Vegfr3抑制劑的制作方法
【專利說明】VEGFR3抑制劑
[0001] 本發(fā)明涉及抑制血管內(nèi)皮生長因子受體3 (VEGFR3)(又稱為Fms相關(guān)酪氨酸激酶 4 (FLT4))的2，4, 5-取代嘧啶、其制備方法或含有所述化合物的藥劑或組合物。本發(fā)明還涉 及一種使用所述化合物來治療增殖性疾?。ㄈ绨┌Y）以及治療通過控制和/或抑制淋巴管 發(fā)生來改善的疾病的方法。
[0002] 背景
[0003] 在21世紀(jì)，癌癥仍然是死亡的主要原因。因此，目前將相當(dāng)大的藥物研宄和開發(fā) 努力放在發(fā)現(xiàn)可為癌癥患者提供壽命延長或治愈選擇的治療劑上。
[0004] 雖然存在許多不同種類的癌癥，每種癌癥表現(xiàn)出不同組的遺傳和生長特性，但許 多實體癌類型的共同點是能夠轉(zhuǎn)移。腫瘤局限于身體的一個區(qū)域并且可通過手術(shù)介入和/ 或放射療法來控制，直到發(fā)生轉(zhuǎn)移。然而，轉(zhuǎn)移導(dǎo)致癌細(xì)胞擴(kuò)散至身體的不同部分并且雖然 手術(shù)介入可去除原發(fā)性腫瘤病變，但所有轉(zhuǎn)移性病變的去除極難控制。
[0005] 腫瘤轉(zhuǎn)移為多階段過程，其涉及分解細(xì)胞外基質(zhì)、浸潤局部組織實質(zhì)、內(nèi)滲到局部 血管（regionalbloodvessel)和淋巴管中、在循環(huán)中存活并且最后在次生組織部位中外 滲、存活和生長（Front.Biosci.(Elite編著）。2012 ;4 :1888-1897)。
[0006] 可通過血管或淋巴管發(fā)生轉(zhuǎn)移。在若干方面，淋巴管不同于血管。大集合淋巴管 在其壁中含有血管平滑肌細(xì)胞以及瓣膜，所述瓣膜防止淋巴液回流。然而，不像典型的毛 細(xì)血管，毛細(xì)淋巴管缺乏周皮細(xì)胞和連續(xù)基膜并且含有大的內(nèi)皮間瓣膜樣開口（J.Theor. Med. 2003 ;5 :59-66)。由于其更大的滲透性，毛細(xì)淋巴管比毛細(xì)血管在允許腫瘤細(xì)胞穿 過上更有效。實驗證據(jù)表明正在生長的腫瘤病變內(nèi)的淋巴管發(fā)生（新淋巴管的形成）促 進(jìn)通過淋巴管的轉(zhuǎn)移。淋巴管發(fā)生的控制為預(yù)防淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)具有吸引力的治療策略 (J.Clin.One. 2007 ;25 :4298-4307)。
[0007] 淋巴系統(tǒng)由毛細(xì)管和由內(nèi)皮細(xì)胞連續(xù)排列的較大的集合管構(gòu)成，其使外滲的流體 和大分子從胞間隙返回至血液循環(huán)。通過淋巴管轉(zhuǎn)移至區(qū)域淋巴結(jié)是許多癌癥類型共同的 腫瘤進(jìn)展過程。淋巴結(jié)累及程度為許多類型癌癥分期的主要決定因素并且為用作受影響的 淋巴結(jié)的手術(shù)介入和放射治療介入的基礎(chǔ)的重要預(yù)后因素。
[0008] 通過生長因子VEGFC或VEGFD結(jié)合至其膜受體VEGFR3的分子信號傳導(dǎo)已顯示在 淋巴管發(fā)生過程中起到核心作用（Brit.J.Cancer2006 ;94 :1355-1360)。VEGFR3受體的 刺激通過磷酸化其細(xì)胞內(nèi)區(qū)域發(fā)生并且觸發(fā)驅(qū)動淋巴內(nèi)皮細(xì)胞增殖、迀移和分化從而導(dǎo)致 淋巴管形成的下游信號傳導(dǎo)級聯(lián)（Exp.CellRes. 2006 ;312 :575-583)。VEGFC或VEGFD的 表達(dá)增加已顯示促進(jìn)腫瘤相關(guān)的淋巴管發(fā)生，從而使淋巴介導(dǎo)的向區(qū)域淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移成為 可能。已針對若干不同腫瘤類型報道了這些觀察，包括結(jié)腸直腸癌（Oncol.Rep. 2009 ;22: 1093-1100)、肺癌（Ann.Oncol. 2010;21:223-231)、胃癌（Surgery2009;146:896-905)、 腎癌（Oncol.R印? 2008 ;20 :721-725)、前列腺癌（Clin.CancerRes. 2004 ; 10 :5137-5144) 以及卵巢癌（Cancer2004;101:1364-1374)。在嚙齒動物中的若干腫瘤實驗?zāi)Ｐ椭?，阻?VEGFC、VEGFD/VEGFR3介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)已顯示抑制淋巴管發(fā)生并且遏制淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（Ann. N.Y.Acad.Sci. 2008 ；113 ： ,225-234 ；Int.J.Cancer2009 ；125 :2747-2756)〇
[0009]VEGFR3為在胚胎發(fā)生過程中廣泛表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞中的跨膜酪氨酸激酶受體 (Biochem.J. 2011 ;437 :169-183)。在發(fā)育后期，VEGFR3表達(dá)變得局限于發(fā)育淋巴管。在 成人中，VEGFR3表達(dá)主要局限于淋巴內(nèi)皮和⑶34+造血細(xì)胞的子集。另外，某些內(nèi)分泌器 官中的有孔毛細(xì)血管和靜脈以及單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和一些樹突細(xì)胞（DC)在成人中繼續(xù) 表達(dá)VEGFR3。小鼠胚胎中VEGFR3基因的破壞導(dǎo)致血管網(wǎng)絡(luò)形成失敗并且在胚胎第9. 5天 之后死亡（Biochem.J. 2011 ;437 :169-183)。這項觀察表明VEGFR3在胚胎脈管系統(tǒng)的發(fā)育 中起到關(guān)鍵作用。在癌癥中，VEGFR3在轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)和淋巴管瘤中的淋巴竇中過表達(dá)。此 外，在許多情況下，癌細(xì)胞自身表達(dá)VEGFR3。表達(dá)VEGFR3的癌細(xì)胞已顯示出其增殖依賴于 VEGFR3/VEGFC信號傳導(dǎo)（Eur.J.Canc. 2011 ;47 :2353-2363)。
[0010] 基于上文，顯而易見，VEGFR3信號傳導(dǎo)的抑制具有作為用于哺乳動物受試者的治 療策略的強烈可能，所述哺乳動物受試者已被診斷患有特征在于表達(dá)這個受體的內(nèi)皮細(xì)胞 的增殖的疾病。在癌癥的情況下，靶向VEGFR3可能通過遏制淋巴轉(zhuǎn)移和遏制表達(dá)VEGFR3 的癌細(xì)胞的生長而產(chǎn)生治療益處。
[0011] 有趣的是，并且從VEGFR3軸線內(nèi)的靶選擇觀點來看可能重要的是，在其中VEGFC 和VEGFD基因純合缺失的小鼠中，血液脈管系統(tǒng)正常發(fā)育，不像VEGFR3純合敲除小鼠的 胚胎心血管表型：即，這兩個配體的缺失與受體的缺失不相同（Mol.Cell.Biol. 2008 ;28 : 4843-4850)。這些數(shù)據(jù)提高了以下可能性：存在VEGFR3的另一個配體或VEGFR3可能夠通 過不依賴于其配體VEGFC和VEGFD的尚且未知的方式起作用。上文表明與單獨靶向VEGFC 或VEGFD相比，靶向VEGFR3對阻斷VEGFC/D-VEGFR3信號傳導(dǎo)更有利。
[0012] 雖然存在許多涉及具有各種水平的VEGFR3活性和選擇性的酪氨酸激酶抑制劑 的已報道的研宄（Nat.Rev.DrugDiscov. 2006 ;5 :835-844 ;Mol.CancerTher. 2007 ;6 : 2012-2021;CancerRes. 2009 ;69 :8009-8016 ;Mol.CancerTher. 2012 ;11 :1637-1649)，但 這些研宄在其它酪氨酸激酶上具有一些至少部分由抑制導(dǎo)致的限制。
[0013] 盡管如此，總體來說這些研宄加強了以下結(jié)論：VEGFR3的抑制可遏制或減少淋巴 管發(fā)生和/或淋巴引起的轉(zhuǎn)移。
[0014] 因此，選擇性抑制VEGFR3的化合物將有用于治療增殖性疾病，如癌癥。
[0015] 如上所述，VEGFR3在淋巴管發(fā)生的控制上起到重要作用。因此，VEGFR3的抑制劑 可用于治療其中淋巴管發(fā)生的控制/抑制具有治療益處的除癌癥以外的疾病。淋巴系統(tǒng)在 慢性炎癥性疾病和移植排斥中起主要作用。通過遏制VEGFR3功能來抑制淋巴管發(fā)生可在 這些病狀中提供可行的治療策略。
[0016]例如，臨床前研宄已表明，VEGFR3在角膜和眼部表面中的表達(dá)在角膜新血管形成 過程中調(diào)節(jié)并且VEGFR3介導(dǎo)角膜樹突細(xì)胞至淋巴結(jié)的迀移和對角膜移植的免疫性的誘 導(dǎo)。其中在發(fā)炎和高度血管化的宿主床上進(jìn)行移植的高危角膜移植具有非常低的成功率， 其中排斥率高達(dá)90% (J.LeukocBiol. 2003 ;74 :172-178)。在臨床前模型中，用VEGFR3抗 體治療導(dǎo)致角膜移植排斥的顯著遏制（Nat.Med. 2004 ; 10 :813-815)。
[0017] 在眼睛的脈絡(luò)膜層中產(chǎn)生新血管的脈絡(luò)膜新血管形成（CNV)導(dǎo)致慢性炎癥， 所述慢性炎癥涉及年齡相關(guān)黃斑變性（AMD)的發(fā)病機理并且由包括血管內(nèi)皮生長因 子（VEGF)家族成員VEGFA和VEGFC的非控制表達(dá)的因素驅(qū)動（J.Cell.Physiol. 2012; 227(1) :116-26)。已開發(fā)了靶向VEGFA的用于AMD的治療劑，例如抗VEGFA抗體蘭尼單抗 (ranibizumab)和貝伐單抗（bevacizumab)以及抗VEGF適體哌加他尼，但迄今為止還沒有 治療劑被臨床評價為通過調(diào)節(jié)VEGFC及其同源受體VEGFR3來介導(dǎo)作用。
[0018] 因此，抑制VEGFR3的化合物可有用于預(yù)防和/或治療眼睛疾病，例如角膜移植排 斥和年齡相關(guān)黃斑變性。
[0019] 此外，有越來越多的證據(jù)表明淋巴管對皮膚的慢性炎癥具有積極作用。淋巴內(nèi)皮 細(xì)胞增殖和淋巴增生已在小鼠的慢性皮膚炎癥中有所描述并且已針對牛皮癬患者的皮膚 病變有所報道（Blood2004 ; 104 :1048-1057)。
[0020] 因此，抑制VEGFR3的化合物可有用于預(yù)防和/或治療皮膚炎癥，如患有牛皮癬的 患者的皮膚病變。
[0021] 還發(fā)現(xiàn)淋巴管發(fā)生與腎移植排斥相關(guān)。產(chǎn)生VEGFC的巨噬細(xì)胞誘導(dǎo)新淋巴管的 形成，所述新淋巴管形成誘導(dǎo)和支持在腎移植物中維持同種異體免疫應(yīng)答（Nat.Med. 2006; 12 :230-234)〇
[0022] 因此，抑制VEGFR3的化合物可有用于預(yù)防和/或治療腎移植中的排斥。
[0023] 共同未決申請PCT/GB2012/000175公開了抑制FAK和VEGFR3的化合物。
[0024] 概述
[0025] 本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了有效作為VEGFR3抑制劑的特定種類的化合物。這些化合物可對 VEGFR3表現(xiàn)出比對如FAK和/或VEGFR2的激酶更高的選擇性。
[0026] 在第一方面，本發(fā)明提供以下式（I)的化合物或其異構(gòu)體、鹽、溶劑合物或前藥：
[0027]
【主權(quán)項】
1. 一種式（I)化合物或其異構(gòu)體、鹽、溶劑合物或前藥： 其中：
A為通過芳環(huán)碳原子連接至所述NH基團(tuán)的任選取代的5-10元雜芳基，其中所述雜芳基 環(huán)系統(tǒng)含有1至4個選自N、O和S的雜原子，并且； A可帶有不在所述NH基團(tuán)的α位的取代基Ria并且可任選地進(jìn)一步帶有不在所述NH 基團(tuán)的α位的一個、