標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為0. 2~0. 4mg/mL。
[0049] 其中，所述的高效液相色譜的條件更優(yōu)選如下：流動(dòng)相A為O.Olmol/L磷酸二氫鉀 溶液，pH值為3. 0,流動(dòng)相B為乙腈，以流動(dòng)相A :流動(dòng)相B按體積比為60 :40進(jìn)行洗脫，柱 溫為25°C，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm，流速為1.0 mL/min，進(jìn)樣量20 μ L，如式I所示的拉科酰胺類 似物標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為〇. 3mg/mL。
[0050] 其中，所述的如式I所示的拉科酰胺類似物標(biāo)準(zhǔn)品溶液較佳地為如式I所示的拉 科酰胺類似物與乙腈混合所形成的溶液。
[0051] 其中，所述的高效液相色譜的色譜柱較佳地為十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，其 型號(hào)為 Agilent XDB-C18, 250*4. 6mm，5 μ m。
[0052] 其中，在由式II化合物制備式III化合物的反應(yīng)中，其反應(yīng)步驟優(yōu)選如下：在有機(jī) 溶劑和水的兩相溶劑中，在堿和相轉(zhuǎn)移催化劑的存在下，將式II化合物與甲基化試劑進(jìn)行 取代反應(yīng)，即可。
[0053] 所述的甲基化試劑較佳地為對(duì)甲苯磺酸甲酯。
[0054] 所述的式II化合物與所述的甲基化試劑的摩爾比較佳地為1 : (3~5)，更佳地為 1:4〇
[0055] 所述的有機(jī)溶劑較佳地為甲苯。
[0056] 所述的反應(yīng)的溫度較佳地為10~30°C。
[0057] 所述的相轉(zhuǎn)移催化劑較佳地為四丁基溴化銨。
[0058] 所述的堿較佳地為無(wú)機(jī)堿，更佳地為氫氧化鈉和/或氫氧化鉀。
[0059] 在所述的反應(yīng)中，反應(yīng)終點(diǎn)的控制優(yōu)選通過(guò)如下方法進(jìn)行：當(dāng)檢測(cè)式I化合物的 含量大于5%時(shí)，應(yīng)立即終止反應(yīng)，表明反應(yīng)液中式I化合物的含量較高，反應(yīng)效果不佳；當(dāng) 檢測(cè)式I化合物的含量小于〇. 5%時(shí)，不終止反應(yīng)，否則會(huì)導(dǎo)致式III化合物的產(chǎn)率較低，反 應(yīng)效果不佳；當(dāng)檢測(cè)式I化合物的含量大于等于〇. 5%且小于等于5%時(shí)，即可終止反應(yīng)，反 應(yīng)效果較好；百分比是指質(zhì)量百分比。
[0060] 本發(fā)明還提供了上述如式I所示的拉科酰胺類似物作為標(biāo)準(zhǔn)品在檢測(cè)拉科酰胺 原料藥中式I化合物含量的應(yīng)用。
[0061] 其中，所述的應(yīng)用較佳地包括下述步驟：將如式I所示的拉科酰胺類似物標(biāo)準(zhǔn)品 溶液和拉科酰胺原料藥溶液分別進(jìn)行高效液相色譜檢測(cè)，根據(jù)如式I所示的拉科酰胺類似 物標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖的保留時(shí)間確定拉科酰胺原料藥溶液中相關(guān)物質(zhì)的峰，并根據(jù)峰面積計(jì)算 拉科酰胺原料藥溶液中式I化合物的含量，從而最終實(shí)現(xiàn)拉科酰胺原料藥的質(zhì)量控制。
[0062] 其中，所述的高效液相色譜的條件優(yōu)選如下：流動(dòng)相A為乙腈：甲醇：0.01mol/L 磷酸二氫銨按體積比為20:5:75的混合溶液，pH值為7. 0,流動(dòng)相B為乙腈：甲醇按體積比 為（70~90) : (10~30)的混合溶液，柱溫為10~30°C，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm，流速為I. 0~ 2. OmL/min，進(jìn)樣量15~25 μ L，如式I所示的拉科酰胺類似物標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為0. 2~ 0. 4mg/mL，拉科酰胺原料藥溶液的濃度為0. 2~0. 4mg/mL。
[0063] 其中，所述的高效液相色譜的條件更優(yōu)選如下：流動(dòng)相A為乙腈：甲醇：0.0 lmol/L 磷酸二氫銨按體積比為20:5:75的混合溶液，pH值為7. 0,流動(dòng)相B為乙腈：甲醇按體積比 為80:20的混合溶液，柱溫為25°C，檢測(cè)波長(zhǎng)為210nm，流速為1.0 mL/min，進(jìn)樣量20 μ L，如 式I所示的拉科酰胺類似物標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為0. 3mg/mL，拉科酰胺原料藥溶液的濃度為 0· 3mg/mL〇
[0064] 其中，所述的高效液相色譜的洗脫較佳地按照如下條件進(jìn)行梯度洗脫，百分比為 體積百分比：
[0065] Omin :100% 流動(dòng)相 A+0% 流動(dòng)相 B - 5min :100% 流動(dòng)相 A+0% 流動(dòng)相 B - 15min : 75%流動(dòng)相八+25%流動(dòng)相13 - 2〇111；[11:75%流動(dòng)相4+25%流動(dòng)相13 - 21111；[11:100%流動(dòng)相 A+0%流動(dòng)相B - 25min :100%流動(dòng)相A+0%流動(dòng)相B。
[0066] 其中，所述的高效液相色譜檢測(cè)的方法優(yōu)選如下：記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí) 間的3倍；控制拉科酰胺原料藥中式I化合物單個(gè)最大雜質(zhì)峰面積不得大于式I化合物 標(biāo)準(zhǔn)品溶液峰面積的〇. 1%，總雜質(zhì)峰面積之和不得大于式I化合物標(biāo)準(zhǔn)品溶液峰面積的 1. 0%〇
[0067] 其中，所述的如式I所示的拉科酰胺類似物標(biāo)準(zhǔn)品溶液較佳地為如式I所示的拉 科酰胺類似物與流動(dòng)相B混合所形成的溶液。
[0068] 其中，所述的拉科酰胺原料藥溶液較佳地為拉科酰胺原料藥與流動(dòng)相B混合所形 成的溶液。
[0069] 其中，所述的高效液相色譜的色譜柱較佳地為十八烷基硅烷鍵合硅膠色譜柱，其 型號(hào)為 Agilent XDB-C18, 250*4. 6mm，5 μ m。
[0070] 在不違背本領(lǐng)域常識(shí)的基礎(chǔ)上，上述各優(yōu)選條件，可任意組合，即得本發(fā)明各較佳 實(shí)例。
[0071] 本發(fā)明所用試劑和原料均市售可得。
[0072] 本發(fā)明中所述的室溫為25°C~35°C。
[0073] 本發(fā)明的積極進(jìn)步效果在于：本發(fā)明的如式I所示的拉科酰胺類似物是對(duì)拉科酰 胺進(jìn)行質(zhì)量控制的必需品；本發(fā)明的分離方法可以高效地分離得到上述的類似物。
【附圖說(shuō)明】
[0074] 圖1為拉科酰胺類似物I的MS圖；
[0075] 圖2為拉科酰胺類似物I的1HNMR圖；
[0076] 圖3為拉科酰胺類似物I的13CNMR圖；
[0077] 圖4為拉科酰胺類似物I的HMBC圖；
[0078] 圖5為拉科酰胺類似物I的HPLC圖。
【具體實(shí)施方式】
[0079] 下面通過(guò)實(shí)施例的方式進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述的實(shí) 施例范圍之中。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，按照常規(guī)方法和條件，或按照商 品說(shuō)明書(shū)選擇。
[0080] 需要說(shuō)明的是，由于HPLC檢測(cè)時(shí)忽略了對(duì)甲苯磺酸甲酯、甲苯等原料、溶劑，因 此，實(shí)施例中油狀物的HPLC檢測(cè)純度并非式I化合物在油狀物中的含量，而是式I化合物 在忽略了對(duì)甲苯磺酸甲酯、甲苯等之后的油狀物中的含量。
[0081] 實(shí)施例1拉科酰胺類似物式III的合成
[0082] 在IL反應(yīng)瓶中依次加入甲苯（330mL)、化合物式II (20. 00g，68mmol)，對(duì)-甲苯磺 酸甲醋（38. 10g，204mmol)、四丁基溴化按（2. 63g，8. 16mmol)，攪拌均勾，室溫下加入氫氧 化鈉水溶液（16. OOg氫氧化鈉+16mL水），加畢，室溫反應(yīng)3小時(shí)。
[0083] 反應(yīng)畢，加入水（16〇1^)，攪拌511^11，靜置分層、分液，有機(jī)層依次用5%的磷酸 (80mL)、水（160mLX2)洗滌，有機(jī)層55°C減壓濃縮，蒸除溶劑后得油狀物38. 5g。
[0084] 實(shí)施例2拉科酰胺類似物式III的合成
[0085] 在IL反應(yīng)瓶中依次加入甲苯（330mL)、化合物式II (20g，68mmol)，對(duì)-甲苯磺酸 甲醋（50. 67g, 272mmol)、四丁基溴化按（2. 63g，8. 16mmol)，攪拌均勾，室溫下加入氫氧化 鉀水溶液（16. OOg氫氧化鉀+16mL水），加畢，室溫反應(yīng)3小時(shí)。
[0086] 反應(yīng)畢，加入水（160mL)，攪拌5min，靜置分層、分液，有機(jī)層依次用5%的磷酸 (80mL)、水（160mLX2)洗滌，有機(jī)層55°C減壓濃縮，蒸除溶劑后得油狀物48. 32g。經(jīng)分離 鑒定、本實(shí)施例的產(chǎn)物同實(shí)施例1。
[0087] 實(shí)施例3拉科酰胺類似物式III的合成
[0088] 在IL反應(yīng)瓶中依次加入甲苯（330mL)、化合物式II (20. 00g，68mmol)，對(duì)-甲苯磺 酸甲醋（63. 50g, 340mmol)、四丁基溴化按（2. 63g，8. 16mmol)，攪拌均勾，室溫下加入氫氧 化鉀水溶液（16. OOg氫氧化鉀+16mL水），加畢，室溫反應(yīng)3小時(shí)。
[0089] 反應(yīng)畢，加入水（16〇1^)，攪拌511^11，靜置分層、分液，有機(jī)層依次用5%的磷酸 (80mL)、水（160mLX2)洗滌，有機(jī)層55°C減壓濃縮，蒸除溶劑后得油狀物60.97g。經(jīng)分離 鑒定、本實(shí)施例的產(chǎn)物同實(shí)施例1。
[0090] 實(shí)施例4拉科酰胺類似物式III的合成
[0091] 在IL反應(yīng)瓶中依次加入甲苯（330mL)、化合物式II (20.00g，68mmol)，對(duì)-甲苯磺 酸甲醋（38. 10g，204mmol)、四丁基溴化按（2. 63g，8. 16mmol)，攪拌均勾，室溫下加入氫氧 化鉀水溶液（11. 5g氫氧化鉀+11. 5mL水），加畢，室溫反應(yīng)3小時(shí)。
[0092] 反應(yīng)畢，加入水（16〇1^)，攪拌511^11，靜置分層、分液，有機(jī)層依次用5%的磷酸 (80mL)、水（160mLX2)洗滌，有機(jī)層55°C減壓濃縮，蒸除溶劑后得油狀物39. 7g。經(jīng)分離鑒 定、本實(shí)施例的產(chǎn)物同實(shí)施例1。
[0093] 實(shí)