一種食用菌多糖和富硒米蛋白肽復(fù)配制劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種食用菌多糖和富硒米蛋白肽復(fù)配制劑及其制備方法,所述制劑包括55~70 wt%的食用菌多糖粉和30~45 wt%的大米富硒蛋白粉,所述制備方法包括食用菌多糖的超聲提取、大米富硒蛋白的制備和按照上述的配比比例將制得的食用菌多糖粉、大米富硒蛋白粉進(jìn)行營養(yǎng)復(fù)配,用精密膠囊填充板對(duì)膠囊進(jìn)行填充,復(fù)配膠囊成品。本發(fā)明有效利用了米糠資源又起到了強(qiáng)化硒元素的作用,既可以補(bǔ)充食用菌多糖的抗氧化等活性較弱缺點(diǎn),又可以消除大米富硒蛋白肽在免疫活性方面的不足,從而可以使各種多糖與富硒蛋白肽的生物效應(yīng)相互配合,滿足現(xiàn)代人群對(duì)功能保健產(chǎn)品多方面的需求。
【專利說明】
一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及保健食品技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]食藥用菌是人們?nèi)粘I畹闹匾参镄缘鞍缀蜖I養(yǎng)要素來源之一,其功能倍受重視。常見的有:靈芝、香菇、猴頭菇、云芝、金針菇、草菇、雙孢蘑菇、木耳、銀耳、杏鮑菇等。食藥用菌栽培工藝成本較低、味道鮮美、營養(yǎng)豐富,含有豐富的氨基酸、蛋白質(zhì)、糖類、維生素、礦質(zhì)元素、核甘酸等多種營養(yǎng)成分,是我國農(nóng)業(yè)中的一種重要產(chǎn)業(yè),也是種植業(yè)中僅次于糧、棉、油、果、菜的第六大產(chǎn)業(yè)。我國是世界食藥用菌生產(chǎn)第一大國,據(jù)統(tǒng)計(jì),2006年全國食藥用菌生產(chǎn)總量已達(dá)1400萬噸,2007年突破1500萬噸,年創(chuàng)產(chǎn)值約600億元人民幣,占世界總產(chǎn)量的70%以上。近年來,已有現(xiàn)代醫(yī)藥學(xué)研究表明某些食藥用菌因具有廣泛的藥用價(jià)值而被廣泛應(yīng)用,其功能主要有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫水平,對(duì)肝臟、心血管系統(tǒng)的保護(hù)作用,防癌、抗病毒、抗菌消炎作用,具有止咳祛痰、健胃助消化、通便利尿作用和降血壓作用等。食藥用菌營養(yǎng)保健價(jià)值極高,富含豐富的營養(yǎng)功能成分。隨著食藥用菌的營養(yǎng)成分、化學(xué)成分、生物活性及其作用機(jī)制不斷被揭示,其食用價(jià)值、保健功能和藥用價(jià)值倍受重視。大量研究表明,食藥用菌含有豐富的多糖、功能性蛋白、三萜、黃酮、多酚、皂苷、核苷等具有生物活性的化合物,具有增強(qiáng)免疫力,緩解體力疲勞、輔助降血脂、延緩衰老等功效,且成本相對(duì)低廉。在國外,一些食藥用菌多糖已被開發(fā)成提高免疫力的膠囊和片劑產(chǎn)品,也有一些被開發(fā)成功能食品飲料的添加劑。在多種食藥用菌中含有的皂苷、萜類、多酚類等物質(zhì),具有明顯的降血脂效果。特別是香菇中含有eritadenine活性成分可降低血漿脂質(zhì)、膽固醇和甘油三酯。此外,食藥用菌含有的黃酮類物質(zhì)對(duì)抗氧化、抗脂質(zhì)過氧化、降血糖、保肝及抑癌和防癌具有一定的預(yù)防和輔助治療作用。
[0003]目前國內(nèi)以食藥用菌功能因子為原料開發(fā)的功能性食品數(shù)量有限,市場份額較少,且功效成分不明確,質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不完善,這就在很大程度上限制了食藥用菌功能性食品開發(fā)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。在我國食藥用菌產(chǎn)業(yè)中,精深加工是最薄弱的環(huán)節(jié),其技術(shù)、加工設(shè)備都遠(yuǎn)遠(yuǎn)落后于發(fā)達(dá)國家,目前,大部分加工企業(yè)還停留在保鮮、烘干、鹽漬等粗加工的層次,產(chǎn)品質(zhì)量差異大,產(chǎn)品附加值低,無法適應(yīng)國內(nèi)外市場對(duì)食品安全和營養(yǎng)保健的要求。食藥用菌加工技術(shù)研究和開發(fā)滯后的局面使得我國食藥用菌產(chǎn)業(yè)在國際市場的競爭中處于劣勢,僅以數(shù)量占優(yōu),因安全性問題、質(zhì)量問題的貿(mào)易糾紛不斷,產(chǎn)品的價(jià)格不高,無法提升產(chǎn)業(yè)水平。同時(shí),食藥用菌產(chǎn)業(yè)的整體創(chuàng)新能力不足,新產(chǎn)品和相關(guān)技術(shù)的儲(chǔ)備嚴(yán)重匱乏。目前,國內(nèi)以食藥用菌為原料開發(fā)的功能食品大部分是免疫調(diào)節(jié)的功能性食品,其功能因子主要是活性多糖。但現(xiàn)在國家批準(zhǔn)的以多糖為功能因子的保健產(chǎn)品均是多糖混合物,多糖的含量一般都低于30%?,F(xiàn)有研究已發(fā)現(xiàn)多種食藥用菌多糖具有調(diào)節(jié)免疫、抗氧化、降血糖、降血壓等功能,但相關(guān)深入和系統(tǒng)的研究工作仍然不足,多糖作用機(jī)制仍不明確。因此,加大食藥用菌類多糖相關(guān)深加工產(chǎn)品科研力度與產(chǎn)業(yè)化步伐是十分必要的。
[0004]砸(Selenium)是人類和動(dòng)物生長發(fā)育所必需的一種微量元素,砸和砸蛋白具有抗氧化作用、增強(qiáng)機(jī)體免疫能力和預(yù)防多種疾病等生物學(xué)功能。然而,我國有73%的土壤砸濃度低于0.02mg/kg,屬于缺砸和低砸地區(qū),導(dǎo)致了食物中砸含量過低。第二次膳食調(diào)查表明人群攝入砸為26mg/kg,遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于RDA推薦的50-200mg/kg。流行病調(diào)查表明我國江蘇和黑龍江省的肝癌和克山病的發(fā)病率均和膳食低砸有關(guān),膳食添加砸后,癌癥的發(fā)生率和死亡率顯著降低。補(bǔ)砸對(duì)于提高人民健康水平具有重大的意義。天然食物中的砸不足以滿足人體的正常需要,經(jīng)濟(jì)、高效、安全的富砸食品是人類補(bǔ)砸的有效途徑。盧良恕、李振聲等院士指出,提高食物鏈砸水平是從源頭調(diào)控砸營養(yǎng)和預(yù)防有關(guān)砸缺乏疾病的根本出路,并呼吁加強(qiáng)富砸農(nóng)產(chǎn)品開發(fā),通過普通作物生產(chǎn)將砸有機(jī)化,建立日常食物攝取的人類砸營養(yǎng)模式。富砸農(nóng)產(chǎn)品技術(shù)的開發(fā),為缺砸地區(qū)人群提供了一條切實(shí)可行的食物補(bǔ)砸途徑。由于普通食品含砸量較低,通過食用各類食物已不能滿足人體砸攝入量。我國從八十年代起開始通過無機(jī)砸的強(qiáng)化鹽來提高人體砸的攝入量。但大量研究證明無機(jī)砸的直接添加引起機(jī)體細(xì)胞的損傷。國內(nèi)外學(xué)者開始尋求一種高砸含量生物活性較高但細(xì)胞毒性低的化合物和食品。與硫同化途徑相似,植物能將土壤中的無機(jī)砸轉(zhuǎn)化為有機(jī)砸化合物。九十年代初期,美國學(xué)者Ip和Lisk控制亞砸酸鹽的濃度和施用頻率成功的培植出含砸量為100-1300 g kg-1(干物質(zhì))的富砸大蒜。國外相繼研究開發(fā)出富砸甘藍(lán)、洋蔥、蔥類、土豆、麥芽和小麥。國內(nèi)也于九十年代初期開始富砸植物的研究,以提高人群的砸攝入量。開發(fā)出了富砸水稻、富砸大豆、富砸螺旋藻、富砸靈芝、富砸麥芽和富砸茶葉,植物的品質(zhì)得到顯著改善,含砸量顯著增高,這對(duì)缺砸地區(qū)人群補(bǔ)砸和預(yù)防各類腫瘤的發(fā)生有著重要的意義。
[0005]水稻是世界上最重要的農(nóng)作物之一,我國常年水稻種植面積4.5億畝左右,總產(chǎn)
1.9億噸左右,占全國糧食作物種植面積的30%和總產(chǎn)量的40%。全國有60%以上人口以大米為主食,年消費(fèi)稻谷近1.8億噸。因此,大米對(duì)于以其為主食的人群來說,是一種很重要的膳食砸來源。當(dāng)前,稻米的生物強(qiáng)化富砸技術(shù)主要集中在以下三個(gè)方面:(I)通過施用外源砸來提高稻米中的砸含量;(2)篩選出富砸親本,選育出富砸稻米品種;(3)對(duì)稻米中砸的遺傳性進(jìn)行分析。同時(shí),在富砸水稻開發(fā)應(yīng)用方面,主要是采用增施外源砸的方法來提高稻米中砸含量。依據(jù)稻米對(duì)微量元素砸的生理吸收及代謝的特點(diǎn),研究并開發(fā)出容易被稻米吸收的富砸肥,通過土壤根部施加砸肥或葉面噴施砸肥,提高砸元素在稻米籽粒部位的積累,生產(chǎn)出砸含量明顯高于對(duì)照組的富砸稻米。在稻米種植期間施加富砸肥料,不僅可提高稻米中砸的含量,還能提高稻米產(chǎn)量并改善其品質(zhì),同時(shí)增強(qiáng)稻米抗逆性及減輕土壤中重金屬對(duì)稻米的毒害作用。魏丹等的實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,在缺砸地區(qū)施以一定濃度一定量的砸肥料,不但可提高稻米籽粒的砸含量,并且稻米產(chǎn)量也可提高8.1%至18.0%。稻米施加富砸肥料后,可增加其抗病、抗早、抗寒、抗氧化、解藥害、解霜凍等功能。有研究發(fā)現(xiàn)葉面噴施砸肥可同時(shí)增強(qiáng)稻米幼苗的SOD抗氧化酶和POD抗氧化酶的活性。砸元素還能有效改善稻米品質(zhì),因其能影響稻米機(jī)體內(nèi)某些有機(jī)化合物的水平。周鑫斌等通過噴施亞砸酸鈉,使富砸稻米籽粒的砸含量在0.225至0.586 mg/kg之間,是對(duì)照組的8至10倍,其中有機(jī)砸含量占總砸的90%。在水稻灌漿期進(jìn)行葉面噴施砸肥已證明可顯著提高稻米中的砸含量,并且富砸稻米的水提物與砸的含量成劑量關(guān)系且具有較高抗氧化性。有動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果表明,小鼠喂養(yǎng)富砸稻米后GPx酶活性有明顯的提高,且具有良好的抗突變作用。為了進(jìn)一步了解富砸稻米中砸在體內(nèi)和體外表現(xiàn)的活性機(jī)理,需研究富砸稻米中砸存在的形態(tài)。有學(xué)者利用二氨基萘熒光分析法測定有機(jī)砸的含量,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,富砸稻米中有機(jī)砸含量大于99%,此外,砸代甲硫氨酸(SeMet)占有機(jī)砸的50%左右。Zhang等用酶水解法提取富砸稻米中砸代氨基酸,反相離子對(duì)HPLC-1CPMS檢測出了一個(gè)主要的未知峰,然而并未發(fā)現(xiàn)砸代甲硫氨酸(SeMet),造成此結(jié)果的原因可能是水解時(shí)間過長致使SeMet被氧化。williams等采用μ-XANESU射線吸收近邊結(jié)構(gòu))技術(shù)對(duì)富砸稻米中砸的形態(tài)進(jìn)行分析和鑒定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,富砸稻米中除含有39.2% SeMet外,還含有55.3%的砸甲基半胱氨酸(MeSeCys),同時(shí),該作者指出砸的形態(tài)分析需要不同方法驗(yàn)證。
[0006]大米蛋白是一種優(yōu)質(zhì)的植物蛋白,經(jīng)過酶水解后,不僅不會(huì)減少蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價(jià)值,還能獲得比原來蛋白質(zhì)更多的具有活性多肽和氨基酸。由大米副產(chǎn)物米渣制備獲得的生物活性肽具有抗氧化作用、調(diào)節(jié)免疫力、輔助降低血壓、減輕動(dòng)脈粥樣硬化和增強(qiáng)食品風(fēng)味等功能。多數(shù)研究證明大米蛋白水解物具有清除DPPH自由基的能力,而且其清除能力與大米蛋白水解物的濃度之間存在劑量-效應(yīng)關(guān)系。Zhang等從通過5種不同蛋白酶水解大米蛋白,并分離純化獲得2種高活性抗氧化肽,并用MALD1-T0F(基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜)鑒定出一級(jí)結(jié)構(gòu),分別是959.5 Da的Phe-Arg-Asp-Glu-His-Lys-Lys和 1002.5 Da的Lys-His-Asp-Arg-Gly-Asp-Glu-Phe肽片段。大米活性肽的免疫活性也已經(jīng)被多數(shù)研究證明,目前已被我國衛(wèi)生部批準(zhǔn)的具有調(diào)節(jié)免疫作用的功能食品。Chen等通過人體白血病細(xì)胞U937模型的建立,證明從大米中獲得的清蛋白具有激活人體抗白血病的免疫應(yīng)答功能。在大米清蛋白研究中,Takahashi等已經(jīng)分離獲得一種大米活性肽Oryzatensin,結(jié)構(gòu)為Gly-Tyr-Pro-Met-Tyr-Pro- Leu-Arg,具有免疫調(diào)節(jié)活性,在濃度為I ymol/L時(shí),吞.作用明顯,吞噬指數(shù)為控制值的1.5倍。根據(jù)蛋白質(zhì)互補(bǔ)理論,不同來源的食物蛋白按一定比例混合互相補(bǔ)充,可提高其營養(yǎng)價(jià)值。1973年,世界衛(wèi)生組織(WHO)和聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)提出了評(píng)價(jià)蛋白質(zhì)營養(yǎng)的必需氨基酸模式。趙江等采用化學(xué)評(píng)分、氨基酸評(píng)分和氨基酸比值系數(shù)法等國際通用的營養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)方法,分別測定了蛋白粉中的乳清濃縮蛋白和大豆分離蛋白的粗蛋白含量,并測定了其氨基酸組成,同時(shí)對(duì)它們的營養(yǎng)價(jià)值進(jìn)行了全面的評(píng)價(jià)。劉芳等用模糊識(shí)別法和氨基酸比值系數(shù)法,對(duì)3種刺槐葉蛋白的氨基酸組成及含量進(jìn)行了分析,并對(duì)這3種蛋白的營養(yǎng)價(jià)值進(jìn)行了全面評(píng)價(jià)和比較。郭潔強(qiáng)等用含有相應(yīng)強(qiáng)化比例的氨基酸的脫脂豆粉補(bǔ)充大米并進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn),但實(shí)驗(yàn)中蛋白質(zhì)消化率較低,要提高大豆的利用率,應(yīng)全面考慮其氨基酸組成及加工工藝等問題。
[0007]因此,亟需提供一種新的技術(shù)方案解決上述食用菌多糖和大米富砸蛋白肽的營養(yǎng)復(fù)配問題,即一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑及其制備方法。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0008]、要解決的問題
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題,本發(fā)明提供一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑及其制備方法,通過將食用菌中多糖組分和大米中富砸蛋白肽復(fù)配,既有效利用了米糠資源又起到了強(qiáng)化砸元素的作用,既可以補(bǔ)充食用菌多糖的抗氧化等活性較弱缺點(diǎn),又可以消除大米富砸蛋白肽在免疫活性方面的不足,從而可以使各種多糖與富砸蛋白肽的生物效應(yīng)相互配合,滿足現(xiàn)代人群對(duì)功能保健產(chǎn)品多方面的需求。
[0009]、技術(shù)方案為了解決上述問題,本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下:
所述的一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑,所述制劑包括55?7O wt%的食用菌多糖粉和30?45 wt%的大米富砸蛋白粉。
[00?0]優(yōu)選地,所述制劑包括65 wt%的食用菌多糖粉和35 wt%的大米富砸蛋白粉。
[0011]優(yōu)選地,所述食用菌多糖粉和大米富砸蛋白粉的純度均不低于85%。
[0012]優(yōu)選地,所述食用菌包括靈芝、香菇、猴頭菇、云芝、金針菇、草菇、雙孢蘑菇、木耳、銀耳和杏鮑菇。
[0013]優(yōu)選地,所述制劑為片劑、丸劑、膠囊或口服液。
[0014]優(yōu)選地,所述制劑為膠囊。
[0015]—種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑的制備方法,包括食用菌多糖的超聲提取、大米富砸蛋白的制備和按照上述的配比比例將制得的食用菌多糖粉、大米富砸蛋白粉進(jìn)行營養(yǎng)復(fù)配,用精密膠囊填充板對(duì)膠囊進(jìn)行填充,收集膠囊得到食用菌多糖和大米富砸蛋白營養(yǎng)復(fù)配膠囊成品。
[0016]優(yōu)選地,所述食用菌多糖的超聲提取包括如下步驟:
Al.將新鮮食用菌晾曬至半干后,放于烘箱中于60°C條件下鼓風(fēng)烘干,然后經(jīng)30B粉碎機(jī)粉碎,雙輥破碎機(jī)破碎,80目篩分,氣流粉碎機(jī)粉碎,300目篩分,制得食用菌超微粉,置于-20°C備用;
A2.稱取所述食用菌超微粉,加入適量的85%乙醇于室溫下靜置2h,以除去部分色素及雜質(zhì),再按照水料比28mL/g加入420mL去離子水充分混勻,用DCTZ-2000多用途恒溫超聲提取機(jī)在功率為680W下超聲15?20min,得浸提液;
A3.取步驟A2所得浸提液于5000r/min的速度下離心15min,取上清即上清液一,所述上清液一采用正丁醇與三氯甲燒體積比為1:4的Sevag試劑法去蛋白,并于8000r/min條件下離心I Omin,取上清即上清液二;
A4.將所述上清液二置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中于50°C條件下減壓濃縮至適量,濃縮液加4倍體積無水乙醇于4°C條件下冰箱沉淀12h;
A5.取步驟A4所得產(chǎn)物于5000r/min離心15min取沉淀物,并沉淀物置60°C烘箱烘干,即可得到超聲波提取的食用菌多糖。
[0017]優(yōu)選地,步驟A4中所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀為N-1100EYELA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。
[0018]優(yōu)選地,所述大米富砸蛋白的制備包括如下步驟:
B1.稱取5g大米干粉于400ml燒杯中,加入250 ml,0.1 M,PH值為6.6-7.0的PBS緩沖溶液,再加入纖維素酶與果膠酶質(zhì)量比為7:3的混合酶,攪拌均勻,在30-40°C條件的水浴中避光提取8小時(shí);
B2.將步驟BI所得產(chǎn)物用100-200目的紗布過濾,收集清液一,向所述清液一中逐步加入分析純的固體(NH4) 2S04至終濃度為20%;
B3.將步驟B2所得產(chǎn)物鹽析10-14小時(shí),并以8000 r/min的速度離心1min,除去雜蛋白,得清液二;
B4.向所述清液二中逐步加入分析純的固體(NH4)2S04至終濃度為45%;
B5.將步驟B4所得產(chǎn)物鹽析12小時(shí),并8000 r/min的速度離心1min,去除清液,將沉淀溶解,用分子量為3000的透析袋流水透析24小時(shí),再用去離子水透析24小時(shí),每4小時(shí)換一次水,將透析袋中的溶液定容到200 ml,檢測即得到大米富砸蛋白。
[0019]、有益效果
相比于現(xiàn)有技術(shù),本發(fā)明的有益效果為:
(1)本發(fā)明利用超聲波產(chǎn)生的強(qiáng)烈振動(dòng)、高加速度、強(qiáng)烈的空化效應(yīng)、攪拌作用等,能夠加強(qiáng)胞內(nèi)物質(zhì)的釋放、擴(kuò)散及溶解,從而提高多糖得率,縮短了提取時(shí)間;同時(shí)超聲波破碎過程是一個(gè)物理過程,浸提過程中無化學(xué)反應(yīng),對(duì)活性物質(zhì)的生物活性影響?。?br> (2)本發(fā)明利用超微粉碎、超聲輔助提取、酶法輔助提取、超濾膜分離、冷凍干燥、噴霧干燥等技術(shù)對(duì)食用菌中多糖組分和大米中富砸蛋白肽進(jìn)行工藝簡單、提取效率高的分離和純化,并按照一定的一定配比混合,按常規(guī)膠囊制備工藝制備食用菌多糖和大米富砸蛋白肽的營養(yǎng)復(fù)配膠囊,既可以補(bǔ)充食用菌多糖的抗氧化等活性較弱缺點(diǎn),又可以消除大米富砸蛋白肽在免疫活性方面的不足,從而可以使各種多糖與富砸蛋白肽的生物效應(yīng)相互配合,滿足現(xiàn)代人群對(duì)功能保健產(chǎn)品多方面的需求;
(3)本發(fā)明根據(jù)食物蛋白質(zhì)互補(bǔ)原理,將食用菌中多糖組分和大米中富砸蛋白肽復(fù)配,既有效利用了米糠資源又起到了強(qiáng)化砸元素的作用。大米中,賴氨酸(Lys)是第一限制氨基酸,而食用菌中多糖組分中賴氨酸含量較之豐富,因此在米糠蛋白中加入食用菌中多糖組分,使其營養(yǎng)更全面;且還具有能耗低、單級(jí)分離效率高、設(shè)備簡單、無污染等優(yōu)點(diǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0020]下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步進(jìn)行描述。
[0021]實(shí)施例1
一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑,所述制劑包括65 wt%的食用菌多糖粉和35wt%的大米富砸蛋白粉。所述食用菌多糖粉和大米富砸蛋白粉的純度均不低于85%。
[0022]值得注意的是,所述食用菌包括靈芝、香菇、猴頭菇、云芝、金針菇、草菇、雙孢蘑菇、木耳、銀耳和杏鮑菇。作為優(yōu)選,所述制劑為膠囊。
[0023]—種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑的制備方法,包括食用菌多糖的超聲提取、大米富砸蛋白的制備和按照上述的配比比例將制得的食用菌多糖粉、大米富砸蛋白粉進(jìn)行營養(yǎng)復(fù)配,用精密膠囊填充板對(duì)膠囊進(jìn)行填充,收集膠囊得到食用菌多糖和大米富砸蛋白營養(yǎng)復(fù)配膠囊成品。
[0024]所述食用菌多糖的超聲提取包括如下步驟:
Al.將新鮮食用菌晾曬至半干后,放于烘箱中于60°C條件下鼓風(fēng)烘干,然后經(jīng)30B粉碎機(jī)粉碎,雙輥破碎機(jī)破碎,80目篩分,氣流粉碎機(jī)粉碎,300目篩分,制得食用菌超微粉,置于-20°C備用;
A2.稱取所述食用菌超微粉,加入適量的85%乙醇于室溫下靜置2h,以除去部分色素及雜質(zhì),再按照水料比28mL/g加入420mL去離子水充分混勻,用DCTZ-2000多用途恒溫超聲提取機(jī)在功率為680W下超聲19.8min,得浸提液;
A3.取步驟A2所得浸提液于5000r/min的速度下離心15min,取上清即上清液一,所述上清液一采用正丁醇與三氯甲烷摩爾比為1:4的Sevag試劑法去蛋白,并于8000r/min條件下離心I Omin,取上清即上清液二;
A4.將所述上清液二置N-1100EYELA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中于50°C條件下減壓濃縮至適量,濃縮液加4倍體積無水乙醇于4°C條件下冰箱沉淀12h;
A5.取步驟A4所得產(chǎn)物于5000r/min離心15min取沉淀物,并沉淀物置60°C烘箱烘干,即可得到超聲波提取的食用菌多糖。
[0025]所述大米富砸蛋白的制備包括如下步驟:
B1.稱取5g大米干粉于400ml燒杯中,加入250 ml,0.1 M,PH值為6.6-7.0的PBS緩沖溶液,再加入纖維素酶與果膠酶質(zhì)量比為7:3的混合酶,攪拌均勻,在30-40°C條件的水浴中避光提取8小時(shí);
B2.將步驟BI所得產(chǎn)物用100-200目的紗布過濾,收集清液一,向所述清液一中逐步加入分析純的固體(NH4) 2S04至終濃度為20%;
B3.將步驟B2所得產(chǎn)物鹽析10-14小時(shí),并以8000 r/min的速度離心1min,除去雜蛋白,得清液二;
B4.向所述清液二中逐步加入分析純的固體(NH4)2S04至終濃度為45%;
B5.將步驟B4所得產(chǎn)物鹽析12小時(shí),并8000 r/min的速度離心1min,去除清液,將沉淀溶解,用分子量為3000的透析袋流水透析24小時(shí),再用去離子水透析24小時(shí),每4小時(shí)換一次水,將透析袋中的溶液定容到200 ml,檢測即得到大米富砸蛋白。
[0026]基于上述,本發(fā)明利用超聲波產(chǎn)生的強(qiáng)烈振動(dòng)、高加速度、強(qiáng)烈的空化效應(yīng)、攪拌作用等,能夠加強(qiáng)胞內(nèi)物質(zhì)的釋放、擴(kuò)散及溶解,從而提高多糖得率,縮短了提取時(shí)間;同時(shí)超聲波破碎過程是一個(gè)物理過程,浸提過程中無化學(xué)反應(yīng),對(duì)活性物質(zhì)的生物活性影響小;通過利用超微粉碎、超聲輔助提取、酶法輔助提取、超濾膜分離、冷凍干燥、噴霧干燥等技術(shù)對(duì)食用菌中多糖組分和大米中富砸蛋白肽進(jìn)行工藝簡單、提取效率高的分離和純化,并按照一定的一定配比混合,按常規(guī)膠囊制備工藝制備食用菌多糖和大米富砸蛋白肽的營養(yǎng)復(fù)配膠囊,既可以補(bǔ)充食用菌多糖的抗氧化等活性較弱缺點(diǎn),又可以消除大米富砸蛋白肽在免疫活性方面的不足,從而可以使各種多糖與富砸蛋白肽的生物效應(yīng)相互配合,滿足現(xiàn)代人群對(duì)功能保健產(chǎn)品多方面的需求;通過根據(jù)食物蛋白質(zhì)互補(bǔ)原理,將食用菌中多糖組分和大米中富砸蛋白肽復(fù)配,既有效利用了米糠資源又起到了強(qiáng)化砸元素的作用。大米中,賴氨酸(Lys)是第一限制氨基酸,而食用菌中多糖組分中賴氨酸含量較之豐富,因此在米糠蛋白中加入食用菌中多糖組分,使其營養(yǎng)更全面;且還具有能耗低、單級(jí)分離效率高、設(shè)備簡單、無污染等優(yōu)點(diǎn)。
[0027]實(shí)施例2
同實(shí)施例1所不同的是,所述制劑包括55wt%的食用菌多糖粉和45 wt%的大米富砸蛋白粉。所述制劑為片劑或丸劑;
步驟A2中用DCTZ-2000多用途恒溫超聲提取機(jī)在功率為680W下對(duì)加入去離子水混合后的溶液超聲15min。
[0028]實(shí)施例3
同實(shí)施例1所不同的是,所述制劑包括7O wt%的食用菌多糖粉和30wt%的大米富砸蛋白粉。所述制劑為口服液。
[0029]步驟A2中用DCTZ-2000多用途恒溫超聲提取機(jī)在功率為680W下對(duì)加入去離子水混合后的溶液超聲20min。
[0030]以上示意性的對(duì)本發(fā)明及其實(shí)施方式進(jìn)行了描述,該描述沒有限制性,實(shí)際的結(jié)構(gòu)并不局限于此。所以,如果本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員受其啟示,在不脫離本發(fā)明創(chuàng)造宗旨的情況下,不經(jīng)創(chuàng)造性的設(shè)計(jì)出與該技術(shù)方案相似的結(jié)構(gòu)方式及實(shí)施例,均應(yīng)屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑,其特征在于,所述制劑包括55?70wt%的食用菌多糖粉和30?45wt%的大米富砸蛋白粉。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑,其特征在于,所述制劑包括65wt %的食用菌多糖粉和35wt %的大米富砸蛋白粉。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑,其特征在于,所述食用菌多糖粉和大米富砸蛋白粉的純度均不低于85%。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑,其特征在于,所述食用菌包括靈芝、香菇、猴頭菇、云芝、金針菇、草菇、雙孢蘑菇、木耳、銀耳和杏鮑菇。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑,其特征在于,所述制劑為片劑、丸劑、膠囊或口服液。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑,其特征在于,所述制劑為膠囊。7.按照權(quán)利要求6所述的一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑的制備方法,其特征在于,包括食用菌多糖的超聲提取、大米富砸蛋白的制備和按照上述的配比比例將制得的食用菌多糖粉、大米富砸蛋白粉進(jìn)行營養(yǎng)復(fù)配,用精密膠囊填充板對(duì)膠囊進(jìn)行填充,收集膠囊得到食用菌多糖和大米富砸蛋白營養(yǎng)復(fù)配膠囊成品。8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑,其特征在于,所述食用菌多糖的超聲提取包括如下步驟: Al.將新鮮食用菌晾曬至半干后,放于烘箱中于60°C條件下鼓風(fēng)烘干,然后經(jīng)30B粉碎機(jī)粉碎,雙輥破碎機(jī)破碎,80目篩分,氣流粉碎機(jī)粉碎,300目篩分,制得食用菌超微粉,置于-20°C備用; A2.稱取所述食用菌超微粉,加入適量的85 %乙醇于室溫下靜置2h,以除去部分色素及雜質(zhì),再按照水料比28mL/g加入420mL去離子水充分混勻,用DCTZ-2000多用途恒溫超聲提取機(jī)在功率為680W下超聲15?20min,得浸提液; A3.取步驟A2所得浸提液于5000r/min的速度下離心15min,取上清即上清液一,所述上清液一采用正丁醇與三氯甲燒體積比為1:4的Sevag試劑法去蛋白,并于8000r/min條件下離心I Omin,取上清即上清液二; A4.將所述上清液二置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中于50°C條件下減壓濃縮至適量,濃縮液加4倍體積無水乙醇于4°C條件下冰箱沉淀12h; A5.取步驟A4所得產(chǎn)物于5000r/min離心15min取沉淀物,并沉淀物置60°C烘箱烘干,即可得到超聲波提取的食用菌多糖。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑,其特征在于,步驟A4中所述旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀為N-1100EYELA型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種食用菌多糖和富砸米蛋白肽復(fù)配制劑,其特征在于,所述大米富砸蛋白的制備包括如下步驟: B1.稱取5g大米干粉于400ml燒杯中,加入250ml,0.1M,PH值為6.6-7.0的PBS緩沖溶液,再加入纖維素酶與果膠酶質(zhì)量比為7:3的混合酶,攪拌均勻,在30-40°C條件的水浴中避光提取8小時(shí); B2.將步驟BI所得產(chǎn)物用100-200目的紗布過濾,收集清液一,向所述清液一中逐步加入分析純的固體(NH4)2S04至終濃度為20 % ; B3.將步驟B2所得產(chǎn)物鹽析10-14小時(shí),并以8000r/min的速度離心lOmin,除去雜蛋白,得清液二 ; B4.向所述清液二中逐步加入分析純的固體(NH4)2SO4至終濃度為45% ; B5.將步驟B4所得產(chǎn)物鹽析12小時(shí),并8000r/min的速度離心1min,去除清液,將沉淀溶解,用分子量為3000的透析袋流水透析24小時(shí),再用去離子水透析24小時(shí),每4小時(shí)換一次水,將透析袋中的溶液定容到200ml,檢測即得到大米富砸蛋白。
【文檔編號(hào)】A23L33/185GK105901705SQ201610248830
【公開日】2016年8月31日
【申請(qǐng)日】2016年4月20日
【發(fā)明人】馬寧, 楊文建, 項(xiàng)春榮, 林德祥, 胡秋輝, 方勇
【申請(qǐng)人】南京財(cái)經(jīng)大學(xué), 鎮(zhèn)江市丹徒區(qū)正東生態(tài)農(nóng)業(yè)發(fā)展中心, 南京老山營養(yǎng)保健品有限公司