技術(shù)特征：

1.用于測定細胞中目標(biāo)基因序列及其鄰近序列的方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟s1包括：

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟s2包括：

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟s2還包括：

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟s3包括：

6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟s5包括：

7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法還包括：

8.用于測定細胞中目標(biāo)基因序列及其鄰近序列的試劑盒，其特征在于，

9.如權(quán)利要求8所述的試劑盒在檢測重組細胞基因組遺傳穩(wěn)定性中的應(yīng)用，其特征在于，所述檢測的內(nèi)容包括：外源基因整合位點、平均拷貝數(shù)定量、外源基因完整性。

10.如權(quán)利要求8所述的試劑盒在對通過隨機整合方式建立的細胞株進行安全性評估中的應(yīng)用，其特征在于，所述評估的內(nèi)容包括：外源基因整合位點、外源基因整合位點注釋分析、外源基因完整性。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種用于測定細胞中目標(biāo)基因序列及其鄰近序列的方法、試劑盒及其應(yīng)用。為了解決現(xiàn)有技術(shù)中靶向測序存在的測序深度不夠以及準(zhǔn)確度不高的問題，本發(fā)明建立了一種高靈敏度的用于測定細胞中目標(biāo)基因序列及其鄰近序列的方法，包括對gDNA打斷并在片段兩端連接環(huán)化接頭，再依次進行環(huán)化、反向PCR，富集得到靶標(biāo)基因序列及其鄰近序列，對富集片段進行文庫構(gòu)建、測序、生物信息分析，得到分析結(jié)果。該方法不僅可以測定目標(biāo)基因的序列及其鄰近的未知序列，還可準(zhǔn)確判斷外源的目標(biāo)基因在宿主基因組上的插入位置以及整合位點，具有靈敏度高、測序偏倚小、操作便捷、實驗周期短且成本較低的特點。

技術(shù)研發(fā)人員：王一丁,楊志行,馬全剛,韓明明
受保護的技術(shù)使用者：湖州申科生物技術(shù)股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19