專利名稱：：聯(lián)苯基和萘基-苯基異羥肟酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及具有抗腫瘤和抗血管生成活性的帶有異羥肟基團(tuán)的聯(lián)苯基和苯基-萘基化合物。
背景技術(shù)：
：已經(jīng)報(bào)道了與本文所述化合物類別在結(jié)構(gòu)上有關(guān)的幾種化合物的抗增殖和抗血管生成活性。據(jù)報(bào)道，(6-[3'-(l-金剛烷基)-4'-羥基苯基]-2-萘?xí)跛?AHPN)也稱作CD437)(CancerReasearch，2002;62(8)，2430-6;Blood，2000;95，2672-82;Leukemia,1999,13,739—49;CancerLetters,1999,137，217-2)對視黃酸受體-y(RAR-y)是選擇性的，會抑制乳腺癌、黑素瘤和子宮頸癌細(xì)胞系的細(xì)胞生長和誘導(dǎo)其凋亡，包括那些全反式-維曱酸-(ATRA-)抗性的癌細(xì)胞系，其機(jī)理不依賴于受體結(jié)合(WO9703682;J.Med.Chem.1995，38，4993-5006)。另外，有些與該類化合物有關(guān)的化合物，例如TAC-101(Clin.CancerRes.1999，5，2304-10)或衍生物例如RE-80，AM-580或Am-80(Bur.J.Pharmacol.1993，249,113-6)，已經(jīng)表現(xiàn)出抗血管生成性質(zhì)。最近，已經(jīng)描迷了新化合物，它們是丙烯酸的聯(lián)苯基衍生物(CincinelliR.等，J.Med.Chem.2003，46:909-912和W003/11808)。更具體地，證實(shí)了命名為ST1926的化合物(f-3-(4'-羥基-3'-金剛烷基聯(lián)苯-4-基)丙烯酸)對一大組人腫瘤細(xì)胞具有有效的抗增殖活性。據(jù)報(bào)道，最近開發(fā)的CD437類似物之一，化合物(^)-4-[3'-(l-金剛烷基)-4'-羥基苯基]-3-氯肉桂酸(3-Cl-AHPC)(Dawson,M.I.等J.Med.Chem.2004，47(14)，3518-3536;W00348101)，在體外和體內(nèi)抑制癌細(xì)胞的增殖和誘導(dǎo)其凋亡。專利JP10182583公開了一些對癌細(xì)胞具有誘導(dǎo)分化作用和可以用作治療惡性腫瘤、自身免疫病和皮膚病的藥物的苯基肉桂基異羥肟
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明化合物的特征在于存在異羥肟基團(tuán)，它令人驚奇地賦予化合物顯著的抗腫瘤活性。更具體地，本發(fā)明化合物出乎意料地對變得抗其它已知抗腫瘤化合物的腫瘤細(xì)胞系有活性，所述其它已知抗腫瘤化合物屬于相關(guān)的化學(xué)試劑類別，但是不含有異羥肟基團(tuán)。因此，本發(fā)明的主要目的是，提供式(I)的聯(lián)苯基和苯基-萘基化合物(phenylcinnamohydroxamicacid)衍生物，<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中^R1選自H，金剛烷基，Cl;參R2選自0Me,Cl，CN，和(CH2)n0H，其中n選自0，1和2;或爭R2與它連接的環(huán)一起，形成亞曱基-或亞乙基-二氧基衍生物；參R3選自H和C1;參A是下述二價(jià)基團(tuán)之一[CH-CH](反式)，[CsC]，或與它連接的環(huán)一起，形成萘基。如前所述，本發(fā)明化合物表現(xiàn)出意外的對變得抗其它已知抗胂瘤化合物的腫瘤細(xì)胞系的抗腫瘤活性。優(yōu)選地，它們具有小于5、更優(yōu)選地接近1的抗性指數(shù)?？剐灾笖?shù)是在抗性腫瘤細(xì)胞系上測得的IC50和在敏感腫瘤細(xì)胞系上測得的IC50之間的比[(對抗性腫瘤細(xì)胞系的IC50/對敏感腫瘤細(xì)胞系的IC50)];關(guān)于該值的測定，可以參考標(biāo)題為"生物學(xué)研究"的相應(yīng)部分。下面是一些最優(yōu)選的根據(jù)本發(fā)明的化合物E-3-(4'-羥基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙烯酰胺(ST2782);E-3'[3'-(l-金剛烷基)-4'-羥基-聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺(ST2992);6-[3-1-(金剛烷基)-4-羥基苯基]-萘-2-甲酸N-羥基酰胺(ST2142);6-[3-1-(金剛烷基)-4-甲舉Jl^基]-萘-2-甲酸N-羥基酰胺(ST3259);3-[4-(8-金剛烷-l-基-2，3-二氫苯并[1，4]二喁英-6-基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺(ST3081);(3'-金剛烷-l-基-2-氯-4'-羥基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙烯酰胺(ST3088);E-3-(3'-金剛烷-l-基-4'-甲氧基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙烯酰胺(ST3056);E-3-(4'-羥基甲基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙烯酰胺(ST3258);五-3-(3'-氯-4'-羥基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙烯酰胺(ST3192);[V-甲氧基-聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺(ST"95);[4'-氰基-聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺(ST3604);和A-3-[V-氯聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺(ST3483)。得到的實(shí)驗(yàn)結(jié)果(記載在標(biāo)題為"實(shí)施例"的部分中)證實(shí)，單獨(dú)的和與其它已知的抗腫瘤藥物相組合的式(I)化合物，是可用于治療腫瘤的試劑。本文所述的本發(fā)明的另一個(gè)目的是，通式(I)的化合物和它們在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用。本文所述的本發(fā)明的另一個(gè)目的是，藥物組合物，其含有作為活性成分的式(I)化合物和至少藥學(xué)可接受的賦形劑和/或稀釋劑。本文所述的本發(fā)明的另一個(gè)目的是，通式(I)的化合物和它們的制備方法o本文所述的本發(fā)明的另一個(gè)目的是，含有式(I)化合物作為活性成分的用于治療腫瘤病狀的藥物組合物，其中所述腫瘤選自肉瘤，癌，類癌，骨肺瘤，神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，淋巴系白血病，急性早幼粒細(xì)胞白血病，髓細(xì)胞性白血病，單核細(xì)胞白血病，巨核細(xì)胞白血病和霍奇金病。本文所述的本發(fā)明的另一個(gè)目的是，含有式(I)化合物作為活性成分的用于治療腫瘤病狀的藥物組合物，其中所述腫瘤已經(jīng)表現(xiàn)出對用于相同治療的其它抗腫瘤劑的抗藥性。本文所述的本發(fā)明的另一個(gè)目的是藥物組合物，其含有作為活性成分的式(I)化合物，與一種或多種已知的抗腫瘤劑相組合，其中所述抗腫瘤化合物選自烷化劑，拓樸異構(gòu)酶抑制劑，抗微管蛋白劑，嵌入化合物，抗代謝物，天然產(chǎn)物例如長春花生物堿，鬼臼乙叉甙，抗生素，酶，紫杉烷類，和細(xì)胞分化化合物。在細(xì)胞分化抗腫瘤劑中，優(yōu)選的是全反式維甲酸(ATRA)。本文所述的本發(fā)明的另一個(gè)目的是，式(I)化合物在制備用于治療腫瘤病狀的藥物中的應(yīng)用。本文所述的本發(fā)明的另一個(gè)目的是，式(I)化合物在制備用于治療腫瘤病狀的藥物中的應(yīng)用，其中所述腫瘤已經(jīng)表現(xiàn)出對用于相同治療的其它抗腫瘤藥物的抗藥性。本文所述的本發(fā)明的另一個(gè)目的是，式(I)化合物與一種或多種已知的抗肺瘤劑相組合在制備用于治療腫瘤病狀的藥物中的應(yīng)用。本文所述的本發(fā)明的另一個(gè)目的是，式(I)化合物與全反式維甲酸相組合在制備用于治療急性早幼粒細(xì)胞白血病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的另一個(gè)目的是，制備本發(fā)明的藥物組合物的方法，其包括混合活性成分和至少一種藥學(xué)可接受的賦形劑和/或稀釋劑。本發(fā)明的另一個(gè)目的是，治療遭受上述腫瘤病狀的哺乳動(dòng)物的方法，其包括施用治療有效量的式(I)化合物。"治療有效量"是能在治療對象中有效地達(dá)到醫(yī)學(xué)上希望的結(jié)果的量。藥物組合物可以含有合適的藥學(xué)上可接受的栽體、適合對動(dòng)物給藥的生物相容的介質(zhì)(例如，生理鹽水)，可選地包含有助于將活性化合物加工成可以藥用的制劑的輔料(如賦形劑，穩(wěn)定劑或稀釋劑)?？梢砸匀魏慰山邮艿姆绞脚渲扑幬锝M合物，以滿足給藥模式的需要。在文獻(xiàn)中公開了用于藥物遞送的生物材料和其它聚合物的使用，以及驗(yàn)證特定給藥模式的不同技術(shù)和模型。修飾本發(fā)明的化合物來提高血腦屏障的穿透也是有用的。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以使用和確定任何被接受的給藥模式。例如，給藥可以是通過多種腸胃外途徑，例如皮下的、靜脈內(nèi)的、真皮內(nèi)的、肌肉內(nèi)的、腹膜內(nèi)的、鼻內(nèi)的、透過皮膚的、經(jīng)口的、或含服的途徑。腸胃外給藥可以是通過快速推注或通過隨時(shí)間逐漸灌注。腸胃外給藥制劑包括無菌的含水或不含水溶液、懸浮液、和乳狀液，其可以含有本領(lǐng)域已知的助劑或賦形劑，且可以根據(jù)常規(guī)方法制備。另外，可以施用作為適當(dāng)?shù)挠托宰⑸鋺腋∫旱幕钚曰衔飸腋∫?。合適的親脂溶劑或介質(zhì)包括脂肪油，例如，芝麻油，或合成的脂肪酸酯，例如，油酸乙酯或甘油三酯?？梢院性黾討腋∫赫扯鹊奈镔|(zhì)的含水注射懸浮液包括，例如，羧甲基纖維素鈉，山梨醇，和/或葡聚糖。任選地，懸浮液也可以含有穩(wěn)定劑。藥物組合物包括適合注射給藥的溶液，且含有約0.01-99%、優(yōu)選約20-75%的活性化合物以及賦形劑?？梢灾蹦c給藥的組合物包括栓劑。應(yīng)當(dāng)理解，給藥劑量取決于受體的年齡、性別、健康和體重，并行治療(如果存在的話)的類型，治療頻率，和希望的效果的性質(zhì)。劑量可以為個(gè)體受試者定制，如本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的和可確定的?？梢酝ㄟ^多次劑量或單次劑量，施用每次治療所需的總劑量。本發(fā)明的藥物組合物可以單獨(dú)施用，或與針對該病癥或針對該病癥的其它癥狀的其它治療劑聯(lián)合施用。通常，活性成分的日劑量是0.01-100毫克/千克體重。本發(fā)明的化合物可以在藥學(xué)上可接受的載體(例如生理鹽水)中靜脈內(nèi)地施用給患者。可以使用細(xì)胞內(nèi)遞送肽的標(biāo)準(zhǔn)方法，例如通過脂質(zhì)體遞送。這樣的方法是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員眾所周知的。本發(fā)明的制劑可用于腸胃外給藥，例如靜脈內(nèi)的、皮下的、肌肉內(nèi)的、和腹膜內(nèi)的給藥。如醫(yī)學(xué)領(lǐng)域眾所周知的，任一位患者的劑量取決于許多因素，包括患者的大小，體表面積，年齡，施用的特定化合物，性別，給藥時(shí)間和途徑，一般健康，和同時(shí)施用的其它藥物。在本文引用的所有文獻(xiàn)在本文中整個(gè)通過參考并入本文，包括引用的文獻(xiàn)中所述的所有數(shù)據(jù)、表格、圖和文字。另外，在本文引用的文獻(xiàn)內(nèi)引用的文獻(xiàn)的所有內(nèi)容，也全部通過參考并入本文。對已知方法步驟、常規(guī)方法步驟、已知方法或常規(guī)方法的提及，決不是承認(rèn)本發(fā)明的任何方面、描迷或?qū)嵤┓桨冈谙嚓P(guān)領(lǐng)域中已經(jīng)公開、教導(dǎo)或暗示。理解了本申請公開的方法和產(chǎn)物的特征后，通過查閱現(xiàn)有技術(shù)以及下面的非限制性附圖和描述本發(fā)明的基本細(xì)節(jié)和一些應(yīng)用的實(shí)施例，可以容易地推導(dǎo)出其它步驟的必要性和類型。根據(jù)使用相應(yīng)羧酸作為原料的方法，可以容易地制備出本發(fā)明化合物。根據(jù)W09703682、JP10182583、WO03/11808和相關(guān)出版物記載的操作，或根據(jù)有機(jī)合成的標(biāo)準(zhǔn)操作，可以制備出這樣的相應(yīng)羧酸?？梢允褂迷?實(shí)施例，，部分記栽的簡圖作為簡單參考，可以容易地設(shè)計(jì)特定式(I)化合物的合成。下面的實(shí)施例進(jìn)一步解釋了本發(fā)明，所述實(shí)施例參考引用的附圖。圖l-它顯示了在本申請中已經(jīng)記載了其合成和生物測試的化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。記載的含有異羥肟基團(tuán)的化合物帶有如在實(shí)施例或參照實(shí)施例中所指明的它們的識別號，在括號內(nèi)記載了相應(yīng)羧酸化合物的識別號。通過括號內(nèi)的編號識別的化合物和它們的相應(yīng)生物學(xué)活性數(shù)據(jù)，僅僅為對比目的而記栽。圖2-它顯示了在本申請中已經(jīng)記載了其生物測試、但是在本發(fā)明范圍之外的化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。記載的含有異羥肟基團(tuán)的化合物帶有如在實(shí)施例或參照實(shí)施例中所指明的它們的識別號，在括號內(nèi)記栽了相應(yīng)羧酸化合物的識別號。通過括號內(nèi)的編號識別的化合物和它們的相應(yīng)生物學(xué)活性數(shù)據(jù)，僅僅為對比目的而記載。實(shí)施例實(shí)施例1制備3-(4'-羥基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙烯酰胺(ST2782)根據(jù)下述合成圖1，制備標(biāo)題化合物。合成圖1<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage11</formula>在氮?dú)庀?，?50mg(1.04mmol)E-4-(4-羥基苯基)肉桂酸溶于10mlDMF，然后加入169mg(1.25mmol)羥基苯并三唑水合物和259mg(1.35mmol)l-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽，將這樣得到的溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)。加入鹽酸羥胺(361mg，5.2mmol)后，隨后加入0.72ml(5.2mmol)TEA,將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。在減壓下去除DMF，用水洗滌殘余物，得到263mg粗產(chǎn)物。使用甲醇水50/50作為洗脫液，在反相硅膠(LiChroprepRP-18,Merck)上進(jìn)行快速色鐠純化，得到34mg(13%)標(biāo)題化合物白色固體。熔點(diǎn)>300"CRf=0.2(Merck珪膠60F2"，CH2C12:/MeOH90:10)Rf=0.34(MerckLiChroprepRP-18,Me0H/H2060:40)1HNMR(DMSO"de)S1.74(6H,s，6Ad.);2.04(3H，s，3Ad.);2.12(6H,s，6Ad.);6.44(1H，d,-CH=，J=16.00Hz);6.82(2H,d'2Ar,J=8.19Hz);7.43(1H,d,-CH=,J=16.00Hz);7.48-7.69(5H，m，5Ar);9.00(1H，brs,-CONHOH).9.62(1H，s,隱OH);10.73(1H，brs，-CONHOH).實(shí)施例2制備[3'_(l-金剛烷基)-4'-羥基-聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺(ST2992)根據(jù)下述合成圖2，制備標(biāo)題化合物。合成圖2<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage12</formula>向A-4-(3-(l-金剛烷基)-4-羥基苯基)肉桂酸(2g，5.34畫l)于80mlDMF中的溶液中，加入羥基苯并三唑水合物(866mg，5.34mmol)和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽(1130mg，6.94mmol)。將混合物在室溫?cái)嚢?h。加入鹽酸羥胺(1856mg，26.7mmol)、隨后加入3.7ml(26.7mmol)TEA,將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。在減壓下去除DMF，用水洗滌殘余物，得到5g粗產(chǎn)物。使用二氯甲烷/甲醇95:5作為洗脫液，通過硅膠(磷酸鹽緩沖)快速色譜純化，得到950mg標(biāo)題化合物白色固體。熔點(diǎn)210-212。Cdec.Rf=0.19(Merck珪膠60F254，己烷/EtOAc4:6)1HNMR(DMSO誦de)S:1.73(6H,s，6Ad.);2.04(3H,s，3Ad.);2.13(6H,s，6Ad.);6.46(1H,d，-CH=,J=16.00Hz);6.86(1H，d,1Ar,J=8.19Hz);7.29-7.40(2H,m,2Ar);7.47(1H,d,-CH=,J=16.00Hz);7.52-7.65(4H,m,4Ar);9.03(1H,brs,-CONHOH);9.54(1H，s,-OH);10.75(1H,brs，-CONHOH).實(shí)施例3制備6-[3-1-(金剛烷基)-4-羥基苯基]-萘-2-甲酸N-羥基酰胺(ST2142)根據(jù)下述合成圖3，制備標(biāo)題化合物。合成圖3<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage13</formula>在氮?dú)庀拢瑢?12mg(0.53mmol)6-[3-1-(金剛烷基)-4-羥基苯基]-萘-2-曱酸溶于8mlDMF,然后加入79mg(0.58mmol)羥基苯并三唑水合物和132mg(0.67mmol)1-(3-二曱氨基丙基)-3-乙基-碳二亞胺鹽酸鹽，將這樣得到的溶液在室溫?cái)嚢?小時(shí)。加入鹽酸羥胺(184mg，2.65mmol)、隨后加入0.36ml(2.65mmol)TEA后,將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。在減壓下去除DMF，用水洗滌殘余物，得到150mg粗產(chǎn)物。使用甲醇水85:15作為洗脫液，在反相硅膠(LiChroprepRP-18，Merck)上進(jìn)行快速色譜純化，得到80mg(41%)標(biāo)題化合物白色固體。熔點(diǎn)217-219Cdec.1HNMR(DMSO-d6)S:1.76(6H,s,6Ad.);2.05(3H,s，3Ad.);2.17(6H,s,6Ad.);6.90(1H,d,1Ar,J=8.19Hz);7.41-7.54(2H，m,2Ar);7.77-7.88(2H,m，2Ar);8.02(2H,dd,2Ar,J=2.23，8.93Hz);8.33(1H,s,1Ar);9.57(1H,brs，-CONHOH);11.35(1H,bre,-CONHOH).實(shí)施例4制備3-[4-(8-金剛烷-1-基-2，3-二氫-苯并[l，4]二喁英-6-基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺(ST3081)根據(jù)下述合成圖4，制備標(biāo)題化合物。合成圖4<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage14</formula>在氮?dú)庀?，?0mg(0.144mmol)3-[4-(8-(l-金剛烷基)-2，3-二氫-苯并[1，4]二喁英-6-基)-苯基]-丙烯酸、55mg(0.144mmol)N-[(二曱氨基)-IH-I，2，3-三唑并-[4，5-b]吡啶-l-基-亞甲基]N-甲基methanaminium-六氟磷酸鹽N-氧化物(HATU)和50/iL(0.288mmol)DIPEA溶于1mLDMF。將得到的混合物攪拌2min(預(yù)活化時(shí)間)，然后加入鹽酸羥胺(40mg，0.576mmo1)。將反應(yīng)物在室溫?cái)嚢柽^夜。蒸發(fā)溶劑后，用冰冷卻殘余物，加入水，在室溫?cái)嚢鑜h。過濾所得到的懸浮液，用水和二乙醚洗滌濾液，得到40.5mg(65%)白色固體。溶點(diǎn)211-2131Cdec.Rf=0.6(Merck桂膠60F254，CH2Cl2/MeOH9:1))1HNMR(DMSO-d6)6:1.74(6H,s,6Ad.);2.04(3H，s,3Ad.);2.12(6H,s,6Ad.);4.27(4H,s,CH2-0-);6.47(1H，d，-CH=J=16.00Hz);7.00(1H,s,1Ar);7.03(1H，s,1Ar);7.47(1H,d，-CH=,J=16.00Hz);7.52-7.68(4H,m,4Ar);9.04(1H,brs,-CONHOH);10.75(1H，brs,-CONHOH).實(shí)施例5制備E-3-(3'-金剛烷-1-基-2-氯-4'-羥基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙烯酰胺(ST3088)根據(jù)下述合成圖5，制備標(biāo)題化合物。合成圖5<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage15</formula>在氮?dú)庀?，?mg(0.134mmol)3-[3'-(l-金剛烷基)-2-氯-4'-羥基聯(lián)苯-4-基]-丙烯酸、51mg(0.134mmol)N-[(二甲氨基)-lH-1，2，3-三唑并-[4，5-b]吡啶-l-基-亞甲基]N-曱基metha議inium六氟磷酸鹽N-氧化物(HATU)和47pL(0.288畫l)DIPEA溶于1mLDMF。將得到的混合物攪拌2min(預(yù)活化時(shí)間)。加入鹽酸羥胺(37mg，0.536mmol)，將反應(yīng)另外攪拌90min。蒸發(fā)溶劑后，用冰冷卻殘余物，加入水，在室溫?cái)嚢鑜h。過濾所得到的懸浮液，用水和二乙醚洗滌濾液。使用二氯甲烷/甲醇9:l作為洗脫液，通過硅膠(磷酸鹽緩沖)快速色鐠純化粗產(chǎn)物，得到15mg白色固體。熔點(diǎn)160Cdec.Rf=0.27(Merck硅膠60Fw，CH2Cl2/MeOH95:5)1HNMR(DMSO-d6)S:1.72(6H,s,6Ad.);2.02(3H,s，3Ad.);2.09(6H,s'6Ad.);6.51(1H,d,-CH=,J=16.00Hz);6.84(1H,d，1Ar,J=8.19Hz);7.13(1H,d'1Ar，J=8.93Hz);7.16(1H,s,1Ar);7.36-7.51(2H,m,2Ar);7.56(1H，d，1Ar，J=8.19Hz);7.71(1H,s,1Ar);9.10(1H，bre,-CONHOH);9.58(1H,s，-OH);10.77(1H,brs，隱CONHOH).實(shí)施例6制備E-3-(3'-金剛烷-l-基-4'-甲氧基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙烯酰胺(ST3056)根據(jù)下述合成圖6，制備標(biāo)題化合物。合成圖6<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage16</formula>在氮?dú)庀拢瑢?50mg(1.159mmol)E-3-[3'-(l-金剛烷基)-2-氯-4'-甲氧基聯(lián)苯-4-基]-丙烯酸、529.2mg(1.392mmol)N-[(二曱氨基)-1H-1，2,3-三唑并-[4，5-b]吡啶-l-基-亞曱基]N-甲基methanaminium六氟磷酸鹽N-氧化物(HATU)和404juL(2.32mmol)DIPEA溶于13.5mLDMF。將得到的混合物攪拌30min(預(yù)活化時(shí)間)。加入鹽酸羥胺(161.19mg，2.320m邁ol)和DIEA(404pL，2.320mmol)于4.5mLDMF中的溶液，將反應(yīng)另外攪拌2.211。操作然后用HC1水溶液(pH3-4)酸化反應(yīng)混合物；過濾得到的懸浮液，用HC1水溶液(pH3-4)和水洗滌沉淀。然后，懸浮于熱MeOH中，使它冷卻至室溫，攪拌過夜。過濾得到的懸浮液，用丙酮洗滌，產(chǎn)生350mg白色固體(0.867;產(chǎn)率75%)。Rf=0.27(Merck硅膠60F254，CH2Cl2/MeOH90:10)1HNMR(DMSO-d6)S:1.73(6H，s,6Ad.);2.04(3H,s,3Ad.);2.08(6H，s，6Ad.);6.46(1H,d,-CH=,J=16.11Hz);7.05(1H,d,1Ar，J=9.07Hz);7.35-7.80(6H,m,Ar);9.10(1H,brs，-CONHOH);9.60(1H，s，-OH);10.78(1H,brs，-CONHOH).ES-MS:402.48[M-H]-and426.38[M-Na]+.實(shí)施例7制備E-3-(V-羥基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙炔酰胺根據(jù)下述合成圖7，制備標(biāo)題化合物。合成圖7<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage17</formula>在氮?dú)庀?，?0mg(0.17咖ol)(4'-羥基聯(lián)苯-4-基)-丙炔酸溶于13jilDMF中，然后加入1.2mLCH2C12，在Ot:冷卻溶液。緩慢加入33pL(0.38mmol)草酰氯后，在0X:攪拌溶液40min。在01q滴加mg(0.68mmo1)鹽酸鞋胺和148jliL(1.06mmol)TEA于0.7mLTHF/H206:1中的溶液，然后在0匸攪拌混合物1.5h。加入CH2C12后，用HC12N洗滌有機(jī)層，用Na2S04干燥，過濾，蒸發(fā)，得到30mg黃色固體。使用水/曱醇l:l作為洗脫液，通過反相快速色譜((LiChroprepRP-18，MERCK)純化，得到15mg(35%)標(biāo)題化合物白色固體。Rf=0.3(Merck硅膠60F254，CH2C12:/MeOH90:10)1HNMR(DMSO-d6)S:6.85(2H,d,2Ar，J=8.93Hz);7.50(2H，d,2Ar,J=8.93Hz);7.65-7.85(4H,m，4Ar);9.75(1H,brs,-CONHOH);10.50(1H，brs,-GONHOH).實(shí)施例8制備f-3-[4'-羥基曱基聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺(ST3258)才艮據(jù)下述合成圖8，制備標(biāo)題化合物。合成圖8<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage17</formula>在氮?dú)庀拢瑢?0mg(0.28mmol)E-4-羥基甲基苯基肉桂酸溶于3mlDMF，然后加入107mg(0.28mmol)HATU和97pL(0.56mmol)DIPEA，將這樣得到的溶液在室溫?cái)嚢?min。加入鹽酸羥胺(22mg，0.31mmol)后，將混合物在室溫?cái)嚢?h。在減壓下去除DMF,用水洗滌殘余物，過濾后得到48mg白色固體。熔點(diǎn)220-223iCdec.Rf=0.6(Merck硅膠60F254，CH2C12:/MeOH90:10).1HNMR(DMSO-d6)5:4.51(2H'd，-CH2-，J=5.58Hz);5.20(1H，t，-OH,J=5.58Hz);6.47(1H，d，-CH=，J=16.00Hz);7.38(2H，d,2Ar,J=7.82Hz);7.47(1H,d,-CH=，J=16.00Hz);7.54-7.77(6H，m，6Ar);9.03(1H，bre,-CONHOH);10.75(1H，brs,-CONHOH).實(shí)施例9制備E-3-[3'-氯-4'-羥基聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺(ST3192)根據(jù)下述合成圖9，制備標(biāo)題化合物。合成圖9在氮?dú)庀?，?05mg(O.75mmol)E-3-氯-4-羥基苯基肉桂酸溶于7.5mlDMF,然后加入285mg(0.75mmol)HATU和97(0.56mmol)DIPEA，將這樣得到的溶液在室溫?cái)嚢?min。加入鹽酸羥胺(261mg，3.75mmol)后，將混合物在室溫?cái)嚢?天。在減壓下去除DMF，用水洗滌殘余物，過濾后得到140mg粗產(chǎn)物。使用水/甲醇1:l作為洗脫液，通過反相快速色鐠((LiChroprepRP-18,MERCK)純化，從二乙醚結(jié)晶，得到21mg標(biāo)題化合物白色固體。18熔點(diǎn)172-1751C.Rf=0.16(RP18MERCK,H20/MeOH1:1).1HNMR(DMSO"d6)5:6.48(1H,d,-CH=，J=15.63Hz);7.05(1H,d,1Ar,J=8.93Hz);7.40-7.74(7H,m,7Ar);9.03(1H，brs,畫CONHOH);10.50(1H,brs,國CONHOH).實(shí)施例10制備6-[3-1-(金剛烷基)-4-甲氧基苯基]-萘-2-甲酸N-羥基酰胺(ST3259)根據(jù)下述合成圖10，制備標(biāo)題化合物。合成圖10<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage19</formula>將6-(3-金剛烷基-4-羥基苯基)萘甲酸甲酯(506mg，1.23mmol)加入冰冷卻的NaH(80mg,60%)于無水DMF中的懸浮液中，在Ot:攪拌混合物l小時(shí)，然后加入245mg(1.7nimo1)CH3I，在室溫放置90fflin。用80ml冷水吸收，用CH2Cl2重復(fù)萃取、然后用EtOAc萃取，干燥，并蒸發(fā)合并的有機(jī)相，色譜(硅膠，己烷/Et0Ac9/l)產(chǎn)生300mg6-(3-金剛垸基-4-甲氧基苯基)萘甲酸甲酯。將該化合物(235mg)懸浮于1MNaOH于MeOH中的溶液中，將混合物回流8h。蒸發(fā)，用水吸收，加入HC1，過濾，產(chǎn)生227mg6-(3-金剛烷基-4-甲氧基苯基)萘?xí)跛?，熔點(diǎn)〉3001C。在氮?dú)庀?，將該化合?100mg，0.24mmol)溶于2.4mlDMF，然后加入92mg(0.24mmol)HATU和0.2ml(1.21mmol)DIPEA,將這樣得到的溶液在室溫?cái)嚢?min。加入鹽酸羥胺(84mg，1.21mmol)后，在室溫?cái)嚢杌旌衔?h。在減壓下去除DMF，用水洗滌殘余物，過濾后得到111mg粗產(chǎn)物，通過快速色譜(硅膠，Me0H/H2085:15)純化，溶點(diǎn)222C。1hNMR:(dmso"d,1.76(s，6H，Adam.)，2.03(s，3H,Adam),2.14(s,6H，Adam)，3.86(s，3H,OCH3)，7.12(d,1H,1Ar,J=8.56)，7.57(d,1H,1Ar,J=1.86),7.65(dd,1H,1Ar，J=1.86，8.93),7.83(dd,1H,1Ar,J=8,56,1.86)，7.88(dd，1H,1Ar,J=8.56，1.86)，8.00~8.10(m,2H,2Ar),8.19(s,1H，1Ar)，8.35(s,1H,1Ar),9,40(s，1H),11.35(s,1H).實(shí)施例11制備E-3-[4'-氯聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺(ST3483)根據(jù)下述合成圖11，制備標(biāo)題化合物。合成圖11<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage20</formula>向61mg(0.22mmol)3-(4-氯聯(lián)苯基)丙烯酸和26mg(0.22mmol)0-四氬吡喃基羥胺于3mlTHF中的混合物中，加入0.45ml(0.46mmol)六二甲基珪氮烷鋰(lithiumhexadimethylsilazane)，在氮?dú)庀聰嚢杌旌衔?0min，然后用NH4C1溶液淬滅反應(yīng)。達(dá)到室溫后，用EtOAc萃取混合物，蒸發(fā)萃取物，產(chǎn)生79mg3-(4-氯聯(lián)苯基)丙烯酸的2-四氫吡喃基氧酰胺。將該化合物(79mg，0.22mmol)溶于3mlMeOH,加入12mg(0.066mmol)對甲苯磺酸一水合物，在室溫?cái)嚢杌旌衔?天。過濾，用MeOH洗滌，產(chǎn)生3-(4-氯聯(lián)苯基)丙烯酸的羥基酰胺。熔點(diǎn)200-202X:，Rf=0.6(TLCMerck硅膠，CH2Cl2/MeOH95/5)，1HNMR(DMSO-d6)S:6.50(s,1H,"CH=J=16.00Hz),7.49(s，1H,-CH=，J=16.00Hz),7.50-7.75(m，8H,8Ar)，9.10(s,1H),10.50(s，1H).實(shí)施例12制備E-3-[4'-曱氧基-聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺(ST3595)根據(jù)下述合成圖12，制備標(biāo)題化合物。合成圖12<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage21</formula>將200mg(0.83薩ol)4-溴肉桂酸甲酯溶于無水甲苯中，加入29mg(0.025mmol)Pd(PPh》"152mg(0.91畫l)4-甲氧基苯硼酸于0,5mlEtOH中的溶液、1.66ml2MNa2C03水溶液，回流2h。加入EtOAc，用水洗滌，然后用鹽水洗滌，過濾，用95/5至8/2的己烷/EtOAc混合物進(jìn)行快速色鐠(Merck硅膠)，產(chǎn)生112mg3-(4-甲氧基聯(lián)苯基)丙烯酸甲酯，熔點(diǎn)175-177X:。在-78。C冷卻上述化合物(110mg，0.41mmol)和2-四氫吡喃基-O-羥胺(48mg，0.41mmol)于6mlTHF中的溶液，加入0.81ml六甲基二硅氮烷鈉，攪拌2小時(shí)，然后在-20lC加熱，再在-78C冷卻，用冊4C1淬滅，用Ac0Et萃取，蒸發(fā)萃取物，產(chǎn)生145mg3-(4-甲氧基聯(lián)苯基)丙烯酸的2-四氫吡喃基氧酰胺，為黃色固體。用23mg(0.12mmol)對曱苯磺酸處理上面化合物(145mg，0.41mmol)于5mlMe0H中的溶液，在室溫?cái)嚢?4h，過濾，用Me0H洗滌，產(chǎn)生50mg3-(4-甲氧基聯(lián)苯基)丙烯酸羥基酰胺，熔點(diǎn)199TC(dec)，Rf=0.2(CH2Cl2/MeOH95/5)，'HNMR:(DMSO-d6):3.80(s,3H,OMe),6.47(d,1H，-CH=，J=15.6Hz),7.03(d，2H,2Ar,J=8.9Hz)，7.48(d，1H,CH=，J=15.6Hz)，7.56-7,73(m'6H,6Ar),9.05(s，1H),10.76(s,1H).實(shí)施例13制備E-3-[《-氰基-聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺(ST3604)根據(jù)下述合成圖13，制備標(biāo)題化合物。合成圖13,CONHOH將820mg(3.4mmol)4-溴肉桂酸甲酯溶于7ml無水甲苯中，加入116mg(0.1mmol)Pd(PPh3)4、374mg(1.1mmol)4-氰基苯硼酸于2mlMeOH中的溶液、6.8ml2MNa2C03水溶液，回流9h。加入EtOAc，用水洗涂，然后用鹽水洗滌，過濾，用己烷/EtOAc混合物9/1進(jìn)行快速色鐠(Merck硅膠)，產(chǎn)生273mg3-(4-氰基聯(lián)苯基)丙烯酸甲酯，熔點(diǎn)150-152iC。在-78r冷卻上迷化合物(270mg，1.02mmol)和2-四氫吡喃基一0-羥胺(117mg，1.02mmol)于14mlTHF中的溶液，加入1.07ml六曱基二硅氮烷鈉，攪拌2小時(shí)，然后在刁or:加熱，再在-wx:冷卻，用NHX1淬滅，用AcOEt萃取，蒸發(fā)萃取物，用己烷/EtOAc6/4色譜處理(Merck硅膠)，產(chǎn)生189mg3-(4-氰基聯(lián)苯基)丙烯酸的2-四氫吡喃基氧酰胺，白色固體，熔點(diǎn)211-2131C。用30mg(0.16mmol)對甲苯磺酸處理上面化合物(187mg，0.54mmol)于5mlMeOH中的溶液，在室溫?cái)嚢?4h,過濾，用MeOH洗滌，產(chǎn)生96mg3-(4-氰基聯(lián)苯基)丙烯酸羥基酰胺，熔點(diǎn)212-214"C，Rf=0.3(CH2Cl2/MeOH95/5)，1h隨:(dmso嚇6.54(d,1H,-CH=，J=15.3Hz),7.51(d,1H,CH=,J=15,3Hz)，7.69(d，2H,2Ar,J=8.2Hz),7.82(d,2H，2Ar，J=8.2Hz),7.8-8.0(m,4H,6Ar),9.05(s,1H,NH),10.80(s,1H，OH).參照實(shí)施例在這部分中，我們報(bào)道了一些化合物的合成，它們已經(jīng)為對比目的被合成并進(jìn)行了測試，以便顯示要求保護(hù)的化合物勝過它們最接近的同系物的優(yōu)越性和優(yōu)點(diǎn)。參照實(shí)施例1制備N-羥基-3-(4'-羥基聯(lián)苯-4-基)-丙酰胺(ST3208)根據(jù)下述合成圖1R，制備標(biāo)題化合物。合成圖1R<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage23</formula>在氮?dú)庀?，?68mg(1.5mmol)3-(4'-羥基聯(lián)苯-4-基)-丙酸溶于15mlDMF中，然后加入568mg(1.5mmol)HBTU和1.23ml(7.5mmol)DIPEA，將這樣得到的溶液在室溫?cái)嚢?0min。加入鹽酸羥胺(521mg，7.5mmol)后，將混合物在室溫?cái)嚢?.5h。在減壓下去除DMF,向殘余物加入水，在0C攪拌15min，過濾后得到354mg白色固體(92%)。熔點(diǎn)180-182*C.Rf=0.1(Merck硅膠60F254，CH2C12:/MeOH95:5)1HNMR(DMSO<i6)S:2.27(2H,d，-CHr,J=7.82Hz);2.81(2H,d，"CH2-,J=7.82Hz);6.82(2H,d,2Ar，J=8.93Hz);7.22(2H,d,2Ar,J=8.19Hz);7.40-7.55(4H,m,4Ar);8.75(1H，brs,-CONHOH);9.55(1H，bre,-CONHOH);10.45(1H，brs,-OH).參照實(shí)施例2制備E-3-(聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙烯酰胺(ST3256)根據(jù)下述合成圖2R，制備標(biāo)題化合物。合成圖2R<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage24</formula>在氮?dú)庀?，?00mg(0.89mmol)E-4-苯基肉桂酸溶于9mlDMF中，然后加入338nig(0.89mmol)HATU和308juL(1.78mmol)DIPEA，將這樣得到的溶液在室溫?cái)嚢?min。加入鹽酸羥胺(68mg，0.98mmol)后，將混合物在室溫?cái)嚢?h。在減壓下去除DMF，用水洗滌殘余物，過濾后得到220mg白色固體。熔點(diǎn)>168-170r.Rf-0.6(Merck桂膠60F254，CH2C12:/MeOH90:10)1HNMR(DMSO"de)S6.48(1H,d，-CH=J=16.00Hz);6.30-7.75(10H，m,9Ar+-CH=);9.05(1H,brs,-CONHOH).10.50(1H，brs,-CONHOH).參照實(shí)施例3制備^-3-[4'-羥基聯(lián)苯-3-基]-N-羥基丙烯酰胺(ST3284)根據(jù)下述合成圖3R，制備標(biāo)題化合物。合成圖3R<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage24</formula>在氮?dú)庀?，?0mg(0.29mmol)(4'-羥基聯(lián)苯-3-基)-丙烯酸溶于3mlDMF中，然后在OX:加入109mg(0.29mmol)HBTU和100(0.57mmol)DIPEA。5min后，加入鹽酸羥胺(20mg，0.29mmol),將混合物在O匸攪拌10min,然后在室溫?cái)嚢?h。在減壓下去除DMF，用水洗滌殘余物，過濾后得到73mg粗產(chǎn)物。使用CH2Cl2/MeOH95:5作為洗脫液，在KH2P04緩沖的硅膠上快速色語純化，得到24mg標(biāo)題化合物白色固體。熔點(diǎn)127-1281C.Rf-0.26(Merck珪膠60F254，CH2C12:/MeOH90:10)1HNMR(DMSO-d6)S:6.51(1H，d,-CH=,J=16Hz);6.85(2H，d，2Ar，J=8.93Hz);7.35-7.80(7H,m，6Ar+-CH=);9.03(1H,brs，-CONHOH);9.60(1H，brs,-OH);10.50(1H,brs,-CONHOH).參照實(shí)施例4制備E，E-5-聯(lián)苯基-戊二烯酸N-羥基酰胺(ST3400)根據(jù)下述合成圖4R，制備標(biāo)題化合物。合成圖4R<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage25</formula>在氮?dú)庀?，?68mg(0.7mmol)A聯(lián)苯基-戊二烯酸(根據(jù)L.M.Werbel等J.Med.Chem.10，366(1967)制備)溶于7ml,，然后加入267mg(0.7mmol)HBTU和245(0.56mmol)DIPEA，將這樣得到的溶液在室溫?cái)嚢?0min。加入鹽酸羥胺(54mg，0.77mmol)后，將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。在減壓下去除DMF，用水洗涂殘余物，過濾后得到53mg產(chǎn)物。1hnmr:(DMSO-d6)S:6.02(s,1H,-CH=,J=14.89Hz),6.90-7.40(m，3H)，7.40(m，1H,1Ar)，7.45-7.50(m，2H,2Ar),7.60-7.75(m,6H,6Ar),9.00(s，1H)，10.75(s,1H).參照實(shí)施例5制備E-3-[4'-二甲氨基聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺(ST3444)根據(jù)下述合成圖5R，制備標(biāo)題化合物。合成圖5R.CONHOH在氮?dú)庀?，?5mg(0.13mmol)(4-二甲氨基苯基)肉桂酸(通過4-二甲氨基-溴苯與4-溴肉桂酸甲酯的Suzuki反應(yīng)，隨后水解酯來制備)溶于l.3mlDMF，然后加入55mg(O.14mmol)HBTU和43|iL(0.26mmol)DIPEA，將這樣得到的溶液在室溫?cái)嚢?0min。加入鹽酸羥胺(IOmg，0.14mmol)后，將混合物在室溫?cái)嚢柽^夜。在減壓下去除服F，用水洗滌殘余物，過濾、干燥和用醚吸收后，得到25mg產(chǎn)物，熔點(diǎn)260-2631C(dec).1HNMR:(DMSO"de)S:2.95(s,6H,N(CH3)2),6.44(s,1H,-CH=,J=16.38Hz),6.80(d，2H,2Ar，J=8.93Hz)，7.46(d，1H,CH=，J=16Hz),7.52-7.70(m,6H，6Ar),9.00(s，1H),10.75(s，1H).生物學(xué)研究細(xì)胞毒性結(jié)果本文記栽了一些含有異羥肝酸基團(tuán)的聯(lián)苯基和苯基萘基化合物的細(xì)胞毒性作用。這些分子具有不同于含有羧酸基團(tuán)的相應(yīng)化合物的藥理學(xué)特征。在圖1中，記載了測試的本發(fā)明化合物和含有羧酸基團(tuán)的相應(yīng)化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)。為了測試化合物對細(xì)胞生長的影響，使用了NB4人早幼粒細(xì)胞白血病、NCI-H460非小細(xì)胞癌細(xì)胞、H460/(R9A)(對含有羧酸的化合物ST1898，ST1926,ST1964是抗性的)、HCT-116人結(jié)腸癌細(xì)胞、IGR0V-1和IGR0V-1/Pt(分別是敏感的卵巢癌和鉑抗性的卵巢癌細(xì)胞)。NB4和NCI-H460腫瘤細(xì)胞生長在含有10。/。胎牛血清(GIBC0)的RPMI1640中，而HCT-116腫瘤細(xì)胞生長在含有10%胎牛血清(GIBCO)的McCoy氏5A中，IGR0V-1和IG,-1/Pt生長在含有10%胎牛血清(GIBC0)的DMEM中。將腫瘤細(xì)胞以約10%匯合接種在96-孔組織培養(yǎng)板(Corning)中，使其貼壁和恢復(fù)至少24h。然后，將不同濃度的藥物加入每個(gè)孔中，計(jì)算它們的IC50值(抑制50。/。細(xì)胞存活的濃度)。將平板在37C溫育24h。在處理結(jié)束時(shí)，對于懸浮的NB4腫瘤細(xì)胞，如下進(jìn)行操作通過在1600xg離心平板10min，去除培養(yǎng)基，去除上清液。加入250julPBS，然后在1600xg離心平板10min，去除上清液。加入200pi1/孔的含有10%FCS的培養(yǎng)基RPMI1640,在37X:溫育平板另外48h。再次在1600xg離心平板10min，去除培養(yǎng)基，加入200ja1PBS和50n1冷80%TCA。在冰上溫育平板至少1h。去除TCA,在蒸餾水中浸沒洗滌平板3次，在紙上于40X:干燥5min。然后，加入200jul于1%醋酸中的0.4y。sulphorodamineB。在室溫溫育平板另外30min。去除SulphorodamineB，在1%醋酸中浸沒洗滌平板3次，然后在紙上于40C干燥5min。然后加入200n1Tris10mM，保持?jǐn)嚢杵桨?0min。存活細(xì)胞測定是通過Multiskan熒光分光光度計(jì)測量在540nm的光密度。對于貼壁的腫瘤細(xì)胞(NCI-H460和HCT-116)，操作如上所述，例外是，在處理結(jié)束時(shí)，通過移動(dòng)上清液并加入PBS3次而不離心來洗滌平板。另外，在測定的最后一天，不離心去除上清液。將殺死的細(xì)胞的量計(jì)算為，與對照培養(yǎng)物相比，sulphorodamineB結(jié)合的百分比降低。用"ALLFIT"程序計(jì)算ICs。值(抑制50%細(xì)胞存活的濃度)。抗性的腫瘤細(xì)胞系NCIH460R9A是選擇對ST1926抗性的克隆(表3)。為了得到抗性的腫瘤細(xì)胞系，用2juMST1926處理敏感的NCI-H460腫瘤細(xì)胞24小時(shí)，維持在不含藥物的培養(yǎng)基中恢復(fù)7天。然后，應(yīng)用2jaM(10xICJST1926的連續(xù)選擇壓力，培養(yǎng)存活的細(xì)胞。將抗性的NCI-H460細(xì)胞繼代培養(yǎng)3-4次，然后將ST1926濃度增加至4jliM(20xIC5。)。將存活的細(xì)胞接種在96-孔平板中，分離抗性細(xì)胞克隆，并維持在含有4pMST1926的完全培養(yǎng)基中。將腫瘤細(xì)胞系維持至少l周，然后接種進(jìn)不含藥物的培養(yǎng)基中，進(jìn)行SRB細(xì)胞毒性測定。令人驚奇地，相對于含有羧酸基團(tuán)的相應(yīng)化合物(分別是ST2188和ST1898)，異羥肟衍生物ST2782和ST3056表現(xiàn)出提高的對不同肺瘤細(xì)胞系的抗增殖活性(表l)。與ST2188相比，ST2782活性的差異是顯著的。表l:不同化合物對NB4、IGR0V-1和IGR0V-1/Pt腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性<tablet>complextableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>另外，異羥將衍生物ST2782,ST2992,ST3081,ST3088,ST3056,SH1"表現(xiàn)出顯著的對不同腫瘤細(xì)胞的抗增殖活性(表2)。表2:不同化合物對NCI-H460、HCT-116、IGR0V-1和IG磨-1/Pt肺瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性<table>complextableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>令人驚奇地，這些化合物作為細(xì)胞毒性劑對于經(jīng)選擇抗含有羧酸基團(tuán)的化合物(ST1898，ST1926,ST1964)的肺癌細(xì)胞系H460/(R9A)也是有效的。為了評價(jià)化合物對存活細(xì)胞的作用，4吏用了sulphorodamineB測試。將殺死的細(xì)胞的量計(jì)算為，相對于對照培養(yǎng)物sulphorodamineB結(jié)合的百分比降低。用"ALLFIT"程序計(jì)算IQ值(抑制50%細(xì)胞存活的濃度)。如表3所示，盡管含有羧酸基團(tuán)的相應(yīng)化合物(例如ST1926,ST1964(CD437)，ST1898)對H460/R9A的有效性低34-78倍，異羥肝衍生物(例如ST2142，ST2992,ST3056)完全克服了該抗性，從而證實(shí)選擇的化合物與相應(yīng)羧酸化合物具有特殊的藥理學(xué)差異。令人感興趣地，ST2782,ST3081和ST3088保留了相同的特性。表3:不同化合物對NCI-H460、NCI-H460R9A腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒性<table>complextableseeoriginaldocumentpage２９</column></row><table>R.I.[RI=抗性指數(shù)(對抗性腫瘤細(xì)胞系的IC50/對敏感腫瘤細(xì)胞系的IC50)]細(xì)胞分化活性結(jié)果急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)是急性髓細(xì)胞性白血病的一種形式，其具有典型的染色體易位，導(dǎo)致涉及核視黃酸受體(RAR)的異常融合蛋白的表達(dá)。這些融合蛋白起癌基因的作用，且負(fù)責(zé)分化阻斷和白血病克隆的擴(kuò)充。在大多數(shù)APL患者中，易位涉及染色體15和17，并導(dǎo)致早幼粒細(xì)胞白血病(PML)-RARa的合成。APL是大量研究的目標(biāo)，因?yàn)樗砜捎眉?xì)胞分化方案治療的腫瘤性疾病的唯一實(shí)例。用全反式維甲酸(ATRA)誘導(dǎo)APL患者進(jìn)入臨床緩解，所述ATRA會迫使白血病母細(xì)胞獲得終末分化的中性粒細(xì)胞的許多特征。這些特征包括短壽命和經(jīng)歷程序性細(xì)胞死亡或細(xì)胞凋亡的天然過程的傾向。盡管在APL患者中獲得的成功已經(jīng)引起了臨床上使用ATRA治療白血病和其它腫瘤性疾病的熱忱，該化合物的治療功效仍然受到抗性和毒性等問題的煩累。一種可能的增加ATRA治療指數(shù)的策略是，開發(fā)比單一組分更有力且容易耐受的基于ATRA的藥理學(xué)組合。在白血病母細(xì)胞的原代培養(yǎng)物中，和在衍生的NB4細(xì)胞系(它是研究ATRA和衍生物的藥理學(xué)活性的獨(dú)特模型)中，可以再現(xiàn)ATRA在APL細(xì)胞中開啟的分化程序的相關(guān)方面。藥理學(xué)濃度的ATRA會阻止NB4母細(xì)胞的生長，并使它們分化成與成熟的中性粒細(xì)胞類似的細(xì)胞。此后是緩慢的細(xì)胞凋亡過程。如表3中所記載的，我們使用NB4細(xì)胞來證實(shí)，這樣的不同的化合物會增強(qiáng)ATRA的藥理學(xué)活性。更具體地，通過硝基藍(lán)四唑(NBT)還原，測定化合物誘導(dǎo)的NB4腫瘤細(xì)胞的分化。以150000細(xì)胞/ml的密度，將NB4早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞接種進(jìn)含有10%FCS的RPMI1640培養(yǎng)基中。為了測量分子的細(xì)胞分化作用，從至少0.4pM-O.OlpM開始，用不同濃度的化合物處理胂瘤細(xì)胞，而為了測量分子對ATRA活性的增強(qiáng)作用，在有或沒有次優(yōu)濃度(5nM)的ATRA存在下，用遞增濃度的分子處理NB4細(xì)胞。在37C，溫育肺瘤細(xì)胞3天，不更換培養(yǎng)基。為了測量促分化作用，收集500，000細(xì)胞，離心，重新懸浮于1ml含有10%FCS、1mg/ml硝基藍(lán)四唑(NBT)和100ngPMA(4-佛波醇-12-肉豆蔻酸酯-13-醋酸酯)的RPMI1640培養(yǎng)基中。在37。C，溫育重新懸浮的腫瘤細(xì)胞60min。在溫育結(jié)束時(shí)，離心肺瘤細(xì)胞，將沉淀重新懸浮于1ml含有10%TritonxlOO的PBS中。超聲處理樣品，用分光光度計(jì)在nm測定吸光度。將腫瘤細(xì)胞分化的AC50(活化濃度)，評價(jià)為在有或沒有ATRA時(shí)，產(chǎn)生NBT-還原活性的最大誘導(dǎo)的50%的化合物濃度。如表4所示，化合物單獨(dú)不能誘導(dǎo)NB4腫瘤細(xì)胞分化，但是當(dāng)它們與次優(yōu)濃度的ATRA(5nM)相組合時(shí)，有些分子增強(qiáng)了ATRA-誘導(dǎo)的分化。最有效的化合物是ST2992，它的AC50值是0.19pM，與ST2142(AC50-0.31jaM)相當(dāng)，其次是ST2782，AC50值為2.47jjM。令人驚奇地，最接近的類似物(ST1926，ST1964,ST3444,ST3256,ST3400)都沒有表現(xiàn)出類似的結(jié)果。表4:異羥肝衍生物對于ATRA對NB4腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞分化活性的增強(qiáng)劑效應(yīng)<table>complextableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>權(quán)利要求1.式(I)化合物，其中●R1選自H，金剛烷基，Cl；●R2選自O(shè)Me，Cl，CN，和(CH2)nOH，其中n選自0，1和2；或●R2與它連接的環(huán)一起，形成亞甲基-或亞乙基-二氧基衍生物；●R3選自H和Cl；●A是下述二價(jià)基團(tuán)之一[CH＝CH](反式)，[C≡C]，或與它連接的環(huán)一起，形成萘基。2.權(quán)利要求1的式(I)化合物，它選自(4'-羥基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙烯酰胺；5-3-[3'-(l-金剛烷基)-4'-羥基-聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺；6-[3-1-(金剛烷基)-4-羥基苯基]-萘-2-甲酸N-羥基酰胺；6-[3-1-(金剛烷基)-4-甲氧基苯基]-萘-2-甲酸N-羥基酰胺；3-[4-(8-金剛烷-l-基-2，3-二氫苯并[1，4]二噍英-6-基)-苯基]-N-羥基-丙烯酰胺；(3'-金剛烷-l-基-2-氯-4'-羥基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙烯酰胺；E-3-(3'-金剛烷-1-基-4'-甲氧基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙烯酰胺；(4'_羥基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙炔酰胺；&3一(4'-羥基甲基-聯(lián)苯—4-基)-N-羥基-丙烯酰胺；^-3-(3'-氯-4'-羥基-聯(lián)苯-4-基)-N-羥基-丙烯酰胺；f-3-[4'-甲氧基-聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺；5-3-[4'-氰基-聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺；和f-3-[4'-氯聯(lián)苯-4-基]-N-羥基-丙烯酰胺。3.制備根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物的方法，其包括，使相應(yīng)羧酸與鹽酸羥胺反應(yīng)。4.作為藥物的權(quán)利要求1或2的化合物。5.藥物組合物，其含有作為活性成分的權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)的化合物，和至少一種藥學(xué)可接受的賦形劑和/或稀釋劑。6.用于治療腫瘤病狀的根據(jù)權(quán)利要求5的組合物。7.用于治療胂瘤病狀的根據(jù)權(quán)利要求5的組合物，其中所迷腫瘤已經(jīng)表現(xiàn)出對用于相同治療的其它抗腫瘤藥物的抗藥性。8.根據(jù)權(quán)利要求5-7中任一項(xiàng)的的組合物，其中所述腫瘤病狀選自肉瘤，癌，類癌，骨腫瘤，神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，淋巴系白血病，急性早幼粒細(xì)胞白血病，髓細(xì)胞性白血病，單核細(xì)胞白血病，巨核細(xì)胞白血病和霍奇金病。9.根據(jù)權(quán)利要求5-8中任一項(xiàng)的組合物，其中所述活性成分與一種或多種已知的抗腫瘤劑相組合。10.根據(jù)權(quán)利要求9的組合物，其中所述已知的抗腫瘤劑選自烷化劑，拓樸異構(gòu)酶抑制劑，抗微管蛋白劑，嵌入化合物，抗代謝物,天然產(chǎn)物例如長春花生物堿，鬼臼乙叉甙，抗生素，酶，紫杉烷類，和細(xì)胞分化化合物。11.根據(jù)權(quán)利要求10的組合物，其中所述細(xì)胞分化抗腫瘤化合物是全反式維甲酸。12.制備根據(jù)權(quán)利要求5-11中任一項(xiàng)的組合物的方法，其包括，混合活性成分和至少一種藥學(xué)可接受的賦形劑和/或稀釋劑。13.根據(jù)權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)的化合物在制備具有抗腫瘤活性的藥物中的應(yīng)用。14.根據(jù)權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)的化合物在制備用于治療腫瘤病狀的藥物中的應(yīng)用，其中所述腫瘤已經(jīng)表現(xiàn)出對用于相同治療的其它抗腫瘤藥物的抗藥性。15.根據(jù)權(quán)利要求13或14的應(yīng)用，其中所述腫瘤選自肉瘤，癌，類癌，骨腫瘤，神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，淋巴系白血病，急性早幼粒細(xì)胞白血病，髓細(xì)胞性白血病，單核細(xì)胞白血病，巨核細(xì)胞白血病和霍奇金病。16.根據(jù)權(quán)利要求15的應(yīng)用，其中所述腫瘤是急性早幼粒細(xì)胞白血病。17.根據(jù)權(quán)利要求13或14的應(yīng)用，其中所述化合物與一種或多種已知的抗腫瘤劑相組合。18.根據(jù)權(quán)利要求17的應(yīng)用，其中所述已知的抗腫瘤劑是全反式維曱酸。19.治療遭受根據(jù)權(quán)利要求13-16中任一項(xiàng)的疾病的哺乳動(dòng)物的方法，其包括，施用治療有效量的權(quán)利要求1或2中任一項(xiàng)的化合物。全文摘要本發(fā)明公開了具有抗腫瘤和抗血管生成活性的帶有異羥肟基團(tuán)的聯(lián)苯基和苯基-萘基化合物。這些化合物因此特別適用于治療抗藥性腫瘤。文檔編號C07C259/06GK101198586SQ200680021008公開日2008年6月11日申請日期2006年5月31日優(yōu)先權(quán)日2005年6月28日發(fā)明者C·皮薩諾,F·祖尼諾,G·詹尼尼,L·梅利尼,L·韋希,S·彭科,S·達(dá)拉瓦萊申請人:希格馬托制藥工業(yè)公司