專利名稱：：抗cd3抗體組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及抗CD3抗體的組合物和制劑，以及這類組合物和制劑的使用方法。
背景技術(shù)：
：已經(jīng)證實，T細胞受體復(fù)合體CD3s信號分子的抗體是有效的免疫抑制劑，并且能夠在自身免疫性疾病的治療中發(fā)揮作用。因此，制備抗CD3抗體的改進的方法、純化抗CD3抗體的方法以及包含抗CD3抗體的藥物組合物將會是有用的。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了直接特異性針對CD3的單克隆抗體的組合物和制劑。本發(fā)明還才是供了制備抗CD3單克隆抗體的方法，以及純化抗CD3抗體的方法。本發(fā)明所述的抗CD3抗體的藥物組合物包括在3.0至6.2的范圍內(nèi)有效的pH緩沖劑；鹽；表面活性劑；以及藥物有效量的抗CD3抗體。所述的鹽是，例如，氯化鈉；所述的表面活性劑是，例如，離子型表面活性劑，陰離子型表面活性劑或者兩性離子表面活性劑。例如，所述表面活性劑是一種離子型表面活性劑比如是一種聚山梨醇酯，例如，聚山梨醇酯80。所述的pH緩沖劑包4舌，例如，醋酸鈉。在某些實施方式中，所述pH緩沖劑選自檸檬酸鈉/檸檬酸，以及醋酸鈉/醋酸。所述的pH緩沖劑以10毫摩至50毫摩的范圍的量存在是有效的。用于本發(fā)明所述的組合物中的pH緩沖劑提供了5.0至6.0的pH范圍。例如，所述pH緩沖劑提供了5.2至5.8的pH范圍。在某些實施方式中，所述pH緩沖劑^是供了5.4至5.6的pH范圍。例如，所述pH緩沖劑提供了大約5.5的pH值。在本發(fā)明所述的組合物中，所述的鹽以100毫摩至140毫摩的范圍的量存在。所述的表面活性劑的重量/體積比為0.02%。所述的抗CD3抗體的藥物有效量^B殳定為每劑量中^是供0.05毫克至10毫克的抗CD3抗體。在某些實施方式中，所述的抗CD3抗體的藥物有效量被設(shè)定為每劑量中提供0.1毫克至5毫克的抗CD3抗體。例如，所述的抗CD3抗體的藥物有效量被設(shè)定為每劑量中提供0.5毫克至3.0毫克的抗CD3抗體。在本發(fā)明所述的抗CD3抗體組合物中，所述的抗CD3抗體是，4列:fe口，28F11,27H5，23F10,15C3，OrthocloneOKT3,人類OKT3y1(HOKT3y1)或者ChAglyCD3。本發(fā)明所述的抗CD3抗體藥物組合物包括pH緩沖劑，所述pH緩沖劑包括在3.0至6.2的范圍內(nèi)有效的醋酸鈉，氯化鈉，該組合物還包括表面活性劑，所述表面活性劑包括聚山梨醇酯，以及藥物有效量的抗CD3抗體。所述的聚山梨醇酯是，例如，聚山梨醇酯80。所述的pH纟爰沖劑以10毫摩至50毫摩的范圍的量存在是有效的。用于本發(fā)明所述的組合物中的pH緩沖劑提供了5.0至6.0的pH范圍。例如，所述pH緩沖劑提供了5.2至5.8的pH范圍。在某些實施方式中，所述pH緩沖劑提供了5.4至5.6的pH范圍。例如，所述pH緩沖劑提供了大約5.5的pH值。在本發(fā)明所述的組合物中，所述的鹽以100毫摩至140毫摩的范圍的量存在。所述的表面活性劑的重量/體積比為0.02%。所述的抗CD3抗體的藥物有效量被設(shè)定為每劑量中4是供0.05毫克至10毫克的抗CD3抗體。在某些實施方式中，所述的抗CD3抗體的藥物有效量被設(shè)定為每劑量中提供0.1毫克至5毫克的抗CD3抗體。例如5所述的抗CD3抗體的藥物有效量^皮設(shè)定為每劑量中提供0.5毫克至3.0毫克的抗CD3抗體。所述的抗CD34元體是，，J:fe口，28F11,27H5,23F10,15C3,OrthocloneOKT3，人類OKT3Y1(HOKT3y1)或者ChAglyCD3。在本發(fā)明所述的抗CD3抗體組合物的一種實施方式中，所述的藥物組合物每劑量中含有0.5毫克至3.0毫克的抗CD3抗體，l至3毫克的醋酸鈉，5至9毫克的氯4匕鈉，以及0.1至0.3毫克的聚山梨醇酯80，用水將該組合物調(diào)整至1.0毫升。例如，所述藥物組合物含有2.05毫克的醋酸鈉，7.31毫克的氯化鈉以及0.216毫克的聚山梨醇酯80。所述藥物組合物的pH值是，例如，5.5。本發(fā)明還提供了治療宿主自身免疫性疾病或者炎性疾病的方法，該方法是給需要治療的宿主給藥有效劑量的抗CD3抗體，所述的有效劑量祐沒定為在5天時間內(nèi)每天每劑量中提供0.05毫克至10毫克的抗CD3抗體。例如，有效劑量的抗CD3抗體被設(shè)定為在5天時間內(nèi)每天每劑量中提供0.1毫克至5.0毫克的抗CD3抗體。優(yōu)選的，有效劑量的抗CD3抗體被設(shè)定為在5天時間內(nèi)每天每劑量中提供0.5毫克至3.0毫克的抗CD3抗體。在本發(fā)明所述的方法中，所述的抗CD3抗體組合物通過靜脈內(nèi)給藥。例如，所述組合物通過持續(xù)靜脈輸注的方式給藥。本發(fā)明還提供了治療或者預(yù)防宿主的移植排斥反應(yīng)的方法，該方法在移才直的同時或者移才直之后以有歲丈劑量向宿主給藥抗^CD3抗體，并且在此之后每天增加劑量，直至達到50%或者更高的TCR-CD3飽和度，之后給藥5天的日劑量，全部治療過程不超過8天。在本發(fā)明所述的方法中，所述的抗CD3抗體組合物通過靜脈內(nèi)給藥。例如，所述組合物通過持續(xù)靜脈輸注的方式給藥。優(yōu)選的，有效劑量的抗CD3抗體導(dǎo)致的細胞因子的釋放水平低于WHO(世界衛(wèi)生組織)毒性分級標度中的3度。本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物在0.05毫克/天至10毫克/天的劑量范圍內(nèi)《會藥。優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.1毫克/天至5.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥，更優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.5毫克/天至3.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量選自0.5毫克/天，0.6毫克/天，0.7毫克/天，0.8毫克/天，0.9毫克/天，1.0毫克/天，1.1毫克/天，1.2毫克/天，1.3毫克/天，1.4毫克/天，1.5毫克/天，1.6毫克/天，1.7毫克/天，1.8毫克/天，1.9毫克/天，2.0毫克/天，2.1毫克/天，2.2毫克/天，2.3毫克/天，2.4毫克/天，2.5毫克/天，2.6毫克/天，2.7毫克/天，2.8毫克/天，2.9毫克/天，3.0毫克/天。范例性的單克隆抗體包括本發(fā)明提供的28F11，27H5,23F10，和15C3,以及OrthocloneOKT3，人類OKT3y1(HOKT3Y1)和ChAglyCD3。優(yōu)選的，所述的單克隆抗體是結(jié)合在與28F11,27H5,23F10或者15C3相同的表位的抗體。同樣優(yōu)選的，所述抗體是完全人源化抗體("huCD3抗體")。所述的抗CD3抗體具有一種或者多種下述特征所述的4元體與CD3陽性(CD3+)細胞相結(jié)合，而不與CD3陰性(CD3-)細胞相結(jié)合；所述的抗CD3抗體包括抗原性修飾，這種修飾包括改變(例如，降低)細胞表面的表達水平或者CD3或T細胞受體(TcR)的活性；所述的抗CD3抗體抑制鼠類抗人類OKT3單克隆抗體與T淋巴細月包的結(jié)合；或者所述的抗CD3抗體結(jié)合于CD3的表位，所述CD3完全包括或者部分包括氨基酸序列EMGGITQTPYKVSISGT(序歹'J57)。所述的抗CD3抗體與鼠類抗CD3抗體OKT3竟爭性的與CD3相結(jié)合，暴露的抗CD3抗體去除或者掩蔽CD3和/或T細胞受體(TcR),而不會影響CD2、CD4或者CD8的細胞表面表達。對鼠類抗人類OKT3單克隆抗體與T淋巴細胞的結(jié)合的抑制表現(xiàn)為鼠類OKT3抗體與CD3在T淋巴細胞的細胞表面形成復(fù)合體的能力的降低?？笴D3抗體含有重鏈可變區(qū)，其具有序列2、序列6、序列10或者序列22所示的氨基酸序列，還含有輕鏈可變區(qū)，其具有序列4、序列8、序列16-20或者序列25-26所示的氨基酸序列。優(yōu)選的，所述的三個重鏈互補性決定區(qū)(CDR)包括一種氨基酸序歹'J,該氨基酸序列與選自GYGMH(序歹'J27);VIWYDGSKKYYVDSVKG(序列28);QMGYWHFDL(序列29);SYGMH(序歹'J33);IIWYDGSKKNYADSVKG(序歹'J34);GTGYNWFDP(序列35);以及AIWYNGRKQDYADSVKG(序歹'J44)的組中的一個序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或者更高的同源性，并且具有三個互補性決定區(qū)(CDR)的輕鏈包括一種氨基酸序列，該氨基酸序列與選自RASQSVSSYLA(序歹'J30);DASNR^VT(序歹'J31);QQRSNWPPLT(序歹'J32);RASQSVSSSYLA(序歹'j36);GASSRAT(序歹'J37);QQYGSSPIT(序列38);RASQGISSALA(序列39);YASSLQS(序歹'J40);QQYYSTLT(序列41);DASSLGS(序歹'J42);WASQGISSYLA(序歹'J43);QQRSNWPWT(序歹'J45);DASSLES(序列46);以及QQFNSYPIT(序列47)的組中的一個序列具有至少90°/。、92%、95%、97%、98%、99%或者更高的同源性。所述的抗體結(jié)合了CD3。本發(fā)明提供的抗CD3抗體表現(xiàn)出下述特征中的至少兩個或者更多(即，兩個或者更多，三個或者更多，四個或者更多，五個或者更多，六個或者更多，七個或者更多，八個或者更多，九個或者更多，十個或者更多，十一個或者更多)所述的抗體含有一個重鏈可變區(qū)(VH)，該可變區(qū)由人類DP50Vh胚系基因序列所編碼，或者由與人類DP50Vh胚系基因序列同源的核酸序列所編碼；所述的抗體含有一個輕鏈可變區(qū)(VL)，該可變區(qū)由人類L6Vt胚系基因序列所編碼，或者由與人類L6V^胚系基因序列同源的核酸序列所編碼；所述的抗體含有一個輕鏈可變區(qū)(V。，該可變區(qū)由人類L4/18aVt胚系基因序列所編碼，或者由與人類L4/18aV^胚系基因序列同源的核酸序列所編碼；所述的抗體包括一個VhCDR1(互補性決定區(qū)1)區(qū)域，該區(qū)域包括氨基酸序列YGMH(序列58);所述的抗體包括一個VHCDR2(互補性決定區(qū)2)區(qū)域，該區(qū)域包括氨基酸序列DSVKG(序列59);所述的抗體包括一個VHCDR2(互補性決定區(qū)2)區(qū)域，該區(qū)域包括氨基酸序列IWYX!GX2X3X4XsYX6DSVKG(序列60);所述的抗體包括一個VHCDR3(互補性決定區(qū)3)區(qū)域，該區(qū)域包括氨基酸序列XAXBGYXCXDFDXE(序歹'J61);所述的4元體包才舌一個VHCDR3區(qū)域，該區(qū)域包括氨基酸序列GTGYNWFDP(序列62)或者氨基酸序列QMGYWHFDL(序列63);所述的抗體包括氨基酸序列VTVSS(序列64)，該序列位于CDR3(互補性決定區(qū)3)區(qū)域的C-末端位置處，所述位置位于CDR3(互補性決定區(qū)3)區(qū)域的C-末端可變區(qū)內(nèi)；所述的抗體包括氨基酸序列GTLVTVSS(序列65)，該序列4立于CDR3(互補性決定區(qū)3)區(qū)域的C-末端位置處，所述位置位于CDR3(互補性決定區(qū)3)區(qū)域的C-末端可變區(qū)內(nèi)；所述的抗體包括氨基酸序列WGRGTLVTVSS(序列66),該序列位于CDR3(互補性決定區(qū)3)區(qū)域的C-末端位置處，所述位置位于CDR3(互補性決定區(qū)3)區(qū)域的C-末端可變區(qū)內(nèi)；所述的抗體結(jié)合的表位完全包括或者部分包括氨基酸序列EMGGITQTPYKVSISGT(序列57);以及所述的抗體包^舌突變，這種突變發(fā)生在重鏈的第234、235、265、或者297中的一個或者多個位置處的氨基酸殘基上，并且，與4吏用重鏈的第234、235、265、或者297中的一個或者多個位置處的氨基酸殘基沒有發(fā)生突變的抗體相比，當所述抗體存在時，T細胞對細胞因子的釋放減少了。本發(fā)明提供的對重鏈殘基的計凄t用EU指數(shù)表示(參見Kabat等人所著的"ProteinsofImmunologicalInterest"(《具有免疫學(xué)重要性的蛋白》)，USDept.ofHealth&HumanServices(美國《建康與人類月良務(wù)部)(1983)),正仕口例如在美國專利No.5624821以及美國專利No.5648260中所述，上述文獻的全部內(nèi)容在此引入作為參考。所述的抗CD3抗體可以含有氨基酸突變。典型的，所述的突變發(fā)生在恒定區(qū)。這種突變^f吏得到的抗體具有變化的效應(yīng)子功能?？贵w的效應(yīng)子功能的變化是通過改變——即，加強或者減弱所述抗體與效應(yīng)分子的親和性來改變的，所述效應(yīng)分子是例如Fc受體或者補體成分。例如，所述的突變^f吏得到的抗體能夠減少T細月包對細l包因子的釋方文。例如，所述的突變發(fā)生在重鏈的第234、235、265、或者297中的一個或者多個位置處的氨基酸殘基上。優(yōu)選的，所述的突變導(dǎo)致在234、235、265或者297中的任意位置處存在丙氨酸殘基，或者在235位置處存在谷氨酸鹽殘基，或者導(dǎo)致上述兩種情況同時發(fā)生。術(shù)語"細胞因子"指的是在本領(lǐng)域已知的、與在細胞表面表達的胞外受體相結(jié)合并因此調(diào)節(jié)細胞功能的所有人類細胞因子，包括j旦不局限于白細胞介素-2(il-2),干護c素-y(ifn-y)，月中瘤i不死因子-a(tnf-a)，白細月包介素-4(IL-4),白細月包介素-5(IL-5)，白細胞介素-6(IL-6)，白細胞介素-9(IL-9),白細月包介素-10(IL-10),以及白細月包介素-13(IL-13)。優(yōu)選的，本發(fā)明提供的抗CD3抗體含有一種或者多種突變，這種突變能夠阻止由重鏈恒定區(qū)介導(dǎo)的一種或者多種細胞因子的體內(nèi)釋;^文。本發(fā)明提供的完全人源化CD3抗體包括，例如，在Fc區(qū)域中發(fā)生L234L235—A^E"s的突變，這樣，當暴露于抗CD3抗體時，細月包因子的釋ib陂顯著的減少或者消除了。正如下面實施例4中的描述，當將抗CD3抗體暴露于人類白細胞中時，本發(fā)明提供的在Fc區(qū)域中發(fā)生L234L235—A234E235突變的抗CD3抗體減少或者消除了細胞因子的釋it,而下面描述的突變則〗呆持了顯著的細胞因子釋放能力。例如，細胞因子釋放的顯著減少是通過下述方法來定義的將暴露于抗CD3抗體的細胞因子的釋》丈水平與暴露于另外一個抗CD3抗體的細月包因子的釋放水平進4亍比4交，前者抗體在其Fc區(qū)域中具有L234L235—A^E"s的突變，后者抗體具有一種或者多種如下描述的突變。在Fc區(qū)域發(fā)生的其他突變包括，例如，L234L235—A234A235，L235—E235,N297—A297,以及D265—A265。或者，編碼所述的抗CD3抗體的核酸包4舌一種或者多種突變，這種突變用胚系核酸殘基取代了核酸殘基。"胚系核酸殘基"指的是在編碼恒定區(qū)或者可變區(qū)的胚系基因中天然存在的核酸殘基。因此，本發(fā)明提供的抗體包括一種或者多種突變，這種突變用胚系核酸殘基取代了核酸殘基。胚系抗體基因包括，例如DP50(4史錄號IMGT/EMBL/Genbank/DDBJ:L06618),L6(收錄號IMGT/EMBL/Genbank/DDBJ:X06618)以及L14/18a(收錄號EMBL/Genbank/DDBJ:Z00006)。huCD3抗體(完全人源化抗體)的重鏈來自于胚系V(可變)基因^者^口，例:&口，DP50胚系基因。所述的DP50胚系基因的核fr吏序列以及氨基酸序列包括，例如，下面所示的核酸序列以及氨基酸序列tgattcatggagaaatagagagactgagtgtgagtgaacatgagtgagaaaaactggatttgtgtggcattttctgataacggtgtccttctgtttgcaggtgtccagtgtcaggtgcagctggtggagtctgggggaggcgtggtccagcctgggaggtccctgagactctcctgtgcagcgtctggattcaccttcagtagctatggcatgcactgggtccgccaggctccaggcaaggggctggagtgggtggcagttatatggtatgatggaagtaataaatactatgcagactccgtgaagggccgattcaccatctccagagacaattccaagaacacgctgtatctgcaaatgaacagcctgagagccgaggacacggctgtgtsttactgtgcgagagacacag(SEQIDNO:67)VQCQVQLVESGGGWQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYYADSVKGRFTISRDNSpjTLYLQMNSIjRAEDTAVYYCAR(SEQIDNO:68)所述的huCD3抗體包括一個由人類DP50Vh胚系基因序列編碼的重鏈可變區(qū)(VH)。DP50VH胚系基因序列在例如附圖5中的序列48中所示。本發(fā)明提供的huCD3抗體包4舌一個由核酸序列編碼的Vh區(qū)域，所述的核酸序列與DP50Vh胚系基因序列具有至少80%的同源性。優(yōu)選的，所述的核酸序列與DP50VH胚系基因序列具有至少90%、95%、96%、97%的同源性，并且更優(yōu)選的，與DP50Vh胚系基因序列具有至少98%、99%的同源性。所述的huCD3抗體的VH區(qū)與由DP50Vh胚系基因序列編碼的vh區(qū)的氨基酸序列具有至少80%的同源性。優(yōu)選的，所述的huCD3抗體的VH區(qū)的氨基酸序列與由DP50VH胚系基因序列編碼的氨基酸序列具有至少90%、95%、96%、97%的同源性，并且更優(yōu)選的，與由DP50vh胚系基因序列編碼的序列具有至少98%、99%的同源性。所述的huCD3抗體還包括一個由人類L6或者L14/18aV^胚系基因序列編碼的輕鏈可變區(qū)(VJ。人類L6Vl胚系基因序列在例如附圖6中的序列56中所示，人類L14/18aV^胚系基因序列在例如附圖7中的序列53中所示?；蛘撸龅膆uCD3抗體包4舌一個由核酸序列編碼的Vl區(qū)域，所述的核酸序列與L6VL胚系基因序列或者L14/18aVl胚系基因序列具有至少80%的同源性。優(yōu)選的，所述的核酸序列與L6V^胚系基因序列或者L14/18aVL胚系基因序列具有至少90%、95%、96%、97%的同源性，并且更優(yōu)選的，與L6Vl胚系基因序列或者L14/18aVl胚系基因序列具有至少98%、99%的同源性。所述的huCD3抗體的V^區(qū)與由L6Vl胚系基因序列或者L14/18aV^胚系基因序列編碼的Vt區(qū)的氨基酸序列具有至少80%的同源性。優(yōu)選的，所述的huCD3抗體的Vl區(qū)的氨基酸序列與由L6V^胚系基因序列或者L14/18aVi胚系基因序列編碼的氨基酸序列具有至少90%、95°/。、96%、97%的同源'1"生，并且更^尤選的，與由L6Vl胚系基因序列或者L14/18aVL胚系基因序列編碼的序列具有至少98%、99%的同源性。所述的huCD3抗體具有，例如部分保守的氨基酸序列，這些氨基酸序列是來自于DP50胚系的。例如，本發(fā)明4吏用的huCD3抗體的CDR1(互補性決定區(qū)1)區(qū)域至少具有連續(xù)的氨基酸序列YGMH(序列58)。所述的抗CD3抗體的CDR2(互補性決定區(qū)2)至少包^l舌例如連續(xù)的氨基酸序列DSVKG(序列59)。例如，所述的CDR2(互補性決定區(qū)2)區(qū)域包括連續(xù)的氨基酸序列IWYXjGXzXsXaXsYXJDSVKG(序歹'J60)，其中X、X2、X3、X4、X5以及X6代表任何氨基酸。例如，X2、X3以及X4是親水性氨基酸。在本發(fā)明使用的某些抗CD3抗體中，X,是天冬酰胺或者天冬氨酸，X2是精氨酸或者絲氨酸，X3是賴氨酸或者天冬酰胺，X4是賴氨酸或者谷氨酰胺，Xs是天冬氨酸、天冬酰胺或者酪氨酸，和/或Xs是纈氨酸或者丙氨酸。例如，所述的VHCDR2(互補性決定區(qū)2)區(qū)域包括選自下述組中的氨基酸序列AIWYNGRKQDYADSVKG(序列69),IIWYDGSKKNYADSVKG(序歹'j70)，VIWYDGSKKYYVDSVKG(序歹'j71)以及VIWYDGSNKYYADSVKG(序列72)?？笴D3抗體的CDR3(互補性決定區(qū)3)區(qū)域至少包括例如連續(xù)的氨基酸序列XaXbGYXcXdFDXe(序列61)，其中XA、XB、Xc、XD以及Xe代表任何氛基酸。在本發(fā)明使用的某些抗CD3抗體中，XA和XB是中性氨基酸，XD是芳族氨基酸，和/或其中XE是疏水性氨基酸。例如，XA是甘氨酸或者谷氨酰胺，XB是蘇氨酸或者甲硫氨酸，Xc是天冬酰胺或者色氨酸，Xo是色氨酸或者組氨酸，和/或XE是脯氨酸或者亮氨酸。例如，所述的CDR3(互補性決定區(qū)3)區(qū)域包括連續(xù)的氨基酸序列GTGYNWFDP(序列62)或者包括連續(xù)的氨基酸序列QMGYWHFDL(序列63)。所述的抗CD3抗體包括一個骨架2區(qū)(FRW2),該骨架2區(qū)含有氨基酸序列WVRQAPGKGLEWV(序列73)。本發(fā)明使用的抗CD3抗體包括一個骨架3區(qū)(FRW3),該骨架3區(qū)含有氨基臥殳序列RFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCA(序列74)。某些抗CD3抗體包括連續(xù)的氨基酸序列VTVSS(序列64)，該序列位于CDR3(互補性決定區(qū)3)區(qū)域的C-末端位置處。例如，所述的抗體含有連續(xù)的氨基酸序列GTLVTVSS(序列65),該序列4立于CDR3(互補性決定區(qū)3)區(qū)域的C-末端位置處。其他的抗CD3抗體包括連續(xù)的氨基酸序列WGRGTLVTVSS(序列66),該序列位于CDR3(互補性決定區(qū)3)區(qū)域的C-末端位置處。例如，序列66中的精氨酸殘基被表示在28F11huCD3抗體的Vh序歹'J(序歹寸2)和23F10huCD34元體的Vh序歹'J(序歹06)中。在另外的方面，本發(fā)明提供用于了治療、預(yù)防或者緩解免疫相關(guān)性疾病的癥狀的方法，該方法向宿主給藥抗CD3抗體組合物。本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物的給藥劑量在0.05毫克/天至10毫克/天的范圍內(nèi)。優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物的舌會藥劑量在0.1毫克/天至5.0毫克/天的范圍內(nèi)，并且更優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量在0.5毫克/天至3.0毫克/天的范圍內(nèi)。例如，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量選自0.5亳克/天，0.6毫克/天，0.7毫克/天，0.8毫克/天，0.9毫克/天，1.0毫克/天，1.1亳克/天，1.2毫克/天，1.3毫克/天，1.4毫克/天，1.5毫克/天，1.6毫克/天，1.7毫克/天，1.8毫克/天，1.9毫克/天，2.0毫克/天，2.1毫克/天，2.2毫克/天，2.3毫克/天，2.4毫克/天，2.5毫克/天，2.6毫克/天，2.7毫克/天，2.8毫克/天，2.9毫克/天，以及3.0毫克/天。例如，將所述的抗CD3抗體組合物給藥于患有或者傾向于患有炎癥性腸病、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩氏病、多發(fā)性石更化癥、風濕性關(guān)節(jié)炎或者I型糖尿病的患者。所述的組合物通過例如靜脈內(nèi)形式給藥?？梢栽O(shè)定其他形式的給藥i各徑。例如，所述的抗CD3抗體組合物通過皮下、口月l、腸道外、鼻內(nèi)、月幾肉內(nèi)的形式給藥，或者通過上述這些路徑的任意組合的形式給藥。在另外的方面，本發(fā)明提供了治療或者預(yù)防移植排斥反應(yīng)的方法，該方法在移才直之后以0.05毫克/天至10毫克/天的范圍的量向宿主給藥抗CD3抗體，并且每天加大劑量，直到達到50%或者更高水平的TCR-CD3飽和度，之后給藥5天的日劑量，全部治療過程不超過8天。優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量在O.l毫克/天至5.0毫克/天的范圍內(nèi)，并且更優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量在0.5毫克/天至3.0亳克/天的范圍內(nèi)。例如，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量選自0.5毫克/天，0.6毫克/天，0.7毫克/天，0.8毫克/天，0.9毫克/天，1.0毫克/天，1.1毫克/天，1.2毫克/天，1.3毫克/天，1.4毫克/天，1.5毫克/天，1.6毫克/天，1.7毫克/天，1.8毫克/天，1.9毫克/天，2.0毫克/天，2.1毫克/天，2.2毫克/天，2.3毫克/天，2.4毫克/天，2.5毫克/天，2.6毫克/天，2.7毫克/天，2.8毫克/天，2.9毫克/天，以及3.0毫克/天。例如，所述的抗CD3抗體纟且合物在器官移^直或者組織移4直之后#皮用來治療或者預(yù)防腎臟的4非斥反應(yīng)。所述的組合物可以;故預(yù)防性的給藥(例如，在急性排斥反應(yīng)發(fā)生之前給藥，以預(yù)防這種反應(yīng))，和/或所述的組合物在移植之后被用來治療急性排斥反應(yīng)。所述的組合物通過例如靜脈內(nèi)形式給藥。可以設(shè)定其他形式的給藥路徑。例如，所述的抗CD3抗體組合物通過皮下、口服、腸道外、鼻內(nèi)、月幾肉內(nèi)的形式《會藥，或者通過上述這些if各徑的^f壬意組合的形式給藥。本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物被儲存在適當?shù)娜萜髦?，例如小瓶中，使得每個容器中的抗CD3抗體組合物的劑量在1至10亳克/容器的范圍內(nèi)。例如，每個容器中的抗CD3抗體組合物的劑量在2至5毫克/容器的范圍內(nèi)。優(yōu)選的，每個容器中的劑量在3.5至4.5毫克/容器的范圍內(nèi)，例如，每個容器中的劑量為4亳克/容器o4壬選的，向所述的宿主進一步^合藥第二制劑，例如但不局限于，抗炎癥化合物或者免疫抑制劑化合物。適當?shù)幕衔锇?，但不局限于甲氨蝶呤，環(huán)胞霉素A(包括，例如，環(huán)胞霉素^f效乳劑)，他克莫司，類固醇，他汀類，I型干擾素，英利昔單抗(因福利美)，依坦西普(依那西普)以及修美樂(阿達木單抗)。例如，也可以向患有I型并唐尿病或者成人隱匿性自身免疫性糖尿病的宿主^會藥第二制劑，例如，人力夷高血津唐素樣肽-1(GLP-1)或者(3細胞休眠化合物(即，減少或者抑制胰島素釋放的化合物，例如4甲通道開》文劑)。在另外的方面，本發(fā)明提供了通過親和色譜、離子交換色譜以及羥基磷灰石色譜純化抗CD3抗體的方法。例如，所述的親和色譜是蛋白質(zhì)A色譜。所述的離子交換色譜是，例如，陰離子交才奐色i普。附圖1A-1D是一系列核酸序列和氨基酸序列的代表，這類核酸序列和氨基酸序列來自于huCD3抗體28F11的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)，其中在CDR(互補性決定區(qū))區(qū)域z使用方框來強調(diào)。附圖2A-2D是一系列核酸序列和氨基酸序列的代表，這類核酸序列和氨基酸序列來自于huCD3抗體23F10的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)。附圖3A-3D是一系列核酸序列和氨基酸序列的代表，這類核酸序列和氨基酸序列來自于huCD3抗體27H5的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)。附圖3E表示的是來自于克隆27H5的五個輕鏈的比對，其中星號(*)代表保守氨基酸序列；冒號()代表保守性突變；而句號(.)代表半保守性突變。附圖4A-4D是一系列核酸序列和氨基酸序列的代表，這類核酸序列和氨基酸序列來自于huCD3抗體15C3的輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)。附圖5描述的是15C3huCD3抗體、27H5huCD3抗體以及28F11huCD34元體的重鏈可變區(qū)與DP-50胚系序列、人類重鏈連接序列5-02、以及人類重鏈連接序列2之間的比對。標示出了每個序列的CDR(互補性決定區(qū))區(qū)域。附圖6描述的是15C3huCD3抗體以及28F11huCD3抗體的VKlII可變區(qū)(可變輕鏈l，即，"VL1")與L6胚系序列、人類k連4妄序列4、以及人類k連^妄序列1之間的比對。標示出了每個序列的CDR(互補性決定區(qū))區(qū)域。附圖7描述的是15C3VL2(可變輕鏈2,即，"VL2")huCD3抗體以及27H5VL2huCD3抗體的VkI可變區(qū)與L4/18a胚系序列、人類k連接序列4、以及人類k連接序列5之間的比對。標示出了每個序列的CDR(互補性決定區(qū))區(qū)域。附圖8描述的是27H5VL1huCD3抗體的VkII可變區(qū)與DPK22、以及人類k連接序列5之間的比對。標示出了每個序列的CDR(互補性決定區(qū))區(qū)域。具體實施例方式本發(fā)明提供了單克隆抗體的組合物及藥劑，所述的單克隆抗體是例如完全人源化單克隆抗體，其特異性針對CD3e鏈(CD3s)。本發(fā)明提供的完全人源化抗體指的是huCD3抗體。本發(fā)明提供的組合物具有3.0至7.0的pH范圍。優(yōu)選的，該組合物具有5.0至6.0的pH范圍，并且更優(yōu)選的，該組合物具有5.2至5.8的pH范圍，并且最優(yōu)選的，該組合物具有5.4至5.6的pH范圍。例如，在一種實施方式中，該組合物具有5.5的pH值。本發(fā)明4吏用的抗CD3抗體與一類CD3相結(jié)合，所述的CD3完全包4舌或者部分包4舌來自于經(jīng)過處理后的人類CD3s亞基的位置27處至位置43處(即，不含有前導(dǎo)序列)的氨基酸殘基。所述的人類CD3s亞基的氨基酸序列被表示在例如Genbank收錄號NP—000724;AAA52295;P07766;A32069;CAA27516;以及AAH49847中。例如，所述的抗CD3抗體與CD3表位相結(jié)合，該表位完全包括或者部分包括氨基酸序列EMGGITQTPYKVSISGT(序列57)。與這種表位相結(jié)合的huCD3單克隆抗體的一個范例性的例子是本發(fā)明提供的28F11抗體。所迷的28F11抗體包括一個重鏈可變區(qū)(序列2),該重鏈可變區(qū)由序列1所示的核酸序列所編石馬，還包^舌一個輕鏈可變區(qū)(序列4)，該輕鏈可變區(qū)由序列3所示的核酸序列所編碼(附圖1A-1D)。所述的氨基酸包含了由Chothia等人于1989年、E.A.Kabat等人于1991年定義的互補性決定區(qū)(CDR)，這類決定區(qū)在附圖1B和附圖1D以及附圖5和附圖6中用方框標示出來(參見ChothiaC等人(于1989年)在Nature(《自然》)342:877-883中發(fā)表的文章；KabatEA等人(于1991年)所著的SequencesofProteinofimmunologicalinterest,FifthEdition,USDepartmentofHealthandHumanServices,USGovernmentPrintingOffice(《具有免疫學(xué)重要性的蛋白序列》，第5版，美國健康與人類服務(wù)部，美國政府印務(wù)局))。所述的28F11抗體的重鏈互補性決定區(qū)具有下述序列GYGMH(序列27);VIWYDGSKKYYVDSVKG(序列28)以及QMGYWHFDL(序列29)。所述的28F11抗體的輕鏈互補性決定區(qū)具有下述序列RASQSVSSYLA(序歹ll30);DASNRAT(序歹'J31)以及QQRSNWPPLT(序列32)。如附圖2A-2D中所示，所述的23F10抗體包括一個重鏈可變區(qū)(序列6)，該重鏈可變區(qū)由序列5所示的核酸序列所編碼，還包4舌一個輕鏈可變區(qū)(序列8),該輕鏈可變區(qū)由序列7所示的核酸序列所編碼。所述的氨基酸包含了由Chothia等人于1989年、E.A.Kabat等人于1991年定義的互補性決定區(qū)(CDR),這類；定區(qū)在附圖2B和附圖2D中用方?jīng)_匡才示示出來。所述的23F104體的重鏈互補性決定區(qū)具有下述序列GYGMH(序歹'J27);VIWYDGSKKYYVDSVKG(序列28)以及QMGYWHFDL(序列29)。所述的23F10抗體的輕鏈互補性決定區(qū)具有下述序列RASQSVSSYLA(序歹'J30);DASNRAT(序歹'J31)以及QQRSNWPPLT(序列32)。如附圖3A-3D中所示，所述的27H5抗體包括一個重鏈可變區(qū)(序列10)，該重鏈可變區(qū)由序列9所示的核酸序列所編碼，還包括一個選自氨基酸序列16-20的輕鏈可變區(qū)，該輕鏈可變區(qū)由序列11-15所示的核酸序列所編石馬。所述的氨基酸包含了由Chothia等人于1989年、E.A.Kabat等人于1991年定義的互補性決定區(qū)(CDR)，這類決定區(qū)在附圖3B、附圖3D、附圖5以及附圖7-8中用方框標示出來。所述的27H5抗體的重鏈互補性決定區(qū)具有下述序歹'J:SYGMH(序歹'J33);IIWYDGSKKNYADSVKG(序列34)以及GTGYNWFDP(序列35)。所述的27H5抗體的輕鏈互補性決定區(qū)具有下述序列RASQSVSSSYLA(序歹'J36);GASSRAT(序歹'J37);QQYGSSPIT(序歹寸38);RASQGISSALA(序歹'j39);YASSLQS(序歹'J40);QQYYSTLT(序歹'J41);DASSLGS(序歹'j42);以及WASQGISSYLA(序歹寸43)。如附圖4A-4D中所示，所述的15C3抗體包括一個重鏈可變區(qū)(序列22)，該重鏈可變區(qū)由序列21所示的核酸序列所編石馬，還包括一個選自氨基酸序列25-26的輕鏈可變區(qū)，該輕鏈可變區(qū)由序列23-24所示的核酸序列所編碼。所述的氨基酸包含了由Chothia等人于1989年、E.A.Kabat等人于1991年定義的互補性決定區(qū)(CDR)，這類決定區(qū)在附圖4B、附圖5D、以及附圖5-7中用方?jīng)_匡標示出來。所述的15C34元體的重鏈互補性決定區(qū)具有下述序列SYGMH(序歹'J33);IIWYDGSKKNYADSVKG(序列34)以及GTGYNWFDP(序列35)。所述的15C3抗體的輕鏈互補性決定區(qū)具有下述序列RASQSVSSYLA(序列30);DASNRAT(序列31);QQRSNWPWT(序列45);RASQGISSALA(序歹'J39);DASSLES(序歹ij46);QQFNSYPIT(序歹'J47)。那些包^r與序列2、序列6、序列IO或者序列22所示的氨基酸序列具有至少90%、92。/。、95%、97%、98%、99%或者更高同源性的重鏈可變氨基酸序列，和/或與序列4、序列8、序列16-20或者序歹'J25-26所示的氨基酸序列具有至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或者更高同源性的輕鏈可變氨基酸序列的抗體也包括在本發(fā)明使用的抗CD3抗體的范圍之內(nèi)?；蛘撸龅膯慰寺】贵w是與28F11，27H5，23F10或者15C3結(jié)合于相同表位的抗體。除非特別定義，與本發(fā)明相關(guān)的科學(xué)術(shù)語和技術(shù)術(shù)語應(yīng)當具備本領(lǐng)域普通技術(shù)人員普遍理解的含義。并且，除非上下文的需要，單數(shù)形式的術(shù)語應(yīng)當包括復(fù)數(shù)形式，而復(fù)數(shù)形式的術(shù)語應(yīng)當包括單數(shù)形式。通常，本發(fā)明描述的與細胞及組織培養(yǎng)、分子生物學(xué)、以及蛋白和寡核苷酸、多核苷酸4匕學(xué)及雜交反應(yīng)相關(guān)的名稱和4支術(shù)都是本領(lǐng)i或熟知的并且普遍4吏用的。重組DNA，寡核苷酸的合成，以及組織的培養(yǎng)和轉(zhuǎn)化(例如，電穿孔，脂質(zhì)轉(zhuǎn)染法)都采用標準技術(shù)。酶反應(yīng)和純化技術(shù)按照制造商的說明書來完成，或者按照本領(lǐng)域普遍4吏用的4支術(shù)或才艮據(jù)本發(fā)明的描述來完成。前述的4支術(shù)和4喿作大體上按照本領(lǐng)域熟知的常規(guī)方法來完成，并且4艮據(jù)本i兌明書中引用的和討i侖的各種綜合文獻以及更具體的文獻中的描述來完成。例如參見Sambrook等人所著的MolecularCloning:ALaboratoryMannual(《分子克隆實l僉室手冊》)(2ded.,ColdSpringHarborLaboratoryPress,ColdSpringHarbor,N.Y.(1989)(第2版，冷泉港實驗室出版社，冷泉港，紐約))。本發(fā)明描述的分4斤化學(xué)、合成有才幾化學(xué)、以及藥物化學(xué)相關(guān)的名稱、實驗室操作A見程和技術(shù)都是本領(lǐng)域熟知并且普遍使用的。使用標準才支術(shù)進4于化學(xué)合成、化學(xué)分析、藥物的制備、配置以及運送、和只十患者的治療。本發(fā)明公開內(nèi)容中使用的下列術(shù)語，除非特別指明，應(yīng)當被理解為具有下述含義這里使用的術(shù)語"抗體"指的是免疫球蛋白分子以及免疫球蛋白(Ig)分子的免疫學(xué)活性部分，即，含有能夠特異性結(jié)合(發(fā)生免疫反應(yīng))抗原的抗原結(jié)合位點的分子。這類抗體包括，但不局限于，多克隆抗體，單克隆抗體，嵌合抗體，單鏈抗體，F(xiàn)ab片段，F(xiàn)ab，片段，以及F(ab，)2片^殳，以及Fab表達文庫。"特異性結(jié)合"或者"發(fā)生免疫反應(yīng)"指的是所述的抗體與所期望的抗原的一個或者多個抗原決定簇發(fā)生反應(yīng)，而不與其他多肽發(fā)生反應(yīng)(即，結(jié)合)，或者以相當?shù)偷挠H和性(Kd〉l(T6)與其他多肽相結(jié)合。已知基礎(chǔ)的抗體結(jié)構(gòu)單元包^:四聚體。每個四聚體由兩對相同的多肽鏈組成，其中每一對具有一個"輕"鏈(大約25kDa)和一個"重"鏈(大約50-70kDa)。每條鏈的氨基末端部分包:括一個大約100至110或者更多個氨基酸的可變區(qū)，主要負責對抗原的識別。每條鏈的羧基末端部分定義了一個恒定去，主要負責效應(yīng)子功能。人類的輕鏈分為K輕鏈和入輕鏈。重鏈分為jH，5,y，a，或者s,并且將所述抗體的同型物分別定義為IgM，IgD，IgA，以及IgE。在輕鏈和重鏈中，所述的可變區(qū)與恒定區(qū)通過一個具有大約12個或者更多個氨基酸的"J，，區(qū)相連接，所述的重鏈還包括一個"D"區(qū)，該區(qū)具有大約IO個或者更多個氨基酸。大體參見FundamentalImmunologyCh.7(《基礎(chǔ)免疫學(xué)》Ch.7)(Paul,W.,ea.,2nded.RavenPress,N.Y.(1989)(PaulW編輯，第二版，Raven出^反;枉，紐約))。每對輕鏈/重鏈的可變區(qū)構(gòu)成了所述的抗體結(jié)合位點。這里Y吏用的術(shù)語"單克隆抗體"(MAb)或者"單克隆抗體組合物"指的是只含有一種類型的抗體分子的一類抗體分子的群體，所述的抗體分子由一種獨特的輕鏈基因產(chǎn)物和一種獨特的重鏈基因產(chǎn)品組成。特別的，在這類抗體分子群體的所有分子中，所述單克隆抗體的互補性決定區(qū)(CDRs)是相同的。單克隆抗位點，其中所述的抗原與該抗原結(jié)合位點具有獨特的結(jié)合親和性。一般的，來自于人類的抗體分子關(guān)系到IgG,IgM,IgA,IgE以及IgD中的任意一類，它們之間的相互區(qū)別在于分子中存在的重鏈的性質(zhì)。某些類別還具有子類，例如IgGpIgG2以及其他。并且，在人類中，所述的輕鏈可以是K鏈或者入鏈。這里使用的術(shù)語"表位"包括能夠特異性結(jié)合于免疫球蛋白、scFv、或者T細胞受體的任何蛋白決定簇。術(shù)語"表位"包括能夠特異性結(jié)合于免疫球蛋白或者T細胞受體的任何蛋白決定簇。表位決定簇通常由分子的化學(xué)活性表面基團組成，例如氨基酸或者糖側(cè)鏈，并且通常具有特定的三維結(jié)構(gòu)特性，以及特定的電荷特性。當解離常數(shù)《l/aM時，優(yōu)選的<100nM并且更優(yōu)選的<10nM時，該抗體被認為可以特異性的結(jié)合抗原。這里使用的術(shù)語"免疫性結(jié)合"以及"免疫性結(jié)合特性"指的是免疫球蛋白分子和其特異性抗原之間發(fā)生的非共價的相互作用。免疫性結(jié)合相互作用的強度或者親和性可以通過這種相互作用的解離常數(shù)(Kd)來表達，其中Kd越小代表親和性越高。使用本領(lǐng)域熟知的方法對選定的多肽的免疫性結(jié)合特性進行量化。其中一種方法需要測定抗原結(jié)合位點/抗原復(fù)合體的形成速率以及解離速率，其中這些速率取決于復(fù)合體形成物的濃度，兩者間相互作用的親和性，以及能夠在兩個方向上平等的影響速率的幾何學(xué)參數(shù)。因此，"結(jié)合速率常數(shù)，，(Kon)以及"解離速率常數(shù)，，(Koff)都可以通過計算結(jié)合和解離的濃度以及實際速率來得出(參見，Nature(《自然》)361:186-87(1993)中的文章)。Koff/Kon的比率能夠消除與親和性不相關(guān)的所有參數(shù)，并且等于解離常數(shù)Kd(大體參見Davies等人(于1990年)在AnnualRevBiochem(《生物4匕學(xué)年鑒》)59:439—473中發(fā)表的文章)。當結(jié)合平衡常數(shù)(Kd)《ljuM時，優(yōu)選的《100nM，更伊乙選的<10nM,并且最優(yōu)選的<100pM至大約lpM時，本發(fā)明所述的抗體被認為可以特異性的結(jié)合于CD3表位上，通過例如放射配基結(jié)合法或者本領(lǐng)域4支術(shù)人員已知的類似方法測量得出。本領(lǐng)域:技術(shù)人員將發(fā)現(xiàn)，有可能在不需要過度試-瞼的情況下確定出一種人類單克隆抗體是否與本發(fā)明使用的人類單克隆抗體(例如，單克隆抗體28F11，27H5,23F10或者15C3)具有相同的特異性，該方法通過查明前者是否能夠阻止后者與CD3抗原多肽發(fā)生結(jié)合來判斷。如果待測的人類單克隆抗體與本發(fā)明使用的人類單克隆抗體產(chǎn)生竟爭，表現(xiàn)為本發(fā)明使用的人類單克隆抗體的結(jié)合的減少，之后兩種單克隆抗體結(jié)合于相同的、或者緊密相關(guān)的表位。確定一種人類單克隆抗體是否具有本發(fā)明使用的人類單克隆抗體的特異性的另外一種方法是，使用一種CD3抗原多肽對本發(fā)明使用的人類單克隆抗體進行預(yù)培養(yǎng)，其中所述的CD3抗原多肽對該人類單克隆抗體具有正常的反應(yīng)性，之后，力口入4寺測的人類單克隆抗體，以確定所述4爭測的人類單克隆抗體結(jié)合上述CD3抗原多肽的能力是否被抑制。如果待測的人類單克隆抗體被抑制，在所有的可能性之下，那么該抗體與本發(fā)明使用的單克隆抗體具有相同的、或者功能上等價的表位特異性。術(shù)語"序列同源性"指的是在比較區(qū)域(comparisonwindow)范圍內(nèi)的兩個多核苷酸序列或者氨基酸序列是相同的(即，基于一種核苷酸或者一種殘基的基礎(chǔ)上)。術(shù)語"序列同源性百分凄丈"是通過下述方法來計算的在比較視窗范圍內(nèi)對兩個最佳比對序列進^f亍比較，確定兩個序列中具有相同核酸石成基(即，A,T,C,G,U或者I)或者殘基的位置的數(shù)量，以得到匹配的位置的凄史量，用所述匹配的位置的數(shù)量除以比較區(qū)域內(nèi)所有位置的總數(shù)(即，比較區(qū)域的大小)，將得到的結(jié)果乘以100,得出序列同源性百分數(shù)。本發(fā)明使用的"本質(zhì)上相同"表示的是一種多核苷酸序列或者氨基酸序列的性質(zhì)，其中所述的多核苷酸或者氨基酸包括一個與參考序列相比具有至少85%的序列同源性、優(yōu)選至少90至95%的序列同源性、更多時候具有至少99%的序列同源性的序列，其中兩種序列的比4交區(qū)域具有至少18個核普酸(6個氨基酸)位置，通常兩種序列的比4交區(qū)i或具有至少24-48個核苷酸(8-16個氨基酸)位置，其中所述的序列同源性百分數(shù)是通過將所述的參考序列與所述的序列進行比較而計算得到的，其中所述的序列可以包括缺失或者添加，這種缺失或者添加占比較區(qū)域內(nèi)的參考序列的總計20%或者更少。所述的參考序列可以是一個更大序列的子集。本發(fā)明使用的二十種常規(guī)氨基酸以及它們的縮寫符合常規(guī)用法。參見Immunology-ASynthesis(2ndEdition,E.S.GolubandD.R.Gren，Eds.，SinauerAssociates,Sunderland7Mass(1991))。上述二十種氨基酸的立體異構(gòu)體(例如，D-氨基酸)，非天然氨基酸例如a-,a-二取代氨基酸，N-烷基氨基酸，乳酸，以及其他非常規(guī)氨基酸也可以作為本發(fā)明所述的多肽的合適的《且分。非常規(guī)氨基酸的例子包括4-羥脯氨酸，y-羧基谷氨酸，e;-N,N,N-三曱基賴氨酸，s-N-乙酰賴氨酸，O-磷酸絲氨酸，N-乙酰絲氨酸，N-甲酰甲疏氨酸，3-甲基組氨酸，5-羥賴氨酸，a-N-曱基精氨酸，以及其他類似的氨基酸和亞氨基酸(例如，4-羥脯氨酸)。在本發(fā)明使用的多肽符號中，依照標準用法及慣例，左邊是氨基末端方向，右邊是羧基末端方向。保守性的氨基酸取代指的是具有相似側(cè)鏈的殘基之間的互換。例如，具有脂肪族側(cè)鏈的一組氨基酸是甘氨酸，丙氨酸，纈氨酸，亮氨酸以及異亮氨酸；具有脂肪族羥基側(cè)鏈的一組氨基酸是絲氨酸和蘇氨酸；具有含酰胺側(cè)鏈的一組氨基酸是天冬酰胺和谷氨酰胺；具有芳香族側(cè)鏈的一組氨基酸是苯丙氨酸，酪氨酸以及色氨酸；具有堿性側(cè)鏈的一組氨基酸是賴氨酸，精氨酸以及組氨酸；具有含硫側(cè)鏈的一組氨基酸是半胱氨酸和甲硫氨酸。優(yōu)選的保守性氨基酸取代組是纈氨酸-亮氨酸-異亮氨酸，苯丙氨酸-酪氨酸，賴氨酸-姊青氨酸，丙氨酸-纈氨酸，谷氨酸-天冬氨酸，以及天冬酰胺-谷氨酰胺。如本發(fā)明中所述，抗體或者免疫球蛋白分子的氨基酸序列的輕度變種也被設(shè)定為包括在本發(fā)明之內(nèi)，所述的氨基酸序列的變種的至少75%、更優(yōu)選至少80%、90%、95%、以及最優(yōu)選99%保持不變。特別的，可以設(shè)定為保守性氨基酸取代。保守性取代發(fā)生在具有相關(guān)側(cè)鏈的一類氨基酸家族中。遺傳編碼的氨基酸通常被劃分為幾個家族(l)酸性氨基酸天冬氨酸，谷氨酸；(2)堿性氨基酸賴氨酸，精氨酸，組氨酸；(3)非極性氨基酸丙氨酸，纈氨酸，亮氨酸，異亮氨酸，脯氨酸，苯丙氨酸，曱硫氨酸，色氨酸；以及(4)不帶電荷的極性氨基酸甘氨酸，天冬酰胺，谷氨酰胺，半胱氨酸，絲氨酸，蘇氨酸，酪氨酸。親水性氨基酸包括精氨酸，天冬酰胺，天冬氨酸，谷氨酰胺，谷氨29酸，組氨酸，賴氨酸，絲氨酸，以及蘇氨酸。疏水性氨基酸包括丙氨酸，半胱氨酸，異亮氨酸，亮氨酸，甲硫氨酸，苯丙氨酸，脯氨酸，色氨酸，酪氨酸，以及纈氨酸。其他的氨基酸家族包括(i)絲氨酸和蘇氨酸，屬于脂肪族羥基家族；(ii)天冬酰胺和谷氨酰胺，屬于含酰胺家族；(iii)丙氨酸，纈氨酸，亮氨酸以及異亮氨酸，屬于脂肪族家族；以及(iv)苯丙氨酸，色氨酸以及酪氨酸，屬于芳香》矣家族。本發(fā)明使用的"制劑"表示化學(xué)化合物，化學(xué)化合物的混合物，生物大分子，或者由生物材料制備的提取物。術(shù)i吾患者包4舌人類宿主和動4勿宿主。本發(fā)明還包括Fv,Fab,Fab,以及F(ab，)2抗CD3片段，單鏈抗CD3抗體，雙特異性抗CD3抗體，抗CD3抗體偶聯(lián)物，三特異性抗體，以及它們的免疫偶聯(lián)物和片,殳。雙特異性抗體是與至少兩個不同的抗原具有結(jié)合特異性的抗體。在本發(fā)明中，一種結(jié)合特異性是針對CD3的。另外一個結(jié)合目標是任何其他抗原，有利的抗原是細胞表面蛋白或者細胞表面受體或者受體亞基。治療'l"生給藥以及纟且合物可以預(yù)計，依照本發(fā)明存在的治療性給藥可以通過向《且合物中加入適當?shù)妮d體、賦形劑、以及其他制劑的方式來《會藥，以提供加強的傳遞性、運送性、耐受性、以及類似性質(zhì)?？梢栽谒兴巹?匕學(xué)師已知的藥方中找到眾多合適的配方組分Remington'sPharmaceuticalSciences(《雷氏藥學(xué)大全》)(15thed，MackPublishingCompany,Easton，PA(1975))，特另'J是其中由Blaug,Seymour編寫的第87章(Chapter87byBlaug，Seymour)。這些配方組分包括，例如，粉末，糊劑，藥膏，凝膠，蠟，油，油脂，含有嚢泡的油脂(陽離子或者陰離子)(例如Lipofectin),DNA偶耳關(guān)物，無水吸收制劑，水包油乳液以及油包水乳液，碳蠟乳液(各種分子量的聚乙二醇)，半固體凝月交，以及含有石友蠟的半固體混合物。前述任意一種混合物都可以適用于本發(fā)明所述的治療和治療劑中，只要保證這種配方組分不會使組合物中的活性成分發(fā)生滅活，并且該配方組分對于纟會藥路徑來"i兌是物理兼容并且耐受的。也可以參見BaldrickP.(于2000年)在Regul.ToxicolPharmaco1.32(2):210-8中發(fā)表的文章"Pharmaceuticalexcipientdevelopment:theneedforpreclinicalguidance"(《藥學(xué)貝武形劑的發(fā)展臨床前指導(dǎo)的需求》)，WangW.(于2000年)在Int.J.Pharm.203(1-2):1-60中發(fā)表的文章"Lyophilizationanddevelopmentofsolidproteinpharmaceuticals"(《冷凍干燥法以及固體蛋白質(zhì)藥物的發(fā)展》)，CharmanWN(于2000年)在JPharmSci.89(8):967-78中發(fā)表的文章"Lipids,lipophilicdrugs,andoraldrugdelivery—someemergingconcepts"(《S由月旨、親月旨寸生藥物，以及口服藥物的運送——些新興概念》)，Powell等人(于1998年)在PDAJPharmSciTechnol.52:238-311中發(fā)表的文章"Compendiumofexcipientsforparenteralformulations"(《用于腸道外組合物的賦形劑相克述》)，以及上述文章所引用的其<也關(guān)于藥劑化學(xué)師熟知的組合物、賦形劑和載體的信息。所述的組合物優(yōu)選是本質(zhì)上純的。這里〗吏用的"本質(zhì)上純的"指的是目的物種類是占支配地位的種類(即，以摩爾計，所述的目的物的量比組合物中其他任何個體種類的量多)，并且優(yōu)選的，本質(zhì)上純的片段指的是一種組合物，其中的目的物占存在于該組合物中的所有大分子種類的至少大約50%(以摩爾計)。一般的，一個本質(zhì)上純的組合物將包括占存在于其中的所有大分子種類的至少大約80%的目的物，更優(yōu)選占至少大約85%、90%、95%,以及99%。最優(yōu)選的，所述的目的物被純化為本質(zhì)上是均一的(使用常規(guī)檢測方法在所述的組合物中檢測不到污染物種)，其中所述的組合物本質(zhì)上由一種大分子物種構(gòu)成。本發(fā)明提供的治療性組合物包括本發(fā)明使用的抗CD3抗體，該組合物一皮用來治療或者纟爰解免疫相關(guān)性疾病帶來的癥狀，例如，自身免疫性疾病或者炎性疾病。自身免疫性疾病包括，例如，獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS，一種自身免疫組分的病毒性疾病)，斑禿，強直性脊柱炎，抗磷脂綜合癥，自身免疫性艾迪森氏病，自身免疫性溶血性貧血，自身免疫性肝炎，自身免疫性內(nèi)耳病(AIED)，自身免疫性淋巴增生綜合癥(ALPS)，自身免疫性血小板減少性紫癜(ATP)，白塞病,心肌病，celiacspruedermatitishepetiformis;慢性疲勞免疫功能紊亂綜合癥(CFIDS)，慢性炎性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)病(CIPD)，瘢痕性類天皰疳，寒冷凝集素癥，肢端^更皮綜合癥，克羅恩氏病，過敏性紫癜，幼年型皮肌炎，紅斑狼瘡，特發(fā)性混合性冷球蛋白血癥，纖維組織炎癥，曱狀腺機能亢進，格林-巴利綜合癥，橋本氏甲狀腺炎，特發(fā)性肺纖維化，特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP),免疫球蛋白A型腎病，胰島素依賴型糖尿病(I型糖尿病)，幼年型慢性關(guān)節(jié)炎(斯提耳病)，幼年型風濕性關(guān)節(jié)炎，美尼爾氏病，混合結(jié)締組織病，多發(fā)性石更化癥，重癥月幾無力，pemaciousanemia,結(jié)節(jié)性多動務(wù)K炎，多壽欠骨炎，多腺體綜合癥，風濕性多肌痛癥，多肌炎和皮肌炎，原發(fā)性無丙種球蛋白血癥，原發(fā)性膽汁性肝硬化，銀屑病，關(guān)節(jié)4艮屑病，雷諾現(xiàn)象，賴特綜合癥，風濕熱，風濕性關(guān)節(jié)炎，結(jié)節(jié)病，-更皮病(進行性系統(tǒng)性硬化癥(PSS),也被稱為系統(tǒng)性硬化癥(SS)),口眼干燥綜合癥，僵石更人綜合癥，系統(tǒng)性紅斑《良疳，高安動脈炎，顳動月永炎/巨細胞動脈炎，潰瘍性結(jié)腸炎，葡萄膜炎，白癜風以及韋格納肉芽腫。炎性疾病包括，例如，f曼性炎性疾病和急性炎性疾病。炎性疾病的例子包括阿茲海默氏癥，哞喘，特異反應(yīng)性過敏，過敏，動脈粥樣硬化，支氣管哞喘，濕滲，腎小球腎炎，移植物抗宿主反應(yīng)，溶血性貧血，手骨性關(guān)節(jié)炎，敗血癥，腦中風，組織和器官移植，血管炎，糖尿病視網(wǎng)膜病變以及高機械通氣誘導(dǎo)的肺損傷。向患有免疫相關(guān)性疾病的宿主》會藥所述的抗CD3抗體組合物，所述疾病是例如自身免疫性疾病或者炎性疾病。利用本4頁域已4口的方法來鑒定患有自身免疫性疾病或者炎性疾病的宿主。例如，通過使用各種臨床4企測和/或?qū)嶑R全室才企測例如身體檢查，放射性檢查，以及血樣、尿才羊和便沖羊分析來評〗介宿主的免疫狀況，以鑒定患有自身免疫性疾病例如克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎、或者炎癥性腸病的宿主。例如，通過例如對及時擴散(即，在至少三個月的時間內(nèi)發(fā)生在中^區(qū)神經(jīng)系統(tǒng)的不同區(qū)域)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)病變進4亍核,茲共振造影，以鑒定患有多發(fā)性硬化癥的患者。通過例如血樣檢測和/或X-射線或者其他造影學(xué)評估來鑒定患有風濕性關(guān)節(jié)炎的患者。例如通過下列方法來鑒定患有I型糖尿病的患者當下述檢測之中的任意三個呈陽性，之后在另外一天出現(xiàn)另外一個陽性檢測時(1)空腹血漿葡萄糖大于或者等于126mg/dl,且具有糖尿病癥狀；(2)即時血漿葡萄糖(在一天中的任意時間測量)大于或者等于200mg/dl,且具有糖尿病癥狀；或者(3)口服葡萄糖耐量檢測(OGTT)值大于或者等于200mg/dl,測量間隔為兩個小時(在三個小時的時間跨度上進行OGTT)。如果各種實驗室檢測或者臨床檢測中的任意一項取得了成功的結(jié)果，則i人為對患有免疫相關(guān)性疾病例如自身免疫性疾病或者炎'1"生疾病的宿主給藥4元CD34元體組合物是成功的。例如，如果與上述疾病相關(guān)的一種或者多種癥狀凈皮參爰解、減輕、抑制或者不再進一步發(fā)展，即惡化，則i人為對患有免疫相關(guān)性疾病例如自身免疫性疾病或者炎性疾病的宿主給藥抗CD3抗體組合物是成功的。如果上述疾病例如自身免疫性疾病開始消除或者不再進一步發(fā)展，即惡化，則認為對患有免疫相關(guān)性疾病例如自身免疫性疾病或者炎性疾病的宿主給藥抗CD3抗體組合物是成功的。本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物^皮用來治療、i貪斷和/或預(yù)防炎癥性腸炎(IBD)。炎癥性腸炎是一種消化道(GI)組織的慢性炎癥和刺激。與炎癥性腸炎相關(guān)的癥狀是例如腹部抽搐和疼痛，泄瀉，直腸出血，發(fā)熱以及升高的白細胞計數(shù)。將本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物給藥于患有、被診斷為、或者傾向于炎癥性腸炎的宿主。將本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物以足夠緩解至少一種炎癥性腸炎癥狀、治療炎癥性腸炎、預(yù)防炎癥性腸炎、和/或防止炎癥性腸炎發(fā)展到更嚴重的疾病狀態(tài)的劑量向宿主給藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物在0.05毫克/天至10毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥。優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.1毫克/天至5.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥，更優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.5毫克/天至3.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)^^藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量選自0.5亳克/天，0.6毫克/天，0.7毫克/天，0.8毫克/天，0.9毫克/天，1.0毫克/天，1.1毫克/天，1.2毫克/天，1.3毫克/天，1.4毫克/天，1.5毫克/天，1.6毫克/天，1.7毫克/天，1.8毫克/天，1.9毫克/天，2.0毫克/天，2.1毫克/天，2.2毫克/天，2.3毫克/天，2.4毫克/天，2.5毫克/天，2.6亳克/天，2.7毫克/天，2.8毫克/天，2.9毫克/天，以及3.0毫克/天。在另一種實施方式中，本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物被用來洽療、i貪斷和/或預(yù)防潰瘍性結(jié)腸炎。潰瘍性結(jié)腸炎是一種結(jié)腸的慢性炎癥和刺激。與潰瘍性結(jié)腸炎相關(guān)的癥狀是例如貧血；疲勞；體重減輕；食名爻不纟展；直腸出血；體液和營養(yǎng)流失；皮膚病變；關(guān)節(jié)疼痛；以及生長障礙(特別是兒童)。將本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物給藥于患有、纟皮it斷為、或者傾向于潰瘍性結(jié)腸炎的宿主。將本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物以足夠緩解至少一種潰瘍性結(jié)腸炎癥狀、治療潰瘍性結(jié)腸炎、預(yù)防潰瘍性結(jié)腸炎、和/或防止?jié)冃越Y(jié)腸炎發(fā)展到更嚴重的疾病狀態(tài)的劑量向宿主鄉(xiāng)合藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物在0.05毫克/天至10毫克/天的劑量范圍內(nèi)癥會藥。優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.1毫克/天至5.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥，更優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體《且合物在0.5毫克/天至3.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量選自0.5毫克/天，0.6毫克/天，0.7毫克/天，0.8毫克/天，0.9毫克/天，1.0亳克/天，1.1毫克/天，1.2毫克/天，1.3毫克/天，1.4毫克/天，1.5毫克/天，1.6毫克/天，1.7毫克/天，1.8毫克/天，1.9毫克/天，2.0毫克/天，2.1毫克/天，2.2毫克/天，2.3毫克/天，2.4毫克/天，2.5毫克/天，2.6毫克/天，2.7毫克/天，2.8毫克/天，2.9毫克/天，以及3.0毫克/天。在另外一種實施方式中，本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物被用來治療、it斷和/或預(yù)防克羅恩氏病?？肆_恩氏病是一種腸部的十曼寸生炎癥和刺、激。與克羅恩氏病相關(guān)的癥狀是例如腹部疼痛，泄瀉，體重減輕，食欲不振，發(fā)熱，夜間盜汗，直腸疼痛，以及直腸出血。將本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物給藥于患有、被診斷為、或者傾向于克羅恩氏病的宿主。將本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物以足夠緩解至少一種克羅恩氏病癥狀、治療克羅恩氏病、f^防克羅恩氏病、和/或防止克羅恩氏病發(fā)展到更嚴重的疾病狀態(tài)的劑量向宿主給藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物在0.05毫克/天至10毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥。優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在O.l毫克/天至5.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥，更優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.5毫克/天至3.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量選自0.5毫克/天，0.6毫克/天，0.7毫克/天，0.8毫克/天，0.9毫克/天，1.0毫克/天，1.1毫克/天，1.2毫克/天，1.3毫克/天，1.4毫克/天，1.5毫克/天，1.6亳克/天，1.7毫克/天，1.8毫克/天，1.9毫克/天，2.0毫克/天，2.1毫克/天，2.2毫克/天，2.3毫克/天，2.4毫克/天，2.5毫克/天，2.6毫克/天，2.7毫克/天，2.8毫克/天，2.9毫克/天，以及3.0毫克/天。在另外一種實施方式中，本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物被用來治療、診斷和/或預(yù)防多發(fā)性硬化癥(MS)。多發(fā)性硬化癥是一種影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的慢性、炎性疾病。多發(fā)性硬化癥的癥狀包^舌，例如，知覺變化，^L力問題，月幾肉4t弱，抑郁，協(xié)調(diào)性和語言困難，以及疼痛。將本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物給藥于患有、^皮診斷為、或者傾向于多發(fā)性石更化癥的宿主。將本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物以足夠緩解至少一種多發(fā)性硬化癥癥狀、治療多發(fā)性硬化癥、預(yù)防多發(fā)性石更化癥、和/或防止多發(fā)性石更化癥發(fā)展到更嚴重的疾病狀態(tài)的劑量向宿主給藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物在0.05毫克/天至10毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥。優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.1毫克/天至5.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥，更優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.5毫克/天至3.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量選自0.5亳克/天，0.6毫克/天，0.7毫克/天，0.8毫克/天，0.9毫克/天，1.0毫克/天，1.1毫克/天，1.2毫克/天，1.3毫克/天，1.4毫克/天，1.5毫克/天，1.6毫克/天，1.7毫克/天，1.8毫克/天，1.9毫克/天，2.0毫克/天，2.1毫克/天，2.2毫克/天，2.3毫克/天，2.4毫克/天，2.5毫克/天，2.6毫克/天，2.7毫克/天，2.8毫克/天，2.9毫克/天，以及3.0毫克/天。在另外一種實施方式中，本發(fā)明4是供的抗CD3抗體組合物4皮用來治療、i貪斷和/或預(yù)防力夷島素依賴型^唐尿病(I型糖尿病)。I型4唐尿病疾病的凈爭點是由;敫素力夷島素的分泌不足而導(dǎo)致持續(xù)的高血糖(高血糖水平)。I型糖尿病的特點是胰島中缺乏產(chǎn)生胰島素的P細胞。I型糖尿病是一種自身免疫性疾病，機體本身的免疫系統(tǒng)攻擊胰島中的P細胞，足以摧毀它們或者損害它們使它們減少或者停止生產(chǎn)胰島素。I型糖尿病的癥狀包括，例如，渴感增強，排尿增多，雖然食名大增加卻體重減輕，惡心，嘔吐，腹部疼痛，以及疲勞。將本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物給藥于患有、祐珍斷為、或者傾向于I型糖尿病的宿主。將本發(fā)明才是供的抗CD3抗體組合物以足夠緩解至少一種I型糖尿病癥狀、治療I型4唐尿病、預(yù)防I型lt尿病、和/或防止I型4唐尿病發(fā)展到更嚴重的疾病狀態(tài)的劑量向宿主纟會藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物在0.05毫克/天至10毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥。優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.1亳克/天至5.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥，更優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.5毫克/天至3.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量選自0.5毫克/天，0.6毫克/天，0.7毫克/天，0.8毫克/天，0.9毫克/天，1.0毫克/天，1.1毫克/天，1.2毫克/天，1.3亳克/天，1.4毫克/天，1.5亳克/天，1.6毫克/天，1.7毫克/天，1.8毫克/天，1.9毫克/天，2.0毫克/天，2.1毫克/天，2.2毫克/天，2.3毫克/天，2.4毫克/天，2.5毫克/天，2.6毫克/天，2.7毫克/天，2.8毫克/天，2,9毫克/天，以及3.0亳克/天。在另外一種實施方式中，本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物被用來治療、診斷和/或預(yù)防風濕性關(guān)節(jié)炎(RA)。風濕性關(guān)節(jié)炎是一種自身免疫性疾病，能夠引起關(guān)節(jié)的慢性炎癥。風濕性關(guān)節(jié)炎也可以引起關(guān)節(jié)周圍的組織的炎癥，以及才幾體中其他器官的炎癥。與風濕性關(guān)節(jié)炎相關(guān)的癥狀是例如疲勞，食欲不振，低度發(fā)熱，月幾肉和關(guān)節(jié)疼痛，以及僵石更。將本發(fā)明4是供的抗CD3抗體組合物給藥于患有、被診斷為、或者傾向于風濕性關(guān)節(jié)炎的宿主。將本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物以足夠緩解至少一種風濕性關(guān)節(jié)炎癥狀、治療風濕性關(guān)節(jié)炎、預(yù)防風濕性關(guān)節(jié)炎、和/或防止風濕性關(guān)節(jié)炎發(fā)展到更嚴重的疾病狀態(tài)的劑量向宿主給藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物在0.05毫克/天至10毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥。優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.1毫克/天至5.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥，更優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.5毫克/天至3.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量選自0.5毫克/天，0.6毫克/天，0.7毫克/天，0.8毫克/天，0.9毫克/天，1.0毫克/天，1.1毫克/天，1.2毫克/天，1.3毫克/天，1.4毫克/天，1.5毫克/天，1.6毫克/天，1.7毫克/天，1.8毫克/天，1.9毫克/天，2.0毫克/天，2.1毫克/天，2.2毫克/天，2.3毫克/天，2.4毫克/天，2.5毫克/天，2.6毫克/天，2.7毫克/天，2.8毫克/天，2.9毫克/天，以及3.0毫克/天。本發(fā)明也提供了用于治療或者緩解免疫相關(guān)性疾病的癥狀的方法，或用于治療或者緩解器官移植之后與排斥反應(yīng)相關(guān)的癥狀的方法。例如，本發(fā)明<吏用的組合物#:用來治療或者纟爰解本發(fā)明提及的自身免疫性疾病以及炎性疾病中的任意一種的癥^)大。本發(fā)明<吏用的治療組合物也可以作為免疫抑制劑;故用于器官移植或者組織移植中。這里所說的"免疫抑制劑，，指的是能夠作用于免疫系統(tǒng)并導(dǎo)致至少一種免疫應(yīng)答途徑的反應(yīng)性發(fā)生立即減弱或者延遲減弱的制劑，這種應(yīng)答可以是自然發(fā)生的或者是人工觸發(fā)的，這種應(yīng)答可以作為先天免疫系統(tǒng)的一部分發(fā)生，也可以作為適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的一部分，或者是兩者皆可。在器官移植或者組織移植之前、之中和/或之后，將這些免疫抑制性抗CD3抗體組合物給藥于宿主。例如，本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物在器官移植或者組織移才直之后^皮用來治療或者預(yù)防排斥反應(yīng)。例如，所述的抗CD3抗體組合物在0.05毫克/天至10毫克/天的劑量范圍內(nèi)《合藥。優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.1毫克/天至5.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥，更優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.5毫克/天至3.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量選自0.5毫克/天，0.6毫克/天，0.7毫克/天，0.8毫克/天，0.9毫克/天，1.0毫克/天，1.1毫克/天，1.2毫克/天，1.3毫克/天，1.4毫克/天，1.5毫克/天，1.6毫克/天，1.7毫克/天，1.8毫克/天，1.9毫克/天，2.0毫克/天，2.1毫克/天，2.2毫克/天，2.3毫克/天，2.4毫克/天，2.5亳克/天，2.6毫克/天，2.7毫克/天，2.8毫克/天，2.9毫克/天，以及3.0毫克/天。優(yōu)選的，本發(fā)明提供的治療性抗CD3抗體組合物通過靜脈內(nèi)或者皮下途徑給宿主給藥。可以i殳定其他形式的給藥路徑。例如，所述的抗CD3抗體組合物通過靜月永內(nèi)、皮下、口月艮、腸道外、鼻內(nèi)、肌肉內(nèi)的形式給藥，或者通過上述這些路徑的4壬意組合的形式給藥。在一種實施方式中，將本發(fā)明4是供的抗CD3抗體組合物與另外一種制劑聯(lián)合給藥，所述的制劑是例如人胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)或者P細胞/休眠化合物(即，減少或者抑制胰鳥素釋放的化合物，例如鉀通道開放劑)。適當?shù)娜艘雀哐撬貥与?1(GLP-1)化合物的例子在例如美國公開申請U.S.20040037826中有所描述，而適當?shù)腜細胞休眠化合物在美國公開申請U.S.20030235583中有所描述，上述兩篇文獻的全部內(nèi)容在此引入作為參考。在另外一種實施方式中，4奪用于治療免疫相關(guān)性疾病的抗CD3抗體組合物與各種已知的抗炎癥化合物和/或免疫抑制性化合物中的任意一種聯(lián)合給藥。合適的已知化合物包括，但不局限于甲氨蝶呤，環(huán)胞霉素A(包括，例如，環(huán)胞霉素微乳劑)，他克莫司，類固醇，他汀類，干擾素P，英利昔單抗(因福利美)，依坦西普(依那西普)以及#~美樂(阿達木單抗)。例如，在對風濕性關(guān)節(jié)炎的治療當中，本發(fā)明使用的抗CD3抗體組合物可以與類固醇、曱氨蝶呤、環(huán)胞霉素A、他汀類、英利昔單抗(因福利美)、依坦西普(Etanercept)和/或修美樂(阿達木單抗)共同給藥。在對葡萄膜炎的治療當中，可以將所述的抗CD3抗體組合物與例如類固醇、甲氨蝶p令、環(huán)I包霉素A、環(huán)>疇酰胺和/或他汀類共同給藥。同樣的，可以《吏用本發(fā)明所述的抗CD3抗體組合物與英利昔單抗(因福利美)，和/或修美樂(阿達木單抗)的混合物對患有例如克羅恩氏病或者4艮屑病的患者進4于治療?；加卸喟l(fā)性石更化癥的患者可以接受本發(fā)明所述的抗CD3抗*體組合物與例如醋酸格拉替雷(Copaxone),干擾素P-la(Avonex)、干擾素p-la(Rebif)、干擾素P-lb(Betaseron或者Betaferon)、米妥蒽酉昆(Novantrone)、i也塞米+》(Decadron)、甲基強的+>(Depo-Medrol)、和/或強的+>(Deltasone)和/或他汀類的混合而成的混合物。在一種實施方式中，本發(fā)明所述的免疫抑制性抗CD3抗體組合物與另外一種制劑聯(lián)合使用，所述的另外一種制劑是例如如上所述的人胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)或者(3細胞休眠化合物。在另外一種實施方式中，將這些免疫抑制性抗CD3抗體組合一種耳關(guān)合給藥。與本發(fā)明所述的抗CD3抗體組合物耳關(guān)用的合適的抗炎癥化合物和/或免疫抑制性化合物包括，但不局限于曱氨蝶呤，環(huán)胞霉素A(包括，例如，環(huán)胞霉素微乳劑)，他克莫司，類固醇以及^也汀類。在本發(fā)明的另外一種實施方式中，當在人類個體中檢測到自身反應(yīng)性抗體的存在后，向該個體給藥抗CD3抗體組合物。本領(lǐng)域已知，這類自身反應(yīng)性抗體對人類個體中的一種或者多種內(nèi)源性表達的蛋白具有結(jié)合特異性。在本發(fā)明的一個方面，對所述人類個體中是否存在本領(lǐng)域熟知的、特別是存在于一種或者多種自身免疫性疾病中的自身反應(yīng)性抗體進行檢測。在一個特殊的實施方式中，對人類患者是否存在針對胰島素、谷氨酸脫羧酶和/或IA-2蛋白的抗體進行檢測，隨后當取得一種或者多種自身反應(yīng)性抗體的陽性檢測結(jié)果時，則向該患者給藥抗CD3抗體。在本發(fā)明所述的另外一種實施方式中，將抗CD3抗體組合物給藥于人類宿主中，用以預(yù)防、纟爰解或者減少免疫細月包在人體組織內(nèi)的聚集。向需要治療的宿主給藥本發(fā)明所述的抗CD3抗體，用以預(yù)防以及治療由于免疫細胞非正常性的或者去調(diào)節(jié)的聚集于人類組織位點而產(chǎn)生的疾病帶來的狀況。在本發(fā)明所述的另外一種實施方式中，將抗CD3抗體組合物給藥于人類宿主中，用以預(yù)防、纟爰解或者減少免疫細月包對人體組織的;參入。因此，《合藥本發(fā)明所述的抗CD3抗體，用以預(yù)防和/或治療由于免疫細力包非正常性的或者去調(diào)節(jié)的滲透入人類組織^f立點而產(chǎn)生的疾病帶來的狀況。在本發(fā)明所述的另外一種實施方式中，將抗CD3抗體組合物給藥于人類宿主中，用以預(yù)防、緩解或者減少由人類機體內(nèi)細胞因子的釋》文而介導(dǎo)的影響。術(shù)語"細胞因子"指的是本領(lǐng)域已知的、能夠與細J包表面的胞外受體相結(jié)合并因此調(diào)節(jié)細力包功能的所有人類細胞因子，包括但不局限于白細胞介素-2(IL-2),干擾素-g(IFN-g),腫瘤壞死因子-a(TNF-a)，白細胞介素-4(IL-4)，白細月包介素-5(IL-5)，白細月包介素-6(IL-6),白細月包介素-9(IL-9),白細月包介素-10(IL-10),以及白細月包介素-13(IL-13)。在本發(fā)明所述的另外一種實施方式中，將抗CD3抗體組合物給藥于人類宿主中，用以預(yù)防、《爰解或者減少由人類才幾體內(nèi)細胞因子受體的釋放而介導(dǎo)的影響。術(shù)語"細胞因子受體"指的是本領(lǐng)域已知的、與一種或者多種細胞因子相結(jié)合的所有人類細胞因子受體，如本發(fā)明所定義的細胞因子受體包括但不局限于前述細胞因子的受體。因此，給藥本發(fā)明所述的抗CD3抗體，用以治療和/或預(yù)防由人類體內(nèi)一種或者多種細胞因子受體的異?；罨?、及其結(jié)合或者連結(jié)而介導(dǎo)的狀況?？梢赃M一步的預(yù)想到，在體內(nèi)給藥所述的抗CD3抗體能夠使該人類宿主體內(nèi)由細胞因子受體介導(dǎo)的胞內(nèi)信號產(chǎn)生衰竭。在本發(fā)明所述的一個方面，將抗CD3抗體組合物《會藥于一種人類個體，所述的人類個體的胰島0細胞功能減弱。在一種實施方式中，使用本領(lǐng)域已知的技術(shù)對所述個體的|3細胞功能、胰島素分泌或者c-肽水平進行才企測。隨后，當發(fā)現(xiàn)任何一種指示劑發(fā)生顯著的減少時，向所述的人類個體給藥足夠劑量的抗CD3抗體，用以預(yù)防其中P細胞功能的自身免疫性破壞的進一步發(fā)展。診斷性組合物以及預(yù)防性組合物本發(fā)明提供的抗CD3抗體組合物(在這里也被稱為抗體組合物)可以用于it斷性《且合物以及子貞防性《且合物中。在一種實施方式中，向存在患有一種前述提及的自身免疫性疾病的危險的患者給藥本發(fā)明提供的抗CD3單克隆抗體組合物?？梢?使用遺傳性標i己、血清學(xué)標i己或者生物化學(xué)標i己來確定傾向于一種或者多種前述^是及的自身免疫性疾病的患者。例如，特定的人白細胞抗原(HLA)亞型的存在以及血清學(xué)自身抗體(針對胰島素、谷氨酸脫羧酶65以及IA-2)的存在則意p未著患有I型4唐尿病。在本發(fā)明提供的另外一種實施方式中，向被診斷為患有一種或者多種前述提及的自身免疫性疾病的人類個體給藥抗CD3抗體組合物。在it斷之后，纟會藥抗CD3抗體來減輕或者逆轉(zhuǎn)由自身免疫性產(chǎn)生的影響。在一個實施例中，向被診斷為患有I型糖尿病的人類個體《合藥足夠劑量的抗CD3抗體，用以重建胰島功能，并且將對胰島的自身免疫性滲入傷害最小化。在另外一種實施方式中，向被診斷為患有風濕性關(guān)節(jié)炎的人類個體給藥抗CD3抗體，用以減少免疫細力包對肢關(guān)節(jié)的滲入以及由此帶來的^皮壞。優(yōu)選的，本發(fā)明提供的治療性、診斷性和/或預(yù)防性抗CD3抗體組合物通過省爭脈內(nèi)或者皮下方式向宿主給藥?？梢栽O(shè)定其他形式的給藥路徑。例如，所述的抗CD3抗體組合物通過靜脈內(nèi)、皮下、口服、腸道外、鼻內(nèi)、肌肉內(nèi)的形式給藥，或者通過上述這些3各徑的4壬意組合的形式給藥。本發(fā)明所引用的全部公開出版物以及專利文獻的內(nèi)容都在此？1入作為參考，就如每篇這樣的公開出版物或者文獻都分別被特意強調(diào)要在此51入作為參考。對7>開出版物以及專利文獻的引用并不意味著認可它們中的任何一篇是相關(guān)現(xiàn)有技術(shù)，也不意味著構(gòu)成了對任〗可一篇文獻的內(nèi)容或者日期的;人可。3E見在通過書面的說明書對本發(fā)明進4亍了描述，本領(lǐng)域:技術(shù)人員能夠理解，本發(fā)明可以通過各種實施方式來實現(xiàn)，前述的說明書以及后面的實施例的目的在于:^兌明，并不構(gòu)成對隨后的一又利要求的限制。實施例下述實施例，包括進行的試驗以及得到的結(jié)果僅僅起到闡述的目的，并不解釋為對本發(fā)明的限制。實施例1:組合物的配置和分析在本發(fā)明4是供的配方研究中，在三個月的時間內(nèi)，在規(guī)定溫度下對20個配方中的抗CD3抗體的穩(wěn)定性進行監(jiān)控。被研究的配方包括醋酸緩沖劑、檸檬酸緩沖劑以及磷酸緩沖劑，它們覆蓋的pH范圍為pH4.0至8.0,并且包括備選的賦形劑吐溫80,甘露醇，乙二胺四乙酸(EDTA),氯化鈉和蔗并唐。在該項研究中裙測的配方在下面的表格中示出表1:^t測的配方<table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>使用不同的穩(wěn)定性指示方法來監(jiān)控產(chǎn)品的不同物理特性以及化學(xué)特性。這些方法選自在產(chǎn)品完整性分批釋放檢測中使用的方法，并且包括pH、蛋白濃度、視覺外觀、凝膠滲透色語(GPHPLC)、十二烷基磺酸鈉-聚丙烯酰胺凝月交電泳(還原型和未還原型)以及等電聚焦。在預(yù)定的儲存溫度5±3。C下以及升高的儲存溫度25士3。C至40土3。C下，評價每個配方中的產(chǎn)品的穩(wěn)定性。所述的升高的溫度用來提供每組配方中的加速的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)，這些數(shù)據(jù);故用來支持對上述配方的選擇，這種選擇取決于實時凄t據(jù)。除此之外，將樣品保存于-20土5。C的溫度下，來考察冷凍-融化對所述分子的穩(wěn)、定性所產(chǎn)生的影響。為了進一步考察配方對產(chǎn)品的聚集趨勢所產(chǎn)生的影響，在環(huán)境溫度下對樣品攪拌48小時，使樣品受壓。從本項研究的每個測試中得到的結(jié)果表明，當處于預(yù)定的儲存溫度時沒有發(fā)生顯著變化的、或者當處于升高的溫度時發(fā)生的變化與研究初始時相比最小的，是候選配方?？傊?，本項研究的結(jié)杲表明，對于抗CD3抗體來說，pH為5.5的醋酸配方F2、F3、F4和F5是最適合的候選配方。之后，25毫摩醋酸鈉/125毫摩氯化鈉/0.02%吐溫80、pH5.5^皮選為抗CD3抗體的最終配方ll沖液。這樣的組合物具有3.0至7.0的pH范圍。優(yōu)選的，這種組合物具有5.0至6.0的pH范圍，更優(yōu)選的，這種組合物具有5.2至5.8的pH范圍，最優(yōu)選的，這種組合物具有5.4至5.6的pH范圍。例如，在一種實施方式中，這種組合物具有5.5的pH《直。實施例2:抗CD3抗體組合物的劑量這里所述的劑量選擇過程用來確定包括在更廣泛的研究中測試的抗CD3抗體組合物的治療時間窗在內(nèi)的劑量。同時，測試使用的初始劑量被選擇為不會對患者造成傷害的劑量。由于本發(fā)明描述的某些抗CD3單克隆抗體，例如28F11,15C3,27H5以及23F10,它們不與"標準"試驗室類型的CD3發(fā)生交叉反應(yīng)，因而無法在毒性藥理學(xué)和預(yù)臨床藥理學(xué)方面獲得毒性數(shù)據(jù)以及功效數(shù)據(jù)。特別的，GLP(人胰高血糖素樣肽)研究證明，本發(fā)明描述的某些抗CD3單克隆抗體不與鼠(mouse)、小鼠(rat)、兔、獼猴、食蟹猴以及狒狒的CD3發(fā)生交叉反應(yīng)。因此，所述的劑量選擇過程由來自于體外的人類T細胞數(shù)據(jù)進行指導(dǎo)，將不與標準試-驗室CD3發(fā)生交叉反應(yīng)的抗CD3抗體(即，"非交叉反應(yīng)性CD3抗體")與其他普遍的市售抗CD3抗體進行比較，利用普遍存在的或者市售的抗CD3抗體中公開的信息(參見，例如，Orthoclone商品單；Woodle翻譯1999;Friend翻譯1999;HeroldNEJM2002;KeymeulenNEJM2005):*OrthocloneOKT3，hOKT3y1(Ala-Ala)以及ChAglyCD3的臨床劑量在每^l十劑5毫克至25毫克的范圍內(nèi)是有效的，能夠達到對T細胞表面上80%的CD3分子或者更多CD3分子的調(diào)節(jié)作用，并且產(chǎn)生的平均血清水平>800納克/毫升；*OrthocloneOKT3,hOKT3y1(Ala-Ala)以及ChAglyCD3的治療長短分別是連續(xù)的10-14天、連續(xù)的7-14天以及連續(xù)的6天；*用來評估CD3以及人類T細J包上的TCR受體的調(diào)節(jié)作用的體外研究一貫表明，與Orthoclone相比，非交叉反應(yīng)性抗CD3抗體的IC50高出2-3倍；*用來評估安全問題例如CRS(細胞因子釋放綜合癥)的體外研究一貫表明，與Orthoclone相比，當使用人外周血白細胞進行培養(yǎng)之后，非交叉反應(yīng)性抗CD3抗體誘導(dǎo)少量的或者不誘導(dǎo)腫瘤壞死因子a(TNFa),干擾素y(IFNy)，白細胞介素-6(IL-6),或者白細胞介素-2(IL-2)。上述體外測試的參數(shù);漠擬白細月包暴露于患者外周血白細月包的臨床狀態(tài)。由非交叉反應(yīng)性抗數(shù)<因jl:匕，為了；平估治療時間窗內(nèi)的免疫學(xué)功效和初步治療功效，患者將接受連續(xù)5天劑量的非交叉反應(yīng)性CD3抗體。在連續(xù)的5天內(nèi)向患者給藥的劑量在0.5毫克/天至5.0亳克/天的范圍內(nèi)，該劑量顯著低于Orthoclone的有效劑量，但可能誘發(fā)輕度的細胞因子釋放綜合癥。優(yōu)選的，在連續(xù)的5天內(nèi)給藥的劑量在0.7毫克/天至2毫克/天的范圍內(nèi)。例如，在連續(xù)的5天內(nèi)給藥的劑量為0.7毫克/天，0.8毫克/天，0.9毫克/天，1.0毫克/天，1.1毫克/天，1.2毫克/天，1.3毫克/天，1.4毫克/天，1.5亳克/天，1.6毫克/天，1.7毫克/天，1.8毫克/天，1.9毫克/天，或者2.0毫克/天。根據(jù)體外數(shù)據(jù)，這里提供的劑量范圍導(dǎo)致顯著輕度的細胞因子釋it綜合癥。實施例3:抗CD3抗體組合物的制備和純化下面4是供了抗CD3抗體的全部制備過程的步驟流程圖。在該過程的每個階段，過程步驟的細節(jié)以及對過程的控制以列表形式表示在表2—表4中。<table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table>表2:細胞生長和收集<table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage50</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table>表3:純^b和f奮飾反應(yīng)步驟號處理步驟條件過程中的控制<table>tableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table>沖液進行清洗/洗脫生物負載洗脫之后，使用10毫摩磷酸鈉SDSPAGE1/2.0摩氯化鈉，pH7.0的緩沖液進行清洗最大負載量50克/升9使用羥基磷溫度》12。CpH灰石色i普進使用pH6.5的0.1摩磷酸鈉進行傳導(dǎo)性行純化預(yù)平衡使用15毫摩磷酸鈉，pH6.5的緩沖液進行清洗使用15毫摩磷酸鈉/375毫摩氯化鈉，pH6.5的緩沖液進行洗脫最大負載量20克/升在洗脫之后，使用pH6.5的0.5摩磷酸鈉進行清洗溫度蛋白濃度(A280)生物負載SDSPAGE110Pl咖va20N20納米紙質(zhì)過濾器蛋白濃度(A280)病毒還原型19±4°C，<0.98巴溫度過濾使用15毫摩磷酸鈉/375毫摩氯化鈉，pH6.5的緩沖液進行沖洗入口壓力過濾之后的完整性測試11濃縮和滲濾濃縮，之后在25毫摩醋酸鈉/125毫摩氯化鈉，pH5.5的緩沖液中進行滲濾蛋白濃度(A280)PH傳導(dǎo)性生物負載12添力口賦形劑10%聚山梨醇酯80最終濃度6.0±0.6毫克/毫升蛋白濃度(A280)pH傳導(dǎo)性l-僅在完成多于1個周期的情況下需要，且洗脫曲線不僅僅通過纟見覺分析來進行比較在每個純化處理步驟的最后，以及在分配到大部分純〗匕產(chǎn)品的容器中時，使該過程中的產(chǎn)品經(jīng)過0.2微米的過濾。在每個純化步驟中，將過程中的產(chǎn)品從5土3。C的儲存環(huán)境中取出、進行所述的純4匕步驟并且將進4亍0.2樣t米過濾處理后的產(chǎn)品送回至冷凍室中的時間一定不超過36小時。所述的最終配方-爰沖組分如下:<table>tableseeoriginaldocumentpage53</column></row><table>表4:最終過濾和釋》文<table>tableseeoriginaldocumentpage53</column></row><table>在抗CD3抗體的制備過程中使用的原料物質(zhì)CM34培養(yǎng)基，其中含有堿性溶液，在細胞庫中使用。將初始的主細胞庫冷藏在CM34培養(yǎng)基中，并且在其中添加二曱基亞砜。CM41培養(yǎng)基，其中含有堿性溶液和化學(xué)制劑，在接種物的制備步驟中使用。除此之外，在^f吏用之前，將含有鹽的補充物E加入到所述的堿性培養(yǎng)基中。CM42培養(yǎng)基，其中含有堿性溶液、化學(xué)制劑以及氨基酸，在發(fā)酵步驟中使用。CM41培養(yǎng)基中添加了SF31，SF32以及補充物E補料。這些補料含有石威性粉末、鹽、氨基酸、葡萄糖、微生物、化學(xué)制劑以及痕量的化學(xué)元素。在所述的培養(yǎng)基以及補料配方中使用的所有氨基酸都來自于非動物來源。實施例4:使用抗CD3抗體組合物在治療自身免疫性疾病中的治療方案在研究的第1天直至第5天，通過靜Ji永內(nèi)融合的方式給藥抗CD3抗體組合物或者與其匹配的安慰劑，癥會藥的劑量在0.05毫克/天至10毫克/天的范圍內(nèi)。優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在O.l毫克/天至5.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥，更優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.5毫克/天至3.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量選自0.5毫克/天，0.6毫克/天，0.7毫克/天，0.8毫克/天，0.9毫克/天，1.0毫克/天，1.1毫克/天，1.2毫克/天，1.3毫克/天，1.4毫克/天，1.5毫克/天，1.6毫克/天，1.7毫克/天，1.8毫克/天，1.9毫克/天，2.0毫克/天，2.1毫克/天，2.2毫克/天，2.3毫克/天，2.4毫克/天，2.5毫克/天，2.6毫克/天，2.7毫克/天，2.8毫克/天，2.9亳克/天，以及3.0毫克/天。如果一種劑量水平與T細胞上的CD3復(fù)合體的顯著的調(diào)節(jié)水平相關(guān)，和/或與顯著的細胞因子釋放綜合癥相關(guān)，則對一種或者多種較低的劑量水平進行檢測，以代替一種或者多種較高的劑量水平。所述的抗CD3抗體組合物的所期望的劑量水平導(dǎo)致的細胞因子釋放水平低于細胞因子釋放WHO標度"3"。用于評價細胞因子釋i文癥狀的WHO標度的評判標準在下述的表5中示出。表5:WHO毒性分級標度類感冒癥狀(細胞因子釋放癥狀)<table>tableseeoriginaldocumentpage55</column></row><table>實施例5:<吏用抗CD3抗體組合物在治療移才直排斥反應(yīng)中的治療方案每天給藥抗CD3抗體抗體組合物，直至^見察到高于50%的TCR-CD3覆蓋/飽和水平。例如，每天給藥所述的抗CD3抗體抗體組合物，直至7見察到的TCR-CD3覆蓋/t包和水平高于60%,高于70%或者高于80%。所1吏用的^7始劑量在0.05毫克/天至10毫克/天的范圍之內(nèi)。優(yōu)選的，所述的4元CD3抗體組合物在0.1毫克/天至5.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)給藥，更優(yōu)選的，所述的抗CD3抗體組合物在0.5毫克/天至3.0毫克/天的劑量范圍內(nèi)《合藥。例如，所述的抗CD3抗體組合物的給藥劑量選自0.5毫克/天，0.6毫克/天，0.7毫克/天，0.8毫克/天，0.9毫克/天，1.0毫克/天，1.1亳克/天，1.2毫克/天，1.3亳克/天，1.4毫克/天，1.5毫克/天，1.6毫克/天，1.7毫克/天，1.8毫克/天，1.9毫克/天，2.0毫克/天，2.1毫克/天，2.2毫克/天，2.3毫克/天，2.4毫克/天，2.5毫克/天，2.6毫克/天，2.7毫克/天，2.8毫克/天，2.9毫克/天，以及3.0亳克/天。如果TCR-CD3的飽和水平低于50%,貝寸每天增加給藥劑量，直至達到所述的覆蓋/飽和水平目標值為止。一旦達到該目標值，^f呆持該劑量5天時間，但總的治療過程最長不超過8天。所述的抗CD3抗體組合物經(jīng)由靜脈內(nèi)(iv)融合的方式給藥。優(yōu)選的，所述的靜脈內(nèi)融合是在30分鐘至3小時的時間4殳內(nèi)發(fā)生的連續(xù)融合，更優(yōu)選的是在1小時至2小時的時間段內(nèi)。例如，通過每天進行2小時的連續(xù)靜脈內(nèi)融合來給藥所述的抗CD3抗體組合物。本領(lǐng)域普通4支術(shù)人員能夠預(yù)期，連續(xù)靜脈內(nèi)融合的時間長短直接關(guān)系到組合物的給藥劑量以及靜脈內(nèi)輸液袋(ivbag)的容積。對于一個給定的劑量水平以及輸液袋容積來說，計算連續(xù)融合的所需時間是在本領(lǐng)域普通技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)的。其4也實施方式盡管本發(fā)明通過詳細的說明書進行了描述，但前述的說明書意在對本發(fā)明進^亍闡述，并不構(gòu)成對發(fā)明范圍的限制，發(fā)明的范圍由后附的斥又利要求來定義。其〗也方面、優(yōu)點以及改進落入隨后的權(quán)利要求的范圍之內(nèi)。權(quán)利要求1.抗CD3抗體的藥物組合物，基本上由下述組分構(gòu)成a.在3.0至6.2的pH范圍內(nèi)有效的pH緩沖劑；b.鹽c.表面活性劑；以及d.藥學(xué)上有效劑量的抗CD3抗體。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述的鹽是氯化鈉。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述的表面活性劑是離子型表面活性劑，陰離子型表面活性劑或者兩性離子表面活性劑。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的組合物，其中所述的離子型表面活性劑是聚山梨醇酯。5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的組合物，其中所述的聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80。6.4艮據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述的pH緩沖劑的有效用量在10亳摩至50毫摩的范圍內(nèi)。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述的pH緩沖劑提供了5.0至6.0的pH范圍。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的組合物，其中所述的pH緩沖劑提供了5.2至5.8的pH范圍。9.#4居權(quán)利要求7所述的組合物，其中所述的pH緩沖劑提供了5.4至5.6的pH范圍。10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的組合物，其中所述的pH緩沖劑提供了5.5的pH值。11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述的pH緩沖劑包括醋酸鈉。12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述的鹽的劑量范圍在100毫摩至140毫摩的范圍內(nèi)。13.才艮據(jù)4又利要求1所述的組合物，其中所述的表面活性劑的重量/體積含量為0.02%。14.4艮據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述的抗CD3抗體的藥物有效劑量被配置為每劑量中提供0.05毫克至10毫克的抗CD3抗體。15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述的抗CD3抗體的藥物有效劑量被配置為每劑量中提供0.1毫克至5.0毫克的抗CD3抗體。16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述的抗CD3抗體的藥物有效劑量被配置為每劑量中提供0.5毫克至3.0毫克的抗CD3抗體。17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述的抗CD3抗體是28FU,27H5,23F10,15C3,OrthocloneOKT3，人類OKT3y1(HOKT3y1)或者ChAglyCD3。18.抗CD3抗體的藥物組合物，主要由下述組分構(gòu)成a.包括醋酸鈉的pH緩沖劑，其在3.0至6.2的pH范圍內(nèi)有效；b.氯化鈉；c.包4舌聚山梨醇酯的表面活性劑；以及d.藥物有效劑量的抗CD3抗體。19.才艮據(jù)權(quán)利要求18所述的組合物，其中所述的聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80。20.根據(jù)權(quán)利要求18所述的組合物，所述的pH緩沖劑的有效用量在10毫摩至50毫摩的范圍內(nèi)。21.根據(jù)權(quán)利要求18所述的組合物，其中所述的pH緩沖劑提供了5.0至6.0的pH范圍。22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的組合物，其中所述的pH緩沖劑提供了5.2至5.8的pH范圍。23.根據(jù)權(quán)利要求21所述的組合物，其中所述的pH緩沖劑提供了5.4至5.6的pH范圍。24.根據(jù)權(quán)利要求21所述的組合物，其中所述的pH緩沖劑提供了5.5的pH值。25.根據(jù)權(quán)利要求18所述的組合物，其中所述的鹽的劑量范圍在100亳摩至140毫摩的范圍內(nèi)。26.根據(jù)權(quán)利要求18所述的組合物，其中所述的表面活性劑的重量/體積含量為0.02%。27.根據(jù)權(quán)利要求18所述的組合物，其中所述的抗CD3抗體的藥物有效劑量被配置為每劑量中提供0.05毫克至10毫克的抗CD3抗體。28.才艮據(jù)權(quán)利要求18所述的組合物，其中所述的抗CD3抗體的藥物有效劑量被配置為每劑量中提供0.1毫克至5.0毫克的抗CD3抗體。29.#4居4又利要求18所述的組合物，其中所述的抗CD3抗體的藥物有效劑量被配置為每劑量中提供0.5毫克至3.0毫克的抗CD3抗體。30.4艮據(jù)權(quán)利要求18所述的組合物，其中所述的抗CD3抗體是28F11,27H5,23F10,15C3，OrthocloneOKT3,人類OKT3Y1(HOKT3Y1)或者ChAglyCD3。31.抗CD3抗體的藥物組合物，其中包括a.每劑量中含有0.5毫克至3.0毫克抗CD3抗體的有效劑量；b.l毫克至3毫克的醋酸鈉；c.5毫克至9毫克的氯4匕鈉；以及d.0.1」徵克至0.3」微克的聚山梨醇酯80，并用水將所述組合物調(diào)整至1.0毫升。32.根據(jù)權(quán)利要求31所述的組合物，其中所述組合物包括2.05毫克醋酸鈉，7.31毫克氯化鈉以及0.216微克聚山梨醇酯80。33.4艮據(jù)4又利要求31所述的組合物，其中所述組合物的pH值為34.—種治療宿主的自身免疫性疾病或者炎性疾病的方法，包括:向有治療需要的宿主給藥有效劑量的抗CD3抗體組合物，以提供每天每劑量中含有0.05毫克至10毫克的抗CD3抗體，給藥5天時間。35.根據(jù)權(quán)利要求34所述的方法，其中所述的抗CD3抗體的有效劑量被配置為每天每劑量中提供0.1毫克至5.0毫克的抗CD34元體，給藥5天時間。36.根據(jù)權(quán)利要求34所述的方法，其中所述的抗CD3抗體的有效劑量被配置為每天每劑量中提供0.5毫克至3.0毫克的抗CD3才元體，給藥5天時間。37.根據(jù)權(quán)利要求34所述的方法，其中所述的給藥是靜脈內(nèi)的。38.—種治療或者預(yù)防宿主的移纟直排斥反應(yīng)的方法，包括，在移植的同時或者移植之后，向所述的宿主給藥有效劑量的抗CD3抗體，并且每天增加給藥劑量，直至達到50%或者更高的TCR-CD3飽和水平，之后給藥5天的日劑量，全部治療過程不超過8天。39.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中所述的給藥是靜脈內(nèi)的。40.根據(jù)權(quán)利要求38所述的方法，其中所述的有效劑量的抗CD3抗體產(chǎn)生的細月包因子釋;^文的水平^氐于WHO毒性分級標度中的3度。全文摘要本發(fā)明涉及抗CD3抗體的治療性、診斷性和/或預(yù)防性組合物和制劑，以及這類組合物和制劑的使用方法。文檔編號C07K16/28GK101309703SQ200680033411公開日2008年11月19日申請日期2006年9月12日優(yōu)先權(quán)日2005年9月12日發(fā)明者G·艾爾森,M·科斯庫-維爾博斯,Y·迪安申請人:諾維莫尼公司