模擬移動(dòng)床色譜拆分天然藥物芝麻素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種天然藥物的拆分技術(shù)，特別是芝麻素的模擬移動(dòng)床色譜分離方法。
【背景技術(shù)】
[0002]芝麻作為一種貴重的油料作物，在我國長江、黃河流域均有種植，一直為人們所利用。它的主要成分油脂含量約為50%左右，其次蛋白質(zhì)約占20%，另外還含有各種維生素、碳水化合物、礦物質(zhì)、食物纖維以及作為芝麻特征成分的木酚素類化合物。木酚素類化合物在芝麻中含量為0.5%-1.0%，此類化合物中芝麻素約占50%以上，其次是芝麻林素，而其它幾種木酚素的含量甚微。
[0003]芝麻素作為一種天然產(chǎn)物，具有多種生理功效，包括抑制乳癌功能、保護(hù)肝臟及改善肝功能、抗過敏癥功能、降血脂功能、抗菌和抗氧化功能、降血壓功能、降膽固醇功能，可以加強(qiáng)維生素E的活性等。因此研制和開發(fā)生產(chǎn)芝麻素具有巨大醫(yī)藥商業(yè)價(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種天然藥物芝麻素模擬移動(dòng)床拆分的方法。
[0005]為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的采用的技術(shù)方案如下:一種天然藥物芝麻素的模擬移動(dòng)床的拆分方法，其特征在于用十八烷基硅烷鍵合的球形硅膠C18為固定相，用甲醇、水和醋酸溶液為流動(dòng)相，用模擬移動(dòng)床系統(tǒng)從木酚素類化合物中拆分出高純度的芝麻素和芝麻林素，包括以下步驟:
(1)將木酚素類化合物溶于流動(dòng)相中，濃度為:(T30g/L；
(2)用模擬移動(dòng)床拆分木酚素類化合物；
(3 )濃縮、重結(jié)晶得到高純度的芝麻素和芝麻林素。
[0006]本發(fā)明具有以下技術(shù)效果:本發(fā)明采用模擬移動(dòng)床系統(tǒng)，從木酚素類化合物中拆分出芝麻素和芝麻林素，工藝簡單，生產(chǎn)連續(xù)自動(dòng)化，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，溶劑采用甲醇、水和醋酸溶液，可回收利用，無污染，實(shí)現(xiàn)清潔生產(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0007]1、設(shè)備及條件選擇
采用模擬移動(dòng)床色譜系統(tǒng)，該系統(tǒng)包括洗脫泵、進(jìn)樣泵、萃取泵、色譜柱、電磁閥、單向閥、控溫器和PLC系統(tǒng)控制器及計(jì)算機(jī)組成。樣品溶液和洗脫液分別從樣品液入口和洗脫液入口注入系統(tǒng)，木酚素類化合物中的芝麻素和芝麻林素分別從提余液和提取液兩個(gè)出口中流出，每隔一定的時(shí)間樣品液和洗脫液入口、提取液和提余液出口沿流動(dòng)相流動(dòng)的方向切換至下一支色譜柱。
[0008]2、色譜柱填料及流動(dòng)相(溶劑)選擇以十八烷基硅烷鍵合的球形硅膠C18為固定相，填料粒度為5?75um，微粒越小，粒徑分布越窄，越有利于分離；但粒徑越小系統(tǒng)壓力越大，最適宜的粒徑范圍是l(T30um ；
流動(dòng)相(溶劑)為正己烷、乙醇和三氟乙酸(TFA)溶液。
[0009]3、分離步驟
A、樣品用流動(dòng)相溶解，濃度為(T30g/L，色譜系統(tǒng)由Γ24根制備柱組成，分為4個(gè)區(qū)，色譜柱數(shù)目越多分離越好，但系統(tǒng)的復(fù)雜度及系統(tǒng)壓力越高，最適合的是8?12根，通過模擬移動(dòng)床色譜系統(tǒng)的控制器，定期控制電磁閥的開閉，使進(jìn)樣口、萃取液出口及殘余液出口沿流動(dòng)相的方向定期變換，使芝麻素和芝麻林素分別從提取液和提余液兩個(gè)出口流出系統(tǒng)；
B、得到的產(chǎn)品溶液，經(jīng)過濃縮、重結(jié)晶得到純度在99%以上的合格產(chǎn)品；
C、成品檢驗(yàn)
流動(dòng)相:甲醇:水:醋酸=75:25:0.1 流速:1.0 mL/min 泵:江蘇漢邦科技分析泵色譜柱:C18 柱(4.6*250mm)
檢測器:江蘇漢邦科技紫外檢測器檢測波長:235nm。
[0010]下面結(jié)合實(shí)例進(jìn)一步說明本發(fā)明:
分離實(shí)例一
1、樣品的配制:樣品用流動(dòng)相溶解，制成濃度為5g/L，經(jīng)0.45um有機(jī)濾膜過濾后備用；
2、模擬移動(dòng)床參數(shù)的選擇:確定參數(shù)如下:進(jìn)樣流速0.4mL/min,洗脫流速2.0mL/min,提取液流速1.4mL/min，提余液流速1.0mL/min，切換時(shí)間34.5min，溫度控制在25?35°C ；
3、產(chǎn)品收集:待模擬移動(dòng)床系統(tǒng)運(yùn)行穩(wěn)定后，分別從兩出口收集產(chǎn)品，減壓濃縮、重結(jié)晶后得到最終產(chǎn)品；
4、成品檢驗(yàn):得到的產(chǎn)品用流動(dòng)相溶解后，用分析條件檢測兩出口產(chǎn)品芝麻素和芝麻林素的純度分別為99.9%和99.3% ；
每公斤固定相每天可生產(chǎn)芝麻素和芝麻林素各0.32kg，流動(dòng)相消耗為25L/kg，回收率為 99.2%ο
[0011]分離實(shí)例二
1、樣品的配制:樣品用流動(dòng)相溶解，制成濃度為10g/L，經(jīng)0.45um有機(jī)濾膜過濾后備用；
2、模擬移動(dòng)床參數(shù)的選擇:確定參數(shù)如下:進(jìn)樣流速1.0mL/min,洗脫流速4.0mL/min,提取液流速2.8mL/min，提余液流速2.2mL/min，切換時(shí)間28.lmin，溫度控制在25?35°C ；
3、產(chǎn)品收集:待模擬移動(dòng)床系統(tǒng)運(yùn)行穩(wěn)定后，分別從兩出口收集產(chǎn)品，減壓濃縮、重結(jié)晶后得到最終產(chǎn)品；
4、成品檢驗(yàn):得到的產(chǎn)品用流動(dòng)相溶解后，用分析條件檢測兩出口產(chǎn)品芝麻素和芝麻林素的純度分別為99.5%和99.3% ；
每公斤固定相每天可生產(chǎn)芝麻素和芝麻林素各1.95kg，流動(dòng)相消耗為23.4L/kg，回收率為98.6%ο
[0012]分離實(shí)例三1、樣品的配制:樣品用流動(dòng)相溶解，制成濃度為20g/L，經(jīng)0.45um有機(jī)濾膜過濾后備用；
2、模擬移動(dòng)床參數(shù)的選擇:確定參數(shù)如下:進(jìn)樣流速1.5mL/min,洗脫流速7.0mL/min,提取液流速5.0mL/min，提余液流速3.5mL/min，切換時(shí)間24.9min，溫度控制在25?35°C ；
3、產(chǎn)品收集:待模擬移動(dòng)床系統(tǒng)運(yùn)行穩(wěn)定后，分別從兩出口收集產(chǎn)品，減壓濃縮、重結(jié)晶后得到最終產(chǎn)品；
4、成品檢驗(yàn):得到的產(chǎn)品用流動(dòng)相溶解后，用分析條件檢測兩出口產(chǎn)品芝麻素和芝麻林素的純度分別為99.1%和99.0% ；
每公斤固定相每天可生產(chǎn)芝麻素和芝麻林素各4.12kg，流動(dòng)相消耗為22.5L/kg，回收率為98.1%。
[0013]上述實(shí)施實(shí)例用來解釋說明本發(fā)明，而不是對本發(fā)明進(jìn)行限制，在本發(fā)明的精神和權(quán)利要求的保護(hù)范圍內(nèi)，對本發(fā)明做出的任何修改和改變，都落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種天然藥物芝麻素的模擬移動(dòng)床色譜拆分方法，其特征在于:采用模擬移動(dòng)床色譜(簡稱SMBC)分離系統(tǒng)，系統(tǒng)中的洗脫泵流量O?100mL/min，壓力O?lOMpa，進(jìn)樣泵流量O?50mL/min,壓力O?1Mpa,萃取泵流量O?100mL/min,壓力O?1Mpa,工作溫度20?35°C，色譜柱填料為十八烷基硅烷鍵合的球形硅膠C18，填料粒度10?30um，流動(dòng)相為甲醇、水和醋酸的混合溶液，該方法的分離步驟如下: A、木酚素類化合物用流動(dòng)相溶解，濃度為O?30g/L，由進(jìn)樣泵進(jìn)入色譜系統(tǒng)，色譜系統(tǒng)由4?24根制備柱組成，分成四個(gè)區(qū)，每區(qū)有I?6支柱子，其中I區(qū)位于洗脫液入口與提取液出口之間，在此區(qū)實(shí)現(xiàn)芝麻林素的解吸；11區(qū)位于提取液出口與進(jìn)樣口之間，在此區(qū)使芝麻林素反復(fù)吸附、解吸、濃縮；ΙΠ區(qū)位于進(jìn)樣口與提余液出口之間在此區(qū)得到芝麻素；IV區(qū)位于提余液出口與洗脫液入口之間，一方面III區(qū)的洗脫液進(jìn)入到該區(qū)可循環(huán)利用，另一方面將III區(qū)與I區(qū)隔開，防止提余液中的芝麻素進(jìn)入到I區(qū)； B、得到芝麻素和芝麻林素產(chǎn)品，經(jīng)過濃縮重結(jié)晶，得到純度為99%以上的合格產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芝麻素的模擬移動(dòng)床色譜分離方法，其特征在于所述的流動(dòng)相為正己烷、乙醇和三氟乙酸(TFA)溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芝麻素的模擬移動(dòng)床色譜分離方法，其特征在于進(jìn)入模擬移動(dòng)床系統(tǒng)的濃度為O?100g/L，進(jìn)樣流速為O?50mL/min，洗脫液流速為O?100mL/min，萃取液流速為O?100mL/min,提余液流速為O?100mL/min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芝麻素的模擬移動(dòng)床色譜分離方法，其特征在于所述的定期切換電磁閥的時(shí)間為:15?40min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的芝麻素的模擬移動(dòng)床色譜分離方法，其特征在于所述的模擬移動(dòng)床色譜系統(tǒng)的操作溫度為25?35°C。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種模擬移動(dòng)床色譜拆分天然藥物芝麻素的方法。本發(fā)明的特征是：采用模擬移動(dòng)床色譜系統(tǒng)，填料為十八烷基硅烷鍵合的球形硅膠C18，流動(dòng)相為甲醇、水和醋酸溶液，在反相條件下拆分木酚素類化合物得到高純度的芝麻素和芝麻林素。模擬移動(dòng)床色譜系統(tǒng)是連續(xù)化生產(chǎn)，自動(dòng)化程度高，生產(chǎn)效率高。
【IPC分類】C07D493-04
【公開號】CN104788464
【申請?zhí)枴緾N201410027934
【發(fā)明人】劉玉明, 沈健增, 李勝迎
【申請人】江蘇漢邦科技有限公司
【公開日】2015年7月22日
【申請日】2014年1月22日