本發(fā)明涉及一種畜牧養(yǎng)殖用高活性益生菌制劑的制備方法，屬于益生菌制劑的制備方法技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

隨著人們生活水平的不斷提高，人們對食品質(zhì)量和食品安全的重視越來越高。特別是近幾年來發(fā)生的三聚氰胺、瘦肉精等一系列事件，越發(fā)引起人們對食品安全的重視。因此，作為動物性食品的源頭的動物飼料的質(zhì)量顯得尤為重要。目前，在動物飼養(yǎng)過程中，需要不斷添加抗生素、激素等粗生長添加劑，致使生產(chǎn)出的肉質(zhì)不僅口感很差，且含有很多藥物殘留，人食用后增加人的抗藥性，影響人們的身體健康。因此，為了增強(qiáng)養(yǎng)殖業(yè)的生產(chǎn)質(zhì)量和減少藥物殘留，利用生物工程手段生產(chǎn)一種不含抗生素的發(fā)酵飼料技術(shù)，已成為飼料行業(yè)的必然趨勢。但限于發(fā)酵菌種和發(fā)酵工藝的限制，發(fā)酵飼料技術(shù)難以健康快速發(fā)展。

歐洲及許多地區(qū)和國家已經(jīng)或正在禁止抗生素在飼料中的使用。動物營養(yǎng)學(xué)家正在積極尋求無毒副作用、無殘留、安全的抗生素替代品用以取代其作為動物生產(chǎn)中促生長劑的身份。益生菌制劑主要通過維持動物腸道內(nèi)的正常微生態(tài)平衡，利用微生物在腸道內(nèi)的競爭排斥原理，形成優(yōu)勢益生菌群，起到促進(jìn)畜禽生長、增強(qiáng)機(jī)體免疫力及防治疾病等作用。用它替代抗生素作為新型的飼料添加劑是目前世界各國研究和應(yīng)用的熱點(diǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種畜牧養(yǎng)殖用高活性益生菌制劑的制備方法。

一種畜牧養(yǎng)殖用高活性益生菌制劑的制備方法，步驟如下：

一、活化：分別挑取斜面保存枯草芽孢桿菌、乳酸菌，接種到枯草芽孢桿菌、乳酸菌種子培養(yǎng)基中，于30-37℃條件下、100-170rpm搖床、12-24h活化；挑取乳酸桿菌保存菌種接種到乳酸桿菌培養(yǎng)基中，于32-36℃條件下靜止培養(yǎng)24-36h活化；挑取雙歧桿菌保存菌種接種到雙歧桿菌培養(yǎng)基中，于32-36℃條件下靜止培養(yǎng)20-30h活化；挑取光合細(xì)菌保存菌種接種到光合細(xì)菌培養(yǎng)基中，于30-34℃條件下靜止培養(yǎng)34-48h活化；

二、培養(yǎng)：枯草芽孢桿菌、乳酸菌活化培養(yǎng)物以0.1％-0.5％接種量分別接種于種子罐中，30-37℃條件下、間歇通氣培養(yǎng)48-72h；乳酸桿菌培養(yǎng)物以0.1％-0.5％接種量接種于種子罐中，30-37℃條件下、靜置培養(yǎng)60-72h；雙歧桿菌培養(yǎng)物以0.1％-0.5％接種量接種于種子罐中，30-37℃條件下、靜止培養(yǎng)48-60h；光合細(xì)菌培養(yǎng)物以0.1％-0.5％接種量接種于種子罐中，30-37℃條件下、靜置培養(yǎng)60-72h；

三、兌制混合液：發(fā)酵用菌種為上述五種菌擴(kuò)繁純培養(yǎng)物按枯草芽孢桿菌30-45％，雙歧桿菌15-20％，乳酸菌25-30％，乳酸桿菌3-6％，光合細(xì)菌6-12％的質(zhì)量百分比，發(fā)酵前2h兌成菌種混合液備用；

四、發(fā)酵：按米糠30-40％、麥麩20-32％、豆粕6-12％、糖蜜3-5％、水20-29％、糖化酶0.06-0.25％和菌種混合液0.5-2.5％的質(zhì)量百分比，投入混合接種機(jī)械混合均勻，接種后的發(fā)酵基礎(chǔ)料按厚度100cm，起始溫度控制在20-25℃，pH值7，均勻攤鋪在獨(dú)立封閉的可調(diào)溫的發(fā)酵槽中進(jìn)行發(fā)酵；

五、發(fā)酵物料6-8h后啟動升溫，溫度升到50℃-55℃、pH值≤6.0，48h后第一階段結(jié)束；

六、進(jìn)行機(jī)械翻料補(bǔ)氧后，繼續(xù)發(fā)酵，時間為24h，溫度達(dá)到45℃-50℃，pH值≤4.2，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室脲酶活性檢測合格，發(fā)酵過程結(jié)束；

七、發(fā)酵后的產(chǎn)物全部移入低溫烘干機(jī)中進(jìn)行烘干，烘干溫度控制在42℃；

八、烘干后的產(chǎn)物輸送到逆流冷卻器降溫至室溫，粉碎、過60目篩；即成為高活性復(fù)合益生菌制劑成品。

所述步驟三中五種菌擴(kuò)繁純培養(yǎng)物按枯草芽孢桿菌30％，雙歧桿菌20％，乳酸菌25％，乳酸桿菌6％，光合細(xì)菌6％的質(zhì)量百分比，發(fā)酵前2h兌成菌種混合液。

所述步驟四中按米糠20％、麥麩32％、豆粕6％、糖蜜5％、水20％、糖化酶0.25％和菌種混合液0.5％的質(zhì)量百分比進(jìn)行發(fā)酵。

本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)：通過即活化、液體擴(kuò)繁和固體發(fā)酵生產(chǎn)，增加了活菌總數(shù)量，而且還提高了益生菌的活力。本發(fā)明可實(shí)現(xiàn)規(guī)模化、產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。

具體實(shí)施例

下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明。

本實(shí)施例所涉及的一種畜牧養(yǎng)殖用高活性益生菌制劑的制備方法，步驟如下：

一、活化：分別挑取斜面保存枯草芽孢桿菌、乳酸菌，接種到枯草芽孢桿菌、乳酸菌種子培養(yǎng)基中，于30-37℃條件下、100-170rpm搖床、12-24h活化；挑取乳酸桿菌保存菌種接種到乳酸桿菌培養(yǎng)基中，于32-36℃條件下靜止培養(yǎng)24-36h活化；挑取雙歧桿菌保存菌種接種到雙歧桿菌培養(yǎng)基中，于32-36℃條件下靜止培養(yǎng)20-30h活化；挑取光合細(xì)菌保存菌種接種到光合細(xì)菌培養(yǎng)基中，于30-34℃條件下靜止培養(yǎng)34-48h活化；

二、培養(yǎng)：枯草芽孢桿菌、乳酸菌活化培養(yǎng)物以0.1％-0.5％接種量分別接種于種子罐中，30-37℃條件下、間歇通氣培養(yǎng)48-72h；乳酸桿菌培養(yǎng)物以 0.1％-0.5％接種量接種于種子罐中，30-37℃條件下、靜置培養(yǎng)60-72h；雙歧桿菌培養(yǎng)物以0.1％-0.5％接種量接種于種子罐中，30-37℃條件下、靜止培養(yǎng)48-60h；光合細(xì)菌培養(yǎng)物以0.1％-0.5％接種量接種于種子罐中，30-37℃條件下、靜置培養(yǎng)60-72h；

三、兌制混合液：發(fā)酵用菌種為上述五種菌擴(kuò)繁純培養(yǎng)物按枯草芽孢桿菌30-45％，雙歧桿菌15-20％，乳酸菌25-30％，乳酸桿菌3-6％，光合細(xì)菌6-12％的質(zhì)量百分比，發(fā)酵前2h兌成菌種混合液備用；

四、發(fā)酵：按米糠30-40％、麥麩20-32％、豆粕6-12％、糖蜜3-5％、水20-29％、糖化酶0.06-0.25％和菌種混合液0.5-2.5％的質(zhì)量百分比，投入混合接種機(jī)械混合均勻，接種后的發(fā)酵基礎(chǔ)料按厚度100cm，起始溫度控制在20-25℃，pH值7，均勻攤鋪在獨(dú)立封閉的可調(diào)溫的發(fā)酵槽中進(jìn)行發(fā)酵；

五、發(fā)酵物料6-8h后啟動升溫，溫度升到50℃-55℃、pH值≤6.0，48h后第一階段結(jié)束；

六、進(jìn)行機(jī)械翻料補(bǔ)氧后，繼續(xù)發(fā)酵，時間為24h，溫度達(dá)到45℃-50℃，pH值≤4.2，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室脲酶活性檢測合格，發(fā)酵過程結(jié)束；

七、發(fā)酵后的產(chǎn)物全部移入低溫烘干機(jī)中進(jìn)行烘干，烘干溫度控制在42℃；

八、烘干后的產(chǎn)物輸送到逆流冷卻器降溫至室溫，粉碎、過60目篩；即成為高活性復(fù)合益生菌制劑成品。

所述步驟三中五種菌擴(kuò)繁純培養(yǎng)物按枯草芽孢桿菌30％，雙歧桿菌20％，乳酸菌25％，乳酸桿菌6％，光合細(xì)菌6％的質(zhì)量百分比，發(fā)酵前2h兌成菌種混合液。

所述步驟四中按米糠20％、麥麩32％、豆粕6％、糖蜜5％、水20％、糖化酶0.25％和菌種混合液0.5％的質(zhì)量百分比進(jìn)行發(fā)酵。