專利名稱：草莓增殖培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種改良的草莓增殖培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
硝酸銨是一種強(qiáng)氧化劑，能助長火勢，與可燃物粉末混合能發(fā)生激烈反應(yīng)而爆炸； 受強(qiáng)烈震動或遇明火也會起爆；急劇加熱時也可發(fā)生爆炸；其與還原劑、有機(jī)物、易燃物如硫、磷或金屬粉末等混合可形成爆炸性混合物，是制造炸藥的原料。但因其分子中同時存在銨態(tài)氮和硝態(tài)氮，是生物生長所必須的，因此在草莓組織培養(yǎng)中被廣泛應(yīng)用；但因其存在巨大的安全隱患，市場流通受到國家有關(guān)部門的限制，給科研和生產(chǎn)帶來不便。目前現(xiàn)有的草莓增殖培養(yǎng)基為MS基本培養(yǎng)基+6-芐基腺嘌呤(BA) 0. 1 0. 5mg/ 1+谷氨酰胺100 200mg/L+糖20 30g/l+瓊脂5 9g/l，pH為5. 5 6. 0。因此，人們急需一種既能保持原有MS培養(yǎng)基的性能，又能避免使用硝酸銨的新型培養(yǎng)基。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種能避免使用硝酸銨的草莓增殖培養(yǎng)基，采用該草莓增殖培養(yǎng)基能獲得大量的草莓組培種苗。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種草莓增殖培養(yǎng)基，其為MSM基本培養(yǎng)基 +6-芐基腺嘌呤(BA) 0. 1 0. 5mg/l+谷氨酰胺100 200mg/L+糖20 30g/l+瓊脂5 9g/l, pH 為 5. 5 6. 0 ；MSM基本培養(yǎng)基為每升MSM基本培養(yǎng)基中含有398%ig的硝酸鉀、1361mg的硫酸銨、170mg的磷酸二氫鉀、370mg的硫酸鎂、440mg的氯化鈣、0. 83mg的碘化鉀、6. 2mg的硼酸、 22. 3mg的硫酸錳、8. 6mg的硫酸鋅、0. 25mg的鉬酸鈉、0. 025mg的硫酸銅、0. 025mg的氯化鈷、 IOOmg的肌醇、0. Img的鹽酸硫胺素(VBl)、0. 5mg的鹽酸吡哆醇(VB6)、0. 5mg的煙酸(VB3或 VPP) >37. 3mg的乙二胺四乙酸二鈉和27. 8mg的硫酸亞鐵，其余為蒸餾水，pH為5. 5 6. 0。本發(fā)明的具體發(fā)明過程如下1)、計算 Murshige 和 Skoog 培養(yǎng)基(MS, 1962)中 KNO3 和 NH4NO3 濃度，KNO3 濃度為 0. 0188mol/L, NH4NO3 濃度為 0. 0206mol/L,即 MS 培養(yǎng)基中含有 0. 0394mol/L 的 NO3-1 和 0. 0206mol/L 的 NH4+1。2)、尋找合適的成分來替代，從而使NCV1和NH/1的含量保持不變。這是本發(fā)明的關(guān)鍵點(diǎn)所在，因?yàn)榘l(fā)明人在發(fā)明過程在大量實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上發(fā)現(xiàn)并不是只要NO3-1和NH4+1的濃度同原有MS培養(yǎng)基中的濃度，所得的草莓增殖培養(yǎng)基就具有同等使用效果。只有本發(fā)明所特定的成分及含量才能實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的。3)、MS培養(yǎng)基中其他元素以及含量均不變。4)、配置草莓增殖培養(yǎng)基為MSM基本培養(yǎng)基+BA 0. 1 0. 5mg/l+谷氨酰胺100 200mg/L+ 糖 20 30g/l+ 瓊脂 5 9g/l, pH 為 5. 5 6. 0。
草莓增殖培養(yǎng)基的制作方法具體如下以改良后的MSM基本培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)，分別加入6-芐基腺嘌呤(BA)、谷氨酰胺、糖和瓊脂，均勻混合，利用lmol/L的KOH或lmol/L 的HCl調(diào)節(jié)pH為5. 5 6. 0 ；每IL的MSM基本培養(yǎng)基中加0. 1 0. 5mg ΒΑ、100 200mg 谷氨酰胺、20 30g糖和5 9g瓊脂。5)、上述培養(yǎng)基可以用來增殖草莓組培苗。培養(yǎng)條件為16小時光照，光照強(qiáng)度 10 30μπιΟ1πΓ2. s—1，溫度為洸 小時暗培養(yǎng)，溫度為20 22°C;上述光照和暗培養(yǎng)交替進(jìn)行。本發(fā)明的草莓增殖培養(yǎng)基選用了新型的MSM基本培養(yǎng)基，該MSM基本培養(yǎng)基既能保持原有MS基本培養(yǎng)基的性能，又能避免使用硝酸銨；因此具有安全性好的特點(diǎn)，便于規(guī)?；茝V使用。


下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的具體實(shí)施方式
作進(jìn)一步詳細(xì)說明。圖1是4種不同的草莓增殖培養(yǎng)基的使用效果對比圖；A對應(yīng)MS (即基準(zhǔn)對比例)，B對應(yīng)對比例1，C對應(yīng)對比例2，D對應(yīng)MSM (即本發(fā)明的實(shí)施例1)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1、一種草莓增殖培養(yǎng)基，為MSM基本培養(yǎng)基+BA 0.;3mg/l+谷氨酰胺 150mg/L+ 糖 25g/l+ 瓊脂 7g/l，pH 為 5. 8。制作方法如下以MSM基本培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)，分別加入6-芐基腺嘌呤(BA)、谷氨酰胺、糖和瓊脂，均勻混合，利用lmol/L的KOH或lmol/L的HCl調(diào)節(jié)pH為5. 8 ；每IL的MSM 基本培養(yǎng)基中加0. 3mg BA、150mg谷氨酰胺、25g糖和7g瓊脂。MSM基本培養(yǎng)基的成分如表1所示(其余為蒸餾水，pH為5. 5 6. 0)。表1、MSM 成分表(mg/L)
權(quán)利要求
1.草莓增殖培養(yǎng)基，其特征是草莓增殖培養(yǎng)基為MSM基本培養(yǎng)基+ 6-芐基腺嘌呤 0.廣0.5 mg/1 + 谷氨酰胺 100 200 mg/L + 糖 20 30 g/1 + 瓊脂 5 9 g/l，pH 為 5. 5 6. 0 ； 所述MSM基本培養(yǎng)基為每升MSM基本培養(yǎng)基中含有398%ig的硝酸鉀、136 Img的硫酸銨、170 mg的磷酸二氫鉀、370mg的硫酸鎂、440 mg的氯化鈣、0. 83 mg的碘化鉀、6. 2 mg的硼酸、22. 3 mg的硫酸錳、8. 6 mg的硫酸鋅、0. 25 mg的鉬酸鈉、0. 025 mg的硫酸銅、0. 025 mg的氯化鈷、100 mg的肌醇、0. 1 mg的鹽酸硫胺素、0. 5 mg的鹽酸吡哆醇、0. 5 mg的煙酸、 37. 3 mg的乙二胺四乙酸二鈉和27. 8 mg的硫酸亞鐵，其余為蒸餾水，pH為5. 5飛.0。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種草莓增殖培養(yǎng)基MSM基本培養(yǎng)基+6-芐基腺嘌呤0.1~0.5mg/l+谷氨酰胺100~200mg/L+糖20~30g/l+瓊脂5~9g/l；每升MSM基本培養(yǎng)基中含有3984mg硝酸鉀、1361mg硫酸銨、170mg磷酸二氫鉀、370mg硫酸鎂、440mg氯化鈣、0.83mg碘化鉀、6.2mg硼酸、22.3mg硫酸錳、8.6mg硫酸鋅、0.25mg鉬酸鈉、0.025mg硫酸銅、0.025mg氯化鈷、100mg肌醇、0.1mg鹽酸硫胺素、0.5mg鹽酸吡哆醇、0.5mg煙酸、37.3mg乙二胺四乙酸二鈉和27.8mg硫酸亞鐵。采用該培養(yǎng)基能獲得大量草莓組培種苗。
文檔編號A01H4/00GK102224802SQ20111009685
公開日2011年10月26日 申請日期2011年4月19日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月19日
發(fā)明者馮利, 毛碧增, 陳麗閩 申請人:浙江大學(xué)