種米托蒽醌的類似物，其中兩個羥乙基氨基乙基側(cè)鏈中的一個被N，N-二甲基氨基乙基側(cè)鏈或N-甲基-N-羥乙基氨基乙基側(cè)鏈代替。對A2780和A2780/cp70細胞系而言，這兩種試劑具有較高的卻相等的細胞毒性活性(即藥物抗性系數(shù)(resistance factor，RF)約等于1)。
Pors等人所述的一種化合物，Alchemix，是基于芥子衍生物的烷基化劑。在Alchemix中，一個氨基烷基氨基側(cè)鏈上的兩個N取代基為2-氯乙基。該參考文獻中還描述了許多其它的芥子化合物。
A2780/cp70細胞系是包括hMLH1和hMSH2的DNA錯配修復(fù)蛋白的缺陷型，之前也顯示任何一種的缺失與對拓撲異構(gòu)酶II抑制劑的抗性有關(guān)，所述抑制劑例如多柔比星、表柔比星(epirubicin)和米托蒽醌。Fedier A.；Schwarz V.A.；Walt H.；Carpini R.D.；Haller U.；FinkD.International Journal of Cancer，2001，93，571-576。
已知某些種類的DNA相互作用劑(interacting agent)的N-氧化物在含氧量低的組織中被生物還原之前是非活性的(Patterson L.H.和Mckeown S.R.，Brit J Cancer 2000 83(12)，1589-93)。A4QN是這種N-氧化物的一個實例。DNA結(jié)合細胞毒性劑的N-氧化物的意義在于它們能夠在含氧量低的腫瘤組織中被選擇性地活化為較強的細胞毒素。常規(guī)的化學療法及放射療法將優(yōu)先殺傷那些被氧合血液良好灌注的腫瘤組織。含氧量低的腫瘤組織灌注較差，具有較低的氧含量，因此難以通過常規(guī)治療方法控制。生物還原劑在含氧量低的腫瘤組織中被優(yōu)先還原為活性細胞毒素，在與輻射療法或細胞毒性劑合用時發(fā)揮出有助于總治療效果的殺傷細胞的作用。
我們嘗試合成出Pors等人所述化合物的相應(yīng)的N-氧化物，然而，氧化后的化合物并不穩(wěn)定，且難以分離或無法分離。希望能夠制備出具有Pors等人所述芥子化合物的優(yōu)點的、能夠在腫瘤中被選擇性地生物還原的前體藥物，及其前體。
在WO-A-9105824中，氨基烷基氨基取代基可包括環(huán)狀的含N基團，但與氮原子相連的烷二基沒有被取代。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種新的通式I的蒽醌化合物或其鹽， 其中，R1至R4各自選自H、C1-4烷基、X1、-NHR0N(R5)2和以下式II基團，其中R0為C1-12烷二基，R5各自為H或任選取代的C1-4烷基，
其中R6、R7和R8中至少一個選自X2、和X2取代的C1-4烷基，而其它為H或C1-4烷基；R9選自H、C1-4烷基、X2、和X2取代的C1-4烷基；m為0或1；n為1或2；X1為鹵原子、羥基、C1-6烷氧基、芳氧基或酰氧基；并且X2為鹵原子、離去基團、羥基、C1-6烷氧基、芳氧基或酰氧基；條件是R1至R4中至少一個為式II基團。
本發(fā)明中，R1和R2可各自為式II基團。盡管它們可代表不同的式II基團，但通?；衔锸菍ΨQ的，并且R1和R2基團彼此相同。
然而，優(yōu)選R1和R2并不相同，而是代表不同的部分。這種不對稱化合物的優(yōu)點在于能夠提供對順鉑抗性癌細胞的增強的活性。優(yōu)選地，R1為式II基團，R2為NHR0N(R5)2。在這種R2基團中，R5基團優(yōu)選彼此相同并且通常為氫或甲基。
當R1和R2均為氨基烷基胺部分時，它們優(yōu)選分別在蒽醌環(huán)體系的1位和4位上取代。蒽醌環(huán)體系的編號規(guī)則如下 R3和R4基團可各自代表一種氨基烷基胺基團，即式II基團或NHR0N(R5)2基團。然而，優(yōu)選R3和R4選自氫和羥基，并優(yōu)選二者相同。R3和R4優(yōu)選分別位于蒽醌環(huán)體系的5位和8位。在本發(fā)明的一組化合物中，R3和R4均為氫。在另一組化合物中，R3和R4均為羥基。
在本發(fā)明中，化合物可以是N-氧化物的形式，即其中m為1。另外，化合物也可以是未被氧化的(或被還原的)形式，其中m為0。N-氧化物是在含氧量低的腫瘤中被選擇性生物還原為相應(yīng)胺的有益前體藥物。這些胺類化合物為細胞毒性化合物。從這個意義上說，它們可在癌癥治療中使用，因此，本發(fā)明提供了這種胺在制備用于治療動物的藥物中的用途。本發(fā)明還提供了N-氧化物在制備用于治療動物的藥物中的用途。對于與氮原子的連接而言，化合物可以外消旋混合物的形式存在，或以分離的R-或S-對映體存在(即其中環(huán)狀的雜環(huán)基團在選定的取向上具有側(cè)鏈)。
本發(fā)明的化合物可以是吡咯烷衍生物，即其中n為1。本發(fā)明另一類的化合物為哌啶衍生物，其中n為2。
本發(fā)明優(yōu)選的一類化合物為烷基化劑。在這種化合物中，或者i)R6為CH2X2且R7為氫；或者ii)R6為H且R7為X2，并且其中X3為鹵原子或離去基團。另外或者此外，R6為CH2CH2X3。當R6為CH2X3時，R9可方便地為相同的基團。
適合的X1、X2或X3鹵原子的實例為氟、氯、溴和碘，優(yōu)選氯。適合的X1、X2或X3離去基團(即離核基團)的實例為烷基芳基磺酰基、酰氧基或芳氧基。
R0優(yōu)選為C2-6烷二基、優(yōu)選直鏈烷二基基團。
然而，其中R6和R7基團不是上述烷基化劑相關(guān)定義之一的化合物仍然可以是充當拓撲異構(gòu)酶II抑制劑的DNA結(jié)合劑。其中R6、R7或R8中的一個為羥基或羥烷基的化合物具有細胞毒性特性。鹵素取代的化合物也具有細胞毒性，即使它們的鹵素并不在使化合物成為烷基化劑(芥子)的位置。
合成這些化合物的方法通常為常規(guī)方法。優(yōu)選地，化合物通過以下方法制備制得前體環(huán)氨基烷基胺，然后在親核取代中使其與被合適取代的蒽醌化合物發(fā)生反應(yīng)。適合地，取代基為鹵原子，或為離去基團。當有兩個氨基烷基胺基團時，可通過連續(xù)的步驟加入這些胺，或者，在允許混合產(chǎn)物時，也可用氨基烷基胺的混合物制備。
本發(fā)明提供了以下一種方法，其中式III化合物
其中R11至R14各自選自H、X4、羥基、C1-4烷氧基、酰氧基、-NHR10N(R15)2基團，其中R10為C1-12烷二基，且R15各自為H或任選取代的C1-4烷基，并且其中X4為鹵原子或離去基團，條件是R11至R14中至少一個為X4；與通式IV的環(huán)狀的氨基烷基胺化合物發(fā)生反應(yīng)， 從而使X4基團在親核取代反應(yīng)中被式V基團代替， 其中或者R16、R17和R18中至少一個選自X5和X5取代的C1-4烷基，而其它為H或C1-4烷基，R19選自H、C1-4烷基、X5和X5取代的C1-4烷基；X5為羥基或被保護的羥基，或者X5為與X4不同的離去基團或鹵原子。
在上述方法中，視具體情況而定，R16、R17、R18和R19基團可與所需通式I最終產(chǎn)物的R6、R7、R8和R9基團相同。另外，這些基團也可以是所需端基的前體，它們可在隨后的反應(yīng)步驟中發(fā)生反應(yīng)而生成所需的R6至R9取代基。隨后反應(yīng)步驟的實例為鹵化步驟，該步驟在羥基上發(fā)生，或在被保護羥基去保護后于其上發(fā)生。在此過程中，作為羥基或被保護羥基的X5基團——任選在去保護后——與鹵化劑發(fā)生反應(yīng)，例如與氯化劑反應(yīng)，用鹵原子代替X5羥基或所有X5羥基。
當所需最終產(chǎn)物為N-氧化物時，即其中m為1且其中q＝0時，親核取代反應(yīng)的產(chǎn)物在環(huán)上的氮原子被氧化，生成相應(yīng)的氧化胺。氧化反應(yīng)采用常規(guī)氧化劑進行，例如采用氯過氧苯甲酸(m-CPBA)、啞嗪(oxaziridine)或二甲基二環(huán)氧乙烷(dimethyldioxirine)(DMD)。
當所需最終產(chǎn)物為不對稱取代的蒽醌時，即其中R1至R4基團中的一個為NHR0N(R5)2基團時，這種化合物在預(yù)先的親核取代反應(yīng)中發(fā)生反應(yīng)，優(yōu)選在預(yù)先的步驟中。在預(yù)先的步驟中，以下一種化合物III的前體與以下一種H2NR10N(R15)2胺發(fā)生反應(yīng)，所述化合物III的前體中對應(yīng)于R11至R14的待取代基團具有取代基X6，所述X6為鹵原子或離去基團，所述胺中R15為H或任選取代的C1-4烷基。例如，R11可以是離去基團X5，位于蒽醌環(huán)體系的一個位置上。式III化合物中的R12可以是所述無環(huán)的烷基氨基烷基，其前體基團為離去基團X6，位于蒽醌環(huán)體系的一個位置上。式III化合物中的R12可以是所述無環(huán)的烷基氨基烷基，前體基團為離去基團X6，在預(yù)先的步驟中，X6基團被-NHR10N(R15)2基團代替。
在上述方法中，環(huán)狀的氨基烷基胺為市售產(chǎn)品，或者也可在預(yù)先的步驟中合成制得。這種起始化合物及其合成的許多實例記載于以下制備實施例中。某些環(huán)狀的氨基烷基胺為新化合物。
本發(fā)明的另一方面提供了通式VII的化合物， 其中R20為C1-12烷二基，并且，或者R26為CH2Cl且R27為H，或者R26為H且R27為Cl；R29為H，或為與R26相同的基團；R28或所有R28為H，或為與R27相同的基團；并且r為1或2。
優(yōu)選R20為(CH2)2。
在一類化合物VII中，r為1。在另一類中r為2。
R29可以與R26相同，但通常為H。
新的環(huán)胺在以下預(yù)先的合成方法中制得，其中，通式VIII的羥基取代的環(huán)狀叔胺被氨基保護，然后發(fā)生氯化，使OH被Cl代替，再去保護得到所需的式VII化合物，
其中R20和r如化合物VII的定義或者R21為CH2OH且R22為H或者R21為H且R22為OH；R24為H，或為與R21相同的基團；R23或所有R23為H，或為與R22相同的基團。
上述新的環(huán)胺可以是用以使其它藥物衍生化并使其轉(zhuǎn)化為芥子衍生物的起始物質(zhì)。
當所需最終產(chǎn)物為帶有兩個環(huán)狀氨基烷基胺取代基的對稱取代的化合物時，式III化合物中R11和R12代表X4，二者為相同的基團，并且在反應(yīng)中兩當量的通式IV胺化合物與一當量的式III化合物發(fā)生反應(yīng)。
本發(fā)明的N-氧化物為有益的前體藥物。它們在含氧量低的腫瘤組織中被還原為活性的環(huán)胺衍生物。它們可以與相關(guān)細胞毒性劑或完全不同的細胞毒性劑聯(lián)合給藥，以促進總的治療效果。另外，環(huán)胺化合物也可以作為諸如細胞毒性劑來給藥，還對預(yù)定活性的部位具有靶向或不具有靶向。以下實施例中的體外實驗部分論證了細胞毒性特性以及由N-氧化物前體藥物生成活性的細胞毒性劑。從結(jié)果中可以合理地預(yù)期作為細胞毒性劑的有益體內(nèi)活性，該活性明確地用于腫瘤治療中。
具體實施例方式
以下實施例闡述了本發(fā)明。
實施例 路線1一般方法1
氨基烷基氨基側(cè)鏈的合成——一般方法1-(2-氨基乙基)吡咯烷及哌啶側(cè)鏈的合成為兩步過程。用溴代乙腈對環(huán)狀的仲胺進行烷基化(無水Et3N，THF，45-50℃，30min，產(chǎn)率63-92％)，再通過LiAlH4還原使腈轉(zhuǎn)化為伯胺(THF，回流，5h，產(chǎn)率27-76％)。一般方法用于2-、3-及4-羥基哌啶，2-及3-羥基吡咯烷和2-及6-雙羥基-甲基哌啶。
一般方法2——氨基蒽醌的合成用N，N-二甲基乙二胺處理1，4-二氟-5，8-二羥基蒽醌，得到二取代與單取代蒽醌的混合物，從該混合物中通過閃式色譜法(flashchromatography)分離出中間體HAQ107(N，N-二甲基乙二胺，C5H5N，22℃，24h，34％)(路線2，

圖1)。然后用哌啶或吡咯烷側(cè)鏈處理純的HAQ107，純化后得到產(chǎn)率較高的目標化合物(HAQ71、HAQ73、HAQ110、HAQ111和HAQ121)和未羥基化的類似物HAQ148(胺，C5H5N，90℃，30min-1h，51-65％)。用1-(2-氨基乙基)哌啶側(cè)鏈原位取代(ipso-substitution)C上的兩個氟，一步合成出對稱構(gòu)型的蒽醌HAQ70和HAQ105(C5H5N，90℃，1h，34-37％)(路線3，圖2)。通過用三苯基膦-四氯化碳——一種將醇轉(zhuǎn)化為相應(yīng)鹵化物的常用配合物試劑——處理前體醇(分別為HAQ70和HAQ71)，制備出氯丙基氨基蒽醌CAQ74和CAQ75(Ph3P，CCl4，CH2Cl2，回流，N2，5h，68-81％)。
羥基化N-乙腈-哌啶及吡咯烷的合成參考實施例13-羥基-哌啶-1-基-乙腈(S1)通N2下，將BrCH2CN(3.19g，25.82mmol)滴加至3-羥基哌啶(6.53g，64.55mmol)的無水THF(25mL)溶液中，保持45-50℃的溫度。加入BrCH2CN后，溶液回流30min，然后使溶液冷卻至室溫。真空下除去溶劑，殘留的油狀物通過閃式色譜法以CH2Cl2∶CH3OH(9∶1)作洗脫劑來純化。得到稻草色的油狀的題述化合物(3.04g，83％)。δH(250MHz；CDCl3)；1.9-2.15(m，3H，CH2CH2CH2，1xCH2CH2CHOH)，2.25(m，1H，1xCH2CH2CHOH)，2.55(d，OH)，2.85-3(m，3H，NCH2CH2，1xNCH2CH)，3.1(2xd，1H，1xNCH2CH)，3.9(s，2H，NCH2CN)和4.3(m，1H，CH2CHOH)；FAB MS，m/z(M+H)+141。
參考實施例23-羥甲基-哌啶-1-基-乙腈(S2)用3-哌啶甲醇(4.79g，41.59mmol)、BrCH2CN(1.99g，16.64mmol)和無水THF(25mL)，方法與S1相同。以CH2Cl2∶CH3OH(9∶1)作洗脫劑通過閃式色譜法后，得到稻草色的油狀的題述化合物(2.35g，92％)。dH(250MHz；CDCl3)；1.05(m，1H，CHCH2OH)，1.5-1.9(m，5H，OH，CH2CH2CH2和CH2CH2CH)，2.15(t，1H，J＝10Hz，1xNCH2CH)，2.35(3xd，1H，J＝4Hz和J＝10Hz，1xNCH2CH2)，2.7(m，1H，1xNCH2CH2)，2.85(2xd，1H，J＝4Hz和J＝12Hz，1xNCH2CH)，3.52(s，2H，NCH2CN)和3.45-3.65(m，2H，CHCH2OH)；dC(62.9MHz；CDCl3)；24.43，26.14，38.55，46.75，52.83，55.73，65.88及114.74(CN)；FAB MS，m/z(M+H)+155。
參考實施例34-羥基-哌啶-1-基-乙腈(S3)通N2下，將BrCH2CN(28.55g，0.238mmol)滴加至4-羥基哌啶(24.98g，0.216mol)和Et3N(33.18mL，0.238mmol)的無水THF(100mL)溶液中，保持45-50℃的溫度。加入BrCH2CN后，溶液回流30min，然后使溶液冷卻至室溫。以乙醚/CH3OH(19∶1)作洗脫劑通過閃式色譜法純化后，得到稻草色的油狀的題述化合物(18.97g，63％)。dH(250MHz；CDCl3)；1.65(m，2H，1xCH2CH2CH及1xCHCH2CH2)，1.75(s，1H，OH)，1.95(m，2H，1xCH2CH2CH，1xCHCH2CH2)，2.45(m，2H，1xNCH2CH2和1xNCH2CH2)，2.78(m，2H，1xNCH2CH2和1xNCH2CH2)，3.55(s，2H，NCH2CN)和3.75(m，1H，CH2CHOH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；33.96，46.09，49.73，66.58和114.71(CN)；IRυmax/cm-1；3375(寬)，2230，1420，1330，1150和1060；FAB MS，m/z(M+H)+141。
參考實施例42-羥甲基-哌啶-1-基-乙腈(S4)用2-哌啶甲醇(26.50g，0.230mol)、BrCH2CN(30.35g，0.253mol)、Et3N(35.27mL，0.253mol)和無水THF(150mL)，方法按S3進行。以乙醚/CH3OH(19∶1)作洗脫劑，通過閃式色譜法純化粗產(chǎn)物。從乙醚中結(jié)晶出題述化合物，得到奶油色晶體(31.46g，89％)。δH(250MHz；CDCl3)；1.2-1.85(m，6H，NCH2CH2CH2，CH2CH2CH2CH及CH2CH2CH)，2.05(s(寬)，6H，OH)，2.4(m，1H，NCH2CH2)，2.55(3xd，1H，1xNCH2CH2)，2.95(m，1H，NCHCH2)，3.45(d，1H，J＝17Hz，1xNCH2CN)，3.5(2xd，1H，J＝3Hz和12Hz，1xCHCH2OH)，3.76(2xd，1H，J＝3Hz和12Hz，CHCH2OH)和4.05(d，1H，J＝17Hz，1xNCH2CN)；δC(62.9MHz；CDCl3)；23.71，25.25，28.69，43.43，54.04，60.73，64.46和115.05(CN)；FAB MS，m/z(M+H)+155；IRυmax/cm-1；3400(OH，m寬)，2350和2240(CN)和1650。
參考實施例52-羥甲基-吡咯烷-1-基-乙腈(S11)用2-吡咯烷甲醇(24.27g，0.241mol)、BrCH2CN(31.81g，0.265mol)、Et3N(37mL，0.265mol)和無水THF(150mL)，方法按S3進行。用乙醚/CH3OH(19∶1)通過閃式色譜法純化后，得到稻草色的油狀產(chǎn)物(21.60g，64％)。δH(250MHz；CDCl3)；1.5-2.0(m，5H，CH2CH2CH2，CH2CH2CH，OH)，2.7(m，1H)，2.85(m，1H)，3.05(m，1H)，3.45(2xd，1H，J＝4Hz和J＝11Hz，1xCHCH2OH)，3.65(2xd，1H，J＝4Hz和11Hz，1xCHCH2OH)和3.75(d，2H，NCH2CN)；δC(62.9MHz；CDCl3)；23.37，27.45，40.96，53.95，62.43，63.06和115.48(CN)；IRυmax/cm-1；3375(NH2)，3300(NH2)，3200(OH)，2970-2800(CH2，CH3)，1600，1475，1375，1230和1060；FAB MS，m/z(M+H)+141。
參考實施例63-羥基-吡咯烷-1-基-乙腈(S12)用3-羥基吡咯烷(15g，0.172mol)、BrCH2CN(22.67g，0.189mmol)和無水THF(60mL)，方法按S3進行。以CH2Cl2/CH3OH(9∶1)作洗脫劑通過閃式色譜法后，得到稻草色的油狀題述化合物(15.39g，71％)。δH(250MHz；CDCl3)；1.9-2.25(m，2H，2x環(huán)-H)，2.3(m，1H，環(huán)-H)，2.65(d，OH)，2.85-3.05(m，3H，3x環(huán)-H)，3.95(d，2H，NCH2CN)和4.2(m，1H，CH2CHOH)；FAB MS，m/z(M+H)+127。
參考實施例72，6-雙-羥甲基-哌啶-1-基-乙腈(S5)步驟1.2，6-哌啶二甲醇(S15)使2，6-哌啶二甲醇(15g，107.9mmol)懸浮于冰冷的乙酸(250mL)中，用PtO2(1.5g)作催化劑在大氣壓和室溫下氫化48h。然后通過硅藻土過濾除去催化劑，真空下濃縮酸性溶液，得到油狀殘余物。油狀物用EtOAc(50mL)稀釋，在冰冷的溫度下攪拌。緩慢加入飽和鹽水及濃氨水(pH～12)直至pH為11-12。然后將有機相與水相分離，水相用EtOAc(3×50mL)萃取。合并的有機相干燥(MgSO4)、過濾并真空下蒸去溶劑，得到稻草色的油狀物(5.21g，33％)。FAB MS，m/z(M+H)+146。
步驟2.2，6-哌啶二甲醇(3.80g，26.21mmol)、碘代乙腈(5.24g，31.45mmol)、Et3N(4.38mL，31.45mmol)和無水DMF(20mL)，方法按S5進行。以CH2Cl2/CH3OH(9∶1)作洗脫劑閃式色譜法純化后，得到稻草色的油狀題述化合物(2.5g，53％)。FAB MS，m/z(M+H)+185。
利用Finkelstein反應(yīng)制備碘代乙腈。將BrCH2CN(3.77g，0.0314mmol)滴加至攪拌的NaI(4.71g，0.031mmol)的丙酮溶液中。數(shù)分鐘內(nèi)出現(xiàn)NaBr沉淀，表明鹵化物的交換已經(jīng)發(fā)生。濾除溴化鈉，真空下除去丙酮。粗產(chǎn)率(5.24g，100％)。
羥基化N-2-氨基乙基哌啶及吡咯烷的合成參考實施例81-(2-氨基-乙基)-哌啶-3-醇(S6)0℃通N2下三口圓底燒瓶中，將LiAlH4(2.44g，64.2mmol)加入至無水THF(20mL)中。溶液攪拌15min，然后用注射器緩慢加入用無水THF(5mL)稀釋的3-羥基哌啶-1-基乙腈(3g，21.4mmol)中。反應(yīng)混合物回流5h，然后使溶液冷卻至室溫。滴加2.4mL H2O、2.4mL NaOH(15％)以及最后EtOAc直至不再有起泡現(xiàn)象，以破壞過量的LiAlH4。濾除形成的顆粒狀沉淀(氫氧化鋰和氫氧化鋁)，用CH2Cl2和EtOAc洗滌數(shù)次。有機層干燥(MgSO4)，真空下除去溶劑，得到粘稠的淺黃色油狀物。通過kugelrohr蒸餾(172℃，0.05mbar)純化，得到稻草色油狀的題述化合物(1.95g，63％)。δH(250MHz；CDCl3)；1.45-1.7(m，3H，CH2CH2CH2，1xCH2CH2CHOH)，1.76(m，1H，1xCH2CH2CHOH)，1.95(s，3H，OH，NH2)，2.25-2.55(m，6H，H2NCH2CH2，NCH2CH2，NCH2CH)，2.75(t，2H，H2NCH2CH2)和3.9(m，1H，CH2CHOH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；21.93，32.01，38.88，53.84，60.80，61.06和66.36；FAB MS，m/z(M+H)+145。
參考實施例9[1-(2-氨基-乙基)-3-哌啶-2-基]甲醇(S7)用3-羥甲基-哌啶-1-基乙腈(2.95g，19.1mmol)、LiAlH4(2.18g，57.3mmol)和無水THF(15mL)，方法按S6進行。通過kugelrohr蒸餾(164℃，0.01mbar)，得到無色油狀的題述化合物(2.30g，76％)。δH(250MHz；CDCl3)；1.1(m，1H，CHCH2OH)，1.5-1.9(m，7H，OH，NH2，CH2CH2CH2和CH2CH2CH)，1.95(t，1H，J＝10Hz，1xNCH2CH)，2.1(3xd，1H，J＝3Hz和10Hz，1xNCH2CH2)，2.4(t，2H，J＝6Hz，H2NCH2CH2N)，2.6(m，1H，1xNCH2CH2)，2.8(t，3H，J＝6Hz，H2NCH2CH2N和1xNCH2CH)，3.45-3.65(m，2H，CHCH2OH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；24.66，27.50，38.19，38.91，54.54，57.43，61.61和66.55；IRυmax/cm-1；3375(寬)，1675，1625，1450，1100和1050；FAB MS，m/z(M+H)+159。
參考實施例101-(2-氨基-乙基)-哌啶-4-醇(S8)用4-羥基-哌啶-1-基乙腈(18.97g，0.136mol)、LiAlH4(15.48g，0.408mol)和無水THF(150mL)，方法按S6進行。通過kugelrohr蒸餾(178℃，0.05mbar)得到稻草色油狀的題述化合物(8.56g，44％)。δH(250MHz；CDCl3)；1.55(m，2H，1xCHCH2CH2和1xCH2CH2CH)，1.85(m，2H，1xCHCH2CH2和1xCH2CH2CH)，2-2.25(m，5H，NCH2CH2，NCH2CH2和OH)，2.38(t，2H，H2NCH2CH2N)，2.72(t，4H，H2NCH2CH2N，NH2)和3.65(m，1H，CH2CHOH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；34.56，38.98，51.35，60.84和67.64；FAB MS，m/z(M+H)+145；IRυmax/cm-1；3375(寬)，1600，1460，1370，1290和1070。
參考實施例11 甲醇(S9)用2-羥甲基-哌啶-1-基乙腈(31.96g，0.208mol)、LiAlH4(23.68g，0.624mol)和無水THF(200mL)，方法按S6進行。通過kugelrohr蒸餾(225℃，0.13mbar)得到稻草色油狀的題述化合物(8.74g，27％)。δH(250MHz；CDCl3)；1.2-1.75(m，6H，CH2CH2CH2，CH2CH2CH和CH2CH2CH)，2.2(m，1H，1xNCH2CH2)，2.35(m，2H，H2NCH2CH2N)，2.58(s(寬)，3H，OH和NH2)，2.75(t，2H，H2NCH2CH2N)，2.85(3xd，1H，1xNCH2CH2)，2.92(m，1H，NCHCH2)，3.4(2xd，1H，J＝4Hz和12Hz，1xCHCH2OH)和3.76(2xd，1H，J＝4Hz和12Hz，1xCHCH2OH)；FAB MS，m/z(M+H)+159。
參考實施例12[1-(2-氨基-乙基)-哌啶-雙-2，6-基]甲醇(S10)用2，6-雙-羥甲基-哌啶-1-基-乙腈(2.40g，13.04mmol)、LiAlH4(1.49g，39.13mmol)和無水THF(30mL)，方法按S6進行。不純化而得到稻草色油狀的題述化合物(1.03g，42％)。發(fā)現(xiàn)有必要在40℃下將干燥的被破壞的LiAlH4絡(luò)合物在無水THF中攪拌10h，以便優(yōu)化所需的二羥基化二胺的產(chǎn)率。FAB MS，m/z(M+H)+189。
參考實施例13[1-(2-氨基-乙基)-吡咯烷-2-基]甲醇(S13)用2-羥甲基-吡咯烷-1-基-乙腈(19.5g，0.139mol)、LiAlH4(15.84g，0.417mol)和無水THF(150mL)，方法按S6進行。通過kugelrohr蒸餾(142℃，0.3mbar)得到稻草色油狀的題述化合物(12.5g，63％)。δH(250MHz；CDCl3)；1.6-1.9(m，4H，CH2CH2CH2，CH2CH2CH)，1.98(s(寬)，3H，NH2，OH)，2.3(m，1H)，2.45(m，1H)，2.55(m，1H)，2.75-2.85(m，3H)，3.19(m，1H，NCHCH2)，3.4(2xd，1H，J＝3Hz和J＝11Hz，1xCHCH2OH)，3.6(2xd，1H，J＝3Hz和J＝11Hz，1xCHCH2OH)；IRυmax/cm-1；3375(NH2)，3300(NH2)，3200(OH)，2970-2800(CH2，CH3)，1600，1475，1375，1230和1060；FAB MS，m/z(M+H)+145。
參考實施例14
1-氨基-乙基-吡咯烷-3-醇(S14)用3-羥基-吡咯烷-1-基-乙腈(15g，0.107mol)、LiAlH4(10.17g，0.268mol)和無水THF(150mL)，方法按S6進行。得到稻草色油狀的題述化合物(9.55g，69％)，不進行純化而用于下一步中。δH(250MHz；CDCl3)；1.55-1.85(m，2H，2x環(huán)-H)，2.05(s，3H，OH，NH2)，2.25-2.55(m，6H，4x環(huán)-H和H2NCH2CH2N)，2.9(t，2H，H2NCH2CH2N)和4.05(m，1H，CH2CHOH)；FAB MS，m/z(M+H)+131。
發(fā)色團的制備參考實施例151，5-二氨基-4，8-二羥基蒽醌在2升的圓底燒瓶中投入1，5-二氨基蒽-9，10-二酮(12g，50mmol)。加入濃硫酸(180g)，混合物在0℃下攪拌15分鐘，然后在45分鐘內(nèi)分批加入氯酸鈉(14.4g，134mmol)。反應(yīng)混合物升至室溫，攪拌3h，然后將其傾倒入1％的冰冷的亞硫酸氫鈉溶液(1L)中。濾出沉淀出的固體，順序用冷水和熱水洗滌。冷凍干燥過夜后，得到紫-藍色固體粗產(chǎn)物(11.3g，83％)。FAB MS，m/z(M+H)+271。
參考實施例165，8-二羥基醌茜隱色體(5，8-dihydroxyleucoquinizarin)(leuco-1，4，5，8-四羥基蒽醌)(B)。
向粗的1，5-二氨基-4，8-二羥基蒽醌(11g，0.041mol)中加入NaOH(2.5M，200mL)，懸浮液輕度回流3小時，然后冷卻至室溫。分批加入亞硫酸氫鈉(31.74g，0.182mol)，反應(yīng)混合物再回流3小時。冷卻至室溫，用濃鹽酸酸化至pH＝3。過濾分離出沉淀物，順序用冷水和熱水洗滌。冷凍干燥過夜后，得到粗的棕色固體題述化合物(8g，73％)。FAB MS，m/z(M+H)+251。
參考實施例171，4-二氟-5，8-二羥基蒽醌(C)將經(jīng)過研磨的AlCl3(2.955g，22.16mmol)、NaCl(432mg，7.39mmol)、1，4-二羥基苯(224mg，2.03mmol)和3，6-二氟鄰苯二甲酸酐(difluorophthalic dry)(340mg，1.85mmol)的混合物在圓底燒瓶中劇烈攪拌，并在油浴中加熱至220℃3h。移去油浴，加入冰和濃鹽酸(10mL)使反應(yīng)驟冷。將最終的水溶液進行抽濾，沉淀出的物質(zhì)水洗然后冷凍干燥。TLC顯示棕色的題述化合物(470mg，92％)為純的物質(zhì)，并經(jīng)過NMR和MS確證，因此不需要其它后處理δH(250MHz；CDCl3)；7.3(s，2H)，7.55(m，2H)，12.9(s，2H)；FAB MS，m/z(M+H)+277。
參考實施例181-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-4-氟-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(HAQ107)室溫下攪拌1，4-二氟-5，8-二羥基蒽醌(0.50g，1.812mmol)、N，N-二甲基乙二胺(0.16g，1.812mmol)和吡啶(3mL)24h?；旌衔镌诶潲}水(50mL)中驟冷，并放置3小時，然后過濾分離出粗產(chǎn)物。以1至5％的MeOH/CH2Cl2作梯度洗脫劑，使粗產(chǎn)物經(jīng)過色譜純化。得到紫色粉末狀的產(chǎn)物HAQ107(0.24g，38％)。δH(250MHz；DMSO)；2.35(s，6H，2xNCH3)，2.7(t，2H，HNCH2CH2N)，3.5(q，2H，HNCH2CH2N)，7.1(s，1H)，7.1(s，1H)，7.4(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.75(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.4(s，2H，C(5)OH和C(8)OH)；δC(62.9MHz；DMSO)；FAB MS，m/z(M+H)+344。
發(fā)色團取代反應(yīng)實施例1和2醌茜隱色體(leucoquinizarin)和5，8-二羥基醌茜隱色體的胺化1-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-4-{[2-(3-羥基哌啶-1-基)乙基]氨基}-蒽-9，10-二酮(HAQ22)和1，4-雙-{[2-(3-羥基哌啶-1-基)乙基]-氨基}-蒽-9，10-二酮(HAQ24)通N2下，將N-N-二甲基乙二胺(0.92g，10.42mmol)和1-(2-氨基乙基)-3-哌啶-3-醇(1.50g，10.42mmol)的EtOH(5mL)溶液同時加入至醌茜隱色體(0.63g，2.61mmol)的EtOH(25mL)懸浮液中?；亓鳒囟认聰嚢?h后，室溫下再攪拌反應(yīng)混合物14h。真空下除去EtOH，將殘余物加入至冰冷的鹽水中。過濾分離出沉淀出的固體，然后冷凍干燥。使深藍色固體通過閃式色譜短柱先用CH2Cl2除去非極性的副產(chǎn)物，然后逐漸提高極性，除去更多的副產(chǎn)物，最后用CH2Cl2/CH3OH(4∶1)洗脫，得到所需的粗組分。以CH2Cl2/CH3OH/NH3(94∶6∶0.75)作洗脫劑使粗固體通過閃式色譜。為得到純的組分，以CH2Cl2/CH3OH/NH3(94∶6∶0.75)作洗脫劑通過制備型TCL進行最后的純化。分別得到深藍色固體的HAQ22(0.12g，10％)和HAQ24(0.16g，12％)。
HAQ22δH(250MHz；CDCl3)；1.5(m，2H，CH2CH2CH2)，1.8(m，1H，1xCH2CH2CH)，2.0(m，1H，1xCH2CH2CH)，2.2(t，1H，1xNCH2CH2)，2.3(s，6H，2xNCH3)，2.5(d，1H，1xNCH2CH)，2.6-2.8(m，7H，2xNCH2CH2N，1xNCH2CH和OH)，3.4(m，4H，2xH2NCH2CH2N)，3.9(m，1H，CH2CHOH)，7.1(d，2H，C(2)H，C(3)H)，7.62(m，2H，C(6)H，C(7)H)，8.32(m，2H，C(5)H，C(8)H)，10.75(t，2H，C(1)NH)和11(t，1H，C(4)NH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；21.18，31.47，39.72，41.13，45.72，53.06，56.05，58.63，60.06，65.99，110.15，123.55，126.16，131.97，134.48，145.78和182.41；FAB MS，m/z(M+H)+437；IRυmax/cm-1；3450(寬，OH)，3220(NH)，3020(Ar-CH)，2960-2800(CH2-CH3)，1650，1625，1575，1480，1380和1220。
HAQ24δH(250MHz；CDCl3)；1.5-1.9(m，10H，8x環(huán)-H和2xOH)，2.1(m，2H，2x環(huán)-H)，2.25(m，2H，2x環(huán)-H)，2.5(d，2H，2x環(huán)-H)，2.75-2.95(m，6H，4x環(huán)-H和2xHNCH2CH2N)，3.5(q，4H，2xHNCH2CH2N)，3.95(m，2H，2xCH2CHOH)，7.2(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.65(m，2H，C(6)H和C(7)H)，8.35(m，2H，C(5)H和C(8)H)和11.0(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)；FAB MS，m/z(M+H)+493。
以下為本發(fā)明的實施例及對比實施例。路線2(圖1)和路線3(圖2)給出了反應(yīng)路線。在這些路線中，步驟(I)為加入一個氨基烷基氨基側(cè)鏈，90℃下在吡啶中進行30min-1hr；步驟(II)為氯化反應(yīng)，用(Ph)3PCCly和CH2Cl2，并采用醚的HCl(ethereal HCl)回流3-10h。在路線3中，步驟(III)為另一個側(cè)鏈連接步驟，在乙醇中回流進行；步驟(IV)為側(cè)鏈羥基的氯化反應(yīng)，用醚的HCl，30-60℃下在吡啶中進行2h至5h。
實施例3
1，4-雙-{[2-(3-羥甲基哌啶-1-基)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(HAQ70)通N2下，將于EtOH(2mL)中的[1-(2-氨基乙基)-哌啶-3-基]甲醇(1.9g，12mmol)加入至攪拌中的5，8-二羥基醌茜隱色體(272mg，1mmol)的EtOH(15mL)懸浮液中?；亓鳒囟认聰嚢?h后，反應(yīng)混合物冷卻至室溫，再攪拌16h。真空下除去EtOH，將殘余物加入至冰冷的鹽水中。過濾分離出沉淀出的固體，然后冷凍干燥。用CH2Cl2然后逐漸提高極性至CH2Cl2/CH3OH(4∶1)，使深藍色固體經(jīng)過閃式色譜。然后以CH2Cl2/CH3OH/NH3(94∶6∶0.75)作洗脫劑使粗產(chǎn)物經(jīng)過閃式色譜。得到深藍色固體的題述化合物(115.9mg，21％)。熔點180-183℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.1-1.95(m，12H，2xOH和10x環(huán)-H)，2.25(m，4H，4x環(huán)-H)，2.7(t，6H，2xHNCH2CH2N和2x環(huán)-H)，2.95(2xd，2H，2x環(huán)-H)，3.5(m，4H，2xHNCH2CH2)，3.65(m，4H，2xCHCH2OH)，7.1(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.2(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.5(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.6(s，2H，C(5)OH和C(8)OH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；FAB MS，m/z(M+H)+553；IRυmax/cm-1；3400(OH)，3225(NH)，3100(Ar-CH)，2960-2800(CH2，CH3)，1650，1625，1575，1480，1370和1225；C30H40N4O6分析計算C，65.20；H，5.47；N，10.14。實測C，65.16；H，5.49；N，9.93。
實施例41，4-雙-{[2-(3-羥甲基哌啶-1-基)乙基]氨基}-蒽-9，10-二酮(HAQ38)盡管未表示于路線3中，但用醌茜隱色體(0.23g，0.95mmol)、[1-(2-氨基乙基)-哌啶-3-基]甲醇(0.06g，3.8mmol)和乙醇(25mL)，方法與HAQ70相同。得到深藍色固體的題述化合物(0.15g，29％)。熔點112-114℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.15(m，2H，2xCH2CHCH2OH)，1.5-1.75(m，6H，2xCH2CH2CH和2xCH2CH2CH2)，1.85(m，2H，2xCH2CH2CH)，2.3(m，4H，4x環(huán)-H)，2.5(s(寬)，4H，2x環(huán)-H，2xOH)，2.65(t，4H，J＝5Hz，2xHNCH2CH2N)，2.75(2xd，2H，J＝3Hz和12Hz，2x環(huán)-H)，3.42(q，4H，J＝5Hz，2xHNCH2CH2N)，3.55(2xd，2H，J＝5Hz和12Hz，2xCHCH2OH)，3.7(2xd，2H，J＝9Hz和12Hz，2xCHCH2OH)，7.1(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.6(m，2H，C(6)H和C(7)H)，8.3(m，2H，C(5)H，C(8)H)和10.75(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；24.08，26.92，37.90，40.52，54.43，56.95，57.75，65.70，109.89，123.87，126.13，132.09，134.46，146.6和182.36；FAB MS，m/z(M+H)+521；IRυmax/cm-1；3400(OH)，3090(Ar-CH)，2960-2800(CH2，CH3)，1650，1585，1550，1520，1265，1175和1125；C30H40N4O4分析計算C，69.21；H，7.74；N，10.76。實測C，69.22；H，7.88；N，10.69。
二胺對1，4-二氟-5，8-二羥基蒽醌的氟化物的原位取代實施例51-[(2-二甲基氨基)乙基氨基]-4-[2-(3-羥甲基-哌啶-1-基)乙基氨基]-5，8-二羥基-蒽-9，10-二酮(HAQ71)用HAQ107(200mg，0.581mmol)、[1-(2-氨基乙基)-哌啶-3-基]甲醇(350mg，2.215mmol)、吡啶(2mL)，90℃，30min，方法按HAQ105(見以下實施例7)進行。得到深藍色粉末的產(chǎn)物(190mg，68％)。熔點181-183℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.2(m，2H，2x環(huán)-H)，1.6-1.9(m，5H，OH和4x環(huán)-H)，2.18-2.3(m，2H，環(huán)-H)，2.35(s，6H，2xNCH3)，2.6-2.75(m，4H，2xHNCH2CH2N)，2.9(2xd，1H，1x環(huán)-H)，3.46(m，4H，2xHNCH2CH2N)，3.65(2xd，2H，CHCH2OH)，7.15(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.2(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.4(t，1H，C(1)H)，10.5(t，1H，C(4)H)，13.5(s，1H，C(8)H)和13.6(s，1H，C(5)H)；δC(62.9MHz；CDCl3)；24.33，26.92，38.29，40.03，40.87，45.42，54.23，57.03，58.20，65.99，108.97，115.33，123.43，123.65，124.51，145.99，146.09，155.32和184.98；FAB MS，m/z(M+H)+483；IRυmax/cm-1；3425(OH)，3225(NH)，3100(Ar-CH)，2975-2800(CH2，CH3)，1650，1625，1575，1490，1360和1225；C26H34N4O5分析計算C，64.71；H，7.10；N，11.61。實測C，64.81；H，7.14；N，11.56。
實施例61-[(2-二甲基氨基)乙基氨基]-4-[2-(3-羥基哌啶-1-基)乙基氨基]-5，8-二羥基-蒽-9，10-二酮(HAQ73)用HAQ107(120mg，0.349mmol)、1-(2-氨基乙基)-哌啶-3-醇(150mg，1.047mmol)、吡啶(1mL)，90℃，30min，方法按HAQ105進行。得到深藍色粉末的產(chǎn)物(95mg，58％)。熔點228-230℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.55-1.75(m，4H，4x環(huán)-H)，1.83-2.0(m，2H，2x環(huán)-H)，2.28(2xd，1H，環(huán)-H)，2.35(s，6H，2xNCH3)，2.65-2.75(2xt，5H，2xHNCH2CH2N和OH)，3.46(m，4H，HNCH2CH2N)，3.9(m，1H，NCH2CHOH)，7.1(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.15(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.4(t，1H，C(1)H)，10.6(t，1H，C(4)H)，13.4(s，1H，C(8)H)和13.5(s，1H，C(5)H)；δC(62.9MHz；DMSO)；21.48，31.52，39.99，41.26，45.61，53.31，56.14，58.43，60.20，66.03，109.11，115.43，115.48，123.81，124.70，146.29，155.51和185.24；FAB MS，m/z(M+H)+469；IRυmax/cm-1；3425(OH)，3240(NH)，3100(Ar-CH)，2975-2800(CH2，CH3)，1650，1625，1575，1490，1375和1225；C28H36N4O6分析計算C，64.09；H，6.88；N，11.96。實測C，63.88；H，6.89；N，11.98。
實施例71，4-雙-{[2-(2-羥甲基哌啶-1-基)乙基]氨基}-5，8-二羥基-蒽-9，10-二酮(HAQ105)90℃下，1，4-二氟-5，8-羥基蒽醌(0.17g，0.601mmol)和[1-(2-氨基乙基)-哌啶-2-基]甲醇(0.95g，6.01mmol)在吡啶(2mL)中攪拌1h。將反應(yīng)混合物加入至冰冷的鹽水中，置于4℃過夜，過濾分離沉淀固體，然后冷凍干燥。通過閃式色譜法純化所需產(chǎn)物，先用CH2Cl2/CH3OH(95∶5)洗脫除去非極性雜質(zhì)，再將CH3OH逐漸提高至CH2Cl2/CH3OH(85∶15)。然后從CHCl3中結(jié)晶出通過色譜的產(chǎn)物，得到深藍色粉末狀題述化合物HAQ105(0.11g，34％)。熔點208-210℃；δH(250MHz；DMSO)；1.15-1.65(m，12H，2xOH和10x環(huán)-H)，2.25-2.4(m，6H，6x環(huán)-H)，2.6-2.7(t，4H，2xHNCH2CH2N)，2.85(m，2H，2x環(huán)-H)，3.55(t，4H，2xHNCH2CH2N)，3.6-3.65(2xd，4H，2xCHCH2OH)，7.2(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.5(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.75(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.65(s，2H，C(5)OH和C(8)OH)；δC(62.9MHz；DMSO)；22.55，24.92，28.14，50.99，52.32，61.94，62.42，107.03，116.11，123.89，125.91，147.07，154.46和182.88；FAB MS，m/z(M+H)+553；IRυmax/cm-1；3400(OH)，3225(NH)，3100(Ar-CH)，2960-2800(CH2，CH3)，1650，1625，1575，1480，1370和1225；C30H40N4O6·1H2O分析計算C，63.14；H，7.24；N，9.82。實測C，63.07；H，7.49；N，9.77。
實施例81-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-4-{[2-(2-羥甲基吡咯烷-1-基)乙基]-氨基}-5，8-二羥基-蒽-9，10-二酮(HAQ110)用HAQ107(75mg，0.218mmol)、[1-(2-氨基乙基)-吡咯烷-2-基]甲醇(650mg，4.114mmol)、吡啶(2mL)，90℃，1h，方法按HAQ105進行。得到深藍色粉末的產(chǎn)物HAQ110(52mg，51％)。熔點202-203℃；δH(250MHz；DMSO/CDCl3(1∶1))；1.55-1.9(m，4H，4x環(huán)-H)，2.3(s，6H，2xNCH3)，2.5-2.55(m，1H，1x環(huán)-H)，3.25-3.4(m，7H，2xHNCH2CH2N，2x環(huán)-H和OH)，3.45-3.6(m，6H，2xHNCH2CH2N和NCHCH2OH)，7.05(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.2(m，2H，C(6)H和C(7)H)，10.6-10.7(2xt，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.5(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；DMSO/CDCl3(1∶1))；22.71，27.65，41.58，44.83，53.38，53.53，57.54，64.07，64.94，107.10，114.81，123.73，125.00，125.11，146.52，154.36和183.17；FAB MS，m/z(M+H)+469；C25H32N4O5分析計算C，64.09；H，6.88；N，11.96。實測C，63.83；H，6.99；N，12.05。
實施例91-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-4-{[2-(4-羥基哌啶-1-基)乙基]氨基}-5，8-二羥基-蒽-9，10-二酮(HAQ111)用HAQ107(18mg，0.0523mmol)、N-(2-氨基乙基)-哌啶-4-醇(140mg，0.97mmol)、吡啶(1mL)，90℃，1h，方法按HAQ105進行。得到深藍色粉末的產(chǎn)物HAQ111(16.1mg，65％)。熔點231-233℃；δH(250MHz；DMSO/CDCl3(1∶1))；1.25-1.8(m，6H，6x環(huán)-H)，2.2-2.25(m，2H，2x環(huán)-H)，2.35(s，6H，2xNCH3)，2.5-2.8(m，5H，2xHNCH2CH2N和1xOH)，3.5-3.55(m，5H，2xHNCH2CH2N和NCH2CHOH)，7.1(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.25(m，2H，C(6)H和C(7)H)，10.65(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.65(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；DMSO/CDCl3(1∶1))；27.78，32.15，43.72，49.49，54.73，56.39，65.09，106.48，113.66，122.55，123.12，123.39，144.97，153.33，182.56；FAB MS，m/z(M+H)+469；C25H32N4O5·1H2O分析計算C，61.17；H，6.84；N，11.52。實測C，61.27；H，6.64；N，11.40。
實施例101，4-雙-{[2-(3-羥基吡咯烷-1-基)乙基]氨基}-5，8-二羥基-蒽-9，10-二酮(HAQ115)盡管未表示于路線3中，但用1，4-二氟-5，8-羥基-蒽醌(75mg，0.272mmol)、1-(2-氨基乙基)-吡咯烷-3-醇(1g，7.7mmol)、吡啶(2mL)，100℃，1h，方法按HAQ105進行。得到深藍色粉末的產(chǎn)物HAQ115(59.2mg，44％)。熔點197-199℃；δH(250MHz；DMSO/CDCl3(1∶1))；1.55-1.65(m，2H，2x環(huán)-H)，2.0-2.1(m，2H，2x環(huán)-H)，2.45-2.9(m，10H，8x環(huán)-H和2xOH)，2.75-2.85(t，4H，2xHNCH2CH2N)，3.55-3.65(q，4H，2xHNCH2CH2N)，4.05-4.15(m，2H，2xCH2CHOH)，7.05(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.3(m，2H，C(6)H和C(7)H)，10.55(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.55(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；DMSO/CDCl3(1∶1))；28.01，34.73，41.22，52.18，54.42，62.33，69.26，107.01，115.04，123.79，124.90，146.43，154.38和183.21；FAB MS，m/z(M+H)+497；C26H32N4O6分析計算C，62.88；H，6.51；N，11.28。實測C，62.50；H，6.54；N，11.00。
實施例111，4-雙-{[2-(4-羥基哌啶-1-基)乙基]氨基}-5，8-二羥基-蒽-9，10-二酮(HAQ116)用1，4-二氟-5，8-羥基-蒽醌(45mg，0.163mmol)、1-(2-氨基乙基)-哌啶-4-醇(1g，42.6mmol)、吡啶(2mL)，90℃，1h，方法按HAQ105進行。得到深藍色粉末的產(chǎn)物HAQ116(36.2mg，42％)。熔點241-244℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.25-1.65(m，12H，12x環(huán)-H)，1.7-2.0(m，4H，4x環(huán)-H)，2.65-3.0(m，6H，2xNCH2CH2N和2xOH)，3.6-3.8(q，4H，2xHNCH2CH2N)，4.1(m，2H，2xCH2CHOH)，7.2(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.6(m，2H，C(6)H和C(7)H)，10.5(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.6(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；31.67，39.45，41.56，49.56，54.66，109.22，115.40，124.82，125.45，146.39，154.70，164.022和183.54；FAB MS，m/z(M+H)+525。
實施例121-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-4-{[2-(3-羥基吡咯烷-1-基)乙基]氨基}-5，8-二羥基-蒽-9，10-二酮(HAQ120)用HAQ107(45mg，0.13mmol)、1-(2-氨基乙基)-吡咯烷-3-醇(880mg，6.77mmol)、吡啶(1mL)，100℃，30min，方法按HAQ105進行。得到深藍色粉末的產(chǎn)物HAQ120(24mg，41％)。熔點195-198℃；δH(250MHz；DMSO/CDCl3(1∶1))；1.55-1.7(m，1H，1x環(huán)-H)，1.95-2.05(m，2H，2x環(huán)-H)，2.3(s，6H，2xNCH3)，2.35-2.4(m，1H，1x環(huán)-H)，2.5-2.6(t，4H，2xNCH2CH2N)，2.6-2.85(m，2H，1x環(huán)-H和OH)，3.5-3.55(q，4H，2xHNCH2CH2N)，4.25(m，1H，CH2CHOH)，7.1(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.4(m，2H，C(6)H和C(7)H)，10.5(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.5(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；DMSO/CDCl3(1∶1))；34.19，41.22，52.18，54.42，62.33，69.26，107.18，114.78，123.79，124.90，146.90，154.38和183.16；FAB MS，m/z(M+H)+455。
實施例131-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-4-{[2-(2-羥甲基哌啶-1-基)乙基]-氨基}-5，8-二羥基-蒽-9，10-二酮(HAQ121)用HAQ107(30mg，0.0872mmol)、[1-(2-氨基乙基)-哌啶-2-基]甲醇(700mg，4.43mmol)、吡啶(1mL)，100℃，30分鐘，方法按HAQ105進行。得到深藍色粉末的產(chǎn)物HAQ121(21.3mg，51％)。熔點201-203℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.7-2.1(m，7H，6x環(huán)-H和OH)，2.6(s，6H，2xNCH3)，2.8(m，2H，2x環(huán)-H)，2.9(t，4H，2xHNCH2CH2N)，2.9-3.1(m，1H，1xNCHCH2)，3.6-3.65(t，4H，2xHNCH2CH2N)，3.9-4.1(2x，2H，CHCH2OH)，7.05(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.15(m，2H，C(6)H和C(7)H)，10.5(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.65(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；23.06，23.93，26.94，40.57，41.13，45.59，50.42，51.88，58.35，61.44，62.65，108.67，115.43，123.45，124.12，146.11，155.24和184.63；FAB MS，m/z(M+H)+483；C26H34N4O5分析計算C，64.71；H，7.10；N，11.61。實測C，64.45；H，6.85；N，11.79。
實施例141，4-雙-{[2-(2-羥甲基吡咯烷-1-基)乙基]氨基}-5，8-二羥基-蒽-9，10-二酮(HAQ125)如路線3所示，用1，4-二氟-5，8-羥基-蒽醌(75mg，0.272mmol)、[1-(2-氨基乙基)-吡咯烷-2-基]甲醇(1.5g，10.42mmol)、吡啶(2mL)，100℃，2小時，方法按HAQ105進行。得到深藍色粉末的產(chǎn)物HAQ125(58.1mg，41％)。熔點202-204℃；δH(250MHz；DMSO/CDCl3(1∶1))；1.6-1.9(m，8H，8x環(huán)-H)，2.2-2.3(m，2H，2x環(huán)-H)，2.6-2.75(m，6H，2xHNCH2CH2N和2x環(huán)-H)，3.1-3.2(m，2H，2x環(huán)-H)，3.3-3.6(m，10H，2xHNCH2CH2N，2xNCHCH2OH和2xOH)，7.1(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.5(m，2H，C(6)H和C(7)H)，10.7(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.55(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；DMSO/CDCl3(1∶1))；22.75，27.65，41.59，53.56，64.08，64.96，107.14，114.92，123.79，125.30，146.65，154.37和183.15；FAB MS，m/z(M+H)+525；C28H36N4O6分析計算C，64.14；H，6.87；N，10.69。實測C，64.09；H，6.98；N，10.77。
實施例151-{[2-(2，6-二羥甲基哌啶-1-基)乙基]-氨基}-4-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(HAQ143)用HAQ107(78mg，0.227mmol)、[1-(2-氨基乙基)-哌啶-雙-2，6-基]甲醇(420mg，2.283mmol)、吡啶(2mL)，100℃，30min，方法按HAQ105進行。得到深藍色粉末的產(chǎn)物HAQ143(63mg，54％)。熔點216-218℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.4-1.8(m，6H，6x環(huán)-H)，2.35(s，6H，2xNCH3)，2.65(t，2H，1xHNCH2CH2N)，2.75-2.85(s，2H，2xNCHCH2)，3.0(t，2H，HNCH2CH2N)，3.35-3.45(m，6H，2xHNCH2CH2N和2xOH)，3.7(d，4H，2xCHCH2OH)，7.05(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.15(m，2H，C(6)H和C(7)H)，10.5(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.65(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；20.90，24.85，41.27，42.35，45.63，50.50，58.42，61.95，64.60，107.01，115.38，123.89，124.92，146.39，155.85和185.21；FAB MS，m/z(M+H)+513；C27H36N4O6分析計算C，63.26；H，7.08；N，10.93。實測C，62.93；H，7.12；N，10.84。
實施例161-{[2-(2-羥甲基吡咯烷-1-基)乙基]氨基}-蒽-9，10-二酮(HAQ163)(路線2)向吡啶(10mL)中的[1-(2-氨基乙基)-吡咯烷-2-基]甲醇(1.63g，11.3mmol)中加入1-氯蒽醌(1.37g，5.646mmol)，混合物在65℃下攪拌24小時。真空下除去吡啶，將得到的油狀物與固體的混合物溶于CH2Cl2中，用H2O(3×50mL)洗滌以除去所有未反應(yīng)的胺。在真空下除去分離的有機層，用CH2Cl2/CH3OH(97∶3)使粗產(chǎn)物經(jīng)過色譜。得到紅色粉末的所需產(chǎn)物(0.21g，11％)。熔點113-115℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.75-2.0(m，4H)，2.25-2.35(m，1H)，2.6-2.8(m，2H)，3.15-3.3(m，2H)，3.35-3.55(m，4H)，3.75-3.85(2xd，1H)，7.0(2xd，1H)，7.45-7.6(m，2H)，7.65-7.8(m，2H)，8.2(2xd，H)，8.45(2xd)和10.05(s，1H，C(1)NH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；24.11，27.15，41.64，52.99，53.82，62.61，65.26，113.15，115.60，126.57，132.86，133.81，135.32，151.49，183.77和184.89；FAB MS，m/z(M+H)+351；C21H22N2O3分析計算C，71.98；H，6.33；N，8.00。實測C，71.79；H，6.13；N，8.07。
實施例171-{[2-(3-氯哌啶-1-基)乙基]氨基}-4-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ166M)CAQ166M的制備包括5步，其中對所有中間體產(chǎn)物均不進行分離和純化。制備方法一般先按照路線5(圖4)再按照路線3(圖2)進行。
(i)一羥基化二胺側(cè)鏈的叔丁氧羰基(boc)保護(ii)叔丁氧羰基保護的一羥基化二胺側(cè)鏈的甲磺?；?iii)一甲磺酰基化二胺側(cè)鏈的氯化(iv)氯化的二胺側(cè)鏈的叔丁氧羰基的去保護(v)通過氯化的二胺對1-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-4-氟-5，8-二羥基蒽醌的氟化物進行原位取代(i)將1-(2-氨基乙基)-哌啶-3-醇(1g，6.94mmol)和Et3N(1.16mL，8.33mmol)與CH3OH(10mL)一起攪拌5min，然后在15-20min內(nèi)滴加溶于CH3OH(5mL)的Boc2O(1.82g，8.33mmol)。反應(yīng)混合物在45℃下攪拌20h，然后在真空下濃縮。將油狀物稀釋于EtOAc(40mL)中，用2×H2O(20mL)和鹽水(20mL)洗滌。有機相用硫酸鎂(MgSO4)干燥，過濾后在真空下濃縮，得到稻草色的不需另外純化的油狀物(1.35g，80％)。FAB MS，m/z(M+H)+245。
(ii)通N2下，將MsCl(420μL，5.41mmol)滴入被叔丁氧羰基保護的胺(880mg，3.61mmol)和Et3N(755μL，5.41mmol)的無水CH2Cl2的冰冷溶液中。反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1h后，溶液用冷的CH2Cl2稀釋，用冰冷的NaHCO3和冰冷的鹽水洗滌。有機相用MgSO4干燥、過濾，并在室溫下在真空中濃縮。得到粗的稻草色油狀的甲磺酰基化產(chǎn)物(965mg，83％)。FAB MS，m/z(M+H)+323。
(iii)將四正丁基氯化銨(2g，7.20mmol)加入至攪拌中的粗甲磺?；?965mg，3.01mmol)的無水DMF(5mL)溶液中。反應(yīng)混合物在90℃下攪拌30min，然后真空下除去DMF。殘留的油狀物在CH2Cl2中處理，并用冰冷的NaHCO3和冰冷的鹽水洗滌。有機相干燥(MgSO4)、過濾，并在室溫下在真空中濃縮溶劑。得到稻草淡黃色油狀的粗產(chǎn)物(624mg，79％)。FAB MS，m/z(M+H)+263。
(iv)將粗的氯化物(624mg，2.38mmol)在EtOAc中的4M HCl中攪拌1小時，以除去叔丁氧羰基基團。向在冰浴中冷卻的酸性EtOAc溶液中緩慢加入鹽水和NH3(pH＝12)的溶液，直至水相為pH～11。然后將氯化后的二胺萃取到有機相中，有機相用MgSO4干燥。真空下除去溶劑，得到帶棕色的油狀的粗產(chǎn)物(175mg，45％)，該粗產(chǎn)物直接用于下一步驟中。FAB MS，m/z(M+H)+163。
(v)室溫下，使HAQ107(36mg，0.105mmol)與粗的叔丁氧羰基去保護的氯化物(175mg，1.08mmol)的混合物在吡啶(2mL)中反應(yīng)2h。反應(yīng)混合物在真空下濃縮，粗產(chǎn)物通過以下方法純化先用CH2Cl2洗脫以除去非極性的雜質(zhì)，然后從CH3OH逐漸提高至CH2Cl2/CH3OH(97∶3)。從CHCl3中結(jié)晶出經(jīng)過色譜的產(chǎn)物。得到深藍色固體的題述化合物CAQ166M(35mg，60％)。熔點＞300℃分解；δH(250MHz；CDCl3)；1.5-1.9(m，4H，4x環(huán)-H)，2.15-2.25(m，3H，3x環(huán)-H)，2.35(s，6H，2xNCH3)，2.65-2.8(2xt，4H，2xHNCH2CH2N)，3.15-3.2(2xd，1H，環(huán)-H)，3.45(t，4H，2xHNCH2CH2N)，4.1(m，1H，CH2CHCl)，7.05(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.15(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.45(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.5(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；24.95，29.65，34.88，40.37，41.26，45.36，52.85，55.78，56.28，58.39，61.43，109.23，115.39，123.64，123.78，124.66，146.05，146.24，155.41，185.28和185.35；FAB MS，m/z(M+H)+487。
實施例181-{[2-(4-氯哌啶-1-基)乙基]氨基}-4-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ172)方法按CAQ166M進行。
(i)1-(2-氨基乙基)-哌啶-4-醇(2g，13.89mmol)、Et3N(2.32mL，16.65mmol)、CH3OH(20mL)、溶于CH3OH(5mL)中的Boc2O(3.63g，16.65mmol)。反應(yīng)混合物攪拌18h。得到不需另外純化的稻草色油狀產(chǎn)物(2.35g，69％)。FAB MS，m/z(M+H)+245。
(ii)被叔丁氧羰基保護的胺(1.70g，6.94mmol)、MsCl(810μL，10.41mmol)、Et3N(1.45mL，10.41mmol)、無水CH2Cl2(20mL)。得到粗的稻草色油狀的甲磺?；a(chǎn)物(1.39g，62％)。FAB MS，m/z(M+H)+323。
(iii)粗的甲磺酰基化物(1.39g，4.29mmol)、四正丁基氯化銨(2.38g，8.58mmol)、無水DMF(10mL)，120℃，30min。得到稻草色/淺黃色油狀的粗的氯化物(0.73g，65％)。FAB MS，m/z(M+H)+263。
(iv)粗的氯化物(0.73g，2.78mmol)、4M HCl EtOAc，1h。得到帶棕色的油狀的粗的叔丁氧羰基去保護的胺(160mg，35％)。FAB MS，m/z(M+H)+163。
(v)HAQ107(36mg，0.105mmol)、粗的去保護的側(cè)鏈(160mg，0.98mmol)、吡啶(2mL)，45℃，5h。得到深藍色固體的題述化合物(CAQ172)(31.4mg，54％)。熔點200-202℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.3-1.75(m，6H，6x環(huán)-H)，1.95-2.1(m，2H，2x環(huán)-H)，2.35(s，6H，2xNCH3)，2.6-2.8(t，4H，2xHNCH2CH2N)，3.3(q，4H，2xHNCH2CH2N)，3.45(m，1H，CH2CHCl)，7.05(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.1(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.45(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.55(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；24.06，34.69，45.38，50.79，56.25，58.96，109.09，115.31，123.77，123.95，124.61，146.12，146.22，155.34，161.33和185.29；FAB MS，m/z(M+H)+487；C25H31ClN4O4·2HCl·3H2O分析計算C，48.90；H，6.24；N，9.12。實測C，48.77；H，6.00；N，9.10。
實施例191-{[2-(2-氯甲基吡咯烷-1-基)乙基]-氨基}-4-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ176M)方法按CAQ166M進行。
(i)[1-(2-氨基乙基)-吡咯烷-2-基]甲醇(5g，34.72mmol)、Et3N(5.8mL，41.67mmol)、CH3OH(40mL)、溶于CH3OH(10mL)中的Boc2O(9.10g，41.67mmol)。反應(yīng)混合物攪拌18h。得到不需另外純化的稻草色油狀產(chǎn)物(6.9g，82％)。
(ii)被叔丁氧羰基保護的胺(5.1g，20.9mmol)、MsCl(2.43mL，31.35mmol)、Et3N(4.32mL，31.35mmol)、無水CH2Cl2(50mL)。得到粗的稻草色油狀的甲磺?；a(chǎn)物(5.63g，84％)。FAB MS，m/z(M+H)+245。
(iii)粗的甲磺酰基化物(5.63g，17.48mmol)、四正丁基氯化銨(9.72g，11.26mmol)、無水DMF(30mL)，90℃，30分鐘。得到稻草色/淺黃色油狀的粗的氯化物(2.2g，48％)。FAB MS，m/z(M+H)+323。
(iv)粗的氯化物(2g，7.58mmol)、4M HCl EtOAc，1h。得到帶棕色的油狀的粗的叔丁氧羰基去保護的胺(675mg，55％)。FAB MS，m/z(M+H)+263。
(v)HAQ107(95mg，0.276mmol)、粗的去保護的側(cè)鏈(675mg，4.15mmol)、吡啶(2mL)，2h，30℃。得到深藍色固體的題述化合物CAQ176M(63.8mg，41％)。FAB MS，m/z(M+H)+163；熔點253-255℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.5-1.85(m，4H，4x環(huán)-H)，2-2.25(m，3H，3x環(huán)-H)，2.35(s，6H，2xNCH3)，2.6-2.8(2xt，4H，2xHNCH2CH2N)，3.15(d，1H，1xNCHCH2Cl)，3.4(m，5H，2xHNCH2CH2N和1xNCHCH2Cl)，7.05(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.1(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.45(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.55(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；24.93，34.86，40.33，41.19，45.59，52.82，55.78，56.03，56.27，58.35，61.43，109.02，115.40，123.55，123.69，124.49，146.01，146.2，155.32和185.11；FAB MS，m/z(M+H)+487；C25H31ClN4O4·2HCl·2H2O分析計算C，50.38；H，6.60；N，9.40。實測C，49.81；H，6.23；N，9.29。
實施例201，4-雙-{[2-(2-氯甲基吡咯烷-1-基)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ177M)方法按CAQ166M進行。
(i)[1-(2-氨基乙基)-吡咯烷-2-基]甲醇(7g，48.61mmol)、Et3N(8.12mL，58.33mmol)、CH3OH(50mL)、溶于CH3OH(15mL)中的Boc2O(12.73g，58.33mmol)。反應(yīng)混合物攪拌20h。得到不需另外純化的稻草色油狀產(chǎn)物(9.36g，79％)。FAB MS，m/z(M+H)+245。
(ii)被叔丁氧羰基保護的胺(8g，32.8mmol)、MsCl(3.81mL，49.2mmol)、Et3N(6.85mL，49.2mmol)、無水CH2Cl2(50mL)。得到粗的稻草色油狀的產(chǎn)物(9.06g，86％)。FAB MS，m/z(M+H)+323。
(iii)粗的甲磺?；?9g，28mmol)、四正丁基氯化銨(13.34g，42mmol)、無水DMF(50mL)，90℃，30min。得到稻草色油狀的粗產(chǎn)物(6.78g，61％)。FAB MS，m/z(M+H)+263。
(iv)粗的氯化物(6.78g，25.7mmol)、4M HCl EtOAc，1h。得到帶棕色的油狀的粗的叔丁氧羰基去保護的胺(1.98g，47％)。FAB MS，m/z(M+H)+163。
(v)HAQ107(125mg，0.363mmol)、粗的去保護的側(cè)鏈(1.98mg，12.1mmol)、吡啶(5mL)，4h，30℃。得到深藍色固體的題述化合物CAQ177M(88.5mg，39％)。熔點＞300℃分解；δH(250MHz；DMSO)；1.45-1.85(m，6H，6x環(huán)-H)，2.15-2.35(m，6H，6x環(huán)-H)，2.65-2.85(m，6H，2xHNCH2CH2N和2x環(huán)-H)，3.15(d，2H，2xNCHCH2Cl)，3.45-3.55(q，4H，2xHNCH2CH2N)，4.15(m，2H，2xNCHCH2Cl)，7.05(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.15(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.45(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.45(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；DMSO)；28.11，35.05，41.78，50.83，55.43，60.52，65.26，107.91，114.93，124.33，127.56，144.33，156.69，183.28；FAB MS，m/z(M+H)+561；C28H34Cl2N4O4·2HCl分析計算C，53.05；H，5.72；N，8.84。實測C，53.35；H，5.84；N，8.72。
實施例211-{[2-(3-氯吡咯烷-1-基)乙基]氨基}-4-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ188M)方法按CAQ166M進行。
(i)1-(2-氨基乙基)-吡咯烷-3-醇(1g，7.94mmol)、Et3N(1.32mL，9.52mmol)、CH3OH(10mL)、溶于CH3OH(5mL)中的Boc2O(2.08g，9.52mmol)。反應(yīng)混合物攪拌16小時。得到不需另外純化的稻草色油狀產(chǎn)物(1.54g，86％)。FAB MS，m/z(M+H)+230。
(ii)被叔丁氧羰基保護的胺(960mg，4.16mmol)、MsCl(483μL，6.24mmol)、Et3N(868μL，6.24mmol)、無水CH2Cl2(10mL)。得到稻草色油狀的粗產(chǎn)物(1g，78％)。FAB MS，m/z(M+H)+308。
(iii)粗的甲磺?；?1g，3.24mmol)、四正丁基氯化銨(1.35g，4.86mmol)、無水DMF(10mL)，100℃，30min。得到稻草色/淺黃色油狀的產(chǎn)物(705mg，81％)。FAB MS，m/z(M+H)+248。
(iv)粗的氯化物(705mg，2.88mmol)、4M HCl EtOAc，1h。得到帶棕色的油狀的粗的叔丁氧羰基去保護的胺(124mg，30％)。FAB MS，m/z(M+H)+148。
(v)HAQ107(50mg，0.18mmol)、粗的去保護的側(cè)鏈(124mg，0.86mmol)、吡啶(2mL)，2小時，60℃。得到深藍色粉末的題述化合物CAQ188M(15mg，15％)。熔點＞300℃分解；δH(250MHz；DMSO/CDCl3(1∶1))；1.8-2.15(m，2H，2x環(huán)-H)，2.3(m，1H，環(huán)-H)，2.35(s，6H，2xNCH3)，2.85-3.05(m，7H)，3.8-4.1(m，5H)，7.1(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.2(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.45(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.55(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；37.19，42.31，52.01，55.05，62.05，68.95，107.65，114.40，124.91，125.15，146.09，154.74，184.44；FAB MS，m/z(M+H)+473；C24H29ClN4O4·2HCl·4H2O分析計算C，46.65；H，6.04；N，9.07。實測C，47.10；H，5.80；N，9.07。
Ph3P-CCl4配合物對羥基化蒽醌的氯化實施例221，4-雙-{[2-(3-氯甲基哌啶-1-基)乙基]氨基}-蒽-9，10-二酮(CAQ39)Ph3P(377.7mg，1.44mmol)和CCl4(425μL，432mmol)攪拌15min，通N2下在回流溫度下將其滴入攪拌中的HAQ38(125mg，0.24mmol)的無水CH2Cl2(5mL)溶液中。反應(yīng)混合物在回流溫度下4h，然后冷卻至室溫。將醚的HCl加入至溶液中，攪拌1h后，濾出沉淀出的固體。為除去過量的Ph3P和Ph3PO，將沉淀出的固體溶于溫的CH3OH(10mL)中。在回流攪拌深藍色溶液的同時，加入EtOAc和EtOH(1∶1)的混合物直至出現(xiàn)固體沉淀。溶液放置1h，然后過濾分離出沉淀出的產(chǎn)物；過量的Ph3P和Ph3PO留在EtOAc/EtOH溶液中。得到深藍色固體的題述化合物(98.3mg，65％)。熔點＞300℃分解；δH(250MHz；CDCl3)；1.1(m，2H，2xCH2CHCH2Cl)，1.75(m，6H，CH2CH2CH和2xCH2CH2CH2)，2.05(m，4H，環(huán)-H)，2.18(3xd，2H，J＝3Hz和10Hz，2xNCH2CH2)，2.73(t，4H，J＝9Hz，2xHNCH2CH2N)，2.8(m，2H，環(huán)-H)，2.96(2xd，2H，2xNCH2CH)，3.5(m，8H，2xCHCH2Cl和2xHNCH2CH2N)，7.25(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.7(m，2H，C(6)H和C(7)H)，8.3(m，2H，C(5)H，C(8)H)和10.75(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)；dC(62.9MHz；CDCl3)；24.42，28.34，38.47，40.56，48.14，54.22，57.52，57.60，110.30，123.52，126.12，132.01，134.56，145.82和182.65；FAB MS，m/z(M+H)+557；IRυmax/cm-1；3400(NH)，3090，2960-2825(CH2，CH3)，1650，1600，1585，1525，1275，1025和740；C30H38Cl2N4O2·2HCl·2H2O分析計算C，54.06；H，6.65；N，8.41。實測C，54.07；H，6.27；N，8.14。
實施例231-{[2-(3-氯哌啶-1-基)乙基]氨基}-4-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-蒽-9，10-二酮(CAQ46M)用HAQ22(167mg，0.384mmol)、Ph3P(302mg，0.152mmol)、CCl4(333μL，3.456mmol)和無水CH2Cl2(2mL)，方法按CAQ39進行。回流6h后停止反應(yīng)。得到深藍色固體的題述化合物(131mg，75％)。δH(250MHz；CDCl3)；1.4-1.8(m，4H，CH2CH2CH2和CH2CH2CH)，2.2(3xd，1H，J＝3Hz和11Hz，1xNCH2CH2)，2.25(d，1H，J＝11Hz，1xNCH2CH)，2.35(s，6H，2xNCH3)，2.7(t，2H，J＝7Hz，HNCH2CH2N)，2.75(t，2H，J＝7Hz，HNCH2CH2N)，2.9(m，1H，1xNCH2CH2)，3.15(2xd，1H，J＝3Hz和11Hz，1xNCH2CH)，3.5(m，4H，2xHNCH2CH2N)，4.05(m，1H，CH2CHCl)，7.1(d，2H，C(2)H，C(3)H)，7.6(m，2H，C(6)H，C(7)H)，8.3(m，2H，C(5)H，C(8)H)和10.75(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；24.50，34.95，40.42，41.02，45.65，52.99，55.88，56.85，58.55，61.61，110.23，123.41，126.12，132.03，134.48，145.73和182.62；FAB MS，m/z(M+H)+455。
實施例241，4-雙-{[2-(3-氯甲基哌啶-1-基)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ74)用HAQ70(142mg，0.26mmol)、Ph3P(404mg，1.54mmol)、CCl4(447μL，4.63mmol)和5mL CHCl3/CH3CN(4∶1)作溶劑，方法按CAQ39進行?；亓?h后停止反應(yīng)。得到深藍色固體的題述化合物(117mg，68％)。熔點＞300℃分解；δH(250MHz；CDCl3/D2O(10∶1))；1.4(m，2H，2xCH2CHCH2OH)，1.85-2.3(m，8H，8x環(huán)-H)，3.0(m，4H，環(huán)-H)，3.4-3.8(m，16H，2xHNCH2CH2N，2xHNCH2CH2N和8x環(huán)-H)，6.96(s，2H，C(2)H和C(3)H)和7(s，2H，C(6)H和C(7)H)；δC(62.9MHz；CDCl3/D2O(10∶1))，27.99，38.45，40.03，48.97，56.36，58.40，111.43，117.38，126.78，127.37，148.32，156.32和187.18；FAB MS，m/z(M+H)+589；C30H38Cl2N4O4·2HCl·2H2O分析計算C，51.59；H，6.35；N，8.02。實測C，51.49；H，6.14；N，8.22。
實施例251-{[2-(2-氯甲基哌啶-1-基)乙基]氨基}-4-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ75)用HAQ71(48mg，0.1mmol)、Ph3P(78.7mg，0.3mmol)、CCl4(300μL，3.11mmol)和無水CH2Cl2(10mL)，方法按CAQ39進行?；亓?h后停止反應(yīng)。得到深藍色粉末的產(chǎn)物(CAQ75)(46.3mg，81％)。熔點＞300℃分解；δH(250MHz；DMSO/CDCl3(1∶1))；1.3-1.45(m，3H，3x環(huán)-H)，1.45-1.6(m，2H，2x環(huán)-H)，2.35(s，6H，2xNCH3)，2.9-3(m，6H)，3-3.2(m，2H)，3.9(m，4H)，4.1(d，2H，CHCH2Cl)，7.15(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.6(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.45(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.55(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；22.45，25.33，41.70，42.56，54.63，54.95，61.95，107.94，114.43，124.41，125.03，145.03，145.81，155.05和184.03；FAB MS，m/z(M+H)+501；C26H33ClN4O4·2HCl·2H2O分析計算C，51.20；H，6.44；N，9.19。實測C，51.30；H，6.18；N，9.01。
實施例261-{[2-(2-氯甲基哌啶-1-基)乙基]-氨基}-4-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ183M)用HAQ121(105mg，0.21mmol)、Ph3P(165.23mg，0.63mmol)、CCl4(500μL，5.25mmol)和無水CH2Cl2(10mL)，方法按CAQ39進行?；亓?小時后停止反應(yīng)。得到深藍色粉末的產(chǎn)物(CAQ183M)(88.8mg，73％)。熔點233-235℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.55-2.1(m，8H，8x環(huán)-H)，2.8(s，6H，2xNCH3)，3.2-3.35(m，4H)，3.6-3.75(m，2H)，3.9-4.15(m，4H)，4.2(m，1H)，7.15(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.6(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.45(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.35(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；21.60，26.03，36.70，42.21，51.73，54.85，62.25，108.34，114.23，124.81，124.93，145.83，145.90，154.65和184.20；FAB MS，m/z(M+H)+501；C26H33ClN4O4·2HCl·3H2O分析計算C，49.73；H，6.58；N，8.92。實測C，50.09；H，6.27；N，8.96。
實施例271-{[2-(2，6-二氯甲基哌啶-1-基)乙基]-氨基}-4-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ187M)用HAQ143(14mg，0.0273mmol)、Ph3P(43mg，0.164mmol)、CCl4(79μL，0.82mmol)和無水CH2Cl2(5mL)，方法按CAQ39進行?；亓?小時后停止反應(yīng)。得到深藍色粉末的產(chǎn)物(CAQ187M)(12.2mg，81％)。δH(250MHz；CDCl3)；1.3-1.65(m，6H，6x環(huán)-H)，2.35(s，6H，2xNCH3)，2.7(t，2H，1xHNCH2CH2N)，2.8-2.9(m，2H，2xNCHCH2)，3.0(t，2H，1xHNCH2CH2N)，3.35-3.45(q，4H，2xHNCH2CH2N)，3.8-3.9(d，4H，2xCHCH2Cl)，7.1(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.15(m，2H，C(6)H和C(7)H)，10.55(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.65(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；FABMS，m/z(M+H)+549。
實施例281，4-雙-{[2-(2-氯甲基哌啶-1-基)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ190M)用HAQ105(60mg，0.109mmol)、Ph3P(171.5mg，0.654mmol)、CCl4(190μL，1.96mmol)和無水CH2Cl2(5mL)，方法按CAQ39進行?；亓?小時后停止反應(yīng)。得到深藍色粉末的產(chǎn)物(CAQ190M)(49.8mg，78％)。熔點＞300℃分解；δH(250MHz；DMSO)；1.5-1.65(m，4H，4x環(huán)-H)，1.75-2.15(m，10H，10x環(huán)-H)，3.4-3.8(m，8H，2xHNCH2CH2N和4x環(huán)-H)，4-4.1(q，4H，2xHNCH2CH2N)，4.15(2xd，4H，2xNCHCH2Cl)，7.2(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.65(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.45(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.45(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；DMSO)；26.11，37.05，42.78，50.78，51.83，60.32，62.26，108.41，114.33，125.00，126.56，145.93，154.69，184.28；FAB MS，m/z(M+H)+589。
實施例291-{[2-(2-氯甲基吡咯烷-1-基)乙基]氨基}-蒽-9，10-二酮(CAQ191M)用HAQ163(115mg，0.329mmol)、Ph3P(260mg，0.99mmol)、CCl4(100μL，9.86mmol)和無水CH2Cl2(5mL)，方法按CAQ39進行?；亓?小時后停止反應(yīng)。得到橙色粉末的產(chǎn)物(CAQ191M)(91.9mg，69％)。熔點250-253℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.6-2.1(m，4H)，2.15-2.35(m，1H)，2.65-2.75(m，2H)，3.05-3.15(m，2H)，3.4-3.6(m，4H)，3.8(2xd，1H)，7.2(2xd，1H)，7.45-7.65(m，2H)，7.75-7.95(m，2H)，8.1-8.3(m，2H)和9.95(s，1H，C(1)NH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；FAB MS，m/z(M+H)+351；C28H36N4O6分析計算C，62.23；H，5.47；N，6.91。實測C，62.15；H，5.11；N，6.77。
N-氧化物衍生化(路線4，圖3)實施例301-{[2-(2-羥甲基吡咯烷-1-基-N-氧化)乙基]氨基}-4-{[(2-二甲基氨基-N-氧化)乙基]氨基}-5，8-二羥基-蒽-9，10-二酮(HAQ132N)通N2下，將溶于無水二甲基二環(huán)氧乙烷DCM(1mL)的氧化劑間氯過氧苯甲酸m-CPBA(25mg，0.145mmol)滴入攪拌中的HAQ110(20mg，0.043mmol)的無水CH2Cl2(5mL)溶液中。-10℃下(丙酮-冰浴)攪拌15分鐘后，4℃下反應(yīng)攪拌3h。然后用己烷稀釋溶液，2小時后，濾出沉淀出的固體，順序用冰冷的己烷、乙醚、CH2Cl2和EtOAc洗滌。得到粗的深藍色固體的粗產(chǎn)物HAQ132N(15.5mg，73％)。C25H32N4O7分析計算C，59.99；H，6.44；N，11.19。實測C，52.94；H，6.15；N，10.01。
實施例311-{[2-(3-氯哌啶-1-基-N-氧化)乙基]氨基}-4-{[(2-二甲基氨基-N-氧化)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ167MN)用CAQ166M(19mg，0.0391mmol)、m-CPBA(21.6mg，0.125mmol)、無水CH2Cl2(5mL)，方法按HAQ132N進行。得到粗的深藍色固體的產(chǎn)物CAQ167MN(12.5mg，62％)。C25H31ClN4O6分析計算C，57.86；H，6.02；N，10.8。實測C，54.82；H，4.93；N，7.43。
實施例321-{[2-(4-氯哌啶-1-基-N-氧化)乙基]氨基}-4-{[(2-二甲基氨基-N-氧化)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ179N)用CAQ172(17mg，0.035mmol)、m-CPBA(21.5mg，0.119mmol)、無水CH2Cl2(5mL)，方法按HAQ132N進行。得到粗的深藍色固體的產(chǎn)物CAQ179N(15.5mg，86％)。C25H31ClN4O6分析計算C，57.86；H，6.02；N，10.80。實測C，54.62；H，4.84；N，6.80。
實施例33
1-{[2-(2-氯甲基吡咯烷-1-基-N-氧化)乙基]氨基}-4-{[(2-二甲基氨基-N-氧化)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ181MN)用CAQ176M(48.3mg，0.0994mmol)、m-CPBA(58.3mg，0.338mmol)、無水CH2Cl2(10mL)，方法按HAQ132N進行。得到粗的深藍色固體的產(chǎn)物CAQ181MN(46.2mg，90％)。C25H31ClN4O6分析計算C，57.86；H，6.02；N，10.80。實測C，54.66；H，4.51；N，6.81。
實施例341，4-雙-{[2-(2-氯甲基哌啶-1-基-N-氧化)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(CAQ192MN)用CAQ190M(11mg，0.0187mmol)、m-CPBA(12.9mg，0.075mmol)、無水CH2Cl2(5mL)，方法按HAQ132N進行。得到粗的深藍色固體的產(chǎn)物CAQ192MN(10.2mg，83％)。C30H38Cl2N4O6分析計算C，57.97；H，6.16；N，9.01。實測C，55.46；H，4.49；N，6.93。
對比實施例11，4-雙-{[2-(哌啶-1-基)乙基]氨基}-5，8-二羥基-蒽-9，10-二酮(HAQ145)用1，4-二氟-5，8-羥基-蒽醌(50mg，0.181mmol)、1-(2-氨基乙基)-哌啶(232mg，1.81mmol)、吡啶(1mL)，30min，100℃，方法按HAQ105進行。得到深藍色粉末的產(chǎn)物HAQ145(31.7mg，35％)。熔點219-212℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.45-1.55(m，4H，4x環(huán)-H)，1.55-1.7(m，8H，8x環(huán)-H)，2.55(m，8H，2xNCH2CH2)，2.65(t，4H，2xHNCH2CH2N)，3.55(q，4H，2xHNCH2CH2N)，7.05(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.15(s，2H，C(6)H和C(7)H)，10.5(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.65(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；24.37，26.09，40.72，54.64，57.63，109.21，115.48，123.63，124.63，146.31，155.46和185.35；FAB MS，m/z(M+H)+493；C28H36N4O6·1.5H2O分析計算C，64.66；H，7.27；N，10.78。實測C，64.70；H，7.55；N，10.67。
對比實施例21-{[(2-二甲基氨基)乙基]氨基}-4-{[2-(哌啶-1-基)乙基]氨基}-5，8-二羥基蒽-9，10-二酮(HAQ148)用HAQ107(62mg，0.18mmol)、1-(2-氨基乙基)-哌啶(250mg，1.953mmol)、吡啶(1mL)，30min，100℃，方法按HAQ105進行。得到深藍色粉末的產(chǎn)物HAQ148(42.9mg，65％)。熔點220-223℃；δH(250MHz；CDCl3)；1.45-1.7(m，6H，6x環(huán)-H)，2.35(s，6H，2xNCH3)，2.55(m，4H，2xNCH2CH2)，2.75(2xt，4H，2xHNCH2CH2N)，3.5(q，4H，2xHNCH2CH2N)，7.05(s，2H，C(2)H和C(3)H)，7.1(m，2H，C(6)H和C(7)H)，10.45(t，2H，C(1)NH和C(4)NH)和13.55(s，2H，C(5)OH，C(8)OH)；δC(62.9MHz；CDCl3)；24.28，25.93，40.51，41.24，45.63，54.62，57.50，58.39，109.23，115.41，123.73，123.99，124.75，146.24，155.44和185.41；FAB MS，m/z(M+H)+453。
生物學評價取代的吡咯烷基(pyrollidinyl)-及哌啶基-烷基氨基蒽醌的細胞毒性表1對比了具有側(cè)鏈羥基部分的化合物(HAQ71、HAQ73、HAQ111)與HAQ148的活性，表明羥基對這些被哌啶基/吡咯烷基取代的烷基氨基蒽醌的nM活性而言至關(guān)重要(見表1)。
對A2780野生型細胞系而言，不對稱取代的化合物(HAQ71、HAQ73、HAQ110、HAQ111、HAQ121和CAQ75)具有類似的效力。
用Cl取代OH(對比HAQ71與CAQ75)可導(dǎo)致細胞毒性降低超過10倍，然而CAQ75仍然保留了對抗性細胞的增強的活性(RF＝0.4)。此外，與對稱的氯丙基同類化合物CAQ74相比，CAQ75顯示在A2780細胞系中明顯更有效，這也進一步強調(diào)了這些1，4-二取代烷基氨基蒽醌的不對稱取代的重要性。
氯甲基哌啶基和吡咯烷基1，4二取代的烷基氨基蒽醌顯示在多柔比星抗性(2780AD)和順鉑抗性(A2780/cp70)的卵巢癌細胞系中具有較低的交叉抗性(表2)。羥基和氯取代的化合物顯示在小鼠體內(nèi)的人異種移植卵巢癌中具有顯著的抗腫瘤活性(表3)。
體內(nèi)研究對針對順鉑抗性細胞的測試化合物組而言，化合物HAQ71具有最低的RF(0.2)，選擇HAQ71及其氯丙基取代類似物進行小鼠體內(nèi)研究，采用在小鼠體內(nèi)作為異種移植生長的腫瘤A2780和A2780/cp70細胞。顯示HAQ71和CAQ75具有顯著的體內(nèi)抗癌活性；兩種化合物在人異種移植的野生型及所得的順鉑抗性腫瘤(A2780/cp70)中發(fā)揮了相似的腫瘤生長延遲作用。而后者很難通過順鉑及其它共價結(jié)合劑治療，它具有以下特征升高的谷胱甘肽水平、藥物攝取/排出的改變以及包括錯配修復(fù)缺陷在內(nèi)的DNA修復(fù)機制的改變。
氨基蒽醌及氯代烷基氨基蒽醌的二-N-氧化物的體外細胞毒性在卵巢癌野生型細胞系A(chǔ)2780、多柔比星抗性2780AD和順鉑抗性2780CP細胞系中研究了新的CAQ的二-N-氧化物和非共價結(jié)合氨基蒽醌的細胞毒性。
全部二-N-氧化物的細胞毒性均明顯低于其母體細胞毒性劑，所述氧化物的IC50值在μM范圍。全部測試試劑的細胞毒性順序為HAQ132N(＞100μm)＜CAQ179N(46μM)＜CAQ181MN(38μM)＜CAQ167MN(36μM)＜CAQ192MN(8μM)。用細胞毒性比(CR＝烷基氨基蒽醌-二-N-氧化物IC50/烷基氨基蒽醌IC50)計算相對活性。在A2780細胞系中，三種二-N-氧化物，HAQ132N、CAQ181MN和CAQ167MN的細胞毒性比其胺對應(yīng)物低1000倍以上。CAQ的細胞毒性比其胺對應(yīng)物低約40-100倍。測得CR的順序為AQ4N(17,000)＞＞HAQ132N(1,450)＞＞CAQ181MN(1293)＞CAQ179N(80)＞CAQ167MN(4167)＞CAQ192MN(44)。
所選化合物的N-氧化物具有非常低的細胞毒性(表4)，有可能作為生物還原性的前體藥物。
表11，4-二取代氨基蒽醌的細胞生長(IC50，nM)抑制作用

表21，4-二取代蒽醌的細胞生長抑制作用

HAQ＝羥基衍生物；CAQ＝氯代衍生物；M＝芥子除非另外說明，所有化合物均為R和S混合物。
除非另外說明，所有化合物均為混合的側(cè)鏈(不對稱)。
IC50為抑制細胞生長50％所需的藥物濃度(nM)。
A2780為野生型卵巢細胞系；A2780/cp70順鉑抗性和2780AD多柔比星抗性變異細胞系。
RF＝藥物抗性系數(shù)(抗性細胞系中的IC50/母細胞系中的IC50)。
表3化合物HAQ71和CAQ75在人卵巢腫瘤異種移植(A2780)和順鉑抗性變異細胞系(A2780/cp70)的雙倍時間下的作用

HAQ＝羥基衍生物；CAQ＝氯代衍生物()＝壽命中位數(shù)(median life span)提高的百分比-計算成腫瘤達到其起始體積兩倍時所經(jīng)過的時間。
化合物HAQ71的劑量為20mg/kg，化合物CAQ75為16mg/kg，二者均為腹腔注射。
表4氨基蒽醌和氯代烷基氨基蒽醌的二-N-氧化物對卵巢癌細胞系的生長抑制作用(IC50)

HAQ＝羥基衍生物；CAQ＝氯代衍生物；N＝N-氧化物；M＝芥子；MN＝芥子的N-氧化物CR＝細胞毒性比(胺的IC50/N-氧化物的IC50)。
權(quán)利要求
1.通式I的蒽醌化合物或其鹽， 其中，R1至R4各自選自H、C1-4烷基、X1、-NHR0N(R5)2和以下式II基團，其中R0為C1-12烷二基，且R5各自為H或任選取代的C1-4烷基， 其中R6、R7和R8中至少一個選自X2、和X2取代的C1-4烷基，而其它為H或C1-4烷基；R9選自H、C1-4烷基、X2、和X2取代的C1-4烷基；m為0或1；n為1或2；X1為鹵原子、羥基、C1-6烷氧基、芳氧基或酰氧基；并且X2為鹵原子、羥基、C1-6烷氧基、芳氧基或酰氧基；條件是R1至R4中至少一個為式II基團。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1和R2各自為式II基團。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R1為式II基團，且R2為NHR0N(R5)2。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中所有R5相同，且為H或CH3。
5.權(quán)利要求2至4之一的化合物，其中R1在蒽醌環(huán)體系的4位，且R2在1位。
6.前述任一權(quán)利要求的化合物，其中R3和R4選自H和羥基。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中R3和R4均為羥基，且在蒽醌環(huán)體系的5位和8位上取代。
8.權(quán)利要求6的化合物，其中R3和R4均為H。
9.前述任一權(quán)利要求的化合物，其中m為1。
10.權(quán)利要求1至8之一的化合物，其中m為0。
11.前述任一權(quán)利要求的化合物，其中n為2。
12.前述任一權(quán)利要求的化合物，其中X2為鹵原子或離去基團。
13.權(quán)利要求12的化合物，其中X2為氯。
14.前述任一權(quán)利要求的化合物，其中或者i)R6為CH2X3且R7為H；或者ii)R6為H且R7為X3其中X3為鹵原子或離去基團。
15.權(quán)利要求14的化合物，其中R6為CH2X3，且R7為H。
16.權(quán)利要求15的化合物，其中n為2，且R9為CH2X3，其中X3與R6中的X3相同。
17.在治療動物的方法中使用的權(quán)利要求9或10和/或權(quán)利要求12的化合物。
18.一種組合物，包括權(quán)利要求9或10和/或權(quán)利要求12的化合物以及賦形劑。
19.權(quán)利要求18的組合物，所述組合物為藥用組合物，且所述組合物中的賦形劑為可藥用的賦形劑。
20.權(quán)利要求9或10和/或權(quán)利要求12的化合物在制備用于治療動物的藥物中的用途。
21.權(quán)利要求20的用途，其中所述動物為人。
22.權(quán)利要求20或21的用途，其中所述動物患有腫瘤，且所述治療為抗腫瘤治療。
23.權(quán)利要求22的用途，其中所述化合物為權(quán)利要求9的化合物，且所述治療還包括細胞毒性劑給藥和/或腫瘤的放射治療。
24.一種合成方法，其中式III化合物 其中R11至R14各自選自H、X4、羥基、C1-4烷氧基、酰氧基、-NHR10N(R15)2基團，其中R10為C1-12烷二基，且R15各自為H或任選取代的C1-4烷基，并且其中X4為鹵原子或離去基團，條件是R11至R14中至少一個為X4；與通式IV的環(huán)狀的氨基烷基胺化合物發(fā)生反應(yīng)， 從而使X4基團在親核取代反應(yīng)中被式V基團代替， 其中或者R16、R17和R18中至少一個選自X5和X5取代的C1-4烷基，而其它為H或C1-4烷基，并且R19選自H、C1-4烷基、X5和X5取代的C1-4烷基X5為羥基或被保護的羥基，或者X5為與X4不同的離去基團或鹵原子，且q為0或1。
25.權(quán)利要求24的方法，其中至少一個X5為羥基或被保護的羥基，并且產(chǎn)物——任選在去保護之后——與鹵化化合物發(fā)生反應(yīng)，用鹵原子代替X5羥基或所有X5羥基。
26.權(quán)利要求25的方法，其中所述鹵化劑為氯化劑。
27.權(quán)利要求24至26之一的方法，其中q為0，并且產(chǎn)物在氮環(huán)原子上被氧化，形成相應(yīng)的氧化胺(q為1)。
28.權(quán)利要求24至28之一的方法，其中R11至R14中的一個為-NHR10N(R15)2基團，并且所述方法包括以下預(yù)先步驟在預(yù)先的親核取代反應(yīng)中，使下述的前體化合物與通式VI的無環(huán)的氨基烷基胺化合物發(fā)生反應(yīng)，所述前體化合物中相應(yīng)的基團X6，其中X6為鹵原子或離去基團H2NR10N(R15)2(VI)所述親核取代反應(yīng)中X6被-NHR10N(R15)2基團代替，其中R15為H或任選取代的C1-4烷基。
29.權(quán)利要求23至26之一的方法，其中R11和R12相同且為X5，并且其中2當量的環(huán)狀的氨基烷基胺化合物IV發(fā)生反應(yīng)，從而兩個X4基團均被所述通式V基團所代替。
30.通式VII的化合物 其中R20為C1-12烷二基，并且，或者R26為CH2Cl且R27為H，或者R26為H且R27為Cl；R29為H，或為與R26相同的基團；R28或所有R28為H，或為與R27相同的基團；并且r為1或2。
31.權(quán)利要求30的化合物，其中R20為(CH2)2。
32.權(quán)利要求30或31的化合物，其中R26為CH2Cl，R27為H，并且R29選自H和CH2Cl。
33.權(quán)利要求30或31的化合物，其中R26為H，R27為Cl，R29為H并且R28為H。
34.權(quán)利要求30至33之一的化合物，其中r為1。
35.權(quán)利要求30至33之一的化合物，其中r為2。
36.合成權(quán)利要求30的化合物的方法，其中通式VIII的羥基取代的環(huán)狀的叔胺被氨基保護，然后發(fā)生氯化，使OH被Cl代替，再去保護得到所需的式VII化合物， 其中R20和r如權(quán)利要求30的定義或者R21為CH2OH且R22為H或者R21為H且R22為OH；R24為H，或為與R21相同的基團R23或所有R23為H，或為與R22相同的基團。
全文摘要
通式(I)的蒽醌化合物或其鹽(式I)，其中，R
文檔編號C07D207/46GK1934079SQ200480041751
公開日2007年3月21日 申請日期2004年12月22日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月23日
發(fā)明者L·H·帕特森, K·波斯, P·H·蒂斯戴爾－斯皮特爾 申請人:索曼塔有限公司