本發(fā)明屬于植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑領(lǐng)域,涉及一種5-取代噻唑酰胺類(lèi)化合物及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù):
油菜素內(nèi)酯又稱(chēng)蕓苔素內(nèi)酯(BRs),是由植物內(nèi)合成的一類(lèi)內(nèi)源性植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。它能調(diào)節(jié)植物本身所需要的多種酶和激素,充分發(fā)揮植物自身潛能和生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì),增強(qiáng)生命活力和抗旱耐澇能力。鑒于蕓苔素內(nèi)酯等在植物中的含量極低(小于10-6ppm)和它作為植物激素在農(nóng)業(yè)作物中所表現(xiàn)出的優(yōu)異的生理活性,其合成和改造研究一直受到各國(guó)科學(xué)家的青睞。然而對(duì)于油菜素內(nèi)酯合成成本高昂及體內(nèi)代謝位點(diǎn)多、極易代謝失活的問(wèn)題卻束手無(wú)策,因而尋找新靶標(biāo)受體進(jìn)行類(lèi)似物開(kāi)發(fā)的探索日益引起人們關(guān)注。
US6667278(2003)報(bào)道了根據(jù)BL的結(jié)構(gòu)和單元仿造了第一類(lèi)非甾體類(lèi)似物,并篩選得到高活性BM1(pM級(jí)),但高濃度(nM以上)表現(xiàn)為無(wú)生理活性,且必須與IAA(5μM)協(xié)同才能發(fā)揮作用。WO2009109570和US20100152253報(bào)道了在研究糖原合酶激酶3(GSK3s)時(shí),通過(guò)化學(xué)遺傳學(xué)篩選得到一個(gè)高活性的小分子Bikinin,它能有效抑制BIN2,充當(dāng)ATP的競(jìng)爭(zhēng)者,阻止轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化失活,活性約為BL的1/30。同時(shí),WO2014122066還報(bào)道了含氮雜環(huán)的Bikinin衍生物,但經(jīng)測(cè)定的活性普遍不高。
鑒于含有N、S雜原子的5-甲基噻唑結(jié)構(gòu)與Bikinin吡啶結(jié)構(gòu)的高度相似性,為了研究發(fā)現(xiàn)新型的以BIN2為靶標(biāo)的高效安全的調(diào)節(jié)劑,本發(fā)明設(shè)計(jì)合成了一類(lèi)新型甲基噻唑酰胺類(lèi)油菜素內(nèi)酯類(lèi)似物,并對(duì)該類(lèi)化合物進(jìn)行了多樣化的生物活性評(píng)價(jià)和制劑制備應(yīng)用。所有設(shè)計(jì)的化合物中均為全新結(jié)構(gòu),首次報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的是提供一種5-取代噻唑酰胺類(lèi)化合物及其制備方法與應(yīng)用。
本發(fā)明提供的5-取代噻唑酰胺類(lèi)化合物,其結(jié)構(gòu)通式如式II所示,
所述式Ⅱ中,X為甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、丙?;⒓籽貂;?、乙酰氧基、二甲氨基、乙酰氨基、甲氧基、乙氧基、甲硫基、甲基二硫基或硝基;
Y為氫、氧或硫;
Z為氧、亞氨基或亞甲基;
R為乙氧基乙?;⒈趸阴;?、乙磺?;?、2-甲氧基乙基、乙氧基羰基、4-三氟甲氧基苯基、4-硝基芐基、1-氯乙氧基乙?;?、1,1-二氯乙氧基乙?;?、1,1,1-三氯乙氧基乙?;?、異丙氧基乙?;?、異丁氧基乙酰基、新戊氧基乙酰基、甲氧甲氧基乙?;?、2-羥乙氧基乙?;⒁阴Q趸宜峄蛞阴Q趸宜峒柞セ?。
本發(fā)明提供的制備式II所示化合物的方法,包括如下步驟:
在催化劑和堿存在的條件下,將式I所示化合物與反應(yīng)物III進(jìn)行酰基化反應(yīng),反應(yīng)完畢得到所述式I所示化合物;
所述反應(yīng)物III為
所述式I中,X的定義與式I中的相同;
所述中,R1為W為C或S;
所述中,R2為如下基團(tuán)中的任意一種:
上述方法中,所述催化劑為4-二甲氨基吡啶或三乙胺;
所述堿為二乙胺、三乙胺、碳酸鉀或N,N-二異丙基乙胺;
所述催化劑與式I所示化合物的投料摩爾比為0.5-5:100;
所述堿與式I所示化合物的投料摩爾比為2-3:1;
所述式I所示化合物與反應(yīng)物III的摩爾比為1:(0.8-1.5);
所述反應(yīng)在溶劑中進(jìn)行;所述溶劑具體選自四氫呋喃、二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮和乙腈中的至少一種;
所述反應(yīng)物III為時(shí),所述?;磻?yīng)在-5℃-5℃或室溫中進(jìn)行;反應(yīng)時(shí)間為3-12h;
所述反應(yīng)物III為時(shí),所述酰基化反應(yīng)的反應(yīng)溫度為所用溶劑的回流溫度;反應(yīng)時(shí)間為2-5h;
所述反應(yīng)物III為所述?;磻?yīng)的反應(yīng)溫度為室溫;反應(yīng)時(shí)間為3-12h。
所述方法還包括如下步驟:在所述反應(yīng)完畢后,將反應(yīng)體系進(jìn)行純化;
所述純化的方法具體為重結(jié)晶或溶劑打漿;
所述重結(jié)晶步驟中,所用溶劑具體為乙醇或乙酸乙酯;
所述溶劑打漿步驟中,所用溶劑具體為乙醇或由體積比為2:1的乙酸乙酯和石油醚組成的混合液;
所述溶劑打漿步驟具體包括:向所述反應(yīng)體系中加入打漿所用溶劑,攪拌至產(chǎn)物析出,抽濾;所述反應(yīng)體系與溶劑打漿步驟所用溶劑的用量比具體為1g:5mL。
另外,上述本發(fā)明提供的式II所述化合物在調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)活性中的應(yīng)用及含有式II化合物的植物生長(zhǎng)活性調(diào)節(jié)劑,也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
具體的,所述調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)活性為如下任意一種:
1)促進(jìn)植物生長(zhǎng);
2)促進(jìn)莖桿伸長(zhǎng)和/或增粗;
3)提高種子萌發(fā)率;
4)提高產(chǎn)量;
5)改善品質(zhì);
6)增強(qiáng)植物抗倒伏能力;
7)增強(qiáng)植物的抗逆性能;
所述植物生長(zhǎng)活性調(diào)節(jié)劑為具有如下功能的至少一種的調(diào)節(jié)劑:
1)促進(jìn)植物生長(zhǎng)
2)促進(jìn)莖桿伸長(zhǎng)和/或增粗;
3)提高種子萌發(fā)率;
4)提高產(chǎn)量;
5)改善品質(zhì);
6)增強(qiáng)植物抗倒伏能力;
7)增強(qiáng)植物的抗逆性能;
所述增強(qiáng)植物的抗逆性能具體為增強(qiáng)植物的耐鹽脅迫能力;
所述植物具體為水稻、玉米、小麥或油菜。
另外,上述本發(fā)明提供的式II所述化合物在除草中的應(yīng)用及含有式II化合物的除草劑,也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
具體的,所述草為禾本科雜草;具體為野燕麥、節(jié)節(jié)麥、稗草、狗尾巴草或山羊草;所述植物生長(zhǎng)活性調(diào)節(jié)劑或除草劑的劑型為水分散粒劑、懸浮劑、水乳劑、片劑或微膠囊。上述劑型中的載體可為各種常見(jiàn)的載體,只要保證其與本發(fā)明式II所示化合物配制后便于施用于待處理的位點(diǎn)即可,例如可以是植物、種子或土壤;或者有利于貯存、運(yùn)輸或操作。載體可以是固體或液體,或通常為氣體但已壓縮為液體的物質(zhì)。
本發(fā)明設(shè)計(jì)合成的化合物是一類(lèi)結(jié)構(gòu)特異的5-取代噻唑酰胺類(lèi)油菜素內(nèi)酯類(lèi)似物,通過(guò)相關(guān)生物活性驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)其中某些化合物具有特異的油菜素內(nèi)酯反應(yīng),如促進(jìn)黑暗中擬南芥突變體det2-1下胚軸伸長(zhǎng),水稻葉片傾角增大,增強(qiáng)玉米耐鹽脅迫,春小麥幼苗耐低溫和油菜耐高溫的能力等。個(gè)別化合物在低濃度就具有很高的響應(yīng)值,另外在高濃度情況下,還能抑制小麥的株高,延緩生長(zhǎng),提高其抗倒伏的能力。同時(shí)在防治野燕麥、節(jié)節(jié)麥、稗草、狗尾巴草、山羊草等禾本科雜草上具有很好的防治效果。該系列化合物制備容易,成本低廉,農(nóng)業(yè)應(yīng)用推廣價(jià)值高,值得后續(xù)的深入研究開(kāi)發(fā)。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述,但本發(fā)明并不限于以下實(shí)施例。所述方法如無(wú)特別說(shuō)明均為常規(guī)方法。所述原材料如無(wú)特別說(shuō)明均能從公開(kāi)商業(yè)途徑獲得。
實(shí)施例1、化合物2a的制備:
在100mL圓底燒瓶瓶中,加入2-氨基噻唑(10mmol)、丁二酸酐(12mmol),15mL四氫呋喃攪拌溶解,65℃回流反應(yīng)3h進(jìn)行?;磻?yīng),反應(yīng)完畢降溫冷卻至室溫25℃析出固體,過(guò)濾得固體,乙醇重結(jié)晶純化得中間產(chǎn)物。取中間產(chǎn)物(10mmol),甲醇3ml溶解,冰鹽浴冷卻至0℃,恒溫滴加含有5ml二氯亞砜的10ml四氫呋喃溶液,30min滴加完畢;繼續(xù)反應(yīng)5小時(shí),反應(yīng)混合物倒入150mL冰水中,乙酸乙酯提取(3x100mL),飽和食鹽水洗滌(3x100mL),無(wú)水Na2SO4干燥,過(guò)濾濃縮,粗產(chǎn)物通過(guò)乙醇重結(jié)晶純化。(乙醇重結(jié)晶具體操作為:向1g待重結(jié)晶初產(chǎn)物中,逐滴加入乙醇3mL,加熱回流(80-100℃),直至初產(chǎn)物全部溶解,繼續(xù)回流10min,后緩慢降溫至室溫25℃析出固體,抽濾得純凈產(chǎn)物。)
實(shí)施例2、化合物2e的制備:
在100mL圓底燒瓶中,加入5-甲基-2-氨基吡啶(10mmol)、15ml四氫呋喃攪拌溶解,另加入4-(三氟甲氧基)苯基異氰酸酯(10mmol),反應(yīng)混合物室溫25℃攪拌進(jìn)行?;磻?yīng)12h,TLC檢測(cè)反應(yīng)進(jìn)程。反應(yīng)結(jié)束后,析出大量固體,濃縮得粗產(chǎn)物,通過(guò)乙醇重結(jié)晶純化(乙醇重結(jié)晶具體操作為:向1g待重結(jié)晶初產(chǎn)物中,逐滴加入乙醇3mL,加熱回流,直至初產(chǎn)物全部溶解,繼續(xù)回流10min,后緩慢降溫析出固體,抽濾得純凈產(chǎn)物。)。
按照與上相同的方法,可制備得到表1所列其余歸屬式I的化合物。
化合物2a-2I的結(jié)構(gòu)及產(chǎn)率如下表1所示。
表1合成化合物(2a-2I)的分子式及產(chǎn)率
實(shí)施例3、擬南芥突變體det2-1下胚軸伸長(zhǎng)活性試驗(yàn)
擬南芥突變體det2-1種子用70%乙醇消毒1min,同時(shí)1%次氯酸鈉15min,無(wú)菌水洗凈播種于分裝好培養(yǎng)基(1/2MS,0.8%瓊脂,1%蔗糖和指定濃度化合物)的培養(yǎng)皿(Φ=9cm)中;4℃冰箱春化3天,隨后轉(zhuǎn)移至黑暗下,22℃/65%濕度條件下培養(yǎng)7天,整株拍照后,ImageJ軟件測(cè)量其下胚軸長(zhǎng)度?;衔锛皾舛葹?4-epiBL(1μM)、Bikinin(40μM)和待測(cè)藥劑(40μM)。
所有化合物測(cè)試結(jié)果如表2所示:
表2對(duì)照藥劑擬南芥下胚軸伸長(zhǎng)測(cè)定結(jié)果
表3合成化合物擬南芥下胚軸伸長(zhǎng)測(cè)定結(jié)果
從表2和表3可以看出,24-epiBL具有很高的活性,在1μM濃度,下胚軸長(zhǎng)度達(dá)到0.9413±0.0748cm,而已報(bào)道的非甾體油菜素內(nèi)酯類(lèi)似物Bikinin在40μM時(shí),伸長(zhǎng)活性好于24-epiBL,達(dá)到1.1086±0.0684cm;在所有設(shè)計(jì)合成的化合物中,2a、2h、2i、2l、2o、2q、2r、2s、2t、2v、2w、2C、2E、2G、2I都對(duì)擬南芥突變體下胚軸都具有很高的伸長(zhǎng)活性,其中2a在40μM時(shí)最大值達(dá)到1.4262±0.0527cm,活性甚至好過(guò)Bikinin;同時(shí),2e高濃度下具有抑制下胚軸伸長(zhǎng)的活性,最小值達(dá)到0.2732±0.0215cm。由于化合物成本低廉、藥效高,在同等情況下,具有很高的利用價(jià)值。
實(shí)施例4、水稻葉片傾斜實(shí)驗(yàn)
水稻(日本晴)種子用10%H2O2消毒20min,無(wú)菌水洗凈,30℃培養(yǎng)箱中萌發(fā)3天,幼芽(29℃/26℃、65%濕度)條件下黑暗培養(yǎng)5-6天,在28℃弱光條件下截取葉傾角部位置于含不同濃度的藥液培養(yǎng)盒(120mm*120mm*60mm)中浸漬48h,量角器測(cè)量葉傾角?;衔锛皾舛葹?4-epiBL(10μM)、Bikinin(10、100μM)和待測(cè)藥劑(100μM)。所有化合物測(cè)試結(jié)果如表4、5所示:
表4對(duì)照藥劑水稻葉片傾角測(cè)定結(jié)果
表5合成化合物水稻實(shí)驗(yàn)結(jié)果
從上述表4、5可以看出,24-epiBL具有很高的活性,在10μM濃度,葉片傾斜角度達(dá)到125±9°,而B(niǎo)ikinin在最大濃度100μM時(shí),活性不如24-epiBL,只能達(dá)到75±8°;在所有設(shè)計(jì)合成的化合物中,2a對(duì)葉片傾斜都具有極高的活性,100μM時(shí)最大值達(dá)到89±9°,活性甚至好過(guò)Bikinin;另外,2h、2i、2l、2o、2q、2r、2s、2t、2v、2w、2C、2E、2G、2I都對(duì)水稻傾角的增大也有一定的作用。2e對(duì)葉片傾角增大具有較好的抑制作用,最小值達(dá)到17±1°活性化合物的表現(xiàn)與擬南芥下胚軸伸長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)一致,表明活性化合物具有油菜素內(nèi)酯相關(guān)活性,同時(shí)設(shè)計(jì)化合物成本低廉、藥效高,在同等情況下,具有很高的利用價(jià)值。
實(shí)施例5、化合物對(duì)小麥幼苗控制生長(zhǎng)試驗(yàn)
小麥(冬小麥濟(jì)麥22)種子用10%雙氧水消毒15-20min,無(wú)菌水洗凈播種于培養(yǎng)基(0.8%瓊脂和指定濃度化合物)的培養(yǎng)盒(120mm*120mm*80mm)中,25℃培養(yǎng)箱黑暗發(fā)芽2天,隨后100%光照(22000LX)、26℃/22℃、65%濕度條件下培養(yǎng)6天,測(cè)量小麥的株高,統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果?;衔锛皾舛葹?4-epiBL(10μM)、Bikinin(10、60μM)和待測(cè)藥劑(100μM)。
統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表6、7所示:
表6對(duì)照藥劑對(duì)小麥株高的影響
表7合成化合物對(duì)小麥株高的影響
從表6、7中的數(shù)據(jù)可以得知,本發(fā)明制備的某些化合物對(duì)小麥幼苗延緩生長(zhǎng)具有很好的效果,如2a、2e、2h、2i、2l、2o、2q、2r、2s、2t、2v、2w、2C、2E、2G、2I;其中2a控制株高最小值達(dá)到1.23±0.43cm,相比Bikinin有更高的藥效,同時(shí)不遏制植株的正常生長(zhǎng)發(fā)育。在惡劣情況下,這些效應(yīng)有助于防止小麥的倒伏發(fā)生,保障小麥穩(wěn)產(chǎn)和正常的經(jīng)濟(jì)效益。
實(shí)施例6、化合物對(duì)鹽脅迫下玉米幼苗生物量的影響試驗(yàn)
選取籽粒飽滿(mǎn)、大小一致、無(wú)霉變、無(wú)病蟲(chóng)害的玉米種子(鄭單958),用對(duì)照24-epiBL(1.0mg/L)、Bikinin(20mg/L)和待測(cè)藥劑(20mg/L)常溫浸種24h,浸種完成后,用滅菌濾紙吸干水分備用。將浸種處理的種子置于鋪有石英砂的發(fā)芽盒(120mm*120mm*60mm)中,每盒中加入150mM NaCl溶液10mL,于培養(yǎng)箱中28℃下催芽,每盒25粒,設(shè)3個(gè)重復(fù),用清水處理(CK)作為對(duì)照,光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(18h/6h,26℃/22℃;100%光照(22000LX),65%濕度)。每天更換處理液,發(fā)芽至第8天時(shí),隨機(jī)測(cè)量10株幼苗的生物量(稱(chēng)量苗鮮重,后置于80℃烘箱中烘干48h,稱(chēng)量干重量)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表8所示:
表8對(duì)照藥劑和化合物對(duì)玉米幼苗生物量的影響
從表8數(shù)據(jù)可以得知,本發(fā)明制備的某些化合物對(duì)玉米幼苗鹽脅迫下的生物量積累具有一定的效果,其中2a、2e、2h、2i、2l、2o、2q、2r、2s、2t、2v、2w、2C、2E、2G、2I表現(xiàn)顯著超過(guò)清水對(duì)照,其中2a相比Bikinin具有更高的藥效,同時(shí)促進(jìn)脅迫下的種子發(fā)芽。在惡劣情況下,這些效應(yīng)有助于幫助輕度鹽脅迫下玉米的正常生長(zhǎng)及發(fā)育,保障玉米的經(jīng)濟(jì)效益。
實(shí)施例7、化合物誘導(dǎo)春小麥幼苗耐低溫試驗(yàn)
春小麥(墾麥2號(hào))種子用10%雙氧水消毒15-20min,無(wú)菌水洗凈播種于含培養(yǎng)基(0.8%瓊脂和指定濃度的化合物)的植物培養(yǎng)盒(70mm*70mm*100mm)中,26℃培養(yǎng)箱黑暗發(fā)芽1天,隨后100%光照(22000LX)、65%濕度條件下,26℃/22℃培養(yǎng)10天,隨后培養(yǎng)盒置于4℃低溫處理4h(降溫從25℃開(kāi)始,每小時(shí)降溫10℃,后保持4℃4小時(shí)),處理結(jié)束后,培養(yǎng)箱重回25℃恢復(fù)培養(yǎng)一周,恢復(fù)期結(jié)束后,統(tǒng)計(jì)小麥幼苗的存活數(shù)目(葉片50%以上灰白色記為死亡),分析結(jié)果?;衔锛皾舛葹?4-epiBL(1μM)、Bikinin(30μM)和待測(cè)藥劑(30μM)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表9所示:
表9對(duì)照藥劑和化合物對(duì)春小麥幼苗耐低溫的影響
從表9中的數(shù)據(jù)可以得知,本發(fā)明制備的某些化合物對(duì)玉米幼苗鹽脅迫下的生物量積累具有一定的效果,其中2a、2e、2h、2i、2l、2o、2q、2r、2s、2t、2v、2w、2C、2E、2G、2I表現(xiàn)顯著超過(guò)清水對(duì)照,其中2a與Bikinin一樣具有更高的藥效,同時(shí)誘導(dǎo)春小麥抵抗春季苗期的低溫脅迫。在惡劣情況下,這些效應(yīng)有助于幫助低溫脅迫下春小麥的正常生長(zhǎng)及發(fā)育,保障東北小麥的經(jīng)濟(jì)效益。
實(shí)施例8、化合物誘導(dǎo)油菜幼苗耐高溫試驗(yàn)
油菜(青雜5號(hào))種子用10%雙氧水消毒15-20min,無(wú)菌水洗凈播種于含培養(yǎng)基(0.8%瓊脂和指定濃度的化合物)培養(yǎng)盒(70mm*70mm*100mm)中,20℃培養(yǎng)箱黑暗發(fā)芽1天,隨后100%光照(22000LX)、22℃/20℃、65%濕度條件下培養(yǎng)14天,隨后培養(yǎng)盒置于40℃培養(yǎng)箱中高溫處理4h(升溫從20℃開(kāi)始,每小時(shí)升溫10℃,后保持40℃4小時(shí)),處理結(jié)束后,培養(yǎng)箱重回22℃恢復(fù)培養(yǎng)一周,恢復(fù)期結(jié)束后,統(tǒng)計(jì)油菜幼苗的存活數(shù)目(葉片50%以上灰白色記為死亡),分析結(jié)果?;衔锛皾舛葹?4-epiBL(1μM)、Bikinin(30μM)和待測(cè)藥劑(30μM)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表10所示:
表10對(duì)照藥劑和化合物對(duì)油菜幼苗耐高溫的影響
從表10中的數(shù)據(jù)可以得知,本發(fā)明制備的某些化合物對(duì)玉米幼苗鹽脅迫下的生物量積累具有一定的效果,其中2a、2e、2h、2i、2l、2o、2q、2r、2s、2t、2v、2w、2C、2E、2G、2I表現(xiàn)顯著超過(guò)清水對(duì)照,其中2a與Bikinin一樣具有更高的藥效,同時(shí)誘導(dǎo)油菜抵抗苗期高溫脅迫,增加存活率。在惡劣情況下,這些效應(yīng)有助于幫助高溫脅迫下油菜的正常生長(zhǎng)及發(fā)育,保障油菜的經(jīng)濟(jì)效益。
實(shí)施例9、化合物對(duì)雜草種子抑制萌發(fā)試驗(yàn)
用2a、2e、2h、2i、2l、2o、2q、2r、2s、2t、2v、2w、2C、2E、2G、2I配置的40mg/L的藥液對(duì)雜草(野燕麥、狗尾巴草、山羊草)種子進(jìn)行培養(yǎng)皿浸種24h,無(wú)菌水洗凈播種于底部墊有兩層濾紙的一次性滅菌培養(yǎng)皿(Φ=6cm)中,每皿均勻放置適量粒大飽滿(mǎn)且大小均一的種子20粒,3個(gè)重復(fù),用清水處理(CK)作為對(duì)照,試驗(yàn)期間培養(yǎng)皿濾紙一直保持濕潤(rùn)。培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)(18h/6h,25℃/20℃,65%濕度),統(tǒng)計(jì)3天發(fā)芽勢(shì)和7天發(fā)芽率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表11所示:
表11化合物對(duì)雜草的抑制萌發(fā)活性
從表11的結(jié)果可以看出,在40mg/L的藥物濃度下,狗尾巴草、山羊草和野燕麥的種子發(fā)芽都受到一定程度的抑制。在狗尾巴草中,抑制最好的是2a,抑制率達(dá)到了55.8%;其次是2q,達(dá)到了54.8%;抑制率一半以上的還有2v、2o和2C。山羊草中,抑制最好的還是2a,抑制率達(dá)到了52.8%;其次是1v,達(dá)到了51.7%;抑制率一半以上的還有2o、2q和2C。2a對(duì)野燕麥的抑制同樣也是最好的,達(dá)到了55.7%;其次是2q,達(dá)到了51.8%;抑制率達(dá)到和超過(guò)一半的還有1v、1o和1C。隨著濃度的提高,藥效可能會(huì)更好,其中2a具有很高的應(yīng)用價(jià)值,值得后續(xù)的開(kāi)發(fā)研究。
實(shí)施例12、化合物2a水分散粒劑(10%)的配制
稱(chēng)量2a 10g、潤(rùn)濕分散劑脂肪醇硫酸酯鹽6g、崩解劑硫酸銨3g、載體高嶺土補(bǔ)足至100g,充分混合均勻,經(jīng)氣流粉碎機(jī)粉碎成可濕性粉劑,加入流化床干燥造粒機(jī)中,用含有黏結(jié)劑聚乙二醇2g的水溶液,在(50℃-70℃)的流化床造粒,干燥機(jī)中干燥(60-80℃),篩分后得到10%2a水分散粒劑產(chǎn)品。
其他通式化合物的水分散粒劑均可通過(guò)上述方法制備。
實(shí)施例13、化合物2h水懸浮劑(25%)的配制
稱(chēng)量2b 25g、乳化劑NPEPO4 4.8g、脫糖木質(zhì)素磺酸鹽1.2g,連同加水總量70g加入到砂磨釜中進(jìn)行磨研,1h后,將增稠劑黃原膠0.15g、防凍劑乙二醇4g及剩余水補(bǔ)足100%,加入體系中,進(jìn)行調(diào)制,得到2b(25%)白色均相水懸浮劑。
其他通式化合物的水懸浮劑均可通過(guò)上述方法制備。
實(shí)施例14、化合物2i水乳劑(5%)的配制
稱(chēng)量2c 5g和乳化劑農(nóng)乳501#2.8g、共乳化劑農(nóng)乳601#7.2g加在一起,使溶解成均勻油相。將水、抗凍劑乙二醇5g混合在一起,成為均一水相。在常溫25℃和高剪切乳化機(jī)攪拌下,將水相加入油相,形成分散良好的水乳劑。
其他通式化合物的水乳劑均可通過(guò)上述方法制備。
實(shí)施例15、化合物2j泡騰片劑(1%)的配制
稱(chēng)量2d 1g在80℃烘干24小時(shí)后密封包裝,將草酸30g、碳酸氫鈉30g機(jī)械粉碎到100目,硅藻土0.1g、乳糖3g、白炭黑31g和滑石粉5g混合攪拌均勻,粉碎到800目,與2d在混合攪拌機(jī)內(nèi)攪拌10分鐘后壓制成泡騰片,密封包裝即成產(chǎn)品。
其他通式化合物的片劑均可通過(guò)上述方法制備。
實(shí)施例16、化合物2l粒徑20μm微膠囊(3%)的配制
稱(chēng)取2.0g殼聚糖和1.0g明膠溶于100ml 2%的醋酸溶液中,將2ml失水山梨酸鉀單月桂酸酯在800rpm攪拌下,緩慢加入到上述溶液中,持續(xù)攪拌20min。再將1.0ml脂肪醇聚氧乙烯醚與2.0ml 7.5%2e乙醇溶液混合,1000rpm下攪拌乳化10min。而后將2e的乳化液在1200rpm攪拌下緩慢加入到已乳化好的殼聚糖與明膠的醋酸溶液中,繼續(xù)攪拌45min直至混合液均勻分散。最后將制得的混合液在進(jìn)口溫度為135℃、出口溫度為85℃的噴霧干燥器中進(jìn)行固化干燥,所得粉末即為2e緩釋微膠囊。經(jīng)測(cè)定,藥物成囊率83%,載藥率3.0%,平均粒徑20.5μm。
其他通式化合物的微膠囊均可通過(guò)上述方法制備。
實(shí)施例17、不同的2a化合物制劑對(duì)藥效的影響(擬南芥下胚軸伸長(zhǎng)實(shí)驗(yàn))
擬南芥突變體det2-1種子用70%乙醇消毒1min,同時(shí)1%次氯酸鈉15min,無(wú)菌水洗凈播種于分裝好培養(yǎng)基(1/2MS,0.8%瓊脂,1%蔗糖和指定濃度化合物)的培養(yǎng)皿(Φ=9cm)中;4℃冰箱春化3天,隨后轉(zhuǎn)移至黑暗下,22℃/65%濕度條件下培養(yǎng)7天,整株拍照后,ImageJ軟件測(cè)量其下胚軸長(zhǎng)度。制劑濃度為10mg/L,配制方法為將各種濃度的制劑按標(biāo)明的濃度,加水或DMSO稀釋至所需的濃度。
所有化合物測(cè)試結(jié)果如表12所示。
表12擬南芥下胚軸伸長(zhǎng)測(cè)定結(jié)果
從表12中的數(shù)據(jù)可以得知,本發(fā)明制備的2a化合物制劑對(duì)擬南芥下胚軸的藥效都好于純藥劑的處理。其中水分散粒劑、水懸浮劑、水乳劑和微膠囊表現(xiàn)了較高的活性,在10mg/L的濃度下好于片劑和2a,突顯了制劑對(duì)提高藥效的普遍作用,對(duì)于后期的應(yīng)用研究提供了一定的指導(dǎo)意義。
附所有化合物譜圖表征數(shù)據(jù)
4-(5-甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2a)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.93(s,1H),7.10(q,J=1.2Hz,1H),4.03(t,J=7.1Hz,2H),2.73–2.54(m,4H),2.32(d,J=1.3Hz,3H),1.16(t,J=7.1Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ172.15,169.76,156.27,134.70,126.01,60.07,29.79,28.48,14.14,11.13.HRMSm/z:243.0795(M+H+,calcd for C10H15N2O3S,243.0798)mp:163.2-164.6℃
3-(5-甲基噻唑-2-氨基)-1-丙磺酸(2b)
1H NMR(300MHz,D2O)δ6.83(s,1H),4.00(t,J=7.2Hz,2H),2.86(t,J=7.4Hz,2H),2.20–2.03(m,5H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ167.26,125.45,120.79,46.94,46.14,10.84.HRMSm/z:237.0365(M+H+,calcd for C7H13N2O3S2,237.0362)mp:301.2-302.8℃
2-甲氧乙基-N-(5-甲基-2-噻唑)氨基甲酸酯(2c)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.53(s,1H),7.10–6.99(m,1H),4.32–4.21(m,2H),3.62–3.51(m,2H),3.28(s,3H),2.32(d,J=1.3Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ158.13,153.81,134.83,126.07,69.98,64.49,58.06,11.12.HRMSm/z:217.0643(M+H+,calcd for C8H13N2O3S,217.0641)mp:146.2-147.2℃
[N-(5-甲基-2-噻唑)硫代甲酰胺]氨基甲酸乙酯(2d)
1H NMR(300MHz,CDCl3-d)δ12.92(s,1H),11.70(s,1H),7.28(t,J=1.2Hz,1H),4.23(q,J=7.1Hz,2H),2.36(d,J=1.3Hz,3H),1.26(t,J=7.1Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ175.64,157.62,153.69,134.02,127.05,62.50,14.16,11.23.HRMSm/z:246.0364(M+H+,calcd for C8H12N2O3S2,246.0365)mp:163.3-164.9℃
N-[4-三氟甲氧基苯基]-N-[5-甲基-2-噻唑]脲(2e)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.49(s,1H),9.14(s,1H),7.65–7.53(m,2H),7.31(d,J=8.5Hz,2H),7.04(d,J=1.6Hz,1H),2.35–2.28(m,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ158.40,152.29,143.23,138.26,133.19,128.02–112.55(m),11.27.HRMSm/z:318.0519(M+H+,calcd for C12H11F3N3O2S,318.0519)mp:201.1-202.3℃
4-硝基芐基-N-(5-甲基-2-噻唑)氨基甲酸酯(2f)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.79(s,1H),8.32–8.21(m,2H),7.73–7.63(m,2H),7.06(d,J=1.5Hz,1H),5.36(s,2H),2.32(d,J=1.3Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ157.98,153.68,147.29,144.05,134.91,128.53,126.25,123.73,65.52,11.25.HRMSm/z:294.0547(M+H+,calcd for C12H12N3O4S,294.0543)mp:196.4-198.0℃
4-甲氧羰基-N-(5-甲基噻唑-2-氨基)苯甲酸(2g)
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ12.68(s,1H),8.19(d,J=8.4Hz,2H),8.08(d,J=8.4Hz,2H),7.25(s,1H),3.90(s,3H),2.51(s,3H).
13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ167.84,166.87,162.80,134.88,134.08,134.05,133.89,129.25,122.45,52.17,12.30.HRMSm/z:277.0642(M+H+,calcd for C13H13N2O3S,277.0641)mp:198.2-200.0℃
4-(5-甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸丙酯(2h)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.23(s,1H),δ7.45(s,1H),4.12(t,J=7.5Hz,2H),2.60–2.43(m,2H),2.32(s,3H),1.73(h,J=7.8Hz,2H),1.01(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.14,165.60,134.88,122.45,66.20,32.19,30.93,21.93,12.30,10.30.HRMSm/z:256.0882(M+H+,calcd for C11H17N2O3S,256.0888)mp:178.9-179.3℃
2-氯-4-(5-甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2i)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.82(s,1H),7.45(s,1H),4.36(t,J=7.3Hz,2H),3.94(t,J=7.3Hz,2H),2.60–2.43(m,4H),2.31(s,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.14,165.60,134.88,122.45,64.69,41.49,32.19,30.93,12.30.HRMSm/z:277.0363(M+H+,calcd for C10H14ClN2O3S,277.0365)mp:181.3-182.6℃
2,2-二氯-4-(5-甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2j)
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.89(s,1H),7.50(s,1H),6.56(t,J=7.0Hz,1H),4.60(d,J=6.9Hz,2H),2.61–2.42(m,4H),2.33(s,3H).13CNMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,172.87,165.60,134.88,122.45,70.13,68.52,32.19,30.93,12.30.HRMSm/z:311.1753(M+H+,calcd for C10H14Cl2N2O3S,311.1756)mp:200.1-201.4℃
2,2,2-三氯-4-(5-甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2k)
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.51(s,1H),7.52(s,1H),4.84(s,2H),2.60–2.43(m,4H),2.34(s,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.00,165.60,134.88,122.45,95.10,73.93,32.19,30.93,12.30.HRMSm/z:345.6175(M+H+,calcd for C10H14Cl3N2O3S,345.6180)mp:238.7-239.9℃
4-(5-甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸異丙酯(2l)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.48(s,1H),7.52(s,1H),4.90(p,J=6.8Hz,1H),2.60–2.43(m,4H),2.34(s,3H),1.14(d,J=6.8Hz,6H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.28,165.60,134.88,122.45,67.37,33.01,30.93,21.92,12.30.HRMSm/z:256.0881(M+H+,calcd for C11H17N2O3S,256.0880)mp:167.6-169.0℃
4-(5-甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸異丁酯(2m)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.32(s,1H),δ7.45(s,1H),3.88(d,J=7.0Hz,2H),2.60–2.43(m,4H),2.32(s,3H),1.87(dt,J=13.7,6.8Hz,1H),0.88(d,J=6.8Hz,6H). 13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,172.87,165.60,134.88,122.45,70.79,32.19,30.93,27.70,18.86,12.30.HRMSm/z:271.1010(M+H+,calcd for C12H19N2O3S,271.1009)mp:177.3-178.7℃
4-(5-甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸新戊酯(2n)
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.36(s,1H),δ7.45(s,1H),3.94(s,2H),2.60–2.43(m,3H),2.31(s,3H),1.03(s,9H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.00,165.60,134.88,122.45,73.90,32.19,31.40,30.93,26.50,12.30.HRMSm/z:285.1190(M+H+,calcd for C13H21N2O3S,285.1188)mp:182.3-183.4℃
4-(5-甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸甲氧甲酯(2o)
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.84(s,1H),7.45(s,1H),6.16(s,2H),3.21(s,3H),2.60–2.43(m,3H),2.32(s,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,171.28,165.60,134.88,122.45,93.75,56.37,32.19,30.93,12.30.HRMSm/z:259.0678(M+H+,calcd for C10H15N2O4S,259.0677)mp:175.8-176.9℃
4-(5-甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙二單酯(2p)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.82(s,1H),7.45(s,1H),4.97(t,J=5.0Hz,1H),4.22(t,J=7.2Hz,2H),3.71(td,J=7.2,5.0Hz,2H),2.60–2.43(m,4H),2.31(s,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.14,165.60,134.88,122.45,65.69,60.99,32.19,30.93,12.30.HRMSm/z:256.0677(M+H+,calcd for C10H15N2O4S,259.0676)mp:200.3-201.8℃
2-(4-(5-甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酰氧基)乙酸(2q)
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ14.42(s,1H),δ11.32(s,1H),7.46(s,1H),4.64(s,2H),2.60–2.43(m,4H),2.32(s,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,172.68,170.90,165.60,134.88,122.45,63.77,32.19,30.93,12.30.HRMSm/z:273.0487(M+H+,calcd for C10H13N2O5S,273.0483)mp:252.7-253.9℃
2-(4-(5-甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酰氧基)乙酸甲酯(2r)
1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.36(s,1H),δ7.45(s,1H),4.66(s,2H),3.72(s,3H),2.60–2.43(m,4H),2.31(s,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,172.68,169.48,165.60,134.88,122.45,64.41,52.24,32.19,30.93,12.30.HRMSm/z:286.0654(M+H+,calcd for C11H15N2O5S,286.0656)mp:212.7-214.5℃
4-(5-乙基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2s)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.36(s,1H),δ7.47(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),2.68–2.43(m,6H),1.27(t,J=8.0Hz,3H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,167.10,135.38,134.31,60.86,32.19,30.93,24.69,14.77,14.21.HRMSm/z:256.0881(M+H+,calcd for C11H17N2O3S,256.0880)mp:172.6-173.9℃
4-(5-異丙基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2t)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.83(s,1H),δ7.57(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),3.23(p,J=6.8Hz,1H),2.60–2.43(m,4H),1.25(d,J=6.8Hz,6H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,163.85,140.79,132.66,60.86,35.07,32.19,30.93,19.14,14.21.HRMSm/z:270.1033(M+H+,calcd for C12H19N2O3S,270.1030)mp:167.3-168.6℃
4-(5-環(huán)丙基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2u)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.09(s,1H),7.22(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),2.61–2.42(m,3H),1.50(p,J=7.0Hz,1H),1.07(t,J=8.0Hz,3H),0.93–0.74(m,2H),0.71(tdd,J=7.2,6.0,3.9Hz,2H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,163.85,137.96,129.53,60.86,32.19,30.93,16.35,14.21,10.12.HRMSm/z:270.0884(M+H+,calcd for C12H17N2O3S,270.0884)mp:200.1-201.8℃
4-(5-氯甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2v)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.03(s,1H),δ7.57(s,1H),4.64(s,2H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),2.60–2.43(m,4H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,167.10,145.11,124.87,60.86,42.58,32.19,30.93,14.21.HRMSm/z:276.0332(M+H+,calcd for C10H14ClN2O3S,276.0331)mp:190.2.4-192.0℃
4-(5-二氯甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2w)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.18(s,1H),δ7.83(s,1H),7.50(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),2.60–2.43(m,4H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,163.85,151.97,122.66,64.59,60.86,32.19,30.93,14.21.HRMSm/z:309.9942(M+H+,calcd for C10H13Cl2N2O3S,309.9941)mp:204.6.4-206.3℃
4-(5-三氯甲基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2x)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.29(s,1H),δ7.97(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),2.60–2.43(m,4H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,165.59,144.54,126.64,101.80,60.86,32.19,30.93,14.21.HRMSm/z:343.9556(M+H+,calcd for C10H12Cl3N2O3S,343.9558)mp:248.6-250.1℃
4-(5-乙?;邕?2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2y)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.74(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),2.60–2.43(m,4H),2.36(s,3H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ193.79,173.85,173.03,164.80,138.77,131.98,60.86,32.19,30.93,25.77,14.21.HRMSm/z:270.0680(M+H+,calcd for C11H15N2O4S,270.0678)mp:193.1-194.8℃
4-(5-丙?;邕?2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2z)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.65(s,1H),8.79(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),3.26(q,J=8.0Hz,2H),2.60–2.43(m,4H),1.27(t,J=8.0Hz,3H),1.07(t,J=8.0Hz,3H). 13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ195.43,173.85,173.03,164.80,137.52,126.55,60.86,32.28,32.19,30.93,14.21,8.35.HRMSm/z:284.0860(M+H+,calcd for C12H17N2O4S,284.0864)mp:216.1-218.0℃
4-(5-甲氧酰基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2A)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.57(s,1H),δ8.70(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),3.83(s,3H),2.60–2.43(m,4H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,164.80,164.14,133.41,126.03,60.86,52.70,32.19,30.93,14.21.HRMSm/z:286.0652(M+H+,calcd for C11H15N2O5S,286.0650)mp:210.0-211.5℃
4-(5-乙酰氧基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2B)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ14.17(s,1H),δ7.28(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),2.60–2.43(m,4H),2.08(s,3H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,167.61,157.25,155.83,122.26,60.86,32.19,30.93,20.83,14.21.HRMSm/z:286.0645(M+H+,calcd for C11H15N2O5S,286.0644)mp:212.1-214.0℃
4-(5-二甲氨基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2C)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.43(s,1H),δ6.75(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),2.98(s,6H),2.60–2.43(m,4H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,167.54,142.78,130.13,60.86,42.42,32.19,30.93,14.21.HRMSm/z:271.0910(M+H+,calcd for C11H18N3O3S,271.0912)mp:200.1-201.8℃
4-(5-乙酰氨基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2D)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.58(s,2H),8.58(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),2.60–2.43(m,4H),2.27(s,3H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,169.16,165.99,140.12,137.07,60.86,32.19,30.93,23.07,14.21.HRMSm/z:285.0785(M+H+,calcd for C11H16N3O4S,285.0785)mp:284.3-285.6℃
4-(5-甲氧基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2E)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.28(s,1H),δ7.20(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),3.81(s,3H),2.60–2.43(m,4H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,155.83,150.42,109.89,60.86,59.57,32.19,30.93,14.21.HRMSm/z: 258.0670(M+H+,calcd for C10H15N2O4S,258.0670)mp:190.7-191.8℃
4-(5-乙氧基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2F)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.30(s,1H),δ7.21(s,1H),4.05(dq,J=39.0,8.0Hz,4H),2.60–2.43(m,4H),1.24(t,J=8.0Hz,3H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,155.83,148.85,109.67,66.70,60.86,32.19,30.93,14.21,14.03.HRMSm/z:272.0876(M+H+,calcd for C11H17N2O4S,272.0877)mp:188.7-189.5℃
4-(5-甲硫基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2G)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.67(s,1H),δ8.12(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),2.60–2.43(m,4H),2.37(s,3H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,162.89,148.97,126.74,60.86,32.19,30.93,17.66,14.21.HRMSm/z:274.0467(M+H+,calcd for C10H15N2O3S2,274.0467)mp:190.9.1-192.3℃
4-(5-甲二硫基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2H)
1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.71(s,1H),δ8.13(s,1H),3.98(q,J=8.0Hz,2H),2.60–2.43(m,4H),2.00(s,3H),1.07(t,J=8.0Hz,3H).13C NMR(75MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,162.89,153.67,135.24,60.86,32.19,30.93,22.67,14.21.HRMSm/z:306.0644(M+H+,calcd for C10H15N2O3S3,306.0645)mp:215.6-217.3℃
4-(5-硝基噻唑-2-氨基)-4-氧代丁酸乙酯(2I)
1H NMR(300 MHz,DMSO-d6)δ12.94(s,1H),9.11(s,1H),3.98(q,J=8.0 Hz,2H),2.62–2.41(m,4H),1.07(t,J=8.0 Hz,3H).13C NMR(75 MHz,DMSO-d6)δ173.85,173.03,166.28,146.28,136.45,60.86,32.19,30.93,14.21.HRMSm/z:273.0423(M+H+,calcd for C9H12N3O4S,273.0423)mp:243.6-245.3℃。