專利名稱：：輔助鑒定具有不同千粒重性狀小麥的方法及其專用引物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種輔助鑒定具有不同千粒重性狀小麥的方法及其專用引物。
背景技術(shù)：
：小麥?zhǔn)鞘澜缟献钪匾募Z食作物之一，它提供的熱量和蛋白占人類營養(yǎng)成分的20%以上，全世界有超過35%的人口以小麥為主糧。我國的小麥種植面積、總產(chǎn)和消費量居世界首位，其產(chǎn)量約占我國糧食總產(chǎn)量的1/5。提高小麥產(chǎn)量是小麥育種的一個重要目標(biāo)。小麥的單位面積產(chǎn)量是由單位面積穗數(shù)、每穗粒數(shù)和平均粒重構(gòu)成的。千粒重在產(chǎn)量構(gòu)成因素中對產(chǎn)量的直接貢獻最大，在群體條件下提高平均單穗粒重是提高品種群體產(chǎn)量潛力的關(guān)鍵。研究表明不同類型小麥品種(多穗型、中間型和大穗型)千粒重每增加l個單位(g)，產(chǎn)量分別增加151、157和147kg。小麥產(chǎn)量的高低總是伴隨著粒重的高低而同步變化的，在增產(chǎn)年份中，粒重占增產(chǎn)因素的比重達87.4%;而在減產(chǎn)年份，因粒重下降造成產(chǎn)量下降占到94.2%。千粒重在產(chǎn)量構(gòu)成因素中受遺傳特征的影響最大，其遺傳主要受加性效應(yīng)的基因控制，廣義遺傳力高達59-80%。也有研究結(jié)果表明千粒重受三組基因控制，一些微效基因起一定輔助作用。小麥籽粒粒重受多種因素影響，其中灌漿是影響小麥生長、發(fā)育的重要生理過程，其持續(xù)時間和速率決定小麥籽粒大小或重量，但灌漿持續(xù)時間和灌漿速率受品種、環(huán)境、栽培措施等條件的影響。有研究認(rèn)為小麥籽粒最大粒重主要由灌漿速率和灌漿持續(xù)期來決定，但也有研究表明灌漿速率的影響大于灌漿持續(xù)時間。不同小麥品種籽粒粒重的差異很大，而其差異主要是由灌漿速率不同引起的，而灌漿速率主要受遺傳因素控制，是高產(chǎn)育種的重要選擇指標(biāo)。但多年來一直無法直接對籽粒灌漿性狀及其基因進行有效選擇，成為育種的瓶頸問題。中國科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院植物生理生態(tài)研究所，在篩選水稻遺傳資源的基礎(chǔ)上，通過構(gòu)建遺傳定位群體，成功分離了控制水稻籽粒發(fā)育中蔗糖運輸卸載和灌漿的關(guān)鍵功能基因GIF1，研究表明GIF1是水稻馴化過程中起重要作用的一個基因。人工選擇可以使現(xiàn)代栽培稻的GIF1基因有嚴(yán)格的組織表達特異性，有利于籽粒灌漿，使水稻產(chǎn)量提高。GIF1基因是控制蔗糖轉(zhuǎn)化酶的一種基因。光合產(chǎn)物以蔗糖的形式被運輸?shù)阶蚜Ｖ?，而轉(zhuǎn)化酶可將光合產(chǎn)物的蔗糖不可逆地裂解形成葡萄糖和果糖，植物酸性轉(zhuǎn)化酶主要有兩大類一類結(jié)合于細胞壁上，稱之為細胞壁結(jié)合的轉(zhuǎn)化酶(cellwall—boundinvertase，CWI)，另一類存在于液泡中，稱之為可溶性酸性轉(zhuǎn)化酶(solubleacidinvertase，SAI)。在所有形式的轉(zhuǎn)化酶中，不溶性轉(zhuǎn)化酶(即CWI)是庫器官形成中決定庫強的一個關(guān)鍵酶。玉米芯和胚乳中CWI活性缺失的玉米突變體，在早期籽粒形成階段，籽粒生長即明顯受到抑制，成熟時，粒重只有正常籽粒的l/5。對轉(zhuǎn)基因胡蘿卜的研究表明，降低CWI活性，植株不能形成主根。CWI在大麥籽粒形成早期的時空表達和蔗糖運輸?shù)囊恢滦?，表明其在碳水化合物分配方面起到關(guān)鍵作用。對水稻中0sCINl基因的RNA原位雜交表明，CWI在籽粒形成階段中對碳水化合物的供應(yīng)起決定作用。Sturm和Chrispeels(1990)首先從胡蘿卜中分離出了細胞壁結(jié)合轉(zhuǎn)化酶(CWI)基因，隨后在馬鈴薯、擬南芥、煙草、番茄和葡萄等植物中也分離到編碼該酶的全長或部分的核苷酸序列。目前，有關(guān)GIF基因在小麥中的克隆并沒有報道。功能標(biāo)記(Functionalmarker)是一類基于基因特征序列開發(fā)的標(biāo)記，與目標(biāo)基因共分離，大大提高了選擇的準(zhǔn)確性，在MAS中有著廣泛應(yīng)用前景。而小麥千粒重是一個數(shù)量性狀，受基因型、環(huán)境及其互作的影響。因此，克隆和開發(fā)小麥GIF基因?qū)π←湼弋a(chǎn)育種具有重要意義。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供輔助鑒定具有不同千粒重性狀小麥的方法及其專用引物。本發(fā)明提供的輔助鑒定具有不同千粒重性狀小麥的方法，包括如下步驟以小麥基因組DNA為模板，分別用引物對甲和引物對乙進行PCR擴增；如果引物對甲的擴增產(chǎn)物中具有402bp的DNA片段且引物乙的擴增產(chǎn)物中不具有404bp的DNA片段，待測小麥的基因型為TaCwi-Ala;如果引物對乙的擴增產(chǎn)物中具有404bp的DNA片段且引物甲的擴增產(chǎn)物中不具有402bp的DNA片段，待測小麥的基因型為TaCwi-Alb;基因型為TaCwi-Ala的小麥的千粒重在統(tǒng)計學(xué)上大于基因型為TaCwi-Alb的小麥品種；所述引物對甲由序列表的序列6所示DNA和序列表的序列7所示DNA組成；所述引物對乙由序列表的序列5所示DNA和序列表的序列7所示DNA組成。本發(fā)明還保護序列表的序列6所示DNA和序列表的序列7所示DNA組成的引物對甲。本發(fā)明還保護序列表的序列5所示DNA和序列表的序列7所示DNA組成的引物對乙。本發(fā)明同時保護所述引物對甲和/或所述引物對乙在制備輔助鑒定具有不同千粒重性狀小麥的試劑盒中的應(yīng)用。本發(fā)明還保護一種輔助鑒定具有不同千粒重性狀小麥的試劑盒，包括所述引物對甲和/或權(quán)利要求3所述引物對乙。所述方法，所述應(yīng)用，所述試劑盒中，所述小麥可為普通小麥。本發(fā)明還保護序列表的序列6所示DNA、序列表的序列7所示DNA和序列表的序列8所示DNA組成的引物組合物。所述方法，所述引物對甲，所述引物對乙，所述試劑盒和所述引物組合物均可應(yīng)用于小麥育種。本發(fā)明還保護如下(a)或(b)或(c)或(d)的蛋白質(zhì)(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(b)由序列表中序列3所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(c)將序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與小麥千粒重性狀相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)；(d)將序列3的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與小麥千粒重性狀相關(guān)的由序列3衍生的蛋白質(zhì)。編碼所述蛋白的基因也屬于本發(fā)明的保護范圍，所述基因是如下1)或2)或3)或4)的DNA分子1)序列表中序列2所示的DNA分子；2)序列表中序列4所示的DNA分子；3)在嚴(yán)格條件下與1)或2)限定的DNA序列雜交且編碼小麥千粒重性狀相關(guān)蛋白的DNA分子；4)與1)或2)或3)限定的DNA序列具有90%以上同源性且編碼小麥千粒重性狀相關(guān)蛋白的DNA分子。本發(fā)明所提供的蛋白及其編碼基因，與小麥籽粒粒重性狀有著緊密的相關(guān)性。本發(fā)明還提供了基于該小麥粒重高低相關(guān)蛋白基因等位變異的特異性功能標(biāo)記，利用該標(biāo)記可以對小麥粒重高低相關(guān)基因的變異進行分子標(biāo)記輔助選擇，從而培育高粒重的優(yōu)良小麥品種，避免篩選粒重較低的小麥品種。應(yīng)用本發(fā)明提供的蛋白及其編碼基因以及功能標(biāo)記輔助選擇，可在發(fā)育早期篩選小麥品種，從而優(yōu)化雜交組合，加快育種速度，降低育種成本。本發(fā)明提供的檢測小麥粒重高低的方法操作簡單，可以避免環(huán)境等因素對小麥籽粒粒重的影響、穩(wěn)定可靠，對快速小麥高產(chǎn)育種具有重要的理論意義和經(jīng)濟價值。本發(fā)明對小麥籽粒粒重的基因工程改良將起到重要作用，同時也有助于小麥籽粒粒重的遺傳和分子生物學(xué)的進一步研究，對高產(chǎn)小麥品種的培育也具有重大意義。圖1為來源于普通小麥的2個籽粒粒重相關(guān)蛋白TaCwi-Ala與TaCwi-Alb的序列對比。圖2為CWI21/CWI22標(biāo)記對14個不同粒重材料的多態(tài)性檢測。具體實施例方式以下的實施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實施例中所用的試驗材料，如無特殊說明，均為自常規(guī)生化試劑商店購買得到的。下述實施例中的％，如無特殊說明，均為質(zhì)量百分含量。以下實施例中的定量試驗，均設(shè)置三次重復(fù)實驗，結(jié)果取平均值。所有引物合成均由北京奧科生物公司完成。實施例中所用小麥材料均獲自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所的國家種質(zhì)庫。實施例1、與小麥籽粒粒重相關(guān)的蛋白及其編碼基因的獲得—、TaCwi-Ala蛋白及其編碼基因的獲得TaCwi-Ala蛋白編碼基因的獲得采取電子克隆結(jié)合常規(guī)PCR擴增的方法。根據(jù)水稻粒重相關(guān)基因GIF基因(GenBankAccessionNumber:EU095553)在小麥EST數(shù)據(jù)庫中進行BLAST檢索，將篩選得到的EST分別進行拼接，隨后根據(jù)CK206103、CD927722、CJ673133、D927242電子拼接得到的全長CWI基因，采用PrimierPrimer5軟件設(shè)計3對引物Cl、C2、C3，從小麥品種豆麥的基因組DNA中獲得真正的CWI基因序列。PCR反應(yīng)以小麥基因組DNA為模板，在MJResearchPTC-200PCR儀上進行，20ii1PCR反應(yīng)體系為模板DNA50ng，Taq酶1U(北京天根生化科技公司)，上、下游引物(5iimo1L—0各l.Oii1，dNTP(25iimo1L—"0.2ii1，10XPCR緩沖液2iil，用無菌蒸餾水補充反應(yīng)體系至20iU。PCR反應(yīng)采用步降(Touchdown)退火程序首先95°C5min;然5后95。C60s，由66。C開始，每個循環(huán)的退火溫度降低0.3。C，退火時間lmin30s，72。C2min，共40個循環(huán)；最后72°C10min，4t:保溫。PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)1.2%瓊脂糖凝膠電泳分離，采用緩沖體系為1XTAE溶液，用北京'六一'廠的DYC-34A型電泳槽，200V電壓電泳30分鐘，O.5%溴化乙錠(Ethidiumbromide,EB)染色10分鐘，蒸餾水漂洗后在MultiGeniusBio-ImagingSystem成像系統(tǒng)上用紫外燈掃描成像并存入計算機。在紫外燈下將目標(biāo)帶挖下來，克隆至pMD18-T載體上進行測序。測序由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司(http://www.sangon.com)完成。為了保證Cl、C2、C3擴增片段位于2A染色體上，每對引物都要在中國春缺體_四體系N2A-T2B、N2B-T2A和N2D-T2B中驗證，以確保其PCR擴增的基因組專一性。為防止PCR過程中和測序過程中發(fā)生堿基錯配和誤讀，每個PCR反應(yīng)和測序反應(yīng)都要重復(fù)2到4次，每一段序列只有在至少兩次測序結(jié)果完全一樣的情況下才能最終確定，否則還要繼續(xù)測定。序列比對采用DNAMAN軟件(http:〃www.lynnon.com)進行，得到用于擴增2A染色體上CWI基因全長的三對引物(表l)?；蚪M中內(nèi)含子的位置根據(jù)GIF基因的mRNA序列和基因組DNA的序列比對來確定。確定其內(nèi)含子區(qū)及起始密碼子和終止密碼子，并將外顯子進行拼接，翻譯獲得TaCwi-Ala蛋白序列。表1用于擴增小麥2A染色體上TaCwi基因全長的引物序列<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>TaCwi-Ala蛋白的序列如序列表的序列1所示，編碼基因如序列表的序列2所示。二、TaCwi-Alb蛋白及其編碼基因的獲得TaCwi-Alb蛋白及其編碼基因的獲得與TaCwi-Ala的獲得方法完全相同，所用小麥品種為洋小麥。TaCwi-Alb蛋白的序列如序列表的序列3所示，編碼基因如序列表的序列4所示。實施例2、小麥籽粒粒重性狀與基因型的相關(guān)性分析—、功能標(biāo)記引物的設(shè)計根據(jù)序列表中的序列2、序列4設(shè)計兩組引物CWI21(引物對乙；P1/P2)和CWI22(引物對甲；P3/P2)如下Pl(上游引物)5'-GTGGTGATGAGTTCATGGTTAAG-3'(序列5);P3(上游引物)5'-GGTGATGAGTTCATGGTTAAT-3'(序列6)P2(下游引物)5'-AGAAGCCCAACATTAAATCAAC-3'(序列7)。用引物對乙，可以擴增序列表中序列4所示核苷酸中404bp的DNA片段，不能擴增序列表中序列2所示核苷酸中的DNA片段；用引物對甲可以擴增序列表中序列2所示核苷酸中402bp的DNA片段，不能擴增出序列表中序列4所示核苷酸中的DNA片段。二、小麥籽粒粒重與所述基因的相關(guān)性分析材料I:192份中國冬小麥栽培品種(2001年種植于河南安陽)；材料II:117份中國冬小麥栽培品種(2008年種植于四川成都)；材料III:130份中國冬小麥農(nóng)家品種(2008年種植于四川成都)；材料IV:48份中國冬小麥農(nóng)家品種(2008年種植北京)。1、小麥籽粒千粒重的測定按GB/T5519-2008檢測小麥籽粒千粒重。2、小麥基因型的測定提取各個小麥的基因組DNA，分別按以下步驟進行檢測①以小麥基因組DNA為模板，分別用CWI21和CWI22進行PCR擴增。PCR反應(yīng)體系模板DNA50ng，Taq酶1U(北京天根生化科技公司)，上、下游引物(5iimo1L—0各lyl，dNTP(25iimo1L—"0.1，10XPCR緩沖液2yl，用無菌蒸餾水補充反應(yīng)體系至20iU。PCR反應(yīng)程序首先95。C、5min;然后95。C、lmin，58。C(CWI21)或60°C(CWI22)、lmin，72t:、lmin20s，共40個循環(huán)；最后72°C、8min。擴增產(chǎn)物于4"C保存。②將PCR擴增產(chǎn)物進行1.5%瓊脂糖凝膠電泳檢測。圖2為14個樣本的鑒定結(jié)果；泳道M表示分子量標(biāo)準(zhǔn)(Marker);泳道01至14分別為以下品種的小麥豆麥、中麥9號、川麥39、SW18390、內(nèi)麥8、山農(nóng)664、川麥43，鳳麥24、石4185、臨旱917、豫麥21、綿陽26、川農(nóng)16、揚麥10;A為CWI22擴增結(jié)果，B為CWI21擴增結(jié)果。如果用引物對乙擴增出404bp的條帶，而同時用引物對甲擴增不出402bp的條帶，說明基因型為TaCwi-Alb;如果引物對甲擴增出402bp的條帶，而用引物對乙沒有擴增出404bp的條帶，說明基因型為TaCwi-Ala。材料I的192個樣本中，146個樣本的基因型為TaCwi-Ala，46個樣本基因型為TaCwi-Alb。材料I中的小麥的品種、來源、千粒重測定結(jié)果和基因型分析結(jié)果見表2。材料II的117個樣本中，102個樣本的基因型為TaCwi-Ala，15個樣本的基因型為TaCwi-Alb。材料II中的小麥的品種、來源、千粒重測定結(jié)果和基因型分析結(jié)果見表3。材料III的130個樣本中，5個樣本的基因型為TaCwi-Ala，125個樣本的基因型為TaCwi-Alb。材料III中的小麥的品種、來源、千粒重測定結(jié)果和基因型分析結(jié)果見表4。材料IV的48個樣本中，5個樣本的基因型為TaCwi-Ala，43個樣本的基因型為TaCwi-Alb。材料IV中的小麥的品種、來源、千粒重測定結(jié)果和基因型分析結(jié)果見表5。表2材料I192份中國冬小麥品種千粒重測定結(jié)果和基因型分析結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>基因型分析結(jié)果a:TaCwi-Ala;b:TaCwi-Alb千粒重(g)108揚麥1337.7109省預(yù)26b37.0110省預(yù)6036.0111省預(yù)4435.0112川育1232.6113揚麥9號30.0114揚麥15828.9115揚麥10號b27.3116綿陽1126.3117繁六25.8表4材料III中130份小麥品種千粒重測定結(jié)果和基因型分析結(jié)果編號品種名稱基因型分析結(jié)果a:TaCwi-Ala;b:TaCwi-Alb千粒重(g)1彰明魚尾蘭麥a47.02平武一根麥b45.53小紅麥b41.54白老來變b40.55紅春麥b40.06金黃麥b40.024<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>對不同基因型小麥的籽粒粒重進行統(tǒng)計分析，發(fā)現(xiàn)有顯著差異，見表6。表6小麥等位變異與籽粒粒重高低關(guān)系的統(tǒng)計分析結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table>通過小麥千粒重與所述基因的相關(guān)性分析，得出以下結(jié)論以小麥基因組DNA為模板，分別用引物甲和引物對進行擴增，如果用引物對乙擴增出404bp的條帶，而同時用引物對甲擴增不出402bp的條帶，說明基因型為TaCwi-Alb，具有低千粒重；如果用引物對甲擴增出402bp的條帶，而用引物對乙沒有擴增出404bp的條帶，說明基因型為TaCwi-Ala，具有高千粒重。基因型為TaCwi-Ala的小麥品種的千粒重在統(tǒng)計學(xué)上大于基因型為TaCwi-Alb的小麥品種。權(quán)利要求輔助鑒定具有不同千粒重性狀小麥的方法，包括如下步驟以小麥基因組DNA為模板，分別用引物對甲和引物對乙進行PCR擴增；如果引物對甲的擴增產(chǎn)物中具有402bp的DNA片段且引物乙的擴增產(chǎn)物中不具有404bp的DNA片段，待測小麥的基因型為TaCwi-A1a；如果引物對乙的擴增產(chǎn)物中具有404bp的DNA片段且引物甲的擴增產(chǎn)物中不具有402bp的DNA片段，待測小麥的基因型為TaCwi-A1b；基因型為TaCwi-A1a的小麥的千粒重在統(tǒng)計學(xué)上大于基因型為TaCwi-A1b的小麥品種；所述引物對甲由序列表的序列6所示DNA和序列表的序列7所示DNA組成；所述引物對乙由序列表的序列5所示DNA和序列表的序列7所示DNA組成。2.序列表的序列6所示DNA和序列表的序列7所示DNA組成的引物對甲。3.序列表的序列5所示DNA和序列表的序列7所示DNA組成的引物對乙。4.權(quán)利要求2所述引物對甲和/或權(quán)利要求3所述引物對乙在制備輔助鑒定具有不同千粒重性狀小麥的試劑盒中的應(yīng)用。5.輔助鑒定具有不同千粒重性狀小麥的試劑盒，包括權(quán)利要求2所述引物對甲和/或權(quán)利要求3所述引物對乙。6.如權(quán)利要求1所述方法，如權(quán)利要求4所述應(yīng)用，如權(quán)利要求5所述試劑盒，其特征在于所述小麥為普通小麥。7.序列表的序列6所示DNA、序列表的序列7所示DNA和序列表的序列8所示DNA組成的引物組合物。8.權(quán)利要求1所述方法，權(quán)利要求2所述引物對甲，權(quán)利要求3所述引物對乙，權(quán)利要求5所述試劑盒或權(quán)利要求7所述引物組合物在小麥育種中的應(yīng)用。9.如下(a)或(b)或(c)或(d)的蛋白質(zhì):(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(b)由序列表中序列3所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(c)將序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與小麥千粒重性狀相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)；(d)將序列3的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與小麥千粒重性狀相關(guān)的由序列3衍生的蛋白質(zhì)。10.編碼權(quán)利要求9所述蛋白質(zhì)的基因，是如下1)或2)或3)或4)的DNA分子1)序列表中序列2所示的DNA分子；2)序列表中序列4所示的DNA分子；3)在嚴(yán)格條件下與1)或2)限定的DNA序列雜交且編碼小麥千粒重性狀相關(guān)蛋白的DNA分子；4)與l)或2)或3)限定的DNA序列具有90X以上同源性且編碼小麥千粒重性狀相關(guān)蛋白的DNA分子。全文摘要本發(fā)明公開了一種輔助鑒定具有不同千粒重性狀小麥的方法及其專用引物。本發(fā)明提供的方法，包括如下步驟以小麥基因組DNA為模板，分別用引物對甲和引物對乙進行PCR擴增；如果引物對甲的擴增產(chǎn)物中具有402bp的DNA片段且引物乙的擴增產(chǎn)物中不具有404bp的DNA片段，待測小麥的基因型為TaCwi-A1a；如果引物對乙的擴增產(chǎn)物中具有404bp的DNA片段且引物甲的擴增產(chǎn)物中不具有402bp的DNA片段，待測小麥的基因型為TaCwi-A1b；基因型為TaCwi-A1a的小麥的千粒重在統(tǒng)計學(xué)上大于基因型為TaCwi-A1b的小麥品種。本發(fā)明可以用于培育高千粒重的優(yōu)良小麥品種，避免篩選千粒重較低的小麥品種?？稍诎l(fā)育早期篩選小麥品種，從而優(yōu)化雜交組合，加快育種速度，降低育種成本。文檔編號C12N15/29GK101768643SQ20101012775公開日2010年7月7日申請日期2010年3月17日優(yōu)先權(quán)日2010年3月17日發(fā)明者何中虎,夏先春,馬冬云申請人:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所