一種云芝多糖的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種云芝多糖的提取方法。該方法包括以下步驟：先對樣品進(jìn)行預(yù)處理包括漂洗、烘干及粉碎，再將樣品加入碳酸鈉溶液進(jìn)行超聲提取，并先后經(jīng)微孔濾膜及超孔濾膜過濾，然后將濾液進(jìn)行兩次離心，將沉淀加碳酸鈉溶液進(jìn)行浸提，離心并濃縮制得濃縮漿，最后將濃縮漿干燥至含水量為3%~8%。本發(fā)明對云芝進(jìn)行超聲提取可使多糖提取率達(dá)到最高，同時可大大節(jié)省操作時間，提高了提取效率，在云芝多糖在提取過程中，采用2%~5%的碳酸鈉溶液作為溶劑，提取效果好，且溶劑廉價，安全無害，經(jīng)濟(jì)環(huán)保，且本發(fā)明先對樣品進(jìn)行粉碎過篩，在超聲提取后先后兩次過濾，避免了有關(guān)雜質(zhì)對提取過程的干擾。
【專利說明】一種云芝多糖的提取方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物工程【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種云芝多糖的提取方法。

【背景技術(shù)】
[0002]云芝(Cor1lusversicolor)又稱為采絨革蓋菌、千層蘑、彩云革蓋菌等，隸屬真菌門、擔(dān)子菌亞門、多孔菌科、革蓋菌屬。云芝味甘、淡，性微寒，有健脾利濕，止咳平喘，清熱解毒，抗腫瘤的功效。云芝多糖是云芝的主要有效成分，能激活免設(shè)細(xì)胞、提高機(jī)體免疫功能，抗腫瘤、降血脂及抗菌，是安全有效的人或動物的免疫增強(qiáng)劑，可作為保健食品的添加劑。
[0003]目前云芝多糖的提取方法主要包括水浸提法、酸或堿提法等，兩者對云芝多糖的最高得率相差不大，但后者可對環(huán)境造成嚴(yán)重污染，而前者在生產(chǎn)工藝及生產(chǎn)成本等方面具有較大的優(yōu)勢。但目前的水浸提法提取過程需花費(fèi)5?10h，浸提液用量大，耗能大，且云芝多糖的得率僅為7.81%左右。因此，急需尋求一種能獲得高產(chǎn)率高含量的云芝多糖的提取方法。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的就是針對上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺陷提供一種能獲得高產(chǎn)率高含量的云芝多糖的提取方法。
[0005]本發(fā)明的技術(shù)方案如下:
一種云芝多糖的提取方法，包括以下步驟:
(1)樣品預(yù)處理:取云芝適量漂洗干凈，烘干研磨成粉狀，待用；
(2)取步驟(I)的云芝粉末脫脂5-10g，加入溶劑l(T20ml超聲提取，先進(jìn)行微孔濾膜過濾，收集濾液，再將濾液進(jìn)行超孔濾膜過濾，收集超濾后的濾液；
(3)將步驟(I)中超濾后的濾液加入l(T20ml無水乙醇中，混勻離心，棄上清液,沉淀再加70%?80%的乙醇l(T20ml混勻，離心，棄上清液，沉淀加碳酸鈉溶液2(T50ml浸提0.5?lh，離心，取上清液，進(jìn)一步濃縮得到濃縮漿；
(4)將步驟(2)中制得的濃縮漿進(jìn)行干燥直到含水量為39Γ8%。
[0006]優(yōu)選的，所述的云芝粉末為可過40目的粗粉。
[0007]步驟(2)中所述的脫脂方法具體為:用95%的乙醇在8(T85°C水浴2(T30min后抽干。
[0008]優(yōu)選的，步驟(2 )中所述的溶劑為2°/Γ5%的碳酸鈉溶液。
[0009]優(yōu)選的，步驟(2)中所述的超聲提取時間為45?55min。
[0010]步驟(2)中微孔濾膜孔徑為0.05?lum，微孔濾膜過濾時的進(jìn)壓為2飛bar，出壓為O?5bar。
[0011]步驟(2)中超濾選擇截留分子量為80(Tl000Da的超濾膜，操作溫度為38?40°C;進(jìn)壓為I?8bar，出壓為I?3bar。
[0012]優(yōu)選的，步驟(3)中所述的浸提時操作溫度為60°C?70°C。
[0013]優(yōu)選的，步驟(3)中的離心速度為400(T5000r/min，離心溫度為4°C。
[0014]優(yōu)選的，步驟(3)中所述的濃縮為在4(T80°C條件下、真空度-0.08?-0.085Mpa濃縮到固形物含量為309Γ70%的的濃縮漿。
[0015]本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下有益效果:
1.研究顯示，在室溫下先將云芝粗粉浸泡4h左右后采用常規(guī)方法和超聲提取多糖提取率相似，均可達(dá)到最高。因此，本發(fā)明先對樣品進(jìn)行超聲提取，不僅能達(dá)到較高的多糖提取率，同時可大大節(jié)省操作時間，提高了提取效率。
[0016]2.本發(fā)明中在云芝多糖在提取過程中，采用29Γ5%的碳酸鈉溶液作為溶劑，提取效果好，且溶劑廉價，安全無害，經(jīng)濟(jì)環(huán)保。
[0017]3.本發(fā)明先對樣品進(jìn)行粉碎過篩，在超聲提取后先后兩次過濾，避免了有關(guān)雜質(zhì)對提取過程的干擾。

【具體實(shí)施方式】
[0018]本發(fā)明通過以下具體實(shí)施例更詳細(xì)的說明本發(fā)明，可以使本專業(yè)技術(shù)人員更全面的了解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。
[0019]實(shí)施例1
一種云芝多糖的提取方法，包括以下步驟:
(1)樣品預(yù)處理:取云芝適量漂洗干凈，烘干研磨成40目的粗粉，待用；
(2)取步驟(I)的云芝粉末脫脂5g，加入2%的碳酸鈉溶液1ml超聲提取45min，先采用0.05um的微孔濾膜過濾，進(jìn)壓為2bar，出壓為Obar，收集濾液，再將濾液采用截留分子量為SOODa的超濾膜進(jìn)行超孔濾膜過濾，操作溫度為38°C，進(jìn)壓為lbar，出壓為lbar，收集超濾后的濾液；
(3)將步驟(I)中超濾后的濾液加入1ml無水乙醇中，混勻離心，棄上清液，沉淀再加70%的乙醇1ml混勻，離心，棄上清液，沉淀加碳酸鈉溶液20ml浸提0.5h，操作溫度為60°C°C，離心，取上清液，進(jìn)一步濃縮得到濃縮漿；
(4)將步驟(2)中制得的濃縮漿進(jìn)行干燥直到含水量為3%。
[0020]步驟(2)中所述的脫脂方法具體為:用95%的乙醇在80°C水浴20min后抽干。
[0021]步驟(3)中的離心速度為4000r/min，離心溫度為4°C。
[0022]步驟(3)中所述的濃縮為在40°C條件下、真空度-0.08 Mpa濃縮到固形物含量為30%的的濃縮漿。
[0023]實(shí)施例2
一種云芝多糖的提取方法，包括以下步驟:
(1)樣品預(yù)處理:取云芝適量漂洗干凈，烘干研磨成40目的粗粉，待用；
(2)取步驟(I)的云芝粉末脫脂10g，加入5%的碳酸鈉溶液20ml超聲提取55min，先采用Ium的微孔濾膜過濾，進(jìn)壓為6bar，出壓為5bar，收集濾液，再將濾液采用截留分子量為100Da的超濾膜進(jìn)行超孔濾膜過濾，操作溫度為40°C，進(jìn)壓為8bar，出壓為3bar，收集超濾后的濾液；
(3)將步驟(I)中超濾后的濾液加入20ml無水乙醇中，混勻離心，棄上清液，沉淀再加80%的乙醇20ml混勻，離心，棄上清液，沉淀加碳酸鈉溶液50ml浸提lh，操作溫度為70°C，離心，取上清液，進(jìn)一步濃縮得到濃縮漿；
(4)將步驟(2)中制得的濃縮漿進(jìn)行干燥直到含水量為8%。
[0024]步驟(2)中所述的脫脂方法具體為:用95%的乙醇在85°C水浴30min后抽干。
[0025]步驟(3)中的離心速度為5000r/min，離心溫度為4°C。
[0026]步驟(3)中所述的濃縮為在80°C條件下、真空度-0.085Mpa濃縮到固形物含量為70%的的濃縮漿。
[0027]實(shí)施例3
一種云芝多糖的提取方法，包括以下步驟:
(1)樣品預(yù)處理:取云芝適量漂洗干凈，烘干研磨成40目的粗粉，待用；
(2)取步驟(I)的云芝粉末脫脂8g，加入4%的碳酸鈉溶液15ml超聲提取50min，先采用0.05^1um的微孔濾膜過濾，進(jìn)壓為4bar，出壓3bar，收集濾液，再將濾液采用截留分子量為900Da的超濾膜進(jìn)行超孔濾膜過濾，操作溫度為39°C，進(jìn)壓為5bar，出壓為2bar，收集超濾后的濾液；
(3)將步驟(I)中超濾后的濾液加入15ml無水乙醇中，混勻離心，棄上清液，沉淀再加75%的乙醇15ml混勻，離心，棄上清液，沉淀加碳酸鈉溶液30ml浸提0.5h，操作溫度為65°C，離心，取上清液，進(jìn)一步濃縮得到濃縮漿；
(4)將步驟(2)中制得的濃縮漿進(jìn)行干燥直到含水量為6%。
[0028]步驟(2)中所述的脫脂方法具體為:用95%的乙醇在82°C水浴25min后抽干。
[0029]步驟(3)中的離心速度為4500r/min，離心溫度為4°C。
[0030]步驟(3)中所述的濃縮為在60°C條件下、真空度-0.08 Mpa濃縮到固形物含量為50%的的濃縮漿。
[0031]以上所述實(shí)施例只是本發(fā)明的較佳實(shí)例，并非來限制本發(fā)明實(shí)施范圍，故凡依本發(fā)明申請專利范圍所述的構(gòu)造、特征及原理所做的等效變化或修飾，均應(yīng)包括本發(fā)明專利申請范圍內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種云芝多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)樣品預(yù)處理:取云芝適量漂洗干凈，烘干研磨成粉狀，待用； (2)取步驟(I)的云芝粉末脫脂5-10g，加入溶劑l(T20ml超聲提取，先進(jìn)行微孔濾膜過濾，收集濾液，再將濾液進(jìn)行超孔濾膜過濾，收集超濾后的濾液； (3)將步驟(I)中超濾后的濾液加入l(T20ml無水乙醇中，混勻離心，棄上清液,沉淀再加70%?80%的乙醇l(T20ml混勻，離心，棄上清液，沉淀加碳酸鈉溶液2(T50ml浸提0.5?lh，離心，取上清液，進(jìn)一步濃縮得到濃縮漿； (4)將步驟(2)中制得的濃縮漿進(jìn)行干燥直到含水量為39Γ8%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種云芝多糖的提取方法，其特征在于，所述的云芝粉末為可過40目的粗粉。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種云芝多糖的提取方法，其特征在于，步驟(2)中所述的脫脂方法具體為:用95%的乙醇在8(T85°C水浴2(T30min后抽干。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種云芝多糖的提取方法，其特征在于，步驟(2)中所述的溶劑為2°/Γ5%的碳酸鈉溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種云芝多糖的提取方法，其特征在于，步驟(2)中所述的超聲提取時間為45?55min。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種云芝多糖的提取方法，其特征在于，根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種云芝多糖的提取方法，其特征在于，步驟(2)中微孔濾膜孔徑為0.05?lum，微孔濾膜過濾時的進(jìn)壓為2?6bar,出壓為0?5bar。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種云芝多糖的提取方法，其特征在于，步驟(2)中超濾選擇截留分子量為80(Tl000Da的超濾膜，操作溫度為38?40°C ;進(jìn)壓為I?8bar，出壓為I?3bar。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種云芝多糖的提取方法，其特征在于，步驟(3)中所述的浸提時操作溫度為60°C?70°C。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種云芝多糖的提取方法，其特征在于，步驟(3)中的離心速度為400(T5000r/min，離心溫度為4°C。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種云芝多糖的提取方法，其特征在于，步驟(3)中所述的濃縮為在4(T80°C條件下、真空度-0.08?-0.085Mpa濃縮到固形物含量為30°/Γ70%的的濃縮漿。
【文檔編號】C08B37/00GK104231100SQ201410446251
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年9月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月4日
【發(fā)明者】劉巴寧, 鄭安喬 申請人:中山安蕎生物科技有限公司