專利名稱：：白細(xì)胞三分類試劑的配制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種將血液中的白細(xì)胞分成淋巴球、中性白細(xì)胞和其他白細(xì)胞三個亞類的試劑的配制方法。對白細(xì)胞的檢測結(jié)果，被作為醫(yī)院臨床診斷和治療的指導(dǎo)，一直受到重視，老法檢測是用血液涂片，固定和染色，在高倍顯微鏡下目測計(jì)數(shù)。本世紀(jì)八十年代以來，研制出電阻式自動分析儀，如美國西科亞—特勒公司生產(chǎn)的CELL-DYN610型分析儀等，一次可測8個項(xiàng)目。但儀器所用的溶血劑、稀釋劑都需進(jìn)口。白細(xì)胞三分類試劑大多采用十二烷基三甲基氯化銨作溶血劑、氰化鉀作絡(luò)合劑配制。如US3874852(Apr.1.1975)公布的由1L水、0.25gKCN、35gC12H25N(CH3)3Cl配制。US4346018(Aug.24.1982)公布的由40-70g/L(最佳60g/L)C12H25N(CH3)3Cl(50％溶液)、4-7g/L(最佳6g/L)C12H25N(CH3)3Br、0.25-0.5g/L(最佳0.3g/L)KCN、H2O稀釋至1升配制成。US4485175(NOV.27.1984)公布的由40-70g/L(最佳60g/L)C12H25N(CH3)3Cl、4-7g/L(最佳6g/L)C12H25N(CH3)3Br、0.25-0.5g/L(最佳0.3g/L)KCN、H2O稀釋至1升配制成。上述文件均只介紹了十二烷基三甲基氯化銨、氰化鉀等組分，對后續(xù)工序沒有予以介紹。本發(fā)明的目的旨在提供一種白細(xì)胞三分類試劑的配制方法，所配出的試劑可適于CELL-DYN610、1700型血液分析儀使用。本發(fā)明目的的實(shí)現(xiàn)方式為，白細(xì)胞三分類試劑的配制方法，試劑由十二烷基三甲基氯化銨、氰化鉀配制而成。每升試劑取30-35g十二烷基三甲基氯化銨、0.4-0.5g氰化鉀，用雙蒸水稀釋至1升，用三羥甲基甲胺緩沖溶液調(diào)PH＝9±0.2。血液中加入白細(xì)胞三分類試劑后，紅細(xì)胞迅速腫脹而溶血，白細(xì)胞由于超微結(jié)構(gòu)與紅細(xì)胞不同，它們在溶血劑低滲溶液中，可發(fā)生收縮，使體積減小。幾個亞類的白細(xì)胞，收縮的快慢有差異，淋巴細(xì)胞迅速，中性細(xì)胞較慢，其他白細(xì)胞則在二者之間。這些收縮快慢不同的顆粒通過儀器中的微孔時(shí)，就會產(chǎn)生脈沖信號，經(jīng)電腦處理轉(zhuǎn)換成各種參數(shù)。為此對溶血劑的組成、含量及其溶液的PH值，要求非常嚴(yán)格。本發(fā)明十二烷基三甲基氯化銨、氰化鉀配制成后，加緩沖液調(diào)節(jié)PH值，試劑使用可靠。武漢空軍醫(yī)院對用本制備方法配制的白細(xì)胞三分類試劑作了有關(guān)測試，其測試結(jié)果見附表，沙丘圖見附圖。血樣有濃血樣、稀血樣，對比試劑為進(jìn)口試劑的ASK試劑。附表<tablesid="table1"num="001"><tablewidth="900">NO血樣溶血劑劑量WBC(g/L)LYMGRANHGB(g/L)g/L％Lg/L％g1濃血樣ASK1mL15.54.327.811.272.21672自制原液0.5mL15.74.126.311.573.71723原液∶稀釋劑(1∶1)1mL15.03.925.911.174.11644原液∶雙蒸水(1∶1)1mL15.54.326.411.373.61675稀血樣ASK1mL11.03.733.47.466.61146自制原液0.5mL11.33.329.18.070.91167原液稀釋劑(1∶1)1mL10.93.128.37.871.71118原液∶雙蒸水(1∶1)1mL10.93.330.17.669.6112</table></tables>圖1-8分別為1-8號沙丘圖譜。本配制方法操作簡單，所得試劑可用于CELL-DYN610、1700型血液分析僅等儀器。權(quán)利要求1.白細(xì)胞三分類試劑的配制方法，試劑由十二烷基三甲基氯化銨、氰化鉀配制而成，其特征在于每升試劑取30-35g十二烷基三甲基氯化銨、0.4-0.5g氰化鉀，用雙蒸水稀釋至1升，用三羥甲基甲胺緩沖溶液調(diào)PH＝9±0.2。全文摘要白細(xì)胞三分類試劑的配制方法,采用十二烷基三甲基氯化銨作溶血劑、氰化鉀作絡(luò)合劑,而后用雙蒸水稀釋,并用三羥甲基甲胺調(diào)pH值配制而成。本配制方法操作簡單、所得的試劑適用于CELL－DYN610、1700型血液分析儀等儀器。將血液中的紅細(xì)胞溶血、白細(xì)胞分成淋巴球、中性和其他白細(xì)胞三個亞類。文檔編號G01N33/50GK1178324SQ97109190公開日1998年4月8日申請日期1997年8月1日優(yōu)先權(quán)日1997年8月1日發(fā)明者吳萱階,吳桐,吳稚敏,齊化昌申請人:吳萱階