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      一種葛根素的分離純化方法

      文檔序號(hào):4927169閱讀:1550來(lái)源:國(guó)知局
      一種葛根素的分離純化方法
      【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種葛根素的分離純化方法。本發(fā)明提供了一種葛根素的分離純化方法,其包括以下步驟:以乙酸乙酯、正丁醇和水組成的三元溶劑體系為分離溶劑體系,采用高速離心分配色譜法對(duì)葛根素提取物進(jìn)行分離純化得到葛根素即可;所述的高速離心分配色譜法在高速離心分配色譜儀中進(jìn)行。本發(fā)明的葛根素的分離純化方法步驟簡(jiǎn)單、分離時(shí)間短、分離能力強(qiáng)、分離到的葛根素純度高(HPLC純度大于99%)、回收率高(大于65%),具有良好的市場(chǎng)開(kāi)發(fā)前景。
      【專利說(shuō)明】一種葛根素的分離純化方法
      【技術(shù)領(lǐng)域】
      [0001]本發(fā)明涉及一種葛根素的分離純化方法。
      【背景技術(shù)】
      [0002]葛根為豆科植物葛Pueraria lobata (Wi I Id.) Ohwi的干燥根,習(xí)稱野葛,系常用中藥,具有解肌退熱,生津止渴,透疹,升陽(yáng)止瀉,通經(jīng)活絡(luò),解酒毒之功效。葛根含有多種有效成分,異黃酮類化合物是葛屬植物的主要成分之一,其中葛根素(Puerarin)是本屬植物的主要有效成分。葛根素的藥理作用十分廣泛,具有降血脂,抗炎,抗心律失常、對(duì)心肌缺血的保護(hù)作用、腎保護(hù)、抗氧化、抗缺血再灌注損傷、抗肝缺血再灌注損傷、抗酒精中樞抑制、調(diào)控骨代謝、降血糖、利尿等作用。
      [0003]隨著葛根素的藥理作用的研究深入,葛根素的分離純化也越來(lái)越受到人們的重視。目前葛根素純化方法主要有:大孔吸附樹(shù)脂法、柱層析、酸水解有機(jī)溶劑萃取法及金屬離子絡(luò)合法等。如專利CN1154849A采用正丁醇萃取后經(jīng)三氧化二鋁柱脫色得到純度97%以上的葛根素產(chǎn)品;專利CN1927876A經(jīng)過(guò)離子交換大孔樹(shù)脂層析再經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂層析可以獲得葛根素含量很高的葛根素提取物;專利CN1398872A通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂及硅膠柱層
      析可得到高純度葛根素。葛根素的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下式所示:
      [0004]
      【權(quán)利要求】
      1.一種葛根素的分離純化方法,其特征在于包括以下步驟:以乙酸乙酯、正丁醇和水組成的三元溶劑體系為分離溶劑體系,采用高速離心分配色譜法對(duì)葛根素提取物進(jìn)行分離純化得到葛根素即可;所述的高速離心分配色譜法在高速離心分配色譜儀中進(jìn)行。
      2.如權(quán)利要求1所述的葛根素的分離純化方法,其特征在于:所述的高速離心分配色譜儀為廠家為法國(guó)Rousselet Robatel,型號(hào)為FCPC A或FCPC C的高速離心分配色譜儀。
      3.如權(quán)利要求1所述的葛根素的分離純化方法,其特征在于:所述的高速離心分配色譜儀的轉(zhuǎn)速為1800r/min~2300r/min。
      4.如權(quán)利要求1所述的葛根素的分離純化方法,其特征在于:所述的三元溶劑體系中乙酸乙酯、正丁醇和水的體積比為(3~8):2:(6~10),優(yōu)選2:1:3。
      5.如權(quán)利要求1所述的葛根素的分離純化方法,其特征在于:所述的高速離心分配色譜法采用的三元溶劑體系充分混合后分層,取下層溶液為固定相,上層溶液為流動(dòng)相。
      6.如權(quán)利要求5所述的葛根素的分離純化方法,其特征在于:所述的固定相和流動(dòng)相過(guò)濾后超聲備用,所述的超聲的頻率為16KHz~28KHz。
      7.如權(quán)利要求5所述的葛根素的分離純化方法,其特征在于:所述的高速離心分配色譜法,將葛根素提取物溶解于所述的固定相和流動(dòng)相形成的混合溶液中,過(guò)濾后上樣;所述的固定相和流動(dòng)相形成的混合溶液中所述的流動(dòng)相與所述的固定相的體積比優(yōu)選1:1~1:5。
      8.如權(quán)利要求1所述的葛根素的分離純化方法,其特征在于:所述的葛根素提取物為采用普通超聲提取法、循環(huán)超聲提取法或者回流提取法得到的葛根素提取物;所述的葛根素提取物的純度為11%~18%,所述的純度是指葛根素的質(zhì)量占葛根素提取物總質(zhì)量的百分比。
      9.如權(quán)利要求1所述的葛根素的分離純化方法,其特征在于:所述的高速離心分配色譜儀的流速為 2.0mT,/min ~7.0mL/min,優(yōu)選 2.0mT,/min ~3.0mT,/min。
      10.如權(quán)利要求1所述的葛根素的分離純化方法,其特征在于:所述的高速離心分配色譜儀的上樣濃度為10mg/mL~30mg/mL ;所述的上樣濃度是指葛根素提取物的質(zhì)量與流動(dòng)相的體積的比例。
      11.如權(quán)利要求1所述的葛根素的分離純化方法,其特征在于:所述的 葛根素分離純化方法,包括以下步驟: 步驟1:將三元溶劑體系充分混合后分層,取下層溶液為固定相、上層溶液為流動(dòng)相;將葛根素提取物溶解于固定相與流動(dòng)相的混合溶液中,形成葛根素提取物的溶液; 步驟2:高速離心分配色譜儀在descending模式下充滿固定相;轉(zhuǎn)換成ascending模式,后再將流動(dòng)相泵入色譜柱;待體系平衡完畢后,由進(jìn)樣閥注入步驟I中制得的葛根素提取物的溶液,然后根據(jù)檢測(cè)器圖譜接收目標(biāo)組分即可。
      12.如權(quán)利要求11所述的葛根素的分離純化方法,其特征在于:步驟2中,所述的在高速離心分配色譜儀在descending模式下充滿固定相,在高流速和低轉(zhuǎn)速下進(jìn)行,所述的高流速是指流速在5mL/min~10mL/min ;所述的低轉(zhuǎn)速是指轉(zhuǎn)速在600r/min~800r/min ; 步驟2中,所述的轉(zhuǎn)換成ascending模式,后再將流動(dòng)相泵入色譜柱中,轉(zhuǎn)換成ascending 模式后提高轉(zhuǎn)速至 1800r/min ~2300r/min。
      【文檔編號(hào)】B01D15/10GK103709152SQ201310729209
      【公開(kāi)日】2014年4月9日 申請(qǐng)日期:2013年12月25日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月25日
      【發(fā)明者】楊義芳, 孫百玲, 謝欣辛 申請(qǐng)人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院, 中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)研究總院
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