專利名稱：預(yù)防、診斷、治療、預(yù)后細(xì)菌感染相關(guān)疾病的方法和試劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域；更具體地，本發(fā)明涉及預(yù)防、診斷、治療、預(yù)后細(xì)菌感染相關(guān)疾病的方法和試劑，特別是提供了一種混合細(xì)菌感染引起的嚴(yán)重膿毒血癥及感染性休克預(yù)后，預(yù)防和治療的新方法·。
背景技術(shù)：
細(xì)菌感染引起的膿毒血癥至今仍然是危害人類健康的急性綜合癥，膿毒血癥目前是美國排位第10的主要死亡原因，在中國膿毒血癥的發(fā)病率和死亡率也不容樂觀。全球每年至少有1800萬例膿毒癥發(fā)生，占世界總?cè)丝诘腛. 3%，我國估計(jì)為300萬例/年計(jì)算。保守預(yù)測(cè)我國嚴(yán)重膿毒癥和膿毒性休克病人為174萬病人。革蘭氏陰性以及陽性細(xì)菌引起的膿毒血癥主要原因是由于細(xì)菌或細(xì)菌毒素侵入血流引起。健康者在病原菌入侵后，一般僅表現(xiàn)為短暫的菌血癥，細(xì)菌可被人體的免疫防御系統(tǒng)迅速消滅，并不引起明顯癥狀；但各種免疫防御功能缺陷者(包括局部和全身屏障功能的喪失)，都易誘發(fā)膿毒血癥。放射治療、廣譜抗菌素、細(xì)胞毒類藥物的應(yīng)用，以及各種大手術(shù)致嚴(yán)重的開放性創(chuàng)傷等都是膿毒血癥的重要誘因。單一微生物感染是指微生物培養(yǎng)中可以檢出一個(gè)孤立的微生物體；多種微生物感染是指微生物培養(yǎng)中可以檢出超過一個(gè)的微生物體，即多個(gè)微生物體。與單一微生物感染相比較，多種微生物感染引起的膿毒血癥伴有較高并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)，較長的病程以及較高死亡率。細(xì)菌感染引起的膿毒血癥以及濃毒性休克的診斷、預(yù)防治療工作仍然面臨許多挑戰(zhàn)，監(jiān)測(cè)血流中的微量細(xì)菌和細(xì)菌毒素都是可行的診斷方法但存在嚴(yán)重缺點(diǎn)，而且缺乏統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)。近20多年，發(fā)現(xiàn)一些可以應(yīng)用于診斷的分子靶點(diǎn)的人血清分子可以應(yīng)用于細(xì)菌感染的診斷，例如 B 型尿肽(B-type natriuretic peptide)、降血 I丐素原(Procalcitonin)、細(xì)菌聚脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)、細(xì)菌滲透性增強(qiáng)蛋白(BPI)、可溶性⑶14(s⑶14)、Endocan等。其中降血鈣素原(Procalcitonin)已被廣泛應(yīng)用于膿毒血癥、嚴(yán)重膿毒血癥、濃毒性休克的分類以及診斷，但它們都不能準(zhǔn)確、有效預(yù)測(cè)濃毒性休克的發(fā)生。目前感染免疫學(xué)研究認(rèn)為，引起膿毒血癥以及濃毒性休克的病源分子主要是革蘭氏陰性菌的脂多糖(LPS)、細(xì)菌核酸(DNA)、糖肽(PGN)以及磷脂壁酸(LTA);又發(fā)現(xiàn)細(xì)菌的單鏈DNA(ssDNA)可以保護(hù)個(gè)體，降低混合細(xì)菌感染的死亡率。革蘭氏陰性菌感染往往伴隨其它細(xì)菌的感染。多種抗原的病理協(xié)同作用還有待進(jìn)一步研究，其原理有待揭示。因此，本領(lǐng)域迫切需要發(fā)現(xiàn)新的病理機(jī)制、開發(fā)的新的、有效地對(duì)嚴(yán)重膿毒血癥以及濃毒性休克進(jìn)行預(yù)后、預(yù)防和治療的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供預(yù)防、診斷、治療、預(yù)后混合細(xì)菌感染以及多種微生物感染相關(guān)疾病的方法和試劑。在本發(fā)明的第一方面，提供含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2(CRISPLD2)及其編碼基因的用途，用于制備預(yù)防、緩解或治療細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病的藥物。在一個(gè)優(yōu)選例中，所述的藥物用于阻斷脂多糖(LPS)與靶細(xì)胞受體結(jié)合；或抑制脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的炎癥因子(如腫瘤壞死因子)釋放。在另一優(yōu)選例中，所述的藥物用于從源頭上控制脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的一系列病理反應(yīng)，以及修飾單鏈DNA的免疫調(diào)控功能。在另一優(yōu)選例中，所述的含LC⑶和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2通過結(jié)合細(xì)菌單鏈DNA(ssDNA)和/或脂多糖(LPS)預(yù)防、緩解或治療膿毒血癥、嚴(yán)重膿毒血癥或感染性休克。在本發(fā)明的另一方面，提供含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2或其編碼基因的用途，用于制備診斷或預(yù)后膿毒血癥、嚴(yán)重膿毒血癥或感染性休克的試劑或試劑盒。在另一優(yōu)選例中，所述的膿毒血癥、嚴(yán)重膿毒癥以及感染性休克是格蘭氏陰性細(xì)菌及多種微生物感染引起的膿毒血癥、嚴(yán)重膿毒癥以及感染性休克。在另一優(yōu)選例中，所述的細(xì)菌感染是格蘭氏陰性細(xì)菌及多種微生物感染，可以包含格蘭氏陽性細(xì)菌。在另一優(yōu)選例中，所述的細(xì)菌感染是混合細(xì)菌感染。在另一優(yōu)選例中，所述的混合細(xì)菌感染以及多種微生物感染包括內(nèi)源性格蘭氏陰性和陽性細(xì)菌混合感染或外源性格蘭氏陰性感染。在另一優(yōu)選例中，所述的細(xì)菌選自(但不限于)大腸桿菌，葡萄球菌，沙門氏菌，克雷伯氏菌，不動(dòng)桿菌。在本發(fā)明的另一方面，提供特異性識(shí)別含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2或其編碼基因的試劑的用途，用于制備診斷或預(yù)后細(xì)菌感染膿毒血癥、嚴(yán)重膿毒血癥以及感染性休克的試劑盒。在另一優(yōu)選例中，所述的特異性識(shí)別含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2或其編碼基因的試劑選自(但不限于)特異性擴(kuò)增含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2基因的引物；特異性識(shí)別含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2基因的探針；或特異性結(jié)合含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2的抗體或配體。在另一優(yōu)選例中，所述的特異性識(shí)別含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2的試劑是抗含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2的抗體，如多克隆抗體。在本發(fā)明的另一方面，提供一種用于診斷或預(yù)后膿毒血癥、嚴(yán)重膿毒血癥以及感染性休克的試劑盒，它包括容器，以及位于容器中的特異性識(shí)別含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2或其編碼基因的試劑；較佳地，為用于檢測(cè)CRISPLD2血清濃度的試劑，如多克隆抗體。在本發(fā)明的另一方面，提供一種預(yù)防或治療細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病的方法，包括步驟提高需要的哺乳動(dòng)物對(duì)象的血清中含LCCD結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2的濃度。在本發(fā)明的另一方面，提供一種預(yù)防、緩解或治療細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病的方法，該方法包括給予細(xì)菌感染者含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2。本發(fā)明的其它方面由于本文的公開內(nèi)容，對(duì)本領(lǐng)域的技術(shù)人員而言是顯而易見的。


圖1、顯示了 ELISA檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線?！D2、顯示了重組CRISPLD2的鑒定結(jié)果。其中，A、10% SDS-PAGE膠分離純化重組CRISPLD2分子，考馬斯藍(lán)鑒定；B、抗CRISPLD2抗體免疫印跡；C、抗c-myc-標(biāo)記抗體免疫印跡。各泳道如下1，4和6為培養(yǎng)基中的CRISPLD2 ；2為分子量標(biāo)準(zhǔn)；3和5為對(duì)照培養(yǎng)基。圖3、應(yīng)用BIAcore技術(shù)測(cè)定的分子相互作用；CRISPLD2與LPS和單鏈DNA(OND)
結(jié)合。其中，A、E.col i LPS(E. col1-LPS)與 CRISPLD2 結(jié)合解離的傳感圖。B、金黃色葡萄球菌(S. aureus) LTA (Aureus-LTA)與CRISPLD2結(jié)合解離的傳感圖。C、E-coli糖脂(PGN)與CRISPLD2結(jié)合解離的傳感圖。D、人工合成細(xì)菌單鏈GPC-DNA (0DN2006)與CRISPLD2結(jié)合解離的傳感圖。E、人工合成細(xì)菌單鏈CPG-DNA (0DN2006 (Ctr))與CRISPLD2結(jié)合解離的傳感圖。F、人工合成雙鏈RNA(PolyI = C)與CRISPLD2結(jié)合解離的傳感圖。圖4、盲腸結(jié)扎手術(shù)和穿刺誘導(dǎo)混合細(xì)菌感染膿毒血癥以及低劑量LPS腹腔注射后血清CRISPLD2濃度的時(shí)間動(dòng)力學(xué)曲線。A為大鼠盲腸結(jié)扎手術(shù)和穿刺誘導(dǎo)低度及中度混合細(xì)菌感染后血清CRISPLD2濃度變化。B為低劑量LPS腹腔注射后小鼠血清CRISPLD2濃度變化。圖5、重組CRISPLD2阻斷LPS與靶細(xì)胞受體結(jié)合，抑制靶細(xì)胞炎癥因子釋放。其中，A-B :重組CERISPLD2蛋白阻斷大腸桿菌LPS及沙門氏菌(S. minnesota ；S. m) LPS與靶細(xì)胞受體結(jié)合。其中，MFI是熒光強(qiáng)度的中值。C-D :重組CERISPLD2蛋白阻斷大腸桿菌LPS誘導(dǎo)的炎癥因子釋放。圖6、重組人CRISPLD2保護(hù)小鼠免于內(nèi)毒素休克致死，血清CRISPLD2濃度與E. col1-LPS致死劑量相關(guān)性分析。A、重組人類CRISPLD2保護(hù)小鼠免于內(nèi)毒素休克致死。B、小鼠血清CRISPLD2濃度與E. col1-LPS致死劑量正相關(guān)。圖7、抗菌素長時(shí)間治療引起小鼠血清CRISPLD2濃度下降，小鼠對(duì)內(nèi)毒素休克的敏感性增加。其中，
A、長時(shí)間服用萬古霉素加新霉素導(dǎo)致小鼠血清CRISPLD2濃度下降。B、長時(shí)間服用萬古霉素加新霉素增加了小鼠對(duì)內(nèi)毒素休克的敏感性。圖8、CRISPLD2血清濃度關(guān)與LPS誘導(dǎo)的內(nèi)毒素休克的易感性呈正相關(guān)。合并三例類似圖7抗菌素長時(shí)間治療的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)繪圖并統(tǒng)計(jì)分析A、CRISPLD2血清濃度關(guān)與LPS誘導(dǎo)的內(nèi)毒素休克的存活率呈正相關(guān)(小鼠腹腔(1. P.)注射亞致死劑量的大腸桿菌LPS O. 2mg)。B、顯示血清CRISPLD2水平正態(tài)分布曲線，提示了相應(yīng)的內(nèi)毒素休克的易感性變化與CRISPLD2水平的關(guān)系。縱坐標(biāo)是血清CRISPLD2水平；橫縱坐標(biāo)是存活率或小鼠計(jì)數(shù)。 C、顯示抗內(nèi)毒素血清IgG抗體水平與存活率沒有相關(guān)性。圖9、重組CRISPLD2蛋白靜脈注射或內(nèi)源性激活上調(diào)血清CRISPLD2水平保護(hù)混合細(xì)菌感染小鼠免于濃毒性休克。圖10、膿毒血癥病人CRISPLD2-低/降鈣素原(Procalcitonie)-高的血清樣本頻率更敏感地反映膿毒血癥的嚴(yán)重程度及死亡率。APACHE II指數(shù)4-14為輕度膿毒血癥病人；15-23為嚴(yán)重膿毒血癥病人；23-39為嚴(yán)重膿毒血癥乃至濃毒性休克高發(fā)病人。病例30，標(biāo)本數(shù)180。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明人經(jīng)過深入而廣泛的研究，首次證明了一種天然免疫調(diào)節(jié)蛋白一含LCXD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2 (cyste ine-rich secretoryprote in LCCLdomain containing 2，CRISPLD2)可結(jié)合細(xì)菌的單鏈DNA和LPS，其血清濃度與細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病(如嚴(yán)重膿毒血癥以及濃毒性休克)的發(fā)生密切相關(guān)。一方面，以CRISPLD2蛋白作為靶分子，可檢測(cè)個(gè)體血清CRISPLD2濃度，預(yù)測(cè)個(gè)體對(duì)細(xì)菌感染(如濃毒性休克)的敏感性，并通過跟蹤血清水平CRISPLD2預(yù)后細(xì)菌感染引起的嚴(yán)重膿毒血癥以及濃毒性休克。另一方面，通過提高血清中CRISPLD2蛋白的濃度，可以預(yù)防和治療細(xì)菌感染弓I起嚴(yán)重膿毒血癥以及濃毒性休克。在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。一種 CRISPLD2 的 cDNA 序列可參見登錄號(hào) NM_031476(長度 4607bp)或 SEQ ID NO:1，其基因組序列可參見登錄號(hào)NC_000016. 9，其氨基酸序列可參見序列號(hào)NP_113664或SEQID NO 2o在本發(fā)明中，術(shù)語“CRISPLD2蛋白”、“CRISPLD2多肽”、“含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2”或“人嚴(yán)重膿毒血癥以及濃毒性休克相關(guān)蛋白CRISPLD2”可互換使用，都指具有人嚴(yán)重胺毒血癥以及濃毒性休克相關(guān)蛋白CRISPLD2氣基酸序列的蛋白或多肽。它們包括含有或不含起始甲硫氨酸的CRISPLD2蛋白。如本文所用，“分離的”是指物質(zhì)從其原始環(huán)境中分離出來(如果是天然的物質(zhì)，原始環(huán)境即是天然環(huán)境)。如活體細(xì)胞內(nèi)的天然狀態(tài)下的多聚核苷酸和多肽是沒有分離純化的，但同樣的多聚核苷酸或多肽如從天然狀態(tài)中同存在的其它物質(zhì)中分開，則為分離純化的。如本文所用，“分離的CRISPLD2蛋白或多肽”是指CRISPLD2多肽基本上不含天然與其相關(guān)的其它蛋白、脂類、糖類或其它物質(zhì)。本領(lǐng)域的技術(shù)人員能用標(biāo)準(zhǔn)的蛋白質(zhì)純化技術(shù)純化CRISPLD2蛋白。基本上純的多肽在非還原聚丙烯酰胺凝膠上能產(chǎn)生單一的主帶。
本發(fā)明的多肽可以是重組多肽、天然多肽、合成多肽，優(yōu)選重組多肽。本發(fā)明的多肽可以是天然純化的產(chǎn)物，或是化學(xué)合成的產(chǎn)物，或使用重組技術(shù)從原核或真核宿主(例如，細(xì)菌、酵母、高等植物、昆蟲和哺乳動(dòng)物細(xì)胞)中產(chǎn)生。根據(jù)重組生產(chǎn)方案所用的宿主，本發(fā)明的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。
本發(fā)明還包括CRISPLD2蛋白的片段、衍生物和類似物。如本文所用，術(shù)語“片段”、“衍生物”和“類似物”是指基本上保持本發(fā)明的天然CRISPLD2蛋白相同的生物學(xué)功能或活性的多肽。本發(fā)明的多肽片段、衍生物或類似物可以是(i)有一個(gè)或多個(gè)保守或非保守性氨基酸殘基(優(yōu)選保守性氨基酸殘基)被取代的多肽，而這樣的取代的氨基酸殘基可以是也可以不是由遺傳密碼編碼的，或(ii)在一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基中具有取代基團(tuán)的多肽，或(ii i)成熟多肽與另一個(gè)化合物(比如延長多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的多肽，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前導(dǎo)序列或分泌序列或用來純化此多肽的序列或蛋白原序列，或與抗原IgG片段的形成的融合蛋白)。根據(jù)本文的教導(dǎo)，這些片段、衍生物和類似物屬于本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員公知的范圍。在本發(fā)明中，術(shù)語“CRISPLD2蛋白”指具有CRISPLD2蛋白活性的SEQ ID NO :2序列的多肽。該術(shù)語還包括具有與CRISPLD2蛋白相同功能的、SEQ ID NO :2序列的變異形式。這些變異形式包括(但并不限于)若干個(gè)(通常為1-50個(gè)，較佳地1-30個(gè)，更佳地1-20個(gè)，最佳地1-10個(gè))氨基酸的缺失、插入和/或取代，以及在C末端和/或N末端添加或缺失一個(gè)或數(shù)個(gè)(通常為20個(gè)以內(nèi)，較佳地為10個(gè)以內(nèi)，更佳地為5個(gè)以內(nèi))氨基酸。例如，在本領(lǐng)域中，用性能相近或相似的氨基酸進(jìn)行取代時(shí)，通常不會(huì)改變蛋白質(zhì)的功能。又比如，在C末端和/或N末端添加或缺失一個(gè)或數(shù)個(gè)氨基酸通常也不會(huì)改變蛋白質(zhì)的功能。該術(shù)語還包括CRISPLD2蛋白的活性片段和活性衍生物。通常，這些變異形式包括CRISPLD2蛋白的LCXD和R3H結(jié)構(gòu)域。該多肽的變異形式包括同源序列、保守性變異體、等位變異體、天然突變體、誘導(dǎo)突變體、在高或低的嚴(yán)緊度條件下能與CRISPLD2DNA雜交的DNA所編碼的蛋白、以及利用抗CRISPLD2多肽的抗血清獲得的多肽或蛋白。本發(fā)明還提供了其它多肽，如包含CRISPLD2多肽或其片段的融合蛋白。除了幾乎全長的多肽外，本發(fā)明還包括了 CRISPLD2多肽的可溶性片段。通常，這些變異形式包括CRISPLD2蛋白的LCXD和R3H結(jié)構(gòu)域。發(fā)明還提供CRISPLD2蛋白或多肽的類似物。這些類似物與天然CRISPLD2多肽的差別可以是氨基酸序列上的差異，也可以是不影響序列的修飾形式上的差異，或者兼而有之。這些多肽包括天然或誘導(dǎo)的遺傳變異體。誘導(dǎo)變異體可以通過各種技術(shù)得到，如通過輻射或暴露于誘變劑而產(chǎn)生隨機(jī)誘變，還可通過定點(diǎn)誘變法或其它已知分子生物學(xué)的技術(shù)。類似物還包括具有不同于天然L-氨基酸的殘基(如D-氨基酸)的類似物，以及具有非天然存在的或合成的氨基酸(如β'Υ-氨基酸)的類似物。應(yīng)理解，本發(fā)明的多肽并不限于上述例舉的代表性的多肽。通常，這些類似物包括CRISPLD2蛋白的LCXD和R3H結(jié)構(gòu)域。修飾(通常不改變一級(jí)結(jié)構(gòu))形式包括體內(nèi)或體外的多肽的化學(xué)衍生形式如乙?；螋然?。修飾還包括糖基化，如那些在多肽的合成和加工中或進(jìn)一步加工步驟中進(jìn)行糖基化修飾而產(chǎn)生的多肽。這種修飾可以通過將多肽暴露于進(jìn)行糖基化的酶(如哺乳動(dòng)物的糖基化酶或去糖基化酶)而完成。修飾形式還包括具有磷酸化氨基酸殘基(如磷酸酪氨酸，磷酸絲氨酸，磷酸蘇氨酸)的序列。還包括被修飾從而提高了其抗蛋白水解性能或優(yōu)化了溶解性能的多肽。在本發(fā)明中，“CRISPLD2蛋白保守性變異多肽”指與SEQ ID NO 2的氨基酸序列相比，有至多10個(gè)，較佳地至多8個(gè)，更佳地至多5個(gè)，最佳地至多3個(gè)氨基酸被性質(zhì)相似或相近的氨基酸所替換而形成多肽。這些保守性變異多肽最好根據(jù)表I進(jìn)行氨基酸替換而產(chǎn)生。表I
權(quán)利要求
1.含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2或其編碼基因的用途，用于制備預(yù)防、緩解或治療細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病的藥物。
2.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的藥物用于阻斷脂多糖與靶細(xì)胞受體結(jié)合；或抑制脂多糖誘導(dǎo)的炎癥因子釋放。
3.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述的含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2通過結(jié)合細(xì)菌單鏈DNA和/或脂多糖預(yù)防、緩解或治療膿毒血癥、嚴(yán)重膿毒血癥或感染性休克。
4.含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2或其編碼基因的用途，用于制備診斷或預(yù)后膿毒血癥、嚴(yán)重膿毒血癥或感染性休克的試劑或試劑盒。
5.特異性識(shí)別含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2或其編碼基因的試劑的用途，用于制備診斷或預(yù)后細(xì)菌感染膿毒血癥、嚴(yán)重膿毒血癥或感染性休克的試劑盒。
6.如權(quán)利要求5所述的用途，其特征在于，所述的特異性識(shí)別含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2或其編碼基因的試劑選自特異性擴(kuò)增含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2基因的引物；特異性識(shí)別含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2基因的探針；或特異性結(jié)合含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2的抗體或配體。
7.如權(quán)利要求5或6所述的用途，其特征在于，所述的特異性識(shí)別含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2的試劑是抗含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2的抗體。
8.一種用于診斷或預(yù)后膿毒血癥、嚴(yán)重膿毒血癥或感染性休克的試劑盒，其特征在于，它包括容器，以及位于容器中的特異性識(shí)別含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2或其編碼基因的試劑。
9.如權(quán)利要求8所述的試劑盒，其特征在于，所述的特異性識(shí)別含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2的試劑是抗含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2的抗體。
10.一種預(yù)防、緩解或治療細(xì)菌感染或細(xì)菌感染相關(guān)疾病的方法，其特征在于，該方法包括給予細(xì)菌感染者含LCXD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2。
全文摘要
本發(fā)明涉及預(yù)防、診斷、治療、預(yù)后細(xì)菌感染相關(guān)疾病的方法和試劑。首次證明含LCCD和R3H結(jié)構(gòu)域的半胱氨酸富集的分泌蛋白2(CRISPLD2)可結(jié)合細(xì)菌的LPS和單鏈DNA，其血清濃度與細(xì)菌感染引起的嚴(yán)重膿毒血癥及濃毒性休克密切相關(guān)。以CRISPLD2蛋白為靶分子，檢測(cè)個(gè)體血清CRISPLD2濃度，預(yù)測(cè)個(gè)體對(duì)細(xì)菌感染的敏感性，并通過跟蹤C(jī)RISPLD2血清水平預(yù)后細(xì)菌感染引起的嚴(yán)重膿毒血癥及濃毒性休克。且，通過提高血清中CRISPLD2蛋白的濃度，可預(yù)防和治療細(xì)菌感染引起的嚴(yán)重膿毒血癥及濃毒性休克。
文檔編號(hào)G01N33/569GK102988956SQ20111027906
公開日2013年3月27日 申請(qǐng)日期2011年9月19日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月19日
發(fā)明者王志勤, 江宏銓, 張新, M·K·霍夫曼 申請(qǐng)人:上海人類基因組研究中心, 上海南方基因科技有限公司