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      一株富鐵產(chǎn)朊假絲酵母菌株及其應(yīng)用

      文檔序號:9575097閱讀:828來源:國知局
      一株富鐵產(chǎn)朊假絲酵母菌株及其應(yīng)用
      【技術(shù)領(lǐng)域】
      [0001] 本發(fā)明設(shè)及一株富鐵產(chǎn)航假絲酵母菌株及其應(yīng)用,屬于微生物發(fā)酵工業(yè)技術(shù)領(lǐng) 域。
      【背景技術(shù)】
      [0002] 鐵是人和動物維持生命和發(fā)育的必需營養(yǎng)物質(zhì),是構(gòu)成血紅素、肌紅蛋白、細胞色 素等的重要成分,參與體內(nèi)氧的運送和組織呼吸過程W及一系列新陳代謝反應(yīng),并具有增 強免疫的功能。膳食中鐵的缺乏會引起貧血,免疫功能低下,并誘發(fā)多種疾病,例如貧血性 屯、臟病、舌炎、口角炎及各種感染性疾病和癌癥等。仔豬貧血癥也是由于缺鐵引起的一種W 血紅蛋白含量降低、紅細胞數(shù)減少、皮膚粘膜蒼白及生長受阻為特征的疾病,是嚴重危害周 齡哺乳仔豬的一種微量元素缺乏癥。
      [0003] 微量元素鐵一般W無機鹽形態(tài)補充,但由于鐵離子對粘膜的刺激、胃腸道副作用 較大且吸收率低等原因限制了其使用。研究低毒高效補鐵劑一直是開發(fā)的方向。利用生物 轉(zhuǎn)化法,將無機狀態(tài)的鐵轉(zhuǎn)化成有機狀態(tài)的鐵,可W提高生物體對鐵的利用率,是開發(fā)新型 鐵源,提高鐵的利用率的主要措施。
      [0004] 近年來,用微生物、特別是用酵母菌為載體富集人及動物所必需的微量元素W求 有機形態(tài)、制造成本較低廉而富有多種營養(yǎng)的微量元素產(chǎn)品已引起人們的關(guān)注。富鐵酵母 是W酵母為載體,將無機鐵轉(zhuǎn)化為有機鐵的發(fā)酵產(chǎn)品。已有實驗表明,富鐵酵母具有較高的 生物利用率。食用富鐵酵母安全性好,除含有高含量高吸收率的鐵元素外,還可提供相當(dāng)數(shù) 量的蛋白、必需氨基酸及豐富的維生素、甘露寡糖及一些重要的營養(yǎng)輔助因子等。W高鐵食 用酵母作為強化食品及飼料的鐵源是預(yù)防鐵缺乏和缺鐵性貧血的一項行之有效的措施。 陽〇化]現(xiàn)有的富鐵酵母產(chǎn)品多是由隨機得到的酵母菌種進行發(fā)酵生產(chǎn)富鐵酵母,對酵母 菌種缺少系統(tǒng)的篩選和育種過程。因此,酵母菌種的遺傳穩(wěn)定性差,不同酵母菌種對鐵的抗 性和富集效果差異較大,產(chǎn)品缺乏穩(wěn)定性,不利于實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
      [0006] 產(chǎn)航假絲酵母又名食用圓酵母,其蛋白質(zhì)和維生素B的含量都比啤酒酵母高,在 培養(yǎng)基中無需加入任何生長因子即可生長。目前,對于產(chǎn)航假絲酵母的研究主要集中于其 富砸、富含活性膚和乙硫氨酸抗性等方面,而對于產(chǎn)航假絲酵母的富鐵特性尚未見報道。

      【發(fā)明內(nèi)容】

      [0007] 針對上述現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明的目的是提供一株富鐵產(chǎn)航假絲酵母菌株及其應(yīng)用。
      [0008] 為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用下述技術(shù)方案:
      [0009] 一株富鐵產(chǎn)航假絲酵母菌株,其為產(chǎn)航假絲酵母(Candidautilis)BLCC4-0021, 已于2015年10月16日保藏于位于中國武漢市武漢大學(xué)的中國典型培養(yǎng)物保藏中屯、,其保 藏編號為CCTCCN0:M2015611。
      [0010] 上述產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021在生產(chǎn)富鐵酵母產(chǎn)品中的應(yīng)用也是本發(fā)明保護的 范圍。
      [0011] 本發(fā)明的另一目的是提供一種富鐵酵母產(chǎn)品,其活性成分為上述產(chǎn)航假絲酵母 化CC4-0021或其發(fā)酵產(chǎn)物。
      [0012] 本發(fā)明中所述的發(fā)酵產(chǎn)物是指W產(chǎn)航假絲酵母為載體,將無機鐵轉(zhuǎn)化為有機鐵的 發(fā)酵產(chǎn)品,即富鐵酵母。
      [0013] 上述富鐵酵母產(chǎn)品中,所述產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021的發(fā)酵產(chǎn)物按照如下方法 制備:在含無機鐵的發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵上述產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021,得到發(fā)酵產(chǎn)物。
      [0014] 所述含無機鐵的發(fā)酵培養(yǎng)基中的無機鐵選自硫酸亞鐵、硝酸鐵、Ξ氯化鐵、硫酸鐵 錠或硫酸鐵;優(yōu)選為硫酸亞鐵。
      [0015] 所述無機鐵在所述含無機鐵的發(fā)酵培養(yǎng)基中的濃度為400-1200μg/mL;優(yōu)選為 400μg/血。
      [0016] 上述方法中,發(fā)酵的溫度為23~28°C,發(fā)酵的時間為20~2地,發(fā)酵培養(yǎng)基的初 始抑為4.0~6.0。
      [0017] 上述方法中,在所述發(fā)酵前,還包括如下步驟:
      [0018] 將產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021的斜面種子接種在滅菌后的種子培養(yǎng)基中,在 28-32°C搖床(180巧m)振蕩培養(yǎng)14-1化,得到液體種子液。
      [0019] 所述種子培養(yǎng)基的組成為:酵母膏5g,蛋白腺lOg,葡萄糖20g,KH2P〇42g,蒸饋水 1000血。
      [0020] 上述的富鐵酵母產(chǎn)品在作為飼料添加劑和/或食品營養(yǎng)強化劑中的應(yīng)用也是本 發(fā)明的保護范圍。
      [0021] 本發(fā)明的第Ξ個目的是提供一種預(yù)防保育豬缺鐵性貧血的微生態(tài)制劑。
      [0022] 該微生態(tài)制劑是由產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021的發(fā)酵產(chǎn)物8-12份、硫酸亞鐵8-12 份、氯化鉆0. 04-0. 08份、硫酸銅0. 6-1. 0份、VBi2〇. 2-0. 4份、Vc8-12份、巧樣酸8-12份、 載體55-65份和乳酸菌復(fù)配而成;
      [0023] 復(fù)配后的微生態(tài)制劑中,乳酸菌的活菌數(shù)大于或等于108c化/g。
      [0024] 所述載體為玉米淀粉和石粉中的任一種或二者的混合物。
      [00巧]優(yōu)選的,所述乳酸菌為植物乳桿菌LP化actobacillusplantarum),已于2010年 06月21日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中屯、,其保藏編號為:CCTCCΜ2010150;記載在申請 人的另一項專利"一株可用于生物防腐保鮮的乳酸菌及其應(yīng)用"(CN101914475Β)中。 [00%] 優(yōu)選的,所述微生態(tài)制劑由產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021的發(fā)酵產(chǎn)物10份、硫酸亞鐵 10份、氯化鉆0.06份、硫酸銅0.8份、VBi2〇. 3份、Vc10份、巧樣酸10份、載體60份和乳酸 菌復(fù)配而成;
      [0027] 復(fù)配后的微生態(tài)制劑中,乳酸菌的活菌數(shù)為5X108c化/邑。
      [0028] 載體為玉米淀粉和石粉的混合物,淀粉和石粉的質(zhì)量比為7:3。
      [0029] 本發(fā)明的有益效果:
      [0030] (1)本發(fā)明利用紫外誘變的方法選育出一株新的產(chǎn)航假絲酵母化CC4-0021,該菌 株具有高濃度無機鐵耐受性,在進行高生物量發(fā)酵的同時還具有較高的轉(zhuǎn)鐵富鐵能力,該 菌株為高效富鐵的酵母菌株,可W用來制備富鐵酵母產(chǎn)品。
      [0031] (2)本發(fā)明的菌株發(fā)酵生產(chǎn)富鐵產(chǎn)品的原料來源廣泛、操作簡便、發(fā)酵周期短,而 且酵母中有機鐵含量高,其對于飼料添加方面,安全無毒,對預(yù)防仔豬貧血及促生長作用均 極明顯,且改善了母豬的繁殖性能,提高了母豬初乳中鐵含量,通過給母豬補鐵間接給仔豬 補鐵,既避免仔豬應(yīng)激,又利于環(huán)境保護。
      【附圖說明】
      [0032] 圖1:富鐵產(chǎn)航假絲酵母生長曲線;
      [0033] 圖2:鐵富集曲線;
      [0034] 圖3:各試驗組仔豬照片。
      【具體實施方式】
      [0035] 結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的說明,應(yīng)該說明的是,下述說明僅是為了解釋本 發(fā)明,并不對其內(nèi)容進行限定。
      [0036] 實施例1:菌株的紫外誘變篩選
      [0037] 1材料與方法
      [0038] 1. 1試驗設(shè)備:UV2000分光光度計、離屯、機、超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱、振蕩培養(yǎng)箱 等。
      [0039] 1. 2試驗材料
      [0040]1. 2. 1菌種
      [0041] 產(chǎn)航假絲酵母(Candidautilis),山東寶來利來生物工程股份有限公司生物研究 院保臧。
      [0042] 1. 2. 2試劑
      [0043] 硫酸亞鐵、鹽酸徑胺、鄰二氮菲、醋酸鋼,均是分析純。
      [0044]1. 2. 3培養(yǎng)基配方
      [0045] 斜面保存培養(yǎng)基:酵母膏5g,蛋白腺lOg,葡萄糖20g,KH2P〇42g,瓊脂15g,蒸饋水 1000血。
      [0046] 種子培養(yǎng)基:酵母膏5g,蛋白腺lOg,葡萄糖20g,KH2P〇42g,蒸饋水lOOOmL。
      [0047] 液體發(fā)酵培養(yǎng)基:同種子培養(yǎng)基。
      [0048]1. 3方法
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