專利名稱：D－果糖－1,6－二磷酸鈉鎂其制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的化合物D-果糖-1,6-二磷酸鈉鎂，其制備方法以及這種新化合物作為有效成份的治療心肌缺血藥和抗高血壓藥的用途。
結(jié)構(gòu)式為Ⅱ的D-果糖-1,6-二磷酸(D-Fructose-1,6-DiphosphoricAcid)，為體內(nèi)糖代謝的重要中間體，并具有調(diào)節(jié)糖代謝中若干酶的作用。D-果糖-1,6-二磷酸能改善組織缺血缺氧條件下的能量代謝，即FDP可為組織細(xì)胞提供能源，又具有代謝調(diào)控劑的作用，激活若干酶，緩解細(xì)胞糖代謝紊亂。但式Ⅱ本身很不穩(wěn)定，實(shí)現(xiàn)其藥用價(jià)值困難。已知結(jié)構(gòu)式為Ⅲ的D-果糖-1,6-二磷酸三鈉鹽(D-Fructose-1,6-diphosphate trisodium Salt)，具有治療心肌缺血等缺血缺氧性疾病的作用，并已作為藥品應(yīng)用(Diana Massimo,Ger Offen DE 3446927,1985)。
Mg2+是機(jī)體內(nèi)必要的重要離子，是體內(nèi)許多酶保持活性，不可缺少的一種輔酶，即Mg2+對(duì)組織細(xì)胞功能有調(diào)節(jié)和參與作用。其體內(nèi)功能可對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生鎮(zhèn)靜，抗驚厥作用；松馳血管平滑肌而降壓，擴(kuò)張冠脈；減少兒茶酚胺釋放治療心律失常；防止洋地黃中毒等。而目前臨床所補(bǔ)充的Mg2+即硫酸鎂，不能為機(jī)體提供能源，以致在病變過程中組織細(xì)胞可因能源不足產(chǎn)生功能紊亂。
目前除已知硫酸鎂作為藥品在治療急性心肌梗塞，心肌缺血已在臨床應(yīng)用外，未見有文獻(xiàn)未報(bào)道過D-果糖-1,6-二磷酸鈉鎂這種化合物，及其在治療心肌缺血和抗高血壓藥中的應(yīng)用。
現(xiàn)有技術(shù)中已有的制備結(jié)構(gòu)式Ⅱ的化合物的D-果糖-1,6-二磷酸的方法，如芬蘭赫爾辛基大學(xué)的Matti Leisala在《Acta Chemica Scandinavica》B28 1974年公開的采用以葡萄糖，磷酸鹽和啤酒酵母為主要原料，經(jīng)酶促連續(xù)磷酸化反應(yīng)得到結(jié)構(gòu)式Ⅱ的化合物的D-果糖-1,6-二磷酸的方法。
本發(fā)明的目的一是提供新型治療心肌缺血和抗高血壓作用的化合物D-果糖-1,6-二磷酸鈉鎂；二是提供制備該化合物作為藥品的工業(yè)生產(chǎn)的簡便方法，三是該化合物作為有效成份的治療心肌缺血藥和抗高血壓藥的用途。
本發(fā)明提供的新型治療心肌缺血和抗高血壓作用的化合物D-果糖-1,6-二磷酸鈉鎂，其特征是
本發(fā)明提供的制備結(jié)構(gòu)式Ⅰ的化合物的方法采用的是這樣的步驟即首先將由葡萄糖、磷酸鹽和啤酒酵母經(jīng)酶促連續(xù)磷酸化反應(yīng)得到的發(fā)酵液制備的結(jié)構(gòu)式果糖二磷酸，與氧化鎂或堿式鎂鹽反應(yīng)，再用氫氧化鈉與之中和，然后加入乙醇中，攪拌、離心，待沉淀產(chǎn)生后再用乙醇對(duì)其重結(jié)晶，最后將結(jié)晶體進(jìn)行干燥后即得結(jié)構(gòu)式Ⅰ的化合物。
本發(fā)明的上述方法可以通過附圖
及實(shí)施例進(jìn)一步說明。
附圖為本發(fā)明實(shí)施例的工藝流程圖。
首先制備發(fā)酵液，1升發(fā)酵液的制備包括5-10％的葡萄糖，磷酸鹽6-8％，啤酒酵母400-600克，用氫氧化鈉調(diào)整溶液的pH值至5-6，在40℃的溫度下，經(jīng)過四小時(shí)的發(fā)酵即得。將1.5升發(fā)酵液離心，棄去酵母。用20％三氯醋酸沉淀以除去蛋白質(zhì)，離心，取上清液加入氨水調(diào)節(jié)PH值至8-9，有沉淀生成。離心棄去沉淀。在攪拌下加入約200ml50％CaCl2溶液，即有大量沉淀生成，得果糖二磷酸鈣粗制品；將粗制品置于200ml蒸餾水中攪拌，緩慢滴加1M鹽酸溶液至沉淀溶解；離心，棄去不溶物。上清液中加入氫氧化鈉溶液至PH值8.0，離心，收集沉淀。重復(fù)操作一次。減壓過濾，收集沉淀于真空干燥器中干燥，干燥后得到果糖二磷酸鈣白色粉末，約重40g。按發(fā)酵液中果糖二磷酸計(jì)算收率約為50％。取純化的果糖二磷酸鈣50g，置于250ml蒸餾水中攪拌，加入強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂使果糖二磷酸鈣脫鈣，轉(zhuǎn)化成果糖二磷酸Ⅱ，用氧化鎂或堿式鎂鹽反應(yīng)后，以氫氧化鈉中和，加入乙醇中，待反應(yīng)完畢，離心，沉淀用乙醇溶液重結(jié)晶，干燥后可得40克結(jié)構(gòu)式Ⅰ的化合物D-果糖-1,6-二磷酸鈉鎂。產(chǎn)品用高度專一性的酶法測定果糖二磷酸Ⅱ的含量。其中酶試劑采用甘油磷酸脫氫酶一磷酸丙糖異構(gòu)酶混懸液(GDH/TIM)，還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)，醛縮酶(Aldolose)。用化學(xué)法測定金屬離子含量。結(jié)果是果糖二磷酸Ⅱ71.0％，鎂6.2％，鈉5.4％，結(jié)晶水17.4％。按C6H10O12P2Na2Mg分子式計(jì)算，接近理論值。
本發(fā)明提供的結(jié)構(gòu)式Ⅰ的化合物既可通過其陰離子給病變組織或器官細(xì)胞提供能源，又可通過Mg2+調(diào)節(jié)或參與其生理生化功能，兩者的協(xié)同作用能達(dá)到防治組織或器官細(xì)胞功能紊亂及其細(xì)胞病理性損害，有益于組織恢復(fù)其功能。
本發(fā)明化合物，毒性小，制備方法簡單。動(dòng)物藥效學(xué)試驗(yàn)證明，經(jīng)拮抗垂體所至冠脈血管收縮模型證實(shí)，能改善冠脈缺血缺氧所致心肌損傷，有明顯抗心肌缺血作用。本發(fā)明化合物能明提高小鼠常壓下耐缺氧能力。此外經(jīng)大鼠試驗(yàn)證明，本發(fā)明化合物有明顯降壓作用。
權(quán)利要求
1．一種化合物D-果糖-1,6-二磷酸鈉鎂(Sodium Magnasium-D-Fructose-1,6-diphosphate)I，其特征是具有如下的結(jié)構(gòu)式
2．一種制備權(quán)利要求1所述結(jié)構(gòu)式Ⅰ化合物的方法，其特征在于采用這樣的步驟即首先將由葡萄糖、磷酸鹽和啤酒酵母經(jīng)酶促連續(xù)磷酸化反應(yīng)得到的發(fā)酵液制備的果糖二磷酸，與氧化鎂或堿式鎂鹽反應(yīng)，再用氫氧化鈉與之中和，然后加入乙醇中，攪拌、離心，待沉淀產(chǎn)生后再用乙醇對(duì)其重結(jié)晶，最后將結(jié)晶體進(jìn)行干燥后即得結(jié)構(gòu)式Ⅰ的化合物。
3．權(quán)利要求1所述的結(jié)構(gòu)式Ⅰ的化合物D-果糖-1,6-二磷酸鈉鎂在治療心肌缺血藥和抗高血壓藥中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的結(jié)構(gòu)式Ⅰ的化合物D－果糖－1,6－二磷酸鈉鎂,及其制備方法,以及這種新化合物作為有效成份在治療心肌缺血藥和高血壓藥中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)C07H11/00GK1211577SQ98112218
公開日1999年3月24日 申請(qǐng)日期1998年8月28日 優(yōu)先權(quán)日1998年8月28日
發(fā)明者王馳, 徐昌喜, 周遠(yuǎn)大, 余惠媛, 沈佩娟 申請(qǐng)人:重慶醫(yī)科大學(xué), 重慶啤酒(集團(tuán))有限責(zé)任公司