一種棗仁揮發(fā)油的提取及純化方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于天然植物有效成分提取技術領域，具體涉及一種棗仁揮發(fā)油的提取及純化方法。
【背景技術】
[0002]率仁(Zizyphus jujube Mill)系鼠李科率屬植物率類干燥成熟的種仁，率仁主要含有棗仁皂苷類、三萜類、脂肪油、蛋白質(zhì)、留醇類、磷脂類等化合物?，F(xiàn)代藥理研究表明:棗仁有補心、鎮(zhèn)靜、安神、斂汗、補肝、生津等功效，用于虛煩不眠，驚淨多夢，體虛多汗，津傷口渴等癥，是較為常用的鎮(zhèn)靜安眠藥類。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，將其列為上品，《本草綱目》列為本部類。醫(yī)籍初見于《傷寒雜病論》，并以棗仁湯而著名，已有1700多年的藥用歷史。近代載于歷版《中華人民共和國藥典》。揮發(fā)油是棗仁主要活性成分之一，近年來，棗仁油經(jīng)研究表明具有和棗仁皂莢類成分相同的鎮(zhèn)靜催眠作用，已經(jīng)逐漸為棗仁的一個重要研究內(nèi)容。
[0003]目前棗仁揮發(fā)油的提取及純化方法大致為以下幾種方法:水蒸氣蒸餾法、有機溶劑提取法和超臨界流體萃取法。前兩種方法都存在收率低、工藝繁瑣、操作條件不穩(wěn)定等問題，而超臨界CO2流體萃取法是目前新興的提取分離技術，尤其適合提取熱敏性物質(zhì)，并且既無重金屬污染、無溶劑殘留，而且方便運輸，提取條件穩(wěn)定等優(yōu)點，且在提取過程中加入適量的夾帶劑，可以有效提高目標產(chǎn)物的收率，但是仍舊存在提取出油率較低的問題。
[0004]目前新疆棗樹栽培面積已達700萬畝，豐富的紅棗資源為棗仁的開發(fā)研究提供了得天獨厚的有利條件，紅棗加工業(yè)已成為新疆林果種植業(yè)規(guī)模化與農(nóng)民增收的重要環(huán)節(jié)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于針對棗仁提取出油率低和原料無法有效利用的問題，提出一種采用超臨界CO2流體萃取法提取及純化棗仁中揮發(fā)油的方法。
[0006]—種棗仁揮發(fā)油的提取及純化方法，包括如下步驟:
[0007](I)棗仁原料的預處理:將棗仁烘干，粉碎過篩，備用；
[0008](2)裝料:將預處理的棗仁原料加入超臨界CO2流體萃取裝置的萃取釜中；
[0009](3)設定萃取釜、分離釜I和分離釜Π的溫度、壓力；
[0010](4)靜態(tài)萃取:通入一定量的CO2使得萃取釜內(nèi)升至預定壓力，先以溶劑A為夾帶劑進行靜態(tài)萃?。?br>[0011 ] (5)動態(tài)一次萃取:調(diào)控(》2的流速，再以溶劑A為夾帶劑進行動態(tài)一次萃取；
[0012](6)動態(tài)二次萃取:調(diào)控⑶2的流速，最后加入溶劑B作為夾帶劑進行動態(tài)二次萃??；
[0013](7)將分離釜I和分離釜Π得到棗仁揮發(fā)油合并；
[0014](8)柱層析分離純化步驟(7)中得到的棗仁揮發(fā)油，除去流動相得到棗仁揮發(fā)油純品O
[0015]上述棗仁揮發(fā)油的提取及純化方法，在步驟(I)中:棗仁烘干溫度為45-65°C，烘干時間為15-25h，粉碎過篩后的粉末粒度為50-70目。
[0016]上述棗仁揮發(fā)油的提取及純化方法，步驟(3)中:萃取釜的萃取壓力為20_35MPa，萃取溫度為35-50°C，靜態(tài)萃取時間為0.5-lh，動態(tài)一次萃取時間為l-2h，動態(tài)二次萃取時間為2-3h;分離釜I的分離壓力為8.0-9.0MPa，分離溫度為30-40°C，分離時間為l_3h;分離釜Π的分離壓力為4.9-5.8MPa，分離溫度為30-40 °C，分離時間為0.5_2h。
[0017]上述棗仁揮發(fā)油的提取及純化方法，步驟(4)和(5)中:溶劑A為正己烷、乙酸乙酯和三氯甲烷的一種。
[0018]上述棗仁揮發(fā)油的提取及純化方法，步驟(6)中:溶劑B為正丁醇、叔丁基甲基醚或者正丁醇和叔丁基甲基醚的混合物。
[0019]上述棗仁揮發(fā)油的提取及純化方法，步驟(5)和(6)中:C02的流量均為1.0-1.5L/min0
[0020]上述棗仁揮發(fā)油的提取及純化方法，溶劑A的用量為棗仁原料質(zhì)量的20_30wt%，溶劑B的用量為棗仁原料質(zhì)量的50-100wt%。
[0021]上述棗仁揮發(fā)油的提取及純化方法，在步驟(8)中:a)色譜柱:ACQUITY UPLC BEHC18柱，2.1mmX 50mm, 1.7ym;b)流動相由A相和B相組成:A相為:甲醇，B相為:Immo 1/L甲酸錢水溶液;c)梯度洗脫條件:初始時A相與B相體積比為10:1，I分鐘時A相與B相體積比為8:3，3分鐘時A相與B相體積比為7:4，6分鐘時A相與B相體積比為6:5，9分鐘時A相與B相體積比為5:6，12分鐘時A相與B相體積比為4: 7，15分鐘時A相與B相體積比為3:8，18分鐘時A相與B相體積比為1:10，開始收集時間:lmin，結束收集時間:18min;d)柱溫:35°C ;e)流速:0.6mL/分鐘。
[0022]上述棗仁揮發(fā)油的提取及純化方法，在步驟(I)中還包括將粉碎過篩后的棗仁原料依次進行堿浸泡、酸浸泡和緩沖溶液浸泡以及晾干步驟;堿浸泡使用的堿溶液是質(zhì)量濃度為5-12wt%的碳酸鈉溶液，每10g棗仁粉末的堿溶液用量為300-400mL，堿浸泡時間為5-1 Oh，堿浸泡之后過濾;酸浸泡使用的酸溶液是質(zhì)量濃度為10-15wt %的鹽酸，每10g棗仁粉末的堿溶液用量為200-300mL，酸浸泡時間為0.5_2h，酸浸泡之后過濾;緩沖溶液浸泡使用的緩沖溶液是pH=7.2的磷酸緩沖溶液，緩沖溶液浸泡時間為5-10h。
[0023]本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明以新疆大宗林果紅棗副產(chǎn)物棗仁為原料，利用超臨界C02萃取法提取棗仁中的揮發(fā)油，通過采用靜態(tài)萃取和動態(tài)二次萃取相結合的萃取方式，大大提高了棗仁揮發(fā)油的提取效率，同時通過選擇合適的萃取劑以及柱層析純化技術大大提高了揮發(fā)油中抗氧化合物的含量，增大了棗仁揮發(fā)油的藥用價值和實用價值，提高了棗仁的利用率，增加了其經(jīng)濟效益。
【具體實施方式】
[0024]實施例1:
[0025]—種棗仁揮發(fā)油的提取及純化方法，包括如下步驟:
[0026](I)棗仁原料的預處理:在溫度為45 °C將棗仁烘干15h，粉碎過篩，粉末粒度為50-70目，備用；
[0027](2)裝料:將預處理的棗仁原料和溶劑A—起加入超臨界CO2流體萃取裝置的萃取釜中；本實施例中溶劑A為正己烷;溶劑A的用量為棗仁原料質(zhì)量的20wt% ；
[0028](3)設定萃取釜、分離釜I和分離釜Π的溫度、壓力；
[0029]萃取釜的萃取壓力為20MPa，萃取溫度為35 V ；分離釜I的分離壓力為8.0MPa，分離溫度為30°C ;分離釜Π的分離壓力為4.9MPa，分離溫度為30°C ;
[0030](4)靜態(tài)萃取:通入一定量的CO2使得萃取釜內(nèi)升至步驟(3)中的設定壓力，先以溶劑A為夾帶劑進行靜態(tài)萃取，靜態(tài)萃取時間為0.5h;
[0031](5)動態(tài)一次萃取:調(diào)控⑶2的流量為1.0L/min，再以溶劑A為夾帶劑進行動態(tài)一次萃取，動態(tài)一次萃取時間為Ih;
[0032](6)動態(tài)二次萃取:調(diào)控⑶2的流量為1.0L/min，最后用夾帶劑栗向萃取釜中加入溶劑B作為夾帶劑進行動態(tài)二次萃取，動態(tài)二次萃取時間為2h;溶劑B為正丁醇，溶劑B的用量為棗仁原料質(zhì)量的50wt% ;
[0033](7)在分離釜I中分離時間為Ih，在分離釜Π中分離時間為0.5h，將分離釜I和分離釜Π得到棗仁揮發(fā)油合并；
[0034](8)柱層析分離純化步驟(7)中得到的棗仁揮發(fā)油，a)色譜柱:ACQUITY UPLC BEHC18柱，2.1mmX 50mm, 1.7ym;b)流動相由A相和B相組成:A相為:甲醇，B相為:Immo 1/L甲酸錢水溶液;c)梯度洗脫條件:初始時A相與B相體積比為10:1，I分鐘時A相與B相體積比為8:3，3分鐘時A相與B相體積比為7:4，6分鐘時A相與B相體積比為6:5，9分鐘時A相與B相體積比為5:6，12分鐘時A相與B相體積比為4: 7，15分鐘時A相與B相體積比為3:8，18分鐘時A相與B相體積比為1:10，開始收集時間:lmin，結束收集時間:18min;d)柱溫:35°C ;e)流速:0.6mL/分鐘;除去流動相得到棗仁揮發(fā)油純品。<