本發(fā)明涉及食品加工領(lǐng)域，更具體的說(shuō)，是一種利用沸石分離醇溶蛋白組分的方法。

背景技術(shù)：

醇溶蛋白是面筋的主要成分，通過(guò)分離其組分進(jìn)而研究各組分性質(zhì)可以深入了解醇溶蛋白對(duì)相關(guān)食品加工性能的作用機(jī)理。常用高效液相色譜法色譜層析方法是鑒定和分離醇溶蛋白組分的主要方法，該方法雖然具有準(zhǔn)確性高、重現(xiàn)性好等有點(diǎn)，但該方法制備醇溶蛋白組分價(jià)格昂貴、分離時(shí)間長(zhǎng)、分離產(chǎn)物少。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明是為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處，提供一種利用沸石分離醇溶蛋白組分的方法，本方法不需要昂貴的設(shè)備，僅采用沸石柱層析制備不同分子量醇溶蛋白組分，簡(jiǎn)化了不同分子量醇溶蛋白分離過(guò)程，提高了制備產(chǎn)率。

本發(fā)明通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

利用沸石分離醇溶蛋白組分的方法，其特征在于：包括下述步驟：

將谷朊粉和65％的乙醇按照質(zhì)量比1:6-1:10配比混合，在35-45℃水浴鍋里攪拌浸提2-3h使谷朊粉中醇溶蛋白溶于乙醇中；浸提后溶液用離心機(jī)在3500r/min條件下離心5min，上清液即為醇溶蛋白溶液；將醇溶蛋白溶液加入裝有沸石的層析柱中吸附30-120min，之后采用濃度為40-100％乙醇洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集不同時(shí)段蛋白得到不同分子量的醇溶蛋白組分溶液；該溶液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮后冷凍干燥得到固體醇溶蛋白組分。

填充層析柱的沸石是天然沸石或人造沸石，沸石的直徑范圍為1-6mm。

所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為60℃，真空度0.09MPa；進(jìn)而采用3500r/min離心5min得到濕蛋白，濕蛋白進(jìn)行冷凍干燥得到固體蛋白組分，冷凍干燥溫度為-65℃，時(shí)間為3d。

天然沸石和人造沸石常被用來(lái)吸附水中氨氮和有機(jī)物，醇溶蛋白可通過(guò)液膜擴(kuò)散和粒子擴(kuò)散被沸石吸附，分子量越大的醇溶蛋白組分吸附力越強(qiáng)，洗脫出來(lái)時(shí)間越長(zhǎng)。選擇合適濃度的乙醇進(jìn)行洗脫，分子量較小的醇溶蛋白分子先洗脫下來(lái)，分子量大的醇溶蛋白分子后洗脫下來(lái)，收集不同時(shí)段的蛋白就可得到分子量不同的醇溶蛋白組分。得到的醇溶蛋白組分可再次進(jìn)行多次吸附、洗脫，就可以得到分子量范圍分布更窄的醇溶蛋白組分。

本發(fā)明具有下述技術(shù)效果：

本發(fā)明的方法利用天然沸石和人造沸石可吸附有機(jī)大分子的特性，根據(jù)分子量大小不同吸附強(qiáng)度不同的特點(diǎn)選擇合適洗脫劑將不同分子量醇溶蛋白組分在不同時(shí)段洗脫下來(lái)收集，再通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀揮發(fā)乙醇、離心沉淀將醇溶蛋白組分分離出來(lái)，本方法不需要昂貴設(shè)備，可高效分離出不同分子量的醇溶蛋白組分，簡(jiǎn)化了不同分子量醇溶蛋白組分的制備過(guò)程。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。

實(shí)施例1

將谷朊粉和65％的乙醇按照質(zhì)量比1:6配比混合，在35℃水浴鍋里攪拌浸提2h使谷朊粉中醇溶蛋白溶于乙醇中。浸提后溶液用離心機(jī)(3500r/min、5min)離心，上清液即為醇溶蛋白溶液。將5Kg天然沸石填充到層析柱中，沸石的直徑范圍為1-3mm。將3000mL醇溶蛋白溶液倒入層析柱吸附30min，之后采用濃度為40％乙醇洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集不同時(shí)段蛋白得到不同分子量的醇溶蛋白組分溶液。該溶液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮后冷凍干燥得到固體醇溶蛋白組分。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為60℃，真空度0.09MPa。進(jìn)而采用3500r/min離心5min得到濕的蛋白，蛋白進(jìn)行冷凍干燥得到固體蛋白組分，冷凍干燥溫度為-65℃，時(shí)間為3d。分離得到3種醇溶蛋白組分4.8g、3.7g和3.9g，采用高效液相離子交換法測(cè)定其平均分子量分別為52649、54663、1078544。

實(shí)施例2

將谷朊粉和65％的乙醇按照質(zhì)量比1:10配比混合，在45℃水浴鍋里攪拌浸提3h使谷朊粉中醇溶蛋白溶于乙醇中。浸提后溶液用離心機(jī)(3500r/min、5min)離心，上清液即為醇溶蛋白溶液。將5Kg人造沸石填充到層析柱中，沸石的直徑范圍為3-6mm。將5000mL醇溶蛋白溶液倒入層析柱吸附120min，之后采用濃度為100％乙醇洗脫劑進(jìn)行洗脫，收集不同時(shí)段蛋白得到不同分子量的醇溶蛋白組分溶液。該溶液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮后冷凍干燥得到固體醇溶蛋白組分。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為60℃，真空度0.09MPa。進(jìn)而采用3500r/min離心5min得到濕的蛋白，蛋白進(jìn)行冷凍干燥得到固體蛋白組分，冷凍干燥溫度為-65℃，時(shí)間為3d。分離得到4種醇溶蛋白組分6.2g、4.5g、3.2和2.1g，采用高效液相離子交換法測(cè)定其平均分子量分別為52431、56842、64598、1048223。