專利名稱：胃抑勝肽受體活化的胰高血糖素化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供了一種胰高血糖素勝肽類似物，其對于胃抑勝肽受體(GIP)顯現(xiàn)促效劑(agonist)活性。同時(shí)于本文中提出了使用該類似物的方法。
背景技術(shù)：
胰高血糖素前原(pre-proglucagon)是一種具有158個(gè)氨基酸的前體多肽，其在不同組織中經(jīng)處理而形成的許多不同的胰高血糖素原(proglucagon)的衍生肽，包括胰高血糖素(glucagon)、胰高血糖素樣肽-I(GLP-I)、胰高血糖素樣肽-2 (GLP-幻及調(diào)酸素 (0XM;OXyntOmOdUlin)，其參與多樣生理功能，包括葡萄糖體內(nèi)平衡、胰島素分泌、胃排空、 及腸道生長、以及食物攝取量調(diào)節(jié)。胰高血糖素(Glucagon)是對應(yīng)于胰高血糖素前原由 33至61位氨基酸組成的含四個(gè)氨基酸的勝肽，而胰高血糖素樣肽-1 (GLP-I)是經(jīng)產(chǎn)生為對應(yīng)于胰高血糖素前原由72至108位氨基酸組成的含37個(gè)氨基酸的勝肽。胰高血糖素樣肽-1(7-36)酰胺或胰高血糖素樣肽-1(7-37)酸是胰高血糖素樣肽_1的生物有效形式，其主要對胰高血糖素樣肽-1受體展現(xiàn)相等的活性。當(dāng)血糖值降得太低時(shí)而不能提供足夠能量供身體活動時(shí)，會發(fā)生低血糖癥。在成人或超過10歲大的孩童中，低血糖癥除了作為糖尿病治療的副作用出現(xiàn)外，并不常見，但其會由其他的藥物治療或疾病、激素或酵素缺乏、或腫瘤所引起。當(dāng)血糖開始下降時(shí)，胰高血糖素(一種由胰臟所產(chǎn)生的激素)會對肝臟發(fā)出分解肝糖(glycogen)及釋放葡萄糖的信號，導(dǎo)致血糖值朝向正常值上升。因此，胰高血糖素在葡萄糖調(diào)節(jié)中所扮演之一般角色是為抗衡胰島素的作用及維持血糖值。然而，對于糖尿病患，此胰高血糖素對低血糖癥的反應(yīng)可能受損，而使得葡萄糖值更難回到正常范圍。低血糖癥是一種需要立即醫(yī)療而威脅生命的事件。施予胰高血糖素是為一種已確定的用于治療急性低血糖癥的藥物療法，且其是可在給藥的數(shù)分鐘內(nèi)恢復(fù)正常葡萄糖值。當(dāng)將胰高血糖素用于低血糖癥的急性醫(yī)療時(shí)，將結(jié)晶形態(tài)的胰高血糖素用稀酸緩沖液溶解，且以肌內(nèi)注射該溶液。雖然此治療有效，但此方法對于意識不清的人士而言麻煩且危險(xiǎn)。因此，需要有一種胰高血糖素類似物，其可維持或超越母分子的生物效能但在相關(guān)的生理?xiàng)l件下可充分溶解且穩(wěn)定，且可預(yù)先調(diào)配為溶液，并且能夠立即注射。此外，糖尿病患者被鼓勵要維持接近正常的血糖值，以延緩或預(yù)防微血管并發(fā)癥。 此目標(biāo)的達(dá)成通常需要密集的胰島素治療。在努力達(dá)成此目標(biāo)時(shí)，醫(yī)師已遭遇的糖尿病患中的低血糖癥頻率及嚴(yán)重度大量增加。因此，需要比目前的胰島素療法更不易誘導(dǎo)低血糖癥的用于治療糖尿病的改良藥物及方法。胰高血糖素樣肽-1具有與胰高血糖素不同的生物活性。其作用包括刺激胰島素合成及分泌、抑制胰高血糖素分泌，以及抑制食物攝取量。胰高血糖素樣肽-1已證實(shí)可降低糖尿病患中的高血糖癥(升高的葡萄糖值)。促胰島素分泌素-4(exendin-4)，是一種來自蜥蜴毒液(lizard venom)的與GLP-I共有約50%氨基酸相似度的勝肽，其是可活化 GLP-I受體且同樣已證實(shí)可降低糖尿病患中的高血糖癥。
也證實(shí)胰高血糖素樣肽-1及促胰島素分泌素-4可降低食物攝取量及促進(jìn)減重， 其是一種不僅對糖尿病患，且亦對罹患肥胖癥的病患有益的效果。肥胖癥的病患有較高的糖尿病、高血壓、高脂血癥、心血管疾病、及肌肉骨骼疾病的患病風(fēng)險(xiǎn)。因此，有需要用于治療糖尿病及肥胖癥的替代且較佳的經(jīng)改良的方法。

發(fā)明內(nèi)容
如本文所述，本發(fā)明是提供一種胰高血糖素勝肽類似物，其對于胃抑勝肽受體 (GIP)顯現(xiàn)促效劑(agonist)活性。同時(shí)于本文提出使用所述類似物的方法。天然胰高血糖素(SEQ ID NO 1)不會活化胃抑勝肽受體，且天然胰高血糖原本于胃抑勝肽受體顯現(xiàn)0% (例如小于0. 001%,0. 0001%)的天然胃抑勝肽活性。天然胰高血糖素對于胰高血糖素樣肽-1受體，具有約天然胰高血糖素樣肽-1活性。如本文所述對該天然胰高血糖素序列(SEQ ID NO 1)的修飾產(chǎn)生胰高血糖素勝肽類似物，其是可顯現(xiàn)與天然胰高血糖素(SEQ ID NO 1)活性相等或更佳的有效胰高血糖素活性，與天然胃抑勝肽 (SEQ ID NO :67 活性相等或更佳的有效胃抑勝肽活性，及/或與天然胰高血糖素樣肽-1、 胰高血糖素樣肽-1 (7-36)酰胺(SEQ ID NO 52)或胰高血糖素樣肽_1 (7_37)酸(SEQ ID NO 50)的活性 < 是胰高血糖素樣肽-1的生物有效形式，證實(shí)基本上對胰高血糖素樣肽-1 受體相等的活性 > 相等或更佳的有效胰高血糖素樣肽-1活性。如本文所述的數(shù)據(jù)證實(shí)具有胃抑勝肽活性及胰高血糖素樣肽-1活性的胰高血糖素類似物對于導(dǎo)致體重降低或預(yù)防體重增加，以及治療高血糖癥，包括糖尿病，特別有效。鑒于先前技術(shù)的啟示，即拮抗胃抑勝肽為降低日常食物攝取量及體重，并增加胰島素敏感性及能量消耗，該活性并未特別地被預(yù)期。(Irwin et al.，Diabetologia 50 :1532-1540(2007) ；and Althage et al.，J Biol Chem, e-publication on April 17,2008).。因此，在某些實(shí)施例中，該胰高血糖素類似物為IOOnM或更少，或約75、50、25、 10、8、6、5、4、3、2或InM或更少時(shí)，顯現(xiàn)對胃抑勝肽受體活化活性的EC50值。在某些實(shí)施例中，本文所述的類似物為約0. OOlnM.O. OlnM或0. InM的胃抑勝肽受體顯現(xiàn)一 EC50值。 在某些實(shí)施例中，本文所述的類似物為不超過InM、2nM、3nM、4nM、5nM、6nM、8nM、10nM、15nM、 20nM、25nM、30nM、40nM、50nM、75nM、或IOOnM的胃抑勝肽受體顯現(xiàn)一 EC50值。在某些實(shí)施例中，該類似物為IOOnM或更少，75、50、25、10、8、6、5、4、3、2或InM或更少時(shí)，顯現(xiàn)對胰高血糖素受體活化的EC50值。在某些實(shí)施例中，本文所述的類似物為約0. OOlnM.O. OlnM或 0. InM的胰高血糖素受體顯現(xiàn)一 EC50值。在某些實(shí)施例中，該于胰高血糖素受體的EC50值不超過 InM、2ηΜ、3ηΜ、4ηΜ、5ηΜ、6ηΜ、8ηΜ、IOnMU5ηΜ、20ηΜ、25ηΜ、30ηΜ、40ηΜ、50ηΜ、75ηΜ、或 ΙΟΟηΜ。在某些實(shí)施例中，該類似物顯現(xiàn)約IOOnM或更少，或約75、50、25、10、8、6、5、4、3、2 或InM或更少的對胰高血糖素樣肽-1受體活化的EC50值。在某些實(shí)施例中，本文所述的類似物為約0. OOlnM.O. OlnM或0. InM的胰高血糖素樣肽-1受體顯現(xiàn)一 EC50。在某些實(shí)施例中，該于胰高血糖素樣肽-1的EC50值不超過1ηΜ、2ηΜ、3ηΜ、4ηΜ、5ηΜ、6ηΜ、8ηΜ、10ηΜ、15ηΜ、 2011] 、2511]\1、3011]\1、4011]\1、5011]\1、7511]\1、或10011]\1。受體活化是通過體外(in vitro)測定法而測得，其是在HEK293細(xì)胞中過度表達(dá)該受體以測試cAMP的誘導(dǎo)，例如測定的HEK293細(xì)胞與DNA編號的受體共同轉(zhuǎn)染，且具連接至如實(shí)施例14所述的cAMP應(yīng)答元件(responsive element)的一焚光素酶基因(luciferase gene)。
在某些實(shí)施例中，該類似物于胃抑勝肽受體相對于天然胃抑勝肽(胃抑勝肽效能)顯現(xiàn)至少約 0. 005 %,0. 0075 %,0. 01 %,0. 025 %,0. 05 %,0. 075 %,0. 1 %,0. 2%, 0. 3%,0. 4%,0. 5%,0. 6%,0. 7%,0. 8%,0. 9%,1 %>5%,10%,20%,30%,40%,50%, 60 %、75 %、100 %、125 %、150 %、175 %或200 %或更高的活性。在某些實(shí)施例中，本文所述的類似物于胃抑勝肽受體相對于天然胃抑勝肽顯現(xiàn)不超過約100 %、1000 %、10，000 %、 100，000%，或1，000，000%的活性。在某些實(shí)施例中，該類似物于胰高血糖素受體相對于天然胰高血糖素(胰高血糖素效能)顯現(xiàn)至少約1%、5%、10%、20%、30%、40%、50%、 60%、75%、100%、125%、150%、175%、200%、250%、300%、350%、400%、450%、500% 或更高的活性。在某些實(shí)施例中，本文所述的類似物于胰高血糖素受體相對于天然胰高血糖素顯現(xiàn)不超過約100%、1000%、10，000%、100，000%，或1，000，000%的活性。在某些實(shí)施例中，該類似物于胰高血糖素樣肽-1受體相對于天然胰高血糖素樣肽-1 (胰高血糖素樣肽-1 效能)顯現(xiàn)至少約 0. 1%,0. 2%,0. 3%,0. 4%,0. 5%,0. 6%,0. 7%,0. 8%,0. 9%, 1%,2%,3%,4%,5%,6%,7%,8%,9% ,10%,20%,30%,40%,50%,60%,75% ,100%, 125 %、150 %、175 %或200 %或更高的活性。在某些實(shí)施例中，本文所述的類似物于胰高血糖素樣肽-1受體相對于天然胰高血糖素樣肽-1顯現(xiàn)不超過約100%、1000%、10，000%、 100，000%，或 1,000，000% 的活性。在特定實(shí)施例中，如本文所述的類似物及胰高血糖素勝肽，當(dāng)缺少親水性基團(tuán)時(shí)， 例如聚乙二醇(PEG)，顯現(xiàn)標(biāo)示％的活性，然而，當(dāng)包含親水性基團(tuán)時(shí)，例如聚乙二醇 (PEG)，顯現(xiàn)一降低％的活性(例如約10倍降低的活性)。因此，在某些實(shí)施例中，該類似物在缺少親水性基團(tuán)時(shí)顯現(xiàn)前述％活性程度，并在包含親水性基團(tuán)時(shí)，顯現(xiàn)一約10倍降低的活性。一類似物于一受體相對于該受體之一天然配體的活性，其是以該類似物對天然配體兩者的EC50取倒數(shù)計(jì)算。因此，本發(fā)明一方面提供可于胰高血糖素受體及胃抑勝肽受體顯現(xiàn)活性的類似物 (胰高血糖素/胃抑勝肽共同促效劑(co-agonist))。此類類似物缺少天然胰高血糖素的選擇性(其是胰高血糖素受體相對于胃抑勝肽受體的選擇性)。在某些實(shí)施例中，該類似物于胃抑勝肽受體的EC50，與其于胰高血糖素受體的EC50不同，是少于約50倍、40倍、30 倍或20倍(較高或較低)。在某些實(shí)施例中，該類似物的胃抑勝肽效能，與其于胰高血糖素效能不同，是少于約500倍、450倍、400倍、350倍、300倍、250倍、200倍、150倍、100倍、 75倍、50倍、25倍、20倍、15倍、10倍或5倍(較高或較低)。在某些實(shí)施例中，該類似物于胃抑勝肽受體的EC50除以該類似物于胰高血糖素受體的EC50的比值，約少于100、75、 60、50、40、30、20、15、10或5。在某些實(shí)施例中，于胃抑勝肽受體的EC50除以胰高血糖素受體的 EC50 的比值，約為 1 或少于 1(例如約 0. 01、0. 013、0. 0167、0. 02,0. 025,0. 03,0. 05、 0. 067,0. 1,0. 2)。在某些實(shí)施例中，該類似物胃抑勝肽效能相較于該類似物胰高血糖素效能的比值，約少于 500、450、400、350、300、250、200、150、100、75、60、50、40、30、20、15、10 或 5。在某些實(shí)施例中，于胃抑勝肽受體的效能除以于胰高血糖素受體的效能的比值，約為1 或少于 1 (例如約 0. 01,0. 013,0. 0167,0. 02,0. 025,0. 03,0. 05,0. 067,0. 1,0. 2)。在某些實(shí)施例中，胰高血糖素樣肽-1活性是可顯著地降低或破壞，例如通過第7號位置的氨基酸修飾，如取代異亮氨酸(Ile)，羧基端至第27號或第觀號位置的刪除，產(chǎn)生27-或28-氨基酸勝肽，或其組合。
本發(fā)明的另一方面提供于胰高血糖素、胃抑勝肽及胰高血糖素樣肽-1受體(GLP-1 rec印tor)(胰高血糖素/胃抑勝肽/胰高血糖素樣肽-1三重促效劑 (tri-agonist)顯現(xiàn)活性的類似物。此類類似物會損失天然胰高血糖素的選擇性(其是胰高血糖素受體相對于胰高血糖素樣肽-1及胃抑勝肽受體的選擇性)。在某些實(shí)施例中，該類似物于胃抑勝肽受體的EC50，分別與其于胰高血糖素及胰高血糖素樣肽-1受體的EC50 不同，是約少于5000倍、2500倍、1000倍、750倍、500倍、250倍、100倍、50倍、40倍、30倍或20倍(較高或較低)。在某些實(shí)施例中，該類似物的胃抑勝肽效能，與其于胰高血糖素及胰高血糖素樣肽-1效能不同，是少于約1000倍、750倍、500倍、450倍、400倍、350倍、300 倍、250倍、200倍、150倍、100倍、75倍、50倍、25倍、20倍、15倍、10倍或5倍(較高或較低)。在某些實(shí)施例中，三重促效劑于胃抑勝肽受體的EC50除以三重促效劑于胰高血糖素樣肽-1 受體的 EC50 的比值，約少于 10，000、7500、5000、2500、1000、750、500、250、100、75、 60、50、40、30、20、15、10、5或1。在某些實(shí)施例中，于胰高血糖素樣肽_1受體的EC50除以于胃抑勝肽受體的EC50的比值，約為5、4、3、2或1，或少于1 (例如少于約0. 00001,0. 0001、 0.001,0.0025,0.005,0.0075,0.01,0.013,0.0167,0.02,0.025,0.03,0.05,0. 067,0. 1、 0. 2)。在某些實(shí)施例中，于胰高血糖素樣肽-1受體的EC50大于約0. 1(例如大于約0. 25、 0. 75、1)。在某些實(shí)施例中，三重促效劑于胃抑勝肽受體的效能除以三重促效劑于胰高血糖素樣肽-1 受體的效能的比值，約 1000、750、500、250、100、75、60、50、40、30、20、15、10、5 或1。在某些實(shí)施例中，于胃抑勝肽受體的效能除以于胰高血糖素樣肽-1受體的效能的比值，約為 5、4、3、2 或 1，或少于 1(例如少于約 0. 0001,0. 001,0. 01,0. 013,0. 0167,0. 02、 0. 025,0. 03,0. 05,0. 067,0. 1,0. 2)。在相關(guān)實(shí)施例中，三重促效劑于胃抑勝肽受體的EC50 除以三重促效劑于胰高血糖素受體的EC50的比值，約少于100、75、60、50、40、30、20、15、10 或5。在某些實(shí)施例中，于胃抑勝肽受體的EC50除以胰高血糖素受體的EC50的比值，約為 1 或少于 1 (例如約 0. 01,0. 013,0. 0167,0. 02,0. 025,0. 03,0. 05,0. 067,0. 1,0. 2)。在某些實(shí)施例中，該三重促效劑的胃抑勝肽效能相較于該三重促效劑的胰高血糖素效能的比值，約少于 500、450、400、350、300、250、200、150、100、75、60、50、40、30、20、15、10 或 5。在某些實(shí)施例中，于胃抑勝肽受體的效能除以于胰高血糖素受體的效能的比值，約為1或少于 1 (例如約 0. 01,0. 013,0. 0167,0. 02,0. 025,0. 03,0. 05,0. 067,0. 1,0. 2)。在某些實(shí)施例中，三重促效劑于胰高血糖素樣肽-1的EC50除以三重促效劑于胰高血糖素受體的EC50 的比值，約少于100、75、60、50、40、30、20、15、10或5。在某些實(shí)施例中，于胰高血糖素樣肽-1的EC50除以胰高血糖素受體的EC50的比值，約為1或少于1 (例如約0. 01,0. 013、 0. 0167,0. 02,0. 025,0. 03,0. 05,0. 067,0. 1,0. 2)。在某些實(shí)施例中，三重促效劑的胰高血糖素樣肽-1效能除以三重促效劑的胰高血糖素效能的比值，約少于100、75、60、50、40、30、 20、15、10或5。在某些實(shí)施例中，于胰高血糖素樣肽-1受體的效能除以于胰高血糖素受體的效能的比值，約為1或少于1(例如約0. 01、0. 013、0. 0167、0. 02,0. 025,0. 03,0. 05、 0. 067,0. 1,0. 2)。本發(fā)明的又另一方面提供于胰高血糖素樣肽-1受體及胃抑勝肽受體顯現(xiàn)活性， 但其中胰高血糖素活性是顯著地降低或破壞(胃抑勝肽/胰高血糖素樣肽-1共同促效劑) 的類似物，例如第3號位置氨基酸修飾。舉例來說此位置取代為酸性、堿性或疏水性氨基酸(谷氨酸、鳥氨酸、亮氨酸)而降低胰高血糖素的活性。在某些實(shí)施例中，該類似物于胃抑勝肽受體的EC50，與其于胰高血糖素樣肽-1受體的EC50不同，是約少于1000倍、750 倍、500倍、250倍、100倍、50倍、40倍、30倍或20倍(較高或較低)。在某些實(shí)施例中，該類似物的胃抑勝肽效能，與其胰高血糖素樣肽-1效能不同，是少于約1000倍、750倍、500 倍、250倍、100倍、25倍、20倍、15倍、10倍或5倍(較高或較低)。在某些實(shí)施例中，此類類似物于胰高血糖素受體具有約10%或更少的天然胰高血糖素活性，例如約1至10%，或約0. 1至10%，或大于約0. 但小于約10%。在某些實(shí)施例中，該類似物于胃抑勝肽受體的EC50除以該類似物于胰高血糖素樣肽-1受體的EC50的比值，約少于100、75、60、50、40、 30、20、15、10或5，且不少于1。在某些實(shí)施例中，該類似物的胃抑勝肽效能相較于該類似物的胰高血糖素樣肽-1的比值，約少于100、75、60、50、40、30、20、15、10或5，且不少于1。 在某些實(shí)施例中，于胰高血糖素樣肽-1受體的EC50除以于胃抑勝肽受體的EC50的比值， 約為 5、4、3、2 或 1，或少于 1 (例如少于約 0. 00001,0. 0001,0. 001,0. 0025,0. 005,0. 0075、 0. 01,0. 013,0. 0167,0. 02,0. 025,0. 03,0. 05,0. 067,0. 1,0. 2)。在某些實(shí)施例中，共同促效劑的胃抑勝肽效能除以共同促效劑的胰高血糖素樣肽-1效能，約1000、750、500、250、100、 75、60、50、40、30、20、15、10、5或1。在某些實(shí)施例中，于胃抑勝肽受體的效能除以于胰高血糖素樣肽-1受體的效能的比值，約為5、4、3、2或1，或少于1(例如少于約0. 0001、0. 001、 0. 01,0. 013,0. 0167,0. 02,0. 025,0. 03,0. 05,0. 067,0. 1,0. 2)。本發(fā)明的另一方面提供于胃抑勝肽受體顯現(xiàn)活性，其胰高血糖素及胰高血糖素樣肽-1活性顯著地降低或破壞(「胃抑勝肽促效劑胰高血糖素勝肽」)的類似物，例如第3及 7號位置的氨基酸取代。在某些實(shí)施例中，此類類似物于胰高血糖素受體具有約10%或更少的天然胰高血糖素活性，例如約1至10%，或約0. 1至10%，或大于約0. 1^^0.5%或 1 %，但小于約1 %、5 %或10 %。在某些實(shí)施例中，此類類似物于胰高血糖素樣肽-1受體具有約10%或更少的天然胰高血糖素樣肽-1活性，例如約1至10%，或約0. 1至10%，或大于約0. 1%,0. 5%或1%，但小于約1%、5%或10%。在本發(fā)明的某些方面，于胃抑勝肽受體顯現(xiàn)促效劑活性的類似物包含有SEQ ID NO :1，是具有至少一個(gè)氨基酸修飾以及一種延伸，其是由1至21個(gè)氨基酸(例如5至18、 7至15、9至12個(gè)氨基酸)的羧基端至類似物第四號位置的氨基酸。在特定實(shí)施例中，該類似物包含至少一個(gè)氨基酸修飾并高達(dá)15個(gè)(例如不超過 15個(gè)，不超過10個(gè)氨基酸修飾)。舉例來說，該類似物包含有SEQ ID N0:1，具1、2、3、4、5、 6、7、8、9、10、11、12、13、14或15個(gè)氨基酸修飾。在特定實(shí)施例中，該類似物包含至少一個(gè)氨基酸修飾，高達(dá)10個(gè)氨基酸修飾以及額外的保留性氨基酸修飾。于又一方面，該至少一個(gè)的氨基酸修飾是賦予穩(wěn)定類似物羧基端部分中一穩(wěn)定化的α螺旋結(jié)構(gòu)。達(dá)成穩(wěn)定化的α 螺旋結(jié)構(gòu)的修飾是如本文所述。請參見，例如，在「α螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定/分子內(nèi)架橋」章節(jié)中的教學(xué)。包含有一酰基化或烷基化羧基端延伸或一包括1至6個(gè)帶正電氨基酸羧基端延伸的類似物，意外地于胃抑勝肽受體顯現(xiàn)增加的促效劑活性。因此，在特定實(shí)施例中，該延伸的氨基酸至少一個(gè)，是位于第37至43號位置中任何位置(根據(jù)SEQ ID NO 1的編號)包含有?；蛲榛?，其中該?；蛲榛鶎ψ匀话l(fā)生的氨基酸來說是非自然的，即該延伸酰基化或烷基化。在某些實(shí)施例中，該?；蛲榛侵苯舆B接至氨基酸，例如通過氨基酸側(cè)鏈。 在其他實(shí)施例中，該酰基或烷基是可通過間隔物(例如單一氨基酸、雙肽、三肽、親水性雙功能間隔物、疏水性雙功能間隔物)連接至?；蛲榛?。適合包含?；蛲榛陌被?，也適合如本文所述的?；巴榛?。請參見，例如標(biāo)題為「?；巴榛拐鹿?jié)中的教學(xué)。在其他實(shí)施例中，延伸的1至6個(gè)氨基酸(例如1至2個(gè)、1至3個(gè)、1至4個(gè)、1 至5個(gè)氨基酸)為帶正電氨基酸，例如化學(xué)式IV的氨基酸，如賴氨酸。如本文所使用的術(shù)語「帶正電氨基酸(positive-charged amino acid)」是指包含在生理pH下(例如pH 6. 8至8.0，pH 7.0至7. 7)的任何自然生成或非自然生成，在其側(cè)鏈原子上帶正電的氨基酸。在特定方面，該帶正電氨基酸是位于第37、38、39、40、41、42及43號位置中任何位置。 在特定實(shí)施例中，該帶正電氨基酸是位于第40號位置。在其他實(shí)施例中，該延伸中是如本文所述經(jīng)酰基化或烷基化，并包含如本文所述的1至6個(gè)帶正電氨基酸。在又一實(shí)施例中，該胃抑勝肽受體顯現(xiàn)促效劑活性的類似物包含(i)SEQ ID NO 1，其是具有至少一個(gè)氨基酸修飾，(ii) 一種延伸，為1至21個(gè)氨基酸(例如5至18、7至 15、9至12個(gè)氨基酸)，其是羧基端至類似物第四號位置的氨基酸，以及(iii)包含?；蛲榛陌被?，該酰基或烷基是指對自然生成的氨基酸來說是非自然的氨基酸，該氨基酸是位于羧基端延伸外(例如第1至四號位置中任何位置)。在某些實(shí)施例中，該類似物包含于第10號位置經(jīng)?；蛲榛陌被?。在特定方面，該?；蛲榛菫镃4至C30 脂肪?；駽4至C30烷基。在某些實(shí)施例中，該酰基或烷基是可通過間隔物(例如一氨基酸、雙肽、三肽、親水性雙功能間隔物、疏水性雙功能間隔物)連接至?；蛲榛Ｔ谔囟ǚ矫?，該類似物包含穩(wěn)定α螺旋的氨基酸修飾，(例如其是介于第16號位置的谷氨酸及第20號位置的賴氨酸間的鹽橋，或位于第16、20、21、及M號位置中任意一、二、三或多個(gè)位置的α，α雙取代氨基酸)。在特定方面，該類似物額外地包含有氨基酸修飾，其是賦予對第四型雙勝肽蛋白水解酶切割的抗性。包含另外氨基酸修飾的類似物需于此處考慮。在特定實(shí)施例中，該具胃抑勝肽受體活性的類似物于胃抑勝肽受體顯現(xiàn)至少約 0. 1% (例如至少0. 5%、1%、2%、5%、10%、15%或20%)的天然胃抑勝肽活性。在某些實(shí)施例中，該類似物于胃抑勝肽受體顯現(xiàn)超過20% (例如超過50%、75%、100%、200%、 300%,500%)的天然胃抑勝肽活性。在某些實(shí)施例中，該胃抑勝肽受體于胰高血糖素樣肽-1受體及胰高血糖素受體中之一或前述兩者顯現(xiàn)可觀的促效劑活性。在某些方面，對此類受體(其是指胃抑勝肽受體及胰高血糖素樣肽-1受體及/或胰高血糖素受體)的選擇性為100倍以內(nèi)。舉例來說，該具有胃抑勝肽受體活性的類似物，其對胰高血糖素樣肽-1 受體的選擇性是少于100倍(于50倍內(nèi)、于25倍內(nèi)、于15倍內(nèi)、于10倍內(nèi))，該選擇性是于胃抑勝肽受體及/或胰高血糖素受體。如本文所述，提供高效能的胰高血糖素促效劑類似物，其對于胰高血糖素受體也顯現(xiàn)增加的活性，在另外實(shí)施例中，顯現(xiàn)增強(qiáng)的生物物理穩(wěn)定度及/或水溶液溶解度。此夕卜，依據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供缺少天然胰高血糖素的選擇性(其是胰高血糖素受體相對于胰高血糖素樣肽-1受體的選擇性)的類似物，且因此代表此兩類受體的共同促效劑。 胰高血糖素類似物內(nèi)的經(jīng)選擇氨基酸修飾是可控制該類似物的相對活性，其是于胰高血糖素樣肽-1受體對胰高血糖素受體的相對活性。因此，本發(fā)明的又另一方面提供胰高血糖素共同促效劑類似物，其是于胰高血糖素受體對胰高血糖素樣肽-1受體具較高活性，胰高血糖素共同促效劑類似物是于此兩受體均約有相等活性，且胰高血糖素共同促效劑類似物
12于胰高血糖素樣肽-1受體對胰高血糖素受體具較高活性。共同促效劑的后續(xù)分類是可設(shè)計(jì)于胰高血糖素受體顯現(xiàn)少量或無活性，而仍保留其活化胰高血糖素樣肽-1受體的能力， 其是與天然胰高血糖素樣肽-1有相同或更強(qiáng)的效能。此類共同促效劑的任一種亦包含有修飾，其是賦予增強(qiáng)的生物物理穩(wěn)定度及/或水溶液溶解度。對胰高血糖素及胰高血糖素樣肽-1受體展現(xiàn)共同促效作用的胰高血糖素類似物有利于數(shù)個(gè)應(yīng)用。首先，使用胰高血糖素于治療低血糖癥會過度補(bǔ)償?shù)脱侵?，而?dǎo)致過高的血糖值。若施予胰高血糖素/胰高血糖素樣肽-1受體共同促效劑，則額外的胰高血糖素樣肽-1刺激可緩沖胰高血糖素促效劑的效果，而防止由治療低血糖癥所導(dǎo)致的過高的葡萄糖血值。此外，如本文所述，當(dāng)單獨(dú)使用，或與其他抗糖尿病或抗肥胖藥劑合并用藥時(shí)，本發(fā)明的胰高血糖素共同促效劑類似物可用于控制高血糖癥，或?qū)е麦w重降低或防止體重增力口。另一種導(dǎo)致體重降低的化合物為調(diào)酸素，其是一種存在于小腸中的天然產(chǎn)生的消化激素(參見Diabetes 2005 ；54 =2390-2395)。調(diào)酸素為包含胰高血糖素的四個(gè)氨基酸序列 (即SEQ ID NO 1)其后接SEQ ID NO :27的8個(gè)氨基酸羧基端延伸(KRNRNNIA)之一 37個(gè)氨基酸勝肽。雖然本發(fā)明考慮將文中所述的胰高血糖素類似物可可選擇的結(jié)合至此8個(gè)氨基酸羧基端延伸(SEQ ID NO :27)，但本發(fā)明的某些實(shí)施例中亦特別地考慮缺乏SEQ ID NO 27的8個(gè)相連羧基氨基酸的類似物及該類似物的使用?；衔锟山?jīng)由氨基酸修飾而客置化以調(diào)節(jié)勝肽的胰高血糖素樣肽-1活性，且因此可調(diào)整本發(fā)明的胰高血糖素類似物以治療特定癥狀或疾病。更具體地說，本文提供胰高血糖素類似物，其中每一類似物對各別的胰高血糖素及胰高血糖素樣肽-1受體展現(xiàn)特有的活性相對值。舉例來說，可對每一勝肽進(jìn)行修飾，以產(chǎn)生胰高血糖素勝肽，該胰高血糖素勝肽具有對GLP-I受體相對于天然GLP-I為至少約(包括至少約1.5^^2^^5 ^ 7 % UO %,20 %,30 %,40 %,50 %,60 %,75 % UOO % ,125 % ,150 % ,175 % )至約 200 % 間的任何值或更高活性，以及對胰高血糖素受體相對于天然胰高血糖素為至少約(包括至少約 1. 5%,10 %,20 %,30 %,40 %,50 %,60 %,75 %,100 %,125 150 % ,175 %, 200 %, 250 %, 300 %, 350 %,400 %,450 % )至約 500 % 間的任何值或更高活性。在某些實(shí)施例中，本文所述的胰高血糖素勝肽，于胰高血糖素受體顯現(xiàn)高達(dá)約100%、 1000 %、10，000 %、100，000 %或1，000, 000 %的天然胰高血糖素活性。某些實(shí)施例中，本文所述的胰高血糖素勝肽，于胰高血糖素樣肽-1受體顯現(xiàn)高達(dá)約100%、1000%、10，000%、 100，000%，或1，000，000%的天然胰高血糖素樣肽-1活性。該天然胰高血糖素的氨基酸序列為SEQ ID NO :1，該胰高血糖素樣肽-1(7-36)酰胺的氨基酸序列為SEQ ID N0:52，該胰高血糖素樣肽-1(7-37)的氨基酸序列為SEQ ID NO :50。在例示實(shí)施例中，一胰高血糖素勝肽是可于胰高血糖素受體顯現(xiàn)至少10%的天然胰高血糖素活性，并于胰高血糖素樣肽-1受體顯現(xiàn)至少50%的天然胰高血糖素樣肽-1活性，或于胰高血糖素受體顯現(xiàn)至少 40 %的天然胰高血糖素活性，且于胰高血糖素樣肽-1受體顯現(xiàn)至少40 %的天然胰高血糖素樣肽-1活性，或于胰高血糖素受體顯現(xiàn)至少60%的天然胰高血糖素活性，并于胰高血糖素樣肽-1受體顯現(xiàn)至少60%的天然胰高血糖素樣肽-1活性。胰高血糖素勝肽的選擇性(其是胰高血糖素受體相對于胰高血糖素樣肽-1受體的選擇性)，是以胰高血糖素/胰高血糖素樣肽-ι活性的相對比率描述(其是于胰高血糖素受體對于天然胰高血糖素的勝肽活性，除以于胰高血糖素樣肽-ι受體對于天然胰高血糖素樣肽-1的勝肽活性)。舉例來說，胰高血糖素勝肽有1 1的胰高血糖素/胰高血糖素樣肽-1活性比率，其是于胰高血糖素受體顯現(xiàn)60 %的天然胰高血糖素活性，且于胰高血糖素樣肽-1受體顯現(xiàn)60 %的天然胰高血糖素樣肽-1活性。胰高血糖素/胰高血糖素樣肽-1 活性的例示比率包含約 1 1、1.5 1、2 1、3 1、4 1、5 1、6 1、7 1、8 1、 9 1 或 10 1，或約 1 10、1 9、1 8、1 7、1 6、1 5、1 4、1 3、1 2 或 1 1.5。如一實(shí)施例，10 1的胰高血糖素/胰高血糖素樣肽-1活性比率是指10倍的選擇性(其是胰高血糖素受體相對于胰高血糖素樣肽-1受體的選擇性)。同樣地，10 1的胰高血糖素樣肽-1/胰高血糖素的活性比率是指10倍的選擇性(其是胰高血糖素樣肽-1 受體相對于胰高血糖素受體的選擇性)。根據(jù)一實(shí)施例，提供具有增強(qiáng)的效能，及可選擇的溶解度及穩(wěn)定度經(jīng)改良的胰高血糖素類似物。在一實(shí)施例中，增強(qiáng)的胰高血糖素效能，是通過位于天然胰高血糖素(SEQ ID NO 1)中第16號位置的氨基酸修飾而提供。經(jīng)由非限定實(shí)施例的方法，此等增強(qiáng)的效能是通過第16號位置的自然發(fā)生的絲氨酸取代為谷氨酸，或另一具有4個(gè)原子長度側(cè)鏈的帶負(fù)電氨基酸，或替代為谷氨酰胺、高谷氨酸(homoglutamic acid)或同胱氨酸(homocysteic acid)、或帶電荷氨基酸，其是具有包含至少一異質(zhì)原子(例如N，0，S，P)的側(cè)鏈以及4個(gè) (或3至幻原子長度側(cè)鏈。在一實(shí)施例中，增強(qiáng)效能的胰高血糖素促效劑包含SEQ ID NO 2、SEQ ID NO :3、SEQ ID NO :4、SEQ ID NO :5、SEQ ID NO :6、SEQ ID NO 7 之一勝月太或一 SEQ ID NO :5的胰高血糖素促效劑類似物。依據(jù)一實(shí)施例，是提供一種胰高血糖素類似物蛋白質(zhì)，其是對胰高血糖素受體相對于野生型胰高血糖素具有增強(qiáng)的效能，其中該勝肽包含 SEQ ID NO :7、SEQ ID NO :8、SEQ ID NO 9 或 SEQ ID NO 10 的序列，其中該胰高血糖素肽維持其于胰高血糖素受體相對于胰高血糖素樣肽-1受體的選擇性。胰高血糖素受體活性，是可通過于第3號位置的氨基酸修飾而減少、維持或增強(qiáng)， 例如取代第3號位置自然發(fā)生的谷氨酰胺。在一實(shí)施例中，第3號位置的氨基酸取代為酸性、堿性、或疏水性氨基酸(谷氨酸、鳥氨酸、亮氨酸)，其是證實(shí)可大量地降低或破壞胰高血糖素受體活性。取代該類似物例如谷氨酸、鳥氨酸或亮氨酸，于胰高血糖素受體具有約 10%或更少的天然胰高血糖素活性，例如約1-10%，或約0. 1-10%，或大于約0. 但小于約10%，而于胰高血糖素樣肽-1受體顯現(xiàn)約至少20%的胰高血糖素樣肽-1活性。舉例來說，如本文所述的例示類似物，具有約0.5%、或約7%的天然胰高血糖素活性，而于胰高血糖素樣肽-1受體顯現(xiàn)約至少20%的胰高血糖素樣肽-1活性。在另一實(shí)施例中，該胰高血糖素勝肽第3號位置自然發(fā)生的谷氨酰胺，是可取代為不會于胰高血糖素受體大量降低活性的谷氨酰胺類似物，且在某些情況下，增強(qiáng)如本文所述胰高血糖素受體的活性。舉例來說，該在第3號位置包含有一谷氨酰胺類似物之一胰高血糖素勝肽，是可于胰高血糖素受體顯現(xiàn)約5 %、10 %、20 %、50 %或約85 %，或更高的天然胰高血糖素(例如SEQ ID N0:1)活性。舉例來說，該在第3號位置包含有谷氨酰胺類似物之一胰高血糖素勝肽，是可于胰高血糖素受體顯現(xiàn)約5^^10^^20^^50%或約85%， 或更高的天然胰高血糖素(例如SEQ ID NO :1)活性，其是一對應(yīng)的胰高血糖素勝肽的活性，具有除了在第3號位置經(jīng)修飾氨基酸外(例如SEQ ID NO 601或SEQ ID NO :602)，與包含有谷氨酰胺類似物的勝肽相同的氨基酸序列。在某些實(shí)施例中，該在第3號位置包含有谷氨酰胺類似物之一胰高血糖素勝肽，是可于胰高血糖素受體顯現(xiàn)增強(qiáng)的活性，但增強(qiáng)的活性不超過1000 %、10，000 %、100, 000 %、或1，000, 000 %的天然胰高血糖素活性或一
對應(yīng)的胰高血糖素勝肽的活性，其是具有除了在第3號位置經(jīng)修飾氨基酸外，與包含有谷氨酰胺類似物的勝肽相同的氨基酸序列。在某些實(shí)施例中，該谷氨酰胺類似物是為自然生成或非自然生成的氨基酸，其是包含有結(jié)構(gòu)I、II，或III的側(cè)鏈
權(quán)利要求
1.一種胰高血糖素勝肽的類似物，該類似物包含(i)具有至少一個(gè)至最多10個(gè)氨基酸改變的SEQ ID NO :1，其中該至少一個(gè)的氨基酸的改變使得類似物的C-末端部分被賦予了一個(gè)穩(wěn)定化的α螺旋結(jié)構(gòu)；( )羧基端至第四號位置的氨基酸的1至21個(gè)氨基酸的延伸；以及(iii)下列的至少一種(a)位于第37至43號位置(根據(jù)SEQID NO=I的編號)中任何位置的該延伸的氨基酸中至少一個(gè)包含有對自然發(fā)生的氨基酸來說是非自然的一酰基或一烷基；(b)該延伸的1至6個(gè)氨基酸為帶正電氨基酸；(c)在所述的同系物的第10號位置上為包含?；蛲榛陌被?，其中該?；蛲榛鶎ψ匀话l(fā)生的氨基酸來說是非自然的，或(d)(a)、(b)及(c)的組合；其中當(dāng)該類似物缺少一親水性基團(tuán)時(shí)，該類似物于胃抑勝肽(GIP)受體顯現(xiàn)至少約 0. 的天然胃抑勝肽(GIP)的活性；
2.如權(quán)利要求1所述的類似物，其中⑴該類似物包含一分子內(nèi)架橋，是介于第i及 i+4號位置的氨基酸的側(cè)鏈之間或第j及j+3號位置的氨基酸側(cè)鏈之間，其中i為12、13、 16、17、20或24，且j為17，(ii)該類似物的第16、20、21、及M號位置中一、二、三或多個(gè)位置被取代為α，α-雙取代氨基酸，或(iii) (i)及(ii)兩者。
3.如權(quán)利要求1或2所述的類似物，包含第16號位置的谷氨酸及第20號位置的賴氨酸，其中可選擇的有一內(nèi)酰胺架橋連接至該谷氨酸及該賴氨酸。
4.如權(quán)利要求3所述的類似物，是進(jìn)一步包含一或多個(gè)的第17號位置的谷氨酰胺、 第18號位置的丙氨酸、第21號位置的谷氨酸、第23號位置的異亮氨酸、第M號位置的丙氨酸或半胱氨酸，或其一或多個(gè)保守性取代。
5.如權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的類似物，包含一羧基端酰胺。
6.如權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的類似物，是包含于第1號位置、第2號位置或第1號及2號位置處的氨基酸取代，其中該氨基酸取代獲得了第四型雙勝肽蛋白水解酶 (DPP-IV protease)的抗性。
7.如權(quán)利要求6所述的類似物，其中在第1號位置的組氨酸被一氨基酸所取代，所述的氨基酸是選自于包含D-組氨酸、α，α-雙甲基咪唑乙酸(DMIA)、N-甲基組氨酸、α-甲基組氨酸、咪唑乙酸(imidazole acetic acid)、脫胺基組氨酸、羥基組氨酸、乙?；M氨酸及高組氨酸所組成的群。
8.如權(quán)利要求6或7所述的類似物，其中在第2號位置的絲氨酸被一氨基酸所取代，所述的氨基酸是選自于包含D-絲氨酸、丙氨酸、D-丙氨酸、纈氨酸、甘氨酸、N-甲基絲氨酸、 N-甲基丙氨酸以及胺基異丁酸(AIB)所組成的群。
9.如權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的類似物，其中在第1號位置的氨基酸包含一咪唑環(huán)(imidazole ring)。
10.如權(quán)利要求9所述的類似物，其中在第1號位置的氨基酸為組氨酸。
11.如權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的類似物，其中在第1號位置的氨基酸為非大的、 芳香族氨基酸。
12.如權(quán)利要求11所述的類似物，其中在第1號位置的氨基酸并非酪氨酸。
13.如權(quán)利要求1至12中任一項(xiàng)所述的類似物，包含在27J8或四號位置中一、二或所有處的氨基酸修飾。
14.如權(quán)利要求13所述的類似物，其中(a)第27號位置的甲硫氨酸被取代為大的脂肪族氨基酸，可選擇的為亮氨酸，(b)第觀號位置的天冬酰氨酸取代為小的脂肪族氨基酸，可選擇的為丙氨酸，(c)第四號位置的蘇氨酸取代為小的脂肪族氨基酸，可選擇的為甘氨酸， 或(d) (a)、(b)及(c)中兩種或所有的組合。
15.如權(quán)利要求14所述的類似物，包含第27號位置的亮氨酸、第觀號位置的丙氨酸以及第四號位置的甘氨酸或蘇氨酸。
16.如權(quán)利要求15所述的類似物，是包含一或多個(gè)下列修飾a.第2號位置的絲氨酸替換為為丙氨酸；b.第3號位置的谷氨酰胺替換為谷氨酸或谷氨酰胺類似物；c.第7號位置的蘇氨酸替換為異亮氨酸；d.第10號位置的酪氨酸替換為色氨酸或包含對自然生成的氨基酸來說是非自然的一?；蛲榛囊话被?；e.第12號位置的賴氨酸替換為異亮氨酸；f.第15號位置的天冬氨酸替換為谷氨酸；g.第16號位置的絲氨酸替換為谷氨酸；h.第20號位置的谷氨酰胺替換為絲氨酸、蘇氨酸、丙氨酸或胺基異丁酸； (i)第M號位置的谷氨酰胺替換為絲氨酸、蘇氨酸、丙氨酸或胺基異丁酸； j.第27號位置的甲硫氨酸替換為亮氨酸或正亮氨酸(Nle)；k.第四號位置的天冬酰氨酸替換為一帶電荷氨基酸，可選擇的為天冬氨酸或谷氨酸；以及(1)第四號位置的蘇氨酸替換為甘氨酸或一帶電荷氨基酸，可選擇的為天冬氨酸或谷氨酸。
17.如權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述的類似物，是包含(i)GPSSGAPPPS(SEQID NO :26) 或XGPSSGAPPPS(SEQ ID NO :674)的氨基酸序列，其中X為任何氨基酸，(ii)與SEQ ID NO 或SEQ ID NO :674氨基酸序列相比具有至少80%序列相似度的氨基酸序列，或(iii)具有一或多個(gè)保守性氨基酸替換的(i)或(ii)的該氨基酸序列，其中該氨基酸序列是類似物的羧基端至第四號位置。
18.如權(quán)利要求17所述的類似物，包含GPSSGAPPPS(SEQID NO 26)或 XGPSSGAPPPS(SEQ ID NO :674)的氨基酸序列，其中X為任何氨基酸，C-末端至類似物第四號位置的氨基酸。
19.權(quán)利要求1至18中任一項(xiàng)所述的類似物，其中包含一?；蛲榛脑摪被崾菫榛瘜W(xué)式I、II或III所示的氨基酸。
20.如權(quán)利要求19所述的類似物，其中該包含一?；蛲榛脑摪被釣橘嚢彼?。
21.如權(quán)利要求1至20中任一項(xiàng)所述的類似物，其中包含一酰基或烷基的該氨基酸是位于該類似物的第37、38、39、40、41、42及43號位置中任何位置。
22.如權(quán)利要求21所述的類似物，其中包含一?；蛲榛脑摪被崾俏挥谠擃愃莆锏牡?0號位置。
23.如權(quán)利要求1至22中任一項(xiàng)所述的類似物，其中該酰基為一C4至C30脂肪?；?。
24.如權(quán)利要求1至23中任一項(xiàng)所述的類似物，其中該?；蛲榛峭ㄟ^一間隔物共價(jià)性連接至該氨基酸的該側(cè)鏈。
25.如權(quán)利要求M所述的類似物，其中該間隔物是為3至10個(gè)原子長度。
26.如權(quán)利要求25所述的類似物，其中該間隔物為氨基酸或雙肽。
27.如權(quán)利要求沈所述的類似物，其中該間隔物為六-胺基己酸(6-aminohexanoic acid) 0
28.如權(quán)利要求沈所述的類似物，其中該間隔物為一雙肽，選自于由丙氨酸-丙氨酸、β -丙氨酸-β -丙氨酸、亮氨酸-亮氨酸及脯氨酸-脯氨酸所組成的群。
29.如權(quán)利要求對至觀中任一項(xiàng)所述的類似物，其中該間隔物及該酰基的總長度為約 14至觀個(gè)原子長度。
30.如權(quán)利要求1至四中任一項(xiàng)所述的類似物，其中該?；鶠橐籆12至C18脂肪?；?。
31.如權(quán)利要求30所述的類似物，其中該?；鶠镃14或C16脂肪?；?。
32.如權(quán)利要求1至31中任一項(xiàng)所述的類似物，根據(jù)SEQID NO=I的編號，該1至6個(gè)帶正電氨基酸是位于該類似物的第37、38、39、40、41、42及43號位置中任何位置。
33.如權(quán)利要求32所述的類似物，包含于第40號位置的一帶正電氨基酸。
34.如權(quán)利要求1至33中任一項(xiàng)所述的類似物，其中該帶正電氨基酸包含化學(xué)式IV的該結(jié)構(gòu)
35.如權(quán)利要求34所述的類似物，其中該化學(xué)式IV的氨基酸為鳥氨酸、二胺基丁酸 (Dab)、賴氨酸或高賴氨酸。
36.如權(quán)利要求1-35中任一項(xiàng)所述的類似物，當(dāng)該類似物不包含一親水性基團(tuán)時(shí)，該類似物于胰高血糖素樣肽-1受體具有至少約4%的胰高血糖素樣肽-1(SEQ ID N0:2)的活性。
37.如權(quán)利要求1-36中任一項(xiàng)所述的類似物，其中當(dāng)該類似物不包含一親水性基團(tuán)時(shí)，該類似物于胰高血糖素受體具有至少約20%的胰高血糖素的活性。
38.如權(quán)利要求1-36中任一項(xiàng)所述的類似物，其中當(dāng)該類似物不包含一親水性基團(tuán)時(shí)，該類似物包含在第3號位置的氨基酸修飾且于胰高血糖素受體具有少于的胰高血糖素的活性。
39.如權(quán)利要求1-35、37、38中任一項(xiàng)所述的類似物，其中當(dāng)該類似物不包含一親水性基團(tuán)時(shí)，該類似物包含在第7號位置的氨基酸修飾且于胰高血糖素樣肽-1受體具有少于 10%的胰高血糖素樣肽-1的活性。
40.如權(quán)利要求1-39中任一項(xiàng)所述的類似物，其中該胰高血糖素勝肽是共價(jià)性連接至在第19、20、23、24、27、32、43號位置處或該羧基端的氨基酸任何位置的親水性基團(tuán)。
41.如權(quán)利要求40所述的類似物，其中該胰高血糖素勝肽是共價(jià)性連接至于第M或 40號位置處的氨基酸的親水性基團(tuán)。
42.如權(quán)利要求40或41所述的類似物，其中該親水性基團(tuán)是共價(jià)性鍵結(jié)至賴氨酸、半胱氨酸、鳥氨酸、高半胱氨酸或乙?；奖彼帷?br> 43.如權(quán)利要求40至42中任一項(xiàng)所述的類似物，其中該親水性基團(tuán)為聚乙二醇 (PEG)。
44.如權(quán)利要求43所述的類似物，其中該聚乙二醇鏈分子量為約1，000道爾頓至約 40, 000道爾頓。
45.如權(quán)利要求43所述的類似物，其中該聚乙二醇鏈的分子量為約20，000道爾頓至約 40, 000道爾頓。
46.如權(quán)利要求40至45中任一項(xiàng)所述的類似物，其中對于胃抑勝肽受體活化的該類似物EC50為約IOnM或更少。
47.如權(quán)利要求40至46中任一項(xiàng)所述的類似物，其中該類似物于胃抑勝肽受體具有至少約0.01%的野生型胃抑勝肽(SEQ ID NO 4)的活性。
48.如權(quán)利要求40至47中任一項(xiàng)所述的類似物，其中該類似物于胰高血糖素樣肽-1 受體具有至少約0.4%的胰高血糖素樣肽-1 (SEQ ID NO 2)的活性。
49.如權(quán)利要求40至48中任一項(xiàng)所述的類似物，其中該類似物于胰高血糖素受體具有至少約2%的胰高血糖素的活性。
50.如權(quán)利要求1-38、權(quán)利要求40-47中任一項(xiàng)所述的類似物，其中該類似物于胰高血糖素樣肽-I受體的EC50與該類似物于胃抑勝肽受體的EC50的比值約少于0. 01。
51.如權(quán)利要求1-50中任一項(xiàng)所述的類似物，其中該類似物的胃抑勝肽效能是在該類似物的胰高血糖素樣肽-1效能的約500倍內(nèi)。
52.如權(quán)利要求1-51中任一項(xiàng)所述的類似物，其中該類似物的胃抑勝肽效能是在該類似物的胰高血糖素效能的約500倍內(nèi)。
53.一種包含兩胰高血糖素勝肽的二聚體，其中該胰高血糖素勝肽中至少一個(gè)如權(quán)利要求1至52中任一項(xiàng)所述的類似物，通過一連接物連接至另一者。
54.一種藥學(xué)組合物，包括如權(quán)利要求1至52中任一項(xiàng)所述的類似物、權(quán)利要求53所述的二聚體以及其藥學(xué)可接受鹽類，及藥學(xué)可接受載體。
55.一種使用預(yù)調(diào)配水性組合物治療低血糖癥的方法，該方法包括施予一有效量的如權(quán)利要求M項(xiàng)所述的藥學(xué)組合物的步驟。
56.一種治療糖尿病的方法，該方法包括施予一有效量的如權(quán)利要求M項(xiàng)所述的藥學(xué)組合物的步驟。
57.一種誘發(fā)腸道暫時(shí)麻痹的方法，該方法包括施予一有效量的如權(quán)利要求M項(xiàng)所述的藥學(xué)組合物的步驟。
58. 一種減少體重增加或?qū)е麦w重降低的方法，該方法包括施予一有效量的如權(quán)利要求討項(xiàng)所述的藥學(xué)組合物的步驟。
全文摘要
本發(fā)明提供了具有增加胃抑勝肽(GIP)活性的胰高血糖素勝肽，其可選擇的具有胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)及/或胰高血糖素活性。在某些實(shí)施例中，本發(fā)明提供包含有實(shí)際上與天然胰高血糖素相似的羧基端延伸的胰高血糖素勝肽。
文檔編號C07K14/605GK102459325SQ201080027026
公開日2012年5月16日 申請日期2010年6月16日 優(yōu)先權(quán)日2009年6月16日
發(fā)明者喬納森·戴, 大衛(wèi)·L.·斯邁利, 布萊恩·P.·沃德, 瑪麗亞·迪馬仕, 理查德·D.·迪馬仕, 約瑟夫·沙貝內(nèi), 詹姆斯·帕特森, 馬濤 申請人:印第安納大學(xué)科技研究有限公司