用于腎損傷和腎衰竭的診斷及預(yù)后的方法和組合物的制作方法
【專(zhuān)利說(shuō)明】
[0001] 本申請(qǐng)為申請(qǐng)日是2010年11月5日、申請(qǐng)?zhí)柺?010800570147 (PCT/ US2010/055721)、發(fā)明名稱(chēng)為"用于腎損傷和腎衰竭的診斷及預(yù)后的方法和組合物"的中國(guó) 申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。
技術(shù)領(lǐng)域
[0002] 本發(fā)明要求2009年11月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 135、2009年11 月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 136、2009年11月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng) 61/259, 137、2009年11月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 139、2009年11月7日提交 的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 145、2009年11月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 147、 2009年11月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 148、2009年11月7日提交的美國(guó)臨時(shí) 專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 15U2009年11月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 152、2009年11 月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 153、2009年11月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng) 61/259, 155、2009年11月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 156、2009年11月7日提交 的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 157、2009年11月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 159、 2009年11月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 160、2009年11月7日提交的美國(guó)臨時(shí) 專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 16U2009年11月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/259, 162、2009年12 月11日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/285, 928、2009年12月11日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng) 61/285,929、2010年4月3日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/320,723、2010年5月20日提交 的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/346, 551和2010年5月20日提交的美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)61/346, 547 的優(yōu)先權(quán)，上述每個(gè)申請(qǐng)據(jù)此全文并入，包括所有表格、附圖和權(quán)利要求。
【背景技術(shù)】
[0003] 本發(fā)明的技術(shù)背景的以下論述僅用于幫助讀者理解本發(fā)明且并非認(rèn)同描述或構(gòu) 成本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)。
[0004] 腎臟負(fù)責(zé)從體內(nèi)排泄水和溶解物。它的功能包括維持酸堿平衡、調(diào)節(jié)電解質(zhì)濃 度、控制血容量和調(diào)節(jié)血壓。因此，腎臟功能因損傷和/或疾病的喪失導(dǎo)致大量的發(fā)病及 死亡率。腎損傷的詳細(xì)論述提供在Harrison的Principles of Internal Medicine，第 17版，McGraw Hill，New York，第1741-1830頁(yè)中，該文獻(xiàn)全文以引用的方式并入。腎病 和/或腎損傷可為急性的或慢性的。急性和慢性腎病描述如下（來(lái)自Current Medical Diagnosis&Treatment 2008,第 47 版，McGraw Hill，New York，第 785-815 頁(yè)，該文獻(xiàn)全文 以引用的方式并入）急性腎衰竭是腎功能在幾小時(shí)至幾天內(nèi)惡化，導(dǎo)致含氮廢物（如尿 素氮）和肌酐滯留在血液中。這些物質(zhì)的滯留被稱(chēng)為氮質(zhì)血癥。慢性腎衰竭（慢性腎?。?因腎功能在幾個(gè)月至幾年內(nèi)的異常喪失而引起。"
[0005] 急性腎衰竭（ARF，也稱(chēng)為急性腎損傷，或AKI)是腎小球過(guò)濾急?。ㄒ话阍诩s48小 時(shí)至1周內(nèi)檢測(cè)出）降低。該過(guò)濾能力的喪失導(dǎo)致由腎臟正常排泄的含氮（尿素和肌酐） 和不含氮廢物的滯留、排尿量減少，或兩者兼而有之。據(jù)報(bào)道，ARF的惡化導(dǎo)致約5%需入院 治療，4-15%需進(jìn)行心肺旁路手術(shù)，多達(dá)30%需進(jìn)行重癥監(jiān)護(hù)治療。ARF按起因可分為腎前 性、腎性或腎后性ARF。腎性疾病可進(jìn)一步分為腎小球、腎小管、間質(zhì)和血管異常。ARF的主 要原因描述于下表，該表改自Merck Manual，第17版，第222章，其全文以引用的方式并入。
[0006]
[0007]
[0008]
[0009] 在缺血性ARF的情況下，病程可分成四個(gè)階段。在持續(xù)幾小時(shí)至幾天的起始階段 期間，腎臟灌注降低正發(fā)展為損傷。腎小球超濾減少，濾液流量因腎小管內(nèi)的碎片而減少， 并且濾液通過(guò)受損的上皮發(fā)生回漏。此階段期間，腎損傷可通過(guò)腎臟再灌注而得到介導(dǎo)。起 始階段之后是擴(kuò)展階段，該階段的特征是持續(xù)的缺血性損傷和炎癥，并且可能涉及內(nèi)皮損 傷和血管充血。在持續(xù)1至2周的維持階段期間，腎細(xì)胞出現(xiàn)損傷，并且腎小球過(guò)濾和尿排 出量達(dá)到最小。隨后可以是恢復(fù)階段，其中腎上皮細(xì)胞得以被修復(fù)，GFR逐漸復(fù)原。盡管如 此，但患有ARF的受試者的存活率可能還是低至約60%。
[0010] 因放射性造影劑（也稱(chēng)為造影介質(zhì)）及其它腎臟毒素（如環(huán)孢霉素）、抗生素（包 括氨基糖苷類(lèi)）和抗癌藥（如順鉑）引起的急性腎損傷在幾天至大概一周的時(shí)間段內(nèi)顯現(xiàn) 出來(lái)。造影誘發(fā)的腎?。–IN，其是由放射性造影劑引起的AKI)被認(rèn)為是由腎內(nèi)血管收縮 (導(dǎo)致缺血性損傷）且因產(chǎn)生對(duì)腎小管上皮細(xì)胞具有直接毒性的活性氧物種而引起的。CIN 傳統(tǒng)上表現(xiàn)為血尿素氮和血清肌酐的急性（24-48h內(nèi)發(fā)作）但可逆（峰值3-5天，1周內(nèi)消 除）的升尚。
[0011] 通常報(bào)導(dǎo)的用于確定和檢測(cè)AKI的標(biāo)準(zhǔn)是血清肌酐的急?。ㄒ话阍诩s2-7天內(nèi)或 在住院期間內(nèi)）升高。雖然使用血清肌酐的升高來(lái)確定和檢測(cè)AKI已得到良好的確定，但 血清肌酐升高的幅度和確定AKI的測(cè)量時(shí)間在出版物之間卻有很大的差異。傳統(tǒng)上，相對(duì) 大的血清肌酐增長(zhǎng)（如100%、200%、至少100%的增長(zhǎng)到2mg/dL以上的值及其它定義） 用于確定AKI。然而，目前的趨勢(shì)是使用較小的血清肌酐升高來(lái)確定AKI。血清肌酐升高、 AKI與相關(guān)的健康危險(xiǎn)之間的關(guān)系的綜述見(jiàn)于Praught和Shlipak，Curr Opin Nephrol 辦口6忖6118 14:265-270,2005和〇16竹〇￥等，了六1115〇。他？111'〇1 16:3365-3370,2005 中，上 述文獻(xiàn)與其中所列的參考文獻(xiàn)全文以引用的方式并入。如這些出版物中所述，現(xiàn)在已知急 性惡化的腎功能（AKI)和增加的死亡危險(xiǎn)及其它不利的結(jié)果與血清肌酐的極小增長(zhǎng)有關(guān)。 這些增長(zhǎng)可確定為相對(duì)（百分比）值或標(biāo)稱(chēng)值（nominal value)。已報(bào)道，血清肌酐較損 傷前的數(shù)值相對(duì)增長(zhǎng)低至20%就表明了急性惡化的腎功能（AKI)和增大的健康危險(xiǎn)，但更 常見(jiàn)報(bào)道的確定AKI和增大的健康危險(xiǎn)的值是至少25%的相對(duì)增長(zhǎng)。已報(bào)道，低至0. 3mg/ dL、0. 2mg/dL或甚至0. lmg/dL的標(biāo)稱(chēng)增長(zhǎng)表明有惡化的腎功能和增大的死亡危險(xiǎn)。已經(jīng)用 血清肌酐升至這些閾值的不同時(shí)間段來(lái)確定AKI，例如2天、3天、7天或定義為患者住院或 入住重癥監(jiān)護(hù)病房時(shí)間的變化時(shí)間段。這些研宄表明，對(duì)于惡化的腎功能或AKI，沒(méi)有特定 的血清肌酐升高閾值（或升高所用的時(shí)間段），而是危險(xiǎn)性隨血清肌酐升高幅度的增加而 連續(xù)增大。
[0012] 一項(xiàng)研宄（Lassnigg 等，J Am Soc Nephrol 15 :1597-1605, 2004,其全文以引用 的方式并入）對(duì)血清肌酐的增加和減少進(jìn)行了研宄。心臟手術(shù)后具有-0. 1至-0. 3mg/dL 的血清肌酐輕微下降的患者死亡率最低。血清肌酐下降較大（超過(guò)或等于-〇.4mg/dL)或 血清肌酐有任何增長(zhǎng)的患者死亡率較高。這些研宄結(jié)果使作者得出結(jié)論，即使腎功能的非 常微小的變化（如手術(shù)48小時(shí)內(nèi)通過(guò)小的肌酐變化所檢測(cè)到的）也嚴(yán)重影響患者的結(jié)果。 為了對(duì)用于在臨床試驗(yàn)和臨床實(shí)踐中利用血清肌酐來(lái)確定AKI的統(tǒng)一分類(lèi)系統(tǒng)達(dá)成共識(shí)， Bellomo等（Crit Care. 8(4) :R204-12,2004,全文以引用的方式并入）提出了用于將AKI 患者分級(jí)的以下分類(lèi)：
[0013] "危險(xiǎn)":血清肌酐較基線增長(zhǎng)1. 5倍，或6小時(shí)排尿量< 0. 5ml/kg體重/hr ;
[0014] "損傷":血清肌酐較基線增長(zhǎng)2. 0倍，或12小時(shí)排尿量< 0. 5ml/kg/hr ;
[0015] "衰竭":血清肌酐較基線增長(zhǎng)3. 0倍，或肌酐> 355 μπιο?/l (升高> 44)，或24小 時(shí)排尿量低于〇. 3ml/kg/hr，或至少12小時(shí)無(wú)尿；
[0016] 并包括兩種臨床結(jié)果：
[0017] "喪失":對(duì)腎替代療法的持續(xù)需求超過(guò)四周。
[0018] "ESRD" ：晚期腎病-對(duì)透析的需求超過(guò)3個(gè)月。
[0019] 將這些標(biāo)準(zhǔn)稱(chēng)作RIFLE標(biāo)準(zhǔn)，這些標(biāo)準(zhǔn)提供了適用于對(duì)腎狀態(tài)進(jìn)行分類(lèi)的臨床工 具。如 Kellum，Crit. Care Med. 36 :S141-45,2008 和 Ricci 等，Kidney Int. 73,538-546， 2008中所述（上述每個(gè)文獻(xiàn)全文以引用的方式并入），RIFLE標(biāo)準(zhǔn)提供了已在許多研宄中 得到確認(rèn)的AKI的統(tǒng)一定義。
[0020] 最近，Mehta 等，Crit. Care 11 :R31(doi : 10. 1186. cc5713)，2007(此文獻(xiàn)全文以 引用的方式并入）提出了用于將AKI患者分級(jí)的以下類(lèi)似分類(lèi)，其修改自RIFLE :
[0021] "階段I":血清肌酐增長(zhǎng)超過(guò)或等于0. 3mg/dL (多26. 4 ymol/L)，或增至超過(guò)或等 于基線的150% (1. 5倍），或超過(guò)6小時(shí)的排尿量少于0. 5mL/kg/小時(shí)；
[0022] "階段I I":血清肌酐增至超過(guò)基線的200% (>2倍），或超過(guò)12小時(shí)的排尿量 少于0. 5mL/kg/小時(shí)；
[0023] "階段III":血清肌酐增至超過(guò)基線的300% (> 3倍），或血清肌酐彡354 μmol/ L，伴有至少44 μ mol/L的急性增長(zhǎng)，或24小時(shí)的排尿量少于0. 3mL/kg/小時(shí)，或12小時(shí)無(wú) 尿。
[0024] CIN協(xié)調(diào)工作組（McCollough等，Rev Cardiovasc Med. 2006 ;7(4) :177-197,此文 獻(xiàn)全文以引用的方式并入）用25%的血清肌酐升高來(lái)確定造影劑誘發(fā)的腎病（一種類(lèi)型的 AKI)。雖然各組提出的用血清肌酐檢測(cè)AKI的標(biāo)準(zhǔn)略有不同，但達(dá)成共識(shí)的是，血清肌酐的 小的變化（如〇. 3mg/dL或25% )足以檢測(cè)AKI (惡化的腎功能），并且血清肌酐變化幅度 是AKI嚴(yán)重程度和死亡危險(xiǎn)性的指標(biāo)。
[0025] 雖然在若干天內(nèi)連續(xù)測(cè)量血清肌酐被接受為一種檢測(cè)和診斷AKI的方法，并且被 認(rèn)為是用于評(píng)價(jià)AKI患者的最重要的工具之一，但一般認(rèn)為血清肌酐在診斷、評(píng)估和監(jiān)測(cè) AKI患者時(shí)有一些局限性。根據(jù)所用定義的情況，血清肌酐升至被視為AKI診斷值（例如， 0.3mg/dL或25%的升高）的時(shí)間段可為48小時(shí)或更長(zhǎng)。由于AKI中的細(xì)胞損傷可在數(shù)小 時(shí)內(nèi)發(fā)生，則在48小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間點(diǎn)所檢測(cè)到的血清肌酐升高可能是損傷的晚期指標(biāo)，因 此依賴血清肌酐可能延誤AKI的診斷。此外，當(dāng)腎功能快速變化時(shí)，血清肌酐并非是準(zhǔn)確的 腎臟狀態(tài)及AKI最嚴(yán)重階段期間的治療需求的良好指標(biāo)。一些AKI患者會(huì)完全恢復(fù)，一些 將需要透析（短期或長(zhǎng)期），而一些則會(huì)有其它不利的結(jié)果，包括死亡、嚴(yán)重的不良心臟事 件和慢性腎病。因?yàn)檠寮◆沁^(guò)濾速度的指標(biāo)，所以它并不區(qū)分AKI的起因（腎前性、腎 性、腎后性梗阻、粥樣栓塞性等）或腎性疾病中損傷的類(lèi)別或位置（例如，起源于腎小管、腎 小球或間質(zhì)）。排尿量受到類(lèi)似的限制，了解這些對(duì)管理和治療AKI患者而言是至關(guān)重要 的。
[0026] 這些限制強(qiáng)調(diào)了需要更好的方法來(lái)檢測(cè)和評(píng)估AKI，特別是在早期和亞臨床階段， 但在后期可能出現(xiàn)腎臟的痊愈和恢復(fù)階段也包括在內(nèi)。此外，需要更好地識(shí)別危險(xiǎn)的AKI 患者。 發(fā)明概要
[0027] 本發(fā)明的目的是提供評(píng)價(jià)受試者的腎功能的方法和組合物。如本文中所述，對(duì)選 自以下的一種或多種生物標(biāo)記物的測(cè)量可用于對(duì)罹患腎功能損傷、腎功能衰弱和/或急性 腎衰竭（也稱(chēng)急性腎損傷）或有罹患上述疾病危險(xiǎn)的受試者進(jìn)行診斷、預(yù)后、危險(xiǎn)分級(jí)、分 期、監(jiān)測(cè)、分類(lèi)以及確定進(jìn)一步診斷和治療方案：C-C基序趨化因子23、跨膜糖蛋白NMB、腦 源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、組織蛋白酶S、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β-2 (在某些實(shí)施方案中是其替代形式）、 尿激酶型纖溶酶原激活劑、血管生成素-2、基質(zhì)溶素（Matrilysin)、癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘 附分子1、肌酸激酶ΜΒ、胰島素、免疫球蛋白Μ、免疫球蛋白Ε、巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子、半 乳凝素3、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β -3 (在某些實(shí)施方案中是其替代形式）、硫酸乙酰肝素、鈣粘蛋 白-3、補(bǔ)體C5 (在某些實(shí)施方案中是其C5a形式）、血小板因子4、血小板堿性蛋白和基質(zhì)裂 解素-2(Stromelysin-2)(本文中將每種稱(chēng)為"腎損傷標(biāo)記物"）。
[0028] 本發(fā)明的該等腎損傷標(biāo)記物可單獨(dú)使用，或以包含多種腎損傷標(biāo)記物的組合形式 使用，用于危險(xiǎn)分級(jí)（即，識(shí)別日后有罹患腎功能損傷危險(xiǎn)、日后發(fā)展為腎功能衰弱、日后 發(fā)展為ARF、日后腎功能改善等的受試者）；用于診斷現(xiàn)有的疾?。?，識(shí)別罹患腎功能損 傷、已發(fā)展為腎功能衰弱、已發(fā)展為ARF等的受試者）；用于監(jiān)測(cè)腎功能的惡化或改善；以及 用于預(yù)測(cè)日后的醫(yī)療結(jié)果，如腎功能的改善或惡化、死亡危險(xiǎn)的降低或提高、受試者需進(jìn)行 腎替代療法（即，血液透析、腹膜透析、血液過(guò)濾和/或腎移植）的危險(xiǎn)性的降低或提高、受 試者腎功能損傷痊愈的危險(xiǎn)性的降低或提高、受試者ARF痊愈的危險(xiǎn)性的降低或提高、受 試者發(fā)展為晚期腎病的危險(xiǎn)性的降低或提高、受試者發(fā)展為慢性腎衰竭的危險(xiǎn)性的降低或 提高、受試者移植腎發(fā)生排斥反應(yīng)的危險(xiǎn)性的降低或提高等。
[0029] 在第一方面，本發(fā)明涉及評(píng)價(jià)受試者腎狀態(tài)的方法。這些方法包括執(zhí)行一種測(cè)定 法，該測(cè)定法被設(shè)定成檢測(cè)取自受試者的體液樣本中選自C-C基序趨化因子23、跨膜糖蛋 白NMB、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、組織蛋白酶S、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β-2、尿激酶型纖溶酶原激活 劑、血管生成素2、基質(zhì)溶素、癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子1、肌酸激酶ΜΒ、胰島素、免疫球蛋 白Μ、免疫球蛋白Ε、巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子、半乳凝素3、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β-3、硫酸乙酰肝 素、鈣粘蛋白3、補(bǔ)體C5、血小板因子4、血小板堿性蛋白和基質(zhì)裂解素-2的一種或多種生物 標(biāo)記物，然后將其與受試者的腎狀態(tài)相關(guān)聯(lián)。這種與腎狀態(tài)的相關(guān)聯(lián)可包括將測(cè)定結(jié)果與 本文中所述的受試者的危險(xiǎn)分級(jí)、診斷、預(yù)后、分期、分類(lèi)和監(jiān)測(cè)中的一種或多種相關(guān)聯(lián)。因 此，本發(fā)明利用一種或多種本發(fā)明的腎損傷標(biāo)記物來(lái)評(píng)價(jià)腎損傷。
[0030] 在某些實(shí)施方案中，評(píng)價(jià)本文中所述腎狀態(tài)的方法是對(duì)受試者進(jìn)行危險(xiǎn)分級(jí)的方 法；即，確定受試者腎狀態(tài)的一種或多種日后變化的可能性。在這些實(shí)施方案中，將測(cè)定結(jié) 果與一種或多種上述的日后變化相關(guān)聯(lián)。以下是優(yōu)選的危險(xiǎn)分級(jí)實(shí)施方案。
[0031] 在優(yōu)選的危險(xiǎn)分級(jí)實(shí)施方案中，這些方法包括確定受試者日后出現(xiàn)腎功能損傷的 危險(xiǎn)，并且將測(cè)定結(jié)果與出現(xiàn)這種日后腎功能損傷的可能性相關(guān)聯(lián)。例如，可以將每個(gè)測(cè)定 濃度與閾值相比較。對(duì)于"陽(yáng)向"腎損傷標(biāo)記物，相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)確定的日后 罹患腎功能損傷的可能性來(lái)說(shuō)，當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)，確定受試者日后罹患腎功能損傷 的可能性增大。對(duì)于"陰向"腎損傷標(biāo)記物，相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)確定的日后罹患 腎功能損傷的可能性來(lái)說(shuō)，當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)，確定受試者日后罹患腎功能損傷的可 能性增大。
[0032] 在其它優(yōu)選的危險(xiǎn)分級(jí)實(shí)施方案中，這些方法包括確定受試者日后腎功能衰弱的 危險(xiǎn)，并且將測(cè)定結(jié)果與這種腎功能衰弱的可能性相關(guān)聯(lián)。例如，可以將每個(gè)測(cè)定濃度與閾 值相比較。對(duì)于"陽(yáng)向"腎損傷標(biāo)記物，相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)確定的日后罹患腎功 能衰弱的可能性來(lái)說(shuō)，當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)，確定受試者日后罹患腎功能衰弱的可能性 增大。對(duì)于"陰向"腎損傷標(biāo)記物，相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)確定的日后罹患腎功能衰 弱的可能性來(lái)說(shuō)，當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)，確定受試者日后罹患腎功能衰弱的可能性增大。
[0033] 又在其它優(yōu)選的危險(xiǎn)分級(jí)實(shí)施方案中，這些方法包括確定受試者日后腎功能改善 的可能性，并且將測(cè)定結(jié)果與這種日后腎功能改善的可能性相關(guān)聯(lián)。例如，可以將每個(gè)測(cè)定 濃度與閾值相比較。對(duì)于"陽(yáng)向"腎損傷標(biāo)記物，相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)確定的日后 腎功能改善的可能性來(lái)說(shuō)，當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)，確定受試者日后腎功能改善的可能性 增大。對(duì)于"陰向"腎損傷標(biāo)記物，相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)確定的日后腎功能改善的 可能性來(lái)說(shuō)，當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)，確定受試者日后腎功能改善的可能性增大。
[0034] 還在其它優(yōu)選的危險(xiǎn)分級(jí)實(shí)施方案中，這些方法包括確定受試者發(fā)展成ARF的危 險(xiǎn)性，并且將結(jié)果與這種發(fā)展成ARF的可能性相關(guān)聯(lián)。例如，可以將每個(gè)測(cè)定濃度與閾值相 比較。對(duì)于"陽(yáng)向"腎損傷標(biāo)記，相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)確定的可能性來(lái)說(shuō)，當(dāng)測(cè)定 濃度高于閾值時(shí)，確定受試者發(fā)展成ARF的可能性增大。對(duì)于"陰向"腎損傷標(biāo)記，相對(duì)于 當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)確定的可能性來(lái)說(shuō)，當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)，確定受試者發(fā)展成ARF 的可能性增大。
[0035] 且在其它優(yōu)選的危險(xiǎn)分級(jí)實(shí)施方案中，這些方法包括確定受試者結(jié)果的危險(xiǎn)性， 并且將測(cè)定結(jié)果與出現(xiàn)同受試者罹患的腎損傷相關(guān)的臨床結(jié)果的可能性相關(guān)聯(lián)。例如，可 以將每個(gè)測(cè)定濃度與閾值相比較。對(duì)于"陽(yáng)向"腎損傷標(biāo)記，當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)，確定受 試者出現(xiàn)以下一種或多種情況的可能性增大：急性腎損傷、發(fā)展成AKI的惡化階段、死亡、 需進(jìn)行腎替代療法、需移除腎臟毒素、晚期腎病、心力衰竭、中風(fēng)、心肌梗塞、發(fā)展成慢性腎 病等，這是相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)確定的可能性來(lái)說(shuō)的。對(duì)于"陰向"腎損傷標(biāo)記， 當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)，確定受試者出現(xiàn)以下一種或多種情況的可能性增大：急性腎損傷、 發(fā)展成AKI的惡化階段、死亡、需進(jìn)行腎替代療法、需移除腎臟毒素、晚期腎病、心力衰竭、 中風(fēng)、心肌梗塞、發(fā)展成慢性腎病等，這是相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)確定的可能性來(lái)說(shuō) 的。
[0036] 在上述危險(xiǎn)分級(jí)實(shí)施方案中，優(yōu)選地，確定的可能性或危險(xiǎn)性是指在從獲取受試 者體液樣本之時(shí)起差不多180天內(nèi)可能發(fā)生所關(guān)注的事件。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，確 定的可能性或危險(xiǎn)性涉及在較短的時(shí)間段內(nèi)發(fā)生的所關(guān)注的事件，所述較短的時(shí)間段例如 為18個(gè)月、120天、90天、60天、45天、30天、21天、14天、7天、5天、96小時(shí)、72小時(shí)、48小 時(shí)、36小時(shí)、24小時(shí)、12小時(shí)或更短。自獲取受試者體液樣本起0小時(shí)的危險(xiǎn)性相當(dāng)于目前 癥狀的診斷。
[0037] 在優(yōu)選的危險(xiǎn)分級(jí)實(shí)施方案中，根據(jù)受試者預(yù)先存在的腎前性、腎性或腎后性ARF 的一種或多種已知的危險(xiǎn)因素來(lái)選擇進(jìn)行危險(xiǎn)分級(jí)的受試者。例如，正在經(jīng)歷或經(jīng)歷過(guò)大 血管手術(shù)、冠狀動(dòng)脈搭橋或其它心臟手術(shù)的受試者；具有預(yù)先存在的充血性心力衰竭、子 癇前期、子癇、糖尿病、高血壓、冠狀動(dòng)脈疾病、蛋白尿、腎功能不全、腎小球過(guò)濾低于正常 范圍、肝硬化、血清肌酐高于正常范圍或敗血癥的受試者；或接觸NSAID、環(huán)孢菌素、他克莫 司、氨基糖苷類(lèi)、膦甲酸、乙二醇、血紅蛋白、肌紅蛋白、異環(huán)磷酰胺、重金屬、甲氨蝶呤、不透 射線的造影劑或鏈脲佐菌素的受試者，這些都是優(yōu)選根據(jù)本文中所述的方法監(jiān)測(cè)危險(xiǎn)性的 受試者。這份清單并不意味著具有限制的意思。在這種情況下的"預(yù)先存在"意指在獲取 受試者體液樣本時(shí)就存在所述的危險(xiǎn)因素。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)腎功能損傷、腎 功能衰弱或ARF的現(xiàn)有診斷來(lái)選擇進(jìn)行危險(xiǎn)分級(jí)的受試者。
[0038] 在其它實(shí)施方案中，本文中所述評(píng)價(jià)腎狀態(tài)的方法是診斷受試者腎損傷的方法； 即，評(píng)估受試者是否己罹患腎功能損傷、腎功能衰弱或ARF。在這些實(shí)施方案中，將測(cè)定結(jié)果 與是否出現(xiàn)腎狀態(tài)變化相關(guān)聯(lián)，所述測(cè)定結(jié)果例如為選自以下的一種或多種生物標(biāo)記物的 測(cè)定濃度：C-C基序趨化因子23、跨膜糖蛋白NMB、腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、組織蛋白酶S、轉(zhuǎn)化 生長(zhǎng)因子β -2、尿激酶型纖溶酶原激活劑、血管生成素2、基質(zhì)溶素、癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘 附分子1、肌酸激酶ΜΒ、胰島素、免疫球蛋白Μ、免疫球蛋白Ε、巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子、半乳 凝素3、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β-3、硫酸乙酰肝素、鈣粘蛋白3、補(bǔ)體C5、血小板因子4、血小板堿性 蛋白和基質(zhì)裂解素-2。以下是優(yōu)選的診斷實(shí)施方案。
[0039] 在優(yōu)選的診斷實(shí)施方案中，這些方法包括診斷是否出現(xiàn)腎功能損傷，并將測(cè)定結(jié) 果與是否出現(xiàn)這種損傷相關(guān)聯(lián)。例如，可以將每個(gè)測(cè)定濃度與閾值相比較。對(duì)于陽(yáng)向標(biāo)記 物，當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)，確定受試者出現(xiàn)腎功能損傷的可能性增大（相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃 度低于閾值時(shí)確定的可能性）；或者，當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)，可確定受試者不出現(xiàn)腎功能 損傷的可能性增大（相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)確定的可能性）。對(duì)于陰向標(biāo)記物，當(dāng)測(cè) 定濃度低于閾值時(shí)，確定受試者出現(xiàn)腎功能損傷的可能性增大（相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度高于閾 值時(shí)確定的可能性）；或者，當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)，可確定受試者不出現(xiàn)腎功能損傷的可 能性增大（相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)確定的可能性）。
[0040] 在其它優(yōu)選的診斷實(shí)施方案中，這些方法包括診斷是否出現(xiàn)腎功能衰弱，并將測(cè) 定結(jié)果與是否出現(xiàn)損傷引起的腎功能衰弱相關(guān)聯(lián)。例如，可以將每個(gè)測(cè)定濃度與閾值相比 較。對(duì)于陽(yáng)向標(biāo)記物，當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)，確定受試者出現(xiàn)損傷引起的腎功能衰弱的可 能性增大（相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)確定的可能性）；或者，當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)， 可確定受試者不出現(xiàn)損傷引起的腎功能衰弱的可能性增大（相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值 時(shí)確定的可能性）。對(duì)于陰向標(biāo)記物，當(dāng)測(cè)定濃度低于閾值時(shí)，確定受試者出現(xiàn)損傷引起的 腎功能衰弱的可能性增大（相對(duì)于當(dāng)測(cè)定濃度高于閾值時(shí)確定的可能性）；或者，當(dāng)測(cè)定濃 度高于閾值時(shí)，可確定受試者不出現(xiàn)損傷引起的腎功能衰弱的可能性增大（相對(duì)于當(dāng)測(cè)定 濃度低于閾值時(shí)確定的可能性）