的熒光檢測圖。圖4A-4B為Jurkat細胞，圖4C-4D為 K562細胞，圖4E-4F為原代T細胞，圖4G-4H為小鼠胚胎干細胞(ES)。其中，左側(cè)的圖4A、4C、 4E、4G為白光下拍照，顯示細胞形態(tài)；右側(cè)的圖4B、4D、4F、4H為熒光下拍照，顯示綠色熒光。 對于同一種細胞，左右兩幅圖所拍的視野是相同的。
[0052]圖5 :pNB328-EGFP轉(zhuǎn)染Jurkat細胞（5A)、K562細胞（5B)、原代T細胞（5C)、小鼠 ES細 胞(5D)的流式檢測圖。
[0053] 圖6:pNB328-luc轉(zhuǎn)染Huh7細胞的熒光素酶檢測圖。
[0054]圖7:含c-myc核定位信號的PB與含TAT核定位信號的PB介導EGFP表達框整合效率 比較。
[0055]圖8:pNB328-EGFP轉(zhuǎn)染原代T細胞后EGFP基因表達的熒光表達強度的檢測圖。8A， 8C是白光下的拍照圖片，顯示細胞形態(tài);8B，8D是熒光下拍照圖片，顯示綠色熒光。
[0056]圖9:pNB328-EGFP轉(zhuǎn)染原代T細胞后的整合位點分析圖。圓圈標注部分為整合熱 點。9六，98,9(：，分別代表3個不同來源正常人的原代1'細胞整合位點檢測。三角形代表的是整 合位點屬于基因間區(qū)段，箭頭代表整合位點屬于基因內(nèi)區(qū)段，圓圈代表整合熱點。
[0057]圖10:pNB328-CAR19轉(zhuǎn)染原代T細胞后對Raji細胞的殺傷作用檢測圖。
[0058] 序列信息：
[0059] 序列 1(SEQ ID NO: 1，67bp)，PiggyBac轉(zhuǎn)座子5'末端重復序列
[0060] TTAACCCTAGAAAGATAATCATATTGTGACGTACGTTAAAGATAATCATGCGTAAAATTGACGCATG
[0061] 序列2(SEQ ID N0:2,51bp)，多克隆插入位點
[0062] TCTAGAGTCGAATTCTGAGCTAGCGATGGATCCTGCACTAGTGCTGTCGAC
[0063] 序列3(SEQ ID N0:3,222bp)，polyA加尾信號序列
[0064] CAGACATGATAAGATACATTGATGAGTTTGGACAAACCACAACTAGAATGCAGTGAAAAAAATGCTTTATTTGTGAA ATTTGTGATGCTATTGCTTTATTTGTAACCATTATAAGCTGCAATAAACAAGTTAACAACAACAATTGCATTCATTT TATGTTTCAGGTTCAGGGGGAGGTGTGGGAGGTTTTTTAAAGCAAGTAAAACCTCTACAAATGTGGTA
[0065] 序列4(SEQ ID N0:4,40bp)，PiggyBac轉(zhuǎn)座子3'末端重復序列
[0066] GCATGCGTCAATTTTACGCAGACTATCTTTCTAGGGTTAA
[0067] 序列5(SEQ ID N0:5，1815bp)，含人c-myc核定位信號編碼序列的PiggyBac轉(zhuǎn)座酶 編碼序列，其中下劃線為人c-myc核定位信號編碼序列。
[0068] atgGGCcctgctgccaagagggtcaagttggacggcagcagcctggacgacgagcacatcctgagcg CCCTGCTGCAGAGCGACGACGAGCTGGTGGGCGAGGACAGCGACAGCGAGGTGAGCGACCACGTGAGCGAGGACGAC GTGCAGAGCGACACCGAGGAGGCCTTCATCGACGAGGTGCACGAGGTGCAGCCCACCAGCAGCGGCAGCGAGATCCT GGACGAGCAGAACGTGATCGAGCAGCCCGGCAGCAGCCTGGCCAGCAACCGCATCCTGACCCTGCCCCAGCGCACCA TCCGCGGCAAGAACAAGCACTGCTGGAGCACCAGCAAGCCCACCCGCCGCAGCCGCGTGAGCGCCCTGAACATCGTG CGCAGCCAGCGCGGCCCCACCCGCATGTGCCGCAACATCTACGACCCCCTGCTGTGCTTCAAGCTGTTCTTCACCGA CGAGATCATCAGCGAGATCGTGAAGTGGACCAACGCCGAGATCAGCCTGAAGCGCCGCGAGAGCATGACCAGCGCCA CCTTCCGCGACACCAACGAGGACGAGATCTACGCCTTCTTCGGCATCCTGGTGATGACCGCCGTGCGCAAGGACAAC CACATGAGCACCGACGACCTGTTCGACCGCAGCCTGAGCATGGTGTACGTGAGCGTGATGAGCCGCGACCGCTTCGA CTTCCTGATCCGCTGCCTGCGCATGGACGACAAGAGCATCCGCCCCACCCTGCGCGAGAACGACGTGTTCACCCCCG TGCGCAAGATCTGGGACCTGTTCATCCACCAGTGCATCCAGAACTACACCCCCGGCGCCCACCTGACCATCGACGAG CAGCTGCTGGGCTTCCGCGGCCGCTGCCCCTTCCGCGTGTACATCCCCAACAAGCCCAGCAAGTACGGCATCAAGAT CCTGATGATGTGCGACAGCGGCACCAAGTACATGATCAACGGCATGCCCTACCTGGGCCGCGGCACCCAGACCAACG GCGTGCCCCTGGGCGAGTACTACGTGAAGGAGCTGAGCAAGCCCGTGCACGGCAGCTGCCGCAACATCACCTGCGAC AACTGGTTCACCAGCATCCCCCTGGCCAAGAACCTGCTGCAGGAGCCCTACAAGCTGACCATCGTGGGCACCGTGCG CAGCAACAAGCGCGAGATCCCCGAGGTGCTGAAGAACAGCCGCAGCCGCCCCGTGGGCACCAGCATGTTCTGCTTCG ACGGCCCCCTGACCCTGGTGAGCTACAAGCCCAAGCCCGCCAAGATGGTGTACCTGCTGAGCAGCTGCGACGAGGAC GCCAGCATCAACGAGAGCACCGGCAAGCCCCAGATGGTGATGTACTACAACCAGACCAAGGGCGGCGTGGACACCCT GGACCAGATGTGCAGCGTGATGACCTGCAGCCGCAAGACCAACCGCTGGCCCATGGCCCTGCTGTACGGCATGATCA ACATCGCCTGCATCAACAGCTTCATCATCTACAGCCACAACGTGAGCAGCAAGGGCGAGAAGGTGCAGAGCCGCAAG AAGTTCATGCGCAACCTGTACATGGGCCTGACCAGCAGCTTCATGCGCAAGCGCCTGGAGGCCCCCACCCTGAAGCG CTACCTGCGCGACAACATCAGCAACATCCTGCCCAAGGAGGTGCCCGGCACCAGCGACGACAGCACCGAGGAGCCCG TGATGAAGAAGCGCACCTACTGCACCTACTGCCCCAGCAAGATCCGCCGCAAGGCCAGCGCCAGCTGCAAGAAGTGC AAGAAGGTGATCTGCCGCGAGCACAACATCGACATGTGCCAGAGCTGCTTCTAA
[0069] 序列6(SEQ ID N0:6,531bp)，CMV啟動子
[0070] ATATACTGAGTCATTAGGGACTTTCCAATGGGTTTTGCCCAGTACATAAGGTCAATAGGGGTGAATCAACAGGAAAG TCCCATTGGAGCCAAGTACACTGAGTCAATAGGGACTTTCCATTGGGTTTTGCCCAGTACAAAAGGTCAATAGGGGG TGAGTCAATGGGTTTTTCCCATTATTGGCACGTACATAAGGTCAATAGGGGTGAGTCATTGGGTTTTTCCAGCCATT AAATTAAAACGCCATGTACTTTCCCACCATTGACGTCAATGGGCTATTGAAACTAATGCAACGTGACCTTTAAACGG TACTTTCCCATAGCTGATTAATGGGAAAGTACCGTTCTCGAGCCAATACACGTCAATGGGAAGTGAAAGGGCAGCCA AAACGTAACACCGCCCCGGTTTTCCCCTGGAAATTCCATATTGGCACTCATTCTATTGGCTGAGCTGCGTTCTACGT GGGTATAAGAGGCGCGACCAGCGTCGGTACCGTCGCAGTCTTCGGTCTGACCACCGTAGAACGCAGATC
[0071] 序列7(SEQ ID N0:7,2760bp)，實施例1中拼接成的一段長序列
[0072] GGCGCGCCTTAACCCTAGAAAGATAATCATATTGTGACGTACGTTAAAGATAATCATGCGTAAAATTGACGCATGTC TAGAGTCGAATTCTGAGCTAGCGATGGATCCTGCACTAGTGCTGTCGACCAGACATGATAAGATACATTGATGAGTT TGGACAAACCACAACTAGAATGCAGTGAAAAAAATGCTTTATTTGTGAAATTTGTGATGCTATTGCTTTATTTGTAA CCATTATAAGCTGCAATAAACAAGTTAACAACAACAATTGCATTCATTTTATGTTTCAGGTTCAGGGGGAGGTGTGG GAGGTTTTTTAAAGCAAGTAAAACCTCTACAAATGTGGTAGCATGCGTCAATTTTACGCAGACTATCTTTCTAGGGT TAAATCGATTTAGAAGCAGCTCTGGCACATGTCGATGTTGTGCTCGCGGCAGATCACCTTCTTGCACTTCTTGCAGC TGGCGCTGGCCTTGCGGCGGATCTTGCTGGGGCAGTAGGTGCAGTAGGTGCGCTTCTTCATCACGGGCTCCTCGGTG CTGTCGTCGCTGGTGCCGGGCACCTCCTTGGGCAGGATGTTGCTGATGTTGTCGCGCAGGTAGCGCTTCAGGGTGGG GGCCTCCAGGCGCTTGCGCATGAAGCTGCTGGTCAGGCCCATGTACAGGTTGCGCATGAACTTCTTGCGGCTCTGCA CCTTCTCGCCCTTGCTGCTCACGTTGTGGCTGTAGATGATGAAGCTGTTGATGCAGGCGATGTTGATCATGCCGTAC AGCAGGGCCATGGGCCAGCGGTTGGTCTTGCGGCTGCAGGTCATCACGCTGCACATCTGGTCCAGGGTGTCCACGCC GCCCTTGGTCTGGTTGTAGTACATCACCATCTGGGGCTTGCCGGTGCTCTCGTTGATGCTGGCGTCCTCGTCGCAGC TGCTCAGCAGGTACACCATCTTGGCGGGCTTGGGCTTGTAGCTCACCAGGGTCAGGGGGCCGTCGAAGCAGAACATG CTGGTGCCCACGGGGCGGCTGCGGCTGTTCTTCAGCACCTCGGGGATCTCGCGCTTGTTGCTGCGCACGGTGCCCAC GATGGTCAGCTTGTAGGGCTCCTGCAGCAGGTTCTTGGCCAGGGGGATGCTGGTGAACCAGTTGTCGCAGGTGATGT TGCGGCAGCTGCCGTGCACGGGCTTGCTCAGCTCCTTCACGTAGTACTCGCCCAGGGGCACGCCGTTGGTCTGGGTG CCGCGGCCCAGGTAGGGCATGCCGTTGATCATGTACTTGGTGCCGCTGTCGCACATCATCAGGATCTTGATGCCGTA CTTGCTGGGCTTGTTGGGGATGTACACGCGGAAGGGGCAGCGGCCGCGGAAGCCCAGCAGCTGCTCGTCGATGGTCA GGTGGGCGCCGGGGGTGTAGTTCTGGATGCACTGGTGGATGAACAGGTCCCAGATCTTGCGCACGGGGGTGAACACG TCGTTCTCGCGCAGGGTGGGGCGGATGCTCTTGTCGTCCATGCGCAGGCAGCGGATCAGGAAGTCGAAGCGGTCGCG GCTCATCACGCTCACGTACACCATGCTCAGGCTGCGGTCGAACAGGTCGTCGGTGCTCATGTGGTTGTCCTTGCGCA CGGCGGTCATCACCAGGATGCCGAAGAAGGCGTAGATCTCGTCCTCGTTGGTGTCGCGGAAGGTGGCGCTGGTCATG CTCTCGCGGCGCTTCAGGCTGATCTCGGCGTTGGTCCACTTCACGATCTCGCTGATGATCTCGTCGGTGAAGAACAG CTTGAAGCACAGCAGGGGGTCGTAGATGTTGCGGCACATGCGGGTGGGGCCGCGCTGGCTGCGCACGATGTTCAGGG CGCTCACGCGGCTGCGGCGGGTGGGCTTGCTGGTGCTCCAGCAGTGCTTGTTCTTGCCGCGGATGGTGCGCTGGGGC AGGGTCAGGATGCGGTTGCTGGCCAGGCTGCTGCCGGGCTGCTCGATCACGTTCTGCTCGTCCAGGATCTCGCTGCC GCTGCTGGTGGGCTGCACCTCGTGCACCTCGTCGATGAAGGCCTCCTCGGTGTCGCTCTGCACGTCGTCCTCGCTCA CGTGGTCGCTCACCTCGCTGTCGCTGTCCTCGCCCACCAGCTCGTCGTCGCTCTGCAGCAGGGCGCTCAGGATGTGC TCGTCGTCCAGGCTGCTGCCGTCCAACTTGACCCTCTTGGCAGCAGGGCCCATGGTGGCAAGCTTGATCTGCGTTCT ACGGTGGTCAGACCGAAGACTGCGACGGTACCGACGCTGGTCGCGCCTCTTATACCCACGTAGAACGCAGCTCAGCC AATAGAATGAGTGCCAATATGGAATTTCCAGGGGAAAACCGGGGCGGTGTTACGTTTTGGCTGCCCTTTCACTTCCC ATTGACGTGTATTGGCTCGAGAACGGTACTTTCCCATTAATCAGCTATGGGAAAGTACCGTTTAAAGGTCACGTTGC ATTAGTTTCAATAGCCCATTGACGTCAATGGTGGGAAAGTACATGGCGTTTTAATTTAATGGCTGGAAAAACCCAAT GACTCACCCCTATTGACCTTATGTACGTGCCAATAATGGGAAAAACCCATTGACTCACCCCCTATTGACCTTTTGTA CTGGGCAAAACCCAATGGAAAGTCCCTATTGACTCAGTGTACTTGGCTCCAATGGGACTTTCCTGTTGATTCACCCC TATTGACCTTATGTACTGGGCAAAACCCATTGGAAAGTCCCTAATGACTCAGTATATTTAATTAA
[0073] 序列8(SEQ ID N0:8,54