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      一種抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒及應(yīng)用的制作方法

      文檔序號:6090512閱讀:1913來源:國知局
      專利名稱:一種抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒及應(yīng)用的制作方法
      技術(shù)領(lǐng)域
      本發(fā)明涉及一種檢測用試劑盒,尤其涉及一種血清或血漿樣本中的抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒及應(yīng)用,屬于醫(yī)療檢測用試劑技術(shù)領(lǐng)域。
      背景技術(shù)
      在機(jī)體感染病原體時,首先產(chǎn)生的是抗原,同時也產(chǎn)生少量的抗體。早期感染時 可檢測到抗原,隨著感染周期的延長,機(jī)體對病原體的免疫應(yīng)答反應(yīng)增強(qiáng),抗體的量隨之增 力口,并與抗原相結(jié)合、形成抗原抗體復(fù)合物,致使抗原和抗體在血清或血漿中的濃度降低, 造成臨床上抗原或抗體檢測靈敏度大幅降低。因此,要提高待測樣本中的抗原或抗體檢測 靈敏度,是必要設(shè)法將結(jié)合的抗原抗體復(fù)合物進(jìn)行解離。然而,檢索結(jié)果發(fā)現(xiàn)與檢測相關(guān)的 血清或血漿樣本中的抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒未見報道。

      發(fā)明內(nèi)容
      針對現(xiàn)有技術(shù)的不足,本發(fā)明要解決的問題是提供一種血清或血漿樣本中的抗原 抗體復(fù)合物解離液試劑盒及應(yīng)用。本發(fā)明所述抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒由如下體積百分比濃度的試劑等量混 合制成0. 3% Triton-XlOO1.5%十二烷基硫酸鈉1.5% 3-[(3_膽烷酰胺丙基)_ 二甲銨]丙磺酸。上述抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒的制備方法是將試劑盒組分中的試劑按設(shè)計(jì) 濃度量各配成水溶液,然后按等體積量混合在一起,取混合液按5ml量分裝入試劑瓶中。本發(fā)明所述抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒在病原體抗原抗體復(fù)合物分離中的應(yīng)用。其中所述病原體抗原抗體復(fù)合物優(yōu)選是指丙肝病毒抗原抗體復(fù)合物、乙肝病毒 抗原抗體復(fù)合物、甲肝病毒抗原抗體復(fù)合物、艾滋病病毒抗原抗體復(fù)合物、甲型Hmi流感 病毒抗原抗體復(fù)合物或禽流感病毒抗原抗體復(fù)合物;最優(yōu)選是指丙肝病毒抗原抗體復(fù)合 物。傳統(tǒng)的方法在檢測病原體抗原或抗體時不能將抗原和抗體進(jìn)行分離,大大影響了 檢測試劑盒的靈敏度。本發(fā)明提供的抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒有效實(shí)現(xiàn)了待檢測血清 或血漿樣本中病原抗原抗體復(fù)合物的迅速解離,提高了抗原和抗體的絕對濃度值,大大提 高了待測樣本的檢測靈敏度。本發(fā)明的抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒通用于各種病原體抗原抗體復(fù)合物的分 離,能夠?qū)崿F(xiàn)對感染病原體后形成的抗原抗體進(jìn)行快速分離,利于免疫的方法檢測,大大的 提高了各種病原體的檢出率,減少漏診率。
      具體實(shí)施例方式實(shí)施例1本發(fā)明所述抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒的制備按體積百分比濃度量分別配制0.3% Triton-XlOO (曲拉通X-100)、1. 5%十二烷 基硫酸鈉(SDS)和1.5% 3-[(3_膽烷酰胺丙基)-二甲銨]丙磺酸(3-[(3-Ch0lamid0pr0 pyl)_dimethylammonio]propanesulfonic acid)的水溶液,然后按 1 1 1 體禾只量t昆合 在一起,取混合液按5ml量分裝入試劑瓶中,包裝制成試劑盒。實(shí)施例2本發(fā)明所述抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒在丙肝病毒抗原抗體復(fù)合物分離中的 應(yīng)用采用酶聯(lián)免疫方法檢測HCV核心抗原的試劑盒,能直接檢測血清或血漿中的游離 核心抗原,可縮短HCV病毒感染檢測的“窗口期”約40 50天,在核酸檢測技術(shù)查出HCV RNA之后1 2天,就可以檢測出HCV核心抗原的存在。然而在機(jī)體出現(xiàn)抗HCV抗體之后, 抗體與抗原相結(jié)合成復(fù)合物,測定游離HCV-cAg的酶聯(lián)免疫法的靈敏度明顯降低。若將抗 原與抗體相結(jié)合成復(fù)合物解離開后,檢測總HCV-cAg可大大提高檢測的靈敏度。上述丙肝病毒抗原抗體復(fù)合物具體解離方法是1)取待測血清標(biāo)本100 μ 1,加入本發(fā)明所述抗原抗體復(fù)合物解離液50 μ 1,混合 后56°C孵育30min,即對樣本進(jìn)行預(yù)處理,充分解離樣本中的抗原抗體復(fù)合物,使核心區(qū)抗 原充分暴露;2)按照各HCV核心抗原試劑盒生產(chǎn)企業(yè)提供的產(chǎn)品操作說明書對步驟1)預(yù)處理 后的樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測,以試劑盒規(guī)定的可見光波長臨界OD值判斷標(biāo)記的抗原或抗體檢 測結(jié)果。上述使用本發(fā)明所述抗原抗體復(fù)合物解離液對待測的血清或血漿樣本經(jīng)56°C,30 分鐘處理后,抗原/抗體復(fù)合物解離釋放出所有抗原/抗體,樣本再加入被包被的單抗的酶 標(biāo)板微孔中,如其中含有抗原,則會與酶標(biāo)板上包被的抗體形成抗原_抗體結(jié)合物,經(jīng)37°C 孵育后洗滌,再加入辣根過氧化物酶標(biāo)記二抗,形成雙抗原夾心復(fù)合物,最后加入酶底物顯 色,在合適波長下測定光密度OD值,即可根據(jù)本試劑制定的cutoff臨界值判斷抗原陽性結(jié)^ ο與實(shí)施例2方法類似的,待測樣本中的乙肝病毒抗原抗體復(fù)合物、甲肝病毒抗原 抗體復(fù)合物、艾滋病病毒抗原抗體復(fù)合物、甲型Hmi流感病毒抗原抗體復(fù)合物或禽流感病 毒抗原抗體復(fù)合物均可以使用本發(fā)明所述抗原抗體復(fù)合物解離液對其經(jīng)56°C,30分鐘處 理,使抗原/抗體復(fù)合物解離釋放出所有抗原/抗體,以提高待測樣本的檢測靈敏度。
      權(quán)利要求
      一種抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒,其特征在于所述試劑盒由如下體積百分比濃度的試劑等量混合制成0.3%Triton-X1001.5%十二烷基硫酸鈉1.5%3-[(3-膽烷酰胺丙基)-二甲銨]丙磺酸。
      2.權(quán)利要求1所述抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒在病原體抗原抗體復(fù)合物分離中的應(yīng)用。
      3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于所述病原體抗原抗體復(fù)合物為丙肝病毒抗 原抗體復(fù)合物、乙肝病毒抗原抗體復(fù)合物、甲肝病毒抗原抗體復(fù)合物、艾滋病病毒抗原抗體 復(fù)合物、甲型mm流感病毒抗原抗體復(fù)合物或禽流感病毒抗原抗體復(fù)合物。
      4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用,其特征在于所述病原體抗原抗體復(fù)合物為丙肝病毒抗 原抗體復(fù)合物。
      全文摘要
      本發(fā)明公開了一種抗原抗體復(fù)合物解離液試劑盒,由體積百分比濃度0.3%Triton-X100、1.5%十二烷基硫酸鈉和1.5%3-[(3-膽烷酰胺丙基)-二甲銨]丙磺酸的試劑等量混合制成。本發(fā)明還公開了所述試劑盒在病原體抗原抗體復(fù)合物分離中的應(yīng)用。本發(fā)明的試劑盒有效實(shí)現(xiàn)了待檢測血清或血漿樣本中病原抗原抗體復(fù)合物的迅速解離,提高了抗原和抗體的絕對濃度值,大大提高了待測樣本的檢測靈敏度。
      文檔編號G01N33/569GK101832999SQ20101015945
      公開日2010年9月15日 申請日期2010年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月29日
      發(fā)明者丁興龍, 朱之煒, 朱翎嘉, 江長林, 鄭祖惠 申請人:山東萊博生物科技有限公司
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