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      一種異香豆素類(lèi)化合物的制備方法與作為抗菌劑的應(yīng)用的制作方法

      文檔序號(hào):518700閱讀:257來(lái)源:國(guó)知局
      一種異香豆素類(lèi)化合物的制備方法與作為抗菌劑的應(yīng)用的制作方法
      【專(zhuān)利摘要】一種異香豆素類(lèi)化合物的制備方法與作為抗菌劑的應(yīng)用,制備時(shí)先在菌種培養(yǎng)基中對(duì)海洋真菌Eurotium sp.(HM991283)進(jìn)行菌種培養(yǎng);再在發(fā)酵培養(yǎng)基中對(duì)真菌進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng);將發(fā)酵液和菌體分離后,發(fā)酵液用乙酸乙酯,萃取液減壓濃縮得到發(fā)酵液浸膏;菌體用甲醇浸提,減壓濃縮得到菌體浸膏;合并發(fā)酵液浸膏和菌體浸膏,進(jìn)行色譜分離,得到上述異香豆素類(lèi)化合物。本發(fā)明提供一種抗菌劑,其特征在于以本發(fā)明的異香豆素類(lèi)化合物或其鹽作為有效成分,用于預(yù)防或治療由表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、蠟狀芽孢桿菌、副溶血弧菌、鰻弧菌或大腸桿菌引起的疾病。
      CGMCC No.7991
      2013.08.12
      【專(zhuān)利說(shuō)明】一種異香豆素類(lèi)化合物的制備方法與作為抗菌劑的應(yīng)用

      【技術(shù)領(lǐng)域】
      [0001] 本發(fā)明涉及一種異香豆素類(lèi)化合物的制備方法與作為抗菌劑的應(yīng)用。

      【背景技術(shù)】
      [0002] 近年來(lái),由于抗菌藥物的不合理使用,細(xì)菌的耐藥性已經(jīng)成為一個(gè)異常嚴(yán)峻的問(wèn) 題。世界衛(wèi)生組織(WHO)指出,2010年"超級(jí)細(xì)菌"的出現(xiàn)表明細(xì)菌耐藥性的飛速進(jìn)展,對(duì) 人類(lèi)生命健康帶來(lái)極大威脅。為了減少細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生,急需開(kāi)發(fā)新的高敏抗菌藥物,以 提高臨床用藥的有效性。海洋高鹽、高壓、低光照等條件使海洋微生物能夠產(chǎn)生大量結(jié)構(gòu)新 穎、活性獨(dú)特的次級(jí)代謝產(chǎn)物,其中許多化合物具有抗菌活性,為尋找潛在的抗菌藥物先導(dǎo) 化合物提供了重要來(lái)源。頭孢菌素(Cephalosporin)是繼青霉素后臨床上廣泛應(yīng)用的一種 抗生素,其最初發(fā)現(xiàn)的來(lái)源正是海洋微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物。近年來(lái),隨著海洋天然藥物化學(xué) 的發(fā)展,越來(lái)越多的抗菌活性化合物從海洋微生物中不斷分離獲得,為尋找新型抗菌劑提 供了物質(zhì)基礎(chǔ)。采用人工培養(yǎng)發(fā)酵的方法,從海洋微生物中獲得有重要抗菌活性的次級(jí)代 謝產(chǎn)物,具有環(huán)境友好、可持續(xù)發(fā)展等特點(diǎn),能有效解決藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中的藥源等關(guān)鍵性問(wèn) 題,因此具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。


      【發(fā)明內(nèi)容】

      [0003] 本發(fā)明的目的在于提供一種來(lái)源于海洋真菌的異香豆素類(lèi)化合物的制備方法與 作為抗菌劑的應(yīng)用,它能滿足現(xiàn)有技術(shù)的上述需求。菌種保藏信息:保藏單位名稱:中國(guó)微 生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心;保藏單位地址:北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3 號(hào),中國(guó)科學(xué)院微生物研究所;保藏日期:2013年8月12日;保藏編號(hào):CGMCC7991分類(lèi)命 名:Eurotium sp. 〇
      [0004] -種式I結(jié)構(gòu)的異香豆素類(lèi)化合物或其鹽:
      [0005]

      【權(quán)利要求】
      1. 一種式I結(jié)構(gòu)的異香豆素類(lèi)化合物的制備方法,其特征在于包括以下步驟:先在 菌種培養(yǎng)基中對(duì)海洋真菌Eurotium sp. (HM991283)進(jìn)行菌種培養(yǎng),再在發(fā)酵培養(yǎng)基中對(duì) 上述海洋真菌進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),將發(fā)酵液和菌體分離后,發(fā)酵液用乙酸乙酯萃取2?6次, 萃取液減壓濃縮得到發(fā)酵液浸膏;菌體用甲醇浸提2?6次,減壓濃縮得到菌體浸膏; 合并發(fā)酵液浸膏和菌體浸膏,進(jìn)行色譜分離,得到式I化合物;其中式I化合物結(jié)構(gòu)為:

      R2各自獨(dú)立地為H、 且R2中有 , 一個(gè)為H ;R3、R4各自獨(dú)立地為H、OCH3,且R3、R 4中有一個(gè)為H ;其中所述的菌種培養(yǎng)基中含 有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、瓊脂、粗海鹽、水;所述的發(fā)酵培養(yǎng)基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋 白胨、粗海鹽、水;所述的色譜分離為正相硅膠柱色譜分離和高效液相手性色譜分離。
      2. 如權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于所述的菌種培養(yǎng)基含有葡萄糖 0· 1% -KXO %、酵母膏 0.01 % -4 %、蛋白胨 0.01 % -4 %、瓊脂 0· 1% -6.0 %、粗海鹽 0.05% -10%,其余為水,上述百分含量均為重量百分比;培養(yǎng)溫度為5-45°C ;培養(yǎng)時(shí)間為 3-10 天。
      3. 如權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于所述的發(fā)酵培養(yǎng)基含有葡萄糖 0· 1% -10.0%、酵母膏 0.01% -4%、蛋白胨 0.01% -4%、粗海鹽 0.05% -10%,其余為水, 上述百分含量均為重量百分比;培養(yǎng)溫度為5-45°C ;培養(yǎng)時(shí)間為5-50天。
      4. 如權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于所述的正相硅膠柱色譜分離中采用的固 定相為200?300目硅膠,流動(dòng)相為10% -60 %的乙酸乙酯-石油醚混合溶劑;所述的高效 液相手性色譜分離中采用的色譜柱為T(mén)BB手性色譜柱Kromasil,5 μ m,150X4. 6mm,流動(dòng)相 為5% -15%的異丙醇-正己烷混合溶劑;上述混合溶劑百分比均為體積百分比。
      5. -種抗菌劑,其特征在于包括權(quán)利要求1制備的式I化合物或其鹽作為有效成分。
      6. 權(quán)利要求1制備的式I化合物或其鹽在制備預(yù)防和/或治療由表皮葡萄球菌、金黃 色葡萄球菌、蠟狀芽孢桿菌、副溶血弧菌、鰻弧菌或大腸桿菌引起的疾病的藥物中的應(yīng)用。
      【文檔編號(hào)】C12P17/06GK104230874SQ201310429589
      【公開(kāi)日】2014年12月24日 申請(qǐng)日期:2013年9月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月11日
      【發(fā)明者】王長(zhǎng)云, 邵長(zhǎng)倫, 陳敏 申請(qǐng)人:中國(guó)海洋大學(xué)
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