專利名稱:一種高靈敏度鹽酸克倫特羅檢測(cè)試紙條的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種檢測(cè)試紙條的制備方法,尤其是涉及一種高靈敏度鹽酸克倫特羅 檢測(cè)試紙條的制備方法。
背景技術(shù):
克倫特羅(Clenbuterol,CL),又名雙氯醇胺,是一種β 2受體激動(dòng)劑,可有效地提 高動(dòng)物的產(chǎn)肉性能和飼料報(bào)酬。但對(duì)人與動(dòng)物的肝、腎等內(nèi)臟器官有毒副作用,嚴(yán)重時(shí)會(huì)引 起死亡。農(nóng)業(yè)部明確規(guī)定,克倫特羅等一類β 2受體激動(dòng)劑被禁止作為飼料添加劑使用。酶 聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Enzyme-linked immunosorbant assay, ELISA)是目前定量檢測(cè)CL的常 用方法,適合試驗(yàn)室操作,不便于現(xiàn)場(chǎng)(如養(yǎng)殖場(chǎng)、飼料加工廠、屠宰場(chǎng)、豬肉的銷售市場(chǎng)) 的檢測(cè)。膠體金試紙條比較適合現(xiàn)場(chǎng)的定性檢測(cè)。目前市場(chǎng)上用的膠體金試紙條檢測(cè)靈敏 度較差,常常出現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)漏檢情況。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷而提供一種檢測(cè)靈敏度高、 使用簡(jiǎn)便的高靈敏度鹽酸克倫特羅檢測(cè)試紙條的制備方法。本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)一種高靈敏度鹽酸克倫特羅檢測(cè)試紙條的制備方法,其特征在于,該方法包括以 下步驟(1)用微量槍頭將膠體金-鹽酸克倫特羅單克隆抗體均勻涂布在玻璃纖維上,然 后在20-25 °C真空抽干;(2)將鹽酸克倫特羅抗原及羊抗鼠IgG抗體均勻噴涂在硝酸纖維膜上作為檢測(cè)線 及質(zhì)控線,硝酸纖維膜置于37°C干燥2- ;(3)將硝酸纖維膜切成寬度為5_6mm的條帶,置于干燥環(huán)境備用;(4)將玻璃纖維、金標(biāo)記鹽酸克倫特羅單抗玻璃纖維、已固化鹽酸克倫特羅抗原及 羊抗鼠IgG抗體的硝酸纖維膜及硬質(zhì)吸水濾紙自下而上排列并粘附于單面膠PVC板的一 側(cè),再將已經(jīng)裝配好PVC板縱向切成測(cè)試紙條即可。所述步驟(2)中的硝酸纖維膜大小為80mmX300mm。所述步驟O)中檢測(cè)線設(shè)在質(zhì)控線的下方。所述步驟(4)中的檢測(cè)試紙條大小為5mmX80mm。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明制備的檢測(cè)試紙條檢測(cè)靈敏度高,最小檢測(cè)量為lppb,并 且制備方法簡(jiǎn)便。
圖1為實(shí)施例1中的裝配示意圖;圖2為實(shí)施例1中檢測(cè)試紙條的示意圖。
圖中1為玻璃纖維、2為金標(biāo)記鹽酸克倫特羅單抗玻璃纖維、3為硝酸纖維膜、31為 檢測(cè)線、32為質(zhì)控線、4為硬質(zhì)吸水濾紙、5為單面膠PVC板。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。實(shí)施例1一種高靈敏度鹽酸克倫特羅檢測(cè)試紙條的制備方法,該方法包括以下步驟(1)用微量槍頭將膠體金-鹽酸克倫特羅單克隆抗體均勻涂布在大小為 80mmX 300mm的玻璃纖維2上,然后在20°C室溫下真空抽干,該玻璃纖維購(gòu)自上海金標(biāo)生物 科技有限公司,為SB06玻璃纖維;(2)將鹽酸克倫特羅抗原及羊抗鼠IgG抗體均勻噴涂在大小為SOmmX 300mm硝酸 纖維膜3上作為檢測(cè)線31及質(zhì)控線32,檢測(cè)線31設(shè)在質(zhì)控線32的下方,然后將硝酸纖維 膜3置于37°C干燥2h ;(3)用裁紙刀將硝酸纖維膜3切成寬度為5_6mm的條帶,置于干燥環(huán)境備用;(4)將玻璃纖維1、金標(biāo)記鹽酸克倫特羅單抗玻璃纖維2、已固化鹽酸克倫特羅 抗原及羊抗鼠IgG抗體的硝酸纖維膜3及硬質(zhì)吸水濾紙4自下而上排列,如圖1所示,然 后將其粘附于單面膠PVC板5的一側(cè),再用切條機(jī)將已經(jīng)裝配好PVC板縱向切成大小為 5mmX80mm檢測(cè)試紙條即可,如圖2所示。裝配好的檢測(cè)試紙條在檢測(cè)時(shí)質(zhì)控線32變紅,說(shuō)明試紙條質(zhì)量合格,如果檢測(cè)時(shí) 檢測(cè)線31變色,表明待檢樣品中鹽酸克倫特羅(CL),如果檢測(cè)時(shí)檢測(cè)線31不變色,表明待 檢樣品中含有CL。實(shí)施例2一種高靈敏度鹽酸克倫特羅檢測(cè)試紙條的制備方法,該方法包括以下步驟(1)用微量槍頭將膠體金-CL單克隆抗體均勻涂布在玻璃纖維上,然后在25°C室 溫下真空抽干;(2)將鹽酸克倫特羅抗原及羊抗鼠IgG抗體均勻噴涂在大小為SOmmX 300mm硝酸 纖維膜上作為檢測(cè)線及質(zhì)控線,檢測(cè)線設(shè)在質(zhì)控線的下方,然后將硝酸纖維膜置于37°C干 燥3h ;(3)將硝酸纖維膜切成5_6mm的條帶,置于干燥環(huán)境備用;(4)將玻璃纖維、金標(biāo)記鹽酸克倫特羅單抗玻璃纖維、已固化好的鹽酸克倫特羅抗 原及羊抗鼠IgG抗體的硝酸纖維膜及硬質(zhì)吸水濾紙自下而上排列,然后將其粘附于單面膠 PVC板的一側(cè),再將已經(jīng)裝配好PVC板縱向切成大小為5mmX80mm檢測(cè)試紙條即可。裝配好的檢測(cè)試紙條在檢測(cè)時(shí)質(zhì)控線變紅,說(shuō)明試紙條質(zhì)量合格,如果檢測(cè)時(shí)檢 測(cè)線變色,表明待檢樣品中鹽酸克倫特羅(CL),如果檢測(cè)時(shí)檢測(cè)線不變色,表明待檢樣品中 含有CL。
權(quán)利要求
1.一種高靈敏度鹽酸克倫特羅檢測(cè)試紙條的制備方法,其特征在于,該方法包括以下 步驟(1)用微量槍頭將膠體金-鹽酸克倫特羅單克隆抗體均勻涂布在玻璃纖維上,然后在 20-25 °C真空抽干;(2)將鹽酸克倫特羅抗原及羊抗鼠IgG抗體均勻噴涂在硝酸纖維膜上作為檢測(cè)線及質(zhì) 控線,硝酸纖維膜置于37°C干燥2- ;(3)將硝酸纖維膜切成寬度為5-6mm的條帶,置于干燥環(huán)境備用;(4)將玻璃纖維、金標(biāo)記鹽酸克倫特羅單抗玻璃纖維、已固化鹽酸克倫特羅抗原及羊抗 鼠IgG抗體的硝酸纖維膜及硬質(zhì)吸水濾紙自下而上排列并粘附于單面膠PVC板的一側(cè),再 將已經(jīng)裝配好PVC板縱向切成測(cè)試紙條即可。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高靈敏度鹽酸克倫特羅檢測(cè)試紙條的制備方法,其特征 在于,所述步驟O)中的硝酸纖維膜大小為80mmX300mm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高靈敏度鹽酸克倫特羅檢測(cè)試紙條的制備方法,其特征 在于,所述步驟O)中檢測(cè)線設(shè)在質(zhì)控線的下方。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種高靈敏度鹽酸克倫特羅檢測(cè)試紙條的制備方法,其特征 在于,所述步驟⑷中的檢測(cè)試紙條大小為5mmX80mm。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種高靈敏度鹽酸克倫特羅檢測(cè)試紙條的制備方法,將膠體金-鹽酸克倫特羅單克隆抗體均勻涂布在玻璃纖維上,將鹽酸克倫特羅抗原及羊抗鼠IgG抗體均勻噴涂在硝酸纖維膜上作為檢測(cè)線及質(zhì)控線,然后將玻璃纖維、金標(biāo)記鹽酸克倫特羅單抗玻璃纖維、硝酸纖維膜及硬質(zhì)吸水濾紙自下而上排列并粘附于單面膠PVC板側(cè)并縱向切成紙條即可。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明制備的檢測(cè)試紙條檢測(cè)靈敏度高,最小檢測(cè)量為1ppb,制備方法簡(jiǎn)便。
文檔編號(hào)G01N33/577GK102109524SQ20091020066
公開(kāi)日2011年6月29日 申請(qǐng)日期2009年12月24日 優(yōu)先權(quán)日2009年12月24日
發(fā)明者盧永紅, 呂玉華, 夏東, 孫國(guó)榮, 杭怡瓊, 涂尾龍, 薛惠琴 申請(qǐng)人:上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院