專利名稱：一種藥物組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種治療慢性盆腔炎和細菌性陰道炎的中藥組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法，屬中藥領域。
背景技術：
婦科多種炎癥是臨床上的常見病，易反復發(fā)作，纏綿難愈。化藥治療沒有較為理想的方法，且長期用藥又可能導致菌群失調(diào)與其它并發(fā)癥。現(xiàn)有中藥也沒有一種能夠有效解決這一婦科問題，市場存在巨大開發(fā)的空間。發(fā)明人需要開發(fā)出一種軟膠囊或濃縮丸的劑型，細化工藝參數(shù)，保證工藝的穩(wěn)定，降低藥物的生產(chǎn)成本，并體現(xiàn)傳統(tǒng)中藥的特色，建立完善的質(zhì)量標準，有效控制藥品質(zhì)量，便有利于藥品面向更廣大的需求人群。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的旨在克服現(xiàn)有藥物的不足，提供一種有效治療婦科炎癥的中藥組合物及其工藝制備方法；本發(fā)明目的還在于提供一種中藥組合物的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明目的是通過如下技術方案實現(xiàn)的處方組成赤芍10～15重量份、土茯苓18～22重量份、三棱10～15重量份、川楝子10～15重量份、莪術10～15重量份、延胡索10～15重量份、芡實18～22重量份、當歸18～22重量份、苦參10～15重量份、香附6～10重量份、黃柏10～15重量份、丹參18～22重量份、山藥22～27重量份。
優(yōu)選后的比例為赤芍12重量份、土茯苓20重量份、三棱12重量份、川楝子12重量份、莪術12重量份、延胡索12重量份、芡實20重量份、當歸20重量份、苦參12重量份、香附8重量份、黃柏12重量份、丹參20重量份、山藥24重量份。
需要注意的是，本方中所用三棱、莪術、延胡索、香附也可以經(jīng)過中國藥典中的醋炙處理，并且使用醋炙炮制方法后會有更佳的效果，因而三棱、莪術、延胡索、香附和醋炙后的三棱、莪術、延胡索、香附都在本發(fā)明保護范圍之內(nèi)。
為了方便臨床使用，發(fā)明人針對該原料藥做了進一步研究，制定其提取制備工藝，將其制成臨床或藥學所需的各種劑型，如顆粒劑、片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、丸劑等。
首先為水提取工藝將處方的13味藥除莪術外，其余赤芍等十二味，加水煎煮三次，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量為40～60％，靜置分層后，取上清液備用；另取莪術，用45～55％的乙醇加熱回流提取三次，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，回收乙醇后，繼續(xù)濃縮成清膏，干燥，制成干浸膏粉。
確切的工藝路線為除莪術外，其余赤芍等十二味，加水煎煮三次，每次1～2小時，其中第一次加8倍量水，第二、三次各加6倍量水，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量達50％，靜置24小時，取上清液，備用；另取莪術，分別用5倍量50％的乙醇回流提取三次，每次1～2小時，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，減壓回收乙醇，并繼續(xù)減壓濃縮至相對密度1.13～1.15的浸膏，噴霧干燥，得干浸膏粉。
應用以上提取精制工藝得到的細粉，配以相應的輔料，就可以制成臨床所需的劑型，發(fā)明人重點研究了軟膠囊劑(1)基質(zhì)的組成 軟膠囊的基質(zhì)可以是植物油或聚乙二醇400兩類，根據(jù)本品的藥物性質(zhì)，并經(jīng)過預試驗，確定本品以植物油作為最佳選擇基質(zhì)，并對基質(zhì)的組成作進一步優(yōu)選。在植物油中加入適量蜂蠟可以增加成品的穩(wěn)定性， 發(fā)明人通過在基質(zhì)中加入不同量的蜂蠟，配置成藥液，對基質(zhì)的組成進行試驗比較。方法為取浸膏粉，各取四份，其中一份只加入適量的大豆油；另三份分別加入大豆油量的2％、4％、6％蜂蠟，充分混合攪拌后，在試管中比較藥粉沉降速度，觀察混合液的沉降情況，結果見表1。
表1不同基質(zhì)沉降情況試驗結果

由上述試驗結果可知，蜂蠟加入量為大豆油的2％時還不足以改觀藥液穩(wěn)定性，加入4％和6％均能保持良好的穩(wěn)定不分層，但加入大豆油6％的蜂蠟后藥液呈軟膏樣臘狀，流動性不能滿足壓制軟膠囊的要求，故選擇在基質(zhì)的大豆油中加入4％的蜂蠟做穩(wěn)定劑。
(2)基質(zhì)比例的選擇 基質(zhì)的比例對軟膠囊的影響較大比例過大，藥物的含量降低，裝量增加；比例過低，藥液的流動性不好，裝量差異大。試驗設計篩選了不同比例的基質(zhì)，從而確定最佳比例，方法為取三份浸膏粉，分別加入不同量的基質(zhì)，充分混合后，觀察其狀態(tài)，結果見表2。
表2基質(zhì)比例的選擇試驗結果

由上述試驗結果可知，當基質(zhì)和浸膏粉的比例為1.5∶1時，藥液的流動性可以滿足軟膠囊壓制法的要求，又可使成品的含藥量適宜，大小適宜，服用方便。故確定基質(zhì)和藥粉的比例為1.5∶1。
(3)囊皮成分及比例的選擇軟膠囊的囊皮主要由甘油、明膠、水以一定比例混合制成。本品經(jīng)過試驗，以0.4∶1∶0.9比例的甘油∶明膠∶水制備的囊皮效果較好，可塑性高，彈性好；試裝后發(fā)現(xiàn)囊皮容易氧化變硬變脆，延長崩解時間，穩(wěn)定性不好，后經(jīng)過試驗在囊液中加入1％量的焦亞硫酸鈉，則不會出現(xiàn)失水變硬現(xiàn)象，另加入著色劑氧化鐵棕0.3％，故本品確定囊皮處方為0.4∶1∶0.9比例的甘油∶明膠∶水，并加入1％的焦亞硫酸鈉、0.3％的氧化鐵棕。
最終，發(fā)明人得到軟本發(fā)明藥物組合物軟膠囊制劑的制備方法將提取精制得到的干浸膏粉，加入1.5～2倍的大豆油基質(zhì)中，邊加邊攪拌，混勻后再以膠體磨研磨至混懸均勻，壓制成軟膠囊劑。其中的大豆油基質(zhì)的制備過程為取大豆油加熱至60～70℃保溫，取4％大豆油量的蜂蠟切成小片，加入植物油中，攪拌使溶解，制得軟膠囊基質(zhì)。
當然，本發(fā)明藥物組合物也能制成其他固體劑型，如將干浸膏粉加入適量的羧甲基淀粉鈉，混勻后壓制成片劑；拌入少量微晶纖維素鈉，混勻后填成膠囊劑；或與等量糊精混均后，壓成顆粒劑。
為了有效控制本發(fā)明產(chǎn)品的質(zhì)量，發(fā)明人還制定了其質(zhì)量控制方法，包括含量測定部分和定性鑒別部分。
含量測定方法如下色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；14∶86比例的乙腈-0.1％磷酸為流動相；流速1.0ml/min，柱溫28℃，檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷峰計算，應不低于2500。
對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，加流動相溶解制成每1ml含40μg的溶液，混勻，即得。
供試品溶液的制備取裝量差異項下的本品內(nèi)容物，研勻，稱取1g，精密稱定，加硅藻土1g，混勻，置索氏提取器中，加石油醚適量，加熱回流1小時，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，連同濾紙剪碎，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，以微孔濾膜濾過，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
定性鑒別方法可以包含以下中的一種或者幾種(1)取本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置燒瓶中，加水，連接揮發(fā)油器，加水至溢入燒瓶中，加入醋酸乙酯，提取揮發(fā)油1小時，分取醋酸乙酯層，自然濃縮至約2ml，作為供試品溶液。另取莪術醇對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5ml，分別點于同一硅膠G薄層板上，以93∶7比例的甲苯-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(2)取本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置錐形瓶中，加石油醚，水浴回流30分鐘，濾過，殘渣加甲醇超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加水20ml使溶解，以氨水調(diào)pH9～10，以乙醚提取三次，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ml，分別點于同一硅膠G薄層板上，以12∶6∶3∶3∶1比例的甲苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液為展開劑，在濃氨水飽和下展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(3)取苦參堿對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，分別吸取鑒別(2)中的供試品溶液及苦參堿對照品溶液各5ml，分別點于同一硅膠G薄層板上，以2∶3∶4∶0.5比例的甲苯-丙酮-醋酸乙酯-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置錐形瓶中，加石油醚，水浴回流30分鐘，濾過，殘渣加甲醇，超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加水使溶解，以氯仿提取兩次，棄去氯仿液；水液以乙醚提取三次，合并乙醚液，水液備用，乙醚液水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ml，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶1∶1比例的氯仿-丙酮-甲酸的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2，4-二硝基苯肼試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(5)取鑒別(4)中的剩余水液，以水飽和正丁醇提取三次，合并正丁醇液，以正丁醇飽和的水洗滌一次，水液棄去，正丁醇液水液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5ml，分別點于同一硅膠G薄層板上，以4∶1∶0.1比例的氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(6)本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置錐形瓶中，加甲醇，超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加1％氫氧化鈉溶液40ml使溶解，并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，以石油醚提取兩次，棄去石油醚液，堿水液以鹽酸調(diào)pH2～3，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取阿魏酸對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ml，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶2∶0.2比例的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
經(jīng)發(fā)明人證明，以上質(zhì)量控制方法可以應用于本發(fā)明技術方案能夠制成的各種劑型。
本發(fā)明藥物組合物用于治療多種婦科炎癥，具有明顯的療效。下面以藥效學進一步說明本發(fā)明的有益效果1材料和方法1.1材料1.1.1受試藥品“婦炎康片”為是按本發(fā)明最優(yōu)配比和工藝制備而得的，1g相當于原生藥7.14g。
1.1.2實驗動物本實驗動物為ICR小鼠，SD大鼠均由云南省天然藥物藥理重點實驗室提供(云衛(wèi)動管第A12號)。
1.1.3實驗菌株金黃色葡萄球菌，乙型溶血性鏈球菌，綠膿假單胞菌，痢疾桿菌，傷寒桿菌均由北京生物制品檢定所提供。
1.1.4培養(yǎng)基球脂培養(yǎng)基和肉湯培養(yǎng)基由衛(wèi)生部上海生物制品所提供。
1.2實驗方法1.2.1醋酸所致小鼠扭體反應實驗小鼠50只，隨機分成5組，組別、劑量如下N.S、嗎啡(HCL)10mg/kg A.C；阿司匹林100mg/kg i.g；婦炎康900，1800mg/kg i.g.。給藥60min后i.P.0.6％醋酸0.1mL/10g體重，5min后記錄各組動物10min內(nèi)扭體次數(shù)。
1.2.2甲醛致小鼠傷害反應實驗各藥(阿司匹林、婦炎康、N.S.)劑量同前，均按0.3mL/10g/d×3 i.g.，末次給藥后60min按文獻方法于小鼠右后足趾注射25μL0.5％甲醛，立即單只放于透明容器內(nèi)觀察，以秒表記錄前10min舔咬右后足時間和后20in舔咬右后足或抓咬陰部等的時間。
1.2.3醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性實驗收報告 各藥(阿司匹林、婦炎康、N.S.)劑量及給藥同前，末次給藥后60min，每只小鼠尾靜脈注射0.5％伊文思藍生理鹽水，隨即i.P.0.6％醋酸0.2mL，輕揉翻轉(zhuǎn)幾次后抽取腹腔液，離心，上清液于590nm測定光密度(O，D)值。
1.2.4角叉萊膠所致大鼠足腫脹實臉SD大鼠(體重180-220g)，雌雄各半，隨機分為5組，生理鹽水組給予等體積0.2mL/kg體重，阿司匹林組100mg/kg，婦炎康900，1800mg/kgB.i.g，連續(xù)3d，末次給藥后60min于每只大鼠右側(cè)足趾S.C.1％角叉菜膠0.1mL，左側(cè)注射N.S.0.1mL，采用毛細血管放大法(容器內(nèi)盛水銀)測量足體積變化，于致炎后1，2，3，4，5，6h測量兩足腫脹的差值。
1.2.5體外抑菌學試驗采用紙片法做定性實驗，即將上述細菌密集劃線接種于營養(yǎng)瓊脂平板上(其中乙型溶血性鏈球菌用血平板)，然后用紙片(直徑6mm，高壓滅菌)浸透藥物貼于平板上。同時用青霉素紙片，慶大霉素紙片對照。置37℃，18h后觀察結果。
2結果和討論2.1實驗結果(1)反應實驗結果由表3～表6列出表3對醋酸所致小鼠扭體反應實驗

表4對甲醛所致小鼠傷害反應實驗

*P＜0.05，**P＜0.01表5對醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性實驗

表6對角叉菜膠所致大鼠足腫脹實驗

*P＜0.05，**P＜0.01(2)體外抑菌實驗結果顯示實驗菌株生長情況標準，青霉素紙片抑制球菌圈達24mm以上，慶大霉素紙片抑制桿菌圈均在18mm以上，婦炎康濃度須在25％以上對兩種球菌和大腸桿菌、痢疾桿菌有輕度抑制(抑菌圈＜10mm)。
本實驗證明，婦炎康在臨床劑量的12倍和24倍(900，1000mg/kg.i.g.)對醋酸所致小鼠扭體實驗，甲醛所致小鼠腹腔毛細血管通透性增加，分別顯示止痛、減敏和降低炎性毛細血管通透性；顯著拮抗角叉菜膠所致大鼠關節(jié)腫脹，均呈量效關系方式；體外抑菌實驗顯示本品高濃度對常見球菌和桿菌有弱的抑制作用。
具體實施例方式實施例1處方赤芍10kg土茯苓18kg 三棱10kg 川楝子1kg莪術10kg 延胡索10kg 芡實18kg 當歸18kg、苦參10kg 香附6kg 黃柏10kg 丹參18kg山藥22kg制法除莪術外，其余赤芍等十二味，加8倍量水煎煮三次，每次1.5小時，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量達40％，靜置24小時，取上清液，備用；另取莪術，分別用5倍量50％的乙醇回流提取三次，每次1小時，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，減壓回收乙醇，并繼續(xù)減壓濃縮至相對密度1.13～1.15的浸膏，噴霧干燥，得干浸膏粉。將浸膏粉加入一倍的糊精和適量白糖，混勻后以90％乙醇制粒，壓制成顆粒劑。
實施例2處方赤芍15kg 土茯苓22kg 三棱15kg川楝子15kg莪術15kg 延胡索15kg 芡實22kg當歸22kg
苦參15kg 香附10kg黃柏15kg 丹參22kg 山藥27kg制法除莪術外，其余赤芍等十二味，加6水煎煮三次，每次2小時，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量達60％，靜置24小時，取上清液，備用；另取莪術，分別用5倍量55％的乙醇回流提取三次，每次1.5小時，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，減壓回收乙醇，并繼續(xù)減壓濃縮至相對密度1.13～1.15的浸膏，噴霧干燥，得干浸膏粉。加入5％的淀粉和0.5％的羧甲基淀粉鈉，混勻制粒，壓制成片。
實施例3處方赤芍 100g 土茯苓 200g三棱(醋炙) 100g川楝子(炒) 100g 莪術(醋炙) 100g延胡索(醋炙)100g芡實(炒)200g 當歸 200g苦參100g香附(醋炙) 100g 黃柏 100g丹參200g山藥240g制法以上十三味，除莪術外，其余赤芍等十二味，加水煎煮三次，第一次2小時，第二、三次各1小時，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量達50％，靜置24小時，取上清液，備用；另取莪術，分別用50％的乙醇回流提取三次，第一次2小時，第二、三次各1小時，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，減壓回收乙醇(70±5℃，-0.08MPa)，并繼續(xù)減壓濃縮至相對密度1.13～1.15(70℃)的浸膏，噴霧干燥(進風溫度170～180℃，出風溫度90～100℃)，得干浸膏粉。加1％淀粉制粒，干燥，再加入0.4％微晶纖維素，混勻后填充膠囊劑。
實施例4處方赤芍12kg土茯苓 20kg三棱(醋炙) 12kg川楝子(炒)12kg莪術(醋炙) 12kg延胡索(醋炙) 12kg芡實(炒) 20kg當歸 20kg苦參 12kg香附(醋炙)8kg 黃柏 12kg丹參 20kg山藥 24kg制法以上十三味，除莪術外，其余赤芍等十二味，加水7倍量煎煮三次，第一次2小時，第二、三次各1小時，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量達50％，靜置24小時，取上清液，備用；另取莪術，分別用50％的乙醇回流提取三次，第一次2小時，第二、三次各1小時，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，減壓回收乙醇(70±5℃，-0.08MPa)，并繼續(xù)減壓濃縮至相對密度1.13～1.15(70℃)的浸膏，噴霧干燥(進風溫度170～180℃，出風溫度90～100℃)，得干浸膏粉。取大豆油加熱至60～70℃保溫，取4％的蜂蠟切成小片，加入植物油中，攪拌使溶解，制得軟膠囊基質(zhì)。取干浸膏粉加入基質(zhì)中，邊加邊攪拌，并補加基質(zhì)至總量60kg，混勻，以膠體磨研磨5分鐘，壓制成軟膠囊100000粒，洗油，干燥，即得。
鑒別(1)取本品內(nèi)容物5g，加硅藻土2g，混勻，置燒瓶中，加水30ml，連接揮發(fā)油器，加水至溢入燒瓶中，加入醋酸乙酯5ml，提取揮發(fā)油1小時，分取醋酸乙酯層，自然濃縮至約2ml，作為供試品溶液。另取莪術醇對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯(93∶7)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(2)取本品內(nèi)容物5g，加硅藻土2g，混勻，置錐形瓶中，加石油醚30ml，水浴回流30分鐘，濾過，殘渣加甲醇30ml超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加水20ml使溶解，以氨水調(diào)pH9～10，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液(12∶6∶3∶3∶1)為展開劑，在濃氨水飽和下展開，取出，晾干，置紫外燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。
(3)取苦參堿對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，分別吸取鑒別(2)中的供試品溶液及苦參堿對照品溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-丙酮-醋酸乙酯-濃氨試液(2∶3∶4∶0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(4)取本品內(nèi)容物8g，加硅藻土4g，混勻，置錐形瓶中，加石油醚30ml，水浴回流30分鐘，濾過，殘渣加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加水20ml使溶解，以氯仿提取兩次，每次20ml，棄去氯仿液；水液以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液(水液備用)，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮-甲酸(8∶1∶1)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2，4-二硝基苯肼試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(5)取鑒別(4)中的剩余水液，以水飽和正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，以正丁醇飽和的水40ml洗滌一次，水液棄去，正丁醇液水液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(4∶1∶0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
(6)取本品內(nèi)容物8g，加硅藻土4g，混勻，置錐形瓶中，加甲醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加1％氫氧化鈉溶液40ml使溶解，并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，以石油醚提取兩次，每次20ml，棄去石油醚液，堿水液以鹽酸調(diào)pH2～3，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取阿魏酸對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(8∶2∶0.2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-0.1％磷酸(14∶86)為流動相；流速1.0ml/min，柱溫28℃，檢測波長為230nm。理論板數(shù)按芍藥苷峰計算，應不低于2500。
對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，加流動相溶解制成每1ml含40μg的溶液，混勻，即得。
供試品溶液的制備 取裝量差異項下的本品內(nèi)容物，研勻，稱取1g，精密稱定，加硅藻土1g，混勻，置索氏提取器中，加石油醚適量，加熱回流1小時，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，連同濾紙剪碎，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(250W，50kHz)30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，以微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
權利要求
1.一種藥物組合物，其特征在于它是由如下重量份原料藥制成的赤芍10～15份、土茯苓18～22份、三棱10～15份、川楝子10～15份、莪術10～15份、延胡索10～15份、芡實18～22份、當歸18～22份、苦參10～15份、香附6～10份、黃柏10～15份、丹參18～22份、山藥22～27份。
2.根據(jù)權利要求1所述的藥物組合物，其特征在于各原料的最佳重量配比為赤芍12份、土茯苓20份、三棱12份、川楝子12份、莪術12份、延胡索12份、芡實20份、當歸20份、苦參12份、香附8份、黃柏12份、丹參20份、山藥24份。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于原料中的三棱、莪術、延胡索、香附藥材為醋炙炮制處理。
4.根據(jù)權利要求1、2或3所述的藥物組合物，其特征在于該組合物可制成臨床上或藥學上可接受的劑型，包含顆粒劑、片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、丸劑。
5.根據(jù)權利要求4所述藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法包含如下提取精制過程將處方的13味藥除莪術外，其余赤芍等十二味，加水煎煮三次，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量為40～60％，靜置分層后，取上清液備用；另取莪術，用45～55％的乙醇加熱回流提取三次，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，回收乙醇后，繼續(xù)濃縮成清膏，干燥，制成干浸膏粉。
6.根據(jù)權利要求5所述藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法包含如下提取精制過程除莪術外，其余赤芍等十二味，加水煎煮三次，每次1～2小時，其中第一次加8倍量水，第二、三次各加6倍量水，合并煎液，濾過，放冷后加乙醇使含醇量達50％，靜置24小時，取上清液，備用；另取莪術，分別用5倍量50％的乙醇回流提取三次，每次1～2小時，合并提取液，濾過，濾液與上述上清液合并，減壓回收乙醇，并繼續(xù)減壓濃縮至相對密度1.13～1.15的浸膏，噴霧干燥，得干浸膏粉。
7.根據(jù)權利要求6所述藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法還包括如下制劑過程將提取精制得到的干浸膏粉，加入大豆油基質(zhì)中，邊加邊攪拌，混勻后再以膠體磨研磨至混懸均勻，壓制成軟膠囊劑。
8.根據(jù)權利要求7所述藥物組合物的制備方法，其特征在于大豆油基質(zhì)的制備方法為取大豆油加熱至60～70℃保溫，取4％大豆油量的蜂蠟切成小片，加入植物油中，攪拌使溶解，制得軟膠囊基質(zhì)。
9.根據(jù)權利要求8所述藥物組合的制備方法，其特征在于其中的大豆油也可以用其他植物油或聚乙二醇400代替。
10.根據(jù)權利要求1、2或3所述藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中包括如下含量測定方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；14∶86的乙腈-0.1％磷酸為流動相；流速1.0ml/min，柱溫28℃，檢測波長為230nm；理論板數(shù)按芍藥苷峰計算，應不低于2500；對照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對照品適量，加流動相溶解制成每1ml含40μg的溶液，混勻，即得；供試品溶液的制備 取裝量差異項下的本品內(nèi)容物，研勻，稱取1g，精密稱定，加硅藻土1g，混勻，置索氏提取器中，加石油醚適量，加熱回流1小時，棄去石油醚液，藥渣揮去石油醚，連同濾紙剪碎，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，以微孔濾膜濾過，即得；測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
11.根據(jù)權利要求10所述藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于還含有如下鑒別方法中的一種或幾種A、取本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置燒瓶中，加水，連接揮發(fā)油器，加水至溢入燒瓶中，加入醋酸乙酯，提取揮發(fā)油1小時，分取醋酸乙酯層，自然濃縮至約2ml，作為供試品溶液；另取莪術醇對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5ml，分別點于同一硅膠G薄層板上，以93∶7比例的甲苯-醋酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；B、取本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置錐形瓶中，加石油醚，水浴回流30分鐘，濾過，殘渣加甲醇超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加水20ml使溶解，以氨水調(diào)pH9～10，以乙醚提取三次，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸小檗堿對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ml，分別點于同一硅膠G薄層板上，以12∶6∶3∶3∶1比例的甲苯-醋酸乙酯-甲醇-異丙醇-濃氨試液為展開劑，在濃氨水飽和下展開，取出，晾干，置365nm紫外燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；C、取苦參堿對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，分別吸取B項中的供試品溶液及苦參堿對照品溶液各5ml，分別點于同一硅膠G薄層板上，以2∶3∶4∶0.5比例的甲苯-丙酮-醋酸乙酯-濃氨試液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；D、本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置錐形瓶中，加石油醚，水浴回流30分鐘，濾過，殘渣加甲醇，超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加水使溶解，以氯仿提取兩次，棄去氯仿液；水液以乙醚提取三次，合并乙醚液，水液備用，乙醚液水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ml，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶1∶1比例的氯仿-丙酮-甲酸的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2，4-二硝基苯肼試液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；E、取D項中的剩余水液，以水飽和正丁醇提取三次，合并正丁醇液，以正丁醇飽和的水洗滌一次，水液棄去，正丁醇液水液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5ml，分別點于同一硅膠G薄層板上，以4∶1∶0.1比例的氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛10％硫酸乙醇溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；F、本發(fā)明產(chǎn)品，加硅藻土，混勻，置錐形瓶中，加甲醇，超聲處理30分鐘，濾過，濾液水浴蒸干，殘渣加1％氫氧化鈉溶液40ml使溶解，并轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，以石油醚提取兩次，棄去石油醚液，堿水液以鹽酸調(diào)pH2～3，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，水浴蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取阿魏酸對照品適量，加甲醇溶解制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ml，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶2∶0.2比例的甲苯-醋酸乙酯-甲酸為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鐵乙醇溶液；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。
12.根據(jù)權利要求1、2或3所述藥物組合物在制備用于治療慢性盆腔炎和細菌性陰道炎藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種藥物組合物，確切地說是一種中藥組合物，屬中藥領域。該藥物組合物是由一定重量比的赤芍、土茯苓、三棱、川楝子、莪術、延胡索、芡實、當歸、苦參、香附、黃柏、丹參、山藥等原料藥按特定工藝制備而得，對于多種婦科炎癥有著較好的治療作用。同時本發(fā)明還公開了該藥物組合物的制備方法和質(zhì)量控制方法。
文檔編號G01N33/15GK1868534SQ20051020029
公開日2006年11月29日 申請日期2005年5月24日 優(yōu)先權日2005年5月24日
發(fā)明者吳逸芳 申請人:吳逸芳