專利名稱：用作tlr7調(diào)節(jié)劑的3-脫氮嘌呤衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種3-脫氮嘌呤(3-deazapurine)衍生物。本發(fā)明還涉及該3-脫氮嘌呤衍生物的制備方法、用于制備該3-脫氮嘌呤衍生物的中間體、含有該3-脫氮嘌呤衍生物的藥物組合物以及該3-脫氮嘌呤衍生物的用途。

背景技術(shù)：
Toll樣受體(TLR)為主要的跨膜蛋白，其特征為細(xì)胞外富含亮氨酸及胞質(zhì)尾區(qū)，該胞質(zhì)尾區(qū)含有稱作Toll/IL-1受體(TIR)結(jié)構(gòu)域的保守區(qū)。它們主要在免疫細(xì)胞(例如樹(shù)突狀細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞及自然殺傷細(xì)胞)上表達(dá)，其在先天免疫系統(tǒng)中具有重要作用。它們?yōu)橐蝗航Y(jié)合至病原體相關(guān)分子模式的模式識(shí)別受體(其綜述參見(jiàn)例如Ulevitch，R.J.，Nature ReviewsImmunology，4,512-520，2004，以及，Akira，S.，Takeda，K.，和Kaisho，T.，AnnualRev.Immunol.，21，335-376，2003)。它們的名稱來(lái)源于在果蠅中發(fā)現(xiàn)的黑腹果蠅(Drosophila melanogaster)基因Toll的同源序列，Toll基因在保護(hù)果蠅不受霉菌感染中具有重要作用(Hoffmann，J.A.，Nature，426，33-38，2003)。在哺乳動(dòng)物中已經(jīng)鑒定了11種TLR，且在其它脊椎動(dòng)物中也發(fā)現(xiàn)了其它的非哺乳動(dòng)物TLR。所有的TLR，在識(shí)別病原性有機(jī)體上存在的一個(gè)特異性或一組特異性分子決定子的過(guò)程中，似乎均作為同型二聚體或異型二聚體起作用，上述分子決定子包括細(xì)菌細(xì)胞表面脂多糖、脂蛋白、細(xì)菌鞭毛蛋白、來(lái)自細(xì)菌和病毒的DNA、以及病毒RNA。對(duì)TLR活化的細(xì)胞反應(yīng)涉及一種或多種轉(zhuǎn)錄因子的活化，引起細(xì)胞因子及共刺激分子諸如干擾素、TNF-α、白介素、MIP-1及MCP-1的產(chǎn)生和分泌，它們的作用殺死和清除病原體的侵入。
因此，正需要提供一種TLR7調(diào)節(jié)劑，尤其是激動(dòng)劑。優(yōu)選地，這類化合物應(yīng)具有以下特性中的一種以上它們應(yīng)選擇性與TLR7受體結(jié)合；胃腸道吸收良好；代謝穩(wěn)定且具有有利的藥物動(dòng)力學(xué)特性；幾乎不表現(xiàn)副作用且易于制備。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了一系列3-脫氮嘌呤衍生物，其為TLR7受體的調(diào)節(jié)劑、尤其是激動(dòng)劑，其應(yīng)用于涉及TLR7受體的調(diào)節(jié)、尤其是激動(dòng)作用的各種治療領(lǐng)域，包括治療病毒感染(諸如HCV或HBV)、癌癥及腫瘤、以及T2輔助細(xì)胞(TH2)介導(dǎo)的疾病。
根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供式(I)的化合物，
或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，其中 (a)Y為化學(xué)鍵，且R3選自芳基、(C1-C6)烷基及-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C4)烷基；或 (b)Y為(C1-4)亞烷基，且R3選自芳基、(C3-C7)環(huán)烷基及3-10元雜環(huán)基； Z為氧或不存在； R1選自H、鹵素、OH、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、-NHSO2R6、-NR6R7、-C(O)R6、-CO2R6、-C(O)NR6R7、-C(O)NR6SO2R8、芳基及3-10元雜環(huán)基； R2選自H、鹵素、OH、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、-NR6R7、-CO2R6、-C(O)NR6R7、-C(O)NR6SO2R8及3-10元雜環(huán)基；或 R1與R2可連接形成(C2-C5)亞烷基連接，該連接任選包括1或2個(gè)各自獨(dú)立地選自N、O和S中的雜原子； R5不存在且R4選自H、(C3-C7)環(huán)烷基、芳基、-(CH2)芳基、-C(O)R9、-CO2R9、-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亞烷基-O-CO2R9)、-C(O)NR9R10、-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)NR9R10及-(C1-C6)亞烷基-O-P(O)(OH)2；或 R4不存在且R5選自R9、-C(O)R9、-CO2R9、-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亞烷基-O-CO2R9、-C(O)NR9R10、-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)NR9R10及-(C1-C6)亞烷基-O-P(O)(OH)2； R6和R7各自獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基及-(C1-C6)亞烷基(C3-C7)環(huán)烷基；或R6和R7與它們所連接的氮一起形成3-6元飽和雜環(huán)，該雜環(huán)任選另外含有1或2個(gè)選自N、O和S中的雜原子； R8選自(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基及苯基； R9和R10各自獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、芳基、-(CH2)芳基及3-10元雜環(huán)基；或 R9和R10與它們所連接的氮一起形成3-10元雜環(huán)基； R11和R12獨(dú)立地選自H及(C1-C6)烷基；或R11和R12與所連接的N一起形成3-6元飽和雜環(huán)基，該雜環(huán)基任選另外含有1或2個(gè)選自N、O和S中的雜原子； 該烷基、環(huán)烷基、烷氧基、芳基及雜環(huán)基任選被一或多個(gè)獨(dú)立地選自如下的原子或基團(tuán)取代鹵素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亞烷基-OH、-NR11R12、-(C1-C6)亞烷基-NR11R12、芳基及3-10元雜環(huán)基； 其條件為，若R1和R2為H且Z和R5不存在，則 (a)當(dāng)Y-R3為乙基時(shí)，R4不為甲基；且 (b)當(dāng)Y-R3為甲基時(shí)，R4不為H或甲基。
除非另有說(shuō)明，否則烷基及烷氧基可為直鏈或支鏈基團(tuán)且含有1-6個(gè)碳原子，且優(yōu)選1-4個(gè)碳原子。烷基實(shí)例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、戊基及己基。烷氧基實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、異丙氧基及正丁氧基。
環(huán)烷基包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基及雙環(huán)庚烷基。
鹵素意指氟、氯、溴或碘，且優(yōu)選為氟或氯。
芳基包括苯基、萘基、蒽基及菲基，且優(yōu)選為苯基。
除非另有說(shuō)明，否則雜環(huán)可為飽和、部分飽和、或芳族雜環(huán)，且含有一或多個(gè)獨(dú)立地選自N、O和S中的雜原子。例如，雜環(huán)可為5-6元飽和、部分飽和、或芳族雜環(huán)。飽和雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例為四氫呋喃基、吡咯烷基、吡咯啉基、咪唑烷基、咪唑啉基、二氧戊環(huán)基、二氫吡喃基、四氫吡喃基、哌啶基、吡唑啉基、二噁烷基、嗎啉基、二噻烷基、硫代嗎啉基、哌嗪基、氮雜革基、氧氮雜革基及硫氮雜革基。芳族單雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例為吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、異噁唑基、噁唑基、異噻唑基、噻唑基、三唑基(諸如1，2，3-三唑基及1，2，4-三唑基)、噁二唑基(諸如1-氧雜-2，3-二唑基、1-氧雜-2，4-二唑基、1-氧雜-2，5二唑基及1-氧雜-3，4-二唑基)、噻二唑基(諸如1-硫雜-2，3-二唑基、1-硫雜-2，4-二唑基、1-硫雜-2，5-二唑基及1-硫雜-3，4-二唑基)、四唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基及三嗪基。二環(huán)芳族雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例為苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并咪唑基、吲唑基、苯并三唑基、喹啉基及異喹啉基。
當(dāng)多個(gè)取代基可選自大量替代基團(tuán)時(shí)，所選基團(tuán)可相同或不同。
在一方案中，Z為氧，以便形成N-氧化物。
在本發(fā)明的另一方案中，Z不存在。
在本發(fā)明的又一方案中，R1選自 (a)H； (b)CN； (c)鹵素； (d)任選被1-3個(gè)鹵原子取代的(C1-C6)烷基； (e)四氫呋喃氧基； (f)被含有1-3個(gè)獨(dú)立地選自N、O和S中的雜原子的3-6元飽和雜環(huán)基取代的(C1-C6)烷基，其中該雜環(huán)基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基及-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基中的基團(tuán)取代； (g)-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C6)烷基； (h)-(C1-C4)亞烷基-N(H)-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C4)烷基； (i)任選被OH或環(huán)丙基取代的(C1-C6)烷氧基； (j)(C3-C7)環(huán)烷基； (k)-(C1-C4)亞烷基(C3-C7)環(huán)烷基； (1)-C(O)NR6R7； (m)-CO2R6； (n)-C(O)R6； (o)5元芳族雜環(huán)基，其包含(i)1-4個(gè)氮原子、或(ii)1-2個(gè)氮原子及1個(gè)氧原子或硫原子、或(iii)1個(gè)氧原子或硫原子；或者6元芳族雜環(huán)基，其包含1-3個(gè)氮原子，該5及6元芳族雜環(huán)基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亞烷基-OH、-NR11R12及-(C1-C6)亞烷基-NR11R12中的原子或基團(tuán)取代； (p)任選被1-3個(gè)鹵原子取代的苯基； (q)-NR6R7； (r)-NH-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C6)烷基； (s)或者R1與R2可連接形成(C2-C5)亞烷基連接； 其中 R6、R7、R11和R12如本發(fā)明第一方面所定義。
在另一方案中，R1選自 (a)H； (b)CN； (c)鹵素 (d)任選被1-3個(gè)鹵原子取代的(C1-C6)烷基； (e)四氫呋喃氧基； (f)被任選被1或2個(gè)甲基取代的嗎啉基、哌嗪基或吡咯烷基取代的(C1-C6)烷基； (h)-(C1-C4)亞烷基-N(H)-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C4)烷基； (i)任選被OH或環(huán)丙基取代的(C1-C6)烷氧基； (j)(C3-C7)環(huán)烷基； (k)-(C1-C4)亞烷基(C3-C7)環(huán)烷基； (l)-C(O)NR6R7； (m)-CO2R6； (n)-C(O)R6； (o)包含(i)1-4個(gè)氮原子、或(ii)1-2個(gè)氮原子及1個(gè)氧原子或硫原子、或(iii)1個(gè)氧原子或硫原子的5元芳族雜環(huán)基；或者包含1-3個(gè)氮原子的6元芳族雜環(huán)基，該5及6元芳族雜環(huán)基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亞烷基-OH、-NR11R12及-(C1-C6)亞烷基-NR11R12中的原子或基團(tuán)取代； (p)任選被1-3個(gè)鹵原子取代的苯基； (q)-NR6R7； (r)-NH-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C6)烷基； 其中 R6、R7、R11和R12如本發(fā)明第一方面所定義。
在又一方案中，R1選自任選被1-3個(gè)鹵原子取代的(C1-C4)烷基；(C3-C7)環(huán)烷基；或任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基及-NH(C1-C6)烷基中的原子或基團(tuán)取代的5-6元芳族雜環(huán)基。
在又一方案中，R1選自被1-3個(gè)氟原子取代的甲基或乙基；環(huán)丙基；-(C1-C2)亞烷基-O-(C1-C2)烷基；任選被OH或環(huán)丙基取代的(C1-C4)烷氧基；-COCH3；-CH2OCH3；及-CO2CH3。
在又一方案中，R1為環(huán)丙基或CF3。
在又一方案中，R1為5元芳族雜環(huán)基，其包含(i)1-4個(gè)氮原子、或(ii)1-2個(gè)氮原子及1個(gè)氧原子或硫原子、或(iii)1個(gè)氧原子或硫原子，該5元芳族雜環(huán)基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C3)亞烷基-O-(C1-C4)烷基、-(C1-C4)亞烷基-OH、-R11R12及-(C1-C3)亞烷基-NR11R12中的原子或基團(tuán)取代，其中R11和R12如本發(fā)明第一方面中所述定義。
在又一方案中，R1選自咪唑基、噁唑基、噁二唑基、三唑基、吡唑基及噻唑基，這些基團(tuán)均任選可被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C3)亞烷基-O-(C1-C4)烷基、-(C1-C4)亞烷基-OH及-(C1-C3)亞烷基-NR11R12中的原子或基團(tuán)取代，其中R11和R12如本發(fā)明第一方面所定義。
在又一方案中，R1選自未被取代的噁唑基、三唑基、吡唑基及噻唑基。
在又一方案中，R1為噁唑基。
在又一方案中，R2選自 (a)H； (b)鹵素； (c)任選被1-3個(gè)鹵原子取代的(C1-C6)烷基； (d)四氫呋喃氧基； (e)被含有1-3個(gè)獨(dú)立地選自N、O和S中的雜原子的3-6元飽和雜環(huán)基取代的(C1-C6)烷基，其中該雜環(huán)基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基及-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基中的基團(tuán)取代； (f)-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C6)烷基； (g)-(C1-C4)亞烷基-N(H)-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C4)烷基； (h)任選被OH或環(huán)丙基取代的(C1-C6)烷氧基； (i)(C3-C7)環(huán)烷基； (j)-(C1-C4)亞烷基(C3-C7)環(huán)烷基； (k)-C(O)NR6R7； (1)-CO2R6； (m)-C(O)R6； (n)包含(i)1-4個(gè)氮原子、或(ii)1-2個(gè)氮原子及1個(gè)氧原子或硫原子、或(iii)1個(gè)氧原子或硫原子的5元芳族雜環(huán)基；或者包含1-3個(gè)氮原子的6元芳族雜環(huán)基，該5及6元芳族雜環(huán)基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亞烷基-OH、-NR11R12及-(C1-C6)亞烷基-NR11R12中的原子或基團(tuán)取代； (o)任選被1-3個(gè)鹵原子取代的苯基； (p)-NR6R7； (q)-NH-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C6)烷基； 其中 R6、R7、R11和R12如本發(fā)明第一方面所定義。
在又一方案中，R2為H或甲基。
在又一方案中，R2為H。
在又一方案中，Y為亞甲基；且R3為芳基或5-6元雜環(huán)基，該雜環(huán)基含有1-3個(gè)獨(dú)立地選自N、O和S中的雜原子，該芳基及雜環(huán)基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下的原子或基團(tuán)取代鹵素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基、-NH(C1-C6)烷基、-N((C1-C6)烷基)2、芳基及3-10元雜環(huán)基。
在又一方案中，Y為亞甲基；且R3選自芳基，包含(i)1-4個(gè)氮原子、或(ii)1-2個(gè)氮原子及1個(gè)氧原子或硫原子、或(iii)1個(gè)氧原子或硫原子的5元芳族雜環(huán)基，及包含1-3個(gè)氮原子的6元芳族雜環(huán)基；該芳基及芳族雜環(huán)任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自以下的原子或基團(tuán)取代鹵素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亞烷基-OH、-NR11R12、-(C1-C6)亞烷基-NR11R12、芳基及3-10元雜環(huán)基，其中R11和R12如本發(fā)明第一方面所定義。
在又一方案中，Y為亞甲基；且R3選自苯基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基及吡嗪基，其每一個(gè)任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、(C1-4)烷基、(C1-C4)烷氧基及CF3中的原子或基團(tuán)取代。
在又一方案中，Y為亞甲基；且R3選自苯基、吡啶-3-基及6-甲基-吡啶-3-基。
在又一方案中， Y為亞甲基； R1選自被1-3個(gè)鹵原子取代的(C1-C4)烷基；(C3-C7)環(huán)烷基；及任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下基團(tuán)中的基團(tuán)取代的5-6元芳族雜環(huán)基鹵素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基及-NH(C1-C6)烷基； R2為H； R3為苯基或3-吡啶基，其每一個(gè)任選可被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、(C1-4)烷基及CF3中的原子或基團(tuán)取代； R4為H；且 R5不存在。
在又一方案中， Y為亞甲基； R1選自CF3、環(huán)丙基及噁唑基； R2為H； R3選自苯基、吡啶-3-基及6-甲基-吡啶-3-基。
R4為H；且 R5不存在。
在又一方案中，R5不存在；且 R4選自-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亞烷基-O-CO2R9、-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)NR9R10及-(C1-C6)亞烷基-O-P(O)(OH)2，其中Y、Z、R1、R2、R3、R9和R10如本發(fā)明第一方面所定義，以產(chǎn)生如下式(Ia)的化合物
在又一方案中，R4為H且R5不存在。
在又一方案中，R4不存在；且 R5選自-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亞烷基-O-CO2R9、-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)NR9R10及-(C1-C6)亞烷基-O-P(O)(OH)2，其中Y、R1、R2、R3、R9和R10如上文所定義，以產(chǎn)生如下式(Ib)的化合物
本發(fā)明的實(shí)施例形成本發(fā)明的又一方案。
本發(fā)明的優(yōu)選化合物為實(shí)施例1-4、12、15-18、26、27、36-38、40-54、60、70、76、78、82、83、86、92-94、96-98及100-102的那些化合物及其互變異構(gòu)體以及該化合物或其互變異構(gòu)體的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。
更優(yōu)選的化合物選自 4-氨基-1-芐基-6-環(huán)丙基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(實(shí)施例1)； 4-氨基-1-芐基-6-噁唑-2-基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(實(shí)施例12)； 4-氨基-1-芐基-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(實(shí)施例15)； 及其互變異構(gòu)體以及該化合物或其互變異構(gòu)體的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。
在本發(fā)明的另一方案中，提供式(Ic)的化合物
其中 Y為亞甲基； R1和R2各自獨(dú)立地選自H、鹵素、OH、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、-NR6R7、-CO2R6、-C(O)NR6R7、-C(O)NR6SO2R8、芳基及3-10元雜環(huán)基；或者 R1與R2可連接形成(C2-C5)亞烷基連接，該連接任選包括1或2個(gè)各自獨(dú)立地選自N、O和S中的雜原子； R3選自(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、芳基及3-10元雜環(huán)基； R4選自R9、-C(O)R9、-CO2R9及-C(O)NR9R10，且R5不存在；或者 R5選自R9、-C(O)R9、-CO2R9及-C(O)NR9R10，且R4不存在； R6和R7各自獨(dú)立地選自H及(C1-C6)烷基； R8選自(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基及苯基； R9和R10各自獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、芳基、-(CH2)芳基及3-10元雜環(huán)基；或者 R9和R10與它們所連接的氮一起形成3-10元雜環(huán)基； 該烷基、環(huán)烷基、烷氧基、芳基及雜環(huán)基任選被一或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代鹵素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2、芳基及3-10元雜環(huán)基； 或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物； 其條件為，若R1和R2為H且z和R5不存在，則 (a)若Y-R3為乙基，R4不為甲基；或 (b)若Y-R3為甲基，R4不為H或甲基。
本發(fā)明的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R4選自R9、-C(O)R9、-CO2R9及-C(O)NR9R10；R5不存在；且Y、R1、R2、R3、R9和R10如本發(fā)明的第二方面所定義，以產(chǎn)生如上文中所示的式(Ia)的化合物。
本發(fā)明的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中 Y為亞甲基； R1和R2各自獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、-CO2H、-CO2(C1-C6)烷基及-C(O)NH(C1-C6)亞烷基(C3-C7)環(huán)烷基；或R1與R2可連接形成(C2-C5)亞烷基連接； R3為苯基，其任選被一或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代鹵素、OH、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、NH(C1-C6)烷基及N((C1-C6)烷基)2； R5不存在；且 R4為H。
本發(fā)明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中 Y為亞甲基； R1和R2各自獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、-CO2H、-CO2(C1-C6)烷基及-C(O)NH(C1-C6)亞烷基(C3-C7)環(huán)烷基；或R1與R2可連接形成(C2-C5)亞烷基連接； R3為苯基，其任選被一或多個(gè)獨(dú)立地選自鹵素及CF3中的基團(tuán)取代； R5不存在；且 R4為H。
本發(fā)明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R5選自R9、-C(O)R9、-CO2R9及-C(O)NR9R10；R4不存在；且Y、R1、R2和R3如上文所定義，以產(chǎn)生如上文中所示的式(Ib)的化合物。
本發(fā)明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R1和R2各自獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、-CO2R6、-C(O)NR6R7及-C(O)NR6SO2R8；或R1與R2可連接形成(C2-C5)亞烷基連接，該連接任選含有1或2個(gè)各自獨(dú)立地選自N、O和S中的雜原子。
本發(fā)明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R1和R2各自獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、-CO2H、-CO2(C1-C6)烷基及-C(O)NH(C1-C6)亞烷基(C3-C7)環(huán)烷基；或R1與R2可連接形成(C2-C5)亞烷基連接。
本發(fā)明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R1和R2各自獨(dú)立地選自H、(C1-C3)烷基、環(huán)丙基、-CO2H、-CO2CH3及-C(O)NH(CH2)環(huán)丙基；或R1與R2可連接形成C5-亞烷基連接。
本發(fā)明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R1選自H、甲基、正丙基、異丙基、環(huán)丙基、-CO2H、-CO2CH3及-C(O)NH(CH2)環(huán)丙基；且R2選自H及甲基；或R1與R2可連接形成C5-亞烷基連接。
本發(fā)明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R3為芳基，其任選被一或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代鹵素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基、NH(C1-C6)烷基、N((C1-C6)烷基)2、芳基及3-10元雜環(huán)基。
本發(fā)明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R3為苯基，其任選被一或多個(gè)獨(dú)立地選自以下的基團(tuán)取代鹵素、OH、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、NH(C1-C6)烷基及N((C1-C6)烷基)2。然而更優(yōu)選R3為任選被一或多個(gè)獨(dú)立地選自鹵素及CF3中的基團(tuán)取代的苯基。
本發(fā)明的第二方面的又一方案包括式(Ic)的化合物，其中R3選自2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基及3-三氟甲基苯基。
除非另有說(shuō)明，否則本發(fā)明的化合物包括式(I)、(Ia)、(Ib)及(Ic)的化合物。
應(yīng)理解的是，本發(fā)明涵蓋與式(I)化合物的定義一致的如上所述的本發(fā)明的具體方案的所有組合。
在本發(fā)明的第三方面中，提供一種制備式(Ic)化合物的方法
其中，在各式Ia、XVIII、XVIIIa、XIX、XIXa、XXa、XXb、XIV、XV、LIV及LXIII中，Y-R3如權(quán)利要求14所定義，R1如權(quán)利要求2所定義，R2如權(quán)利要求10所定義，PG1及PG2為氮保護(hù)劑且R13為(C1-6)烷基； 該方法包括 (a)使式(XVIII)或(XVIIIa)的化合物與羰基供給劑反應(yīng)
以形成相應(yīng)的式(XIX)或(XIXa)化合物，
然后將式(XIX)或(XIXa)的化合物脫保護(hù)；或 (b)還原式(XXa)的化合物
以形成式(XXb)的化合物
然后通過(guò)用質(zhì)子酸處理使式(XXb)化合物環(huán)化；或 (c)還原式(XIV)的化合物
以形成式(XV)的化合物
然后在羰基部分存在下使式(XV)的化合物環(huán)化；或 (e)在二苯基膦?；B氮化物存在下使式(LIV)化合物環(huán)化為上文中相應(yīng)的式(XIXA)化合物然后，將氨基保護(hù)基脫保護(hù)
；或者 (f)使式(LXIII)的化合物水解
在如本發(fā)明第四方面中，提供式XVIII、XVIIIa、XIX、XIXa、XXa、XXb、XIV、XV、LIV及LXIII的中間體， 其中Y-R3如權(quán)利要求14所定義，R1如權(quán)利要求2所定義，R2如權(quán)利要求10所定義，PG1及PG2為氮保護(hù)劑且R3為(C1-6)烷基。
式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括其酸加成鹽和堿鹽。
適合的酸加成鹽由可形成無(wú)毒鹽類的酸形成。實(shí)例包括乙鹽酸、己二酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、硼酸鹽、右旋樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環(huán)磺酸鹽、乙二磺酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、延胡索酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、六氟磷酸鹽、羥芐基苯甲酸鹽、鹽酸鹽/氯化物、氫溴酸鹽/溴化物、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙基磺酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸、馬來(lái)酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、乳清酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸一氫鹽/磷酸二氫鹽、焦谷氨酸鹽、糖酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、丹寧酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽、三氟醋酸鹽及羥萘甲酸鹽(xinofoate salts)。
適合的堿鹽由可形成無(wú)毒鹽類的堿類形成。實(shí)例包括鋁鹽、精氨酸鹽、芐星鹽(benzathine)、鈣鹽、膽堿鹽、二乙胺鹽、二乙醇胺鹽、甘氨酸鹽、賴氨酸鹽、鎂鹽、葡甲胺鹽(meglumine)、乙醇胺鹽(olamine)、鉀鹽、鈉鹽、氨丁三醇鹽(tromethamine)及鋅鹽。
還可形成酸類及堿類的半鹽，例如，半硫酸鹽及半鈣鹽。
適合的鹽的綜述，可參見(jiàn)Stahl及Wermuth的＂Handbook ofPharmaceutical SaltsProperties，Selection，andUse＂(Wiley-VCH，Weinheim，Germany，2002)。
式(I)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽可通過(guò)以下三種方法中的一種以上來(lái)制備 (i)使式(I)化合物與所需酸或堿反應(yīng)； (ii)用所需酸或堿將酸或堿的不穩(wěn)定保護(hù)基從式(I)化合物的適合前體中移除；或 (iii)通過(guò)與適合的酸或堿反應(yīng)或利用適合的離子交換柱，將式(I)化合物的一種鹽轉(zhuǎn)化為另一種鹽。
三個(gè)反應(yīng)通常均在溶液中進(jìn)行。所制得的鹽可沉淀析出河被過(guò)濾收集或可通過(guò)蒸發(fā)溶劑來(lái)回收。所得鹽的電離程度可不等(從完全電離至幾乎不電離)。
本發(fā)明的化合物也可以以非溶劑化形式和溶劑化形式存在。術(shù)語(yǔ)“溶劑化物”在本文中用于描述包含本發(fā)明的化合物與一種或多種藥學(xué)上可接受的溶劑分子(例如乙醇)的分子配合物。當(dāng)所述溶劑為水時(shí)采用術(shù)語(yǔ)“水合物”系。
目前對(duì)有機(jī)水合物的公認(rèn)分類系統(tǒng)是定義分離位點(diǎn)(definesisolated site)定義分離位點(diǎn)、通道或金屬離子配位水合物，參見(jiàn)K.R.Morris的Polymorphism in Pharmaceutical Solids(H.g.Brittain主編，Marcel Dekker，1995)，該文引入本文中作為參考文獻(xiàn)。通過(guò)在分離位點(diǎn)水合物中插入有機(jī)分子使水分子分離，互相不直接接觸。在通道水合物(channel hydrates)中，水分子處于晶格通道中，在此其與其它水分子緊鄰。在金屬離子配位水合物中，水分子與金屬離子鍵合。
當(dāng)溶劑或水緊密結(jié)合時(shí)，配合物具有明確的不依賴于濕度的化學(xué)計(jì)量。然而，當(dāng)在通道溶劑化物及吸濕性化合物中溶劑或水的結(jié)合微弱時(shí)，則水/溶劑的含量將取決于濕度及干燥條件。此時(shí)，非化學(xué)計(jì)量法是標(biāo)準(zhǔn)量。
本發(fā)明的化合物可以以連續(xù)的固態(tài)存在，其范圍從完全無(wú)定形至完全結(jié)晶。術(shù)語(yǔ)“無(wú)定形”是指材料在分子水平上缺乏長(zhǎng)程有序的狀態(tài)，并根據(jù)溫度不同而呈現(xiàn)固體或液體的物理特性。通常這些物質(zhì)不顯示特征性的X射線衍射圖，盡管顯示固體特性，但更成常描述為液體。在被加熱后固體特性向液體特性轉(zhuǎn)變的特征則為狀態(tài)的改變，一般是兩級(jí)的(second order)(“玻璃化轉(zhuǎn)變”)。術(shù)語(yǔ)“結(jié)晶”是指材料在在分子水平具有規(guī)則的有序內(nèi)部結(jié)構(gòu)的固態(tài)，其顯示特征性的帶有確定峰態(tài)的X射線衍射圖。當(dāng)被充分加熱時(shí)，這些材料也會(huì)顯示液體的特性，但從固態(tài)至液態(tài)的變化的特征是相變，一般是一級(jí)的(“熔點(diǎn)”)。
本發(fā)明的化合物還可以以多組分復(fù)合物(除鹽類及溶劑化物以外)存在，其中藥物及至少一種其它組分以化學(xué)計(jì)量或非化學(xué)計(jì)量的用量存在。這種類型的復(fù)合物包括晶籠化合物(藥物-主晶包合復(fù)合物)和共晶體。后者通常定義為中性分子成分的結(jié)晶復(fù)合物，其通過(guò)非共價(jià)相互鍵合在一起，但也可以是中性分子和鹽的復(fù)合物。共晶體可通過(guò)熔融結(jié)晶、從溶劑中重結(jié)晶或通過(guò)物理性地將各個(gè)組分研磨在一起來(lái)制備，參見(jiàn)0.Almarsson及M.J.Zaworotko的ChemCommun，17，1889-1896(2004)，該文引入本文中作為參考文獻(xiàn)。關(guān)于多組分復(fù)合物的綜述，參見(jiàn)Haleblian的J PharmSci，64(8)，1269-1288(1975年8月)，該文引入本文中作為參考文獻(xiàn)。
在處于合適條件下時(shí)，本發(fā)明的化合物也可以以介晶態(tài)(中間相或液晶)存在。介晶態(tài)為介于真正的晶態(tài)與真正的液態(tài)(熔體或溶液)之間的中間態(tài)。因溫度變化所引起的介晶現(xiàn)象被稱為＂熱致的＂介晶性，加入第二種成分(如水或其它溶劑)所引起的介晶現(xiàn)象被稱為＂溶致的＂介晶性。有形成溶致中間相趨勢(shì)的化合物被稱為”兩性分子”，其由具有離子(如-COO-Na+、-COO-K+或-SO3-Na+)或非離子(如-N-N+(CH3)3)的極性頭基的分子組成。更多資料請(qǐng)參考N.H.Hartshorne及A.Stuart的Crystals and the Polarizing Microscope，第4版(EdwardArnold，1970)，該文引入本文中作為參考文獻(xiàn)。
下文中涉及式(I)的化合物均包括其鹽、溶劑化物、多組分復(fù)合物及液晶，以及其鹽的溶劑化物、多組分復(fù)合物及液晶。
本發(fā)明的化合物包括如上文中定義的式(I)化合物，包括如下文中定義的所有的其多晶型物及晶癖、其前體藥物及異構(gòu)體(包括光學(xué)異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體及互變異構(gòu)體)以及式(I)的同位素標(biāo)記化合物。
如上所述，式(I)化合物的所謂＂前體藥物＂也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。因此，其本身具有很小或不具有藥理活性的式(I)化合物的一些衍生物當(dāng)給藥于體內(nèi)或機(jī)體上時(shí)，例如能通過(guò)水解分裂作用轉(zhuǎn)化成具有所需活性的式(I)化合物。這些衍生物稱為“前體藥物”。關(guān)于前體藥物應(yīng)用的進(jìn)一步資料可參見(jiàn)＂Pro-drugs as Novel Delivery Systems＂第14卷，ACS Symposium Series(T.Higuchi及W.Stella)及＂BioreVersible Carriers in Drug Design＂，Pergamon Press，1987(E.B.Roche編，American Pharmaceutical Association)。
本發(fā)明的前體藥物例如可通過(guò)將式(I)化合物中存在的合適官能團(tuán)替代為本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的某些部分來(lái)作為“前體部分”(如H.Bundgaard的＂Design of Prodrugs＂(Elsevier，1985)中所述)進(jìn)行制備。
本發(fā)明的前體藥物的一些實(shí)例包括 (i)其中式(I)化合物含有羧酸官能團(tuán)、其酯時(shí)，例如其中式(I)化合物的羧酸官能團(tuán)中的氫被取代為(C1-C8)烷基的化合物；及 (ii)其中式(I)化合物含有伯胺基或仲胺基官能團(tuán)、其酰胺基時(shí)，例如根據(jù)具體情況，其中式(I)化合物的胺基官能團(tuán)中的1或2個(gè)氫被取代為(C1-C10)烷?；幕衔铩?br> 根據(jù)上述實(shí)例及其它前體藥物類型的實(shí)例的取代基的進(jìn)一步實(shí)例可參見(jiàn)前面提到的參考文獻(xiàn)。此外，式(I)的一些化合物本身可充當(dāng)式(I)的其它化合物的前體藥物。
具體而言，本發(fā)明的R4如本文所定義且不為H、且R5不存在(即，式(Ia)的化合物)的式(I)化合物可經(jīng)代謝作用或溶劑分解作用轉(zhuǎn)化成R4為H且R5不存在的式(I)化合物。此外，本發(fā)明的R4不存在、且R5如本文所定義且不為H(即，式(Ib)化合物)的式(I)化合物可經(jīng)代謝作用或溶劑分解作用轉(zhuǎn)化成R4不存在且R5為H的式(I)化合物。
式(I)化合物的代謝物也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，即，給予藥物后在體內(nèi)形成的化合物。符合本發(fā)明的代謝物的一些實(shí)例包括 (i)當(dāng)式(I)化合物含有甲基時(shí)，為其羥甲基衍生物(-CH3->-CH2OH)； (ii)當(dāng)式(I)化合物含有烷氧基時(shí)，為其羥基衍生物(-OR->-OH)； (iii)當(dāng)式(I)化合物含有叔氨基時(shí)，為其仲氨基衍生物(-NR1R2->-NHR1或-NHR2)； (iv)當(dāng)式(I)化合物含有仲氨基時(shí)，為其伯氨基衍生物(-NHR1->-NH2)； (v)當(dāng)式(I)化合物含有苯基部分時(shí)，為其苯酚衍生物(-Ph>-PhOH)； (vi)當(dāng)式(I)化合物含有酰胺基時(shí)，為其羧酸衍生物(-CONH2->-COOH)。
含有一或多個(gè)不對(duì)稱碳原子的式(I)化合物可作為兩種或兩種以上的立體異構(gòu)體存在。當(dāng)式(I)化合物含有烯基或亞烯基時(shí)，可為順式/反式(或Z/E)幾何異構(gòu)體。當(dāng)結(jié)構(gòu)異構(gòu)體可用低能障互變時(shí)，可發(fā)生互變異構(gòu)現(xiàn)象(“互變現(xiàn)象”)。在含有例如酮基的式(I)化合物中可采取質(zhì)子互變異構(gòu)形式，或在含有芳族部分的化合物中可采取所謂的價(jià)互變異構(gòu)形式。由此可見(jiàn)單一化合物可呈現(xiàn)一種類型以上的異構(gòu)現(xiàn)象。
舉式(I)中的虛線為例進(jìn)行說(shuō)明，其中R4為H的式(Ia)化合物為其中R5為H的式(Ib)化合物的互變異構(gòu)體
式(I)化合物的所有立體異構(gòu)體、幾何異構(gòu)體及互變異構(gòu)形式(包括呈現(xiàn)一種類型以上的異構(gòu)現(xiàn)象的化合物)及它們的一種以上的混合物均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明還包括其中平衡離子為光學(xué)活性的(例如d-乳酸鹽或l-賴氨酸)或外消旋(例如dl-酒石酸鹽或dl-精氨酸)的酸加成鹽類。
順式/反式異構(gòu)體可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)技術(shù)(例如層析法及分步結(jié)晶法)分離。
用于制備/分離單個(gè)對(duì)映異構(gòu)體的常規(guī)技術(shù)包括由適合的光學(xué)純前體手性合成或使用例如手性高效液相色譜法(HPLC)拆分外消旋化合物(或鹽或衍生物以外消旋化合物)。
或者，可使外消旋化合物(或外消旋前體)與適合的光學(xué)活性化合物(例如，醇；或，堿或酸(當(dāng)式(I)化合物含有酸性或堿性部分時(shí))，諸如1-苯乙胺或酒石酸)反應(yīng)。所得非對(duì)映體混合物可通過(guò)層析法和/或分步結(jié)晶法分離，且非對(duì)映異構(gòu)體中的1或2個(gè)可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的純的對(duì)映異構(gòu)體。
本發(fā)明的手性化合物(及其手性前體)可使用層析法(典型的是HPLC法)，在具有流動(dòng)相的不均勻樹(shù)脂上、以富含對(duì)映異構(gòu)體的形式獲得，該流動(dòng)相由烴組成，該烴通常為含有0-50體積％(通常2-20體積％)異丙醇及0-5體積％烷基胺(通常0.1％二乙胺)的庚烷或己烷。濃縮洗脫液以產(chǎn)生濃縮混合物。
本發(fā)明包括式(I)化合物的所有晶型，包括其外消旋化合物及外消旋混合物(conglomerates)。立體異構(gòu)外消旋混合物可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)技術(shù)分離，例如參見(jiàn)E.L.Eliel及S.H.Wilen的＂Stereochemistry of Organic Compounds＂(Wiley，New York，1994)。
本發(fā)明包括式(I)的所有藥學(xué)上可接受的同位素標(biāo)記化合物，其中一或多個(gè)原子被替代為具有相同原子數(shù)但原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)不同于自然界中居優(yōu)選的原子質(zhì)量或質(zhì)量數(shù)的原子。
適合包括在本發(fā)明化合物中的同位素的實(shí)例包括氫同位素，諸如2H及3H；碳同位素，諸如11C、13C及14C；氯同位素，諸如36Cl；氟同位素，諸如18F；碘同位素，諸如123I及125I；氮同位素，諸如13N及15N；氧同位素，諸如15O、17O及18O；磷同位素，諸如32P；及硫同位素，諸如35S。
式(I)的一些同位素標(biāo)記化合物(例如，合并有放射性同位素的那些化合物)可用于藥物和/或底物組織分布研究中。放射性同位素氚(即，3H)及碳14(即，14C)由于其易于合并及檢測(cè)方法簡(jiǎn)便而尤其適用于此目的。
經(jīng)重同位素(諸如氘，即2H)取代時(shí)，因代謝穩(wěn)定性更大而產(chǎn)生一定的治療優(yōu)勢(shì)(例如，體內(nèi)半衰期延長(zhǎng)或所需劑量減少)，因此在有些情況下更為優(yōu)選。
經(jīng)正電子發(fā)射性同位素(諸如11C、18F、15O及13N)取代時(shí)，可用于正電子發(fā)射斷層(PET)研究中以調(diào)查底物受體占用率。
式(I)的同位素標(biāo)記化合物通?？赏ㄟ^(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的常規(guī)技術(shù)制備，或采用適合的同位素標(biāo)記試劑替代以往所用的非標(biāo)記試劑、通過(guò)與本文的實(shí)施例和制備例中所述的那些方法同樣的方法制備。
本發(fā)明的藥學(xué)可接受的溶劑化物包括其中結(jié)晶化溶劑可被同位素(例如，D2O、d6-丙酮、d6-DMSO)取代的那些溶劑化物。
還包括在本發(fā)明范圍內(nèi)的有如下文所定義的中間化合物、其所有的鹽、溶劑化物及復(fù)合物，以及如上文中對(duì)式(I)化合物所定義的其鹽的所有溶劑化物及復(fù)合物。本發(fā)明包括上述物質(zhì)類型的所有多晶型物及其晶癖。
當(dāng)制備本發(fā)明的式(I)化合物時(shí)，對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，例行選擇為了制備目的可提供最佳特征組合的中間體形式是顯而易見(jiàn)的。這些特征包括中間體形式的熔點(diǎn)、溶解度、可加工性及產(chǎn)量，以及由此所產(chǎn)生的可分離純化產(chǎn)物的簡(jiǎn)易性。
意欲用作藥物的本發(fā)明的化合物可作為結(jié)晶產(chǎn)物或無(wú)定形產(chǎn)物給藥，或可以以固態(tài)連續(xù)體(從完全無(wú)定形至完全結(jié)晶)存在。其例如可通過(guò)諸如沉淀、結(jié)晶、冷凍干燥、噴霧干燥或蒸發(fā)干燥等方法得到它們的固體填料、粉末或膜形式。為此也可以使用微波干燥或高頻干燥。
它們可單獨(dú)給藥或與一種或多種本發(fā)明的其它化合物聯(lián)合給藥或與一種或多種其它藥物(或者作為其任意的組合)聯(lián)合給藥。通常，它們將作為與一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑組合的制劑而給藥。術(shù)語(yǔ)＂賦形劑＂在本文中用于描述除本發(fā)明化合物以外的任何成分。選擇賦形劑在很大程度上依賴于以下因素諸如特定給藥方式、賦形劑對(duì)溶解性和穩(wěn)定性的影響及劑型性質(zhì)等。
適用于本發(fā)明化合物輸送的藥物組合物及其制備方法對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的。這類組合物及其制備方法可參見(jiàn)例如＂Remington’s Pharmaceutical Sciences＂，第19版(Mack PublishingCompany，1995)。
適合的給藥方式包括口服給藥、非胃腸道給藥、局部給藥、吸入/鼻內(nèi)給藥、直腸/陰道給藥以及經(jīng)眼/經(jīng)耳給藥。
本發(fā)明的化合物可口服給藥。口服給藥可包括吞咽，以便化合物進(jìn)入胃腸道；或可采用口含或舌下給藥，以便化合物直接從口腔進(jìn)入血流。適用于口服給藥的制劑包括固體制劑，諸如片劑、含微粒、液體或粉末的膠囊、錠劑(包括填充液體的)、咀嚼劑、多微粒及納米微粒、凝膠、固溶體、脂質(zhì)體、薄膜、丸劑(卵狀體)、噴霧劑、液體制劑以及口腔/粘膜粘著貼片。
液體制劑包括混懸液、溶液、糖漿及酏劑。這類制劑可作為軟膠囊或硬膠囊中的填充劑使用，且通常包含載劑(例如，水、乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甲基纖維素或適合的油)及一種或多種乳化劑和/或助懸劑。液體制劑還可通過(guò)例如自藥囊中將固體重新配伍來(lái)制備。
本發(fā)明的化合物還可用于速溶劑、速崩劑，諸如Liang和Chen在Expert Opinion in Therapeutic Patents，11(6)，981-986(2001)中所述的那些劑型。
對(duì)于片劑劑型，根據(jù)劑量，藥物可占該劑型的1重量％至80重量％、優(yōu)選為劑型的5重量％至60重量％。除藥物以外，片劑通常還含有崩解劑。崩解劑的實(shí)例包括淀粉羥乙酸鈉、羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚維酮、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素、微晶纖維素、低碳烷基取代的羥丙基纖維素、淀粉、預(yù)膠化淀粉及藻酸鈉。通常，崩解劑占該劑型的1重量％至25重量％、優(yōu)選為劑型的5重量％至20重量％。
粘合劑一般用于使片劑制劑具有粘著性。適合的粘合劑包括微晶纖維素、明膠、糖、聚乙二醇、天然及合成樹(shù)膠、聚乙烯吡咯烷酮、預(yù)膠化淀粉、羥丙基纖維素及羥丙甲基纖維素。片劑還可含有稀釋劑，諸如乳糖(一水合物、經(jīng)噴霧干燥的一水合物、無(wú)水乳糖及類似物)、甘露醇、木糖醇、右旋糖、蔗糖、山梨醇、微晶纖維素、淀粉及磷酸氫鈣二水合物。
片劑任選還可包含表面活性劑(諸如十二烷基硫酸鈉及聚山梨酯80)及助流劑(諸如二氧化硅及滑石粉)。當(dāng)含有這些物質(zhì)時(shí)，表面活性劑可占片劑的0.2重量％至5重量％，助流劑可占片劑的0.2重量％至1重量％。
片劑一般還含有潤(rùn)滑劑，諸如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、十八烷基富馬酸鈉以及硬脂酸鎂與十二烷基硫酸鈉的混合物。潤(rùn)滑劑通常占片劑的0.25重量％至10重量％、優(yōu)選占0.5重量％至3重量％。其它可能的成分包括抗氧化劑、著色劑、調(diào)味劑、防腐劑及掩味劑。
例示的片劑含有至多約80重量％藥物、約10重量％至約90重量％粘合劑、約0重量％至約85重量％稀釋劑、約2重量％至約10重量％崩解劑及約0.25重量％至約10重量％潤(rùn)滑劑。片劑混料可直接壓片或通過(guò)滾筒壓片形成片劑。或者，片劑混料或一部分混料的部分可以在壓片之前進(jìn)行濕法、干法或熔融制粒、熔融凝結(jié)或擠出。最終制劑可包含一層或多層，可以是包衣或不包衣的；甚至可以被囊封。片劑的制備的論述參見(jiàn)H.Lieberman及L.Lachman的＂Pharmaceutical DosageFormsTablets＂，第1卷(Marcel Dekker，New York，1980)。
供人或獸醫(yī)使用的可經(jīng)口消耗薄膜通常為易撓的水溶性薄膜劑型或水膨脹性薄膜劑型，其可快速溶解或粘膜粘附且通常包含式(I)的化合物、成膜聚合物、粘合劑、溶劑、保濕劑、增塑劑、穩(wěn)定劑或乳化劑、粘度改良劑及溶劑。該制劑中的一些組分具有一種以上的功能。
式(I)化合物可為水溶性或不溶性。水溶性化合物通常包含1重量％至80重量％、更通常為20重量％至50重量％的溶質(zhì)。難溶性化合物可構(gòu)成組合物的較大比例，通常至多為溶質(zhì)的88重量％?；蛘撸?I)化合物可為多顆粒微珠的形式。
成膜聚合物可選自天然多糖、蛋白質(zhì)或合成的水膠體，且存在范圍通常為0.01-99重量％、更通常為30至80重量％。
其它可能成分包括抗氧化劑、著色劑、調(diào)味劑及增香劑、防腐劑、唾液刺激劑、冷卻劑、共溶劑(包括油)、潤(rùn)滑劑、填充劑、消泡劑、表面活性劑及掩味劑。
本發(fā)明的薄膜通常是將涂布于可剝離的背襯或紙上的含水薄膜經(jīng)蒸發(fā)干燥而制得。該操作可在干燥箱或烘道(通常為組合式涂布干燥器)中達(dá)成，或通過(guò)冰凍干燥或抽真空達(dá)成。
用于口服給藥的固體制劑可制備成速釋型和/或緩釋型。緩釋型制劑包括延遲釋放、持續(xù)釋放、脈沖釋放、控釋、靶向釋放及計(jì)劃釋放(programmed release)。
適用于本發(fā)明目的緩釋制劑描述于美國(guó)專利第6,106,864號(hào)中。其它適合的藥物釋放技術(shù)(諸如高能分散劑及滲透與包衣顆粒)的詳情參見(jiàn)Verma等人的＂Pharmaceutical TechnologyOn-line＂，25(2)，1-14(2001)。利用咀嚼片實(shí)現(xiàn)控制釋放的技術(shù)描述于WO00/35298中。
本發(fā)明的化合物還可直接給藥于血流、肌肉或內(nèi)臟器官內(nèi)。適用于非胃腸道給藥的方式包括靜脈、動(dòng)脈、腹腔、鞘內(nèi)、心室內(nèi)、尿道內(nèi)、胸骨內(nèi)、顱內(nèi)、肌肉及皮下。適用于非胃腸道給藥的裝置包括針(包括顯微針)注射器、無(wú)針頭注射器及輸注技術(shù)。非胃腸道制劑通常為可含有賦形劑(諸如鹽、碳水化合物)及緩沖劑(優(yōu)選pH3-9)的水溶液，然而對(duì)于某些應(yīng)用，更適合將它們配制成無(wú)菌非水溶液或與適合的溶媒(諸如無(wú)菌無(wú)熱原的水)一起使用的干燥形式。在無(wú)菌條件下(例如通過(guò)凍干)制備非胃腸道制劑可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的標(biāo)準(zhǔn)制藥技術(shù)很容易地實(shí)現(xiàn)。
用于制成非胃腸道給藥溶液的式(I)化合物的溶解性可通過(guò)利用適當(dāng)?shù)闹苿┘夹g(shù)(諸如添加溶解性增強(qiáng)劑)來(lái)增強(qiáng)。用于非胃腸道給藥的制劑可制成速釋型和/或緩釋型。緩釋制劑包括延遲緩釋、持續(xù)緩釋、脈沖緩釋、控釋、靶向釋放及計(jì)劃緩釋。因此，本發(fā)明的化合物可制成固體、半固體或觸變液體，用作能提供緩釋活性化合物的植入儲(chǔ)庫(kù)給藥系統(tǒng)。該制劑實(shí)例包括涂藥支架及聚(dl-乳酸-羥基乙酸)(PGLA)微球的懸液。
本發(fā)明的化合物還可局部、皮(內(nèi))或透皮給藥于皮膚或粘膜。用于此目的典型制劑包括凝膠、水凝膠、洗劑、溶液、乳劑、軟膏、撒粉、敷料劑、泡沫、膜劑、皮膚貼片、包藥干糊片、植入劑、海棉、纖維、繃帶及微乳液。還可使用脂質(zhì)體。典型的載劑包括醇、水、礦物油、液體石蠟、白凡士林、甘油、聚乙二醇及丙二醇?？梢约尤霛B透促進(jìn)劑，例如參見(jiàn)Finnin及Morgan的J PharmSci，88(10)，955-958。其它局部給藥方式包括通過(guò)電穿孔法、離子導(dǎo)入法、超聲透入法、超聲促滲法及顯微針或無(wú)針(例如，PowderjectTM、BiojectTM等)注射法傳遞藥物。用于局部給藥的制劑可制備為速釋型和/或緩釋型。緩釋制劑包括延遲緩釋、持續(xù)緩釋、脈沖緩釋、控釋、靶向釋放及計(jì)劃緩釋(programmed release)。
本發(fā)明的化合物還可以經(jīng)鼻內(nèi)或通過(guò)吸入給藥；通常以來(lái)自干粉吸入器的干粉形式(以例如與乳糖的干燥混合物形式單獨(dú)使用或作為混合組分顆粒，例如與磷脂(諸如磷脂酰膽堿)混合的形式使用)給藥。或者使用或不使用適合的推進(jìn)劑(諸如1，1，1，2-四氟乙烷或1，1，1，2，3，3，3-七氟丙烷)、作為來(lái)自加壓容器、泵、噴淋器、霧化器(優(yōu)選利用電水動(dòng)力學(xué)產(chǎn)生細(xì)霧的霧化器)或噴霧器的噴霧劑給藥，或作為滴鼻劑。對(duì)于鼻內(nèi)給藥，該粉劑可包括生物粘附劑，例如，殼聚糖或環(huán)糊精。
加壓容器、泵、噴淋器、霧化器或噴霧器含有本發(fā)明的化合物的溶液或混懸液，該溶液或混懸液例如包含乙醇、乙醇水溶液或適用于分散、增溶或延長(zhǎng)活性化合物釋放的替代劑、作為溶劑的推進(jìn)劑以及任選的表面活性劑，諸如山梨糖醇酐三油酸酯、油酸或低聚乳酸。
在用于干粉或混懸液制劑中之前，將藥物產(chǎn)物微?；吝m于通過(guò)吸入法傳遞的尺寸(通常在5微米以下)。這可通過(guò)任一種適合的粉碎方法實(shí)現(xiàn)，諸如螺旋噴射研磨法、流化床噴射研磨法、形成納米微粒的超臨界流體處理法、高壓均質(zhì)法或噴霧干燥法。
用于吸入器或吹入器中的膠囊劑(例如，由明膠或羥丙甲基纖維素制成)、泡罩及藥筒可制成含有本發(fā)明的化合物、適合粉末基質(zhì)(諸如乳糖或淀粉)與性能調(diào)節(jié)劑(諸如1-亮氨酸、甘露醇或硬脂酸鎂)的粉末混合物。乳糖可為無(wú)水乳糖或?yàn)橐凰衔镄问剑瑑?yōu)選后者。其它適合的賦形劑包括葡聚糖、葡萄糖、麥芽糖、山梨醇、木糖醇、果糖、蔗糖及海藻糖。
適合在使用電水動(dòng)力學(xué)產(chǎn)生細(xì)霧的霧化器中使用的溶液制劑每噴1μg至20mg的本發(fā)明化合物、噴出體積為1μl至100μl。典型的制劑可包含式(I)的化合物、丙二醇、滅菌水、乙醇及氯化鈉?？商娲际褂玫奶娲軇┌ǜ视图熬垡叶肌?br> 可將適合的調(diào)味劑(諸如薄荷醇及左旋薄荷醇)或甜味劑(諸如糖精或糖精鈉)添加至用于吸入給藥/鼻內(nèi)給藥的本發(fā)明制劑中。
用于吸入給藥/鼻內(nèi)給藥的制劑例如使用PGLA可制備為速釋型和/或緩釋型。緩釋制劑包括延遲釋放、持續(xù)釋放、脈沖釋放、控制釋放、靶向釋放及計(jì)劃釋放。
當(dāng)為干粉吸入器及氣霧劑時(shí)，劑量單位由傳送計(jì)量劑量的閥來(lái)判定。符合本發(fā)明的劑量單位通常設(shè)計(jì)成給予含有1μg至100mg式(I)化合物的計(jì)量劑量或“噴射量”。每日總用藥量的范圍通常為1μg至200mg，其可以單一劑量給藥，或更通常在一天內(nèi)以多劑量給藥。
本發(fā)明的化合物例如可以栓劑、子宮托、殺微劑、陰道環(huán)或灌腸劑的形式經(jīng)直腸或陰道給藥?？煽芍瑸閭鹘y(tǒng)的栓劑基質(zhì)，但若適合則可使用各種替代物。用于直腸/陰道給藥的制劑可制備為速釋型和/或緩釋型。緩釋制劑包括延遲釋放、持續(xù)釋放、脈沖釋放、控制釋放、靶向釋放及計(jì)劃釋放。
本發(fā)明的化合物通常還可以經(jīng)pH調(diào)節(jié)的等滲無(wú)菌生理鹽水中的微?；鞈乙夯蛉芤旱囊旱涡问街苯咏o予眼或耳。適合經(jīng)眼及經(jīng)耳給藥的其它制劑包括藥膏、生物可降解(例如，可吸收凝膠海棉、膠原蛋白)及生物不可降解(例如，聚硅氧烷)植入物、包藥干糊片、透鏡及微?；蚰遗菹到y(tǒng)，諸如類脂囊泡或脂質(zhì)體?？膳c諸如苯扎氯銨等防腐劑一起加入下述聚合物諸如交聯(lián)聚丙烯酸、聚乙烯醇、透明質(zhì)酸、纖維素聚合物(例如，羥丙甲基纖維素、羥乙基纖維素或甲基纖維素)或雜多糖聚合物(例如，結(jié)冷膠)。該制劑還可通過(guò)離子導(dǎo)入法傳送。用于經(jīng)眼/經(jīng)耳給藥的制劑可制備為速釋型和/或緩釋型。緩釋制劑包括延遲釋放、持續(xù)釋放、脈沖釋放、控制釋放、靶向釋放或計(jì)劃釋放。
本發(fā)明的化合物可與可溶性大分子實(shí)體(諸如環(huán)糊精及其適合的衍生物或含聚乙二醇的聚合物)組合，以改善其溶解性、溶出速度、掩味性、生物利用度和/或穩(wěn)定性而用于上述任意一種給藥方式。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，例如藥物-環(huán)糊精復(fù)合物一般可用于大多數(shù)劑型及給藥途徑。包合復(fù)合物與非包合復(fù)合物均可使用。作為與藥物直接復(fù)合(絡(luò)合)的可選擇方式，環(huán)糊精可用作輔助添加劑，即，用作載劑、稀釋劑或增溶劑。最常用于該目的為α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精及γ-環(huán)糊精，其實(shí)例可參見(jiàn)國(guó)際專利申請(qǐng)第WO 91/11172、第WO 94/02518號(hào)及第WO 98/55148號(hào)中。
由于例如為了治療具體的疾病或病狀，可能需要給予活性化合物的組合，因此本發(fā)明的范圍涵蓋將兩種或兩種以上藥物組合物(其中至少一種含有本發(fā)明的化合物)方便地組合成適合共同給藥的藥盒形式。因此，本發(fā)明的藥盒包含兩種或兩種以上單獨(dú)的藥物組合物(其中至少一種含有本發(fā)明的式(I)化合物)以及分別容納該組合物的構(gòu)件，諸如容器、分裝瓶或分隔式箔袋。該藥盒的實(shí)例為常用于包裝片劑、膠囊劑等的泡罩包裝。本發(fā)明的藥盒尤其適合例如經(jīng)口及非胃腸道給藥等不同劑型的給藥，適合在不同給藥間隔期給予單獨(dú)的組合物，或用于彼此相互滴定各自組合物。為有助于順應(yīng)性，該藥盒通常包含用藥說(shuō)明書且可以提供所謂的記憶支持。
對(duì)于給予人患者，本發(fā)明化合物的總?cè)辗┝康姆秶ǔ?mg至10g，如10mg至1g，如25mg至500mg，當(dāng)然，這取決于給藥方式及療效。例如，口服給藥可能需要50mg至100mg的總?cè)辗┝??？側(cè)辗┝靠梢詥未蝿┝炕蚨啻蝿┝拷o藥，且可按醫(yī)生判斷超出本文中指定的一般范圍。這些劑量都是基于具有約60kg至70kg體重的普通人受試者。醫(yī)師易能判定適用于體重超出此范圍的受試者(例如幼兒及老年人)的劑量。
為改良溶出特性，如下制備4-氨基-1-芐基-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(下文實(shí)施例15)與羥丙甲基纖維素(HPMC E3 Prem LV，Methocel

，購(gòu)自Dow ChemicalCompany，Midland，MI)的固體無(wú)定形噴霧干燥分散體(SDD)。首先，形成含有2.97g水、16.83g甲醇及250μL 1M KOH(含有9.8mg鉀陽(yáng)離子)的噴霧溶液，向其添加51.27mg的4-氨基-1-芐基-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮的結(jié)晶中性形式。然后，將140.4mg HPMC添加至該溶液中并將該溶液攪拌5分鐘且超聲處理2分鐘。將該溶液以1.1ml/min流速、用Cole Parmer 74900串聯(lián)控速注射泵抽入由直徑11cm的不銹鋼殼室組成的小型噴霧干燥設(shè)備。使用被加熱的氮?dú)饬?，將該溶液?標(biāo)準(zhǔn)ft3/分鐘的流速用雙流體噴嘴(Spraying Systems Co.，Wheaton，Illinois，型號(hào)SU1A)霧化。熱氣體以85℃的入口溫度進(jìn)入殼室且以22℃的出口溫度排出。將所得固體無(wú)定形分散體收集于Whatman #1微晶纖維素過(guò)濾介質(zhì)(11μm孔徑，11cm外徑)上，在真空下干燥，且儲(chǔ)存于干燥器中。該分散體含有25.4wt％4-氨基-1-芐基-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮、4.9wt％鉀陽(yáng)離子及69.7wt％ HPMC。收率為約60％。
為避免懷疑，本文中所述＂治療＂包括涉及治療性、緩解性及預(yù)防性治療。
以下流程說(shuō)明用于制備式(I)化合物及其中間體的一般方法。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解的是，式(I)化合物或其中間體的制備流程中所述的一些程序可能不適用于一些可能的替取代基。
本領(lǐng)域技術(shù)人員還應(yīng)理解的是，有時(shí)有可能需要或優(yōu)選以與所述不同的順序進(jìn)行流程中所述的轉(zhuǎn)化，或需要修改一種或多種轉(zhuǎn)化，以形成所需的式(I)化合物。
本領(lǐng)域技術(shù)人員此外應(yīng)理解的是，如下文流程中所說(shuō)明，可能需要或優(yōu)選在合成式(I)化合物的任何階段保護(hù)分子中的一或多個(gè)敏感基團(tuán)以便防止不需要的副反應(yīng)。詳細(xì)地說(shuō)，可能需要保護(hù)胺基。在式(I)化合物制備中所用的保護(hù)基可以常規(guī)方式使用。例如參見(jiàn)Theodora W Green及Peter G M Wuts的”Protective Groups in OrganicSynthesis”第3版(John Wiley及Sons，1999)(尤其第7章、第494-653頁(yè)(＂Protection for the Amino Group＂))中所述的那些內(nèi)容，該文引入本文中作為參考文獻(xiàn)，其還描述了移除該類基團(tuán)的方法。
氨基保護(hù)基boc、芐氧基羰基、芐基及乙?；绕溥m用于制備式(I)化合物及其中間體。
除非另有說(shuō)明，流程中R1-R7及Y均如本文所定義。PG1及PG2為氮保護(hù)基。
式(I)化合物可如流程1中所述制備，下文中制備例1-27則進(jìn)一步說(shuō)明流程1。
應(yīng)理解的是，式(XVII)至(XIX)中的氨基保護(hù)基N(PG1)(PG2)在一些情況下可為N(H)PG1。
流程1
流程1描繪了制備式(I)化合物的各種方式。
a)例如，在Zn源存在下，使市購(gòu)腈(II)或通過(guò)化學(xué)文獻(xiàn)中所述任一種標(biāo)準(zhǔn)方法所制備的腈(II)與鹵代乙酸酯(III)(例如溴乙酸乙酯)反應(yīng)。Tet.Letts，1997，38，443-446描述了若應(yīng)用堿性條件分離該產(chǎn)物，則該轉(zhuǎn)化反應(yīng)可產(chǎn)生通用結(jié)構(gòu)(IV)的烯胺。
b)若上述步驟a)中應(yīng)用酸性條件，則產(chǎn)生酮酯(V)，然后可使用氨源(例如乙酸銨)、在分離步驟中使其再轉(zhuǎn)化為烯胺(IV)。由此可見(jiàn)，通用結(jié)構(gòu)(V)的各種酮酯可在中間體(IV)處截獲上述合成路線。c)然后可使烯胺(IV)在堿性條件(諸如乙醇鈉、氫化鈉或叔丁醇鉀)下與丙二酸二烷酯(VII)反應(yīng)以產(chǎn)生(VIII)。J.Org.Chem.，1981，46(15)，3040-3048描述了該轉(zhuǎn)化的實(shí)例。
d)或者，可使烯胺(IV)在適合的堿(諸如碳酸鉀或三乙胺)存在下與丙二酰氯(VI)反應(yīng)以產(chǎn)生酰胺化形式(IX)。
e)然后可使(IX)在分離步驟中與適合的堿反應(yīng)以環(huán)合為吡啶(VIII)。適合的堿包括乙醇鈉、氫化鈉或叔丁醇鉀。
f)然后在加熱作用下使(VIII)在提供相應(yīng)的酸(例如，HCl、HBr、硫酸)、氫氧化鈉或氫氧化鋰的酸性或堿性條件下皂化，自發(fā)脫羧基化以產(chǎn)生吡啶(X)。該轉(zhuǎn)化的實(shí)例描述于WO01101949中。
g)(X)可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何文獻(xiàn)條件(例如使用硝酸與硫酸的混合物或乙酸與硝酸的混合物)硝化以產(chǎn)生硝基吡啶(XI)。例如，Bioorg.Med.Chem.Lett.，1996，6(2)，173-178中描述了該轉(zhuǎn)化。
h)(XI)可使用各種轉(zhuǎn)化羥基為氯的條件(諸如亞硫酰氯或磷酰氯)氯化以產(chǎn)生(XII)。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)理解的是，2個(gè)羥基可分別氯化或轉(zhuǎn)化為替代的離去基團(tuán)(諸如另一鹵原子)或活化酯(諸如甲烷磺酸酯或三氟甲基磺酸酯)。該所有方法的實(shí)例包括于下文部分中。
i)使(XII)與通式R3YNH2的胺反應(yīng)(其優(yōu)先在4-氯基團(tuán)反應(yīng))以產(chǎn)生(XIII)。視R3Y基團(tuán)的性質(zhì)而定，可存在2個(gè)氯基團(tuán)的部分易位或2-氯基團(tuán)處的少量易位，但無(wú)損于顯著獲得(XIII)的能力。
j)然后使(XIII)與氨或氨等效物(諸如乙酸銨)反應(yīng)以產(chǎn)生(XIV)。
k)然后可使(XIV)在文獻(xiàn)中已知的任一種條件(例如使用HCl中的鐵或錫)下還原以將硝基芳族化合物還原為胺，再在過(guò)渡金屬催化劑(諸如鈀、鉑或鎳)或化學(xué)還原劑(諸如氫化鋁鋰)存在下進(jìn)行氫化反應(yīng)以產(chǎn)生(XV)。
l)然后可使(XV)與C＝0源(諸如1，1-羰基二咪唑或光氣)反應(yīng)以產(chǎn)生咪唑酮(XVI)與(I)的混合物，其中(I)可通過(guò)細(xì)致的層析純化獲得。
m)或者，(XIII)可與氨的受保護(hù)形式(諸如二芐基胺或二烯丙胺)反應(yīng)，其中2個(gè)氫原子被2個(gè)隨后在溫和條件下移除的基團(tuán)取代。關(guān)于這些實(shí)例的替代，例如參見(jiàn)Theodora W Green及Peter G M Wuts的“Protective Groups in Organic Synthesis”第3版(John Wileyand Sons，1999)、尤其第7章、第494-653頁(yè)(＂Protection for theAmino Group＂)中所述的那些基團(tuán)。
n)-o)參見(jiàn)步驟k)-l)。
p)然后在適合移除保護(hù)基PG1及PG2的各種條件下將(XIX)脫保護(hù)以產(chǎn)生(I)。例如參見(jiàn)Theodora W Green及Peter G M Wuts的”Protective Groups in Organic Synthesis”第3版(John Wiley andSons，1999)、尤其第7章、第494-653頁(yè)(＂Protection for the AminoGroup＂)中所述的那些基團(tuán)，以及其移除條件。
q)或者，(XIII)可優(yōu)選使用強(qiáng)堿諸如氫化鈉、叔丁醇鉀或二異丙基氨基胺鋰與適合的?；瘎?諸如氯甲酸乙酯或其它任何氯甲酸烷酯或氯甲酸芳酯，氯仿或酸酐的組合，作為胺基甲酸烷基酯R13CO2X(其中R13為C1-6烷基且X為鹵素)加以保護(hù)，以形成(XX)。
r)可對(duì)(XX)如上應(yīng)用步驟j)及k)，然后可將由此步驟順序所得的產(chǎn)物通過(guò)質(zhì)子酸(諸如乙酸或甲酸)簡(jiǎn)單處理，被區(qū)位選擇地環(huán)化為(I)。
還可根據(jù)下述流程2使用中間體(XVII)的替代構(gòu)型(其中鹵原子存在于C2位且形成適合的中間體(流程2中的XXVII)用于進(jìn)一步操作)制備通式(I)的化合物。
流程2
從而，市購(gòu)二鹵代吡啶(例如，二溴吡啶XXI)可用若干步驟的處理以產(chǎn)生通式(I)的諸多類似物。
a)-e)市購(gòu)二溴吡啶(XXI)可根據(jù)被改良的文獻(xiàn)程序(描述于WO2005026164中)操作以產(chǎn)生中間體(XXVI)。介于(XXI)與(XXVI)之間的諸多步驟有賴于熱危險(xiǎn)試劑或產(chǎn)生潛在地?zé)嵛ｋU(xiǎn)產(chǎn)物，因此應(yīng)謹(jǐn)慎操作。
f)(XXVI)是使用各種已知可自氨基產(chǎn)生重氮化物的條件反應(yīng)而得，例如，由HCl與亞硝酸鈉現(xiàn)場(chǎng)產(chǎn)生、而其中重氮化物被C1原子取代的亞硝酸條件。然后(XXVI)轉(zhuǎn)化為關(guān)鍵中間體(XXVII)可通過(guò)添加過(guò)量的胺(例如芐胺)至粗氯化物來(lái)實(shí)現(xiàn)。該步驟將C2鹵原子與C4鹵原子取代為氨基。任何伯胺或仲胺基團(tuán)均適用于該轉(zhuǎn)化。
g)-i)然后可使(XXVII)中的C2鹵原子在各種取代C2鹵素基團(tuán)為各種官能團(tuán)的條件下反應(yīng)，從而可制備多種替代產(chǎn)物(I)。例如，使用多種有機(jī)金屬試劑(硼酸、鋅酸鹽、鎂試劑、銅酸鹽、錫烷等)將雜環(huán)與(XXVII)偶合可產(chǎn)生(XXVIII)，使用乙烯基有機(jī)金屬試劑(諸如乙烯基三丁基錫)及鈀催化劑(諸如Pd(PPh3)4)將雜環(huán)與(XXVII)偶合可產(chǎn)生乙烯基物質(zhì)(XXX)，以及羰化反應(yīng)，其中(XXVII)在諸如三乙胺等堿及鈀催化劑存在下、在壓力下、被CO氣體處理，以產(chǎn)生通用結(jié)構(gòu)(XXIX)的酰基產(chǎn)物。然后可根據(jù)流程1的步驟n、o及p使結(jié)構(gòu)(XXVIII)及(XXIX)的化合物轉(zhuǎn)化為式(I)的化合物。
j)-l)(XXX)然后可通過(guò)氧化作用處理以產(chǎn)生醛(XXXII)，然后(XXXII)或(XXXI)可分別用胺在諸如三乙胺等堿存在下處理或用諸如三乙酰氧基硼氫化鈉的還原劑處理以產(chǎn)生產(chǎn)物(I)(按照流程1中的步驟n、o及p)。
中間體(XIII)的替代構(gòu)型可根據(jù)流程3制備，然后如下操作產(chǎn)生式(I)化合物。流程3
a)-e)步驟a)-e)與流程1所述那些步驟本質(zhì)相似，除制備一鹵化物(XXXIV)以確保(XXXVI)中C6與C4的區(qū)位化學(xué)完整性以外。
f)(XXXVIII)可在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的各種條件下(諸如非極性溶劑(諸如DCM或MeCN)中的溴水)溴化以產(chǎn)生C3-溴化物(XXXIX)。
g)然后可使用CO氣體、在諸如三乙胺等堿、諸如甲醇等醇及諸如Pd(PPh3)4等鈀催化劑存在下、在壓力下使(XXXIX)羰化以產(chǎn)生酯(XXXX)。
h)-i)然后可使(XXXX)與胺NR6R7反應(yīng)以產(chǎn)生酰胺(XXXXI)，其可如上被脫保護(hù)以產(chǎn)生產(chǎn)物(I)。
中間體(XI)的替代合成展示于如下流程4中。
流程4
a)可使在腈官能團(tuán)相鄰處具有亞甲基的任一種腈(XXXXII)與丙二酰氯(XXXXIII)反應(yīng)以形成吡啶(XXXXIV)。該轉(zhuǎn)化描述于Synthesis，1984，765-766中。
b)然后可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何文獻(xiàn)條件，例如使用硝酸與硫酸的混合物或乙酸與硝酸的混合物將吡啶(XXXXIV)硝化以形成硝基吡啶(XXXXV)。
c)(XXXXV)中的氯原子然后可在各種條件下偶合，其中可在過(guò)渡金屬催化劑存在下(在鈀催化劑存在下)用反應(yīng)性有機(jī)金屬試劑(例如，錫烷、鋅酸鹽或硼酸)處理(XXXXV)，以產(chǎn)生被取代的吡啶(XI)。在其中R1＝H時(shí)，在諸如披鈀木炭或氫氧化鈀的適合催化劑存在下可有效進(jìn)行簡(jiǎn)單的氫化反應(yīng)。
中間體(X)的另一替代合成展示于如下流程5中。
流程5
在該方法中，使丙二?；ァ?yōu)選二苯酯(XXXXVI)與希夫堿(XXXXVII)反應(yīng)且加熱以產(chǎn)生通式(X)的吡啶。
制備通式(X)化合物的另一替代方式展示于流程6中。
流程6
a)使通式(XXXXVIII)的酮酸(其可市購(gòu)或通過(guò)式(V)的酮酯的皂化反應(yīng)直接制得)在高溫下、在適合的溶劑中與C＝0源(諸如1，1-羰基二咪唑)反應(yīng)以產(chǎn)生環(huán)化吡喃酮(XXXXIX)。
b)將(XXXXIX)用諸如硫酸或鹽酸的強(qiáng)無(wú)機(jī)酸處理以除去C3-酰基取代基且產(chǎn)生吡喃酮(L)。
c)在加熱下可使(L)與諸如濃氫氧化銨水溶液等氨源反應(yīng)以將吡喃酮環(huán)轉(zhuǎn)化為吡啶(X)，從而截獲流程1中所述的相同中間體?；蛘?，通式(L)的若干種吡喃酮可獲自商業(yè)來(lái)源，其可直接應(yīng)用于步驟c。通式(L)化合物轉(zhuǎn)化為通式(X)的那些化合物系描述于例如WO9504730的若干來(lái)源中。
制備通式(XIX)化合物的一替代方式展示于流程7中。
流程7
a)可使通式(LI)的市購(gòu)二氯吡啶與式R3YNH2的胺反應(yīng)以選擇性取代4-氯基團(tuán)，從而產(chǎn)生吡啶(LII)。
b)然后可使(LII)與氨的受保護(hù)形式PG1NH2或PG1PG2NH(諸如芐胺、烯丙胺、二芐胺或二烯丙胺)反應(yīng)以取代2-氯基團(tuán)，其中2個(gè)氫原子系被2個(gè)可隨后在溫和條件下移除的基團(tuán)取代。關(guān)于該實(shí)例的替代，請(qǐng)參見(jiàn)例如Theodora W Greene和Peter G M Wuts的“ProtectiveGroups in Organic Synthesis”第3版(John Wiley and Sons，1999)、尤其第7章、第494-653頁(yè)(＂Protection for the Amino Group＂)中所述的那些基團(tuán)。若自步驟a使用過(guò)量的胺R3YNH2，則該基團(tuán)可取代2-氯基團(tuán)與4-氯基團(tuán)。
c)(LIII)的酯可在已知將酯脫保護(hù)的各種條件下(例如，氫氧化鈉或氫氧化鋰)水解以產(chǎn)生酸(LIV)。關(guān)于該試劑的替代，請(qǐng)參見(jiàn)例如Theodora W Greene及Peter G M Wuts的”Protective Groups inOrganic Synthesis”第3版(John Wiley and Sons，1999)、尤其第5章、第373-441頁(yè)(＂Protection for the Carboxylgroup＂)中所述的那些條件。
d)然后可使(LIV)與已知可使酸轉(zhuǎn)化為?；B氮(例如二苯基膦?；B氮化物)的試劑反應(yīng)。在加熱作用下，中間體?；B氮經(jīng)歷其中產(chǎn)生異氰酸酯并在內(nèi)部經(jīng)過(guò)4-胺基取代基截留的重排反應(yīng)，以產(chǎn)生咪唑酮(XIX)，從而截獲流程1中所述的相同中間體。
制備通式(I)化合物的一替代方式展示于流程8中。
流程8
a)根據(jù)Org.BioMol.Chem.，2003，1，1354-1365所制備的(LVI)可通過(guò)使(LVI)中的氨基與活性試劑(例如，亞硝酸異戊酯)及鹵化劑(諸如二碘甲烷或二溴甲烷)反應(yīng)來(lái)鹵化，以產(chǎn)生鹵化物質(zhì)(LVII)。
b)(LVII)然后可經(jīng)歷各種過(guò)渡金屬介導(dǎo)的偶合反應(yīng)，其中碘基團(tuán)選擇性地與例如末端炔反應(yīng)。關(guān)于對(duì)咪唑構(gòu)型的該轉(zhuǎn)化的實(shí)例，參見(jiàn)J.Med.Chem.，34(2)，1991，778-786。
c)然后可使(LVIII)與氨反應(yīng)以使炔基-甲腈環(huán)化為吡啶環(huán)。關(guān)于對(duì)咪唑構(gòu)型的該轉(zhuǎn)化的實(shí)例，例如參見(jiàn)Tetrahedron，49(3)，1993，557-570。
d)然后可使(LIX)中的溴原子在強(qiáng)酸性條件下(例如，鹽酸或硫酸)水解；或與OH的親核源(諸如氫氧化鈉或甲醇鈉)反應(yīng)，然后適度的酸性水解，以產(chǎn)生(I)。
中間體(LVIII)還可根據(jù)下述流程9用于制備通式(I)的化合物。 流程9
e)可使(LVIII)在適度的加熱下與醇(例如，甲醇、乙醇、丙醇或其它任何醇)反應(yīng)以形成縮醛(LX)。
f)縮醛(LX)然后可在已知使縮醛或縮酮水解為酮的任何條件下(例如，鹽酸水溶液)經(jīng)歷水解。關(guān)于該條件的替代，請(qǐng)參見(jiàn)例如Theodora W Green及Peter G M Wuts的”Protective Groups in OrganicSynthesis”第3版(John Wiley and Sons，1999)、尤其第4章、第297-347頁(yè)(＂Protection for the Carbonylgroup＂)中所述的那些條件。
g)然后可使酮(LXI)在適合的堿(諸如氫化鈉、叔丁醇鉀或碳酸鉀)及烷化劑(諸如烷基鹵、烷基磺酸鹽或烷基三氟甲烷磺酸鹽)存在下烷基化以產(chǎn)生(LXII)。
h)然后可使(LXII)與氨反應(yīng)以使酮-甲腈環(huán)化為吡啶環(huán)。
i)然后可使(LXIII)中的溴原子在強(qiáng)酸性條件下(例如，鹽酸或硫酸)水解；或與OH的親核源(諸如氫氧化鈉或甲醇鈉)反應(yīng)，然后適度的酸性水解，以產(chǎn)生(I)。在醇解步驟e期間，高溫可使溴原子被醇取代，然后以引入氧代的替代方式將其引入(I)。
流程8及9使用溴(其為優(yōu)選)進(jìn)行說(shuō)明，但應(yīng)了解還可使用其它鹵原子。
中間體(XVII)的替代合成展示于如下流程10中。流程10
a)(LXIV)可在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何硝化條件下處理。已知該類型轉(zhuǎn)化是通過(guò)用中間體N-硝基類似物進(jìn)行的。例如，參見(jiàn)WO2005026164中所述的同樣化學(xué)內(nèi)容。
b)(LXV)被HBr處理以使氯原子轉(zhuǎn)化為溴(LXVI)。
c)然后將(LXVI)用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的將氨基轉(zhuǎn)化為N-亞硝基或重氮基團(tuán)的任何條件處理，然后用HCl處理以產(chǎn)生氯化物(LXVII)。
d)(LXVII)可用胺PG1NH(例如芐胺)處理以取代4-氯與2-溴以產(chǎn)生(LXVIII)。
e)然后使用過(guò)渡金屬介導(dǎo)方法，例如，Pd催化羰化、經(jīng)由Sn、Zn或B試劑的有機(jī)金屬交叉偶合反應(yīng)，或利用Li或Mg試劑、使用Fe或Ni作為催化劑，可使剩余6-溴用于引入各種取代基。在所示實(shí)例中，羰化反應(yīng)產(chǎn)生所示的具體類似物(LXIX)。然后可根據(jù)流程1中的步驟n、o及p，使此物轉(zhuǎn)化為式(I)化合物。
制備通式(XIX)化合物的一替代方式展示于流程11中。流程11
a)依次在可引入鹵原子的各種條件下(例如NCS、NBS、NIS、溴水等)將(LXX)鹵化以產(chǎn)生二鹵素吡啶(LXXI)。
b)然后用通用結(jié)構(gòu)R3YNH2的胺處理(LXXI)以產(chǎn)生兩化合物(LXXII)與(LXXIII)的混合物。
c)-e)所需化合物(LXXII)然后可環(huán)化，取代剩余鹵，然后最后脫保護(hù)，可產(chǎn)生(I)。
制備通式(X)、(XI)及(I)的化合物的另一方法展示于流程12中。流程12
a)從而，可使用一般脫水劑(諸如POCl3、SOCl2、PPA或三氟甲磺酸酐)、在強(qiáng)堿存在下、在現(xiàn)場(chǎng)可形成腈的條件下、使市購(gòu)的式(LXXV)酰胺與丙二酰二酯(例如，1，3-丙酮二甲酸二烷基酯)經(jīng)起始酰胺的脫水作用而起反應(yīng)。該條件直接導(dǎo)致二羥基吡啶(X)的形成。
b)(X)可根據(jù)流程1中所述方法硝化以產(chǎn)生(XI)。
c)(X)可根據(jù)流程1中所述方法皂化及脫羧基。
d)和e)然后可使用流程1中所述任一種方法使(X)或(XI)轉(zhuǎn)化為式(I)化合物。
(I)的前體藥物衍生物的制備方法展示于如下流程13中。

流程13 活性母體化合物與特征為基團(tuán)R4或R5連接于適合的離去基團(tuán)的試劑在適合的堿存在下反應(yīng)，可產(chǎn)生(I)的前體藥物衍生物。適合的試劑包括但不限于如下所示的烷基鹵、酰氯、氯甲酸酯及氨基甲酰氯。

適合的堿包括三乙胺、二異丙基乙胺、碳酸鉀、碳酸銫、氫化鈉及正丁基鋰。多種溶劑(包括但不限于THF、乙腈、二甲基甲酰胺、二氯甲烷及乙醚)還可用于實(shí)現(xiàn)該轉(zhuǎn)化。溶劑與堿的特定選擇會(huì)影響烷化反應(yīng)/?；磻?yīng)的區(qū)域選擇性，即，反應(yīng)基團(tuán)是否連接O原子(R5)或N原子(R4)。例如，母體分子與氯甲酸乙酯在DCM中的三乙胺存在下反應(yīng)可顯著地產(chǎn)生O?；?。
上述所有反應(yīng)以及上述方法中公開(kāi)的新的起始物質(zhì)的制備為常規(guī)的，且對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，參考文獻(xiàn)先例及其實(shí)施例及制備，可知曉用于其執(zhí)行或制備的適合的試劑及反應(yīng)條件以及分離所需產(chǎn)物的程序。
本發(fā)明的化合物由于其在哺乳動(dòng)物(包括人)中具有藥理活性而為有用的。詳細(xì)地說(shuō)，其適用于治療與TLR7的調(diào)節(jié)(尤其是激動(dòng)作用)相關(guān)的疾病。
在另一方案中，本發(fā)明另外提供用于治療與TLR7受體的調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病或病癥的式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。
從而本發(fā)明提供用于治療其中已知或可證明調(diào)節(jié)TLR7受體能產(chǎn)生有益效果的疾病或病癥的(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。
在又一方案中，本發(fā)明的化合物適用于治療病毒感染，諸如由以下病毒所引起的感染腺病毒、皰疹病毒(例如，HSV-I、HSV-II、CMV或VZV)、痘病毒(例如，諸如天花或牛痘的正痘病毒，或接觸傳染性軟疣)、細(xì)小核糖核酸病毒(例如，鼻病毒或腸病毒)、正粘液病毒(例如流感病毒)、副粘液病毒(例如，副感冒病毒、腮腺炎病毒、麻疹病毒或呼吸道合胞體病毒(RSV))、冠狀病毒(例如，SARS)、乳多泡病毒(例如，乳頭狀瘤病毒，諸如產(chǎn)生生殖器疣、普通疣或足腳底疣的那些病毒)、嗜肝DNA病毒(例如，乙型肝炎病毒)、黃病毒(例如，丙型肝炎病毒或登革熱病毒)、逆轉(zhuǎn)錄病毒(例如，慢病毒如HIV)或絲狀病毒(例如，埃博拉病毒或馬爾堡病毒(marbug virus))。
在另一方案中，本發(fā)明的化合物適用于治療丙型肝炎病毒感染。
在又一方案中，本發(fā)明的化合物適用于治療腫瘤或癌癥，其包括但不限于癌、肉瘤及白血病，例如，鱗狀細(xì)胞癌、腎細(xì)胞癌瘤、卡波西氏肉瘤、黑色素瘤、腎細(xì)胞癌瘤、骨髓性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、多發(fā)性骨髓瘤、非何杰金氏淋巴瘤。
在又一方案中，本發(fā)明的化合物適用于治療細(xì)菌感染、真菌感染及原生動(dòng)物感染，包括但不限于由如下菌屬細(xì)菌所引起的感染埃希氏桿菌屬(Escherichia)、腸桿菌屬(Enterobacter)、沙門氏菌屬(Salmonella)、葡萄球菌屬(Staphylococcus)、克雷白氏桿菌屬(Klebsiella)、變形桿菌屬(Proteus)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、鏈球菌屬(Streptococcus)、衣原體屬(Chlamydia)；或是真菌感染，如念珠菌病(candidiasis)、曲霉病(aspergillosis)、組織胞漿菌病(histoplasmosis)、隱球菌腦膜炎(cryptococcal meningitis)。
在又一方案中，本發(fā)明的化合物適用于治療T-輔助細(xì)胞(Th2)介導(dǎo)的疾病(例如參見(jiàn)Dabbagh等人，Curr Opin Infect Dis 2003，16199-204，該文引入本文中作為參考文獻(xiàn))，這些疾病包括但不限于特應(yīng)性疾病，諸如特應(yīng)性皮炎或濕疹、嗜酸性紅細(xì)胞增多癥、哮喘、變態(tài)反應(yīng)、過(guò)敏性鼻炎。
在又一方案中，本發(fā)明的化合物適用于治療損傷或老化的皮膚，諸如疤痕及皺紋。
在又一方案中，本發(fā)明的化合物適用于治療自體免疫性疾病，諸如克羅恩氏病及炎癥性腸病。
式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物可單獨(dú)給藥或作為聯(lián)合療法的一部分進(jìn)行給藥。因此，本發(fā)明的范圍包括包含本發(fā)明的化合物與一種或多種其它治療劑的組合物的實(shí)例及其共同給藥的實(shí)例。
在一方案中，本發(fā)明的組合形式包括用式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物以及一種或多種具有抗HCV活性的其它藥劑進(jìn)行治療，該抗HCV活性的藥劑是能抑制如下靶標(biāo)的藥劑，諸如但不限于HCV NS3蛋白、HCV NS5A蛋白、HCV NS4B蛋白、HCV聚合酶、HCV金屬蛋白酶、HCV絲氨酸蛋白酶、HCV解螺旋酶、p7蛋白。此類藥劑的實(shí)例包括但不限于干擾素、聚乙二醇化干擾素(例如，聚乙二醇化α-2a干擾素及聚乙二醇化α-2b干擾素)、長(zhǎng)效干擾素(例如，白蛋白干擾素α)、拉米夫定(lamivudine)、利巴韋林(ribavarin)、恩曲他濱(emtricitabine)、維拉米定(viramidine)、西戈韋(celgosivir)、伐洛他濱(valopicitabine)、HCV-086、HCV-796、RMZ702、BILN2061、IDN6566、NM283、SCH 6及VX-950。
在另一方案中，本發(fā)明的組合形式包括用式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物及一種或多種其他TLR激動(dòng)劑例如TLR3、TLR7、TLR8或TLR9受體的激動(dòng)劑進(jìn)行治療。
在另一方案中，本發(fā)明的組合形式包括用式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物及一種或多種選自如下抑制劑的其它抗病毒劑治療HCV-HIV共感染HIV蛋白酶抑制劑(PI)、非核苷逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NNRTI)、核苷/核苷酸逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑(NRTI)、CCR5拮抗劑、抑制gp120與CD4的相互作用的藥劑、抑制HIV進(jìn)入靶細(xì)胞的藥劑(如融合抑制劑)、整合酶抑制劑、異戊烯化抑制劑、RNase H抑制劑及成熟抑制劑。
NNRTI的實(shí)例包括但不限于依法韋侖(efavirenz)、HBY-097、奈韋拉平(nevirapine)、TMC-120(達(dá)匹韋林(dapivirine))、TMC-125、依曲韋林(etravirine)、地拉韋啶(delavirdine)、DPC-083、DPC-961、卡普韋林(capravirine)、利匹韋林(rilpivirine)、5-{[3，5二乙基-1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑-4-基]氧基}間苯二甲腈或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或衍生物；GW-678248、GW-695634、MIV-150、胡桐素(calanolide)及三環(huán)嘧啶酮衍生物，如WO 03/062238中所揭示。
CCR5拮抗劑的實(shí)例包括但不限于TAK-779、SC-351125、安立韋羅(ancriviroc)(以往稱為SCH-C)、維立韋羅(vicriviroc)(以往稱為SCH-D)、馬拉韋羅(maraviroc)、PRO-140、阿拉韋羅(aplaviroc)(還稱GW-873140、Ono-4128、AK-602)、AMD-887 CMPD-167、1-內(nèi)-{8-[(3S)-3-(乙酰氨基)-3-(3-氟苯基)丙基]-8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基}-2-甲基-4，5，6，7-四氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-5-甲酸甲酯或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或衍生物，3-內(nèi)-{8-[(3S)-3-(乙酰氨基)-3-(3-氟苯基)丙基]-8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基}-2-甲基-4，5，6，7-四氫-3H-咪唑并[4，5-c]吡啶-5-甲酸甲酯或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或衍生物，1-內(nèi)-{8-[(3S)-3-(乙酰氨基)-3-(3-氟苯基)丙基]-8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛-3-基}-2-甲基-4，5，6，7-四氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-5-甲酸乙酯或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或衍生物，及N-{(1S)-3-[3-內(nèi)-(5-異丁?；?2-甲基-4，5，6，7-四氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-1-基)-8-氮雜雙環(huán)[3.2.1]辛-8-基]-1-(3-氟苯基)丙基}乙酰胺或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或衍生物。
進(jìn)入和融合抑制劑的實(shí)例包括但不限于BMS-806、BMS-488043、5-{(1S)-2-[(2R)-4-苯甲酰基-2-甲基-哌嗪-1-基]-1-甲基-2-氧代-乙氧基}-4-甲氧基-吡啶-2-甲酸甲基酰胺及4-{(1S)-2-[(2R)-4-苯甲?；?2-甲基-哌嗪-1-基]-1-甲基-2-氧代-乙氧基}-3-甲氧基-N-甲基-苯甲酰胺、恩夫韋肽(enfuvirtide)(T-20)、西夫韋肽SP-01A(sifuvirtide SP-01A)、T1249、PRO 542、AMD-3100、可溶性CD4、在JP 2003171381中公開(kāi)的化合物及在JP 2003119137中公開(kāi)的化合物。
HIV整合酶抑制劑的實(shí)例包括但不限于L000870810、GW-810781、WO 03/062204中公開(kāi)的1，5-萘啶-3-甲酰胺衍生物、WO 03/047564中公開(kāi)的化合物、WO 03/049690中公開(kāi)的化合物及WO 03/035076中公開(kāi)的5-羥基嘧啶-4-甲酰胺衍生物、MK-0518(WO 03016315中公開(kāi)的5-(1，1-二氧代-1，2-硫氮雜環(huán)己烷基(thiazinan)-2-基)-N-(4-氟芐基)-8-羥基-1，6-萘啶-7-甲酰胺)、GS-9137(JTK-303)。
異戊烯化抑制劑的實(shí)例包括但不限于HMG輔酶A還原酶抑制劑，諸如他汀類(例如阿伐他汀(atorvastatin))。
成熟抑制劑的實(shí)例包括3-O-(3’3’-二甲基琥珀酰基)樺木酸(或稱為PA-457)及αHGA。
在又一方案中，本發(fā)明的組合形式包括用式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或多晶型物及一種或多種其它藥劑進(jìn)行治療，所述其它藥劑例如、但不限于抗真菌劑，例如氟康唑(fluconazole)、福司氟康唑(fosfluconazole)、伊曲康唑(itraconazole)或伏立康唑(voriconazole)；抗菌劑，例如，阿奇霉素(azithromycin)或克拉霉素(clarithromycin)；用于治療AIDS相關(guān)性卡波西氏肉瘤的干擾素、柔紅霉素(daunorubicin)、阿霉素(doxorubicin)及紫杉醇(paclitaxel)；以及用于治療巨細(xì)胞病毒(CMV)視網(wǎng)膜炎的西多福韋(cidofovir)、福米韋生(fomivirsen)、膦甲酸(foscarnet)、更昔洛韋(ganciclovir)及萬(wàn)賽維(valcyte)。
在又一方案中，本發(fā)明的組合形式包括用式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物及一種或多種可增強(qiáng)機(jī)體免疫系統(tǒng)的其它治療劑進(jìn)行治療，所述其它治療劑包括低劑量的環(huán)磷酰胺、胸腺刺激素、維生素及營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑(例如，抗氧化劑，包括維生素A、C、E、β-胡蘿卜素、鋅、硒、谷胱甘肽、輔酶Q-10及紫錐花)、及疫苗例如免疫刺激復(fù)合物(ISCOM)，該復(fù)合物包含將表達(dá)多聚體5的抗原與佐劑組合的疫苗制劑。
根據(jù)本發(fā)明的應(yīng)用的其它組合包括式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物與下述藥劑的組合，所述藥劑為CCR1拮抗劑，諸如BX-471；β腎上腺素受體激動(dòng)劑，諸如沙美特羅(salmeterol)；皮質(zhì)類固醇激動(dòng)劑，諸如丙酸氟替卡松(fluticasone propionate)；LTD4拮抗劑，諸如孟魯司特(montelukast)；毒蕈堿拮抗劑，諸如噻托溴銨(tiotropium bromide)；PDE4抑制劑，諸如西洛司特(cilomilast)或羅氟司特(roflumilast)；COX-2抑制劑，諸如塞來(lái)考昔(celecoxib)、伐地考昔(valdecoxib)或羅非考昔(rofecoxib)；α-2-δ配體，諸如加巴噴丁(gabapentin)或普加巴林(pregabalin)；TNF-α受體調(diào)節(jié)劑，諸如TNF-α抑制劑(例如，阿達(dá)木單抗(adalimumab))；或免疫抑制劑，諸如環(huán)孢菌素(cyclosporin)或大環(huán)內(nèi)酯(macrolide)，諸如他克莫司(tacrolimus)。
包括于本發(fā)明范圍內(nèi)的還有式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物與一種或多種其它治療劑的組合，該其它治療劑可降低本發(fā)明化合物的代謝速率，由此引起與患者的接觸增加。以這種方式增加暴露被稱為增效(boosting)。這種作用的優(yōu)點(diǎn)在于具有增強(qiáng)本發(fā)明化合物的功效或減少達(dá)到與未增效劑量相同的功效所需的劑量。本發(fā)明的化合物的代謝包括通過(guò)P450(CYP450)酶、尤其是CYP 3A4所進(jìn)行的氧化過(guò)程以及通過(guò)UDP葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶和硫酸化酶所進(jìn)行的結(jié)合。因此，在可以用于增加患者與本發(fā)明化合物接觸的藥劑是能夠充當(dāng)細(xì)胞色素P450(CYP450)酶的至少一種同種型(isoform)的抑制劑的那些藥劑。可以被有利抑制的CYP450的同種型包括但不限于CYP1A2、CYP2D6、CYP2C9、CYP2C19及CYP3A4?？捎糜谝种艭YP 3A4的適合藥劑包括但不限于利托那韋(ritonavir)、沙奎那維(saquinavir)或酮康唑(ketoconazole)。
在上述組合中，就劑型而言，式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物及其它治療劑可單獨(dú)給藥或彼此聯(lián)合給藥；就其給藥時(shí)間而言，可同時(shí)或依次給藥。因此，一組分藥劑的給藥可以在另一組分藥劑給藥之前、同時(shí)或之后給藥。
應(yīng)理解的是，本文所提及的治療包括治療性、緩解性和預(yù)防性的治療。
應(yīng)了解本發(fā)明包括以下各方面。
(i)式(I)的化合物或其互變異構(gòu)體或者該化合物或其互變異構(gòu)體的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物； (ii)包含如上述任一項(xiàng)發(fā)明所述的式(I)化合物或其互變異構(gòu)體或該化合物或者其互變異構(gòu)體的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物與一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物； (iii)用作藥物的式(I)化合物或其互變異構(gòu)體或者該化合物或其互變異構(gòu)體的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物； (iv)用于治療與TLR7受體的調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病或病癥的式(I)化合物或其互變異構(gòu)體或者該化合物或其互變異構(gòu)體的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物； (v)式(I)化合物或其互變異構(gòu)體或者該化合物或其互變異構(gòu)體的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物在制備用于治療與TLR7受體的調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病或病癥的藥物中的用途。
(vi)包括一種或多種其它治療劑的藥物組合物； (vii)包含式(I)化合物或其互變異構(gòu)體或者該化合物或其互變異構(gòu)體的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物與其它治療活性劑的醫(yī)藥產(chǎn)品(如試劑盒形式)，其作為在治療與TLR7受體的調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病中，同時(shí)、單獨(dú)或依次使用的組合制品。
(viii)式(I)化合物或其互變異構(gòu)體或者該化合物或其互變異構(gòu)體的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物在制備與其它治療活性劑組合使用從而在治療與TLR7受體的調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病中同時(shí)、單獨(dú)或依次使用的藥物中的用途。
(ix)治療哺乳動(dòng)物中與TLR7受體的調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病或病癥的方法，其包括將治療有效量的式(I)化合物或其互變異構(gòu)體或者該化合物或其互變異構(gòu)體的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物給予該哺乳動(dòng)物。
(x)制備式(I)化合物或其互變異構(gòu)體或者該化合物或其互變異構(gòu)體的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物的方法。
(xi)本文中公開(kāi)的一些新型中間體。

具體實(shí)施例方式 本發(fā)明通過(guò)以下非限制性實(shí)施例進(jìn)行說(shuō)明，其中使用以下縮略語(yǔ)及定義

過(guò)濾劑(木質(zhì)纖維素)，購(gòu)自J.Rettenmaier & Sohne，Germany APCI+大氣壓力化學(xué)電離(正向掃描) Bn 芐基 br 寬峰 d雙峰 dd雙二重峰 DMSO 二甲亞砜 ELSD 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器 ES+ 電噴霧正向掃描質(zhì)譜 ESI 電噴霧電離質(zhì)譜 (正向掃描或負(fù)向掃描) eq當(dāng)量 HRMS 高分辨率質(zhì)譜 1H NMR質(zhì)子核磁共振 LC-MS 液質(zhì)聯(lián)用儀 LRMS 低分辨率質(zhì)譜 m 多重峰 m/z 質(zhì)譜峰 Reacti-VialTM 反應(yīng)瓶，購(gòu)自美國(guó) 飛世爾科學(xué)世界公司 q 四重峰 s 單峰 t 三重峰 δ 化學(xué)位移 * 表示連接點(diǎn) 實(shí)施例1 4-氨基-1-芐基-6-環(huán)丙基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將4-烯丙氨基-1-芐基-6-環(huán)丙基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(70mg，0.2mmol)溶于乙醇(2ml)中，添加10％ Pd-C(70mg，w/w)，再逐滴添加BF3·OEt2(27 1，0.2mmol)。將混合物在N2氣氛下、在回流下加熱過(guò)夜。將混合物冷卻至室溫并用Arbocel(木質(zhì)纖維素)過(guò)濾，用新制EtOH沖洗并將濾液真空濃縮以產(chǎn)生粗產(chǎn)物(150mg)。用98:2→95:5 DCM:MeOH洗脫、用二氧化硅柱色譜產(chǎn)生灰白色固體的標(biāo)題化合物(17mg)。
1H NMR(CD3OD)δ 7.35-7.27(m，5H)，6.26(s，1H)，5.00(s，2H)，1.89-1.82(m，1H)，0.85-0.80(m，2H)，0.77-0.73(m，2H)；C16H16N4O的HRMS計(jì)算值281.1397，實(shí)測(cè)值281.1395。
實(shí)施例2 4-氨基-1-芐基-6-甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將1-芐基-4-二芐基氨基-6-甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(34mg，0.08mmol)混懸于乙醇(5ml)中并在室溫下、在60psi、在10％ Pd(OH)2(7mg)上氫化6小時(shí)。將反應(yīng)混合物用Arbocel短塞過(guò)濾，然后將濾液真空蒸發(fā)為不透明膠。將此膠溶于甲醇中，且預(yù)吸附于硅膠上，然后用EtOAc中的5％甲醇洗脫、通過(guò)柱色譜純化。將適合的洗脫組分合并并在真空中蒸發(fā)以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物7mg。
1H NMR(CD3OD)δ 2.31(s，3H)，5.01(s，2H)，6.40(s，1H)，7.31(m，5H)；LRMS(ES+)m/z 255(MH+)。
實(shí)施例3 1-芐基-4-氨基-6，7-二甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將1-芐基-4-二烯丙氨基-6，7-二甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(358mg，1mmol)溶解于水(10ml)及乙腈(25ml)中，添加一份RhCl(PPh3)3(286mg，0.3mmol)，然后將混合物在回流下加熱16h。將混合物冷卻至室溫，然后真空濃縮，使用95:5→85:15 DCM:MeOH的梯度、通過(guò)硅膠柱色譜將殘余物純化，以產(chǎn)生淡褐色固體的標(biāo)題化合物(77mg，29％)。
1H NMR(DMSO)δ 1.98(s，3H)，2.14(s，3H)，5.13(s，2H)，5.34(s，2H)，7.03-7.31(m，5H)，10.38(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 269[MH]+ 實(shí)施例4 4-氨基-1-芐基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸甲酯
將1-芐基-4-芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸甲酯(0.02g)溶解于硫酸(2ml)中，快速攪拌15分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，添加水，產(chǎn)生沉淀物，將其過(guò)濾并在真空中干燥以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(10mg)。
1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ 3.75(s，3H)，4.95(s，2H)，7.20-7.50(m，6H)，10.20(s，1H)。LRMS(ES+)m/z 299[MH]+ 實(shí)施例5 4-氨基-1-芐基-6-吡嗪-2-基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將N-2，N-4-二芐基-6-吡嗪-2-基-吡啶-2，3，4-三胺(100mg/0.261mmol)溶于DMF(5ml)中，添加CDI(95.3mg/0.523mmol)，在60℃加熱5小時(shí)，然后真空濃縮。然后將反應(yīng)混合物溶于濃硫酸(3ml)中，并在室溫下攪拌30分鐘。然后向反應(yīng)物添加冰，通過(guò)傾注在水(5ml)中的K2CO3(8g)來(lái)驟冷。然后用EtOAc萃取，用硫酸鈉干燥并真空濃縮。殘余物通過(guò)柱色譜法純化。詳細(xì)地說(shuō)，然后使用EtOAc、95:5EtOAc:MeOH分離該兩種區(qū)位異構(gòu)體以產(chǎn)生淡橙色固體的標(biāo)題化合物(15mg)。
1H NMR(CD30D，400MHz)δ 5.10(s，2H)，7.20-7.40(m，5H)，7.55(s，1H)，8.45(d，1H)，8.55(d，1H)，9.4(s，1H) 實(shí)施例6 4-氨基-1-芐基-6-嗎啉-4-基甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮
將N-2，N-4-二芐基-6-嗎啉-4-基-甲基-吡啶-2，3，4-三胺(240mg，0.59mmol)溶于20ml二氯甲烷中，然后添加1，1′-羰基二咪唑(91mg，1.77mmol)，并將反應(yīng)物在室溫下攪拌48小時(shí)。添加20ml水并將有機(jī)層分離，用硫酸鎂干燥并在真空中移除溶劑。使用二氯甲烷中的4％甲醇、通過(guò)硅膠柱色譜法純化粗殘余物，以產(chǎn)生140mg的2種異構(gòu)體的混合物。將60mg的2種異構(gòu)體的該混合物溶于2ml濃硫酸中并在室溫下攪拌30分鐘。謹(jǐn)慎添加水(5ml)，然后添加碳酸鉀(5.2g直至pH～7)。將混合物用乙酸乙酯萃取，將有機(jī)層分離，用硫酸鎂干燥并在真空中移除溶劑。使用二氯甲烷中的1％氨及10％甲醇、通過(guò)硅膠柱色譜法純化粗殘余物，以產(chǎn)生10mg標(biāo)題化合物及6mg的另一異構(gòu)體。
1H NMR(CD3OD)δ 7.38-7.2(m，5H)，6.58(s，1H)，5.05(d，2H)，3.65(m，4H)，3.4(s，2H)，2.4(m，4H)；LRMS(ES+)m/z 340[MH]+ 實(shí)施例7 4-氨基-1-芐基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5，c]吡啶-7-甲酸環(huán)丙基甲基-酰胺
將1-芐基-4-二芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5，c]吡啶-7-甲酸環(huán)丙基甲基-酰胺(10mg，0.02mmol)溶解于1ml濃硫酸中，并將混合物在室溫下攪拌30分鐘。一旦完成，則將混合物稀釋于5ml水中，逐次添加碳酸鉀直至pH～12。然后用乙酸乙酯(2×50ml)萃取混合物。將有機(jī)層合并，用MgSO4干燥并在真空中移除溶劑。使用乙酸乙酯中的20％甲醇、通過(guò)硅膠柱色譜法純化殘余物，以產(chǎn)生1mg標(biāo)題化合物；LRMS(ES+)m/z 338[MH]+ 實(shí)施例8 4-氨基-1-芐基-7-溴-6-甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮
將4-氨基-1-芐基-6-甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(20mg，0.08mmol)混懸于5ml乙酸中，然后添加乙酸鈉(5mg，0.08mmol)，然后逐滴添加溴(4L，0.08mmol)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘。將混合物稀釋于水(50ml)中并用乙酸乙酯(50ml)萃取，將有機(jī)層分離，用硫酸鎂干燥并在真空中移除溶劑。使用乙酸乙酯中的10％甲醇、通過(guò)硅膠柱色譜法純化殘余物，以產(chǎn)生15mg褐色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(d6 DMSO)δ7.40-7.10(m，5H)，6.85(s，2H)，5.30(s，2H)，2.35(s，3H)；LRMS(ES+)m/z 333，335[MH]+ 實(shí)施例9 4-氨基-1-芐基-6-甲基-5-氧基-1，3-二氫-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮
將4-氨基-1-芐基-6-甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(20mg，0.08mmol)溶于10ml二氯甲烷中，然后添加3-氯過(guò)氧苯甲酸(15mg，0.09mmol)，并將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。將混合物用水洗滌，用硫酸鎂干燥并在真空中移除溶劑，以產(chǎn)生5mg標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD30D)δ7.40-7.20(m，5H)，6.59(s，1H)，5.05(s，2H)，2.45(s，3H)；LRMS(ES+)m/z 271[MH]+ 實(shí)施例10 4-氨基-1-芐基-6-(2-甲氧基-乙基)-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將1-芐基-4-芐基氨基-6-(2-甲氧基-乙基)-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(32mg，0.082mmol)在濃硫酸(2ml)中攪拌30分鐘。添加水(5ml)并將混合物逐滴添加至飽和NaHCO3的被攪拌的溶液中以獲得堿性pH值。將水溶液用2×EtOAc萃取并將所合并的有機(jī)物干燥且濃縮以產(chǎn)生黃色固體。用DCM:MeOH 97:3(梯度增加至DCM:MeOH:NH395:5:0.5)洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜法分離異構(gòu)體的混合物，以產(chǎn)生淺黃色固體的標(biāo)題化合物(3.1mg，13％)。
1H NMR(MeOD)δ 2.82-2.85(t，2H)，3.66-3.69(t，2H)，5.08(s，2H)，6.36(s，1H)，7.19-7.34(m，5H)；LRMS(ES)m/z 299[MH]+ 實(shí)施例11 4-氨基-1-芐基-6-[2-(2-甲氧基-乙氨基)-乙基]-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將[2-(1-芐基-4-芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-基)-乙基]-(2-甲氧基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯(64mg，0.12mmol)在濃硫酸(2ml)中攪拌30分鐘。添加水(5ml)并將混合物逐滴添加至飽和NaHCO3的被攪拌的溶液中以獲得堿性pH值。將水溶液用2×EtOAc萃取并將所合并的有機(jī)物干燥且濃縮以產(chǎn)生黃色固體。用DCM:MeOH 98:2(梯度增加至DCM:MeOH:NH3 90:10:1)洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜法分離異構(gòu)體的混合物，以產(chǎn)生黃色固體的標(biāo)題化合物(4.2mg，11％)。
1H NMR(MeOD)δ 2.84-2.86(t，2H)，3.02-3.05(t，2H)，3.27(s，3H)，3.45-3.48(t，2H)，5.09(s，2H)，6.34(s，1H)，7.20-7.34(m，5H)；LRMS(ES)m/z 342[MH]+ 實(shí)施例12 4-氨基-1-芐基-6-噁唑-2-基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將CDI(821mg，5.06mmol)添加至N*2*，N*4*-二芐基-6-噁唑-2-基-吡啶-2，3，4-三胺(940mg，2.53mmol)于THF(15ml)中的溶液中。將溶液在氮?dú)夥障隆⒃?0℃加熱18小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻，然后真空濃縮。然后將粗混合物溶于濃H2SO4(15ml)中并在室溫下靜置30分鐘。將暗褐色溶液逐滴添加在碎冰上。通過(guò)添加K2CO3飽和水溶液將pH值調(diào)節(jié)至～9，然后過(guò)濾混合物。將固體用EtOAc(200ml)洗滌，然后將有機(jī)物及水性濾液轉(zhuǎn)入分液漏斗中。將各層分離并將水溶液用EtOAc(200ml)再萃取。將有機(jī)物合并、干燥(MgSO4)且蒸發(fā)為橙色膠粘固體。將粗物質(zhì)用EtOAc及甲苯研磨。將所得固體過(guò)濾并用EtOAc洗滌以產(chǎn)生灰白色固體。用0.05％甲酸(水溶液)及MeCN中的0.05％甲酸以15ml/min流速洗脫、通過(guò)在Phenomenex Gemini 5μm柱(150×21.2mmid)上的HPLC純化此物質(zhì)。使梯度在5％有機(jī)物時(shí)等度0.6分鐘，然后歷經(jīng)12分鐘線性地由5％增加至80％有機(jī)物。
將來(lái)自研磨的濾液蒸發(fā)，然后在Isco Companion二氧化硅柱(12g，Redisep)上進(jìn)行柱色譜。然后用EtOAc:MeOH洗脫所得物質(zhì)，經(jīng)8個(gè)柱容積將梯度由95:5線性地增加至98:2。將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)為橙色膠粘固體。如上通過(guò)HPLC純化該物質(zhì)。將所有來(lái)自HPLC柱的所需洗脫組分合并且蒸發(fā)以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(26mg，3％)。
1H NMR(CD30D)δ 5.07(s，2H)7.17-7.36(m，7H)7.92(s，1H)LCMS Rt＝2.15m/z 308[MH]+ 制備實(shí)施例12的替代方式描述如下。
4-氨基-1-芐基-6-噁唑-2-基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
在-78℃、在N2氣氛下將己烷(1.6M，183μl，0.29mmol)中的丁基鋰溶液逐滴添加至噁唑(16μl，0.24mmol)于THF(1ml)中的溶液。將溶液在-78℃攪拌10分鐘，然后逐滴添加氯化鋅(100mg，0.73mmol)于THF(1ml)中的溶液。將溶液在-78℃攪拌15分鐘，然后加溫至室溫。然后用注射器將溶液添加至含有4-氨基-1-芐基-6-溴-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(13mg，0.04mmol)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(12mg，0.02mmol)的預(yù)密封的被氮?dú)獯迪吹奈⒉ㄆ?Biotage，0.5-2.0ml)。將該瓶在微波照射(Biotage，Initiator 8(微波合成儀))下、在110℃加熱15分鐘。將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯(20ml)與飽和NH4Cl(aq)(10ml)之間分溶。將混合物用硅藻土過(guò)濾，用乙酸乙酯(20ml)洗滌。將各層分離并將有機(jī)物用水(10ml)及鹽水(10ml)洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮以產(chǎn)生粗產(chǎn)物。將該樣品溶于乙腈:水:DMSO(2:1:1)的混合物中，通過(guò)制備性HPLC(FractionLynx)純化以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(2mg)。
1H NMR(d6-DMSO)δ 10.60(brs，1H)，8.10(s，1H)，7.36-7.27(m，6H)，7.19(s，1H)，6.01(br s，2H)，5.04(s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 308[MH]+。
實(shí)施例13 4-氨基-1-芐基-6-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將CDI(184mg，1.13mmol)添加至在反應(yīng)瓶中的N*2*，N*4*-二芐基-6-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-2，3，4-三胺(218mg，0.567mmol)于DMF(3ml)中的溶液中。將瓶用氮沖洗，然后密封并在鋁塊中、在60℃(鋁塊溫度)加熱。將暗褐色溶液在此溫度下攪拌16小時(shí)。將溶液在高真空下濃縮，然后溶于濃硫酸(5ml)中。將褐色溶液在室溫下攪拌30分鐘，然后傾注在碎冰(～20ml)上。逐滴添加碳酸鉀的飽和水溶液直至pH～8。自中和期間沉淀析出的固體中傾析出水溶液，然后用EtOAc(2×50ml)萃取。將被合并的有機(jī)物干燥(MgSO4)，蒸發(fā)為黃色固體(106mg)。
在Phenomenex Gemini 5μm柱(150×21.2mmid)上通過(guò)HPLC層析樣品(58mg)。用0.05％ DEA(aq)及MeCN中的0.05％ DEA、以18ml/min流速洗脫。使梯度在5％有機(jī)物時(shí)等度0.6分鐘，然后歷經(jīng)15分鐘由5％線性地增加至100％有機(jī)物。
將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(10mg，6％)。
1H NMR(CD30D)δ 3.94(s，3H)5.08(s，2H)6.91-6.95(m，1H)7.00(s，1H)7.07-7.10(m，1H)7.16-7.38(m，5H)；LRMS(ES+)m/z 321[MH]+ 實(shí)施例14 4-氨基-1-芐基-6-(3-甲基-[1，2，4]噁二唑-5-基)-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將1-芐基-4-芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸(1-羥亞氨基-乙基)-酰胺混懸于甲苯中且密封于微波瓶中(Biotage，0.5-2.0ml)。將瓶密封并在微波照射(Biotage Initiator 8)下、在150℃加熱15分鐘。將樣品在微波中、在150℃再加熱30分鐘，再在150℃加熱30分鐘。將混合物蒸發(fā)，然后在EtOAc(10ml)與水(5ml)之間分溶。將水溶液用EtOAc(2×10ml)萃取兩次以上，然后將所合并的有機(jī)物干燥(MgSO4)且蒸發(fā)。將殘余物混懸于乙腈(2ml)中并將此混合物密封于微波瓶中，然后在微波照射下、在170℃加熱30分鐘，然后在190℃再加熱30分鐘。將反應(yīng)混合物真空濃縮，然后溶于濃H2SO4(2ml)中。將溶液攪拌30分鐘，然后傾注在碎冰上。逐滴添加飽和K2CO3水溶液直至pH值為～8。將水溶液自固體傾析入分液漏斗中，然后用EtOAc(3×15ml)萃取。將所合并的有機(jī)物干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)。將異構(gòu)體混合物在Luna 10微米C18(2)柱(150×21.2mmid)上、通過(guò)HPLC純化。用0.1％甲酸(aq)及MeCN中的0.1％甲酸、以25ml/min流速洗脫。使梯度在5％有機(jī)物時(shí)等度0.6分鐘，然后歷經(jīng)8.50分鐘由5％線性地增加至90％有機(jī)物。將所需洗脫組分蒸發(fā)以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(0.5mg，1％)。
LCMS Rt＝2.46m/z 323[MH]+。
實(shí)施例15 4-氨基-1-芐基-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將1-芐基-4-芐基氨基-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(2.63g，6.60mmol)溶于濃硫酸(50ml)中并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌30分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，添加冰。將K2CO3(150g)溶于水(700ml)中且逐滴添加反應(yīng)混合物。將水溶液用EtOAc(6×500ml)萃取。將所合并的有機(jī)物用鹽水(200ml)洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(1.20g)。
1H NMR(CDCl3)δ 10.77(brs，1H)，7.36-7.25(m，5H)，7.01(s，1H)，6.20(br s，2H)，5.04(s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 309[MH]+，307[MH]-。實(shí)測(cè)值C.54.55 H.3.60 N.18.17％。C14H11F3N4O需要％C.54.36H.3.61 N.17.86。
實(shí)施例15的替代合成描述如下； 將乙基-[2，3-二氨基-6-(三氟甲基)-吡啶-4-基]-芐基氨基甲酸酯(35gm，99mmol)在室溫下溶于冰醋酸(300ml)中。過(guò)濾移除任何不溶性物質(zhì)然后在攪拌下將透明黃色濾液加熱至80℃。10分鐘內(nèi)開(kāi)始形成白色沉淀物。持續(xù)加熱共40分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度并將沉淀物通過(guò)過(guò)濾收集，用乙酸洗滌并在真空中、在50℃干燥3小時(shí)以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(26.4gm，86％收率)。
實(shí)施例16 4-氨基-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-噁唑-2-基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將CDI(272mg)添加至N2，N2-二芐基-N4-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-噁唑-2-基-吡啶-2，3，4-三胺(400mg)于THF(10ml)中的溶液中。將溶液在N2氣氛下、在60℃攪拌5小時(shí)。再添加3當(dāng)量的CDI(408mg)并將反應(yīng)物在回流下加熱16小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻然后真空濃縮。然后將粗混合物溶于濃H2SO4(5ml)中并在室溫下靜置30分鐘。將暗褐色溶液逐滴添加在碎冰上。通過(guò)添加K2CO3飽和溶液將pH值調(diào)節(jié)至～8，然后過(guò)濾混合物。將所獲得的固體用EtOAc(50ml)洗滌，然后將有機(jī)物及水性濾液轉(zhuǎn)入分液漏斗中。將各層分離并將水溶液用EtOAc(50ml)再萃取。將有機(jī)物合并，干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)以產(chǎn)生膠粘固體。將此物用Et2O研磨，并將固體通過(guò)過(guò)濾收集并用Et2O洗滌，產(chǎn)生灰白色固體的標(biāo)題化合物(30mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.45(s，3H)，5.09(s，2H)，7.21-7.28(m，2H)，7.30(s，1H)，7.70(dd，1H)，7.95(s，1H)，8.42(d，1H)。LCMS Rt＝2.29m/z 323[MH]+ 實(shí)施例17 4-氨基-1-芐基-6-(2-甲氧基-乙氧基)-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將[2-氨基-6-(2-甲氧基-乙氧基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯(118mg)溶于乙醇(5ml)中，添加10％ Pd/碳(15mg)。將反應(yīng)物在氫氣氛下(50psi)、在室溫下攪拌1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用硅藻土墊過(guò)濾且蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物溶于冰醋酸(2ml)中且轉(zhuǎn)入微波瓶(Biotage，0.5-2.0ml)中。將瓶密封并在微波照射下、在100℃加熱5分鐘。將所得褐色混合物蒸發(fā)，將固體裝載于二氧化硅上并在IscoCompanion二氧化硅柱(4g，Redisep)上進(jìn)行柱色譜，用EtOAc庚烷洗脫(使梯度經(jīng)8個(gè)柱容積(CV)由6040線性地增加至100％ EtOAc)、然后在100％ EtOAc時(shí)對(duì)8個(gè)CV等度。將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(50mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 3.35(s，3H)，3.62(t，2H)，4.20(t，2H)，4.95(s，2H)，5.80(s，1H)，7.20-7.38(m，5H)。LCMS Rt＝2.13m/z 315[MH]+ 實(shí)施例18 4-氨基-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將(2-氨基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(27mg，0.07mmol)置于冰醋酸(5ml)中攪拌，并將溶液在環(huán)境溫度下、在40psi H2氣氛下、在10％ Pd/C(5.4mg，20％wt)存在下攪拌4小時(shí)。將混懸液用Arbocel墊過(guò)濾，用2×3ml AcOH洗滌并將濾液真空濃縮。將乙腈(5ml)添加至殘余物中，并將該物質(zhì)研磨，將所得固體通過(guò)過(guò)濾移除并在真空中干燥以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(d6-DMSO)δ 8.45(s，1H)，7.57-7.55(d，1H)，7.20-7.18(d，1H)，7.10(s，1H)，6.20(bs，2H)，5.01(s，2H)，2.40(s，3H)；LRMS(APCI)m/z 324[MH]+ 制備實(shí)施例18的替代方式描述如下。
4-氨基-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并(4，5-c)吡啶-2-酮
將4-芐基氨基-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并(4，5-c)吡啶-2-酮(30mg，0.07mmol)溶于1ml濃硫酸中并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。將混合物傾注入水(100ml)中，逐次添加碳酸鉀直至pH值為堿性。然后用乙酸乙酯(100ml)萃取。將有機(jī)層分離，用硫酸鎂干燥并將溶劑在真空中移除以產(chǎn)生16mg白色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(d6-DMSO)δ 8.45(s，1H)，7.57-7.55(d，1H)，7.20-7.18(d，1H)，7.10(s，1H)，6.20(bs，2H)，5.01(s，2H)，2.40(s，3H)；LRMS(APCI)m/z 324[MH]+ 實(shí)施例19 4-氨基-6-(4-甲基-噁唑-2-基)-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將阮內(nèi)鎳(5mg)與[2-氨基-6-(4-甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(69mg)于乙酸(3ml)中的混合物在氫氣氛(80psi)下攪拌1小時(shí)。將Arobcel添加在磺酸陽(yáng)離子交換濾筒(Bakerbond，1g)頂端上，并將反應(yīng)混合物裝載在該頂端上進(jìn)行過(guò)濾。將催化劑及Arbocel用刮刀移除，然后將濾筒用甲醇(5ml)洗滌以移除雜質(zhì)。通過(guò)用甲醇中的氨(2M，2×5ml)洗脫使產(chǎn)物自濾筒釋出。將粗溶液蒸發(fā)，然后添加IPA(3ml)，使固體沉淀，通過(guò)過(guò)濾收集并用IPA洗滌。將所得灰白色固體在高真空下干燥以產(chǎn)生標(biāo)題化合物(16mg)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 2.13(s，3H)2.42(s，3H)5.05(s，2H)5.98(s，2 H)7.21(d，J＝7.90Hz，1 H)7.25(s，1 H)7.56(dd，J＝7.90，2.44Hz，1 H)7.80(s，1 H)8.47(d，J＝2.44Hz，1 H)10.68(br.s.，1H)；LRMS(ESI)m/z 337[MH]+，335[MH]- 實(shí)施例20 4-氨基-6-(4-乙基-噁唑-2-基)-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將[2-氨基-6-(4-乙基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(74mg)溶于乙酸(2ml)中并將鋅粉(113mg，Aldrich，99％)添加至反應(yīng)物中。將混合物在室溫下、在氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)。將反應(yīng)混合物在陽(yáng)離子交換濾筒(Bakerbond SCX，磺酸粘合相，1g)上直接過(guò)濾。將SCX濾筒用甲醇(2×4ml)洗滌以移除雜質(zhì)，然后用甲醇中的氨(2M，4ml)釋出產(chǎn)物。將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)為灰白色固體，用異丙醇研磨，過(guò)濾，然后用異丙醇洗滌，產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(32mg)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 1.16(t，J＝7.42Hz，3 H)2.40(s，3 H)2.44-2.56(m，2 H)5.04(s，2 H)5.98(s，2 H)7.19(d，J＝8.02Hz，1 H)7.23(s，1 H)7.54(dd，J＝8.02，2.34Hz，1 H)7.79(s，1 H)8.45(d，J＝2.34Hz，1 H)10.65(s，1 H)；LCMS Rt＝1.73m/z 351[MH]+ 實(shí)施例21 4-氨基-1-芐基-6-(1H-咪唑-2-基)-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
使用乙酸(3ml)中的{2-氨基-3-硝基-6-[1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑-2-基]-吡啶-4-基}-芐基-氨基甲酸乙酯(174mg)與阮內(nèi)鎳(5mg)，按照實(shí)施例20的方法制備標(biāo)題化合物。由此可初步產(chǎn)生被SEM保護(hù)的咪唑化合物。然后逐滴添加二噁烷(4M，1ml)中的氯化氫并將溶液在室溫下攪拌24小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)入微波瓶(Biotage，2-5ml)中，并在微波照射(Biotage Initiator 8)下、在110℃加熱10分鐘。將反應(yīng)混合物蒸發(fā)，然后再溶于甲醇中，并將溶液裝載在陽(yáng)離子交換濾筒(Bakerbond，磺酸粘合相，1g)上。將濾筒用甲醇(2×5ml)洗滌以移除雜質(zhì)然后通過(guò)用甲醇中的氨(2M，5ml)洗脫來(lái)釋出產(chǎn)物。將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)為褐色固體。將此物用異丙醇研磨，并將固體通過(guò)過(guò)濾收集，然后用更多異丙醇洗滌，產(chǎn)生淺褐色固體的標(biāo)題化合物(28mg)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 5.02(s，2 H)5.58(s，2 H)6.91(s，1H)7.06(s，1 H)7.11(s，1 H)7.25-7.36(m，5 H)10.53(s，1 H)11.99(s，1 H)；LCMS Rt＝1.52m/z 307[MH]+。
實(shí)施例22 4-氨基-1-芐基-6-(2-氟-苯基)-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮
將[2-氨基-6-(2-氟-苯基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯(31mg)溶于乙酸(1ml)中。添加鋅粉(Aldrich，99％，20mg)并將混合物在室溫下、在氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)。添加額外鋅粉(30mg)并將混合物再攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物用甲醇(2ml)稀釋，然后在陽(yáng)離子交換濾筒(Bakerbond SCX，磺酸粘合相，1g)上直接過(guò)濾。將SCX濾筒用甲醇(2×5ml)洗滌以移除雜質(zhì)然后用甲醇中的氨(2M，5ml)釋出產(chǎn)物。將所需洗脫組分蒸發(fā)為淺褐色固體。將此物用乙酸乙酯研磨，然后過(guò)濾，并用更多乙酸乙酯洗滌以產(chǎn)生淡紫色固體的標(biāo)題化合物(8mg)。
1H NMR(400MHz，DMS0-d6)δ ppm 4.99(s，2 H)5.82(s，2 H)6.87(d，J＝1.95Hz，1 H)7.15-7.29(m，3 H)7.29-7.39(m，5 H)7.81(td，J＝8.01，1.95Hz，1 H)10.51(s，1 H)；LCMS Rt＝2.21m/z 335[MH]+ 以下實(shí)施例23-119可以與實(shí)施例1-22類似的方式、由使用類似化學(xué)方法的制備部分中所述的類似中間體制備。
實(shí)施例23-28按照實(shí)施例1的方法制備，實(shí)施例54-60、65-72及107-110均按照實(shí)施例15及18所述的方法制備，實(shí)施例31及61按照實(shí)施例3所述的方法制備，實(shí)施例42-49、83-95及101-102均按照實(shí)施例17所述的方法制備，實(shí)施例73-78、96-99、103-106及111-112均按照實(shí)施例19所述的方法制備，實(shí)施例79-81按照實(shí)施例22所述的方法制備，實(shí)施例34-35及40按照實(shí)施例6所述的方法制備，實(shí)施例29-30、36-39、41及50-53按照實(shí)施例4所述的方法制備，實(shí)施例32-33按照實(shí)施例5所述的方法制備，按照實(shí)施例14所述的方法制備。
實(shí)施例62-64可按照實(shí)施例15及18所述的方法制備，實(shí)施例82可按照實(shí)施例14所述的方法按照，實(shí)施例100可按照實(shí)施例17所述的方法制備。
在以下實(shí)施例表中，星號(hào)表示連接點(diǎn)。















制備1 3-氨基-3-環(huán)丙基-丙烯酸乙酯 將環(huán)丙腈(2.7g，40.5mmol)溶于無(wú)水THF(100ml)中，然后添加鋅(13.2g，202.3mmol)及氧化鋅(1.6g，20.2mmol)，然后逐滴添加溴乙酸乙酯(6.7g，40.5mmol)。將混合物在N2氣氛下、在35kHz超聲波浴中超聲處理2小時(shí)。30分鐘后觀察到綠顏色。將混合物用硅藻土過(guò)濾以移除鋅及氧化鋅。將濾液添加至20ml的50％ K2CO3(aq)溶液中。將所形成的稠沉淀物過(guò)濾以移除固體，并將水溶液用100ml EtOAc萃取。將萃取物用20ml鹽水洗滌，用MgSO4干燥，并真空濃縮以產(chǎn)生粗產(chǎn)物(3.8g)。用90:10戊烷EtOAc洗脫、通過(guò)硅膠柱色譜純化粗物質(zhì)，以產(chǎn)生黃色油狀標(biāo)題化合物(1.32g)。
1H NMR(CDCl3)δ 4.47(s，1H)，4.11(四重峰，2H)，1.45-1.39(m，1H)，1.26(t，3H)，0.88-0.83(m，2H)，0.76-0.72(m，2H)；LRMS(APCI+)m/z156[MH]+。
制備2 6-環(huán)丙基-2，4-二羥基-煙酸乙酯 將金屬鈉(8.1g，119mmol)切成小塊并在室溫下、在氮?dú)夥障轮鸫翁砑又帘粩嚢璧囊掖?120ml)中。然后將混合物在60℃、在N2氣氛下攪拌過(guò)夜，以確保金屬的完全溶解。將丙二酸二乙酯(18.1ml，119mmol)在60℃添加至乙醇鈉溶液中并將混合物在N2氣氛下、在60℃攪拌1小時(shí)。在60℃逐滴添加3-氨基-3-環(huán)丙基-丙烯酸乙酯(10.3g，40mmol)于乙醇(10ml)中的溶液，并將混合物在回流溫度下、在N2氣氛下加熱5天以產(chǎn)生橙色混懸液。將混合物冷卻至室溫且通過(guò)過(guò)濾收集所得固體。將濾液真空濃縮以產(chǎn)生更多固體。將所合并的固體溶于水(150ml)中，并將溶液用EtOAc(150ml)洗滌。使用濃HCl將水溶液酸化至pH 2，使得白色固體沉淀。將固體通過(guò)過(guò)濾收集，然后用冷水及Et2O洗滌，然后在真空中、在40℃干燥過(guò)夜以產(chǎn)生細(xì)白色固體的標(biāo)題產(chǎn)物(5.32g)。將濾液真空濃縮至其體積的一半，使更多產(chǎn)物沉淀。將此第2次收獲的固體通過(guò)過(guò)濾收集，用水及Et2O洗滌，并在真空中、在40℃干燥以產(chǎn)生另外0.35g的米黃色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(d6-DMSO)δ 12.71(br s，1H)，11.43(br s，1H)，5.51(s，1H)，4.26(四重峰，2H)，1.86-1.79(m，1H)，1.26(t，3H)，1.06-1.01(m，2H)，0.90-0.86(m，2H)；LRMS(APCI)m/z 224[MH]+。
制備3 6-環(huán)丙基-2，4-二羥基-吡啶 將6-環(huán)丙基-2，4-二羥基-煙酸乙酯(5.3g，20.5mmol)溶于濃HCl(25ml)中，并將混合物回流過(guò)夜。將混合物冷卻至室溫然后用濃氨中和。將所得沉淀物通過(guò)過(guò)濾收集，用冷水及乙腈洗滌并在真空中、在40℃干燥2天以產(chǎn)生米黃色粉末狀標(biāo)題化合物(3.39g)。
1H NMR(d6-DMSO)δ 10.96(br s，1H)，10.25(br s，1H)，5.38，(d，1H)，5.32(d，1H)，1.79-1.72(m，1H)，0.93-0.89(m，2H)，0.75-0.71(m，2H)；LRMS(ES)m/z 152[MH]+。
制備4 6-環(huán)丙基-2，4-二羥基-3-硝基-吡啶 將6-環(huán)丙基-2，4-二羥基-吡啶(1g，6.6mmol)在室溫下混懸于AcOH:EtOAc(4:1，10ml)中。將混合物加溫至30℃且逐滴添加發(fā)煙硝酸的一小部分(0.05ml，1.2mmol)，使溫度保持在30℃與35℃之間。添加后混合物變成透明溶液。逐滴添加剩余發(fā)煙硝酸(0.25ml，6.3mmol)。將透明溶液冷卻至室溫，于是沉淀物開(kāi)始形成。將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。將固體通過(guò)過(guò)濾收集，用冷水及Et2O洗滌并在真空中、在室溫下干燥隔周(一個(gè)周末)以產(chǎn)生黃色粉末狀標(biāo)題化合物(1.21g)。
1H NMR(d6-DMSO)δ 12.17(br s，1H)，11.88(br s，1H)，5.57(s，1H)，1.88-1.81(m，1H)，1.08-1.03(m，2H)，0.87-0.83(m，2H)；LRMS(APCI)m/z 197[MH]+。
制備5 6-環(huán)丙基-2，4-二氯-3-硝基-吡啶 將6-環(huán)丙基-2，4-二羥基-3-硝基-吡啶(1.2g，6.1mmol)混懸于POCl3(5mL)中。將混合物在堿洗氣器下、在85℃加熱過(guò)夜。將過(guò)量POCl3在真空中移除，將反應(yīng)殘余物溶于EtOAc(50ml)并在使用冰控制溫度下逐滴添加至被攪拌的溫水(50ml)中。將各層分離并將水溶液用90:10 EtOAc:MeOH(100ml)萃取。將有機(jī)物用鹽水(50ml)洗滌，用MgSO4干燥且濃縮以產(chǎn)生粗產(chǎn)物(2g)。用90:10戊烷:EtOAc洗脫、用硅膠柱色譜可產(chǎn)生淺黃色結(jié)晶固體的標(biāo)題化合物(893mg)。
1H NMR(d6-DMSO)δ 7.94(s，1H)，2.31-2.24(m，1H)，1.18-1.14(m，2H)，1.06-1.02(m，2H)；LRMS(APCI)m/z 233[MH]+。
制備6 芐基-(2-氯-6-環(huán)丙基-3-硝基-吡啶-4-基)-胺 將6-環(huán)丙基-2，4-二氯-3-硝基-吡啶(160mg，0.8mmol)溶于THF(2ml)中，添加三乙胺(1041，0.8mmol)及芐胺(811，0.8mmol)。將混合物在室溫下、在氮?dú)夥障聰嚢?8小時(shí)，然后形成黃色沉淀物。將揮發(fā)物在真空中移除并將殘余物在室溫下、在塞緊燒瓶中貯存10天。然后用99:1 DCM:MeOH、98:2 DCM:MeOH洗脫、通過(guò)硅膠柱色譜純化殘余物以產(chǎn)生黃色結(jié)晶固體的標(biāo)題化合物(185mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.42-7.31(m，5H)，7.05(br s，1H)，6.47(s，1H)，4.49(d，2H)，1.88-1.81(m，1H)，1.09-1.04(m，2H)，1.01-0.96(m，2H)；LRMS(APCI)m/z 304[MH]+。
制備7 芐基-(3-氨基-2-氯-6-環(huán)丙基-吡啶-4-基)-胺 將芐基-(2-氯-6-環(huán)丙基-3-硝基-吡啶-4-基)-胺(245mg，0.8mmol)溶于AcOH:H2O(9.0:0.9ml)中。添加鐵粉(270mg，4.8mmol)并將混合物在室溫下、在氮?dú)夥障聞×覕嚢韪糁?，此期間沉淀析出灰白色沉淀物。將反應(yīng)混合物用EtOAc(20ml)及水(20ml)稀釋，將混合物用硅藻土過(guò)濾并將濾餅用EtOAc(20ml)洗滌。將各相分離并將有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液(10ml)及鹽水(10ml)洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮。將殘余物在真空中、在40℃干燥過(guò)夜以產(chǎn)生灰白色結(jié)晶固體的標(biāo)題化合物(215mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.40-7.31(m，5H)，6.29(s，1H)，4.59(br s1H)，4.37(d，2H)，3.30(br s 2H)，1.89-1.82(m，1H)，0.87-0.86(m，4H)；LRMS(APCI)m/z 274[MH]+。
制備8 1-芐基-4-氯-6-環(huán)丙基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮將芐基-(3-氨基-2-氯-6-環(huán)丙基-吡啶-4-基)-胺(210mg，0.8mmol)溶于乙腈(10ml)中。添加1，1-羰基二咪唑(370mg，2.3mmol)并將混合物在氮?dú)夥障?、?0℃加熱2小時(shí)。再添加250mg(1.5mmol)的1，1-羰基二咪唑并將混合物在80℃加熱過(guò)夜。將混合物冷卻至室溫并在真空中移除溶劑。將殘余物溶于DCM(20ml)中然后用1N HCl(10ml)、水(10ml)及鹽水(10ml)洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮。將殘余物在真空中、在40℃干燥過(guò)夜以產(chǎn)生白色蓬松固體的標(biāo)題化合物(217mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 8.20(brs，1H)，7.38-7.31(m，5H)，6.59(s，1H)，5.03(s，2H)，1.96-1.91(m，1H)，0.94-0.92(m，4H)；LRMS(APCI)m/z300[MH]+。
制備9 4-烯丙氨基-1-芐基-6-環(huán)丙基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮 將1-芐基-4-氯-6-環(huán)丙基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮(100mg，0.3mmol)溶于反應(yīng)瓶ReactivialTM中的烯丙胺(2mL)中。添加硫酸銅(II)(83mg，0.3mmol)并將瓶密封。將混合物在85℃加熱過(guò)夜。添加更多份的硫酸銅(II)(83mg，0.3mmol)及烯丙胺(1ml)且再次將瓶密封。將混合物在85℃加熱隔周。將混合物冷卻至室溫。將過(guò)量的烯丙胺在真空中移除并將殘余物溶于EtOAc(50ml)中并用飽和NaHCO3水溶液(20ml)處理。將各層分離并將有機(jī)物再用更多飽和NaHCO3水溶液(10ml)、鹽水(10ml)洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮以產(chǎn)生粗產(chǎn)物(120mg)。用98:2 DCM:MeOH洗脫、用硅膠柱色譜產(chǎn)生灰白色固體的標(biāo)題化合物(73mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 10.40(br s，1H)，7.34-7.25(m，5H)，6.17-6.15(m，1H)，5.96-5.87(m，1H)，5.17(d，1H)，5.02-5.00(m，1H)，4.89(s，2H)，4.05-4.00(m，2H)，1.85-1.80(m，1H)，0.97-0.93(m，2H)，0.84-0.76(m，2H)；LRMS(APCI)m/z 321[MH]+。
制備10 芐基-(2-氯-6-甲基-3-硝基-吡啶-4-基)-胺 將2，4-二氯-6-甲基-3-硝基-吡啶(2g，9.7mmol)及三乙胺(1.35mL，9.7mmol)溶于40ml THF中且冷卻(冰/水)至～5℃。逐滴添加芐胺(1.04g，9.7mmol)于10ml THF中的溶液，然后將混合物逐漸加溫至室溫過(guò)夜。將混合物在真空中蒸發(fā)，在EtOAc(50ml)與水(20ml)之間分溶。將有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液(10ml)洗滌，用MgSO4干燥并在真空中蒸發(fā)為橙色膠體。將此膠體預(yù)吸附在硅膠上，然后用DCM:戊烷3:1洗脫、通過(guò)柱色譜純化。將適合的洗脫組分合并并在真空中蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色固體的標(biāo)題化合物(716mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 2.32(s，3H)，4.38(d，2H)，6.39(s，1H)，6.90(寬單峰，1H)，7.21(m，2H)，7.29(m，3H)。LC-MS(ELSD，ES+)m/z 278(MH+)。
制備11 N-2’，N-2’，N-4’-三芐基-6-甲基-3-硝基-2，4-二胺 將芐基-(2-氯-6-甲基-3-硝基-吡啶-4-基)-胺(99mg，0.4mmol)與三乙胺(55 1，0.4mmol)溶于THF(2ml)且逐滴添加二芐胺(77mg，0.4mmol)。將所得反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過(guò)夜，然后在真空中蒸發(fā)。將殘余物在EtOAc(5ml)與飽和NaHCO3水溶液(3ml)之間分溶。將有機(jī)層干燥(用MgSO4)并在真空中蒸發(fā)為黃色膠體，將膠體預(yù)吸附在硅膠上然后用1:1 DCM:戊烷洗脫、通過(guò)柱色譜純化。將適合的洗脫組分合并并在真空中蒸發(fā)為鮮黃色膠體，靜置固化以產(chǎn)生標(biāo)題化合物(75mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 2.32(s，3H)，4.45(d，2H)，4.54(s，4H)，5.96(s，1H)，7.13-7.40(m，15H)，8.12(寬單峰，1H)。LRMS(ES+)m/z 439(MH+)。
制備12 N-2’，N-2’，N-4’-三芐基-6-甲基-2，3，4-三胺 將N-2’，N-2’，N-4’-三芐基-6-甲基-3-硝基-2，4-二胺(59mg，0.14mmol)溶于乙醇(5ml)中并在室溫下、在30psi下經(jīng)阮內(nèi)鎳(6mg)氫化1小時(shí)。再添加12mg阮內(nèi)鎳并將混合物在30psi及室溫下再氫化1.5小時(shí)。將反應(yīng)混合物用Arbocel短塞過(guò)濾，然后將濾液真空蒸發(fā)為不透明膠體的標(biāo)題化合物(39mg)。
1H NMR(DMSO)δ 2.08(s，3H)，4.07(s，4H)，4.21(s，2H)，4.30(d，2H)，5.83(t，1H可交換)，6.05(s，1H)，7.14-7.34(m，15H)；LRMS(APCI+)m/z409(MH+)。
制備13 1-芐基-4-二芐基氨基-6-甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮 將N-2’，N-2’，N-4’-三芐基-6-甲基-2，3，4-三胺(35mg，0.09mmol)及1，1-羰基二咪唑(139mg，0.86mmol)溶于乙腈(3ml)中并將混合物在回流下加熱3小時(shí)。將反應(yīng)混合物在真空中蒸發(fā)，使用DCM作為洗脫液、通過(guò)柱色譜純化殘余物。將適合的洗脫組分合并并在真空中蒸發(fā)以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(30mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 2.32(寬單峰，3H)，4.68(s，4H)，4.85(s，2H)，6.18(s，1H)，7.18-7.26(m，15H)；LRMS(ES+)m/z 435(MH+)。
制備14 N4-芐基-2-氯-6-三氟甲基-吡啶-3，4-二胺 將芐基-(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-胺(345mg，1.0mmol)溶于AcOH(18ml)與水(2ml)的混合物中。添加鐵粉(349mg，6.2mmol)并將混合物在室溫下劇烈攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物真空濃縮并將殘余物用EtOAc(10ml)及水(10ml)稀釋。將混合物用硅藻土過(guò)濾，用EtOAc(20ml)洗滌。將各層分離并將有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液(2×10ml)及鹽水(10ml)洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮以產(chǎn)生淺黃色固體的標(biāo)題化合物(304g)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.43-7.34(m，5H)，6.87(s，1H)，4.46(brs，1H)，4.42(d，2H)，3.72(br s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 302[MH]+。
制備15 1-芐基-4-氯-6-三氟甲基-吡啶-2-酮 將N4-芐基-2-氯-6-三氟甲基-吡啶-3，4-二胺(300mg，1.0mmol)溶于MeCN(20ml)中。添加CDI(806mg，4.9mmol)并將混合物在80℃加熱48小時(shí)。將混合物冷卻至室溫并在真空中移除溶劑。將殘余物溶于EtOAc(50ml)中然后用1N HCl(aq)(20ml)、水(20ml)及鹽水(20ml)洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮以產(chǎn)生淺黃色固體的標(biāo)題化合物(325g)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.41-7.33(m，5H)，7.14(s，1H)，5.11(s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 328[MH]+。
制備16 1-芐基-4-芐基氨基-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮 將1-芐基-4-氯-6-三氟甲基-吡啶-2-酮(100mg，0.3mmol)溶于反應(yīng)瓶中的BnNH2(2ml)中。添加CuSO4(152mg，0.6mmol)并將瓶密封。將反應(yīng)混合物在80℃加熱120小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物冷卻至室溫且溶于EtOAc(20ml)中。將混合物用飽和NaHCO3水溶液(2×5ml)及鹽水(5ml)洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮以產(chǎn)生粗產(chǎn)物(700mg)。用99:1DCM:MeOH洗脫、用二氧化硅柱色譜可產(chǎn)生黃色固體的標(biāo)題化合物(50mg)。
1H NMR(CDCl3)δ 10.66(br s，1H)，7.34-7.10(m，10H)，6.58(s，1H)，5.86-5.84(m，1H)，4.70(d，2H)，4.66(s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 399[MH]+。
以上標(biāo)題化合物的替代制備描述如下； 將N2，N4-二芐基-6-三氟甲基-吡啶-2，3，4-三胺(9.02g，24.2mmol)溶于TBME(180ml)中，添加CDI(19.6g，121mmol)。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌72小時(shí)。將水(100ml)添加至反應(yīng)混合物并將各層分離。將水溶液用EtOAc(200ml)萃取。將所合并的有機(jī)物用鹽水(50ml)洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮以產(chǎn)生粗產(chǎn)物(25g)。用30:70→60:40庚烷:EtOAc洗脫、用二氧化硅柱色譜產(chǎn)生白色蓬松固體的標(biāo)題化合物(2.64g)。
1H NMR(CDCl3)δ 10.52(br s，1H)，7.44-7.12(m，10H)，6.60(s，1H)，5.76-5.72(m，1H)，4.71-4.70(m，4H)；LRMS(APCI及ES)m/z 399[MH]+。
制備17 N2，N4-二芐基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2，4-二胺 將3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇(5.0g，22.3mmol)溶于DCM(50ml)中，添加Et3N(6.22ml，44.6mmol)。將混合物冷卻至0℃且逐滴添加Tf2O(7.32ml，44.6mmol)。將混合物加溫至室溫且攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物真空濃縮并將殘余物溶于THF(50ml)中。添加BnNH2(7.3ml，66.9mmol)并將混合物在50℃攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并真空濃縮。將殘余物用水(50ml)處理，并用EtOAc(150ml)萃取。將萃取物用鹽水(50ml)洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮以產(chǎn)生粗產(chǎn)物(27g)。
將第二批3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇(11.06g，49.4mmol)溶于DCM(100ml)中，添加Et3N(13.8ml，98.7mmol)。將混合物冷卻至0℃且逐滴添加Tf2O(16.2ml，98.7mmol)。將混合物加溫至室溫且攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物真空濃縮并將殘余物溶于THF(100ml)中。添加BnNH2(16.2ml，148mmol)并將混合物在50℃攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并真空濃縮。將殘余物用水(100ml)處理，并用EtOAc(200ml)萃取。將萃取物用鹽水(50ml)洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮以產(chǎn)生粗產(chǎn)物(53g)。將兩種粗產(chǎn)物合并。用95:5→90:10戊烷:EtOAc洗脫、用二氧化硅柱色譜產(chǎn)生黃色固體的標(biāo)題化合物(15.93g)。
1H NMR(CDCl3)δ 9.68-9.64(m，1H)，9.36-9.32(m，1H)，7.43-7.29(m，10H)，6.38(s，1H)，4.81(d，2H)，4.55(d，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 403[MH]+。
制備18 N2，N4-二芐基-6-三氟甲基-吡啶-2，3，4-三胺 將N2，N4-二芐基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2，4-二胺(15.9g，35.6mmol)溶于THF(100ml)與MeOH(200ml)的混合物中。添加阮內(nèi)鎳(3.18g，20wt％)并將混合物在室溫下、在80psi H2下攪拌1小時(shí)。將混合物用硅藻土過(guò)濾以移除催化劑并將濾液真空濃縮以產(chǎn)生油狀物。在MeOH中用少量水研磨產(chǎn)生沉淀物，通過(guò)過(guò)濾收集，用冷MeOH洗滌并在真空中干燥以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(9.02g)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.43-7.28(m，10H)，6.57(s，1H)，4.66(d，2H)，4.62-4.59(m，1H)，4.57-4.54(m，1H)，4.39(d，2H)，2.49(br s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 373[MH]+。
制備19 2，4-二羥基-6-三氟甲基-煙酸乙酯 添加吡啶(53ml/660mmol)以溶解DCM(6000ml)中的3-氨基-4，4，4-三氟丁烯酸乙酯(100g/546mmol)。然后將混合物置于氮?dú)夥障虑彝ㄟ^(guò)混懸于冰浴中而冷卻至5℃。經(jīng)約1小時(shí)逐滴添加乙基丙二酰氯以使得溫度不超過(guò)20℃。將所得淺褐色溶液在5℃攪拌3小時(shí)，然后加溫至室溫過(guò)夜以產(chǎn)生暗綠色溶液。然后將混合物用1M HCl水溶液(200ml)、飽和NaHCO3水溶液(250ml)洗滌。將水性洗液繼續(xù)用另外的DCM(2×250ml)再萃取。將有機(jī)層合并，用Na2SO4干燥，過(guò)濾且濃縮為暗綠色油狀的粗3-(2-乙氧羰基-乙酰氨基)-4，4，4-三氟-丁-2-烯酸乙酯(175g)。將一部分粗物質(zhì)(120g)溶于EtOH(300ml)中且放置于氮?dú)夥障?。然后分若干份添加叔丁醇?54g/480mmol)以使得溫度不超過(guò)60℃，從而產(chǎn)生紫色溶液。然后將混合物在70℃加熱3小時(shí)。然后添加EtOH(100ml)以降低粘度并在80℃再加熱1小時(shí)。然后將混合物冷卻然后真空濃縮為紅色固體。將混合物溶于水(500ml)中，添加檸檬酸(180g)，產(chǎn)生沉淀。然后添加EtOAc(600ml)并將混合物傾注入分液漏斗內(nèi)并將水層排出。將含有大量不溶解固體的有機(jī)層過(guò)濾以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(46.5g)。濃縮有機(jī)物濾液并用MeOH研磨，產(chǎn)生更多的白色固體的標(biāo)題化合物(15.3g)。
1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ 1.20-1.25(t，3H)，4.20-4.25(q，2H)，6.8(s，1H) 制備20 6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇 在回流溫度下將2，4-二羥基-6-三氟甲基-煙酸乙酯(62g/247mmol)分若干份經(jīng)30分鐘添加至6M HCl(aq)(620ml)中。然后在劇烈攪拌下將所得混合物在100℃加熱過(guò)夜以獲得完整溶液。然后將該溶液冷卻并真空濃縮為白色固體。將此物在水(250ml)中調(diào)成漿液并用濃氨調(diào)節(jié)至pH7以得到稠白色混懸液。將所得固體通過(guò)過(guò)濾收集，用新鮮水沖洗且干燥以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(44.0g)。
1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ 6.05(s，1H)，6.6(s，1H) 制備21 乙基-[2，3-二氨基-6-(三氟甲基)-吡啶-4-基]-芐基氨基甲酸酯 將粗乙基-[2-氨基-3-硝基-6-(三氟甲基)-吡啶-4-基]-芐基氨基甲酸酯(65gm，170mmol)溶于乙醇(1000ml)中，添加10％ Pd-C(6gm)。在40℃及40psi下進(jìn)行氫化反應(yīng)1小時(shí)，使硝基完全還原。將催化劑通過(guò)過(guò)濾移除并將濾液在減壓下蒸干以產(chǎn)生淺褐色半固體。用叔丁基甲醚(150ml)研磨，然后過(guò)濾并用上述相同溶劑(30ml)洗滌，產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(36gm，60％收率)。
1H NMR(DMSOd6)δ 7.30-7.21(m，5H)，6.32(寬峰s，1H)，6.15(寬峰s，2H)，5.39(寬峰s，2H)，5.00(寬峰d，1H)，4.25(寬峰d)，4.09(寬峰d，2H)，1.12(寬峰s，3H)；LRMS(ES+)m/z 355(MH+) 制備22 乙基-[2-氨基-3-硝基-6-(三氟甲基)-吡啶-4-基]-芐基氨基甲酸酯 將乙基-[2-氯-3-硝基-6-(三氟甲基)-吡啶-4-基]-芐基氨基甲酸酯(63gm，160mmol)溶于四氫呋喃(300ml)中且向其中添加0.880氨溶液(100ml)以產(chǎn)生兩相。將此物轉(zhuǎn)入壓力容器內(nèi)，密封并在攪拌下加熱至80℃歷時(shí)2小時(shí)。將四氫呋喃蒸發(fā)并將殘余物在飽和鹽水與乙醚之間分溶。將有機(jī)萃取物用硫酸鈉干燥，過(guò)濾且蒸發(fā)以產(chǎn)生稠黃色漿液(65gm)粗產(chǎn)物；LRMS(ES+)m/z 385(MH+)，(ES-)m/z 383(M-H)。
制備23 乙基-[2-氯-3-硝基-6-(三氟甲基)-吡啶-4-基]-芐基氨基甲酸酯 將芐基-(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-胺(57gm，170mmol)溶于四氫呋喃(750ml)中并在N2下攪拌。然后將所得混合物在冰/鹽浴中冷卻至-5℃。在約30分鐘內(nèi)逐滴添加叔丁醇鉀(21.2gm，189mmol)于四氫呋喃(200ml)中的溶液，使溫度維持在-5℃與0℃之間以產(chǎn)生深紅色反應(yīng)混合物。然后將所得混合物在此溫度攪拌15分鐘后，再逐滴添加氯甲酸乙酯(21.4gm，198mmol)于四氫呋喃(100ml)中的溶液，使溫度保持在5℃以下。
移除冷卻浴，允許反應(yīng)混合物經(jīng)1小時(shí)達(dá)到環(huán)境溫度以產(chǎn)生淺褐色渾濁溶液。蒸發(fā)溶劑，然后將殘余物在飽和鹽水(50ml)與叔丁基甲基醚(300ml)之間分溶。將有機(jī)相依次用水(50ml)、飽和鹽水(50ml)洗滌，用硫酸鈉干燥，過(guò)濾且蒸發(fā)以產(chǎn)生褐色油。將此油溶于正戊烷(250ml)中并在環(huán)境溫度貯存過(guò)夜。
將正戊烷溶液自已沉淀析出的暗褐色焦油中傾析出。蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生淺褐色粘性油狀標(biāo)題化合物(63gm，91％收率)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.28-7.10(m，5H)，4.80(s，2H)4.15(q，2H)1.18(t，3H)；LRMS(ES+)m/z 404/406(MH+)。
制備24 芐基-(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-胺 將4-芐基氨基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2-醇(61.7gm，197mmol)添加至苯基膦酰二氯(180ml)中，并在N2氣氛下、在油浴中加熱至100℃過(guò)夜。加熱溶解起始物質(zhì)以產(chǎn)生淡黃色溶液。然后使混合物驟冷于冰水(600gm冰+100ml水)上以產(chǎn)生淺黃色固體。將固體濾出并用水適當(dāng)洗滌。將固體溶于乙酸乙酯(600ml)中并用碳酸氫鈉水溶液(10％w/v)洗滌直至不再發(fā)泡且洗液水的pH為堿性。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥，過(guò)濾且蒸發(fā)以產(chǎn)生濁黃色固體。然后將固體溶于乙醚中。然后向其中添加正己烷直至溶液混濁為止。在幾分鐘內(nèi)一稠絮狀固體形成，然后濾出，用正己烷洗滌且干燥以產(chǎn)生標(biāo)題化合物(60.59gm，92％收率)。
1H NMR(CDCl3)δ 7.44-7.30(m，5H)，7.04(s，1H)，6.95(s寬峰，1H)4.53(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 332(MH+)。
制備25 2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基胺 將芐基-(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-胺(3.1g，9.3mmol)在5ml濃硫酸中攪拌0.5小時(shí)，再將溶液謹(jǐn)慎傾注入有碎冰的燒杯中。逐次添加固體K2CO3直至達(dá)成堿性pH值，并用2×50ml EtOAc萃取水溶液。將所合并的有機(jī)物用MgSO4干燥并真空濃縮以產(chǎn)生2.2g淺黃色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 7.06(s，1H)，5.87(bs，2H)；LRMS(ESCI)m/z 240[M-H]+ 制備26 (2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)氨基甲酸乙酯 將(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基胺(2.2g，9.1mmol)在2-MeTHF(20ml)中攪拌，添加三乙胺(1.52ml，10.9mmol)。將溶液在冰浴中冷卻至～5℃，再逐滴添加氯甲酸乙酯(1.04ml，10.9mmol)，將溶液加溫至環(huán)境溫度并在氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)。添加20ml EtOAc及10mlH2O并將各相分離，用另外的2×10ml飽和鹽水溶液洗滌。將有機(jī)萃取物用MgSO4干燥，真空濃縮且預(yù)吸附在二氧化硅柱上。用庚烷:EtOAc9:1洗脫，產(chǎn)生2.1g白色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 8.79(s，1H)，8.02(bs，1H)，4.35-4.30(t，2H)，1.38-1.35(qt，3H)；LRMS(ESCI)m/z 312[M-H]+ 制備27 (2-芐基氨基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)氨基甲酸乙酯 將2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)氨基甲酸乙酯(300mg，0.96mmol)溶于10ml四氫呋喃中，然后添加芐胺(0.103ml，0.96mmol)、三乙胺(0.194ml，1.91mmol)，并將反應(yīng)混合物在60℃攪拌過(guò)夜。移除溶劑并將固體在乙酸乙酯/水(50ml/30ml)中分溶，將有機(jī)層用MgSO4干燥，濃縮并用乙酸乙酯中的0％至10％甲醇的梯度洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜純化以產(chǎn)生323mg黃色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 10.75(s，1H)，8.89(s，1H)，8.22(s，1H)，7.35(m，5H)，4.82(d，2H)，4.31(q，2H)，1.36(t，3H)；LRMS(APCI)m/z 385[MH]+ 制備28 (3-氨基-2-芐基氨基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)氨基甲酸乙酯將(2-芐基氨基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(95mg，0.25mmol)溶于10mL乙醇中，添加阮內(nèi)鎳(20mg，20％MW)、然后將反應(yīng)混合物在室溫下、在50PSI氫氣下在壓力罐中攪拌2小時(shí)。將混合物用Arbocel(木質(zhì)纖維素)過(guò)濾并將濾液真空濃縮以產(chǎn)生88mg淺綠色膠體的標(biāo)題化合物；LRMS(APCI)m/z 355[MH]+ 制備29 4-芐基氨基-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并(4，5-c)吡啶-2-酮 將(3-氨基-2-芐基氨基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(88mg，0.25mmol)溶于5ml乙酸中并將反應(yīng)混合物在80℃攪拌過(guò)夜。移除溶劑并將此膠狀物在水/乙酸乙酯中分溶。將有機(jī)層分離，用MgSO4干燥，將溶劑在真空中移除，并用乙酸乙酯中的1％至5％甲醇的梯度洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜純化以產(chǎn)生37mg無(wú)色膠體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 10.56(s，1H)，7.51-7.47(m，5H)，6.61-6.58(m，2H)，5.87(s，1H)，4.61(d，2H)；LRMS(APCI)m/z 309[MH]+ 制備30 4-芐基氨基-1-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并(4，5-c)吡啶-2-酮 將4-芐基氨基-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并(4，5-c)吡啶-2-酮(100mg，0.32mmol)溶于5mL二甲基甲酰胺中然后添加碳酸鉀(89mg，0.65mmol)、5-氯甲基-2-甲基-吡啶(46mg，0.32mmol)，并將反應(yīng)混合物在80℃攪拌過(guò)夜。質(zhì)譜分析展示預(yù)期為一些二苯甲基化產(chǎn)物。將溶劑在真空中移除并將殘余物在乙酸乙酯/水中分溶。將有機(jī)層分離，用MgSO4干燥，將溶劑在真空中移除，并將殘余物用乙酸乙酯中的1％至10％甲醇的梯度洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜純化以產(chǎn)生30mg白色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(d6 DMSO)δ 8.46(s，1H)，7.57-7.55(dd，1H)，7.38-7.16(m，7H)，6.63(t，1H)，5.02(s，2H)，4.59(d，2H)，2.40(s，3H)；LRMS(APCI)m/z 414[MH]+ 制備31 (2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 將碳酸鉀(88mg，0.64mmol)添加至(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(100mg，0.32mmol)于丙酮(10ml)中的被攪拌的溶液中。然后添加5-(氯甲基)-2-甲基吡啶(54.2mg，0.38mmol)、碘化鈉(57.4mg，0.38mmol)并將混懸液在氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)。添加20ml EtOAc并將有機(jī)相用2×H2O洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮以產(chǎn)生紅色油。用庚烷:EtOAc 3:2洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜純化該粗物質(zhì)以產(chǎn)生54mg橙色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 8.35(d，1H)，7.54-7.51(dd，1H)，7.31(s，1H)，7.16-7.15(d，1H)，4.84(s，2H)，4.23-4.18(qt，2H)，2.55(s，3H)，1.26-1.22(t，3H)；LRMS(ESCI)m/z 419[MH]+ 制備32 (2-氨基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 將(2-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(54mg，0.13mmol)溶于THF(1ml)中且轉(zhuǎn)入10ml反應(yīng)瓶中。添加880氨水(1ml)，將容器密封并將混合物在環(huán)境溫度劇烈攪拌16小時(shí)。將溶液真空濃縮以產(chǎn)生粗油，將其用100％ EtOAc洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜法直接純化以產(chǎn)生27mg為黃色殘余物的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 8.39(s，1H)，7.61-7.59(d，1H)，7.15-7.13(d，1H)，6.76(s，1H)，6.25(bs，2H)，4.92(s，2H)，4.23-4.14(qt，2H)，2.54(s，3H)，1.22-1.19(t，3H)LRMS(APCI)m/z 400[MH]+ 制備33 4-芐基氨基-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2-醇 將4-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2-醇(65.1gm，268mmol)溶于四氫呋喃(350ml)中，并在室溫下、在N2氣氛下攪拌。經(jīng)30分鐘逐滴添加四氫呋喃(50ml)中的芐胺(86.3gm，805mmol)以產(chǎn)生亮黃色溶液。將反應(yīng)物在50℃的油浴中加熱18小時(shí)(反應(yīng)期間形成固體)。然后將所得混合物冷卻至環(huán)境溫度，用乙醚(200ml)稀釋然后濾出所得固體(鹽酸芐胺)。在減壓下將濾液蒸發(fā)至低容積以產(chǎn)生黃色稠漿液。添加乙醚(300ml)且濾出黃色固體，在濾墊上干燥以產(chǎn)生芐胺鹽(96.5gm)。將所需產(chǎn)物通過(guò)將固體在2N HCl水溶液與二氯甲烷之間分溶來(lái)釋出，自乙酸乙酯/正戊烷中結(jié)晶，產(chǎn)生淺黃色固體的標(biāo)題化合物(61.7gm，73.4％收率)。
1H NMR(DMSO d6 δ 9.04(寬單峰，1H)，7.38-7.25(m，5H)，6.54(s，1H)，4.67(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 314(MH+)。
制備34 4-氯-3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2-醇 將3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇(5.8gm，26mmol)在苯基膦酰二氯(30ml)中、在100℃加熱19小時(shí)。然后冷卻所得混合物且傾注在冰(60gm)上，然后用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。將所合并的有機(jī)萃取物用碳酸氫鈉水溶液(10％w/v)洗滌直至洗液為堿性(pH～8)。然后將深黃色有機(jī)層用飽和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過(guò)濾且蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色膠體。用二氯甲烷研磨該膠體，產(chǎn)生黃色固體，將其濾出且干燥(4.65gm)。將固體溶于水(25ml)中并用2N鹽酸(7.5ml)酸化以產(chǎn)生白色稠沉淀物，將其濾出并用水洗滌。將沉淀物溶于乙酸乙酯中，用硫酸鈉干燥，過(guò)濾且蒸發(fā)以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(3.75gm)。
1H NMR(DMSOd6)δ 7.78(s，1H)。13C NMR(DMSOd6)δ 157.2(s)145.2(q)138.1(s)136.98(s)120.6(q)113.86(s)；LRMS(ES-)m/z 241/243[MH]- 制備35 3-硝基-6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇 在攪拌下，將6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇(56gm，310mmol)以每份3-5mg添加至濃硫酸(140ml)中，以產(chǎn)生淺褐色溶液。添加期間溫度升高至～50℃。以使得反應(yīng)溫度維持在45℃與50℃之間的流速逐滴添加硝酸(21.1ml，328mmol，70％ HNO3，d＝1.4gm/ml)，歷時(shí)約90分鐘。一旦硝酸全部添加完，則歷經(jīng)3小時(shí)將反應(yīng)物冷卻至環(huán)境溫度。然后在攪拌下，將反應(yīng)混合物傾注入冰/水(～1.3kg)內(nèi)，幾分鐘后，形成淺黃色沉淀物，將其濾出，溶于乙酸乙酯中并用硫酸鈉干燥，過(guò)濾且蒸發(fā)。將第2次收獲的物質(zhì)通過(guò)用乙酸乙酯萃取水性濾液而獲得。將各獲得物合并且通過(guò)結(jié)晶作用自乙酸乙酯/正庚烷中純化，產(chǎn)生白色＂蓬松＂固體的標(biāo)題化合物(49.5gm，71％收率)。
1H NMR(DMSOd6)δ 6.82(s，1H)。13C NMR(DMSOd6)159.82(s)157.58(s)143.10(寬單峰)127.26(s)120.85(q)102.83(s)。
制備36 2，6-二溴吡啶1-氧化物 將2，6-二溴吡啶(79g，334mmol)溶于800ml無(wú)水二氯甲烷中并在氮?dú)夥障吕鋮s至5℃，然后在一份中添加過(guò)氧化氫脲(104g，1.1mol)。當(dāng)混合物再冷卻至3℃時(shí)，歷經(jīng)45分鐘用滴液漏斗添加三氟乙酸酐(140ml，1mol)于100ml DCM中的溶液，同時(shí)使溫度保持在5-7℃之間。將混合物加溫至室溫且攪拌20小時(shí)。將混合物在冰浴中冷卻至10℃且歷經(jīng)60分鐘逐滴添加10％ Na2SO3水溶液(～50g/500ml)直至用淀粉碘化物試紙測(cè)試為陰性。將所得混合物過(guò)濾以移除大量蓬松固體并將各層分離。將水層用二氯甲烷(2×200ml)萃取，并將所合并的萃取物用MgSO4干燥并在減壓下濃縮以產(chǎn)生淺褐色固體。使用600ml沸騰丙酮使粗產(chǎn)物重結(jié)晶，產(chǎn)生48.47g標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 7.65(d，2H)，6.95(m，1H)。
制備37 2，6-二溴-4-硝基吡啶1-氧化物 在室溫下，將2，6-二溴吡啶1-氧化物(10g，39.5mmol)添加至65ml濃硫酸中，無(wú)需冷卻。將濃硫酸(15ml)與硝酸(13.3ml)混合且放置于壓力平衡滴液漏斗中。將反應(yīng)混合物加熱至79℃，然后歷經(jīng)25分鐘逐次添加硝化混合物。當(dāng)添加完成時(shí)，將混合物在83-85℃攪拌3.5小時(shí)。將混合物冷卻至室溫且緩慢傾注在一250g碎冰上。形成非常淺的黃色固體，將其濾出并用水(100ml)洗滌，在真空烘箱中、在50℃干燥過(guò)夜以產(chǎn)生10.9g標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 8.45(s，2H)。
制備38 2，6-二溴吡啶-4-基胺 將2，6-二溴-4-硝基吡啶1-氧化物(14.5g，48.6mmol)溶解于130ml乙酸中，逐次添加鐵粉(11g，196.9mmol)，并將混合物在室溫下攪拌45分鐘。添加500ml水并將產(chǎn)物用EtOAc(500ml)萃取。將有機(jī)層依次用300ml水、300ml飽和K2CO3溶液、300ml鹽水洗滌。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥并將溶劑在真空中移除以產(chǎn)生11.1g白色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 6.65(s，2H)，4.4-4.1(s寬峰，2H)；LRMS(ES+)m/z251，253[MH]+ 制備39 2，6-二溴吡啶-4-基-N-硝基胺 在室溫下將2，6-二溴吡啶-4-基胺(11g，43.6mmol)溶于100ml硫酸中然后在-5℃冷卻。逐滴添加6ml硝酸，使溫度保持在-10℃至-5℃之間，并將混合物在-5℃攪拌30分鐘。然后將混合物傾注在400ml碎冰上。將所形成的固體濾出，然后溶于EtOAc中。將殘留水移除并將有機(jī)層用300ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥并將溶劑在真空中移除以產(chǎn)生12.5g黃色固體的標(biāo)題產(chǎn)物。
1H NMR(CDCl3)δ 6.85(s 1H)，5.7-5.4(s寬峰，2H)。
制備40 2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基胺 將濃硫酸(250ml)在油浴中加熱直至酸溫度達(dá)到47℃。歷經(jīng)35分鐘逐次添加2，6-二溴吡啶-4-基-N-硝基胺(34.0g，114.5mmol)?；旌衔锏臏囟仍谡麄€(gè)添加期間逐漸上升直至最后其為56℃。將混合物在53-55℃攪拌1小時(shí)。一旦反應(yīng)完成，則在攪拌下將反應(yīng)混合物在冰浴中冷卻且傾注在～2L碎冰上。產(chǎn)物沉淀并被濾出。與獲自相同規(guī)模反應(yīng)的其它批料00110916-140-001合并。將粗濕氨基硝基吡啶溶于700ml EtOAc中且分離水層。將有機(jī)層用水(2×150ml)、1×150mlNaHCO3水溶液、鹽水(2×150ml)洗滌，干燥(用MgSO4)，在減壓下濃縮以產(chǎn)生28g標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 7.3-7.2(s寬峰，1H)，7.55(s，2H)。
制備41 N-2，N-4-二芐基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 將2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基胺(6.5g，21.9mmol)混懸于濃HCl(100ml)中且冷卻至0℃，然后添加亞硝酸鈉(7.5g，109mmol)。將混合物攪拌30分鐘，然后加溫至室溫。添加100ml冷水并將混合物用100ml乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層用100ml水洗滌，用硫酸鎂干燥，并在真空中移除溶劑，以產(chǎn)生5.8g橙色油狀的2，6-二溴-3-硝基-4-氯吡啶。將此油溶于80ml THF中且冷卻至0℃。將芐胺(94.9ml，44.9mmol)溶于20ml THF中且逐滴添加至反應(yīng)物中，然后添加碳酸鉀(6.6g，48.2mmol)。將混合物加溫至室溫，然后在50℃加熱過(guò)夜。一旦反應(yīng)完成，則將混合物在水(150ml)與乙酸乙酯(100ml)中分溶。將有機(jī)層用200ml水及200ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥并在真空中移除溶劑。添加100ml乙醇并將混合物超聲處理五分鐘且置于通風(fēng)櫥中過(guò)夜。將沉淀物濾出并用30ml乙醇洗滌以產(chǎn)生4.56g黃色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.6-9.4(m寬峰，2H)，7.4-7.2(m，10H)，6.2(s，1H)，4.8(d，2H)，4.45(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 413，415[MH]+ 制備42 N-2，N-4-二芐基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-2，4-二胺 將N-2，N-4-二芐基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-2，4-二胺(2g，5mmol)溶于THF(60ml)中，添加乙烯基三丁基錫(3.4g，10.8mmol)、乙酸鈀(350mg，10重量％)及三苯基膦(380mg)。將混合物用氬氣脫氣，然后在80度加熱過(guò)夜。在真空中移除溶劑，使用戊烷中的10％乙酸乙酯作為洗脫液、通過(guò)硅膠柱色譜法純化粗殘余物以產(chǎn)生1.9g橙色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.65(s峰寬，1H)，9.4(s峰寬，1H)，7.45-7.2(m，10H)，6.5-6.4(m，1H)，6.35(m，1H)，5.95(s，1H)，5.5(m，1H)，4.85(d，2H)，4.55(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 361[MH]+ 制備43 4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-甲醛 將N-2，N-4-二芐基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-2，4-二胺(800mg，2mmol)溶于10ml四氫呋喃及30ml水中，然后依次添加四氧化鋨(60mg，0.2mmol)、偏高碘酸鈉(1.2g，5.6mmol)。將混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。將混合物在水(30ml)與乙酸乙酯(30ml)中分溶，將有機(jī)層用50ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，使用戊烷中的10％乙酸乙酯作為洗脫液、通過(guò)硅膠柱色譜法純化粗殘余物以產(chǎn)生450mg橙色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.78(s，1H)，9.55(寬單峰，1H)，9..3(s寬峰，1H)，7.4-7.2(m，10H)，7.62(s，1H)，5.5(m，1H)，4.9(d，2H)，4.6(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 363[MH]+ 制備44 N-2，N-4-二芐基-6-嗎啉-4-基-甲基-3-；硝基-吡啶-2，4-二胺 在室溫下將4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-甲醛(150mg，0.41mmol)溶于15ml二氯甲烷中，然后添加2-甲氧基-乙胺(43mg，0.49mmol)、乙酸(25mg，0.41mmol)。將混合物攪拌5分鐘，然后添加三乙酰氧基硼氫化鈉(130mg，0.62mmol)并將混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。將20ml水添加入混合物中，然后將有機(jī)層分離，用20ml水洗滌，然后用MgSO4干燥。在真空中移除溶劑以產(chǎn)生180mg橙色膠體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.55(寬單峰，1H)，9.4(寬單峰，1H)，7.4-7.2(m，10H)，6.19(s，1H)，4.8(d，2H)，4.55(d，2H)，3.6(m，4H)，3.45(m，2H)，3.3(s，2H)，2.35(m，4H)；LRMS(ES+)m/z 434[MH]+ 制備45 N-2，N-4-二芐基-6-嗎啉-4-基-甲基-吡啶-2，3，4-三胺 將N-2，N-4-二芐基-6-嗎啉-4-基-甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(190mg，0.43mmol)溶于30ml甲醇中，添加阮內(nèi)鎳(40mg，20重量％)，然后將混合物在室溫下、在80psi氫氣下攪拌1小時(shí)。完成后，將混合物用Arbocel(木質(zhì)纖維素)過(guò)濾并在真空中移除溶劑以產(chǎn)生180mg綠色油狀標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3OD)δ 7.4-7.2(m，10H)，6.1(s，1H)，4.6(d，2H)，4.4(d，2H)，3.3(m，6H)，2.4-2.2(寬單峰，2H)，2.15(m，4H)；LRMS(ES+)m/z 417[MH]+ 制備46 N-2，N-4-二芐基-6-乙基-吡啶-2，3，4-三胺 將N-2，N-4-二芐基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-2，4-二胺(300mg，0.75mmol)溶于20ml四氫呋喃中，添加阮內(nèi)鎳(40mg，13重量％)，然后將混合物在室溫下、在60psi氫氣下攪拌1.5小時(shí)。完成后，將混合物用Arbocel(木質(zhì)纖維素)過(guò)濾并在真空中移除溶劑以產(chǎn)生230mg標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 7.40-7.20(m，5H)，6.0(s，1H)，4.90-4.80(寬單峰，2H)，4.65(d，2H)，4.35(d，2H)，2.55(q，2H)，1.20(t，3H)。
制備47 1-(4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-乙酮 將N-2，N-4-二芐基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(800mg，1.94mmol)溶于40ml四氫呋喃中，然后依次添加(1-乙氧基乙烯基)-三-正丁錫(909mg，2.52mmol)、乙酸鈀(90mg，W/W)及三苯基膦(100mg，w/w)，并將混合物在80℃攪拌1小時(shí)。一旦反應(yīng)完成，添加30ml乙酸乙酯及40ml的3N HCl溶液。將混合物在60℃劇烈攪拌30分鐘。將有機(jī)層分離，用50ml鹽水洗滌并將溶劑在真空中移除。使用戊烷中的10％乙酸乙酯、通過(guò)硅膠柱色譜法純化粗殘余物以產(chǎn)生680mg黃色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.55(寬單峰，1H)，9.35(寬單峰，1H)，7.40-7.0(m，10H)，6.75(s，1H)，5.25(s，1H)，4.85(d，2H)，4.55(d，2H)，2.50(s，3H)；LRMS(ES+)m/z 377[MH]+ 制備48 N-2，N-4-二芐基-6-二氟甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 將4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-甲醛(250mg，0.69mmol)溶于15ml二氯甲烷中且冷卻至0℃，然后添加雙-(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫(611mg，2.76mmol)并將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。一旦反應(yīng)完成，則將30ml水添加入混合物中，然后將有機(jī)層分離，用30ml碳酸鉀飽和溶液及鹽水洗滌，然后用MgSO4干燥。在真空中移除溶劑，使用戊烷中的10％乙酸乙酯、通過(guò)硅膠柱色譜法純化粗殘余物以產(chǎn)生220mg黃色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.60(寬單峰，1H)，9.3(寬單峰，1H)，7.4-7.2(m，10H)，6.30(s，1H)，6.35-6.05(t，1H)，6.75(d，2H)，6.50(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 385[MH]+ 制備49 4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-甲腈 將N-2，N-4-二芐基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(500mg，1.21mmol)混懸于10ml甲苯中，然后依次添加氰化三丁基錫(765mg，2.42mmol)、乙酸鈀(60mg，W/W)及三苯基膦(70mg，w/w)，并將混合物在130℃微波處理25分鐘。一旦反應(yīng)完成，則將溶劑在真空中移除，使用戊烷中的10％乙酸乙酯、通過(guò)硅膠柱色譜法純化粗殘余物以產(chǎn)生408mg黃色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.65(寬單峰，1H)，9.30(寬單峰，1H)，7.40-7.20(m，10H)，6.40(s，1H)，4.75(d，2H)，4.50(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 360[MH]+ 制備50 (4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-甲醇 將N-2，N-4-二芐基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(315mg，0.87mmol)混懸于20ml四氫呋喃中且冷卻至0℃，然后添加氫化硼鈉(40mg，1.1mmol)并將混合物在0℃攪拌15分鐘。將混合物在水(10ml)與乙酸乙酯(10ml)中分溶。將有機(jī)層分離，用15ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥并將溶劑在真空中移除以產(chǎn)生315mg黃色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.50(寬單峰，1H)，7.40-7.20(m，10H)，5.85(s，1H)，4.59(d，2H)，4.45(d，2H)，4.35(s，2H)；LRMS(ES+)m/z[MH]+ 制備51 N-2，N-4-二芐基-6-溴甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 將(4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-甲醇(300mg，0.82mmol)溶于20ml二氯甲烷中且冷卻至0℃，然后依次添加三苯基膦(237mg，0.91mmol)、N-溴代琥珀酰亞胺(161mg，0.82mmol)，并將混合物在0℃攪拌30分鐘，然后加溫至室溫且攪拌2小時(shí)。在真空中移除溶劑，使用戊烷中的20％乙酸乙酯、通過(guò)硅膠柱色譜法純化粗殘余物以產(chǎn)生220mg黃色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.59(寬單峰，1H)，9.40(寬單峰，1H)，7.40-7.20(m，10H)，6.15(s，1H)，4.80(d，2H)，4.55(d，2H)，4.15(s，2H)；LRMS(ES+)m/z 427，429[MH]+ 制備52 N-2，N-4-二芐基-6-甲氧基甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 將N-2，N-4-二芐基-6-溴甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(100mg，0.23mmol)溶于10ml甲醇中，然后添加甲醇鈉(25mg，0.46mmol)，然后在60℃攪拌過(guò)夜。將溶劑在真空中移除并將粗產(chǎn)物在10ml二氯甲烷與10ml水中分溶。將有機(jī)層分離，用硫酸鎂干燥并將溶劑在真空中移除以產(chǎn)生80mg黃色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 9.59(寬單峰，1H)，9.40(寬單峰，1H)，7.40-7.20(m，10H)，6.20(s，1H)，4.80(d，2H)，4.55(d，2H)，4.25(s，2H)，3.35(s，3H)；LRMS(ES+)m/z 379[MH]+ 制備53 N-2，N-4-二芐基-3-硝基-6-吡嗪-2-基-吡啶-2，4-二胺 將N-2，N-4-二芐基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(100mg/0.242mmol)、2-三-正丁基錫烷基吡嗪(116mg/0.315mmol)、乙酸鈀(15mg)及三苯基膦(20mg)溶于甲苯(2ml)中并在BiotageInitiator中、在130℃經(jīng)微波照射25分鐘。在2個(gè)以上場(chǎng)合中按照相同規(guī)模重復(fù)反應(yīng)。將三種反應(yīng)物合并，用EtOAc(10ml)稀釋，用水(5ml)洗滌并真空濃縮。用10:1戊烷:EtOAc洗脫、通過(guò)柱色譜法純化產(chǎn)生黃色固體的標(biāo)題化合物(105mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 4.60-4.65(d，2H)，4.90-4.95(d，2H)，7.20-7.40(多重峰，10H)，8.55-8.60(多重峰，2H)，9.40-9.50(多重峰，2H)，9.60(多重峰，1H)；LRMS(ESCI)m/z 413[MH]+。
制備54 N-2，N-4-二芐基-6-吡嗪-2-基-吡啶-2，3，4-三胺 將N-2，N-4-二芐基-3-硝基-6-吡嗪-2-基-吡啶-2，4-二胺(105mg/0.255mmol)溶于MeOH(20ml)/THF(20ml)中。添加阮內(nèi)鎳(30mg)并將反應(yīng)物在室溫下、在80psi氫氣下放置5小時(shí)。用硅藻土過(guò)濾并真空濃縮以產(chǎn)生淺綠色油狀標(biāo)題化合物(95mg)；LRMS(ESCI)m/z 383[MH]+，381[MH]-。
制備55 6-烯丙基-N2，N4-二芐基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 將N*2*，N*4*-二芐基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(1g，2.4mmol)在無(wú)水四氫呋喃(20ml)中攪拌并將溶液用氮?dú)饷摎?，再添加乙酸鈀(109mg，0.48mmol)及烯丙基三丁基錫(1.1ml，3.6mmol)。將反應(yīng)混合物脫氣10分鐘，將混懸液在80℃加熱16小時(shí)。將混懸液冷卻至環(huán)境溫度，真空濃縮并用戊烷:EtOAc 9:1洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜法直接純化，以產(chǎn)生黃色固體的標(biāo)題化合物(696mg，77％)。
1H NMR(CDCl3)δ 3.23-3.25(d，2H)，4.47-4.49(d，2H)，4.81-4.82(d，2H)，5.07-5.14(m，2H)，5.89-5.99(m，1H)，7.29-7.40(m，11H)；LRMS(ES)m/z 375[MH]+ 制備56 (4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-乙醛 將6-烯丙基-N2，N4-二芐基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(1.0g，2.7mmol)混懸于15ml四氫呋喃與30ml水的混合物中。添加鋨酸鉀(148mg，0.4mmol)及高碘酸鈉(1.17g，5.4mmol)后，將溶液在室溫下劇烈攪拌30分鐘。將乙酸乙酯(20ml)添加至反應(yīng)混合物中并將各相分溶，將有機(jī)萃取物用硫酸鎂干燥，真空濃縮并用100％ EtOAc洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜法純化，以產(chǎn)生3-(4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-丙烷-1，2-二醇(992mg，91％)。將中間體二醇在20ml丙酮中、在高碘酸鈉(1.17g，5.5mmol)存在下攪拌。2h后，將溶液在EtOAc與水之間分溶，將有機(jī)萃取物干燥(用MgSO4)且濃縮以產(chǎn)生橙色油狀標(biāo)題化合物(962mg，96％)。
1H NMR(CDCl3)δ 3.49(d，2H)，4.49-4.50(d，2H)，4.65-4.66(d，2H)，7.52-7.90(m，11H)，10.03(s，1H)； LCMS(APCI+)RT@3.74min，m/z 409[MH]+ 制備57 2-(4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-乙醇 將(4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-乙醛(250mg，0.66mmol)置于15ml二氯甲烷中攪拌。添加氫化硼鈉(38mg，0.99mmol)并將溶液在環(huán)境溫度下攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物在DCM與水之間分溶，將有機(jī)物用硫酸鎂干燥且濃縮以產(chǎn)生粗固體，用戊烷:EtOAc 4:1-1:1洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜純化以產(chǎn)生黃色固體的標(biāo)題化合物(134mg，53％)。
1H NMR(CDCl3)δ 2.68-2.70(t，2H)，3.83-3.86(t，2H)，4.49-4.51(d，2H)，4.72-4.74(d，2H)，5.86(s，1H)，7.29-7.38(m，10H)，9.50-9.54(bd，2H)；LRMS(ES)m/z 379[MH]+ 制備58 N2，N4-二芐基-6-(2-甲氧基-乙基)-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 將2-(4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-乙醇(134mg，35mmol)混懸于二氯甲烷(15ml)與三乙胺(59μl，0.43mmol)的混合物中并將溶液在冰浴中冷卻至5℃。添加甲磺酰氯(33μ1，0.43mmol)并將反應(yīng)混合物在環(huán)境溫度下攪拌1小時(shí)。再添加10mlDCM，將有機(jī)物用2×K2CO3(10％水溶液)洗滌，干燥且濃縮以產(chǎn)生粗油。將中間體甲磺酸鹽混懸于丙酮(20ml)中，添加甲醇鈉(96mg，1.7mmol)，將混合物在回流下加熱1小時(shí)。在真空中移除殘留溶劑，添加DCM并將溶液用2×H2O洗滌。將所合并的有機(jī)物用MgSO4干燥，濃縮并用8:1-4:1 Pent:EtOAc洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜法純化以產(chǎn)生黃色油狀標(biāo)題化合物(68mg，47％)。
1H NMR(CDCl3)δ 2.70-2.73(t，2H)，3.26(s，3H)，3.64-3.67(t，2H)，4.49-4.50(d，2H)，4.81-4.82(d，2H)，5.91(s，1H)，7.29-7.39(m，10H)，9.40-9.48(bd，2H)；LRMS(ES)m/z 393[MH]+ 制備59 N*2*，N*4*-二芐基-6-(2-甲氧基-乙基)-吡啶-2，3，3-三胺在阮內(nèi)鎳(20wt％，13mg)存在下，將N*2*，N*4*-二芐基-6-(2-甲氧基-乙基)-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(65mg，0.17mmol)置于THF(10ml)中攪拌。將混合物在室溫下、在60psi H2下攪拌2小時(shí)，然后用Arbocel墊過(guò)濾，用2×THF洗滌。將濾液真空濃縮以產(chǎn)生褐色油狀標(biāo)題化合物(47mg，78％)，其可直接用于下一步驟而無(wú)需進(jìn)一步純化；LRMS(ES)m/z363[MH]+ 制備60 1-芐基-4-芐基氨基-6-(2-甲氧基-乙基)-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮 將N*2*，N*4*-二芐基-6-(2-甲氧基-乙基)-吡啶-2，3，3-三胺(47mg，0.13mmol)置于乙腈(5ml)中攪拌。添加N，N-羰基二咪唑(105mg，0.65mmol)并將混合物在回流下加熱16小時(shí)。將溶液真空濃縮并用100％ DCM至964洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜法直接純化以產(chǎn)生作為與異構(gòu)體1-脫氮嘌呤的3:2混合物存在的淺褐色固體的標(biāo)題化合物(32mg，64％)；LRMS(ES)m/z 389[MH]+ 制備61 N2，N4-二芐基-6-[2-(2-甲氧基-乙氨基)-乙基]-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 將N*2*，N*4*-二芐基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-2，4-二胺(50mg，0.14mmol)混懸在2-甲氧基-乙胺(1ml)中并將混合物回流1小時(shí)。在真空中移除過(guò)量試劑，將殘余物溶于DCM(10ml)中，用2×H2O洗滌，干燥且濃縮。用DCM:MeOH 92:8洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜法純化粗物質(zhì)以產(chǎn)生黃色油狀標(biāo)題化合物(58mg，96％)。
1H NMR(CDCl3)δ 2.75-2.80(m，4H)，2.96-3.00(t，2H)，3.29(s，3H)，3.48-3.51(t，2H)，4.48-4.49(d，2H)，4.76-4.78(d，2H)，5.87(s，1H)，7.27-7.40(m，10H)，9.41-9.51(dt，2H)；LRMS(ES)m/z 436[MH]+ 制備62 [2-(4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-基)-乙基]-(2-甲氧基-乙基)-氨基甲酸叔丁酯 將N*2*，N*4*-二芐基-6-[2-(2-甲氧基-乙氨基)-乙基]-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(150mg，0.34mmol)混懸于DCM(10ml)中并將溶液冷卻至0℃，再將boc酸酐(95μl，0.41mmol)作為于5ml DCM中的溶液逐滴添加。將混合物加溫至室溫，1小時(shí)后，用10ml H2O驟冷。將有機(jī)萃取物干燥并真空濃縮以產(chǎn)生黃色油狀標(biāo)題化合物(170mg，92％)。
1H NMR(CDCl3)δ 1.41(s，9H)，2.68(t，2H)，3.30(s，3H)，3.42(bs，2H)，3.50(m，4H)，4.47-4.48(d，2H)，4.80-4.81(d，2H)，5.82(s，1H)，7.24-7.39(m，10H)；LRMS(ES)m/z 536[MH]+ 制備63 N2，N4-二芐基-3-硝基-6-噁唑-2-基-吡啶-2，4-二胺 在-78℃(干冰/丙酮浴)，將丁基鋰(12.8ml，20.5mmol)逐滴添加至噁唑(1.13ml，17.1mmol)于無(wú)水THF(20ml)中的被攪拌的溶液中，保持緩慢的添加速率以使得反應(yīng)溫度不超過(guò)-60℃。在此溫度將溶液攪拌10分鐘，然后逐滴添加氯化鋅(5.00g，36.7mmol)于THF(30ml)中的溶液。將溶液在-78℃攪拌15分鐘，然后移除冷卻浴，并將反應(yīng)混合物加溫至室溫。
用注射器將反應(yīng)混合物的等分樣品(19ml)添加至預(yù)密封且被氮?dú)獯迪吹奈⒉ㄆ?Biotage，10-20ml)中，該瓶含有N*2*，N*4*-二芐基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(1.11g，2.68mmol)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(373mg，0.53mmol)。將該瓶在微波照射(Biotage Initiator 8)下、在130℃加熱15分鐘。將反應(yīng)混合物真空濃縮，然后在2-甲基THF(80ml)與飽和氯化銨溶液(80ml)之間分溶。將混合物過(guò)濾，然后轉(zhuǎn)入分液漏斗中。將各層分離，然后用更多2-甲基THF(50ml)萃取水溶液。將所合并的有機(jī)物干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)。將所得褐色固體用EtOAc研磨且通過(guò)過(guò)濾收集固體，然后用EtOAc洗滌以產(chǎn)生褐色固體的產(chǎn)物(1.03g，96％)。
1H NMR(CDCl3)δ 4.59(d，J＝5.47Hz，2H)4.91(d，J＝5.47Hz，2H)6.93(s，1H)7.21-7.47(m，11H)7.78(s，1H)9.31-9.44(m，1H)9.54-9.63(m，1H)；LRMS(ES+)m/z 402[MH]+ 制備64 N2，N4-二芐基-6-噁唑-2-基-吡啶-2，3，4-三胺 將N*2*，N*4*-二芐基-3-硝基-6-噁唑-2-基-吡啶-2，4-二胺(1.02g，2.54mmol)溶于THF(60ml)中，然后添加MeOH(60ml)。將溶液在氫氣氛(80psi)下經(jīng)阮內(nèi)鎳(210mg，0.25mmol)氫化1小時(shí)。將反應(yīng)混合物用硅藻土墊過(guò)濾，然后蒸發(fā)以產(chǎn)生褐色膠體的標(biāo)題化合物(944mg，100％)。出于穩(wěn)定性考慮，其無(wú)需進(jìn)一步純化便可使用。
LCMS Rt＝2.41m/z 372[MH]+ 制備65 N2，N4-二芐基-6-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 將N-甲基咪唑(0.728ml，9.18mmol)溶于無(wú)水THF(25ml)中，然后將溶液冷卻至-15℃(冰/鹽浴)。將己烷(6.31ml，10.1mmol)中的正丁基鋰逐滴添加至溶液中(顏色由無(wú)色變?yōu)辄S色)。將溶液在-15℃攪拌1小時(shí)，然后逐滴添加無(wú)水氯化鋅(5.00g，36.7mmol)于無(wú)水THF(35ml)中的溶液。將溶液在-15℃攪拌1小時(shí)，然后緩慢加溫至室溫，然后攪拌1個(gè)多小時(shí)。
將該溶液的等分樣品(16ml)添加至預(yù)密封且被氮?dú)獯迪吹奈⒉ㄆ?Biotage，2.0-5.0ml)中，該瓶含有N*2*，N*4*-二芐基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(400mg，0.968mmol)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(136mg，0.193mmol)。將瓶在130℃、在微波照射(Biotage Initiator8)下加熱15分鐘。將反應(yīng)混合物真空濃縮。將殘余物在EtOAc(15ml)與2M氨溶液(15ml)之間分溶。使用分液漏斗將大部分水相移除(各層之間有少量乳液)。將有機(jī)層依次用更多的2M氨溶液(15ml)、鹽水(15ml)洗滌，然后干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物在Isco Companion二氧化硅柱(12g，Redisep)上進(jìn)行柱色譜。用EtOAc:庚烷洗脫，經(jīng)8個(gè)柱容積使梯度由20:80線性地增加至60:40，然后使4個(gè)柱容積在60:40等度。將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色固體的標(biāo)題化合物(240mg，60％)。
1H NMR(CD3OD)δ3.88(s，3H)4.67(d，J＝5.48Hz，2H)4.83(d，J＝5.48Hz，2H)6.92(d，J＝1.17Hz，1H)7.14(d，J＝1.17Hz，1H)7.17(s，1H)7.26-7.42(m，10H)9.43-9.66(m，2H)；LRMS(ES+)m/z 415[MH]+ 制備66 N2，N4-二芐基-6-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-吡啶-2，3，4-三胺 將N*2*，N*4*-二芐基-6-(1-甲基-1H-咪唑-2-基)-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(0.235g，0.567mmol)溶于THF(10ml)中，然后添加MeOH(10ml)。將溶液在氫氣氛(80psi)下經(jīng)阮內(nèi)鎳(0.050g，0.58mmol)氫化1小時(shí)。將反應(yīng)混合物用硅藻土墊過(guò)濾，然后蒸發(fā)以產(chǎn)生淺綠色固體的標(biāo)題化合物(218mg，100％)。出于穩(wěn)定性考慮，其無(wú)需進(jìn)一步純化便可使用。
LCMS Rt＝2.22m/z 385[MH]+ 制備67 (2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯 在0℃，將氯甲酸乙酯(5.96g)于無(wú)水2-甲基THF(50ml)中的溶液逐滴添加至2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基胺(15.00g)與三乙胺(10.1g)于無(wú)水2-甲基THF(100ml)中的溶液中，保持添加速率以使得反應(yīng)溫度上升不超過(guò)5℃。將反應(yīng)混合物加溫至室溫，然后在氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)。再添加一份氯甲酸乙酯(0.54g)并將混合物再攪拌1小時(shí)。添加水(50ml)并將各層分離。將水層用EtOAc(50ml)萃取并將所合并的有機(jī)物干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)為褐色固體。將此固體在二氧化硅(～19g)上預(yù)吸附，然后用EtOAc:庚烷洗脫、在Isco Companion二氧化硅柱(330g，Redisep)上進(jìn)行柱色譜。使1個(gè)柱容積(CV)的梯度在10:90等度，然后經(jīng)6個(gè)CV由10:90線性地增加至30:70。由此產(chǎn)生淺黃色發(fā)泡固體的標(biāo)題化合物(12.6g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.36(t，J＝7.10Hz，3H)，4.26(q，＝7.10Hz，2 H)，7.95(br，s，1 H)，8.59(s，1 H)，LCMS Rt＝3.22m/z368，370，372[MH]+ 制備68 (2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 將碳酸鉀(7.95g)添加至(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)氨基甲酸乙酯(10.62g)于丙酮(100ml)中的被攪拌的溶液中。然后依次添加5-(氯甲基)-2-甲基吡啶(4.89g)、碘化鈉(5.18g)。將混合物在氮?dú)夥障聰嚢?8小時(shí)。將反應(yīng)混合物過(guò)濾，真空濃縮然后在乙酸乙酯(100ml)與水(100ml)之間分溶。將有機(jī)物干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)為暗紫色膠，用EtOAc:庚烷洗脫、在Isco Companion二氧化硅柱(330g，Redisep)上進(jìn)行柱色譜，經(jīng)6個(gè)柱容積梯度由40:60線性地增加至80:20。由此形成綠色膠狀標(biāo)題化合物(8.5g)，將其靜置固化為淺綠色固體。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.24(t，J＝7.10Hz，3 H)2.59(s，3 H)4.19(q，J＝7.10Hz，2 H)4.79(s，2 H)7.17(s，1 H)7.19(d，J＝8.20Hz，1 H)7.57(dd，J＝8.20，2.34Hz，1 H)8.38(d，J＝2.34Hz，1 H)，LCMSRt＝2.44m/z 473，475，477[MH]+ 制備69 (2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 將(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(6.00g)溶于2-甲基四氫呋喃(60ml)中。將溶液等量分入3個(gè)可密封容器(Biotage，10-20ml)中。將氨水溶液(0.88gcm-3，20ml)添加至各瓶(共60ml)中。將瓶密封，然后將二相混合物在室溫下劇烈攪拌過(guò)夜。將三種反應(yīng)混合物合并且轉(zhuǎn)入分液漏斗中。添加乙酸乙酯(120ml)及水(120ml)。將各相分離，然后將有機(jī)物用鹽水(100ml)洗滌。將有機(jī)物干燥(用MgSO4)，然后蒸發(fā)為褐色膠。將此膠再溶于乙醚中，然后蒸發(fā)以形成黃色發(fā)泡固體的標(biāo)題化合物(5.4g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.16-1.27(m，3 H)2.58(s，3 H)4.10-4.21(m，2 H)4.87(s，2 H)6.34(s，2 H)6.61(s，1 H)7.18(d，J＝8.19Hz，1 H)7.66(s，1 H)8.41(d，J＝2.34Hz，1 H)，LCMSRt＝1.94m/z 412[MH]+ 制備70 [2-氨基-6-(4-甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 在-78℃(干冰/丙酮浴)，將丁基鋰(1.6M于己烷中，366μl)逐滴添加至在反應(yīng)瓶中的4-甲基噁唑(41mg)于THF(0.5ml)中的被攪拌的溶液中。在此溫度將溶液攪拌10分鐘，然后逐滴添加氯化鋅(199mg)于THF(1ml)中的溶液。將溶液在-78℃攪拌15分鐘，然后移除冷卻浴并將反應(yīng)混合物加溫至室溫。用注射器將此鋅噁唑溶液添加至預(yù)密封且被氮?dú)獯迪吹奈⒉ㄆ?Biotage，0.5-2.0ml)中，該瓶含有(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(34mg)。將該瓶在微波照射(BiotageInitiator 8)下、在60℃加熱15分鐘。然后將反應(yīng)混合物在乙酸乙酯(10ml)與飽和氯化銨水溶液(10ml)之間分溶。將各層分離并用乙酸乙酯(10ml)萃取水溶液。將所合并的有機(jī)物用鹽水(10ml)洗滌，然后干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物用4個(gè)柱容積(CV)的乙酸乙酯洗脫、在Isco Companion二氧化硅柱(12g，Redisep)上進(jìn)行柱色譜，然后經(jīng)10個(gè)CV使乙酸乙酯中的甲醇梯度由0線性地增加至5％。由此形成黃色膠狀標(biāo)題化合物(69mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.11-1.25(m，3 H)2.28(s，3 H)2.56(s，3 H)4.13-4.23(m，2 H)4.96(s，2 H)6.37(s，2 H)7.16(d，J＝7.80Hz，1 H)7.26(s，1 H)7.53(s，1 H)7.65-7.78(m，1 H)8.43(s，1 H)，LCMS Rt＝1.86m/z 413[MH]+ 制備71 5-乙基-噁唑 將乙基-5-乙基噁唑-4-甲酸酯(3.5g)溶于乙醇(45ml)中，添加氫氧化鈉(2.07g)于水(18ml)中的溶液。將反應(yīng)物在室溫下攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物減縮為～20ml，然后添加濃鹽酸以產(chǎn)生～1-2的pH值。將反應(yīng)混合物用CH2Cl2 3×30ml萃取。將被合并的有機(jī)萃取物用飽和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，過(guò)濾且蒸發(fā)以產(chǎn)生淺黃色固體。將此物溶解于喹啉(3ml)中，添加100mg氧化銅(II)。然后將反應(yīng)物在稍微減壓下加熱(油浴160℃)并在～60-70℃蒸餾出透明液體。由此形成透明油狀標(biāo)題化合物(790mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.2(t，3 H)，2.6(q，2 H)，6.65(s，1H)，7.7(s，1 H)。
制備72 [2-氨基-6-(5-乙基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用5-乙基-噁唑(47mg)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)，按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(79mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.13-1.25(m，3 H)1.33(t，J＝7.61Hz，3H)2.56(s，3 H)2.80(q，J＝7.41Hz，2 H)4.13-4.22(m，2 H)4.96(s，2H)6.31-6.45(m，2 H)6.97(s，1 H)7.16(d，J＝7.80Hz，1 H)7.26(s，1H)7.63-7.79(m，1 H)8.43(s，1 H)，LCMS Rt＝2.16m/z 427[MH]+ 制備73 5-異丙基-噁唑-4-甲酸乙酯 在0℃、在氮?dú)夥障聦惽杌宜嵋阴?4.52g)逐滴添加至KOtBu于THF(35ml)中的被攪拌的混懸液中。添加完成后，將暗褐色溶液攪拌30分鐘然后逐滴添加異丁酰氯(2.1ml)于THF(15ml)中的溶液，使溫度保持在約10℃以下。將反應(yīng)物攪拌1小時(shí)然后蒸干。將殘余物用乙酸(1.14ml)及水(25ml)處理，然后用醚(3×30ml)萃取。將所合并的醚萃取物用飽和鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，過(guò)濾且蒸發(fā)以產(chǎn)生褐色油，將其用二氯甲烷中的1％MeOH洗脫、通過(guò)柱色譜純化。由此產(chǎn)生無(wú)色油狀標(biāo)題化合物(1.91g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.25(d，6 H)，1.38(t，3 H)，3.8(m，1H)，4.35(q，2 H)，7.7(s，1 H)，LRMS m/z(API)184[MH]+，367[2MH]+ 制備74 5-異丙基-噁唑 將5-異丙基-噁唑-4-甲酸乙酯(1.89g)溶解于1N氫氧化鈉(10ml)與乙醇(0.5ml)的溶液中，并將混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。添加1NHCl溶液(約9ml)并將混合物攪拌幾分鐘。有白色固體結(jié)晶析出且通過(guò)過(guò)濾收集。干燥后，將此固體溶解于喹啉(3ml)中，添加氧化銅(120mg)。將反應(yīng)物在真空下加熱，使油浴溫度緩增至～170℃。蒸餾出透明液體，產(chǎn)生所需產(chǎn)物與喹啉的混合物。然后將此油在更低壓力(～180mBar)及溫度(70℃)下再蒸餾，產(chǎn)生透明油狀標(biāo)題化合物(260mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.24(d，6 H)，2.96(m，1 H)，6.7(s，1H)，7.7(s，1 H) 制備75 [2-氨基-6-(5-異丙基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用5-異丙基-噁唑(54mg)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)，按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(48mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.13-1.26(m，3 H)1.34(d，J＝6.63Hz，6H)2.56(s，3 H)3.04-3.15(m，1 H)4.10-4.23(m，2 H)4.96(s，2 H)6.39(s，2 H)6.94(s，1 H)7.16(d，J＝7.80Hz，1 H)7.21(s，1 H)7.63-7.76(m，1 H)8.43(s，1 H)，LCMS Rt＝2.30m/z 441[MH]+ 制備76 [2-氨基-6-(4，5-二甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用4，5-二甲基-噁唑(47mg)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)，按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(75mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.03-1.26(m，3 H)2.19(s，3 H)2.37(s，3 H)2.56(s，3 H)4.09-4.26(m，2 H)4.95(s，2 H)6.40(s，2H)7.16(d，J＝7.80Hz，1 H)7.21(s，1 H)7.62-7.83(m，1 H)8.42(s，1H)，LCMS Rt＝2.12m/z 427[MH]+ 制備77 噁唑-4-基-甲醇 在-78℃，經(jīng)15分鐘將DIBAL-H(56ml于甲苯中的1.0M溶液)逐滴添加至噁唑-4-甲酸乙酯(7.50g，53.1mmol)于THF(140ml)中的溶液。將所得溶液在-78℃攪拌30分鐘然后經(jīng)15分鐘再添加DIBAL-H(56ml于甲苯中的1.0M溶液，56.0mmol)。然后將反應(yīng)物由-78℃緩慢加溫至室溫歷時(shí)16小時(shí)。將所得亮黃色溶液在冰浴中冷卻至0℃且逐小份添加Na2SO4.10H2O(15.9g-與所添加的DIBAL-H重量相等)(注意緩慢添加以防止放熱)以促使鋁鹽沉淀。將混合物加溫至室溫，攪拌90分鐘后，將所得混懸液用硅藻土層過(guò)濾。將硅藻土塞用二氯甲烷(3×100ml)及甲醇(2×100ml)沖洗并將濾液合并。在減壓下移除溶劑，產(chǎn)生褐色油狀標(biāo)題化合物(4.8g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 4.60(s，2 H)，7.6(s，1 H)，7.9(s，1 H) 制備78 4-甲氧基甲基-噁唑 將噁唑-4-基-甲醇(750mg)溶于無(wú)水THF(38ml)中并將溶液冷卻至0℃。然后經(jīng)過(guò)4分鐘逐小份添加氫化鈉(365mg，9.1mmol)，添加結(jié)束后，將反應(yīng)物加溫至室溫歷時(shí)30分鐘。將反應(yīng)物再冷卻至0℃且逐小份添加甲基甲苯磺酸鹽(2.11g)。添加結(jié)束后，將反應(yīng)物加溫至室溫且攪拌16小時(shí)。將粗反應(yīng)混合物預(yù)吸附于硅膠上然后通過(guò)ISCOcombi-快速色譜(SiO2；DCM中的2至5％ MeOH的梯度洗脫，1％ NH3)純化以產(chǎn)生淺黃色液體的標(biāo)題化合物(473mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 3.41(s，3 H)，4.40(s，2 H)，7.61(s，1H)，7.85(s，1 H) 制備79 [2-氨基-6-(4-甲氧基甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用4-甲氧基甲基-噁唑(110mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(200mg)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(68mg)，按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(107mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.11-1.29(m，3 H)2.54(s，3 H)3.47(s，3 H)4.09-4.24(m，2 H)4.49(s，2 H)4.96(s，2 H)6.34(s，2H)7.13(d，J＝7.81Hz，1 H)7.32(s，1 H)7.63-7.72(m，1 H)7.76(s，1H)8.42(s，1 H)，LCMS Rt＝1.62m/z 443[MH]+ 制備80 (2-氨基-3-硝基-6-噻唑-2-基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用噻唑(42mg)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)，按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(79mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.06-1.30(m，3 H)2.56(s，3 H)4.07-4.25(m，2 H)4.99(s，2 H)6.26(s，2 H)7.16(d，J＝7.80Hz，1 H)7.46(s，1 H)7.54(d，J＝3.12Hz，1 H)7.64-7.84(m，1 H)7.96(d，J＝3.12Hz，1 H)8.35-8.50(m，1 H)，LCMS Rt＝2.11m/z 415[MH]+ 制備81 2-氯-3-氧代-戊酸乙酯 在室溫下將磺酰氯(6.50ml)逐滴添加至丙酰基乙酸乙酯(11.70g)中并將反應(yīng)物攪拌16小時(shí)。將反應(yīng)混合物在真空下放置1小時(shí)以移除高度揮發(fā)性物質(zhì)，然后將殘余物在“高”真空下蒸餾以產(chǎn)生油，將油在75-79℃、在6Mbar(＝4.5mmHg)真空下蒸餾，從而產(chǎn)生透明油狀標(biāo)題化合物(13.54g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.11(t，3 H)，1.31(t，3 H)，2.75(q，2H)，4.25(q，2 H)，4.80(s，1 H) 制備82 4-乙基-噁唑-5-甲酸乙酯 將2-氯-3-氧代-戊酸乙酯(13.5g)溶于75ml的95％甲酸中。添加甲酸銨(27.6g)并將反應(yīng)物在回流溫度下、在氮?dú)夥障录訜?小時(shí)。冷卻至室溫后，將反應(yīng)混合物蒸發(fā)并將殘余物用醚(3×50ml)萃取。將所合并的醚萃取物用水及鹽水洗滌，干燥(用MgSO4)，過(guò)濾且蒸發(fā)以產(chǎn)生粗油(9g)。將油用CH2Cl2/MeOH 99:1洗脫、通過(guò)硅膠層析法純化，產(chǎn)生淺褐色油狀標(biāo)題化合物(3.77g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.25(t，3 H)，1.41(t，3 H)，2.90(q，2H)，4.41(q，2 H)，7.85(s，1 H) 制備83 4-乙基-噁唑-5-甲酸 將4-乙基-噁唑-5-甲酸乙酯(4.6g)置于1N NaOH(25ml)與乙醇(1ml)的溶液中攪拌。然后將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)。添加乙醚(25ml)，然后將水層分離并用1N HCl(26ml)酸化。通過(guò)過(guò)濾收集形成黃色固體，然后用水、正戊烷洗滌，產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(2.6g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.30(t，3 H)，2.95(q，2 H)，8.0(s，1H) 制備84 4-乙基-噁唑 將4-乙基-噁唑-5-甲酸(1.2g)溶解于喹啉(3ml)中，添加CuO(50mg)。然后將反應(yīng)物加熱至215-20℃，收集無(wú)色餾分，從而產(chǎn)生混濁油狀標(biāo)題化合物(621mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.21(t，3 H)，2.55(q，2 H)，7.4(s，1H)，7.8(s，1 H) 制備85 [2-氨基-6-(4-乙基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用4-乙基-噁唑(47mg)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)，按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(74mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.09-1.22(m，3 H)1.25(t，J＝7.42Hz，3H)2.50(s，3 H)2.56-2.68(m，2 H)4.04-4.21(m，2 H)4.92(s，2 H)6.33(s，2 H)7.10(d，J＝7.81Hz，1 H)7.23(s，1 H)7.46-7.49(m，1 H)7.59-7.69(m，1 H)8.39(s，1 H)，LCMS Rt＝2.07m/z 427[MH]+ 制備86 1-溴-3-甲基-丁-2-酮 將3-甲基-2-丁酮(5g)于甲醇(55ml)中的溶液冷卻至-30℃。然后逐滴添加溴(2.97μl)，一旦添加結(jié)束，則將反應(yīng)物加溫至室溫且攪拌3.5小時(shí)。然后將反應(yīng)物傾注入水(100ml)中，并用乙醚(2×100ml)萃取，將所合并的萃取物干燥(用MgSO4)，過(guò)濾且濃縮。將油狀殘余物靜置后形成兩層不同的油層，將其分離。保留底層，從而產(chǎn)生淺黃色油狀標(biāo)題化合物(5.14g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.15(d，6 H)，2.95(m，1 H)，3.95(s，1H) 制備87 4-異丙基-噁唑 將1-溴-3-甲基-丁-2-酮(1.0g)添加至甲酰胺(3.0ml)中并將反應(yīng)混合物加熱至110℃歷時(shí)6小時(shí)。冷卻至室溫后，將反應(yīng)混合物用40％氫氧化鉀溶液(10ml)稀釋，攪拌幾分鐘然后用乙醚(3×10ml)萃取。將醚萃取物合并且謹(jǐn)慎地蒸發(fā)。將所得褐色機(jī)油用正戊烷研磨并將溶劑傾析。重復(fù)此方法(×2)，然后蒸發(fā)殘留戊烷，以產(chǎn)生淺褐色油狀標(biāo)題化合物(65mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.30(d，6 H)，2.85(m，1 H)，4.41(q，2H)，7.35(s，1 H)，7.80(s，1 H) 制備88 [2-氨基-6-(4-異丙基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用4-異丙基-噁唑(54mg)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)，按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(71mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.10-1.22(m，3 H)1.27(d，J＝6.64Hz，6H)2.50(s，3 H)2.82-2.97(m，1 H)3.96-4.27(m，2 H)4.92(s，2 H)6.34(s，2 H)7.10(d，J＝7.81Hz，1 H)7.23(s，1 H)7.45(s，1 H)7.59-7.70(m，1 H)8.39(s，1 H)，LCMS Rt＝2.23m/z 441[MH]+ 制備89 芐基-(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯 將碳酸鉀(5.57g)添加至(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(7.44g)于丙酮(100ml)中的被攪拌的溶液中，然后依次添加芐基溴(2.87ml)、碘化鈉(3.63g)。將混合物在氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物過(guò)濾以移除所沉淀的白色固體，真空濃縮，然后在乙酸乙酯(100ml)與水(100ml)之間分溶。將有機(jī)物干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)為黃色油。將此粗油吸附于硅膠上然后用EtOAc:庚烷洗脫、通過(guò)Isco Companion二氧化硅柱(80g，Redisep)層析法純化，梯度由10:90線性地增至50:50。由此產(chǎn)生黃色油狀標(biāo)題化合物(7.50g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.20(t，3 H)，4.18(q，2 H)，4.8(br，s，2H)，7.0(s，1 H)，7.20(m，2 H)，7.35(m，3 H)，LRMS m/z(API)458，460，462[MH]+ 制備90 (2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯 將芐基-(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(7.50g)溶于2-甲基-四氫呋喃(15ml)中且將該溶液放置于可密封容器中。添加濃氨水溶液(15ml)然后將瓶密封，并將二相混合物在室溫下劇烈攪拌36小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)入分液漏斗中，添加乙酸乙酯(120ml)及水(120ml)。將各相分離，然后將有機(jī)物用鹽水(100ml)洗滌，干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)為黃色油。靜置后，結(jié)晶出黃色固體。將此物通過(guò)過(guò)濾收集并用戊烷洗滌，產(chǎn)生黃色固體的標(biāo)題化合物(6.64g)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm1.21(t，3H)，4.19(q，2H)，4.82(br，s，2H)，6.25(br，s，2H)，6.55(s，1H)，7.20-7.35(m，5H)，LRMS m/z(API)395，397[MH]+ 制備91 [2-氨基-6-(4-甲氧基甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯 使用4-甲氧基甲基-噁唑(114mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯(200mg)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(71mg)，按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(160mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.20(t，J＝7.03Hz，3 H)3.46(s，3 H)4.12-4.22(m，2 H)4.47(s，2 H)4.92-5.03(m，2 H)6.32(s，2 H)7.28-7.35(m，6 H)7.74(s，1 H)，LCMS Rt＝3.08m/z 428[MH]+ 制備92 二甲基-噁唑-4-基甲基-胺 經(jīng)5分鐘將亞硫酰氯(5.51ml)逐滴添加至噁唑-4-基-甲醇(1.51g)于二氯甲烷(50ml)中的冷溶液(0℃)中。將所得混濁溶液在室溫下攪拌5分鐘然后加熱至回流。加熱后，溶液變得透明且為深黃色。在回流溫度下10分鐘后，將溶液冷卻至室溫并在減壓下移除過(guò)量的亞硫酰氯及溶劑以產(chǎn)生相應(yīng)的氯化物化合物，其無(wú)需進(jìn)一步純化便可使用。在冰浴中將二甲胺(38ml于THF中的2.0M溶液)冷卻至0℃且經(jīng)10分鐘逐小份添加該氯化物(1.74g)于無(wú)水THF(50ml)中的溶液。然后使所得混懸液反應(yīng)16小時(shí)。移除溶劑以產(chǎn)生暗褐色/黑色固體，然后將其預(yù)吸附于二氧化硅上并用具有10％ NH3的二氯甲烷中的5至15％MeOH洗脫、通過(guò)硅膠上的ISCO combi-快速色譜純化。由此產(chǎn)生暗褐色粘油狀標(biāo)題化合物(335mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 2.35(s，6 H)，3.50(s，2 H)，7.62(s，1H)，7.85(s，1 H) 制備93 [2-氨基-6-(4-二甲基氨基甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯 使用二甲基-噁唑-4-基甲基-胺(128mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯(200mg)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(71mg)，按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(99mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.20(t，J＝7.03Hz，3 H)2.32(s，6 H)3.49(s，2 H)4.13-4.23(m，2 H)4.92-5.03(m，2 H)6.33(s，2 H)7.28-7.36(m，6 H)7.68(s，1 H)，LCMS Rt＝1.86m/z 441[MH]+ 制備94 {2-氨基-3-硝基-6-[1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑-2-基]-吡啶-4-基}-芐基-氨基甲酸乙酯 使用1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-咪唑(201mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯(200mg)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(71mg)，按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(174mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm-0.04(s，9 H)0.87-0.94(m，2 H)1.19(t，J＝7.03Hz，3 H)3.49-3.59(m，2 H)4.10-4.22(m，2 H)4.98(s，2 H)5.93(s，2 H)6.18(s，2 H)7.18(s，1 H)7.23(s，1 H)7.28-7.38(m，5 H)7.53(s，1 H) 制備95 (2-氨基-6-甲基硅烷基-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯 將甲硫醇鈉(180mg)逐滴添加至(2-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯(300mg)于甲醇:THF(3:1，4ml)中的被攪拌的混懸液中。將混合物密封于反應(yīng)瓶中，然后在室溫下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物用甲醇稀釋，然后直接地預(yù)吸附于硅膠上。將粗物質(zhì)用EtOAc:庚烷洗脫、通過(guò)Isco Companion二氧化硅柱(12g，Redisep)進(jìn)行柱色譜，經(jīng)6個(gè)柱容積梯度由30:70線性增至50:50。將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色膠狀標(biāo)題化合物(297mg)。
1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δ ppm 1.04-1.22(m，3 H)2.43(s，3 H)3.96-4.24(m，2 H)4.35-4.55(m，1 H)5.03-5.17(m，1 H)6.13(s，2 H)7.12-7.47(m，6 H)，LCMS Rt＝3.29m/z 363[MH]+ 制備96 [2-氨基-6-(2-氟-苯基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯 將2-氟-苯基硼酸(34mg)、噻吩-2-甲酸銅(I)(79mg)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(19mg)添加至微波瓶中。然后將瓶用氮?dú)獯迪辞颐芊?。然后?2-氨基-6-甲硫基-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯(42mg)于無(wú)水THF(0.5ml)中的溶液添加該瓶中，并將混合物在微波照射(CEM)下、在100℃加熱10分鐘。然后將反應(yīng)混合物用甲醇稀釋，用Arbocel、在陽(yáng)離子交換濾筒(Bakerbond，磺酸粘合相，1g)上直接過(guò)濾。將濾筒用甲醇(2×5ml)洗滌以移除雜質(zhì)然后通過(guò)用甲醇中的氨(2M，5ml)洗脫來(lái)釋出產(chǎn)物。將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色膠狀標(biāo)題化合物(31mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.03-1.31(m，3 H)4.16(s，2 H)4.91(br.s.，1 H)6.20(s，2 H)6.95(s，1 H)7.07(dd，J＝11.71，8.20Hz，1H)7.16-7.22(m，1H)7.21-7.42(m，7H)7.84-7.93(m，1H)，LCMSRt＝3.50m/z 411[MH]+ 制備97 [2-氨基-6-(3-氟-苯基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯 使用3-氟-苯基硼酸、按照制備96中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(18mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.08-1.35(m，3 H)4.19(s，2 H)5.29(br.s.，2 H)6.29(s，2 H)6.66(s，1 H)7.04-7.17(m，1 H)7.28-7.40(m，7 H)7.43-7.55(m，1 H)，LCMS Rt＝3.53m/z 411[MH]+ 制備98 [2-氨基-6-(4-氟-苯基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯 使用4-氟-苯基硼酸、按照制備96中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(28mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.19(s，3 H)4.19(s，2 H)5.33(br.s.，2 H)6.31(s，2 H)6.63(s，1 H)7.03-7.13(m，2 H)7.29-7.38(m，5H)7.68-7.77(m，2 H)，LCMS Rt＝3.52m/z 411[MH]+ 制備99 (2-氨基-6-甲氧基-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯 謹(jǐn)慎地將氫化鈉(9mg)溶解于甲醇(0.5ml)中然后在室溫下將該溶液添加至(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯(50mg)于THF(0.5ml)中的溶液中。將反應(yīng)物在氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)，然后直接將溶液預(yù)吸附于硅膠上。將混合物用乙酸乙酯:庚烷洗脫、通過(guò)Isco Companion層析純化，經(jīng)若干個(gè)柱容積，梯度由20:80線性地增至60:40。將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色膠狀標(biāo)題化合物(23mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.15(s，3 H)3.84(s，3 H)3.97-4.32(m，2 H)4.42(d，J＝15.05Hz，1 H)5.21(d，J＝15.05Hz，1 H)5.77(s，1 H)6.61(br.s.，2 H)7.23-7.38(m，5 H)，LCMS Rt＝3.19m/z347[MH]+ 制備100 (2-氨基-6-乙氧基-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯 使用乙醇、按照制備99中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生灰白色固體的產(chǎn)物(31mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.10-1.28(m，3 H)1.31(t，J＝7.03Hz，3H)3.97-4.32(m，4 H)4.43(d，J＝15.83Hz，1 H)5.20(d，J＝15.83Hz，1H)5.70-5.86(m，1 H)6.61(br.s.，2 H)7.26-7.36(m，5 H)，LCMS Rt＝3.36m/z 361[MH]+ 制備101 (2-氨基-6-丙氧基-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯 使用丙醇、按照制備99中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生灰白色固體的產(chǎn)物(30mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 0.95(t，J＝7.42Hz，3 H)1.07-1.33(m，3H)1.62-1.79(m，2 H)3.95-4.29(m，4 H)4.44(d，J＝15.63Hz，1 H)5.20(d，J＝15.63Hz，1 H)5.67-5.90(m，1 H)6.61(br.s.，2 H)7.25-7.41(m，5 H)，LCMS Rt＝3.51m/z 375[MH]+ 制備102 (2-氨基-6-甲基氨基-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯 在室溫下將甲胺(40％水溶液)(0.055ml)添加至(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯(50mg)于THF(0.5ml)中的溶液中。將反應(yīng)物在氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)，然后直接將溶液預(yù)吸附于硅膠上。將混合物用乙酸乙酯:庚烷洗脫、通過(guò)Isco Companion層析純化，經(jīng)若干個(gè)柱容積，梯度由20:80線性地增至60:40。將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色膠狀標(biāo)題化合物(30mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.04-1.40(m，3 H)2.82(s，3 H)3.97-4.33(m，3 H)4.75-5.04(m，1 H)5.22-5.49(m，2 H)6.79(br.s.，2 H)7.28-7.39(m，5 H)，LCMS Rt＝2.83m/z 346[MH]+ 制備103 (2-氨基-6-乙基氨基-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯 使用乙胺(70％水溶液)(0.051ml)、按照制備102中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(35mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.05-1.37(m，6 H)3.23(s，2 H)3.93-4.35(m，3 H)4.84(s，1 H)5.17-5.52(m，2 H)6.75(br.s.，2 H)7.29-7.42(m，5 H)，LCMS Rt＝3.0m/z 360[MH]+ 制備104 (2-氨基-6-丙基氨基-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯 使用1-丙胺(0.052ml)、按照制備102中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(35mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 0.91(t，J＝7.42Hz，3 H)1.06-1.38(m，3H)1.44-1.55(m，2 H)3.14(s，2 H)3.93-4.30(m，3 H)4.75-5.07(m，1H)5.22-5.48(m，2 H)6.77(br.s.，2 H)7.28-7.37(m，5 H)，LCMS Rt＝3.16m/z 374[MH]+ 制備105 (2-氨基-6-丁基氨基-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯 使用正丁胺(0.063ml)、按照制備102中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(39mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 0.92(t，J＝7.42Hz，3 H)1.12-1.37(m，5H)1.41-1.51(m，2 H)3.17(s，2 H)3.98-4.31(m，3 H)4.84(s，1 H)5.26-5.47(m，2 H)6.75(br.s.，2 H)7.28-7.36(m，5 H)，LCMS Rt＝3.31m/z 388[MH]+ 制備106 [2-氨基-6-(2-甲氧基-乙氨基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯 使用2-甲氧基乙胺(1.0ml)及(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯(150mg)、按照制備102中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色膠狀產(chǎn)物(121mg)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 1.21(t，3 H)，3.35(s，3 H)，3.45(m，4H)，4.20(q，2 H)，5.25(br，s，2 H)，7.20-7.35(m，5 H)，LRMS m/z(API)390[MH]+，388[MH]-。
制備107 (2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-三氟甲基-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用碳酸鉀(1.50g)、丙酮(40ml)中的(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(2.0g)、5-(氯甲基)-2-三氟甲基吡啶(1.06g)及碘化鈉(0.98g)、按照制備68中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物。由此產(chǎn)生黃色油狀產(chǎn)物(2.79g)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 1.20(t，3 H)，4.20(q，2 H)，4.85(s，2H)，7.28(s，1 H)，7.71(d，1 H)，7.88(dd，1 H)，8.61(d，1 H) 制備108 (2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用(2，6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(2.75g)、氨水(11ml)及2-甲基-THF(11ml)、按照制備69中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物。由此產(chǎn)生黃色油狀產(chǎn)物(1.92g)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 1.21(t，3 H)，4.11(q，2H)，4.95(br，s，2 H)，6.41(br，s，2 H)，6.60(s，1 H)，7.65(d，1H)，7.95(m，1 H)，8.65(m，1 H) 制備109 (3-氰基-芐基)-(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯 使用碳酸鉀(1.50g)、丙酮(40ml)中的(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(2.0g)、3-氯甲基-苯甲腈(0.82g)及碘化鈉(0.98g)、按照制備68中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物。由此產(chǎn)生黃色油狀產(chǎn)物(2.62g)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 1.20(t，3 H)，4.15(q，2H)，4.80(br，s，2 H)，7.15(s，1 H)，7.5(m，2 H)，7.61(m，1 H)，7.65(m，1H) 制備110 (2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(3-氰基-芐基)-氨基甲酸乙酯 使用(3-氰基-芐基)-(2，6-二溴-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(2.32g)、氨水(10.2ml)及2-甲基-THF(10.2ml)、按照制備68中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物。由此產(chǎn)生黃色固體的產(chǎn)物(1.51g)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ ppm 1.20(t，3 H)，4.21(q，2H)，4.95(br，s，2 H)，6.35(br，s，2 H)，6.59(s，1 H)，7.5(m，1H)，7.6(m，3 H) 制備111 (2-氨基-3-硝基-6-噁唑-2-基-吡啶-4-基)-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用噁唑(30mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(30mg)，按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色固體的產(chǎn)物(61mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.10-1.31(m，3 H)4.02-4.30(m，2 H)5.07(s，2 H)6.39(s，2 H)7.32(s，1 H)7.35(s，1 H)7.69(d，J＝7.82Hz，1 H)7.84(s，1 H)8.01(d，J＝5.47Hz，1 H)8.70(s，1 H)，LCMS Rt＝3.02m/z 453[MH]+ 制備112 [2-氨基-6-(4-甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 使用4-甲基-噁唑(36mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-三氟甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(100mg)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(30mg)、按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色固體的產(chǎn)物(44mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.10-1.25(m，3 H)2.28(s，3 H)4.09-4.25(m，2 H)5.06(s，2 H)6.41(s，2 H)7.25(s，1 H)7.55(d，J＝1.17Hz，1 H)7.69(d，J＝8.21Hz，1 H)8.01(d，J＝7.03Hz，1H)8.70(s，1 H)，LCMS Rt＝3.13m/z 467[MH]+ 制備113 (2-氨基-3-硝基-6-噁唑-2-基-吡啶-4-基)-(3-氰基-芐基)-氨基甲酸乙酯 使用噁唑(33mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(3-氰基-芐基)-氨基甲酸乙酯(100mg)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(33mg)、按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色固體的產(chǎn)物(67mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.20(t，J＝7.03Hz，3 H)4.17(s，2 H)4.99(s，2 H)6.36(s，2 H)7.26(s，1 H)7.34(s，1 H)7.46(t，J＝7.62Hz，1 H)7.59(d，J＝7.42Hz，1 H)7.62-7.68(m，2 H)7.82(s，1 H)，LCMSRt＝2.93m/z 409[MH]+ 制備114 [2-氨基-6-(4-甲基-噁唑-2-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-(3-氰基-芐基)-氨基甲酸乙酯 使用4-甲基-噁唑(40mg)、(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-(3-氰基-芐基)-氨基甲酸乙酯(100mg)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(30mg)、按照制備70中的實(shí)例制備標(biāo)題化合物，產(chǎn)生黃色固體的產(chǎn)物(65mg)。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δ ppm 1.10-1.25(m，3 H)2.28(s，3 H)4.10-4.23(m，2 H)4.99(s，2 H)6.39(s，2 H)7.20(s，1 H)7.46(t，J＝7.62Hz，1 H)7.54(d，J＝1.17Hz，1 H)7.60(d，J＝7.42Hz，1H)7.63-7.69(m，2 H)，LCMS Rt＝3.04m/z 423[MH]+ 制備115 4-氨基-1-芐基-6-溴-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮 將(2-氨基-6-溴-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯(50mg，0.13mmol)溶于AcOH(3ml)中。添加鐵粉(43mg，0.76mmol)并將混合物在室溫下劇烈攪拌24小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc(20ml)及水(10ml)稀釋。將混合物用硅藻土過(guò)濾并用EtOAc(20ml)洗滌。將各層分離并將有機(jī)層用水(10ml)、飽和NaHCO3水溶液(2×10ml)及鹽水(10ml)洗滌，用MgSO4干燥并真空濃縮。將粗物質(zhì)研磨于戊烷中，過(guò)濾并在真空中、在40℃干燥以產(chǎn)生米黃色固體的標(biāo)題化合物(15mg)。
1H NMR(d6-DMSO)δ 10.47(br s，1H)，7.36-7.26(m，5H)，6.70(s，1H)，6.05(br s，2H)，4.94(s，2H)；LRMS(APCI及ES)m/z 319/321[MH]+。
制備116 芐基-(2，3-二氨基-6-吡唑-1-基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯 將(2-氨基-3-硝基-6-吡唑-1-基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯(65.4mg，0.171mmol)溶于甲醇(5ml)中并在室溫、80psi H2下經(jīng)阮內(nèi)鎳(25mg)氫化1小時(shí)。將反應(yīng)混合物用Arbocel短塞過(guò)濾然后將濾液在真空中蒸發(fā)以產(chǎn)生58mg褐色殘余物狀標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ 1.15(m，3H)，2.90(s br，2H)，3.50(m，2H)，4.12(d，2H)，4.20(s br，2H)，6.28(s br，1H)，7.10(s br，1H)，7.20-7.35(m，5H)，7.85(s，1H)，8.30(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 353(MH+)。
制備117 (2-氨基-3-硝基-6-[1，2，4]三唑-1-基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯 標(biāo)題化合物按照制備116中的實(shí)施例制備。
1H NMR(CDCl3)δ 1.20(t，3H)，4.19(四重峰，2H)，5.00(sbr，2H)，6.37(sbr，2H)，7.09(s，1H)，7.27-7.37(m，5H)，8.03(s，1H)，9.00(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 384(MH+)。
制備118 (ai)(2-氨基-3-硝基-6-[1，2，3]三唑-2-基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯及(bi)(2-氨基-3-硝基-6-[1，2，3]三唑-1-基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯
將(2-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯(100mg，0.285mmol)溶于乙腈(10ml)中然后添加1，2，3-三唑(39.4mg，0.570mmol)、碳酸鉀(78.8mg，0.570mmol)。將黃色溶液在70℃、在氮?dú)夥障聰嚢?8小時(shí)。將所得暗橙色反應(yīng)混合物在真空中蒸發(fā)并將殘余物溶于EtOAc中并用水萃取。將有機(jī)萃取物合并，被無(wú)水硫酸鎂干燥并真空濃縮。通過(guò)自動(dòng)純化(chiralpak柱，50:50甲醇:乙醇)將2種結(jié)構(gòu)異構(gòu)體分離以產(chǎn)生均為黃色固體的48.1mg(ai)(2-氨基-3-硝基-6-[1，2，3]三唑-2-基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯及34.9mg的(bi)(2-氨基-3-硝基-6-[1，2，3]三唑-1-基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯。
1H NMR(CDCl3)(ai)δ 1.19(t，3H)，4.18(d，2H)，5.00(s br，2H)，6.62(sbr，2H)，7.25-7.36(m，6H)，7.87(s，1H).LRMS(ES+)m/z 384(MH+)。
1H NMR(CDCl3)(bi)δ 1.21(t，3H)，4.20(q，2H)，5.02(s br，2H)，6.35(sbr，2H)，7.24-7.40(m，6H)，7.77(s，1H)，8.40(d，1H).LRMS(ES+)m/z384(MH+)。
制備119 [2-氨基-6-(4-氟-吡唑-1-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯 在氮?dú)夥障?，?2-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯(100mg，0.285mmol)、4-氟吡唑(24.5mg，0.285mmol)及碳酸鉀(118mg，0.855mmol)一起置于5ml乙腈中攪拌。將反應(yīng)物加熱至回流溫度歷時(shí)3小時(shí)，然后冷卻至環(huán)境溫度過(guò)夜。
將溶劑蒸發(fā)并將殘余物的二氯甲烷可溶性部分用二氯甲烷中的1％甲醇洗脫、通過(guò)二氧化硅層析法純化。將含有純凈物質(zhì)的洗脫組分與0.66的Rf在同一洗脫液中合并且蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色膠狀標(biāo)題化合物(106mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.20(寬單峰，3H)，4.17(寬單峰，2H)，4.95(寬雙峰，2H)6.38(寬單峰，2H)7.15(s，1H)7.35(m，5H)7.58(d，1H)8.23(d，1H)；LRMS(ES+)m/z 401(MH+) 使用與制備119中所述相同的方法制備以下化合物。
制備120 [2-氨基-6-(3，5-二甲基-吡唑-1-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.19(寬單峰，3H)，2.24(s，3H)2.62(s，3H)4.16(寬單峰，2H)，4.94(寬雙峰，2H)5.98(s，1H)6.36(寬單峰，2H)7.21(s，1H)7.32(m，5H)；LRMS(ES+)m/z 411(MH+)。
制備121 [2-氨基-6-(4-甲基-吡唑-1-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.20(寬單峰，3H)，2.14(s，3H)4.16(寬單峰，2H)，4.95(寬雙峰，2H)6.39(寬單峰，2H)7.16(s，1H)7.36(m，5H).7.53(s，1H)8.15(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 397(MH+) 制備122 [2-氨基-6-(3-三氟甲基-吡唑-1-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.22(寬單峰，3H)，4.20(寬單峰，2H)，5.00(寬雙峰，2H)，6.33(寬單峰，2H)6.69(d，1H)，7.22(s，1H)，7.35(m，5H)，8.45(d，1H)；LRMS(ES+)m/z451(MH+)。
制備123 [2-氨基-6-(5-甲基-3-三氟甲基-吡唑-1-基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.22(寬單峰，3H)，2.69(s，3H)，4.20(寬單峰，2H)，5.00(寬單峰，2H)，6.29(寬單峰，2H)，6.41(s，1H)，7.19(s，1H)，7.33(m，5H)；LRMS(ES+)m/z 465(MH+)。
制備124 {2-氨基-6-[4-(2-羥基-乙基)-吡唑-1-基]-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯 1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.20(寬峰，3H)，2.78(t，2H)，3.85(q，2H)4.18(寬單峰，2H)，4.98(寬單峰，2H)，6.37(寬單峰，2H)，7.17(s，1H)，7.33(m，5H)，7.61(s，1H)，8.28(s，1H)；LRMS(ES+)m/w 427(MH+) 制備125 1-芐基-4-芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸-(1-羥亞氨基-乙基)-酰胺 在反應(yīng)瓶中，將CDI(52mg，0.32mmol)添加至1-芐基-4-芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸(80mg，0.21mmol)與Hunnigs堿(83μl，0.64mmol)于無(wú)水DMF中的溶液中。將瓶密封并將混合物在室溫下攪拌15分鐘。添加N-羥基乙脒(24mg，0.32mmol)并將混合物在鋁塊中加熱至60℃。將混合物在此溫度攪拌3小時(shí)，然后冷卻并真空濃縮。將殘余物在EtOAc(15ml)與水(5ml)之間分溶。將各層分離并將有機(jī)相用鹽水(5ml)洗滌。此時(shí)，有一些固體沉淀，置于分液漏斗內(nèi)。用MeOH將其洗入有機(jī)相內(nèi)，然后將有機(jī)物干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)以產(chǎn)生白色固體的最終產(chǎn)物(120mg，130％)。該物質(zhì)可能含有無(wú)機(jī)物質(zhì)，但就純化而言可用于下一步驟。
1H NMR CD3OD δ 1.94(s，3H)4.54(s，2H)5.16(s，2H)7.16-7.46(m，11H)。
LCMS Rt＝3.47m/z 431[MH]+ 制備126 N2，N2-二芐基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 將2，6-二溴-4-氨基-5-硝基-吡啶(3.52g)溶于2-甲基THF(40ml)中并將溶液在冰浴中冷卻至<5℃。將二芐胺(2.39ml)與三乙胺(2.48ml)于2-甲基THF(20ml)中的溶液逐滴添加至二溴吡啶溶液中，并將反應(yīng)混合物加溫至室溫并在氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)。再添加二芐胺(684μl)及三乙胺(496μl)，并將混合物在室溫下再攪拌5小時(shí)，然后再添加二芐胺(684μl)及三乙胺(496μl)，并將混合物在室溫下再攪拌16小時(shí)。
將混合物轉(zhuǎn)入分液漏斗中，然后添加水(60ml)。將各層分離并將水溶液用EtOAc(60ml)再萃取。將所合并的有機(jī)物干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)為橙色膠。使該膠自MeOH:水(90:10，～200ml)中結(jié)晶以產(chǎn)生固體，將其過(guò)濾并用MeOH:水(90:10)洗滌，然后在真空下干燥以產(chǎn)生橙色結(jié)晶固體的標(biāo)題化合物(3.6g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 4.45(s，4H)，5.95(br，s，2H)，6.22(s，1H)，7.05-7.15(m，4H)，7.21-7.35(m，6H)。LCMS Rt＝3.73m/z 415[MH]+ 制備127 N2，N2-二芐基-6-溴-N4-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-3-硝基吡啶-2，4-二胺 在氮?dú)夥障聦⑹宥〈尖?448mg)逐滴添加至N2，N2-二芐基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(1500mg，3.63mmol)于THF(40ml)中的冷溶液(-18℃-鹽/冰浴)中。添加堿后，溶液由黃色變?yōu)樯罴t色/橙色。將溶液在冷卻浴中攪拌5分鐘。
將5-溴甲基-2-甲基-吡啶氫溴酸鹽(1160mg)在飽和NaHCO3溶液(20ml)與2-Me THF(20ml)之間分溶。將各相分離并將有水溶液用2-MeTHF(20ml)再萃取。將所合并的有機(jī)物干燥(用MgSO4)，然后用滴液漏斗逐滴添加至氨基吡啶與KOtBu混合物中。顏色由紅色/橙色變?yōu)辄S色/橙色。將混合物在冷卻浴中緩慢加溫至室溫，然后在室溫、在氮?dú)夥障聰嚢?8小時(shí)。將反應(yīng)混合物再冷卻至-18℃(冰/鹽浴)，然后依次添加KOtBu(102mg)、四-正丁基碘化銨(670mg)。移除冷卻浴并將混合物加溫至室溫，然后再攪拌4小時(shí)。將反應(yīng)混合物直接預(yù)吸附于二氧化硅上，然后用EtOAc:庚烷洗脫、通過(guò)Isco Companion二氧化硅柱(80g，Redisep)進(jìn)行柱色譜，經(jīng)10個(gè)柱容積梯度由40:60線性增至80:20。將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色固體的標(biāo)題化合物(0.99g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.58(s，3H)，4.38(d，2H)，4.45(s，4H)，6.19(s，1H)7.05-7.15(m，4H)，7.18(d，1H)，7.21-7.35(m，6H)，7.49(dd，1H)，7.99(t，1H)，8.42(d，1H)。LCMS Rt＝3.12m/z 520[MH]+ 制備128 N2，N2-二芐基-N4-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-3-硝基-6-噁唑-2-基-吡啶-2，4-二胺 將丁基鋰(2.9ml)在-78℃(干冰/丙酮浴)逐滴添加至噁唑(0.251ml)于THF(5ml)中的被攪拌的溶液中，保持添加速率以使得反應(yīng)溫度不超過(guò)-60℃。將溶液在此溫度攪拌10分鐘，然后逐滴添加氯化鋅(1.56g)于THF(7ml)中的溶液。將溶液在-78℃攪拌15分鐘，然后移除冷卻浴并將反應(yīng)混合物加溫至室溫。將鋅噁唑溶液的等分樣品(1.2ml)用注射器添加至預(yù)密封且被氮?dú)獯迪吹奈⒉ㄆ?Biotage，0.5-2.0ml)中，該瓶含有N2，N2-二芐基-6-溴-N4-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-3-硝基吡啶-2，4-二胺(90mg)及雙(三苯基膦)二氯化鈀(24mg)。將此瓶在微波照射(Biotage Initiator 8)下、在130℃加熱15分鐘。以同樣方式再使鋅噁唑溶液的九份等分樣品與溴吡啶在微波中反應(yīng)。
將所有反應(yīng)混合物合并并真空濃縮為褐色膠。將膠在EtOAc(20ml)與2M氨溶液(20ml)之間分溶。將水溶液用EtOAc(20ml)再萃取，并將所合并的有機(jī)物用鹽水(20ml)洗滌，然后干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)為褐色膠。將粗產(chǎn)物用EtOAc:庚烷洗脫、在Isco Companion二氧化硅柱(120g，Redisep)上進(jìn)行純化，經(jīng)6個(gè)柱容積梯度由80:20線性增至100:0，然后使18個(gè)柱容積在100％ EtOAc等度。將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色發(fā)泡固體的標(biāo)題化合物(0.43g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.60(s，3H)，4.55(d，2H)，4.60(s，4H)，6.99(s，1H)7.05-7.15(m，4H)，7.20-7.22(d，2H)，7.22-7.35(m，6H)，7.59(dd，1H)，7.79(s，1H)，8.09(t，1H)，8.55(d，1H)。LCMS Rt＝2.87m/z 507[MH]+ 制備129 N2，N2-二芐基-N4-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-6-噁唑-2-基-吡啶-2，3，4-三胺 將N2，N2-二芐基-N4-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-3-硝基-6-噁唑-2-基-吡啶-2，4-二胺(425mg)溶于THF(60ml)中，然后添加MeOH(60ml)。將溶液在氫氣氛下(80psi)經(jīng)阮內(nèi)鎳(40mg)氫化1小時(shí)。將反應(yīng)混合物用硅藻土墊過(guò)濾，然后蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色粗膠狀標(biāo)題化合物，其可直接用于下一步驟。
LCMS Rt＝2.42m/z 477[MH]+。
制備130 (2，6-二氯-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯 將氯甲酸乙酯(2.75ml)于2-甲基THF(10ml)中的溶液逐滴添加至2，6-二氯-4-氨基-5-硝基-吡啶(5.00g)與三乙胺(4.02ml)于2-甲基THF(50ml)中的冷(冰浴)溶液中。添加速率應(yīng)使得反應(yīng)溫度不升至5℃。添加氯甲酸乙酯后，形成沉淀物。將混懸液加溫至室溫，然后在氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)。將混懸液轉(zhuǎn)入分液漏斗內(nèi)，添加水(50ml)。將各層分離并將有機(jī)物用鹽水(50ml)洗滌，然后干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)為橙色膠，將其靜置固化為黃色固體。使固體自MeOH:水(70:30)中重結(jié)晶，產(chǎn)生白色針狀標(biāo)題化合物，將其通過(guò)過(guò)濾收集(6.7g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.25(t，3H)，4.31(q，2H)，8.10(br，s，1H)，8.40(s，1H)。LCMS Rt＝4.16m/z 280[MH]+ 制備131 芐基-(2，6-二氯-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯 將溴化芐(2.33ml)逐滴添加至(2，6-二氯-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(4.57g)于乙腈(40ml)中的被攪拌的混懸液中。將混合物在氮?dú)夥障?、在室溫下攪?6小時(shí)。將混合物真空濃縮然后在EtOAc(50ml)與水(50ml)之間分溶。將各層分離并將有機(jī)物用飽和NH4Cl(50ml)、水(50ml)及鹽水(50ml)洗滌。將有機(jī)物干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)為黃色油。將此物質(zhì)預(yù)吸附于二氧化硅上，然后用EtOAc:庚烷洗脫、在Isco Companion二氧化硅柱(330g，Redisep)進(jìn)行柱色譜，使1個(gè)柱容積(CV)在10:90等度，然后梯度經(jīng)6個(gè)CV由10:90線性增至30:70。將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色油狀標(biāo)題化合物(6.05g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.25(t，3H)，4.19(q，2H)，4.81(s，2H)，6.88(s，1H)，7.20-7.28(m，2H)，7.30-7.40(m，3H)。LCMS Rt＝3.62m/z372[MH]+。
制備132 (2-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯 將芐基-(2，6-二氯-3-硝基-吡啶-4-基)-氨基甲酸乙酯(500mg)溶于反應(yīng)瓶中的THF(3ml)中。添加氨(7M于MeOH中，1ml)，將瓶密封，并將反應(yīng)物在室溫下攪拌48小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物直接預(yù)吸附于二氧化硅上，并用EtOAc:庚烷洗脫、在Isco Companion二氧化硅柱(40g，Redisep)進(jìn)行柱色譜，梯度經(jīng)10個(gè)柱容積由10:90線性增至40:60。將所需洗脫組分合并且蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色膠狀標(biāo)題化合物，使其靜置固化(305mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.05(t，3H)，4.02(q，2H)，4.87(br，s，2H)，6.58(s，1H)，7.20-7.36(m，5H)，7.61(br，s，1H)。LCMS Rt＝3.24m/z351[MH]+ 制備133 [2-氨基-6-(2-甲氧基-乙氧基)-3-硝基-吡啶-4-基]-芐基-氨基甲酸乙酯 將氫化鈉(21mg)逐滴添加至2-甲氧基乙醇(0.5ml)中。將所得溶液逐滴添加至(2-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-芐基-氨基甲酸乙酯(100mg)于THF(1.0ml)中的溶液中。反應(yīng)混合物由黃色溶液變?yōu)樯罴t/橙色溶液，并將其在室溫下攪拌1小時(shí)。將橙色混合物真空濃縮，然后在EtOAc(10ml)與飽和NH4Cl溶液(10ml)之間分溶。將各層分離并將有機(jī)物用水(10ml)及鹽水(10ml)洗滌，然后干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)以產(chǎn)生粗黃色膠狀的標(biāo)題化合物(111mg)。此物可直接用于下一步驟而無(wú)需進(jìn)一步純化。
LCMS Rt＝3.13m/z 391[MH]+ 制備134 4-芐基氨基-3-硝基-吡啶-2-醇 將4-氯-3-硝基-2-吡烷酮(5g，28.65mmol)混懸于150ml乙腈中，然后依次添加芐胺(3.15ml，28.65mmol)、碳酸鉀(4g，28.65mmol)，并將混合物在60℃攪拌過(guò)夜。在真空中移除溶劑并將殘余物混懸于水(200ml)中。添加2M HCl溶液直至pH值為～6。將沉淀物過(guò)濾并在真空中干燥以產(chǎn)生4.75g米黃色固體的標(biāo)題化合物。自母液中第2次收獲，產(chǎn)生1.4g標(biāo)題化合物。
1H NMR(d6 DMSO)δ11.20(寬單峰，1H)，9.35(t，1H)，7.40-7.20(m，6H)，5.85(d，1H)，4.60(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 246[MH]+ 制備135 芐基-(2-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-胺 將4-芐基氨基-3-硝基-吡啶-2-醇(6.15g，25.07mmol)混懸于100ml乙腈中，然后依次添加磷酰氯(12ml，125.40mmol)、氯化四乙銨(4.15g，25.07mmol)，并將混合物在85℃攪拌過(guò)夜。在真空中移除溶劑并將殘余物混懸于水(300ml)中并用二氯甲烷(2×200ml)萃取。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥并將溶劑在真空中移除以產(chǎn)生5.9g黃色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ8.0(d，1H)，7.40-7.20(m，5H)，6.9(寬單峰，1H)，6.60(d，1H)，4.5(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 264[MH]+ 制備136 N-2，N-2，N-4，三芐基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 將芐基-(2-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-胺(3.95g，14.99mmol)混懸于50ml乙腈中，然后依次添加二芐胺(2.9ml，14.99mmol)、碳酸鉀(2g，14.99mmol)，并將混合物在80℃攪拌過(guò)夜。在真空中移除溶劑并將殘余物混懸于水(100ml)中并用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥并在真空中移除溶劑。使用戊烷中的15％乙酸乙酯、通過(guò)硅膠柱色譜法純化粗殘余物以產(chǎn)生6g黃色油狀標(biāo)題化合物。
1H NMR(d6 DMSO)δ8.1(s寬峰，1H)，7.9(d，1H)，7.40-7.10(m，15H)，6.10(d，1H)，4.55(s，4H)，4.5(d，2H)；LRMS(ES+)m/z 425[MH]+ 制備137 N-2，N-2，N-4-三芐基-吡啶-2，3，4-三胺 將N-2，N-2，N-4，三芐基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(6g，14.13mmol)混懸于150ml乙醇中，添加阮內(nèi)鎳(1.2g，20重量％)，然后將混合物在室溫下、在50psi氫氣下攪拌3小時(shí)。完成后，將混合物用Arbocel(木質(zhì)纖維素)過(guò)濾并在真空中移除溶劑以產(chǎn)生5g淡紫色膠狀標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ7.80(d，1H)，7.40-7.15(m，15H)，6.35(d，1H)，4.35(d，2H)，4.15(s，4H)，3.5-3.25(寬單峰，2H)；LRMS(ES+)m/z 395[MH]+ 制備138 1-芐基-4-二芐基氨基-1，3-二氫-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮 將N-2，N-2，N-4，三芐基-吡啶-2，3，4-三胺(5g，12.67mmol)溶于100ml乙腈中，然后添加1，1’-羰基二咪唑(3g，19.701mol)并將反應(yīng)物在80℃攪拌過(guò)夜。將混合物冷卻至室溫并將沉淀物過(guò)濾并用乙腈洗滌，然后在真空中干燥以產(chǎn)生4.3g淺紫色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(d6 DMSO)δ10.9(s，1H)，7.75(d，1H)，7.40-7.10(m，15H)，6.70(d，1H)，4.9(s，2H)，4.6(s，4H)；LRMS(ES+)m/z 421[MH]+。
制備139 1-芐基-7-溴-4-二芐基氨基-1，3-二氫-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮 將1-芐基-4-二芐基氨基-1，3-二氫-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮(1g，2.4mmol)混懸于20ml乙酸中，然后然后逐滴添加乙酸鈉(195mg，2.4mmol)、溴(456mg，2.85mmol)。將混合物在室溫下攪拌15分鐘。形成稠的沉淀物。將混合物稀釋于水(50ml)中并將固體過(guò)濾并用水洗滌。然后稀釋于乙酸乙酯(20ml)中，用硫酸鎂干燥，并在真空中移除溶劑以產(chǎn)生1.29g淺橙色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(d6 DMSO)δ11.5(s，1H)，7.85(s，1H)，7.40-7.10(m，15H)，5.30(s，2H)，4.55(s，4H)；LRMS(ES+)m/z 499，501[MH]+ 制備140 1-芐基-4-二芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5，c]吡啶-7-甲酸甲酯 將1-芐基-7-溴-4-二芐基氨基-1，3-二氫-咪唑并[4，5，c]吡啶-2-酮(500mg，1mmol)混懸于30ml甲醇中，然后依次添加三乙胺(203mg，2mmol)、(1，1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵)二氯鈀(82mg，0.1mmol)，并將混合物在100℃、在100psi CO下攪拌過(guò)夜。將混合物冷卻至室溫，用Arboce1過(guò)濾并用甲醇洗滌。在真空中移除溶劑，使用二氯甲烷中的1％甲醇、通過(guò)硅膠柱色譜法純化殘余物以產(chǎn)生21mg白色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(CDCl3)δ8.4(s，1H)，8.0(寬單峰，1H)，7.40-7.00(m，15H)，5.45(s，2H)，4.80(s，4H)，3.7(s，3H)；LRMS(ES+)m/z 479[MH]+ 制備141 1-芐基-4-二芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5，c]吡啶-7-甲酸環(huán)丙基甲基酰胺 將1-芐基-4-二芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5，c]吡啶-7-甲酸甲酯(50mg，0.1mmol)混懸于2ml(氨基甲基)環(huán)丙烷中，并將混合物在120℃攪拌過(guò)夜。在真空中移除過(guò)量的胺并將膠在水(20ml)與乙酸乙酯(50ml)中分溶，將有機(jī)層分離，用MgSO4干燥并在真空中移除溶劑。使用二氯甲烷中的5％甲醇、通過(guò)硅膠柱色譜法純化殘余物以產(chǎn)生10mg黃色膠狀標(biāo)題化合物；LRMS(ES+)m/z 518[MH]+ 制備142 6-氯-2，4-二羥基-5-甲基-吡啶 將丙二酰氯(10g，71mmol)與丙腈(12ml)混合并在室溫下、在氮?dú)夥障聰嚢?6小時(shí)。將50mL二噁烷添加至所得異質(zhì)混合物中，通過(guò)過(guò)濾收集所得沉淀物并用冷二噁烷洗滌。將所收集固體溶于幾毫升甲醇中并用二噁烷再次沉淀。通過(guò)過(guò)濾收集固體，用二噁烷洗滌并在真空中干燥以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(6g，53％)；LRMS(ES+)m/z 160[MH]+。
制備143 6-氯-2，4-二羥基-5-甲基-3-硝基-吡啶 將6-氯-2，4-二羥基-5-甲基-吡啶(500mg，3.1mmol)溶解于乙酸(1ml)中，冷卻至0℃，并在攪拌下逐滴添加硝酸(4ml)。添加結(jié)束后，移除冰浴，經(jīng)16小時(shí)將反應(yīng)混合物加溫至室溫。將冰添加至混合物以產(chǎn)生沉淀物，通過(guò)過(guò)濾收集并在真空中干燥以產(chǎn)生黃色固體的標(biāo)題化合物(180mg，28％)；LRMS(ES+)m/z 205[MH]+ 制備144 丙二酸二苯酯 在0℃、在氮?dú)夥障率贡?11g，106mmol)與苯酚(20g，212mmol)混合，并將磷酰氯(11.5ml，123mmol)逐滴添加至固體混合物中。將所得混合物在0℃攪拌5分鐘，然后在回流溫度加熱5小時(shí)，使固體熔融且形成橙色溶液。將反應(yīng)物冷卻至室溫，然后傾注在100ml水上并用乙醚(3×75ml)萃取。將所合并的有機(jī)物用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，真空濃縮為橙色油狀的標(biāo)題化合物(27g，99％)。
1HNMR(CDCl3，400MHz)3.86(s，2H)，7.17(m，4H)，7.27(m，2H)，7.41(m，4H)；LRMS(ES)m/z 257[MH]+ 制備145 環(huán)戊酮-叔丁亞胺 在氮?dú)夥障聦h(huán)戊酮(13.3ml，150mmol)與叔丁胺(47.4ml，450mmol)混合于110ml乙醚中，然后在干冰/乙腈浴中冷卻至-55℃。將四氯化鈦(8.2ml，75mmol)溶解于70ml戊烷中，逐滴添加至上述溶液，注意使溫度維持在-40℃。然后將反應(yīng)物在-40℃攪拌6小時(shí)，然后加溫至室溫過(guò)夜。將反應(yīng)混合物用硅藻土短塞過(guò)濾并用乙醚洗滌。將濾液在真空中蒸發(fā)以產(chǎn)生15.9g(76％)透明油狀的標(biāo)題產(chǎn)物。
1HNMR(CDCl3，400MHz)1.26(s，9H)，1.67(m，2H)，1.82(m，2H)，2.29(t，2H)，2.36(t，2H)。
制備146 6，7-二氫-5H-[1]吡啶-2，4-二醇 將環(huán)戊酮-叔丁亞胺(2.78g，20mmol)與丙二酸二苯酯(5.12g，20mmol)混合于40ml三甘醇二甲醚中并在100℃加熱4小時(shí)，然后在200℃加熱2小時(shí)。然后將反應(yīng)物冷卻至室溫，再傾注入200ml乙醚中并在密封燒瓶中、在冰箱中貯存4天。過(guò)濾所得沉淀物，用乙醚洗滌并在真空中干燥以產(chǎn)生淺褐色固體的標(biāo)題化合物(1.45g，50％)。
1HNMR(CD3OD，400MHz)2.12(m，2H)，2.70(t，2H)，2.82(t，2H)，5.64(s，1H)。
制備147 5，6-二甲基-吡啶-2，4-二醇 將5，6-二甲基-4-羥基-2-氧代-2H-吡喃(J.Chem.Soc.PerkinTrans 1，1980，2272)(10g，71mmol)溶于66ml二噁烷及33ml的0.88NH3溶液中，并將混合物回流3小時(shí)。然后將所得混懸液冷卻至室溫過(guò)夜，過(guò)濾收集固體，并在真空中干燥以產(chǎn)生白色結(jié)晶固體的標(biāo)題化合物(6.5g)。將濾液真空濃縮至約10ml，通過(guò)過(guò)濾收集第2次收獲的固體(1.0g)。將兩次收獲物合并用于下一合成步驟。
1H NMR(DMSO，400MHz)δ 1.77(s，3H)，2.06(s，3H)，5.42(s，1H)；LRMSm/z(APCI+)140[MH]+。
制備148 5，6-二甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二醇 將5，6-二甲基-吡啶-2，4-二醇(6.5g，47mmol)置于30ml硫酸中攪拌然后在冰浴中冷卻至0℃。逐滴添加發(fā)煙硝酸(10ml)，添加結(jié)束后將混合物攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾注在碎冰上且通過(guò)過(guò)濾收集所得黃色固體以獲得標(biāo)題化合物(3.9g，46％)。
1H NMR(MeOD，400MHz)δ 2.04(s，3H)，2.31(s，3H)；LRMS m/z(APCI+)185[MH]+。
制備149 2，4-二氯-5，6-二甲基-3-硝基-吡啶 將5，6-二甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二醇(3.9g，21mmol)溶于乙腈(150ml)中，然后添加氯化四乙銨(7.1g，42mmol)及磷酰氯(19.9ml，210mmol)，并將整個(gè)物質(zhì)在70℃加熱16小時(shí)。將反應(yīng)混合物傾注入碎冰中并用DCM(2×30ml)萃取。將所合并的萃取物用MgSO4干燥，過(guò)濾并真空濃縮以產(chǎn)生褐色固體。將此固體溶解于2ml DCM中并用21戊烷EtOAc洗脫、用硅膠短塞過(guò)濾。然后蒸發(fā)濾液以產(chǎn)生淺褐色固體的標(biāo)題化合物(3.5g，75％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.61(s，3H)，2.41(s，3H) 制備150 芐基-(2-氯-5，6-二甲基-3-硝基-吡啶-4-基)-胺 將2，4-二氯-5，6-二甲基-3-硝基-吡啶(2g，9mmol)溶于乙腈(100ml)與芐胺(1.0ml，9.5mmol)中。將碳酸鉀(1.3g，9.5mmol)以一份添加，并將整個(gè)物質(zhì)在55℃加熱16小時(shí)。將反應(yīng)混合物用EtOAc稀釋并用50ml水洗滌。將水溶液用EtOAc再萃取，將有機(jī)物合并然后用MgSO4干燥，蒸發(fā)為暗紅色殘余物。使用81戊烷EtOAc作為洗脫液、通過(guò)硅膠柱色譜法純化此殘余物，以產(chǎn)生亮橙色固體的標(biāo)題化合物(1.2g，45％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.09(s，3H)，2.47(s，3H)，4.25-4.27(d，2H)，4.52(bs，1H)，7.28-7.30(m，2H)，7.35-7.41(m，3H)LRMS m/z(APCI+)292[MH]+。
制備151 N2，N2-二烯丙基-N4-芐基-5，6-二甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 將芐基-(2-氯-5，6-二甲基-3-硝基-吡啶-4-基)-胺(1.2g，4.1mmol)溶于乙氧基乙醇(60ml)中，并將二異丙基乙胺(1.1ml，6.2mmol)及二烯丙胺(0.76ml，6.2mmol)以一份添加。將反應(yīng)混合物在密封容器中、在100℃加熱過(guò)夜，然后真空濃縮為橙色殘余物。使用梯度8:1→1:1的戊烷:EtOAc作為洗脫液、通過(guò)硅膠柱色譜法直接純化此殘余物以產(chǎn)生亮橙色油狀標(biāo)題化合物(938mg，65％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.16(s，3H)，2.34(s，3H)，3.90-3.92(d，4H)，4.33-4.34(d，2H)，5.13-5.21(m，4H)，5.77-5.87(m，2H)，6.37-6.40(bt，1H)，7.35-7.28(m，5H)；LRMS m/z(APCI+)353[MH]+ 制備152 N2，N2-二烯丙基-N4-芐基-5，6-二甲基-吡啶-2，3，4-三胺 將N2，N2-二烯丙基-N4-芐基-5，6-二甲基-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(828mg，2.4mmol)溶于乙醇(15ml)及2N HCl(15ml)中，并將鐵粉(527mg，9.6mmol)以一份添加。將反應(yīng)混合物在70℃加熱2小時(shí)，然后冷卻至室溫且傾注入50ml水中。將所得溶液用1N NaOH溶液中和以產(chǎn)生暗綠色混懸液，將其用EtOAc(2×25ml)萃取，并將所合并的有機(jī)物用MgSO4干燥，過(guò)濾且蒸發(fā)以產(chǎn)生暗綠色油狀標(biāo)題化合物(559mg，74％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.95(s，3H)，2.32(s，3H)，3.73-3.74(d，4H)，4.21(s，2H)，5.07-5.23(m，4H)，5，86-5.96(m，2H)，7.26-7.32(m，5H)；LRMS m/z(APCI+)323[MH]+ 制備153 1-芐基-4-二烯丙氨基-6，7-二甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮 將N2，N2-二烯丙基-N4-芐基-5，6-二甲基-吡啶-2，3，4-三胺(559mg，1.7mmol)溶于乙腈(50ml)中，并將1，1-羰基二咪唑(2.8g，17mmol)以一份添加，使整個(gè)物質(zhì)回流2小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后真空濃縮，使用梯度8:1→4:1戊烷:EtOAc作為洗脫液、通過(guò)硅膠柱色譜法直接純化，以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(258，59％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 2.12(s，3H)，2.34(s，3H)，3.99-4.01(dt，4H)，5.25-5.28(m，4H)，5.34-5.40(d，2H)，6.01-6.10(m，2H)，7.11-7.13(d，2H)，7.24-7.32(m，3H)，7.66(bs，1H)；LRMS m/z(ESCI+)349[MH]+ 制備154 4-甲基-3-氧代-戊酸 將乙基異丁酰基乙酸(21g，132mmol)溶解于1.5M氫氧化鈉溶液(15g于250ml水中)中并在室溫下攪拌16小時(shí)。將溶液在冰浴中冷卻至0℃然后用35ml濃鹽酸酸化至pH1-2。將所得溶液用氯化鈉飽和然后用乙酸乙酯(3×300ml)萃取。將所合并的萃取物用硫酸鈉干燥后過(guò)濾，并真空濃縮以產(chǎn)生透明油狀標(biāo)題化合物(16.4g，95％)。
1HNMR(CDCl3，400MHz，酮與烯醇互變異構(gòu)體的約4:1混合物)(主要酮形式)1.15-1.16(d，6H)，2.75-2.71(m，1H)，3.56(s，2H)。
制備155 4-羥基-3-異丁酰基-6-異丙基-吡喃-2-酮 將4-甲基-3-氧代-戊酸(16.4g，126mmol)在室溫下、在氮?dú)夥障氯芙庥赥HF(200ml)中，并將1，1-羰基二咪唑(22.4g，138mmol)以一份添加。將所得黃色溶液在室溫下攪拌16小時(shí)，然后真空濃縮并將殘余物用DCM(200ml)稀釋。將溶液用2N HCl(100ml)及水(100ml)洗滌并將水溶液用DCM(50ml)再萃取。將所合并的有機(jī)物用硫酸鈉干燥，然后真空濃縮以產(chǎn)生黃色油狀標(biāo)題化合物(11.7g，80％)。
1HNMR(CDCl3，400MHz)δ 1.16-1.18(d，6H)，1.25-1.27(d，6H)，2.71-2.74(m，1H)，3.94-3.97(m，1H)，5.92(s，1H)；LRMS(APCI+)m/z225[MH]+ 制備156 4-羥基-6-異丙基-吡喃-2-酮 將4-羥基-3-異丁?；?6-異丙基-吡喃-2-酮(11.7g，52mmol)溶解于濃硫酸(40ml)中并在130℃攪拌15分鐘。將所獲得的黑色油冷卻至室溫然后進(jìn)一步在冰浴中冷卻至0℃，再在攪拌下添加200ml碎冰。將所得溶液用乙酸乙酯(3×200ml)萃取并將所合并的有機(jī)物用硫酸鈉干燥，過(guò)濾并在真空中蒸發(fā)為淺褐色油，使用乙酸乙酯中的戊烷3:1→30:70梯度作為洗脫液、通過(guò)柱色譜將其純化以產(chǎn)生淺褐色油狀的標(biāo)題化合物，將其靜置固化(6.1g，77％)。
1HNMR(CDCl3，400MHz)δ 1.20-1.22(d，6H，2.70-2.80(m，1H)，5.58(s，1H)，5.99(s，1H)；LRMS(APCI+)m/z 155[MH]+ 制備157 乙基-2，4-二氨基芐基-6-甲基-3-甲酸酯 將乙基-2，4-二氯-6-甲基-3-甲酸酯(100mg，0.43mmol)溶于乙腈(2ml)中，然后用三乙胺(2401，1.70mmol)及芐胺(1121，1.02mmol)處理，并將反應(yīng)混合物在40℃、在氮?dú)夥障聰嚢?8小時(shí)。冷卻至室溫后，將反應(yīng)物傾注入水中并將混合物用乙酸乙酯(3×5ml)萃取。將所合并的有機(jī)物干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)以產(chǎn)生粗油，用戊烷乙酸乙酯20:1-5:1洗脫、通過(guò)硅膠柱色譜純化。獲得透明油狀的標(biāo)題化合物(98mg，61％)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ1.21(t，3H)，2.25(s，3H)，4.29(q，2H)，4.40，(d，2H)，4.78，(d，2H)，5.81(s，2H)，7.21-7.42(m，10H)，8.10(brs，1H)，8.30(brs，1H)；LRMSm/z(ESI)376[MH]+ 制備158 2，4-二氨基芐基-6-甲基-3-甲酸 將乙基-2，4-二氨基芐基-6-甲基-3-甲酸酯(40mg，0.11mmol)溶于甲醇(1ml)中，并用2N氫氧化鈉溶液(601，0.12mmol)處理，并將反應(yīng)混合物在65℃、在氮?dú)夥障聰嚢?小時(shí)。冷卻至室溫后，將反應(yīng)物傾注入水中，使用2N鹽酸將pH調(diào)節(jié)至6-7，并將混合物用乙酸乙酯(3×5ml)萃取。將所合并的有機(jī)物干燥(用MgSO4)且蒸發(fā)以產(chǎn)生灰白色固體的標(biāo)題化合物(37mg，定量)。
1H-NMR(DMSO，400MHz)δ2.22(s，3H)，4.59，(d，2H)，4.64，(d，2H)，6.20(s，2H)，7.20-7.39(m，10H)；LRMS m/z(ESI)348[MH]+，346[M-H]- 制備159 6-芐基氨基-9-芐基-2-甲基-8-氧代-8，9-二氫-7H-嘌呤及4-芐基氨基-9-芐基-6-甲基-8-氧代-8，9-二氫-7H-嘌呤
將2，4-二氨基芐基-6-甲基-3-甲酸(30mg，0.09mmol)、二苯基膦?；B氮化物(25mg，0.09mmol)及三乙胺(141，0.10mmol)混合于甲苯中，并將反應(yīng)物在氮?dú)夥障?、?11℃加熱16小時(shí)。冷卻至室溫后，將反應(yīng)物傾注入水中，并將混合物用乙酸乙酯(3×5ml)萃取。將所合并的有機(jī)物干燥(用MgSO4)以產(chǎn)生粗油，用戊烷:乙酸乙酯1:1洗脫、通過(guò)硅膠柱色譜法純化，產(chǎn)生均為透明油狀的各自的標(biāo)題化合物(10mg(I)，11mg(II)，68％組合收率)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)(I)δ 2.39(s，3H)，4.7，(s，4H)，6.04(s，2H)，7.15-7.39(m，10H)；LRMS m/z(ESI)354[MH]+；(II)δ2.39(s，3H)，4.39，(d，2H)，5.01，(s，2H)，6.19(s，2H)，7.15-7.39(m，10H)。LRMS m/z(ESI)354[MH]+。
制備160 1-芐基-2-溴-1H-咪唑-5-碘-4-甲腈 將5-氨基-1-芐基-2-溴-1H-咪唑-4-甲腈(50mg，0.18mmol)溶于二碘甲烷(1ml)中并將混合物加熱至100℃。然后用注射器將亞硝酸異戊酯(971，0.72mmol)逐滴添加至所加熱的反應(yīng)混合物中。觀察到氣體逸出。30分鐘后，將反應(yīng)物冷卻至室溫并在高真空下移除溶劑。用100％戊烷至73戊烷乙酸乙酯洗脫、通過(guò)硅膠柱色譜法純化剩余的紅色粗殘余物。由此產(chǎn)生黃色油狀標(biāo)題化合物(40mg，60％)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ 5.22(s，2H)，6.71(s，2H)，7.09(m，2H)，7.28-7.40(m，3H)；LRMS m/z(ESI)388/390[MH]+ 制備161 1-芐基-2-溴-5-(4-羥基丁-1-炔)-1H-咪唑-4-甲腈(I)及2-(4-氨基-1-芐基-2-溴-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-基)-乙醇(II) 將1-芐基-2-溴-1H-咪唑-5-碘-4-甲腈(39mg，0.1mmol)溶于乙腈(1ml)中并將混合物用三乙胺(201，0.15mmol)、Pd(PhCN)2Cl2(3.8mg，0.01mmol)及丁-1-炔-4-醇(91，0.12mmol)處理。然后將反應(yīng)物在密封管中、在100℃加熱2小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫并在真空下移除溶劑。然后將7N甲醇中的氨溶液添加至剩余粗褐色殘余物中，并將反應(yīng)物在密封管中、在120℃加熱18小時(shí)。然后在真空下移除揮發(fā)性組分，產(chǎn)生粗褐色油。此物質(zhì)的LRMS表明主要組分為環(huán)化物質(zhì)(II)，m/z(ESI)347/349[MH]+。然后將此油用乙酸乙酯中的10％戊烷洗脫、通過(guò)硅膠柱色譜法純化，產(chǎn)生黃色油狀的標(biāo)題化合物(I)(6mg)。化合物(II)無(wú)法自硅膠柱中回收。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)(I)δ 2.75(t，2H)，3.79(t，2H)，5.2(s，2H)，7.18(m，2H)，7.22-7.38(m，3H)；LRMS m/z(ESI)330/332[MH]+ 制備162 1-芐基-5-(-丁-4-羥基-2-酮-1-基)-1H-咪唑-2-甲氧基-4-甲腈將1-芐基-2-溴-5-(4-羥基丁-1-炔)-1H-咪唑-4-甲腈(6mg，0.02mmol)溶于甲醇(1ml)中并將混合物用甲醇鈉(5mg，×s)處理。然后將反應(yīng)物在65℃加熱12小時(shí)。將反應(yīng)物冷卻至室溫并將溶劑在真空下移除。然后將2N鹽酸溶液添加至剩余的粗殘余物中并將反應(yīng)物在室溫下攪拌2小時(shí)。然后在真空下移除揮發(fā)性組分，產(chǎn)生主要含有標(biāo)題化合物的粗白色固體；LRMS m/z(ESI)300[MH]+。
制備163 2，6-二氯-4-(N-硝基)氨基-吡啶 在0℃、在氮?dú)夥障聦?，6-二氯-4-氨基吡啶(1.58g)溶解于硫酸(20ml)中，逐滴添加硝酸(2.5ml)。30分鐘后，反應(yīng)物變成橙色并將其緩慢傾注入冰水中。將沉淀物過(guò)濾，用水洗滌然后溶于乙酸乙酯中。然后將有機(jī)溶液用MgSO4干燥，過(guò)濾并在真空中蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色固體的標(biāo)題化合物(1.7g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 7.40(s，2H)，10.4(s，1H)。
制備164 2，6-二氯-4-氨基-5-硝基-吡啶 將2，6-二氯-4-(N-硝基)氨基-吡啶(1.7g)溶解于硫酸(10ml)中，并在90℃加熱30分鐘。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后傾注入冰水中以產(chǎn)生沉淀物。將黃色固體濾出、收集、溶于乙酸乙酯中，然后用Na2CO3水溶液洗滌。然后將有機(jī)物再用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，過(guò)濾并在真空中蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色固體的標(biāo)題化合物(1.45g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 5.70(s，2H)，6.70(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 209[MH]+ 制備165 2，6-二溴-4-氨基-5-硝基-吡啶 將2，6-二氯-4-氨基-5-硝基-吡啶(2g)溶解于HBr于乙酸(20mL)中的33％溶液中，并在90℃、在鐵氟龍內(nèi)襯容器中加熱72小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，傾注入冰水中以產(chǎn)生沉淀物。將所得固體濾出、收集、溶于乙酸乙酯中，然后用Na2CO3水溶液洗滌。然后將有機(jī)物再用鹽水洗滌，然后用MgSO4干燥，過(guò)濾并在真空中蒸發(fā)以產(chǎn)生淺黃色固體的標(biāo)題化合物(2g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 5.60(s，2H)，6.90(s，1H)；LRMS(ES+)m/z295，297，299[MH]+ 制備166 2，6-二溴-4-氯-5-硝基-吡啶 將2，6-二溴-4-氨基-5-硝基-吡啶(3g)溶解于濃鹽酸(20ml)中，冷卻至0℃。添加亞硝酸鈉(3.5g)，并將反應(yīng)混合物在0℃攪拌1小時(shí)。移除冰浴且經(jīng)3小時(shí)將反應(yīng)物加溫至室溫，然后通過(guò)添加乙酸乙酯(50ml)及水(100ml)驟冷。將有機(jī)層分離，用MgSO4干燥且過(guò)濾并在真空中蒸發(fā)為淺黃色油，將其使用35:1戊烷EtOAc作為洗脫液、通過(guò)柱色譜法純化，以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(2.2g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 7.65(s，1H)。
制備167 N-2，N-4-二芐基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺 將2，6-二溴-4-氨基-5-硝基-吡啶(1.53g)溶解于THF(20ml)中，然后各以一份添加固體K2CO3(100mg)及芐胺(1.1ml)。然后將反應(yīng)混合物在70℃加熱16小時(shí)。在真空中移除溶劑，使用戊烷中的10％乙酸乙酯作為洗脫液、通過(guò)硅膠柱色譜法純化粗殘余物以產(chǎn)生黃色油狀的標(biāo)題化合物(1.2g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 4.45(d，2H)，4.78(d，2H)，6.20(s，1H)，7.20-7.41(m，10H)，9.41(s，1H)，9.50(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 413，415[MH]+ 制備168 4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯 將N-2，N-4-二芐基-6-溴-3-硝基-吡啶-2，4-二胺(1g)溶解于甲醇與DMF(2:1，15ml)的混合物中，然后添加三乙胺(0.7ml)、三苯基膦(30mg)及乙酸鈀(27mg)，并將混合物在60℃及100psi一氧化碳?jí)毫ο录訜?6小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用Arbocel短塞過(guò)濾并在真空中蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色殘余物。使用乙酸乙酯中的8:1→2:1戊烷梯度作為洗脫液、通過(guò)硅膠柱色譜法純化此殘余物以產(chǎn)生淺黃色固體的標(biāo)題化合物(0.5g)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 3.91(s，2H)，4.58(s，1H)，4.85(d，2H)，6.85(s，1H)，7.05-7.25(m，10H)，9.3(t，1H)，9.55(t，1H)；LRMS(ES+)m/z 393[MH]+ 制備169 5-氨基-4，6-芐基氨基-吡啶-2-甲酸甲酯 將4，6-雙-芐基氨基-5-硝基-吡啶-2-甲酸甲酯(800mg)溶解于甲醇(30ml)中，并將阮內(nèi)鎳(80mg)以一份添加，并將混合物在室溫下、在60psi氫氣壓力下攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)混合物用Arbocel短塞過(guò)濾并將濾液在真空中蒸發(fā)以產(chǎn)生黃色殘余物狀的標(biāo)題化合物(0.75g)，其無(wú)需進(jìn)一步純化便可使用；LRMS(ES+)m/z 363[MH]+ 制備170 1-芐基-4-芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸甲酯 將5-氨基-4，6-芐基氨基-吡啶-2-甲酸甲酯(0.75g)溶解于乙腈(40ml)中，并將1，1-羰基二咪唑(500mg)以一份添加，并將混合物在80℃加熱6小時(shí)。將反應(yīng)混合物在真空中蒸發(fā)以產(chǎn)生殘余物，使用乙酸乙酯中的1:1戊烷作為洗脫液、通過(guò)硅膠柱色譜法純化，以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(100mg)。
1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ 3.75(s，3H)，4.45(d，2H)，4.98(s，2H)，6.48(t，1H)，7.18(s，1H)，7.22-7.47(m，10H)；LRMS(ES+)m/z 389[MH]+ 制備171 1-芐基-4-芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫[4，5-c]吡啶-6-甲酸 將1-芐基-4-芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸甲酯(0.03g)溶解于甲醇(1ml)及1N NaOH溶液(2ml)中，并將混合物在40℃攪拌。2小時(shí)后，添加2ml的2N HCl，促使固體沉淀析出。將此固體濾出并在真空中干燥以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(25mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 4.30(s，2H)，4.90(s，2H)，7.10-7.35(m，11H)，10.80(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 375[MH]+ 制備172 1-芐基-4-芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸環(huán)丙基甲基酰胺 將1-芐基-4-芐基氨基-2-氧代-2，3-二氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-6-甲酸甲酯(0.05g)溶解于環(huán)丙基甲胺(1ml)并在反應(yīng)瓶中、在80℃加熱3小時(shí)。在真空中移除溶劑，添加乙醚，促使固體沉淀析出。將此固體濾出并在真空中干燥以產(chǎn)生40mg白色固體。使用乙腈、水與二乙胺的混合物作為洗脫液、通過(guò)制備性HPLC將此固體純化，以產(chǎn)生白色固體的標(biāo)題化合物(18mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 0.22(q，2H)，0.55(q，2H)，1.05(m，1H)，3.22(t，2H)，4.35(d，2H)，4.90(s，2H)，5.90(t，1H)，7.10-7.35(m，11H)，7.85(t，1H)；LRMS(ES+)m/z 428[MH]+ 制備173 4-溴-2-氯-6-三氟甲基-吡啶-3-基胺 將6-三氟甲基-吡啶-3-基胺(150g，925mmol)混懸于500ml乙腈中。將N-氯代琥珀酰亞胺(124g，925mmol)添加至該溶液中，并將混合物在80℃加熱2小時(shí)，然后添加N-溴代琥珀酰亞胺(165g，925mmol)并將混合物在80℃再加熱3小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至環(huán)境溫度，真空濃縮并在100ml乙醚中研磨，通過(guò)過(guò)濾移除沉淀物。將所得濾液真空濃縮，并用庚烷:EtOAc 4:1洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜純化，以產(chǎn)生暗紅色油狀標(biāo)題化合物(220g，86％)。
1H NMR(CDCl3)δ 4.90(bs，2H)，7.67(s，1H)；LRMS(ES)m/z 275/277[MH]+ 制備174 N*4*-芐基-2-氯-6-三氟甲基-吡啶-3，4-二胺 在氟化銫(46.3g，305mmol)及芐胺(66.6ml，610mmol)存在下，將4-溴-2-氯-6-三氟甲基-吡啶-3-基胺(84g，300mmol)置于500ml DMSO中攪拌。將所得褐色混懸液在150℃加熱16小時(shí)。將1500ml水添加至被冷卻的混懸液中并將混合物用2×500ml乙醚萃取。將所合并的有機(jī)萃取物干燥(用MgSO4)，真空濃縮并用庚烷:EtOAc 4:1-2:1洗脫、通過(guò)二氧化硅柱色譜法純化，以產(chǎn)生淺褐色固體的標(biāo)題化合物(15.8g，17％)。將褐色油狀的非所需異構(gòu)體以同樣方式分離(51.0g，48％)。
1H NMR(CDCl3)δ 3.76(bs，2H)，4.39-4.41(d，2H)，4.53(bs，1H)，6.85(s，1H)，7.34-7.40(m，5H)；LRMS(ES)m/z 302[MH]+。
制備175 4，6-二羥基-2-三氟甲基-煙酸乙酯 在一個(gè)三頸瓶中，將叔丁醇鉀(5.8g，51.9mmol)混懸于100ml四氫呋喃中，緩慢添加1，3-丙酮二甲酸二乙基酯(10g，49.5mmol)于30ml四氫呋喃中的溶液。一旦添加結(jié)束，則將混合物在室溫下攪拌30分鐘。在第二個(gè)配有與第一個(gè)三頸瓶連接的氣體出口的三頸瓶中，將2，2，2-三氟乙酰胺(11.2g，98.9mmol)溶于80ml吡啶中，緩慢添加三氟醋酐(20.8g，98.9mmol)于30ml吡啶中的預(yù)混溶液，所形成氣體(2，2，2-三氟甲基乙腈)直接鼓泡通入第一個(gè)三頸瓶。一旦添加結(jié)束，將第二個(gè)三頸瓶中的混合物在室溫下攪拌30分鐘，然后在真空中移除溶劑，并將殘余物傾注入100ml的4M HCl中。將混合物用150ml乙酸乙酯萃取。將有機(jī)層分離，用硫酸鎂干燥并在真空中移除溶劑。將殘余物在二氯甲烷中研磨，并將沉淀物過(guò)濾以產(chǎn)生3g固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(MeOD)12.5(s，1H)，12.4(寬單峰，1H)，7.1(s，1H)，5.05(q，2H)，2.05(t，3H)；LRMS(ES+)m/z 252[MH]+ 制備176 4，6-二羥基-5-硝基-2-三氟甲基-煙酸乙酯 將4，6-二羥基-2-三氟甲基-煙酸乙酯(1g，3.9mmol)溶于10ml濃硫酸中，并在室溫下逐滴添加2ml發(fā)煙硝酸。一旦添加結(jié)束，則將混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后將混合物傾注入碎冰中，收集白色沉淀物，溶于50ml乙酸乙酯中，用50ml水及50ml鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥并在真空中移除溶劑以產(chǎn)生1.1g白色固體的標(biāo)題化合物。
1H NMR(d6 DMSO)4.25(q，2H)，1.20(t，3H)。
制備177 6-三氟甲基-吡啶-2，4-二醇 將4，6-二羥基-2-三氟甲基-煙酸乙酯(15g，59.7mmol)溶于250ml濃HCl中，并將混合物在115℃攪拌3天。將混合物冷卻至0℃，添加0.88氨直至pH值為～7。將所形成的固體過(guò)濾，用水洗滌，與甲苯共沸，并在真空中干燥以產(chǎn)生白色固體的9g標(biāo)題化合物。
1H NMR(d6 DMSO)6.7(s，1H)，6.1(s，1H)；LRMS(ES+)m/z 180[MH]+ 制備178 (2-氨基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 將(2-氨基-6-氯-3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(715mg/1.955mmol)、乙烯基三氟硼酸鉀(415mg/3.098mmol)、[1，1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II).CH2Cl2(90mg/0.11mmol)及三乙胺(0.28ml/2.0mmol)混合于iPrOH(8.0ml)中，并在50℃、在N2氣氛下加熱24小時(shí)。直接預(yù)吸附于二氧化硅上且通過(guò)柱色譜純化以產(chǎn)生紫色樹(shù)脂狀的標(biāo)題化合物(270mg)。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δ 1.15-1.20(多重峰，3H)，2.50(s，3H)，4.05-4.15(多重峰，2H)，4.90-4.95(多重峰，2H)，5.60(d，1H)，6.20-6.30(多重峰，1H)；6.55-6.65(多重峰，2H)，7.20-7.25(d/1H)，7.70(多重峰/1H)，8.35(s/1H)；LRMS(ES)m/z358[MH]+。
制備179 (2-氨基-6-甲?；?3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 將(2-氨基-3-硝基-6-乙烯基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(270mg/0.755mmol)溶于丙酮(5ml)/水(5ml)中，添加四氧化鋨(2.5wt％于tBuOH中)(0.10ml/0.008mmol)。攪拌5分鐘以產(chǎn)生褐色溶液，然后添加偏高碘酸鈉(500mg/3.47mmol)，將橙色混懸液攪拌1小時(shí)。在EtOAc(100ml)與硫代硫酸鈉五水合物(20wt％于H2O中)(50ml)之間分溶。收集有機(jī)物，用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，過(guò)濾且濃縮為褐色樹(shù)脂。用EtOAc洗脫、通過(guò)柱色譜法純化產(chǎn)生黃色油狀標(biāo)題化合物(220mg)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ 1.15-1.20(多重峰，3H)，2.55(s，3H)，4.10-4.20(多重峰，2H)，4.95(s，2H)，6.06-6.15(br s，2H)，7.05(s，1H)；7.10-7.15(d，1H)，7.60(d/1H)，8.35-8.40(s/1H)，9.75(s/1H)；LRMS(AP)m/z 360[MH]+。
制備180 (2-氨基-3-硝基-6-噁唑-5-基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯 將(2-氨基-6-甲?；?3-硝基-吡啶-4-基)-(6-甲基-吡啶-3-基甲基)-氨基甲酸乙酯(190mg/0.529mmol)溶于MeOH(5ml)中。依次添加(4-甲苯磺?；?甲胩(124mg/0.634mmol)、無(wú)水碳酸鉀(200mg/1.45mmol)。在N2氣氛下攪拌1小時(shí)，然后真空濃縮。在EtOAc(100ml)與H2O(50ml)之間分溶。收集有機(jī)物，用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，過(guò)濾且濃縮為黑色樹(shù)脂。用90:10 DCM/MeOH洗脫、通過(guò)柱色譜法純化產(chǎn)生粗褐色固體的標(biāo)題化合物(135mg)；LRMS(ES)m/z399[MH]+。
生物數(shù)據(jù) 通過(guò)如下詳述的PBL/HCV復(fù)制子生物檢定法來(lái)確認(rèn)式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物和多晶型物調(diào)節(jié)TLR7受體活性的能力，其中使用以下的縮略語(yǔ) EMCV腦心肌炎病毒 IRES內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn) HuhHuh-7人肝瘤細(xì)胞株7(用于產(chǎn)生HCV復(fù)制子細(xì)胞株的親代細(xì)胞) luc熒光素酶 ubi泛素 neo新霉素 ET谷氨酸、蘇氨酸(用于檢定的復(fù)制子中的細(xì)胞培養(yǎng)適應(yīng)性突變) RPMI-FCSRoswell Park Memorial Institute(PBL的細(xì)胞培養(yǎng)基)-胎牛血清 PBL外周血淋巴細(xì)胞 PBL含有漿細(xì)胞樣樹(shù)突狀細(xì)胞亞群，其在感染期間是天然干擾素產(chǎn)生細(xì)胞，因此它是描繪干擾素誘導(dǎo)劑的優(yōu)良模型。作為一個(gè)極敏感的抗病毒生物試驗(yàn)，檢測(cè)取自PBL的上清液在HCV復(fù)制子系統(tǒng)中的抗病毒活性。抗病毒EC50值定義為在預(yù)定量的PBL培養(yǎng)基傳遞至含有HCV復(fù)制子的細(xì)胞株后，使得HCV復(fù)制子含量減少50％時(shí)施用于PBL的測(cè)試化合物的濃度。盡管含有HCV復(fù)制子的細(xì)胞對(duì)PBL條件培養(yǎng)基完全響應(yīng)，但其并不對(duì)已知的TLR激動(dòng)劑如雷西莫特(Resiquimod)和咪喹莫特(Imiquimod)直接響應(yīng)。
HCV復(fù)制子(Huh-5-2[I389luc-ubi-neo-NS3-3’/ET])為HCV復(fù)制的體外模型，其中熒光素酶報(bào)道分子整合入HCV序列中，并穩(wěn)定地保留在人肝瘤細(xì)胞株Huh-7中。螢火蟲熒光素酶報(bào)道分子表達(dá)為熒光素酶-泛素-新霉素磷酸轉(zhuǎn)移酶融合蛋白，該融合蛋白可被宿主蛋白酶分裂而釋放熒光素酶。該復(fù)制子還含有內(nèi)部EMCV IRES，其驅(qū)動(dòng)HCVNS3-5B聚合蛋白的轉(zhuǎn)譯，該蛋白具有細(xì)胞培養(yǎng)適應(yīng)性突變能力以容許高克隆率。熒光素酶產(chǎn)量已顯示與宿主細(xì)胞中存在的HCV RNA的含量直接成正比。螢火蟲熒光素酶活性使用Promega制造的Bright-GloTM熒光素酶檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)。
具體來(lái)說(shuō)，將1-3mg的測(cè)試化合物溶于100％(v/v)DMSO中，至最終濃度通常為1、4或10mM或10mM以上，取決于試驗(yàn)中所需起始濃度。從母液中制備化合物在100％ DMSO中的初始3倍連續(xù)稀釋液系列。再將該稀釋液系列進(jìn)一步用完整RPMI-FCS稀釋100倍。因此，試驗(yàn)中DMSO的終濃度為0.1％，100％ DMSO稀釋液系列中測(cè)試化合物的終濃度為1/1000。
PBL系以5×105/孔/90μl接種于含有上述制備的化合物的檢測(cè)板(96孔底部透明的TC級(jí))中而進(jìn)行制備，孵育24小時(shí)。
LucUbiNeo HCV復(fù)制子細(xì)胞以104/孔/90μl接種。將其孵育24小時(shí)。24小時(shí)后，從PBL檢測(cè)板中取10μl培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至HCV復(fù)制子檢測(cè)板中并繼續(xù)孵育48小時(shí)。
有利的是本發(fā)明的化合物具有針對(duì)TLR7受體而非一種或多種其它已知的Toll樣受體的選擇性。還有利的是本發(fā)明的化合物具有針對(duì)TLR7受體而非一種或多種細(xì)胞激酶和/或一種或多種嘌呤能受體諸如腺苷或磷酸二酯酶受體的選擇性。
實(shí)施例1、2、12及15經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)TLR7受體而非其它所有已知的Toll樣受體具有選擇性。
此外，實(shí)施例1、2、12及15經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)TLR7受體而非以下靶標(biāo)具有選擇性MEK(絲裂素活化蛋白激酶/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶)、CDK1(周期素依賴性激酶-1)、CDK2(周期素依賴性激酶-2)、JNK(應(yīng)激活化蛋白激酶)、MSK(絲裂素和應(yīng)激活化蛋白激酶)、MSK-1、SGK、AMPK、MLCK、CHK-2及磷酸二酯酶PDE3、PDE4及PDE5。
此外，實(shí)施例12及15經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)TLR7受體而非MAP(絲裂素活化蛋白激酶)具有選擇性。
此外，實(shí)施例15經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)對(duì)TLR7受體而非所有已知的腺苷受體A1、A2a、A2b及A3具有選擇性。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物，
或者該化合物或互變異構(gòu)體的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，其中
(a)Y為化學(xué)鍵，R3選自芳基、(C1-C6)烷基和-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C4)烷基；或
(b)Y為(C1-4)亞烷基，R3選自芳基、(C3-C7)環(huán)烷基和3-10元雜環(huán)基；
Z為氧或不存在；
R1選自H、鹵素、OH、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、-NHSO2R6、-NR6R7、-C(O)R6、-CO2R6、-C(O)NR6R7、-C(O)NR6SO2R8、芳基和3-10元雜環(huán)基；
R2選自H、鹵素、OH、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、-NR6R7、-CO2R6、-C(O)NR6R7、-C(O)NR6SO2R8和3-10元雜環(huán)基；或
R1與R2可連接形成(C2-C5)亞烷基連接，該連接任選并入1或2個(gè)各自獨(dú)立地選自N、O和S中的雜原子；
R5不存在且R4選自H、(C3-C7)環(huán)烷基、芳基、-(CH2)芳基、-C(O)R9、-CO2R9、-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亞烷基-O-CO2R9)、-C(O)NR9R10、-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)NR9R10和-(C1-C6)亞烷基-O-P(O)(OH)2；或
R4不存在且R5選自R9、-C(O)R9、-CO2R9、-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亞烷基-O-CO2R9、-C(O)NR9R10、-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)NR9R10和-(C1-C6)亞烷基-O-P(O)(OH)2；
R6和R7各自獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基和-(C1-C6)亞烷基(C3-C7)環(huán)烷基；或R6和R7與它們所連接的氮一起形成3-6元飽和雜環(huán)，該飽和雜環(huán)任選含有另外1或2個(gè)選自N、O和S中的雜原子；
R8選自(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基和苯基；
R9和R10各自獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、芳基、-(CH2)芳基和3-10元雜環(huán)基；或R9和R10與它們所連接的氮一起形成3-10元雜環(huán)基；
R11和R12獨(dú)立地選自H和(C1-C6)烷基；或R11和R12與所連接的N一起形成3-6元飽和雜環(huán)基，該飽和雜環(huán)基任選含有另外1或2個(gè)選自N、O和S中的雜原子；
該烷基、環(huán)烷基、烷氧基、芳基和雜環(huán)基任選被一或多個(gè)獨(dú)立地選自如下的原子或基團(tuán)取代:鹵素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亞烷基-OH、-NR11R12、-(C1-C6)亞烷基-NR11R12、芳基和3-10元雜環(huán)基；
其條件為，若R1和R2為H、且Z和R5不存在，則:
(a)當(dāng)Y-R3為乙基時(shí)，R4不為甲基；且
(b)當(dāng)Y-R3為甲基時(shí)，R4不為H或甲基。
2.如權(quán)利要求1的化合物，其中，R1選自
(a)H；
(b)CN；
(c)鹵素
(d)任選被1-3個(gè)鹵原子取代的(C1-C6)烷基；
(e)四氫呋喃氧基；
(f)被含有1-3個(gè)獨(dú)立地選自N、O和S中的雜原子的3-6元飽和雜環(huán)基取代的(C1-C6)烷基，其中該雜環(huán)基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基和-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基中的基團(tuán)取代；
(g)-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C6)烷基；
(h)-(C1-C4)亞烷基-N(H)-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C4)烷基；
(i)任選被OH或環(huán)丙基取代的(C1-C6)烷氧基；
(j)(C3-C7)環(huán)烷基；
(k)-(C1-C4)亞烷基(C3-C7)環(huán)烷基；
(l)-C(O)NR6R7；
(m)-CO2R6；
(n)-C(O)R6；
(o)包含(i)1-4個(gè)氮原子、或(ii)1-2個(gè)氮原子及1個(gè)氧原子或硫原子、或(iii)1個(gè)氧原子或硫原子的5元芳族雜環(huán)基；或者包含1-3個(gè)氮原子的6元芳族雜環(huán)基，該5和6元芳族雜環(huán)基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亞烷基-OH、-NR11R12和-(C1-C6)亞烷基-NR11R12中的原子或基團(tuán)取代；
(p)任選被1-3個(gè)鹵原子取代的苯基；
(q)-NR6R7；
(r)-NH-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C6)烷基；
其中
R6、R7、R11和R12如權(quán)利要求1所定義。
3.如權(quán)利要求1或2的化合物，其中，R1選自
(a)H；
(b)CN；
(c)鹵素
(d)任選被1-3個(gè)鹵原子取代的(C1-C6)烷基；
(e)四氫呋喃氧基；
(f)被任選被1或2個(gè)甲基取代的嗎啉、哌嗪或吡咯烷取代的(C1-C6)烷基；
(h)-(C1-C4)亞烷基-N(H)-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C4)烷基；
(i)任選被OH或環(huán)丙基取代的(C1-C6)烷氧基；
(j)(C3-C7)環(huán)烷基；
(k)-(C1-C4)亞烷基(C3-C7)環(huán)烷基；
(l)-C(O)NR6R7；
(m)-CO2R6；
(n)-C(O)R6；
(o)包含(i)1-4個(gè)氮原子、或(ii)1-2個(gè)氮原子及1個(gè)氧原子或硫原子、或(iii)1個(gè)氧原子或硫原子的5元芳族雜環(huán)基；或者包含1-3個(gè)氮原子的6元芳族雜環(huán)基，該5和6元芳族雜環(huán)基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亞烷基-OH、-NR11R12和-(C1-C6)亞烷基-NR11R12中的原子或基團(tuán)取代；
(p)任選被1-3個(gè)鹵原子取代的苯基；
(q)-NR6R7；
(r)-NH-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C6)烷基；
其中，
R6、R7、R11和R12如權(quán)利要求1所定義。
4.如上述任一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中，R1選自:被1-3個(gè)氟原子取代的甲基或乙基、環(huán)丙基、-(C1-C2)亞烷基-O-(C1-C2)烷基、任選被OH或環(huán)丙基取代的(C1-C4)烷氧基、-COCH3、-CH2OCH3、和-CO2CH3。
5.如上述任一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中，R1為環(huán)丙基或CF3。
6.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的化合物，其中，R1為包含(i)1-4個(gè)氮原子、或(ii)1-2個(gè)氮原子及1個(gè)氧原子或硫原子、或(iii)1個(gè)氧原子或硫原子的5元芳族雜環(huán)基，該5元芳族雜環(huán)基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下的原子或基團(tuán)取代:鹵素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C3)亞烷基-O-(C1-C4)烷基、-(C1-C4)亞烷基-OH、-NR11R12和-(C1-C3)亞烷基-NR11R12，其中，R11和R12如權(quán)利要求1所定義。
7.如權(quán)利要求6的化合物，其中，R1選自咪唑基、噁唑基、噁二唑基、三唑、吡唑和噻唑，它們均任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下的原子或基團(tuán)取代:鹵素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C3)亞烷基-O-(C1-C4)烷基、-(C1-C4)亞烷基-OH和-(C1-C3)亞烷基-NR11R12，其中，R11和R12如權(quán)利要求1所定義。
8.如權(quán)利要求7的化合物，其中，R1選自未被取代的噁唑基、三唑、吡唑和噻唑。
9.如權(quán)利要求8的化合物，其中，R1為噁唑基。
10.如上述任一項(xiàng)權(quán)利要求1的化合物，其中，R2選自
(a)H；
(b)鹵素；
(c)任選被1-3個(gè)鹵原子取代的(C1-C6)烷基；
(d)四氫呋喃氧基；
(e)被含有1-3個(gè)獨(dú)立地選自N、O和S中的雜原子的3-6元飽和雜環(huán)基取代的(C1-C6)烷基，其中該雜環(huán)基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基和-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基中的基團(tuán)取代；
(f)-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C6)烷基；
(g)-(C1-C4)亞烷基-N(H)-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C4)烷基；
(h)任選被OH或環(huán)丙基取代的(C1-C6)烷氧基；
(i)(C3-C7)環(huán)烷基；
(j)-(C1-C4)亞烷基(C3-C7)環(huán)烷基；
(k)-C(O)NR6R7；
(l)-CO2R6；
(m)-C(O)R6；
(n)包含(i)1-4個(gè)氮原子、或(ii)1-2個(gè)氮原子及1個(gè)氧原子或硫原子、或(iii)1個(gè)氧原子或硫原子的5元芳族雜環(huán)基；或者包含1-3個(gè)氮原子的6元芳族雜環(huán)基，該5和6元芳族雜環(huán)基任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、OH、CF3、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亞烷基-OH、-NR11R12和-(C1-C6)亞烷基-NR11R12中的原子或基團(tuán)取代；
(o)任選被1-3個(gè)鹵原子取代的苯基；
(p)-NR6R7；
(q)-NH-(C1-C4)亞烷基-O-(C1-C6)烷基；
其中
R6、R7、R11和R12如權(quán)利要求1所定義。
11.如上述任一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中，R2為H或甲基。
12.如上述任一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中，R2為H。
13.如上述任一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中，Z不存在。
14.如上述任一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中，Y為亞甲基；且R3選自:芳基；包含(i)1-4個(gè)氮原子、或(ii)1-2個(gè)氮原子及1個(gè)氧原子或硫原子、或(iii)1個(gè)氧原子或硫原子的5元芳族雜環(huán)基；和包含1-3個(gè)氮原子的6元芳族雜環(huán)基；該芳基和芳族雜環(huán)任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自如下的原子或基團(tuán)取代:鹵素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基、-(C1-C6)亞烷基-OH、-NR11R12、-(C1-C6)亞烷基-NR11R12、芳基和3-10元雜環(huán)基，其中，R11和R12如權(quán)利要求1所定義。
15.如上述任一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中，Y為亞甲基；且R3選自苯基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基和吡嗪基，其每一個(gè)任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自鹵素、(C1-4)烷基、(C1-C4)烷氧基和CF3中的原子或基團(tuán)取代。
16.如上述任一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中，Y為亞甲基；且R3選自苯基、吡啶-3-基和6-甲基-吡啶-3-基。
17.如上述任一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中，R5不存在；且
R4選自-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亞烷基-O-CO2R9、-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)NR9R10和-(C1-C6)亞烷基-O-P(O)(OH)2，其中，R9和R10如權(quán)利要求1所定義。
18.如上述任一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中，R4為H且R5不存在。
19.如權(quán)利要求1-16中任一項(xiàng)的化合物，其中，R4不存在；且R5選自-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)R9、-(C1-C6)亞烷基-O-CO2R9、-(C1-C6)亞烷基-O-C(O)NR9R10和-(C1-C6)亞烷基-O-P(O)(OH)2，其中，R9和R10如權(quán)利要求1所定義。
20.如權(quán)利要求1的化合物，其中:
Y為亞甲基；
R1選自CF3、環(huán)丙基和噁唑；
R2為H；
R3選自苯基、吡啶-3-基和6-甲基-吡啶-3-基；
R4為H；且
R5不存在。
21.式(Ic)的化合物，
或其互變異構(gòu)體，或者該化合物或互變異構(gòu)體的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物或多晶型物，
其中，
Y為亞甲基；
R1和R2各自獨(dú)立地選自H、鹵素、OH、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、-NR6R7、-CO2R6、-C(O)NR6R7、-C(O)NR6SO2R8、芳基和3-10元雜環(huán)基；或
R1與R2可連接形成(C2-C5)亞烷基連接，該連接任選并入1或2個(gè)各自獨(dú)立地選自N、O和S中的雜原子；
R3選自(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、芳基和3-10元雜環(huán)基；
R4選自R9、-C(O)R9、-CO2R9和-C(O)NR9R10，R5不存在；或
R5選自R9、-C(O)R9、-CO2R9和-C(O)NR9R10，R4不存在；
R6和R7各自獨(dú)立地選自H和(C1-C6)烷基；
R8選自(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基和苯基；
R9和R10各自獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、芳基、-(CH2)芳基和3-10元雜環(huán)基；或
R9和R10與它們所連接的氮一起形成3-10元雜環(huán)基；
上述烷基、環(huán)烷基、烷氧基、芳基及雜環(huán)基任選被一或多個(gè)獨(dú)立地選自以下基團(tuán)的基團(tuán)取代:鹵素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、-(C1-C6)亞烷基-O-(C1-C6)烷基、-NH(C1-C6)烷基、-N((C1-C6)烷基)2、芳基和3-10元雜環(huán)基；
其條件為，若R1和R2為H，Z和R5不存在，則:
(a)當(dāng)Y-R3為乙基時(shí)，R4不為甲基；且
(b)當(dāng)Y-R3為甲基時(shí)，R4不為H或甲基。
22.如權(quán)利要求21的化合物，其中，R1和R2各自獨(dú)立地選自:H、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、-CO2H、-CO2(C1-C6)烷基和-C(O)NH(C1-C6)亞烷基(C3-C7)環(huán)烷基；或R1與R2可連接形成(C2-C5)亞烷基連接。
23.如權(quán)利要求22的化合物，其中，R1選自H、甲基、正丙基、異丙基、環(huán)丙基、-CO2H、-CO2CH3和-C(O)NH(CH2)環(huán)丙基；且R2選自H和甲基；或R1與R2可連接形成C5-亞烷基連接。
24.如權(quán)利要求21-23的化合物，其中，R3為芳基，其任選被一或多個(gè)獨(dú)立地選自以下基團(tuán)的基團(tuán)取代:鹵素、OH、氧代、CF3、CN、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環(huán)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷氧基(C1-C6)烷基、-NH(C1-C6)烷基、-N((C1-C6)烷基)2、芳基和3-10元雜環(huán)基。
25.如權(quán)利要求24的化合物，其中，R3為苯基，其任選被一或多個(gè)獨(dú)立地選自鹵素和CF3中的基團(tuán)取代。
26.如權(quán)利要求1的式(I)化合物，其選自:
4-氨基-1-芐基-6-環(huán)丙基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮；
4-氨基-1-芐基-6-噁唑-2-基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮；及
4-氨基-1-芐基-6-三氟甲基-1，3-二氫-咪唑并[4，5-c]吡啶-2-酮；
或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。
27.藥物合并物，包含如上述任一項(xiàng)權(quán)利要求的式(I)化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物以及一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。
28.如權(quán)利要求27的藥物合并物，其包括一種或多種其它治療劑。
29.如權(quán)利要求28的藥物合并物，其中上述一種或多種其它治療活性劑選自HCV NS3A蛋白、HCV NS5A蛋白、HCV NS4B蛋白、HCV聚合酶、HCV金屬蛋白酶、HCV絲氨酸蛋白酶、HCV解螺旋酶和p7蛋白的抑制劑。
30.如權(quán)利要求1-26中任一項(xiàng)的式(I)化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，用作藥物。
31.如權(quán)利要求1-26中任一項(xiàng)的式(I)化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，用于治療與TLR7受體的調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病或病癥。
32.如權(quán)利要求31的化合物，其中，所述疾病或病癥為選自以下各病毒的病毒感染:腺病毒、皰疹病毒、痘病毒、正粘液病毒、副粘液病毒、冠狀病毒、乳多泡病毒、乳頭狀瘤病毒、嗜肝DNA病毒、黃病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒和絲狀病毒。
33.如權(quán)利要求31的化合物，其中，所述疾病或病癥為丙型肝炎。
34.如權(quán)利要求1-26中任一項(xiàng)所述的式(I)化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物在制備用于治療與TLR7受體的調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病或病癥的藥物中的用途。
35.在哺乳動(dòng)物中治療與TLR7受體的調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病或病癥的方法，其中包括向所述哺乳動(dòng)物給藥治療有效量的權(quán)利要求1-26中任一項(xiàng)所述的式(I)化合物或該化合物的藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物。
36.式(I)的化合物的制備方法，
其中，在式I、XVIII、XVIIIa、XIX、XIXa、XXa、XXb、XIV、XV、LIV和LXIII各者中，Y-R3如權(quán)利要求14所定義，R1如權(quán)利要求2所定義，R2如權(quán)利要求10所定義，PG1和PG2為氮保護(hù)劑且R13為(C1-6)烷基；
該方法包括:
(a)使式(XVIII)或(XVIIIa)的化合物與羰基供給劑反應(yīng)，
以形成相應(yīng)的式(XIX)或(XIXa)化合物，
然后，將式(XIX)或(XIXa)的化合物脫保護(hù)；或者
(b)使式(XXa)的化合物還原，
以形成式(XXb)的化合物，
然后通過(guò)用質(zhì)子酸處理使式(XXb)的化合物環(huán)化；或者
(c)使式(XIV)的化合物還原，
以形成式(XV)的化合物，
然后在羰基部分存在下使式(XV)的化合物環(huán)化；或者
(e)在二苯基膦?；B氮化物存在下，使式(LIV)的化合物環(huán)化為上述相應(yīng)的式(XIXA)的化合物，然后將氨基保護(hù)基脫保護(hù)，
或者
(f)使式(LXIII)的化合物水解，
37.式XVIII、XVIIIa、XIX、XIXa、XXa、XXb、XIV、XV、LIV和LXIII的化合物，其中，Y-R3如權(quán)利要求14所定義，R1如權(quán)利要求2所定義，R2如權(quán)利要求10所定義，PG1和PG2為氮保護(hù)劑且R13為(C1-6)烷基。
38.式XVIII、XVIIIa、XIX、XIXa、XXa、XXb、XIV、XV、LIV和LXIII的化合物，其中，Y-R3如權(quán)利要求15或16所定義，R1如權(quán)利要求4-6中任一項(xiàng)所定義，R2為H或甲基，PG1和PG2為氮保護(hù)劑且R13為(C1-6)烷基。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)劑，其選擇性地通過(guò)對(duì)Toll樣受體(TLR)的激動(dòng)而發(fā)揮作用；還涉及其用途、其制備方法、其制備中所使用的中間體以及含有該抑制劑的合并物。這些抑制劑可用于各種治療領(lǐng)域，包括治療諸如肝炎(例如，HCV、HBV)等傳染性疾病、與遺傳學(xué)相關(guān)的病毒感染以及癌癥。
文檔編號(hào)C07D213/80GK101384593SQ200780005609
公開(kāi)日2009年3月11日 申請(qǐng)日期2007年2月5日 優(yōu)先權(quán)日2006年2月17日
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