專利名稱：生長激素抑制素激動劑的制作方法
背景技術：
生長激素抑制素(SRIF)是一種由Brazeau et al.發(fā)現(xiàn)的十四個氨基酸肽，其顯示了對組織中多種分泌過程的抑制作用，諸如垂體、胰腺和胃腸道。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，SRIF也作為一種神經(jīng)調節(jié)物。SRIF的這些生物作用，本質上為抑制作用，都是通過一系列G蛋白偶聯(lián)的受體引起的，其中表現(xiàn)為5種亞型(SSTR-1至SSTR-5)。這五種亞型對于內源性的SRIF具有相似的親和性，但在不同的組織其分布不同。SRIF與五種不同的受體(SSTR)亞型的結合力比較高，且與每一種亞型的親和性相同。SRIF產(chǎn)生多種作用，包括激素釋放的調節(jié)，激素如生長激素、高血糖素、胰島素、胰淀素(amylin)和神經(jīng)遞質釋放。其中一些作用與其同特異性SRIF受體的結合有關。例如，生長激素的抑制作用歸因于生長激素抑制素2型受體(“SSTR-2”)(Raynor，et al.，Molecular Pharmacol.43838(1993)；Lloyd，et al.，Am.J.Physiol.268G102(1995))，而胰島素的抑制作用歸因于生長激素抑制素5型受體(“SSTR-5”)(Coy，et al.197366-371(1993))。2型和5型受體的活性與生長激素的抑制有關，尤其是GH分泌腺瘤(支端肥大癥)和TSH分泌腺瘤。2型的活性與治療促乳素分泌的腺瘤相關，而5型則沒有該作用。
本領域技術人員公知，SRIF及其類似物在治療多種疾病和/或病癥中很有用。沒有窮舉這些疾病和/或病癥，典型的例子包括庫欣綜合征(CushingsSyndrome)(see Clark，R.V.et al，Clin.Res.38，p.943A，1990)；促性腺素瘤(seeAmbrosi B.，et al.，Acta Endocr.(Copenh.)122，569-576，1990)；甲狀旁腺功能亢進(see Miller，D.，et al.，Canad.Med.Ass.J.，Vol.145，pp.227-228，1991)；培吉特氏病(Paget′s disease)(see，Palmieri，G.M.A.，et al.，J.of Bone and MineralResearch，7，(Suppl.1)，p.S240(Abs.591)，1992)；VIP腫瘤(VIPoma)(seeKoberstein，B.，et al.，Z.Gastroenterology，28，295-301，1990 and Christensen，C.，Acta Chir.Scand.155，541-543，1989)；胰島細胞彌漫性增生和高胰島素血癥(see Laron，Z.，Israel J.Med.Sci.，26，No.1，1-2，1990，Wilson，D.C.，Irish J.Med.Sci.，158，No.1，31-32，1989 and Micic，D.，et al.，Digestion，16，Suppl.1.70.Abs.193，1990)；胃泌素瘤(see Bauer，F(xiàn).E.，et al.，Europ.J.Pharmacol.，183，55 1990)；卓-艾二氏綜合征(Zollinger-Ellison Syndrome)(see Mozell，E.，et al.，Surg.Gynec.Obstet.，170，476-484，1990)；與AIDS及其它病癥相關的分泌過多性腹瀉(hypersecretory diarrhea)(due to AIDS，see Cello，J.P.，et al.，Gastroenterology，98，No.5，Part 2，Suppl.，A163 1990；due to elevated gastrinreleasing peptide，seeAlhindawi，R.，et al.，Can.J.Surg.，33，139-142，1990；secondary to intestinal graftvs.host disease，see Bianco J.A.，et al.，Transplantation，49，1194-1195，1990；diarrhea associated with chemotherapy，see Petrelli，N.，et al.，Proc.Amer.Soc.Clin.Oncol.，Vol.10，P 138，Abstr.No.417 1991)；應激性腸道綜合征(seeO′Donnell，L.J.D.，et al.，Aliment.Pharmacol.Therap.，Vol.4.，177-181，1990)；胰腺炎(see Tulassay，Z.，et al.，Gastroenterology，98，No.5，Part 2，Suppl.，A238，1990)；克朗氏病(Crohn′s Disease)(see Fedorak，R.N.，et al.，Can.J.Gastroenterology，3，No.2，53-57，1989)；系統(tǒng)性硬化癥(see Soudah，H.，et al.，Gastroenterology，98，No.5，Part 2，Suppl.，A129，1990)；甲狀腺癌(seeModigliani，E.，et al.，Ann.，Endocr.(Paris)，50，483-488，1989)；銀屑病(seeCamisa，C.，et al.，Cleveland Clinic J.Med.，57，No.1，71-76，1990)；低血壓(seeHoeldtke，R.D.，et al.，Arch.Phys.Med.Rehabil.，69，895-898，1988 and Kooner，J.S.，et al.，Brit.J.Clin.Pharmacol.，28，735P-736P，.1989)；恐慌癥(panic attacks)(see Abelson，J.L.，et al.，Clin.Psychopharmacol.，10，128-132，1990)；硬皮病(sclerodoma)(see Soudah，H.，et al.，Clin.Res.，Vol.39，p.303A，1991)；小腸阻塞(see Nott，D.M.，et al.，Brit.J.Surg.，Vol.77，p.A691，1990)；胃食管反流(seeBranch，M.S.，et al.，Gastroenterology，Vol.100，No.5，Part 2 Suppl.，p.A425，1991)；十二指腸胃反流(see Hasler，W.，et al.，Gastroenterology，Vol.100，No.5，Part 2，Suppl.，p.A448，1991)；葛瑞夫茲氏病(Graves′Disease)(seeChang，T.C.，et al.，Brit.Med.J.，304，p.158，1992)；多囊卵巢綜合征(seePrelevic，G.M.，et al.，Metabolism Clinical and Experimental，41，Suppl.2，pp76-79，1992)；上消化道出血(see Jenkins，S.A.，et al.，Gut.，33，pp.404-407，1992 and Arrigoni，A.，et al.，American Journal of Gastroenterology，87，p.1311，(abs.275)，1992)；假性胰腺囊腫和腹水(see Hartley，J.E.，et al.，J.Roy.Soc.Med.，85，pp.107-108，1992)；白血病(see Santini，et al.，78，(Suppl.1)，p.429A(Abs.1708)，1991)；腦膜瘤(see Koper，J.W.，et al.，J.Clin.Endocr.Metab.，74，pp.543-547，1992)；以及癌癥惡體質(see Bartlett，D.L.，et al.，Surg.Forum.，42，pp.14-16，1991)。
其它與SRIF受體亞型活性有關的適應癥是胰島素和/或高血糖素的抑制，尤其是作用于糖尿病，血管病，增生性視網(wǎng)膜病變，黎明現(xiàn)象和腎??；胃酸分泌的抑制，尤其是作用于消化器官潰瘍，腸皮膚和胰腺皮膚的瘺管，應激腸道綜合征，傾倒綜合征(Dumping syndrome)，水性腹瀉綜合征，AIDS相關的腹瀉，化療誘導性腹瀉，急性或慢性胰腺炎和胃腸激素分泌性腫瘤(gastrointestinal hormone secreting tumors)；癌癥的治療，如治療肝癌；抑制血管發(fā)生，炎癥性失調的治療，如關節(jié)炎；視網(wǎng)膜病變；慢性同種異體移植物排斥；血管成形術；預防移植血管和胃腸道出血。
優(yōu)選的方法是具有一種類似物，其選擇性作用于特定的SRIF受體亞型或導致所需生物反應的亞型，這樣就減少了與其它受體亞型相互作用，而避免產(chǎn)生不需要的副作用。更進一步，由于天然的SRIF半衰期短，開發(fā)了多種SRIF類似物，如用于治療肢端肥大癥(Raynor，et al.，Molecular Pharmacol.43838(1993))。在開發(fā)有效的、分子更小的SRIF激動劑時，發(fā)現(xiàn)了各種的截短了的配體對于不同的亞型具有不同的親和性。Trp8-Lys9殘基經(jīng)常存在于受體識別的配體中。Trp8-Lys9殘基構成了β-彎曲的一部分，其通常通過將L-Trp替代為D-型，骨架的環(huán)化、二硫化橋、或所有的結構約束(constraints)而使結構穩(wěn)定。在發(fā)現(xiàn)多種受體亞型之前進行這種結構簡化，無意中的結果是廣譜的結合親和性的喪失。在OCTREOTIDE系中肽與2型的親和性高，但與1，3，4，和5型的親和性低。這樣，很多關于這種類型的類似物的基本生物學研究就不能能檢測到由所有SRIF受體亞型介導的作用，而只是其中一個受體亞型介導的作用。
我們發(fā)現(xiàn)可以通過導入N-烷基化而限定肽骨架。這種修飾很大程度地限制了被修飾的殘基及其前面的氨基酸，使其延伸了構象并另外阻礙了潛在的分子內氫結合位點和蛋白水解酶酶切位點，從而可能增強肽的藥代動力學特性?，F(xiàn)在只能得到幾種商用N-甲基氨基酸，而它們的合成是很繁瑣的。在本發(fā)明的另一個方案中，我們發(fā)現(xiàn)了一種采用固相方法在每一個氨基酸殘基進行N-甲基化截短的SRIF類似物，該方法利用Miller and Scanlan的報道(J.Am.Chem.Soc.1997，119，2301-2302)。
本發(fā)明的一個方面涉及式(I)的肽A1-環(huán){Cys-A2-D-Trp-A3-A4-Cys}-A5-Y1，(I)其中，A1是被任意取代的D-或L-芳香α-氨基酸或被任意取代的D-或L-環(huán)(C3-6)烷基丙氨酸；A2是被任意取代的芳香α-氨基酸或被任意取代的環(huán)(C3-6)烷基丙氨酸；A3是Lys或Orn；A4是β-羥纈氨酸Ser，hSer，或Thr；A5是β-羥纈氨酸，Ser，hSer，或Thr；和Y1是OH，NH2或NHR1，其中R1是(C1-6)烷基；其中所述的每一個被任意取代的芳香α-氨基酸和每個所述被任意取代的環(huán)(C3-6)烷基丙氨酸是被一個或多個取代基任意取代，每個取代基獨立的選自鹵素，NO2，OH，CN，(C1-6)烷基，(C2-6)烯基，(C2-6)炔基，(C1-6)烷氧基，Bzl，O-Bzl，和NR9R10，其中R9和R10分別獨立地選自H或(C1-6)烷基；而且其中，每個肽鍵中的氨基氮和式(I)中A1的氨基氮被甲基任意地取代，并且至少有一個所述的甲基；并且進一步，所述化合物不是D-Phe-環(huán){Cys-Phe-D-Trp-Lys-(N-Me-Thr)-Cys}-Thr-NH2；或其藥用可接受的鹽。
式(I)中優(yōu)選的一組化合物是那些化合物，其中A1是Phe，D-Phe，Tyr，D-Tyr，β-Nal，D-β-Nal，Cha或D-Cha；A2是Phe，Tyr，β-Nal或Cha；Y1是OH或NH2；或其藥用可接受的鹽。
上述優(yōu)選化合物中的更優(yōu)選化合物是那些化合物，其中A1是D-Phe或Tyr；或其中A2是Phe；或其中A3是Lys；或其中A4是Thr；或其中A5是Thr；或其藥用可接受的鹽。
在一個更優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明描述了一種式(I)化合物，其中所述化合物是下式化合物(N-Me-D-Phe)-{Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2；D-Phe-{(N-Me-Cys)-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2；D-Phe-cyclo{Cys-(N-Me-Phe)-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2；D-Phe-{Cys-Phe-(N-Me-D-Trp)-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2；D-Phe-{Cys-Phe-D-Trp-(N-Me-Lys)-Thr-Cys}-Thr-NH2；D-Phe-環(huán){Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-(N-Me-Cys)}-Thr-NH2；D-Phe-環(huán){Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-(N-Me-Thr)-NH2；(N-Me-Tyr)-{Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2；Tyr-{(N-Me-Cys)-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2；Tyr-{Cys-(N-Me-Phe)-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2；Tyr-{Cys-Phe-(N-Me-D-Trp)-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2；Tyr-{Cys-Phe-D-Trp-(N-Me-Lys)-Thr-Cys}-Thr-NH2；Tyr-{Cys-Phe-D-Trp-Lys-(N-Me-)Thr-Cys}-Thr-NH2；Tyr-{Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-(N-Me-Cys)}-Thr-NH2；orTyr-{Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-(N-Me-Thr)-NH2；或其藥用可接受的鹽。
本發(fā)明的另一個方案，描述了式(II)的化合物， 其中A1是Ala、Leu、Ile、Val、Nle、Thr、Ser、β-Nal、β-Pal、Trp、Phe、2，4-二氯-Phe、五氟-Phe、對-X-Phe，或鄰-X-Phe的D-或L-異構體，其中X是CH3、Cl、Br、F、OH、OCH3或NO2；A2是Ala、Leu、Ile、Val、Nle、Phe、β-Nal、吡啶基-Ala、Trp、2，4-二氯Phe、五氟-Phe、鄰-X-Phe，或對-X-Phe，其中X是CH3、Cl、Br、F、OH、OCH3或NO2；A3是吡啶基-Ala、Trp、Phe、β-Nal、2，4-二氯-Phe、五氟-Phe、鄰-X-Phe，或對-X-Phe，其中X是CH3、Cl、Br、F、OH、OCH3或NO2；A6是Val、Ala、Leu、Ile、Nle、Thr、Abu，或Ser；A7是Ala、Leu、Ile、Val、Nle、Phe、β-Nal、吡啶基-Ala、Trp、2，4-二氯Phe、五氟-Phe、鄰-X-Phe，或對-X-Phe，其中X是CH3、Cl、Br、F、OH、OCH3或NO2；A8是Ala、Leu、Ile、Val、Nle、Thr、Ser、Phe、β-Nal、吡啶基-Ala、Trp、2，4-二氯-Phe、五氟-Phe、對-X-Phe，或鄰-X-Phe的D-或L-異構體，其中X是CH3、Cl、Br、F、OH、OCH3或NO2；每個R1和R2獨自是H、低級?；虻图壨榛?；R3是OH或NH2；其中每個酰胺肽鍵中的氨基氮和N-末端氨基酸的氮被甲基任意取代，使式(II)的化合物至少有一個所述的甲基；至少A1和A8之一和A2和A7之一必須為芳香氨基酸，而A1，A2，A7和A8不能是芳香氨基酸；或其藥用可接受的鹽。
本發(fā)明的一個實施方案描述了式(II)的化合物，其中所述化合物選自如下H-D-Phe-對-氯-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-NH2；H-D-Phe-對-NO2-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe-Thr-NH2；H-D-Nal-對-氯-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe-Thr-NH2；H-D-Phe-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-NH2；H-D-Phe-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe-Thr-NH2；H-D-Phe-對-氯-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe-Thr-NH2；和H-D-Phe-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Ala-β-D-Nal-NH2；或其藥用可接受的鹽。
本發(fā)明的另一個實施方案描述了選自下列的肽，表示為“組III”，其包括
D-β-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-β-Nal-NH2；D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys-β-Nal-NH2；D-β-Nal-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Pen-Thr-NH2；D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Pen-Thr-NH2；D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Pen-Thr-OH；D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Pen-Thr-OH；Gly-Pen-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-OH；Phe-Pen-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-OH；Phe-Pen-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Pen-Thr-OH；H-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol；H-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Th-Cys-Thr-NH2；H-D-Trp-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；H-D-Trp-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2；H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；Ac-D-Phe-Lys*-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Asp-Thr-NH2(在Lys*和Asp之間形成的一個酰胺橋)Ac-hArg(Et)2-Gly-Cys-phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(Et)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(Bu)-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(Et)2-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-L-hArg(Et)2-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Phe-NH2；
Ac-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NHEt；Ac-L-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys(Me)-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys(Me)-Thr-Cys-Thr-NHEt；Ac-hArg(CH3；hexyl)-Gly-Cys-Phe-D-TrP-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；H-hArg(hexyl2)-Gly-Cys-Phe-D-TrP-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(Et)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NHEt；Ac-D-hArg(Et)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Phe-NH2；丙?；?D-hArg(Et)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys(iPr)-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-β-Nal-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Gly-hArg(Et)2-NH2；Ac-D-Lys(iPr)-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Gys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Phe-NH2；Ac-D-hArg(Et)2-D-hArg(Et)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-Cys-Lys-Asn-4-Cl-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-D-Cys-NH2；Bmp-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；Bmp-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Phe-NH2；Bmp-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-p-Cl-Phe-NH2；Bmp-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-β-Nal-NH2；H-D-β-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2；H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-β-Nal-NH2；H-五氟-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；Ac-D-β-Nal-Cys-五氟-Phe-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；H-D-β-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-β-Nal-NH2；
H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-β-Nal-NH2；H-D-β-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2；H-D-p-Cl-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2；Ac-D-p-Cl-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2；H-D-Phe-Cys-β-Nal-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Cys-Thr-NH2；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-N-Me-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-N-Me-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-N-Me-Phe)；環(huán)(N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phh)；環(huán)(Pro-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-L-Trp-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp(F)-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-Trp(F)-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-p-Cl-Phe)；環(huán)(D-Ala-N-Me-D-Phe-D-Thr-D-Lys-Trp-D-Phe)；環(huán)(D-Ala-N-Me-D-Phe-D-Val-Lys-D-Trp-D-Phe)；環(huán)D-Ala-N-Me-D-Phe-D-Thr-Lys-D-Trp-D-Phe)；環(huán)D-Abu-N-Me-D-Phe-D-Val-Lys-D-Trp-D-Tyr)；環(huán)Pro-Tyr-D-Trp-t-4-AchxAla-Thr-Phe)；環(huán)Pro-Phe-D-Trp-t-4-AchxAla-Thr-Phe)；環(huán)N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe)；環(huán)N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-t-4-AchxAla-Thr-Phe)；環(huán)Pro-Tyr-D-Trp-4-Amphe-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-4-Amphe-Thr-Phe)；環(huán)(N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-4-Amphe-Thr-Phe)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba-Gaba)；
環(huán)(Asn-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-NH(CH2)4CO)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-β-Ala)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-D-Glu)-OH；環(huán)(Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gly)；環(huán)(Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gly)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp(F)-Lys-Thr-Phe-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp(NO2)-Lys-Thr--Phe-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-Trp(Br)-Lys-Thr-Phe-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe(I)-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Tyr(But)-Gaba)；環(huán)(Bmp-Lys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Pro-Cys)-OH；環(huán)(Bmp-Lys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Pro-Cys)-OH；環(huán)(Bmp-Lys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Tpo-Cys)-OH；環(huán)(Bmp-Lys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-MeLeu-Cys)-OH；環(huán)(Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Phe-Gaba)；環(huán)(Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-D-Phe-Gaba)；環(huán)(Phe-Phe-D-Trp(5F)-Lys-Thr-Phe-Phe-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys(Ac)-Thr-Phe-NH-(CH2)3-CO)；環(huán)(Lys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba)；環(huán)(Lys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba)；環(huán)(Orn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba)；H-Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys-NH2； and
和 或其藥用可接受的鹽，其中二硫鍵存在于具有兩個Cys殘基的化合物中，其中每個酰胺肽鍵和N-末端氨基酸中的氨基氮被甲基任意取代，使化合物至少含有一個所述的甲基。
本發(fā)明的又一個方案描述了SRIF激動劑，其包括通式囊括的SRIF激動劑的N-甲基化類似物或下述公開文本中描述的特定物質歐洲申請?zhí)朠5 164 EU(發(fā)明人G.Keri)；Van Binst，G.et al.Peptide Research 58(1992)；Horvath，A.et al.Abstract，＂Conformations of Somatostatin Analogs HavingAntitumor Activity＂，22nd European peptide Symposium，September 13-19，1992，Interlaken，Switzerland美國專利號6,001,801(1999)；美國專利號4,904,642(1990)；美國專利號4,871,717(1989)；美國專利號4,853,371(1989)；美國專利號4,725,577(1988)；美國專利號4,684,620(1987)美國專利號4,650,787(1987)；美國專利號4,603,120(1986)；美國專利號4,585,755(1986)；歐洲申請0 203 031 A2(1986)；美國專利號4,522,813(1985)；美國專利號4,486,415(1984)；美國專利號4,485,101(1984)；美國專利號4,435,385(1984)；
美國專利號4,395,403(1983)；美國專利號4,369,179(1983)；美國專利號4,360,516(1982)；美國專利號4,358,439(1982)；美國專利號4,328,214(1982)；美國專利號4,316,890(1982)；美國專利號4,310,518(1982)；美國專利號4,291,022(1981)；美國專利號4,238,481(1980)；美國專利號4,235,886(1980)；美國專利號4,224,190(1980)；美國專利號4,211,693(1980)；美國專利號4,190,648(1980)；美國專利號4,146,612(1979)；美國專利號4,133,782(1979)；美國專利號5,506,339(1996)；美國專利4,261,885(1981)；美國專利號4,728,638(1988)；美國專利號4,282,143(1981)；美國專利號4,215,039(1980)；美國專利號4,209,426(1980)；美國專利號4,190,575(1980)；歐洲申請0 363 589 A2(1990)；歐洲專利號0 389 180(1990)；歐洲申請No.0 505 680(1982)；歐洲申請No.0 083 305(1982)；歐洲申請No.0 030 920(1980)；PCT申請?zhí)朩O 97/01579(1997)；PCT申請?zhí)朩O 91/18016(1991)；PCT申請?zhí)朩O 91/09056(1991)；
PCT申請?zhí)朩O 90/12811(1990)；PCT申請?zhí)朩O 88/05052(1988)；英國申請?zhí)朑B 2,095,261(1981)；和法國申請?zhí)朏R 2,522,655(1983).
本申請的式(I)，式(II)和組(III)的化合物具有和SRIF相同的用途，其由本發(fā)明描述的結合測定法測定的特異性結合或不具有特異性結合所決定。
因此，本發(fā)明的另一個方案描述了一種結合一個或多個人生長激素抑制素亞型受體-1，-2，-3，-4和-5的方法，其包括將一個或多個式(I)和/或式(II)和/或組(III)化合物，或這些化合物的藥用可接受的鹽施用于所需接受者上。
上面方法的一個優(yōu)選實施例描述了一種引起生長激素抑制素激動劑作用的方法，其包括將一個或多個式(I)和/或式(II)和/或組(III)化合物，或這些化合物的藥用可接受的鹽施用于所需接受者的步驟。
緊鄰的上面方法的一個更優(yōu)選的實施例描述了一種對需要治療的人或其他動物治療疾病或病癥的方法，其包括將一個或多個式(I)和/或式(II)和/或組(III)化合物，或這些化合物的藥用可接受的鹽施用于所述人或其它動物，其中所述疾病或病癥選自庫欣綜合征，促性腺素瘤，甲狀旁腺功能亢進，培吉特氏病，胰腺瘤，胰島細胞彌漫性增生，高胰島素血癥；胃泌素瘤；卓-艾二氏綜合征；與AIDS及其它病癥相關的分泌過多性腹瀉(hypersecretory diarrhea)；應激性腸道綜合征；胰腺炎；克朗氏病(Crohn′s Disease)；系統(tǒng)性硬化癥；甲狀腺癌；銀屑病；低血壓；恐慌癥；硬皮病(sclerodoma)；小腸阻塞；胃食管反流；十二指腸胃反流；葛瑞夫茲氏病(Graves′Disease)；多囊卵巢綜合征；上消化道出血；假性胰腺囊腫，胰腹水；白血?。荒X膜瘤；以及癌癥惡體質，肢端肥大癥，再狹窄，肝細胞瘤，肺癌，黑色素瘤，抑制實體瘤的快速增長，減少體重，治療胰島素耐受，綜合征X，延長胰腺細胞的存活，纖維變性，高血脂，高胰淀素癥(hyperamylinemia)，高催乳素血癥和催乳素瘤。
除了N-末端氨基酸，本申請公開的所有氨基酸的縮寫(例如，A1代表Phe)代表結構-NH-CH(R)-CO-，其中R在緊鄰上面的通式中是氨基酸的側鏈(例如，Ala上的CH3)。對于N-末端氨基酸，縮寫代表結構(R1R2)-N-CH(R)-CO-，其中R是氨基酸的側鏈，R1和R2如此所定義。
生長激素抑制素受體亞型的命名依照IUPHAR的建議方法，其中SSTR-4是指Bruno等人最初克隆的受體，SSTR-5是指O′Carroll等人克隆的受體。普通的氨基酸的縮寫是依照IUPAC-IUB的建議方法。下面是本發(fā)明出現(xiàn)的一些α-氨基酸的縮寫Abu＝α-氨基丁酸；Aib＝α-氨基異丁酸；β-Ala＝β-丙氨酸；Amp＝4-氨基-苯丙氨酸；Ava＝5-氨基戊酸；Cha＝環(huán)己基丙氨酸；Gaba＝γ-氨基丁酸；Lys＝賴氨酸；β-Nal＝β-(2-奈基)丙氨酸；Nle＝正亮氨酸；Nva＝正纈氨酸；Orn＝鳥氨酸；Pal＝β-(3-吡啶)丙氨酸；Phe＝苯丙氨酸；Ser＝絲氨酸；HSer＝高絲氨酸；Thr＝蘇氨酸；和Tyr＝酪氨酸.
其它的縮寫包括DBU，1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一-7-烯；DCM，二氯甲烷；DIC，二環(huán)己基碳二亞胺；DIEA，二異丙乙胺；DMF，二甲基甲酰胺；MTBD，1，3，4，6，7，8-六氫-1-甲基-2H-嘧啶并[1，2-a]嘧啶；NPS，2-硝基苯基磺?；?；TBTU，O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基-uronium四氟硼酸鹽；
和TFA，三氟乙酸。
本發(fā)明的化合物或其藥用可接受的鹽可以通過口服、非腸道給藥(如，肌內、腹膜內、靜脈內或皮下注射或植入)，鼻、陰道、直腸、舌下或局部給藥，并可以與藥用可接受的載體制成制劑以提供各種給藥途徑的劑型。
口服的固體劑型包括膠囊，片劑，丸劑，粉劑和顆粒劑。在這些固體劑型中，活性化合物與至少一種惰性的藥用可接受載體混合，這些載體諸如蔗糖、乳糖或淀粉。正如正常制備中，這些劑型也包括除了這些惰性稀釋劑外的其它物質，例如潤滑劑，如硬脂酸鎂。在膠囊，片劑和丸劑中，劑型也包括緩沖劑。片劑和丸劑還可用腸溶衣制備。
口服的液體劑型包括藥用可接受的乳劑，溶液，懸浮液，糖漿，以及包含本領域常用惰性稀釋劑，如水的酏劑。除了這些惰性稀釋劑以外，組合物還包括佐劑，如潤濕劑，乳化劑和懸浮劑，甜味劑，矯味劑和芳香劑。
本發(fā)明的非腸道給藥制劑包括無菌水溶液或非水溶液、懸浮液、或乳劑。非水溶劑或載體的實例有丙二醇、聚乙二醇，植物油，如橄欖油、玉米油、明膠，以及可注射的有機酯，如油酸乙酯。這些制劑也包括佐劑，如防腐劑、潤濕劑、乳化劑和分散劑。這些制劑也可以被滅菌，例如，通過過濾將細菌截住，將滅菌劑加入組合物中，照射組合物，或加熱組合物。固體無菌組合物的制備也可以在使用前將無菌固體組合物溶解在無菌水中，或其他無菌可注射用介質中。
經(jīng)直腸或陰道給藥的組合物優(yōu)選為栓劑，其除活性物質以外還包括賦型劑，如古柯油或栓劑用臘。
經(jīng)鼻或舌下給藥的組合物也是用本領域熟知的標準賦型劑制備。
本發(fā)明組合物中的活性成分的含量可以不同，然而，活性成分的量是所獲得的適宜劑型所必需的。選擇的劑量根據(jù)所需的治療效果，給藥途徑和治療時間決定。通常，根據(jù)體重每日給藥劑量水平在25μg/kg/日至100mg/kg/日，其作為單劑量或分為多劑量施用于人和其他動物，例如，哺乳動物中，以得到需要的治療效果。
根據(jù)體重每日優(yōu)選的通常劑量范圍為250μg/kg/日至5.0mg/kg/日，其可作為單劑量或分為多劑量。
進一步地，本發(fā)明的化合物或其藥用可接受的鹽可以以持續(xù)釋放的組合物給藥，如以下專利所描述的。在這種劑型中，優(yōu)選14-日或28-日的緩釋劑型。美國專利號5,672,659描述的包括肽和聚脂的持續(xù)釋放組合物。美國專利號5,595,760描述的包括膠狀形式的肽的持續(xù)釋放組合物。美國專利號5,821,221描述的包括肽和殼聚糖的持續(xù)釋放組合物。美國專利號5,916,883描述的包括肽和環(huán)式糊精的持續(xù)釋放組合物。國際專利申請?zhí)朠CT/US99/01180，(公開號WO 99/38536，August 5，1999)，描述了包括肽的可吸收的持續(xù)釋放組合物。前述專利和申請內容在此引作參考文獻。
速釋或持續(xù)釋放的組合物的使用由治療的適應癥類型決定。如果適應癥包括急性或過急失調，則用速釋劑型治療優(yōu)于延長釋放的組合物。相反，用于預防或長期治療目的，優(yōu)選用延長釋放的組合物。
發(fā)明詳述本領域技術人員能夠基于本發(fā)明詳述最大程度地利用本發(fā)明。因此，以下具體的實施方案只是用于舉例說明本發(fā)明而不是有意限制發(fā)明的范圍。
合成4-甲基二苯甲基胺鹽酸樹脂(0.25或0.5mequiv g-1)是從AdvancedChemTech Inc.，Louisville，KY獲得。被Nα叔-丁基氧羰基(Boc)保護的氨基酸購自Bachem Inc.，Tonance，CA，Advanced ChemTech Inc.，和Synthetech Inc.，Albany，OR。氨基酸的反應側鏈用下列基團之一掩蔽Cys，4-甲基芐氧羰基；Lys，2-氯芐氧羰基；Thr，O-芐基；Tyr，O-2，6-二氯芐基。所有試劑和溶劑都是ACS級或更好，使用時不進行純化。
本發(fā)明的化合物，例如，式(I)的化合物可以并已在功能化的4-甲基二苯甲基胺，1％交聯(lián)聚苯乙烯樹脂(0.25或0.5mequiv g-1)上，以0.25mmol的量在Advanced ChemTech(200型)合成器上，采用以下方法合成而得脫保護，40％TFA(2分鐘，20分鐘)；DCM循環(huán)清洗(清洗三次)；中和，10％DIEA(1分鐘，5分鐘)；DMF循環(huán)清洗；DCM循環(huán)清洗(清洗兩次)；雙偶聯(lián)；首先用1，3-二異丙基碳二亞胺酯(3equiv.)，在DCM中30分鐘；DCM清洗(清洗三次)；用制備的TBTU酯進行第二次偶聯(lián)(3equiv.)，在含有催化量的DIEA的DMF中90分鐘；DMF清洗(清洗一次)；DCM清洗(清洗三次)。用茚三酮測試法定性監(jiān)測偶聯(lián)反應。
N∝-保護。在需要甲基化的位置脫氨基保護后，樹脂被懸浮在DCM(20mL)中。在懸浮液中加入三甲基吡啶(3equiv.)和鄰-硝基苯磺酰氯(3equiv.)，混合物用Advanced ChemTech(200型)合成器振蕩2小時。然后，用DCM清洗樹脂(清洗2次)并用DMF清洗(清洗三次)。用茚三酮測試法定性監(jiān)測偶聯(lián)反應。
N∝-甲基化。將鄰-硝基苯磺酰胺保護的樹脂懸浮于DMF中(20mL)，加入MTBD(3equiv.)和甲基4-硝基苯磺酸酯或二甲基硫酸酯(用于Cys11中)?；旌衔镉肁dvanced ChemTech(200型)合成器振蕩0.5小時，用DMF清洗樹脂(清洗4次)。
N∝-甲基脫保護。當所需殘基甲基化后，再將樹脂懸浮在DMF(20mL)中。將DBU(3equiv.)和2-巰基乙醇(3equiv.)加入到該懸浮液中，在AdvancedChemTech(200型)合成器中攪拌混合物0.5小時，然后將樹脂用DMF(清洗5次)充分清洗。
切斷肽。0℃時，用含有清除劑苯甲醚(～30％v/v)的無水氟化氫處理45分鐘，將肽從樹脂上切斷，同時酸解使側鏈脫保護。在90％乙酸(～600mL)中，用稍微過量的I2(15分鐘)將該肽環(huán)化。然后加入抗壞血酸除去過量的I2。
純化。粗品肽由制備型RP-HPLC，用C-18鍵合的硅膠軸向加壓柱(Dynamax-300，5或8μm，21.4×250mm)進行純化。用線性梯度洗脫，流速為20ml分鐘-1A；0.1％TFA，B；80％MeCN中的0.1％TFA，以1％分鐘-1從20％B至50％B。通過分析型RP-HPLC在215nm監(jiān)測分離過程。收集包含產(chǎn)物的流分，真空濃縮，凍干法干燥。從乙酸水溶液凍干恒重得到的每個肽都是蓬松的白色粉末。最終的肽純度由分析型RP-HPLC在215nm測定。分析型RP-HPLCs是用Vydac C-18柱(4.6 250mm，5μm，300?？讖剑合喾蛛x)進行記錄的。以流速1.5mL min-1使用線性梯度洗脫系統(tǒng)HPLC-1，A，0.1％TFA；B，80％MeCN中的0.1％TPA；以1％分鐘-1從20％B至50％B；HPLC-2，C，TEAP(0.1M，pH3)中的5％MeCN；D，MeCN中的20％C，以1％分鐘-1從10％D至70％D。在215nm監(jiān)測洗脫液。通過Rainin DynamaxHPLC方法管理軟件測定每個肽的保留時間和純度。
氨基酸分析。將肽在真空(110℃；20小時)下，用含有0.2％3-(2-氨基乙基)吲哚(Pierce)的4M甲磺酸進行水解。將水解產(chǎn)物用鄰苯二醛(o-phthalidaldehyde)試劑(Sigma Chemical Co.)衍生化后，進行氨基酸分析，氨基酸分析采用自動HPLC系統(tǒng)(Rainin Instrument Co.)，該HPLC系統(tǒng)配有100×4.6mm，3μm C18軸向加壓柱和完整的保護柱(Microsorb AAAnalysisTM，Type O；Rainin Instrument Co.)。衍生化后的一級氨基酸用二元梯度進行洗提，緩沖液A；0.10M乙酸鈉，其含有4.5％v/v甲醇和0.5％v/v四氫呋喃，pH 7.2；緩沖液B；甲醇。梯度洗脫順序；在0分鐘時0％A；在16.5分鐘時，35％A；在30分鐘時，90％A；在33分鐘時，90％A，流速為1.0mL分鐘-1，洗脫溫度為室溫。在340nm監(jiān)測洗脫液，結合Dynamax HPLC方法管理軟件(Rainin)。標準保留時間如下Asp，6.6分鐘；Arg，19.9分鐘；Trp，25.4分鐘和Lys，29.5分鐘。表I中的每個肽對于初級氨基酸產(chǎn)生了預料的分析結果。半胱氨酸沒有被量化。
質譜測定。用LaserMat 2000質譜儀(Thermal Bioanalysis，San Jose，CA.)通過基質輔助激光吸附/電離飛行時間質譜測定法分析肽，用α-氰基-4-羥基肉硅酸作為基質，物質P(1348.7 Da)作為內標。每個測定的光譜包含有一個內標的M-H主離子峰，可以預料的分析物的M-H峰，以及一些與基質(＜500Da)有關的峰。本發(fā)明的幾個代表性化合物的質譜數(shù)據(jù)列于表1。
SRIF類似物抑制GH釋放。收集成年雄性大鼠垂體前葉，并通過前述的胰蛋白酶/脫氧核糖核酸酶方法進行分散(Murphy，W.A.；Taylor，J.；Moreau，J.-P.and Coy，D.H.，Peptide Res.1989，2，128-132.)。分散的細胞用無菌過濾的Dulbecco′s modified Eagle培養(yǎng)基(MEM，Gibco Laboratories，Grand Island，NY)稀釋，MEM補充有2.5％胎牛血清(Gibco)，3％馬血清(Gibco)，10％垂體供體的新鮮鼠血清(冰中保藏不超過1小時)，1％MEM非必需氨基酸(Gibco)，慶大霉素(10ng/mL；Sigma)和制霉菌素(10,000U/mL；Gibco)。將細胞隨機置于培養(yǎng)板上，其密度大約是200,000細胞/孔(Costar cluster 24；Rochester ScientificCo.，Rochester，NY)。培養(yǎng)板上的細胞在上述Dulbecco′s培養(yǎng)基中培養(yǎng)，在95％空氣/5％CO2的潮濕空氣中，于37℃下培養(yǎng)4-5天。在制備激素免疫激發(fā)物中，用培養(yǎng)基199(Gibco，3×1mL)清洗細胞。本發(fā)明化合物的每個劑量在三個孔中測試，總體積為1mL含有1％BSA的培養(yǎng)基199(fraction V；SigmaChemical Co.)。所有的孔都含有GHRH(1-29)NH2(1nM)。在空氣/二氧化碳條件下培養(yǎng)(95/5％，37℃ 3小時)后，清除培養(yǎng)基，在-20℃下儲藏直至測定激素含量。用National Hormone和Pituitary Program(NHHP)Torrance的Dr.A.F.Parlow提供的組分中的標準雙抗體RIA測定培養(yǎng)基中的生長激素，CA激動劑IC50是用Sigmaplot(Jandel Scientific，San Rafael，CA)計算的。數(shù)值以(n)個分散的劑量-響應曲線的平均值IC50(nM)±SEM表示。
克隆的人生長激素抑制素受體的功能表達。含有人生長激素抑制素受體(hSSTR-1至hSSTR-5)的基因克隆體(Yamada，Y.，et al.al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.1992，89，25 1255；Yasuda，K.，et al.，J.Biol.Chem.1992，267，20422-20428；Yamada，Y.，et al.，Mol.Pharmacol.1992，42，2136-2142；Rohrer，L.，et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.1993，90，4196-4200.)由芝加哥大學的Dr.Graeme I.Bell提供的。hSSTR-1，hSSTR-2，hSSTR-3，hSSTR-4和hSSTR-5 cDNAs被分別分離為一個1.5-kb PstI-XmnI片段，1.7-kbBamHI-HindIII片段，2.0-kb NcoI-HindIII片段，1.4-kb NheI-NdeI片段，和一個1.2-kb HindIII-XbaI片段，每一個都含有全長受體的完整編碼區(qū)。這些片段分別被克隆至哺乳動物表達載體pCMV5中相應的限制性核酸內切酶位點上，在人巨細胞病毒(CMV)啟動子的下游，制備表達質粒pCMV5/hSSTR-1，pCMV5/hSSTR-2，pCMV5/hSSTR-3，pCMV5/hSSTR-4和pCMV5/hSSTR-5。將攜帶新霉素哺乳動物細胞可選擇的標記的質粒pRSV-neo(American TypeCulture Collection，Rockville，MD)轉染至CHO-K1細胞中。
受體表達和轉染。轉染方法采用磷酸鈣法。CHO-K1細胞被置于含有10％胎牛血清的α-最低的必要培養(yǎng)基中(α-MEM；Gibco)，用磷酸鈣沉淀法將每個表達質粒轉染至CHO-K1細胞。在添加有500ug/mL的geneticin(G418；Gibco)的α-MEM中選擇具有表達質粒的克隆體。獨立的CHO-K1克隆體用玻璃環(huán)克隆選擇，然后在選擇性培養(yǎng)基中培養(yǎng)放大。膜由分離出的克隆體制備，通過與[125I]Tyr11-SRIF和[125I]MK-678(用于結合SSTR-2)的結合評價hSSTR的表達。
放射性配體結合試驗。從相應的CHO-K1細胞的勻漿中(Polytron setting6，15sec)得到5種細胞的細胞膜，其在冰冷卻的Tris-HCl(50mM)中并離心(39000g，10min×2)，將中間物在新鮮的緩沖液中再次懸浮。將最后的小球再次懸浮在Tris-HCl(10mM)中以待檢測。等份的膜置于0.05nM[125I]Tyr11-SRIF(類型1，3，4，5)或[125I]MK-678(類型2)的含BSA(10mg/mL)的50nM HEPES(pH 7.4)；MgCl2(5mM)，Trasylol(200kIU/mL)，枯草菌素(Bacitracin)(0.02mg/mL)，和苯甲磺酰氟(0.02mg/mL)中(37℃下30分鐘)。最后的測試體積為0.3mL，用Brandel快速過濾膜塊通過GF/C過濾器快速過濾終止培養(yǎng)，過濾器提前浸泡在0.3％聚(次乙亞胺)中。然后將每個管和過濾器用等量冷緩沖液沖洗(3×5mL)。
特異性結合被定義為結合的所有放射性配體數(shù)減去在1.0μM SRIF存在下結合的放射性配體數(shù)。以下是用這些測試系統(tǒng)得到的結合的所有放射性配體和非特異性結合的數(shù)值(nsb)hSSTR-1，全部結合數(shù)值7000cpm與nsb的3500cpm；hSSTR-2，全部結合數(shù)值9000cpm與nsb的1000cpm；hSSTR-3，全部結合數(shù)值8000cpm與nsb的1000cpm；hSSTR-4，全部結合數(shù)值6000cpm與nsb的3500cpm；以及hSSTR-5，全部結合數(shù)值7500cpm與nsb的3500cpm。5種受體亞型中的每一種的結合親和性都用Ki值±SEM(nM)表示。Ki值來自于表2的代表化合物。
分子模型。所有分子模型在Silicon Graphics Indigo2High Impact 10000計算機中，用SYBYL 6.6軟件，Kollman所有原子力場建立的。根據(jù)PDB分析初始化合物Sandostatin/OCTREOTIDE的三種NMR解析結構；從PDB數(shù)據(jù)庫中獲得Dphe5-c[Cys6-Phe7-DTrp8-Lys9-Thr10-Cys11]-Thr12-ol(1SOC和2SOC)。將這些結構輸入SYBYL6.6中，并依據(jù)實例9改變結構為N-甲基化化合物。Kollman的部分原子從單體詞典(monomer dictionary)中裝載。對突變的殘基退火，然后用共軛梯度算法使全部能量最小化至最終的均方根梯度≤0.01Kcal mol.A-1，從而使得結構最佳。在此過程中采用了由距離決定的介電常數(shù)和其它最小化操作所需的默認值設置。
實施例9和18通過固相方法在每個殘基處被烷基化，同時被裝配在甲基二苯甲基胺樹脂上。從選定的N-甲基化位置上除去叔-丁氧羰基(Boc)，用鄰-硝基苯磺酰氯和二氯甲烷中的三甲基吡啶保護樹脂的自由氨基結合的肽。然后，將鄰-硝基苯磺酰胺的N-H用位阻大的非離子強堿MTBD選擇性去質子，并在DMF中，用對-硝基苯磺酸甲酯進行甲基化。甲基化的磺酰胺用β-巰基乙醇和DBU在DMF中脫保護，通過溶液出現(xiàn)亮黃色很容易跟蹤反應，表示鄰-硝基苯磺酰基從樹脂結合的肽上除去了。如果N-磺酰胺不被烷基化，脫保護則慢，因此就會將未烷基化的肽覆蓋。隨后，氨基酸用TBTU/DIPEA，而不是DIC偶聯(lián)兩次。
序列(o-NBS)HN-Cys11(4-MeZ)-Thr12(OBzl)-不能用鄰-硝基苯磺酸甲酯進行甲基化。然而，這一問題通過使用二甲基硫酸酯作為甲基化試劑而不是位阻大的鄰-硝基苯磺酸甲酯而得到了克服。
所有SRIF類似物的結合親和性(Kd，nM)用125I-放射標記的肽配體濃度依賴性置換測定，該配體來自用相應人生長激素抑制素受體轉染的CHO細胞分離出的細胞膜。作為參考，使用了相同系統(tǒng)中的SRIF-14和SRIF-28的結合親和性。對于5種受體，與SRIF-14相比，SRIF-28顯示了特別強的親和性。假定這類類似物的構型和N-末端氨基酸側鏈對于生物活性具有重要作用，使用兩種基本結構(化合物9和18)用于研究，其中一個含有一個DPhe(類似物9)，另一個含有一個Tyr殘基(類似物18)，以給出總數(shù)為16的N-甲基化的類似物，其結構和理化性質如表1所示。
本發(fā)明的化合物如上所述和/或引用的各種文獻所述的方法進行合成。
表1N-甲基類似物結構和分析數(shù)據(jù)


a理論分子量(M-H+，Da)b觀察的分子量(M-H+，Da)c反相HPLC(C-18，5μm，4.6×250mm，λ＝215nm)保留時間(min)。每個化合物通過HPLC后，純度＞98％。
dHPLC洗脫系統(tǒng)A；0.1％TFA，B；80％MeCN中的0.1％TFA，以1％min-1和1.5mL min-1的流速，從20％B至50％B。
cHPLC-2洗脫系統(tǒng)C，TEAP(0.1M，pH3)中的5％MeCN；D，MeCN中的20％C，以1％min-1和1.5mL min-1的流速，從10％D至70％D。
表2表1所示的類似物對克隆的人sst1-5受體的結合親和性(Kd)以及在培養(yǎng)的大鼠垂體細胞的激動劑活性(IC50)


a用平均值±SEM表示，一個數(shù)值表示一個結合實驗的結果。
b大鼠體外的拮抗劑IC50(nM)與SRIF(1.0nM)的比值，表示為(n)個分散劑量反應曲線的平均值±SEM。
c沒有測定。
d不適用。
應該理解，本發(fā)明結合詳細的說明書進行描述，前述描述只是用于舉例說明而不是用于限制發(fā)明的范圍。其它的方案、優(yōu)點和修飾變化都在權利要求的范圍之內。而且，每個引用的參考文獻都是作為參考使用。
權利要求
1.一種式(I)的化合物，A1-環(huán){Cys-A2-D-Trp-A3-A4-Cys}-A5-Y1，(I)其中A1是任意取代的D-或L-芳香α-氨基酸或任意取代的D-或L-環(huán)(C3-6)烷基丙氨酸；A2是任意取代的芳香α-氨基酸或任意取代的環(huán)(C3-6)烷基丙氨酸；A3是Lys或Orn；A4是β-羥纈氨酸Ser，hSer，或Thr；A5是β-羥纈氨酸，Ser，hSer，或Thr；和Y1是OH，NH2或NHR1，其中R1是(C1-6)烷基；其中每一個所述的任意取代的芳香α-氨基酸和每個所述的任意取代的環(huán)(C3-6)烷基丙氨酸是被一個或多個取代基任意取代的，每一個取代基獨立選自鹵素，NO2，OH，CN，(C1-6)烷基，(C2-6)烯基，(C2-6)炔基，(C1-6)烷氧基，Bzl，O-Bzl，和NR9R10，其中R9和R10分別獨自為H或(C1-6)烷基；并且其中，每個肽鍵的氨基氮和式(I)中A1的氨基被甲基任意取代，使至少含有一個所述的甲基；并進一步使所述化合物不是D-Phe-環(huán){Cys-Phe-D-Trp-Lys-(N-Me-Thr)-Cys}-Thr-NH2；或其藥用可接受的鹽。
2.根據(jù)權利要求1的化合物，其中，A1是Phe，D-Phe，Tyr，D-Tyr，β-Nal，D-β-Nal，Cha或D-Cha；A2是Phe，Tyr，β-Nal或Cha；和Y1是OH或NH2；或其藥用可接受的鹽。
3.根據(jù)權利要求2的化合物，其中，A1是D-Phe；或其藥用可接受的鹽。
4.根據(jù)權利要求2的化合物，其中，A1是Tyr；或其藥用可接受的鹽。
5.根據(jù)權利要求2的化合物，其中，A2是Phe；或其藥用可接受的鹽。
6.根據(jù)權利要求2的化合物，其中，A3是Lys；或其藥用可接受的鹽。
7.根據(jù)權利要求2的化合物，其中，A4是Thr；或其藥用可接受的鹽。
8.根據(jù)權利要求2的化合物，其中，A5是Thr；或其藥用可接受的鹽。
9.根據(jù)權利要求3的化合物，其中，化合物是(N-Me-D-Phe)-{Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2。
10.根據(jù)權利要求3的化合物，其中，化合物是D-Phe-{(N-Me-Cys)-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2。
11.根據(jù)權利要求3的化合物，其中，化合物是D-Phe-環(huán){Cys-(N-Me-Phe)-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2。
12.根據(jù)權利要求3的化合物，其中，化合物是D-Phe-{Cys-Phe-(N-Me-D-Trp)-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2。
13.根據(jù)權利要求3的化合物，其中，化合物是D-Phe-{Cys-Phe-D-Trp-(N-Me-Lys)-Thr-Cys}-Thr-NH2。
14.根據(jù)權利要求3的化合物，其中，化合物是D-Phe-環(huán){Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-(N-Me-Cys)}-Thr-NH2。
15.根據(jù)權利要求3的化合物，其中，化合物是D-Phe-環(huán){Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-(N-Me-Thr)-NH2。
16.根據(jù)權利要求4的化合物，其中，化合物是(N-Me-Tyr)-{Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2。
17.根據(jù)權利要求4的化合物，其中，化合物是Tyr-{(N-Me-Cys)-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2。
18.根據(jù)權利要求4的化合物，其中，化合物是Tyr-{Cys-(N-Me-Phe)-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2。
19.根據(jù)權利要求4的化合物，其中，化合物是Tyr-{Cys-Phe-(N-Me-D-Trp)-Lys-Thr-Cys}-Thr-NH2。
20.根據(jù)權利要求4的化合物，其中，化合物是Tyr-{Cys-Phe-D-Trp-(N-Me-Lys)-Thr-Cys}-Thr-NH2。
21.根據(jù)權利要求4的化合物，其中，化合物是Tyr-{Cys-Phe-D-Trp-Lys-(N-Me-)Thr-Cys}-Thr-NH2。
22.根據(jù)權利要求4的化合物，其中，化合物是Tyr-{Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-(N-Me-Cys)}-Thr-NH2。
23.根據(jù)權利要求4的化合物，其中，化合物是Tyr-{Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys}-(N-Me-Thr)-NH2。
24.一種式Tyr-環(huán)(Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys)-Thr-NH2的化合物；或其藥用可接受的鹽。
25.一種化合物，其選自D-β-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-β-Nal-NH2；D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys-β-Nal-NH2；D-β-Nal-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Pen-Thr-NH2；D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Pen-Thr-NH2；D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Pen-Thr-OH；D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Pen-Thr-OH；Gly-Pen-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-OH；Phe-Pen-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-OH；Phe-Pen-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Pen-Thr-OH；H-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol；H-D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Tlhr-NH2；H-D-Trp-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；H-D-Trp-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2；H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；Ac-D-Phe-Lys*-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Asp-Thr-NH2(在Lys*和Asp之間形成的一個酰胺橋)Ac-hArg(Et)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(Et)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(Bu)-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(Et)2-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-L-hArg(Et)2-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Phe-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NHEt；Ac-L-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-phe-D-Trp-Lys(Me)-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys(Me)-Thr-Cys-Thr-NHEt；Ac-hArg(CH3；hexyl)-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；H-hArg(hexyl2)-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(Et)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NHEt；Ac-D-hArg(Et)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Phe-NH2；丙酰基-D-hArg(Et)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys(iPr)-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-β-Nal-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Gly-hArg(Et)2-NH2；Ac-D-Lys(iPr)-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-D-hArg(CH2CF3)2-D-hArg(CH2CF3)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Phe-NH2；Ac-D-hArg(Et)2-D-hArg(Et)2-Gly-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-NH2；Ac-Cys-Lys-Asn-4-Cl-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-D-Cys-NH2；Brmp-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；Bmp-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Phe-NH2；Bmp-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-p-Cl-Phe-NH2；Bmp-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-β-Nal-NH2；H-D-β-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2；H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-β-Nal-NH2；H-五氟-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；Ac-D-β-Nal-Cys-五氟-Phe-D3-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；H-D-β-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-β-Nal-NH2；H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-β-Nal-NH2；H-D-β-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2；H-D-p-Cl-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2；Ac-D-p-Cl-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2；H-D-Phe-Cys-β-Nal-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2；H-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Cys-Thr-NH2；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-N-Me-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-N-Me-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-N-Me-Phe)；環(huán)(N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-L-Trp-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp(F)-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Fro-Phe-Trp(F)-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-p-Cl-Phe)；環(huán)(D-Ala-N-Me-D-Phe-D-Thr-D-Lys-Trp-D-Phe)；環(huán)(D-Ala-N-Me-D-Phe-D-Val-Lys-D-Trp-D-Phe)；環(huán)D-Ala-N-Me-D-Phe-D-Thr-Lys-D-Trp-D-Phe)；環(huán)D-Abu-N-Me-D-Phe-D-Val-Lys-D-Trp-D-Tyr)；環(huán)Pro-Tyr-D-Trp-t-4-AohxAla-Thr-Phe)；環(huán)Pro-Phe-D-Trp-t-4-AchxAla-Thr-Phe)；環(huán)N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe)；環(huán)N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-t-4-AchxAla-Thr-Phe)；環(huán)Pro-Tyr-D-Trp-4-Amphe-Thr-Phe)；環(huán)(Pro-Phe-D-Trp-4-Amphe-Thr-Phe)；環(huán)(N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-4-Amphe-Thr-Phe)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-NH(CH2)4CO)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-β-Ala)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-D-Glu)-OH；環(huán)(Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe)；環(huán)(Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gly)；環(huán)(Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gly)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp(F)-Lys-Thr-Phe-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp(NO2)-Lys-Thr-Phe-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-Trp(Br)-Lys-Thr-Phe-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe(I)-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Tyr(But)-Gaba)；環(huán)(Bmp-Lys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Pro-Cys)-OH；環(huán)(Bmp-Lys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Pro-Cys)-OH；環(huán)(Bmp-Lys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Tpo-Cys)-OH；環(huán)(Bmp-Lys-Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-MeLeu-Cys)-OH；環(huán)(Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Phe-Gaba)；環(huán)(Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-D-Phe-Gaba)；環(huán)(Phe-Phe-D-Trp(5F)-Lys-Thr-Phe-Phe-Gaba)；環(huán)(Asn-Phe-Phe-D-Trp-Lys(Ac)-Thr-Phe-NH-(CH2)3-CO)；環(huán)(Lys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba)；環(huán)(Lys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba)；環(huán)(Om-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba)；和H-Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Cys-NH2；其中，在具有兩個Cys殘基的化合物中存在一個二硫鍵，其中每個酰胺肽鍵中的氨基氮和N-末端氨基酸中的氨基氮任選地被甲基取代，只要化合物中至少有一個所述的甲基。
26.一種式(II)的化合物， 其中，A1是Ala、Leu、Ile、Val、Nle、Thr、Ser、β-Nal、β-Pal、Trp、Phe、2，4-二氯-Phe、五氟-Phe、對-X-Phe，或鄰-X-Phe的D-或L-異構體，其中X是CH3、Cl、Br、F、OH、OCH3或NO2；A2是Ala、Leu、Ile、Val、Nle、Phe、β-Nal、吡啶基-Ala、Trp、2，4-二氯-Phe、五氟-Phe、鄰-X-Phe，或對-X-Phe，其中X是CH3、Cl、Br、F、OH、OCH3或NO2；A3是吡啶基-Ala、Trp、Phe、β-Nal、2，4-二氯-Phe、五氟-Phe、鄰-X-Phe，或對-X-Phe，其中X是CH3、Cl、Br、F、OH、OCH3或NO2；A6是Val、Ala、Leu、Ile、Nle、Thr、Abu，或Ser；A7是Ala、Leu、Ile、Val、Nle、Phe、β-Nal、吡啶基-Ala、Trp、2，4-二氯Phe、五氟-Phe、鄰-X-Phe，或對-X-Phe，其中X是CH3、Cl、Br、F、OH、OCH3或NO2；A8是Ala、Leu、Ile、Val、Nle、Thr、Ser、Phe、β-Nal、吡啶基-Ala、Trp、2，4-二氯-Phe、五氟-Phe、對-X-Phe，或鄰-X-Phe的D-或L-異構體，其中X是CH3、Cl、Br、F、OH、OCH3或NO2；每個R1和R2獨自是H，低級?；虻图壨榛?；R3是OH或NH2；至少A1和A8之一和A2和A7之一必須為芳香氨基酸，而A1，A2，A7和A8不能是芳香氨基酸；其中每一個肽鍵酰胺中的氨基氮任選地被甲基取代，使式(II)的化合物至少有一個所述的甲基。
27.根據(jù)權利要求26的化合物，其中，所述化合物選自H-D-Phe-對-氯-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-NH2；H-D-Phe-對-NO2-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe-Thr-NH2；H-D-Nal-對-氯-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe-Thr-NH2；H-D-Phe-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-NH2；H-D-Phe-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe-Thr-NH2；H-D-Phe-對-氯-Phe-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe-Thr-NH2；和H-D-Phe-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Ala-β-D-Nal-NH2；其中，每個肽鍵的酰胺中的氮和N-末端氨基酸中的氨基氮任選地被甲基取代，使化合物中至少有一個所述的甲基。
28.一種化合物，其具有下式 或 其中，其中每個肽鍵的酰胺中的氨基氮和磺胺鍵的氨基任選地被甲基取代，使化合物中至少有一個所述的甲基。
29.一種結合一個或多個人生長激素抑制素亞型受體-1，-2，-3，-4和-5的方法，其包括將權利要求1或24的化合物或其藥用可接受的鹽施用于需要的受體。
30.一種結合一個或多個人生長激素抑制素亞型受體-1，-2，-3，-4和-5的方法，其包括將權利要求25中的化合物或其藥用可接受的鹽施用于需要的受體。
31.一種結合一個或多個人生長激素抑制素亞型受體-1，-2，-3，-4和-5的方法，其包括將權利要求26中的化合物或其藥用可接受的鹽施用于需要的受體。
32.一種結合一個或多個人生長激素抑制素亞型受體-1，-2，-3，-4和-5的方法，其包括將權利要求27中的化合物或其藥用可接受的鹽施用于需要的受體。
33.一種結合一個或多個人生長激素抑制素亞型受體-1，-2，-3，-4和-5的方法，其包括將權利要求28中的化合物或其藥用可接受的鹽施用于需要的受體。
34.一種誘導生長激素抑制素激動劑作用的方法，其包括將權利要求1或24的化合物或其藥用可接受的鹽施用于需要的受體。
35.一種誘導生長激素抑制素激動劑作用的方法，其包括將權利要求25的化合物或其藥用可接受的鹽施用于需要的受體。
36.一種誘導生長激素抑制素激動劑作用的方法，其包括將權利要求26的化合物或其藥用可接受的鹽施用于需要的受體。
37.一種誘導生長激素抑制素激動劑作用的方法，其包括將權利要求27的化合物或其藥用可接受的鹽施用于需要的受體。
38.一種誘導生長激素抑制素激動劑作用的方法，其包括將權利要求28的化合物或其藥用可接受的鹽施用于需要的受體。
39.一種治療人或其它動物的疾病或病癥的方法，其包括將權利要求1或24的化合物或其藥用可接受的鹽施用于所述哺乳動物中，其中，所述疾病或病癥選自庫欣綜合征，促性腺素瘤，甲狀旁腺功能亢進，培吉特氏病，胰腺瘤，胰島細胞彌漫性增生，高胰島素血癥；胃泌素瘤；卓-艾二氏綜合征；與AIDS及其它病癥相關的分泌過多性腹瀉；應激性腸道綜合征；胰腺炎；克朗氏??；系統(tǒng)性硬化癥；甲狀腺癌；銀屑病；低血壓；恐慌癥；硬皮?。恍∧c阻塞；胃食管反流；十二指腸胃反流；葛瑞夫茲氏?。欢嗄衣殉簿C合征；上消化道出血；假性胰腺囊腫，胰腹水；白血?。荒X膜瘤；以及癌癥惡體質，肢端肥大癥，再狹窄，肝細胞瘤，肺癌，黑色素瘤，抑制實體瘤的快速增長，減少體重，治療胰島素耐受，綜合征X，延長胰腺細胞的存活，纖維變性，高血脂，高胰淀素癥，高催乳素血癥和催乳素瘤。
40.一種治療所需治療的人或其它動物的疾病或病癥的方法，其包括將權利要求25的化合物或其藥用可接受的鹽施用于所述哺乳動物中，其中，所述疾病或病癥選自庫欣綜合征，促性腺素瘤，甲狀旁腺功能亢進，培吉特氏病，胰腺瘤，胰島細胞彌漫性增生，高胰島素血癥；胃泌素瘤；卓-艾二氏綜合征；與AIDS及其它病癥相關的分泌過多性腹瀉；應激性腸道綜合征；胰腺炎；克朗氏??；系統(tǒng)性硬化癥；甲狀腺癌；銀屑?。坏脱獕?；恐慌癥；硬皮病；小腸阻塞；胃食管反流；十二指腸胃反流；葛瑞夫茲氏病；多囊卵巢綜合征；上消化道出血；假性胰腺囊腫，胰腹水；白血病；腦膜瘤；以及癌癥惡體質，肢端肥大癥，再狹窄，肝細胞瘤，肺癌，黑色素瘤，抑制實體瘤的快速增長，減少體重，治療胰島素耐受，綜合征X，延長胰腺細胞的存活，纖維變性，高血脂，高胰淀素癥，高催乳素血癥和催乳素瘤。
41.一種治療所需治療的人或其它動物的疾病或病癥的方法，其包括將權利要求26的化合物或其藥用可接受的鹽施用于所述哺乳動物中，其中，所述疾病或病癥選自庫欣綜合征，促性腺素瘤，甲狀旁腺功能亢進，培吉特氏病，胰腺瘤，胰島細胞彌漫性增生，高胰島素血癥；胃泌素瘤；卓-艾二氏綜合征；與AIDS及其它病癥相關的分泌過多性腹瀉；應激性腸道綜合征；胰腺炎；克朗氏病；系統(tǒng)性硬化癥；甲狀腺癌；銀屑?。坏脱獕?；恐慌癥；硬皮病a；小腸阻塞；胃食管反流；十二指腸胃反流；葛瑞夫茲氏病；多囊卵巢綜合征；上消化道出血；假性胰腺囊腫，胰腹水；白血?。荒X膜瘤；以及癌癥惡體質，肢端肥大癥，再狹窄，肝細胞瘤，肺癌，黑色素瘤，抑制實體瘤的快速增長，減少體重，治療胰島素耐受，綜合征X，延長胰腺細胞的存活，纖維變性，高血脂，高胰淀素癥，高催乳素血癥和催乳素瘤。
42.一種治療所需治療的人或其它動物的疾病或病癥的方法，其包括將權利要求27的化合物或其藥用可接受的鹽施用于所述哺乳動物中，其中，所述疾病或病癥選自庫欣綜合征，促性腺素瘤，甲狀旁腺功能亢進，培吉特氏病，胰腺瘤，胰島細胞彌漫性增生，高胰島素血癥；胃泌素瘤；卓-艾二氏綜合征；與AIDS及其它病癥相關的分泌過多性腹瀉；應激性腸道綜合征；胰腺炎；克朗氏病；系統(tǒng)性硬化癥；甲狀腺癌；銀屑??；低血壓；恐慌癥；硬皮?。恍∧c阻塞；胃食管反流；十二指腸胃反流；葛瑞夫茲氏??；多囊卵巢綜合征；上消化道出血；假性胰腺囊腫，胰腹水；白血?。荒X膜瘤；以及癌癥惡體質，肢端肥大癥，再狹窄，肝細胞瘤，肺癌，黑色素瘤，抑制實體瘤的快速增長，減少體重，治療胰島素耐受，綜合征X，延長胰腺細胞的存活，纖維變性，高血脂，高胰淀素癥，高催乳素血癥和催乳素瘤。
43.一種治療所需治療的人或其它動物的疾病或病癥的方法，其包括將權利要求28的化合物或其藥用可接受的鹽施用于所述哺乳動物中，其中，所述疾病或病癥選自庫欣綜合征，促性腺素瘤，甲狀旁腺功能亢進，培吉特氏病，胰腺瘤，胰島細胞彌漫性增生，高胰島素血癥；胃泌素瘤；卓-艾二氏綜合征；與AIDS及其它病癥相關的分泌過多性腹瀉；應激性腸道綜合征；胰腺炎；克朗氏??；系統(tǒng)性硬化癥；甲狀腺癌；銀屑??；低血壓；恐慌癥；硬皮?。恍∧c阻塞；胃食管反流；十二指腸胃反流；葛瑞夫茲氏??；多囊卵巢綜合征；上消化道出血；假性胰腺囊腫，胰腹水；白血病；腦膜瘤；以及癌癥惡體質，肢端肥大癥，再狹窄，肝細胞瘤，肺癌，黑色素瘤，抑制實體瘤的快速增長，減少體重，治療胰島素耐受，綜合征X，延長胰腺細胞的存活，纖維變性，高血脂，高胰淀素癥，高催乳素血癥和催乳素瘤。
全文摘要
本發(fā)明要求保護一組生長激素抑制素激動劑，尤其是其酰胺的氮被烷基化，以及其用途。式(I)要求的化合物的實例有A
文檔編號A61P25/28GK1541102SQ02808005
公開日2004年10月27日 申請日期2002年4月8日 優(yōu)先權日2001年4月9日
發(fā)明者戴維·H·科伊, 瓦拉杰派特·G·拉杰斯瓦蘭, 戴維 H 科伊, 派特 G 拉杰斯瓦蘭 申請人:圖蘭恩教育基金管理人