1.一種引物，其特征在于，所述引物的序列為：SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2。
2.一種應(yīng)用權(quán)利要求1所述引物的利用TaqI鑒定食管癌易感基因KRAS多態(tài)性的方法，其特征在于，所述利用TaqI鑒定食管癌易感基因KRAS多態(tài)性的方法包括以下步驟：
步驟一，抽提樣品的基因組DNA；
步驟二，提供擴(kuò)增人KRAS基因多態(tài)性rs712位點(diǎn)附近序列的正向引物和反向引物，上游引物:5’-GCAG ACTGTTAGCT TTTACC-3’，下游引物:5’-CTATAGGACATGATGCCTAGAAG-3’，以提取的待測人基因組DNA為模板，進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲取擴(kuò)增產(chǎn)物；
步驟三，使用限制性內(nèi)切酶TaqI進(jìn)行酶切獲取相應(yīng)的酶切產(chǎn)物；
步驟四，將酶切產(chǎn)物采用3％的瓊脂糖凝膠進(jìn)行電泳，以判定KRAS基因多態(tài)性rs712的各基因型，其中，經(jīng)電泳后有一條條帶者為野生型TT基因型，兩條條帶者為純合突變GG基因型，三條條帶者為雜合基因型TG基因型。
3.如權(quán)利要求2所述的利用TaqI鑒定食管癌易感基因KRAS多態(tài)性的方法，其特征在于，所述PCR擴(kuò)增的體系反應(yīng)條件：
在標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)中采用三溫度點(diǎn)法，雙鏈DNA在94℃變性，再迅速冷卻至57℃，引物退火并結(jié)合到靶序列上，然后升溫至72℃，在TaqDNA聚合酶的作用下，使引物鏈沿模板延伸。
4.如權(quán)利要求2所述的利用TaqI鑒定食管癌易感基因KRAS多態(tài)性的方法，其特征在于，所述利用TaqI鑒定食管癌易感基因KRAS多態(tài)性的方法包括以下步驟：
(l)獲取手術(shù)切取的食管癌組織，采用酚-氯仿法提取食管癌組織的基因組DNA作為待測DNA，提取步驟如下：
1)將食管癌組織塊解凍，用生理鹽水洗去血污，剪取0.1g的組織進(jìn)行碾磨，加入1ml的滅菌水，顛倒混勻，10000rpm離心10min，棄上清，以上步驟重復(fù)兩次；
2)加入200μl的DNA裂解液，5μl的蛋白酶K混勻，55℃水浴消化過夜；
3)消化完成后加入等體積的酚氯仿混合液1:1，劇烈震蕩，使其變成奶咖色，12000rpm離心10min；
4)取上清時(shí)避免觸及中間介質(zhì)以及下層液體，加入等體積的氯仿后顛倒混勻，12000rm離心10min；
5)取上清，加入1/10的醋酸鈉以及2.5倍的無水乙醇，顛倒混勻，12000rpm離心10min，棄上清；
6)加入1ml 70％乙醇，使其白色沉淀懸浮，顛倒混勻數(shù)次，12000rpm離心10min，棄上清，室溫靜置5-10min使乙醇揮發(fā)干凈；
7)加入50μl滅菌水溶解DNA，即得食管癌組織基因組DNA；
(2)堿基序列信息從NCBI的dbSNP數(shù)據(jù)庫獲取，在CHIP網(wǎng)站上進(jìn)行核對，明確準(zhǔn)確無誤后采用Primer Premier 6.0設(shè)計(jì)各位點(diǎn)引物，結(jié)合退火溫度、GC含量以及Pubmed中的Blast序列比對結(jié)果信息篩選出最優(yōu)引物為正向引物序列：5’-GCAG ACTGTTAGCT TTTACC-3’，下游引物:5’-CTATAGGACATGATGCCTAGAAG-3’，進(jìn)行PCR引物擴(kuò)增，制備PCR擴(kuò)增體系：2×TaqPCRMix7.5μl，雙蒸水5.9μl，上游引物0.3μl，下游引物0.3μl以及模板DNA 1.0μl，充分混勻后即得15.0μl PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系；按照第一階段：94℃變性5min，第二階段共包括30個循環(huán)三個步驟，首先94℃變性30s，57℃退火45s，最后72℃延伸45s，第三階段：72℃延伸5min，最終4℃儲存以備用，即得長為384bp的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；
(3)擴(kuò)增后的SNP片段用限制性核酸內(nèi)切酶TaqI 5U水浴鍋中酶切6-14h，PCR反應(yīng)產(chǎn)物5μl，限制性內(nèi)切酶0.5μl，Buffer1.0μl以及無核酸酶純水8.5μl共計(jì)15μl酶切體系，于水浴鍋中37℃酶切6-14h，即得酶切產(chǎn)物；
(4)酶切產(chǎn)物采用3％的瓊脂糖進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，在紫外燈照射下根據(jù)不同的條帶判斷野生純合基因型，雜合基因型以及突變純合基因型。
5.如權(quán)利要求2所述的利用TaqI鑒定食管癌易感基因KRAS多態(tài)性的方法，其特征在于，所述利用TaqI鑒定食管癌易感基因KRAS多態(tài)性的方法包括以下步驟：
(l)獲取外周血細(xì)胞，采用酚-氯仿法提取血細(xì)胞基因組DNA作為待測DNA，提取步驟如下：
l)在1.5ml離心管中加入300μl血細(xì)胞后，再加入900μl細(xì)胞裂解液混和均勻，在冰上放置10min后，在離心機(jī)中12000rpm離心1min，棄上清，再次加入900μl細(xì)胞裂解液，用槍吹起沉淀并混勻后，重復(fù)上述步驟；
2)向沉淀物中加入600μl solution B溶液，用移液槍輕輕吹起沉淀后，加入10μl蛋白酶K混勻，在70℃水浴鍋中放置10min后，12000rpm離心5min；
3)將離心管中的上清轉(zhuǎn)入編過號的新的離心管中，再向新的離心管中加入500μl無水乙醇，期間可能會出現(xiàn)絮狀沉淀物，該絮狀物即為DNA；
4)將混勻的液體轉(zhuǎn)入離心柱中，室溫靜置2min，再12000rpm離心1min，棄廢液；
5)加入700μl已加入相應(yīng)體積無水乙醇的solution C漂洗液，室溫靜置2min，12000rpm離心1min，棄廢液；
6)加入700μl已加入相應(yīng)體積無水乙醇的solution D漂洗液，室溫靜置2min，12000rpm離心1min，棄廢液；
7)加入500μl solution D漂洗液，12000rpm離心1min，棄廢液；
8)再次離心2min，將離心柱置于新的編過號的離心管中，敞口放入37℃恒溫箱內(nèi)10min直至無明顯乙醇味；
9)在硅基質(zhì)膜中央加入已經(jīng)預(yù)熱到65℃的solution E 100μl，室溫放置5min，12000rpm離心1min，重復(fù)上述步驟一次，終離心后的液體即為提取出的基因組DNA；
(2)堿基序列信息從NCBI的dbSNP數(shù)據(jù)庫獲取，在CHIP網(wǎng)站上進(jìn)行核對，明確準(zhǔn)確無誤后采用Primer Premier 6.0設(shè)計(jì)各位點(diǎn)引物，結(jié)合退火溫度、GC含量以及Pubmed中的Blast序列比對結(jié)果信息篩選出最優(yōu)引物為正向引物序列：5’-GCAG ACTGTTAGCT TTTACC-3’，下游引物:5’-CTATAGGACATGATGCCTAGAAG-3’，進(jìn)行PCR引物擴(kuò)增，制備PCR擴(kuò)增體系：2×TaqPCRMix7.5μl，雙蒸水5.9μl，上游引物0.3μl，下游引物0.3μl以及模板DNA 1.0μl，充分混勻后即得15.0μl PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系；按照第一階段：94℃變性5min，第二階段共包括30個循環(huán)三個步驟，首先94℃變性30s，57℃退火45s，最后72℃延伸45s，第三階段：72℃延伸5min，最終4℃儲存以備用，即得長為384bp的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；
(3)擴(kuò)增后的SNP片段用限制性核酸內(nèi)切酶TaqI 5U水浴鍋中酶切6-14h，PCR反應(yīng)產(chǎn)物5μl，限制性內(nèi)切酶0.5μl，Buffer1.0μl以及無核酸酶純水8.5μl共計(jì)15μl酶切體系，于水浴鍋中37℃酶切6-14h，即得酶切產(chǎn)物；
(4)酶切產(chǎn)物采用3％的瓊脂糖進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，在紫外燈照射下根據(jù)不同的條帶判斷野生純合基因型，雜合基因型以及突變純合基因型。
6.一種包含權(quán)利要求1所述引物的利用TaqI鑒定食管癌易感基因KRAS多態(tài)性的試劑盒。