積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD(% )小于3.I %。
[0022]樣品的分析，按照前述方法對樣品進行處理衍生，并在與標(biāo)準(zhǔn)品相同色譜條件下進行分析測定。
[0023]合成了新的熒光標(biāo)記試劑2_( 2-噻吩-2-基-菲[9，10_d]并咪唑_1_基)-對甲苯磺酸乙酯(TSTPE)通過對衍生化和色譜分離條件的優(yōu)化，建立了靈敏度高、重現(xiàn)性好的測定26 種飽和脂肪酸方法。
【附圖說明】
[0024]圖1:衍生試劑合成概括圖和脂肪酸衍生反應(yīng)概況圖；
[0025]圖2:脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)品衍生物色譜圖；
[0026]圖3:脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)曲線方程、相關(guān)系數(shù)和檢測限；
[0027]圖4:樣品中脂肪酸衍生物色譜圖；
[0028]圖5:銀杏果和銀杏葉中脂肪酸的含量及回收率。
【具體實施方式】
[0029]—種用于標(biāo)記羧酸類化合物的熒光衍生試劑的合成，包括以下步驟:
[0030]I )2-噻吩-2-1H-菲[9，10-d]并咪唑的合成，在100mL三口燒瓶中，分別加入16g9，10-菲醌、12mL 2-噻吩甲醛、120g醋酸銨和300mL冰醋酸，在機械攪拌的條件下快速加熱至Ij80-90°C，保持溫度攪拌反應(yīng)3h。反應(yīng)物冷卻至室溫后倒入燒杯中，用氨水調(diào)節(jié)pH至7-8，過濾，固體用水洗2次后放暗處干燥。干燥后的固體用乙腈/DMF(5:1，v/v)重結(jié)晶三次，得棕色晶體，產(chǎn)率88 %。
[0031]2)2-(2-噻吩-2-基-菲[9，ΙΟ-d]并咪唑-1-基)-乙醇的合成，在500mL燒瓶中，分別加入9g 2-噻吩-2-1H-菲[9，10-d]并咪唑，痕量氫氧化鉀和lOOmLDMF，在攪拌的條件下加熱到沸騰后，把3.2g的碳酸亞乙酯分三次在Ih內(nèi)加入到燒瓶中，在繼續(xù)加熱5h。反應(yīng)完畢冷卻到室溫后，燒瓶中的混合物倒入到300mL水中，過濾并用水和60 %乙醇依次洗滌固體。固體干燥后用乙腈/DMF(4:1，v/v)重結(jié)晶三次，得黃色晶體，產(chǎn)率51%。
[0032]3)2-(2-噻吩-2-基-菲[9，ΙΟ-d]并咪唑-1-基)-對甲苯磺酸乙酯(TSTPE)的合成，在10mL燒瓶中，分別加入3g對甲基苯磺酰氯和20mL吡啶，冷卻至0°C。把6g 2-(2-噻吩-2-基-菲[9，I Ο-d ]并咪唑-1 -基)_乙醇溶解在1mL吡啶中滴加到燒瓶中的溶液里，保持溶液在0°C攪拌反應(yīng)4h，繼續(xù)在室溫下攪拌反應(yīng)1h后，反應(yīng)物倒入適量冰水中并攪拌0.5h。過濾，固體用水洗滌，干燥后用乙腈重結(jié)晶3次，得淺黃色晶體，產(chǎn)率91%。一種熒光衍生試劑的應(yīng)用，將熒光衍生試劑用于標(biāo)記脂肪酸類化合物，濃度為1.0X10—4mol.L—1的混合脂肪酸(〇5-030)標(biāo)準(zhǔn)溶液用乙腈/01^(1:1，v/v)溶解;準(zhǔn)確稱取0.5gTSTPE，用DMF溶解并定容至10mL，得濃度為1.0 X 10—Vol.L—1的熒光衍生試劑溶液；向盛有1mg無水K2CO3的2mL安培瓶中依次加入400yL DMF，10yL混合脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，220yL熒光衍生試劑溶液，封口后于85°C恒溫水浴下振蕩反應(yīng)30min，得到穩(wěn)定的熒光產(chǎn)物。
[0033]本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。
【主權(quán)項】
1.一種用于標(biāo)記羧酸類化合物的熒光衍生試劑的合成，其特征在于，包括以下步驟: 1)2-噻吩-2-1H-菲[9，10-d]并咪唑的合成，在100mL三口燒瓶中，分別加入16g9,10-菲醌、12mL 2-噻吩甲醛、120g醋酸銨和300mL冰醋酸，在機械攪拌的條件下快速加熱到80-90°C，保持溫度攪拌反應(yīng)3h。反應(yīng)物冷卻至室溫后倒入燒杯中，用氨水調(diào)節(jié)pH至7-8，過濾，固體用水洗2次后放暗處干燥。干燥后的固體用乙腈/DMF(5:1，v/v)重結(jié)晶三次，得棕色晶體，產(chǎn)率88 %。 2)2-(2-噻吩-2-基-菲[9，10-d]并咪唑-1-基)-乙醇的合成，在500mL燒瓶中，分別加入9g 2-噻吩-2-1H-菲[9，10-d]并咪唑，痕量氫氧化鉀和lOOmLDMF，在攪拌的條件下加熱到沸騰后，把3.2g的碳酸亞乙酯分三次在Ih內(nèi)加入到燒瓶中，在繼續(xù)加熱5h。反應(yīng)完畢冷卻到室溫后，燒瓶中的混合物倒入到300mL水中，過濾并用水和60 %乙醇依次洗滌固體。固體干燥后用乙腈/DMF(4:1，v/v)重結(jié)晶三次，得黃色晶體，產(chǎn)率51 %。 3)2-(2-噻吩-2-基-菲[9，ΙΟ-d]并咪唑-1-基)-對甲苯磺酸乙酯(TSTPE)的合成，在10mL燒瓶中，分別加入3g對甲基苯磺酰氯和20mL吡啶，冷卻至0°C。把6g 2-(2-噻吩-2-基-菲[9，ΙΟ-d]并咪唑-1-基)-乙醇溶解在1mL吡啶中滴加到燒瓶中的溶液里，保持溶液在0°C攪拌反應(yīng)4h，繼續(xù)在室溫下攪拌反應(yīng)1h后，反應(yīng)物倒入適量冰水中并攪拌0.5h。過濾，固體用水洗滌，干燥后用乙腈重結(jié)晶3次，得淺黃色晶體，產(chǎn)率91%。2.—種用于標(biāo)記羧酸類化合物的熒光衍生試劑的應(yīng)用，其特征在于，將熒光衍生試劑用于標(biāo)記脂肪酸類化合物:濃度為1.0X 10—4H1l.L-1的混合脂肪酸(C5-C30)標(biāo)準(zhǔn)溶液用乙腈/DMF( 1:1, v/v)溶解;準(zhǔn)確稱取0.5gTSTPE，用DMF溶解并定容至1mL，得濃度為1.0X10—Vol.L-1的熒光衍生試劑溶液；向盛有1mg無水K2CO3的2mL安培瓶中依次加入400yL DMF,10yL混合脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，220yL熒光衍生試劑溶液，封口后于85°C恒溫水浴下振蕩反應(yīng)30min，得到穩(wěn)定的焚光產(chǎn)物。
【專利摘要】本發(fā)明涉及衍生試劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種熒光衍生試劑的合成用于標(biāo)記羧酸類化合物的熒光衍生試劑的合成及應(yīng)用。本發(fā)明合成了新型高靈敏的熒光試劑2-(2-噻吩-2-基-菲[9,10-d]并咪唑-1-基)-對甲苯磺酸乙酯(TSTPE)，在DMF溶劑中以碳酸鉀為催化劑，85℃時反應(yīng)30min即可獲得穩(wěn)定的熒光產(chǎn)物，衍生產(chǎn)率高、條件溫和、操作簡便，衍生溶液不必預(yù)處理可直接進樣分析。
【IPC分類】C07D409/04, C09K11/06
【公開號】CN105566308
【申請?zhí)枴緾N201610008486
【發(fā)明人】董秀麗, 陳向明
【申請人】濱州醫(yī)學(xué)院
【公開日】2016年5月11日
【申請日】2016年1月8日